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Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响 预览

Effects of roscovitine on proliferation and cell cycleinduced by TNF-αof vascular smooth muscle cells in rats
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摘要 目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15、30μmol·L-1组。MTT比色法检测细胞增殖活性;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA);流式细胞仪检测细胞周期;荧光定量RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4、CDK5)、细胞周期抑制蛋白(p53、p21、p27)的表达。结果Roscovitine能抑制VSMC增殖;抑制细胞周期从G 0/G 1期向S期转化。与TNF-α组比较,Roscovitine 5、10、15、30μmol·L^-1组能降低细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E蛋白表达,降低细胞周期蛋白依赖激酶CDK4、CDK5蛋白表达,升高细胞周期抑制蛋白p53、p21、p27蛋白表达(P<0.05)。结论Roscovitine可抑制大鼠VSMC细胞周期进程及增殖活性。 Aim To observe the effect of roscovitine on TNF-α-induced proliferation and cell cycle of rat vascular smooth muscle cells(VSMCs).Methods VSMCs were isolated and cultured using tissue explant method.Tumor necrosis factor-alpha(TNF-α)was used to induce the proliferation of VSMCs.VSMCs were divided into control group,TNF-αgroup and roscovitine 5,10,15,30μmol·L^-1 group.Cell proliferation was detected with MTT,and PCNA expression was tested.Flow cytometry was used to detect the cell cycle.The expressions of cyclin proteins(Cyclin A,Cyclin B,Cyclin D,Cyclin E),cyclin-dependent kinase proteins(CDK4,CDK5),and cell cycle inhibitory proteins(p53,p21,p27)were examined by real-time reverse transcription PCR(qRT-PCR)and Western blot.Results Roscovitine could inhibit the proliferation of VSMCs.Roscovitine inhibited transformation of cell cycle from G0/G1 phase to S phase.Compared with TNF-αgroup,the expressions of Cyclin A,Cyclin B,Cyclin D,Cyclin E protein decreased,the expressions of CDK4 and CDK5 protein decreased,while the expression of p53,p21 and p27 protein in cell cycle increased of roscovitine 5,10,15,30μmol·L-1 group(P<0.05).Conclusion Roscovitine inhibits the cell cycle progression and proliferative activity of rat VSMCs.
作者 王超 刘玉 安然 赵京山 孙佳欢 李爱英 WANG Chao;LIU Yu;AN Ran;ZHAO Jing-shan;SUN Jia-huan;LI Ai-ying(Key Lab of Geriatrics of Hebei General Hospital,Shijiazhuang050051,China;Dept of Biochemistry and Biology,Basic Medical College,Hebei University of Chinese Medicine and Hebei Key Lab of Chinese Medicine Research on Cardiocerebrovascular Diseases,Shijiazhuang050200,China)
出处 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期376-381,共6页 Chinese Pharmacological Bulletin
基金 国家自然科学基金资助项目(No31271466,81573698) 河北省自然科学基金资助项目(NoH2017423033) 河北省教育厅项目(NoZD2014005,ZD2017056).
关键词 ROSCOVITINE 血管平滑肌细胞 增殖 细胞周期 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖性激酶 细胞周期抑制蛋白 Roscovitine vascular smooth muscle cells proliferation cell cycle cyclin cyclin-dependent kinase cell cycle inhibitory protein
作者简介 王超(1975-),男,博士,副研究员,研究方向:代谢病,E-mail:cwyx163@163.com;通讯作者:李爱英(1963-),女,博士,教授,研究方向:心血管疾病的分子生物学机制,E-mail:liaiying@hebcm.edu.cn.
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参考文献3

二级参考文献13

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