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布鲁氏菌Omp16蛋白的原核表达与鉴定 预览
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作者 李俊萱 吴胜昔 +6 位作者 曾政 李令臣 鲁友铭 侯力嘉 李志 徐缘 李红 《重庆理工大学学报:自然科学》 CAS 北大核心 2019年第2期162-166,215共6页
为实现布鲁氏菌Omp16蛋白在大肠杆菌中的高效表达,根据GenBank发表的Omp16(登录号为JF918760.1)基因序列,在不改变Omp16蛋白氨基酸序列的情况下,根据大肠杆菌密码子偏好性优化基因序列,全基因合成Omp16基因,并将其克隆到pET28a(+)载体中... 为实现布鲁氏菌Omp16蛋白在大肠杆菌中的高效表达,根据GenBank发表的Omp16(登录号为JF918760.1)基因序列,在不改变Omp16蛋白氨基酸序列的情况下,根据大肠杆菌密码子偏好性优化基因序列,全基因合成Omp16基因,并将其克隆到pET28a(+)载体中,构建重组质粒pET28a(+)-Omp16,转化至BL21工程菌进行诱导表达,利用His-tag镍柱纯化Omp16重组蛋白,并对纯化后的重组蛋白进行鉴定。结果表明:当重组菌株pET28a(+)-Omp16/BL21(DE3)诱导条件为37℃、IPTG浓度为0.5mmol/L诱导6h时,Omp16蛋白表达量最高;SDS-PAGE电泳显示经镍柱纯化后Omp16蛋白达到了电泳纯,经Westernblot分析,目的蛋白具有抗原特异性,在21ku处出现阳性条带,与预期蛋白分子大小相符,因此成功在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达出布鲁氏菌Omp16重组蛋白,为后续单克隆抗体的制备和布鲁氏菌病的检测试剂的研发提供了参考。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 Omp16蛋白 原核表达 镍柱纯化 蛋白免疫印迹
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禽流感病毒HA蛋白的原核表达与鉴定 预览
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作者 李令臣 侯力嘉 +6 位作者 吴胜昔 李俊萱 鲁友铭 徐缘 李志 曾政 梁望旺 《重庆理工大学学报:自然科学》 CAS 北大核心 2019年第5期137-141,共5页
为了实现禽流感病毒血凝素(HA)蛋白在原核系统中高效表达,根据GenBank发表的HA(ID=DQ023145.1)基因序列,在不改变HA蛋白氨基酸序列的情况下,根据大肠杆菌密码子偏好性优化基因序列,化学合成HA全基因。将其克隆到pET28a(+)载体中,构建重... 为了实现禽流感病毒血凝素(HA)蛋白在原核系统中高效表达,根据GenBank发表的HA(ID=DQ023145.1)基因序列,在不改变HA蛋白氨基酸序列的情况下,根据大肠杆菌密码子偏好性优化基因序列,化学合成HA全基因。将其克隆到pET28a(+)载体中,构建重组质粒pET28a(+)-HA,转化至BL21工程菌进行诱导表达,利用His-tag镍柱纯化HA重组蛋白,并对纯化后的重组蛋白进行SDS-PAGE分析及Western-blot鉴定。结果表明:当重组菌株pET28a(+)-HA/BL21(DE3)诱导条件为30℃、IPTG浓度为1mmol/L诱导8h时,HA蛋白表达量最高;SDS-PAGE电泳显示经镍柱纯化后HA蛋白纯度较高,Westernblot实验发现在预期的70kD处有明显的蛋白印迹条带,说明已成功实现了在大肠杆菌中高效表达禽流感病毒HA蛋白,为后续开展禽流感检测方法及疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素蛋白 原核表达 镍柱纯化 蛋白免疫印迹
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二元复合驱提高普通稠油采收率室内试验研究 预览
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作者 侯力嘉 《化学工程师》 CAS 2017年第9期52-55,共4页
二元复合驱现已成为三次采油技术研究的新方向,由于普通稠油粘度高,二元复合驱研究较少。本文辽河油田普通稠油油藏H1块为研究对象,在室内开展了二元复合驱提高采收率研究。首先,通过对聚合物理化指标检测,筛选出了适合该区块聚合... 二元复合驱现已成为三次采油技术研究的新方向,由于普通稠油粘度高,二元复合驱研究较少。本文辽河油田普通稠油油藏H1块为研究对象,在室内开展了二元复合驱提高采收率研究。首先,通过对聚合物理化指标检测,筛选出了适合该区块聚合物P2500;然后通过对四种表活剂界面性能进行评价,筛选出了两种表活剂W1、L2。为了确定地下最佳工作粘度,开展了不同油水粘度比的增油效果物模评价,确定了最佳粘度比为1.5。最后结合聚合物粘一浓曲线,确定二元复合体系配方为:0.18%P2500+0.20%L2。室内驱油实验表明:驱油效率比水驱提高27.36%,具有良好的增油效果。 展开更多
关键词 二元复合驱 普通稠油 油水粘度比 驱油效率
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无碱二元驱提高原油采收率技术在辽河油田的应用 预览 被引量:2
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作者 郭斐 刘佳林 +2 位作者 肖传敏 侯力嘉 郭丽娜 《精细石油化工进展》 CAS 2013年第5期共3页
针对辽河油田区块的油藏条件,在室内进行了无碱表面活性剂/聚合物复合二元驱提高原油采收率的研究.对聚合物(P)进行了基本参数的检测,确保聚合物达到驱油聚合物的行业标准;对3种表面活性剂YD,J16,BH进行了筛选,优选出对该地层原油具有... 针对辽河油田区块的油藏条件,在室内进行了无碱表面活性剂/聚合物复合二元驱提高原油采收率的研究.对聚合物(P)进行了基本参数的检测,确保聚合物达到驱油聚合物的行业标准;对3种表面活性剂YD,J16,BH进行了筛选,优选出对该地层原油具有最佳降低界面张力效果的表面活性剂YD;将筛选出的表面活性剂与聚合物复配组成二元体系,并得出最佳配方:0.16%P +0.15%YD.筛选出的二元体系可以使油水界面张力降至<10-3 mN/m,并具有长期稳定性,采用无碱二元驱可以大幅提高原油采收率,增幅>10%. 展开更多
关键词 无碱二元驱 界面张力 驱油效率
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