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外源硫化氢通过清除4-HNE抑制肝细胞死亡的分子机制研究 预览
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作者 马旺 +3 位作者 王萃 任宣奇 窦晓兵 《浙江临床医学》 2018年第4期595-597,共3页
目的通过体外细胞实验,研究外源硫化氢(H2S)以4-羟基壬烯酸(4-HNE)为作用靶点抑制肝细胞死亡的作用及分子机制。方法以人的肝癌细胞系HepG2为细胞模型,通过MTT法、LDH活性检测外源H2S对4-HNE诱导肝细胞死亡的抑制作用,利用酶联... 目的通过体外细胞实验,研究外源硫化氢(H2S)以4-羟基壬烯酸(4-HNE)为作用靶点抑制肝细胞死亡的作用及分子机制。方法以人的肝癌细胞系HepG2为细胞模型,通过MTT法、LDH活性检测外源H2S对4-HNE诱导肝细胞死亡的抑制作用,利用酶联免疫吸附法检测肝细胞内H2S水平,利用WesternBlot技术检测肝细胞内4-HNE与蛋白质形成的加合物水平。结果外源NariS(H2S前体)能升高肝细胞内H2S水平。外源NaHS(H2S前体)能够显著抑制4-HNE诱导的肝细胞死亡。升高肝细胞内H2S水平可以显著降低细胞内4-HNE与蛋白质形成的加合物水平。结论补充外源性H2S能增加肝细胞内H2S水平,清除细胞内4-HNE蛋白质加合物,从而抑制4-HNE诱导的肝细胞死亡,为以4-HNE为靶点的治疗酒精性肝病的新型药物研发提供重要的理论指导和依据。 展开更多
关键词 酒精性肝病 4-羟基壬烯 酸硫化 氢肝细胞
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水解蛇蜕的几种方法及水解产物的生物活性研究 预览
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作者 蒋凯 严发展 +3 位作者 陈鑫珉 梁文星 《科技创新与应用》 2018年第29期32-34,共3页
目的比较几种蛇蜕水解方法的水解效率,并以HaCaT细胞评价水解产物的生物活性.方法利用乙酸、NaOH、氧化还原两步法在不同温度和时间条件下水解蛇蜕;利用茚三酮法、考马斯亮蓝法检测水解产物中氨基酸及多肽的含量;用HPLC测定提水解产物... 目的比较几种蛇蜕水解方法的水解效率,并以HaCaT细胞评价水解产物的生物活性.方法利用乙酸、NaOH、氧化还原两步法在不同温度和时间条件下水解蛇蜕;利用茚三酮法、考马斯亮蓝法检测水解产物中氨基酸及多肽的含量;用HPLC测定提水解产物分子量;利用HaCaT评价水解产物的生物活性.结果酸水解的最适条件为80℃、2.5mol/L乙酸反应6h;碱水解的最适条件为80益、0.625mol/LNaOH反应6h;氧化还原水解法最适试剂浓度分别为6%过硫酸氢钾、4mol/L尿素、1.25%亚硫酸氢钠;通过上述方法获得的胶原蛋白多肽分子量约为1kDa.该多肽能够促进细胞体外增殖. 展开更多
关键词 蛇蜕 多肽 水解 生物活性
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关于公众保肝护肝中药认识和接受程度的调查 预览
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作者 张琪 +3 位作者 金卓 蒋凯 窦晓兵 《中成药》 CSCD 北大核心 2018年第11期2590-2592,共3页
为了更全面了解公众的肝脏健康状况,以及对保肝护肝类中药(包括中药饮片和中成药)的认识和接受程度,本文采用随机发放问卷并对调查结果进行统计学分析的方法。结果发现,民众对肝脏健康非常关注,但缺乏相关知识。因此,建议通过网络媒体... 为了更全面了解公众的肝脏健康状况,以及对保肝护肝类中药(包括中药饮片和中成药)的认识和接受程度,本文采用随机发放问卷并对调查结果进行统计学分析的方法。结果发现,民众对肝脏健康非常关注,但缺乏相关知识。因此,建议通过网络媒体对民众开展有关肝脏健康、合理使用保肝护肝类中药(包括中药饮片和中成药)的通识教育,以达到提高公众健康水平的目的。 展开更多
关键词 公众 肝脏健康 保肝护肝类中药
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磷酸苯酯羧化酶同源基因在部分Thauera aromatica及Azoarcus evansii菌株中的多样性
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作者 蒋福升 +2 位作者 钱朝东 蒋莉娜 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期470-476,共7页
苯酚是重要的化工原料,也是危害环境的重要酚类污染物之一。在反硝化细菌Thauera aromatica K172中,苯酚经过磷酸化和羧化可转化成毒性较低的4-羟基苯甲酸。磷酸苯酯羧化酶是这一过程的关键酶,由4个亚基α、δ、β和γ构成。本研究... 苯酚是重要的化工原料,也是危害环境的重要酚类污染物之一。在反硝化细菌Thauera aromatica K172中,苯酚经过磷酸化和羧化可转化成毒性较低的4-羟基苯甲酸。磷酸苯酯羧化酶是这一过程的关键酶,由4个亚基α、δ、β和γ构成。本研究以编码δ和γ亚基的开放阅读框架(open reading frame, ORF)orf 5和orf 12为模板构建了DNA探针,通过Southern blot 的方法,对部分T. aromatica及Azoarcus evansii菌株中相关基因的多样性进行了分析,发现这些菌株普遍含有多个orf 5同源序列,而杂交图谱显示该基因不具备属的特异性。相比之下,orf 12仅分布在T. aromatica K172和S100以及A. evansii T中,相关的基因簇为单一拷贝,且均位于一个Pst I消化的大小一致的片段中;在培养实验中也只有这3个菌株能够稳定地在反硝化条件下以苯酚为唯一碳源生长。因此推测,T. aromatica K172,S100和A. evansii T中降解代谢苯酚的途径是相同的,可能是在进化过程中获得了相同的苯酚代谢的基因或基因簇。本研究进一步证明了orf 12编码的γ蛋白是磷酸苯酯羧化酶的亚基之一,为深入探讨苯酚的无氧代谢提供了实验基础。 展开更多
关键词 磷酸苯酯羧化酶 苯酚 降解代谢 硝酸呼吸
丹参酮ⅡA通过miR30b-p53信号通路诱导人肝癌细胞凋亡的研究
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作者 谢彬彬 夏永良 +4 位作者 任宣奇 杜仲燕 窦晓兵 王萃 《中药材》 北大核心 2017年第7期1718-1721,共4页
目的:研究丹参酮ⅡA诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及其机制。方法:用不同浓度的丹参酮ⅡA处理细胞24 h后,检测LDH释放水平,观察丹参酮ⅡA对HepG2活力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡;Real-time PCR检测microRNA30家族主要亚型(a,b,c,... 目的:研究丹参酮ⅡA诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及其机制。方法:用不同浓度的丹参酮ⅡA处理细胞24 h后,检测LDH释放水平,观察丹参酮ⅡA对HepG2活力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡;Real-time PCR检测microRNA30家族主要亚型(a,b,c,d)表达;Western Blot检测肝癌细胞内凋亡相关分子Bax、Bcl-2、Caspase-3及p53蛋白表达水平。结果:丹参酮ⅡA对HepG2细胞内LDH释放及细胞凋亡的诱导均存在量效关系。≥20μmol/L丹参酮ⅡA能显著诱导细胞凋亡(P〈0.05),在80μmol/L时最大诱导率达20%。Real-time PCR结果显示,丹参酮ⅡA对miR30b的抑制最为显著。同时丹参酮ⅡA通过抑制miR30b从而诱导了下游分子p53的表达。Western Blot检测结果显示,丹参酮ⅡA上调p53蛋白水平,诱导Bax/Bcl-2及凋亡执行分子Caspase-3的表达。结论:丹参酮ⅡA能诱导肝癌细胞凋亡,其机制可能为通过调控miR30b-p53介导的细胞凋亡信号通路。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA miR30b-p53 HEPG2细胞 细胞凋亡
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