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利用CRISPR/Cas9技术制备ApoE^-/-兔 被引量:1

ApoE~(-/-) rabbit mediated by CRISPR/Cas9 technology
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摘要 目的制作载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE~(-/-))兔,为研究动脉粥样硬化提供优良动物模型。方法应用CRISPR/Cas9系统编辑新西兰兔的Apo E基因,制作F0代ApoE~(-/-)兔,利用PCR、TA克隆、Sanger测序、Western blot和血脂检测鉴定Apo E靶向敲除的效率和效果,并通过传代获得ApoE~(+/-)兔。结果 Sanger测序结果显示成功靶向敲除兔ApoE基因,血清脂蛋白含量在正常饮食状态下相对于野生型兔有升高,且可稳定遗传。结论成功建立了ApoE~(-/-)兔,为进一步研究动脉粥样硬化和其他相关疾病提供了良好的动物模型。 Aim To provide an excellent animal model for the study of atherosclerosis,it generated apolipoprotein E gene knockout( ApoE~(-/-)) rabbit. Methods Apo E gene of New Zealand rabbits were edited and F0 ApoE~(-/-)rabbits were created by applying CRISPR/Cas9 system. The efficiency and effect of Apo E gene targeted knockout was determined through PCR,TA cloning,Sanger sequencing,Western blot and lipid assay. Apo E+/-rabbits were obtained through transmitting by germline. Results Sanger sequencing results showed that Apo E gene was successfully targeted knockout. Serum lipoprotein content of ApoE~(-/-)rabbits increased in normal diet compared with wild type rabbits and can be transmitted by germline. Conclusion The successful establishment of ApoE~(-/-)rabbit provided a good animal model for the further study of atherosclerosis and other related diseases.
作者 袁婷婷 周敏雅 卢瑶瑶 陆睿 张婷 孙雨婷 钟港 王梦恬 黄俊杰 胡艳华 梁景岩 成勇 YUAN Tingting1,ZHOU Minya2,LU Yaoyao1,LU Rui2,ZHANG Ting2,SUN Yuting1;ZHONG Gang1;WANG Meng-tian1;HUANG Junjie2;HU Yanhua1;LIANG Jingyan1;CHENG Yong2 ( 1. Jiangsu Key Laboratory of Senile Diseases Control and Prevention with Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Medical College of Yangzhou University, Yangzhou, Jiangsu 225001; 2.Jiangsu Provincial Research Center for Animal Transgencsis and Biopharming, College of Veterinary Medicine Yangzhou University, Yangzhou, Jiangsu 225009, China)
出处 《中国动脉硬化杂志》 2018年第7期658-665,共8页 Chinese Journal of Arteriosclerosis
基金 国家重点研发计划(2016YFE0126000) 国家自然科学基金(81570392) 扬州大学研究生科研创新计划项目(XKYCX17_069)
关键词 载脂蛋白E 基因敲除 规律成簇间隔短回文重复序列 新西兰兔 血脂 apolipoprotein E gene knockout CRISPR/Cas9 New Zealand rabbit serum lipid
作者简介 袁婷婷,硕士研究生,研究方向为心血管疾病之动脉粥样硬化,E-mail为m160825@yzu.edu.cn。;通信作者 梁景岩,博士,教授,硕士研究生导师,研究方向为心血管疾病与动脉粥样硬化,E-mail为jyliang@yzu.edu.cn。;通信作者 成勇,博士,教授,博士研究生导师,研究方向为胚胎学与基因工程,E-mail为chengyong@yzu.edu.cn。
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