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六种核酸提取试剂盒对粪样中小鼠肝炎病毒核酸提取效率的比较
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作者 桂飞 杨伟伟 +3 位作者 利平 戴方伟 杜江涛 宋晓明 《实验动物科学》 2019年第1期31-35,共5页
目的比较六种商品化试剂盒在小鼠粪便中提取小鼠肝炎病毒(MHV)RNA的效率,筛选出效率高、耗时短的核酸提取方法。方法采集感染MHV小鼠的新鲜粪便样本,分别用液氮研磨法、磁珠匀浆法以及PBS溶解离心法进行处理,通过同一核酸提取试剂盒比... 目的比较六种商品化试剂盒在小鼠粪便中提取小鼠肝炎病毒(MHV)RNA的效率,筛选出效率高、耗时短的核酸提取方法。方法采集感染MHV小鼠的新鲜粪便样本,分别用液氮研磨法、磁珠匀浆法以及PBS溶解离心法进行处理,通过同一核酸提取试剂盒比较病毒核酸提取效率,明确最佳样本前处理方法;之后,用6种试剂盒进行RNA提取,经反转录后进行TaqMan实时定量PCR检测,以Ct值评价6种试剂盒的提取效率,结合产物测序和血清抗体ELISA结果,筛选MHV的最佳核酸提取方法。结果对于粪便样本的前处理,液氮研磨法的RNA提取效率显著高于磁珠匀浆法。对于6种试剂盒的提取效果,TIANGEN DP422[总RNA浓度:(549.70±52.38) ng/μL,Ct值:(24.51±0.10)]核酸提取效率最高;TIANGEN SD101[总RNA浓度:(274.13±6.87) ng/μL,Ct值:(2.39±0.017)]和QIAGEN 52904[总RNA浓度:(288.13±15.11) ng/μL,Ct值:(2.40±0.012)]用时最短;XS VRL[总RNA浓度:(348.80±15.85) ng/μL,Ct值:(24.70±0.13)]操作最为方便。结论粪便样本前处理建议采用液氮研磨法。针对粪便中MHV RNA的提取,TIANGEN DP422提取效率最高,推荐用于小鼠肝炎病毒的分子生物学检测。 展开更多
关键词 小鼠肝炎病毒 病毒RNA提取 TAQMAN探针 实时荧光定量PCR
互联网+经济背景下的财务管理研究 预览
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作者 利平 《财会学习》 2018年第15期76-76,78共2页
在互联网+经济的时代下人们的生活发生了各种变化。同时经济全球化的过程中使得企业竞争也达到白热化状态。企业不断进行跨界融合与重组,管理不断升级,经营模式与营销方式也在不断变化。因此财务管理工作也要站在战略的高度进行思考与... 在互联网+经济的时代下人们的生活发生了各种变化。同时经济全球化的过程中使得企业竞争也达到白热化状态。企业不断进行跨界融合与重组,管理不断升级,经营模式与营销方式也在不断变化。因此财务管理工作也要站在战略的高度进行思考与定位。 展开更多
关键词 互联网+ 财务管理 管理会计
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危害我国食品安全犯罪的刑事法治路径之选择
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作者 利平 《政法学刊》 2015年第6期68-74,共7页
以《刑法修正案(八)》)有关食品安全犯罪的立法修订为切入点,评析我国食品安全犯罪立法之不足,建议构建食品安全犯罪的双轨制立法模式、调整食品安全类犯罪的归位、合理设置罪名、均衡法定刑的配置、增设财产刑和资格刑,通过严密食... 以《刑法修正案(八)》)有关食品安全犯罪的立法修订为切入点,评析我国食品安全犯罪立法之不足,建议构建食品安全犯罪的双轨制立法模式、调整食品安全类犯罪的归位、合理设置罪名、均衡法定刑的配置、增设财产刑和资格刑,通过严密食品安全犯罪的刑事法网,实现食品安全犯罪立法由"厉而不严"到"严而不厉"的刑事法治路径的转变。 展开更多
关键词 食品安全犯罪 双轨制立法模式 均衡法定刑配置
培养学生的数据意识 预览
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作者 利平 《湖北教育:科学课》 2015年第4期103-106,共4页
数据意识是指学生通过观察、实验等探究活动在搜集数据、整理数据、分析数据时表现出来的心理倾向。可是,在日常教学活动中,我们不难发现,学生的数据意识还不强,很多课堂上热热闹闹实验之后得来的数据,学生只是做了简单的分析就放... 数据意识是指学生通过观察、实验等探究活动在搜集数据、整理数据、分析数据时表现出来的心理倾向。可是,在日常教学活动中,我们不难发现,学生的数据意识还不强,很多课堂上热热闹闹实验之后得来的数据,学生只是做了简单的分析就放在一边没什么用了。 展开更多
关键词 学生 培养 探究活动 心理倾向 分析数据 教学活动 实验
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三例眼部突变小鼠的培育及特征分析
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作者 杨伟伟 金红颖 +7 位作者 吴晓玲 周祥 李高天 刘桂杰 顾美儿 利平 宋晓明 吴宝金 《实验动物科学》 2014年第5期1-4,I0001,I0002共6页
目的筛选培育眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供材料。方法采用N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱变处理G0代小鼠,繁育获得G1代,筛选眼部突变表型个体,进行遗传力试验、临床诊断及病理学观察。结果本实验繁殖G... 目的筛选培育眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供材料。方法采用N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱变处理G0代小鼠,繁育获得G1代,筛选眼部突变表型个体,进行遗传力试验、临床诊断及病理学观察。结果本实验繁殖G1代小鼠2782只,经筛查获得眼部突变表型小鼠65只,可稳定遗传小鼠3例,分别表现为:角膜混浊、小眼球和虹膜异常等特征。角膜混浊者其角膜症状严重程度差异较大,角膜病变部位明显增厚,部分伴有新生血管;小眼球者睑裂较小,甚至上下眼睑粘连,外观眼球不可见,病理学检查可见内有发育异常的小眼球;虹膜异常者可见瞳孔偏大,明显偏离中心位置,偏向位置不定,对光无反射,病理学观察可见虹膜晶状体粘连、虹膜缺损,严重者伴有视网膜异常等。结论本实验成功培育了3例眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供良好的材料。 展开更多
关键词 眼部疾病 小鼠模型 诱变
论行刑社会化中的我国社区矫正制度 被引量:3
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作者 利平 《政法学刊》 2014年第6期70-75,共6页
明确我国社区矫正的对象及管辖范围,确立司法行政机关执法主体的法律地位,加强社区矫正人员的队伍建设,全面规范矫正方法,实行差别化的矫正管理,乃是完善当前我国社区矫正制度的重要任务。
关键词 社区矫正 行刑社会化 司法行政机关
Plcd1转基因小鼠的制备 预览 被引量:1
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作者 杨伟伟 殷筱舒 +6 位作者 殷黎静 张艳丽 李高天 刘桂杰 利平 顾美儿 吴宝金 《杭州师范大学学报:自然科学版》 CAS 2013年第1期1-7,共7页
通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载... 通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载体;经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础. 展开更多
关键词 Plcd1 pEF6 V5-His-Plcd1 显微注射 转基因小鼠
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5种不同遗传背景绿色荧光蛋白(GFP)基因导入系小鼠的培育 预览
8
作者 吴培林 利平 +6 位作者 尹洪萍 杨伟伟 顾美儿 刘桂杰 张艳丽 李高天 吴宝金 《杭州师范大学学报:自然科学版》 CAS 2013年第1期8-13,共6页
通过反复回交——筛选目的基因的手段,将C57BL/6-Tg(UBC-GFP)30Scha/J转基因小鼠的绿色荧光蛋白基因(GFP)分别向BABL/C、CBA/J、DBA/2J、AKR/J、FVB/J等品系小鼠导入,得到了5种不同遗传背景且带有GFP基因的导入系小鼠.冰冻组织切片... 通过反复回交——筛选目的基因的手段,将C57BL/6-Tg(UBC-GFP)30Scha/J转基因小鼠的绿色荧光蛋白基因(GFP)分别向BABL/C、CBA/J、DBA/2J、AKR/J、FVB/J等品系小鼠导入,得到了5种不同遗传背景且带有GFP基因的导入系小鼠.冰冻组织切片等方法显示GFP导入系小鼠的皮肤、肝、肾、心、肺等均有不同程度的绿色荧光蛋白表达,不同遗传背景对GFP的组织表达谱、血液生理指标及繁殖性能未见影响.本实验采用基因导入法培育了5种新的带有GFP导入系小鼠,这些不同遗传背景的基因导入系小鼠为移植生物学研究提供了材料. 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 基因导入 表达谱
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公安机关参与的矛盾纠纷多元解决机制的构建 被引量:1
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作者 利平 任继升 《政法学刊》 2013年第6期94-99,共6页
矛盾纠纷多元解决机制是当今世界各国在纠纷解决和司法制度发展中面临的共同课题,化解社会矛盾纠纷,则成为公安机关现阶段的一个重要研究课题。以新时期公安机关参与矛盾纠纷多元解决机制的理论基础为依据,分析公安机关在化解矛盾纠... 矛盾纠纷多元解决机制是当今世界各国在纠纷解决和司法制度发展中面临的共同课题,化解社会矛盾纠纷,则成为公安机关现阶段的一个重要研究课题。以新时期公安机关参与矛盾纠纷多元解决机制的理论基础为依据,分析公安机关在化解矛盾纠纷多元机制中的主体地位和作用,找出公安机关在化解矛盾纠纷多元机制中的困境,提出完善公安机关化解矛盾纠纷多元机制的建议。 展开更多
关键词 公安机关 矛盾纠纷 多元解决机制
腹侧黄斑小鼠的部分特征及其突变基因的染色体定位 被引量:1
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作者 施美莲 徐平 +5 位作者 殷筱舒 杨伟伟 顾美儿 利平 刘桂杰 吴宝金 《动物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 290-297,共8页
腹侧黄斑小鼠(VY^Slac)是在B6小鼠繁殖生产过程中被发现、分离的突变系小鼠,呈单基因显性遗传,其头颈及躯干的腹侧为黄色。VY^Slac腹部表皮多巴(+)黑色素细胞及毛囊内黑色素较其背景品系B6少;腹部毛发颜色浅黄、多数无黑色素沉积,... 腹侧黄斑小鼠(VY^Slac)是在B6小鼠繁殖生产过程中被发现、分离的突变系小鼠,呈单基因显性遗传,其头颈及躯干的腹侧为黄色。VY^Slac腹部表皮多巴(+)黑色素细胞及毛囊内黑色素较其背景品系B6少;腹部毛发颜色浅黄、多数无黑色素沉积,但结构正常。通过微卫星标记与48只F2小鼠(VY^SlacD2F1回交D2)的连锁分析发现,突变基因与D2Mit229间的LOD值为5.79,确定连锁。随后,在突变基因附近反复多次筛选新的微卫星或SNP标记,通过对196例F2小鼠的多次连锁分析,将突变基因所在区域缩小到rs13476833(距着丝粒149804749bp)与rs27310903(距着丝粒155060764bp)间约5256015bp的范围内。 展开更多
关键词 腹部黄斑小鼠 表型分析 基因定位
锡基巴氏合金轴瓦浇注技术介绍 预览
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作者 利平 《浙江冶金》 2012年第1期 43-45,共3页
根据轴瓦尺寸制作轴瓦浇注模具,组装轴瓦和模具,把熔化的锡基巴氏合金倒入模具与轴瓦的空隙内,冷却脱模成型。通过涂石墨粉、化合金、上锡、冷却等环节的控制,保证轴瓦的浇注质量。
关键词 模具制作 涂石墨粉 上锡 化合金 轴瓦浇注 冷却脱模
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我国危险驾驶罪的罪刑评价
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作者 利平 肖扬宇 《政法学刊》 2012年第6期59-62,共4页
在风险社会的时代,民众规避风险的意愿影响和引导着刑法规范的立法活动,危险驾驶罪的制定就是其表现之一。危险驾驶罪虽然存在一些积极意义,但在规范层面和司法层面还存在一些没有理清的问题。在规范层面,应当明确危险驾驶罪与交通肇事... 在风险社会的时代,民众规避风险的意愿影响和引导着刑法规范的立法活动,危险驾驶罪的制定就是其表现之一。危险驾驶罪虽然存在一些积极意义,但在规范层面和司法层面还存在一些没有理清的问题。在规范层面,应当明确危险驾驶罪与交通肇事罪、以危险方法危害公共安全罪竞合情况的适用规则,在司法层面应当统一司法使用标准以解决现存的困境。 展开更多
关键词 危险驾驶罪 罪刑评价 司法适用
热带联合传动箱的吊装方法 预览
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作者 利平 陈利法 《浙江冶金》 2012年第4期16-18,共3页
热带联合传动箱重21.5吨,现场只有10吨和16吨行车,无法用一台行车直接吊装,需制作专用铁扁担,用铁扁担抬吊联合传动箱。联合传动箱更换时需要竖起和放平,现场行车难以实现吊装,需用50吨吊机大小钩配合实现联合传动箱竖立和放平... 热带联合传动箱重21.5吨,现场只有10吨和16吨行车,无法用一台行车直接吊装,需制作专用铁扁担,用铁扁担抬吊联合传动箱。联合传动箱更换时需要竖起和放平,现场行车难以实现吊装,需用50吨吊机大小钩配合实现联合传动箱竖立和放平吊装。 展开更多
关键词 联合传动箱 吊装 更换 方法
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AKR/J小鼠的表型特征与疾病模型价值评估 预览 被引量:1
14
作者 顾美儿 杨伟伟 +6 位作者 利平 卢增兰 邓巧凤 顾小丽 张艳丽 吴宝金 刘桂杰 《健康研究》 CAS 2012年第1期 10-15,F0003,共7页
目的深入分析AKR/J小鼠的与胆固醇代谢相关的表型特征及其内在联系,探讨其作为人类疾病模型的价值。方法AKR/J小鼠为实验组,BABL/C小鼠为对照组,取两组小鼠毛发镜下观察;取两组小鼠的肾上腺、卵巢、睾丸,冷冻切片后进行油红O染... 目的深入分析AKR/J小鼠的与胆固醇代谢相关的表型特征及其内在联系,探讨其作为人类疾病模型的价值。方法AKR/J小鼠为实验组,BABL/C小鼠为对照组,取两组小鼠毛发镜下观察;取两组小鼠的肾上腺、卵巢、睾丸,冷冻切片后进行油红O染色;检测并比较两组小鼠肾上腺相关激素(皮质素、醛固酮、ACTH)水平;检测并比较血常规、血糖、血脂(甘油三酯,总胆固醇)、血电解质及血压。结果AKR/J小鼠内部毛发结构排列紊乱,肾上腺脂类含量明显少于对照鼠,皮质素、醛固酮、总胆固醇浓度比对照小鼠有显著性降低(P〈0.01);血液Na+、Cl-、Mg^2+浓度及平均血红蛋白含量低于对照鼠,Ca^2+浓度高于对照鼠(P〈0.05),其他各项指标均无显著性差别。结论AKR/J小鼠是人类毛发结构缺陷、肾上腺皮质机能减退等疾病的天然模型,也是胆结石及动脉粥样硬化的抗性模型。 展开更多
关键词 AKR/J小鼠 肾上腺脂质缺乏 毛髓缺失 疾病模型
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利用专用钢架吊装蒸汽机车 预览 被引量:1
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作者 利平 陈利法 《浙江冶金》 2012年第3期46-47,共2页
保护性吊装蒸汽机车难度大,制作专用钢架,把主吊钢丝绳靠在钢架上吊装,防止蒸汽机车吊装时锅炉变形。
关键词 蒸汽机车 钢架 变形 主吊钢丝绳
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建立卵泡刺激素受体单位点基因突变体的卵巢癌SKOV3细胞和裸鼠模型
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作者 姚济芬 利平 +6 位作者 董小龙 卢玲芬 张晓光 王亚云 韦兰芳 王水英 黄荷凤 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期767-771,共5页
目的建立转染卵泡刺激素受体(FSHR)307和680位点突变的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系和裸鼠动物模型。方法将人卵巢颗粒细胞(来自体外受精取卵时废弃的颗粒细胞),行原代培养后用于FSHRRNA提取;FSHR和FSHR307、680位点突变重组蛋白构建... 目的建立转染卵泡刺激素受体(FSHR)307和680位点突变的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系和裸鼠动物模型。方法将人卵巢颗粒细胞(来自体外受精取卵时废弃的颗粒细胞),行原代培养后用于FSHRRNA提取;FSHR和FSHR307、680位点突变重组蛋白构建;将FSHR和FSHR307、680位点突变蛋白转染SKOV3细胞株;将处理后的3组SKOV3细胞接种到裸鼠皮下,8周后处死裸鼠,并取瘤组织验证。结果建立了307和680位点突变的FSH受体高表达的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系和裸鼠动物模型。结论成功地建立了307和680位点突变的FSH受体高表达的SKOV3上皮性卵巢癌细胞系和裸鼠移植瘤模型,为FSH在上皮性卵巢癌中的作用和治疗提供了一种新的细胞模型和动物模型。 展开更多
关键词 卵泡刺激素受体 突变 上皮性卵巢癌 SKOV3细胞系 反转录-聚合酶链反应 裸鼠
“保两头、放中间"新型农村合作医疗制度基本运行模式的研究与评估 被引量:3
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作者 张黎明 利平 +1 位作者 何梅 高雪琴 《中国卫生经济》 北大核心 2012年第4期 40-42,共3页
根据长期与世界卫生组织、国家卫生部以及上海市卫生局合作的重点项目研究,结合嘉定区新型农村合作医疗运行的实践.对我国新型农村合作医疗运行的基本模式、补偿的效果和病人就医的流向等进行研究与评估。提出“保两头、放中间”是我... 根据长期与世界卫生组织、国家卫生部以及上海市卫生局合作的重点项目研究,结合嘉定区新型农村合作医疗运行的实践.对我国新型农村合作医疗运行的基本模式、补偿的效果和病人就医的流向等进行研究与评估。提出“保两头、放中间”是我国新型农村合作医疗的基本运行模式。该模式保障目标明确,基金使用合理,保障效果显著,是一个适宜于我国实行新型农村合作医疗地区推广的可行性模式。也为我国其他社会医疗保险制度的完善提供了科学的参考依据。 展开更多
关键词 新型农村合作医疗 保两头 放中间 模式 补偿
销轴法吊装钢筋混凝土柱子 预览
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作者 利平 《浙江冶金》 2011年第2期 41-43,共3页
杭钢转炉铁水预处理厂房建筑工程,AB跨共有18根混凝土柱子,每根重量都超过110吨,最重的达到122吨,若采用常规捆绑式吊装,吊装难度会相当大。经过反复讨论,方案比较,最终确定用销轴法吊装的施工方案,顺利完成了吊装任务。
关键词 钢筋 混凝土柱子 销轴法 吊装 强度验算 双机协同
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整体顶升平移法更换转炉托圈、倾动机构 预览
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作者 利平 《浙江冶金》 2011年第3期 46-49,共4页
转炉1号炉托圈、倾动机构更换,托圈耳轴重达63442kg,安装在现场行车无法直接吊装的地方,吊装难度非常大。根据现场情况,制作钢支架,把钢支架放到出钢平板车上,用四只液压千斤顶同步整体硕升托圈、倾动机构,顶升到一定高度,把托... 转炉1号炉托圈、倾动机构更换,托圈耳轴重达63442kg,安装在现场行车无法直接吊装的地方,吊装难度非常大。根据现场情况,制作钢支架,把钢支架放到出钢平板车上,用四只液压千斤顶同步整体硕升托圈、倾动机构,顶升到一定高度,把托圈、倾动机构随同平板车整体拉到炉前,吊出托圈、倾动机构;在炉前拼装新托圈、倾动机构,整体把新托圈、倾动机构安装到位。 展开更多
关键词 托圈倾动机构 钢支架 钢支承墩 液压千斤顶 配重 整体顶升更换
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慢性酒精性肝损伤大鼠COX-2、TNF—α的表达及蜂王浆的干预作用 预览 被引量:1
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作者 徐小冬 利平 尹洪萍 《健康研究》 CAS 2011年第1期4-8,共5页
目的观察COX-2和TNF—α在酒精性肝损伤大鼠肝脏中的表达及蜂王浆对其表达的影响。方法雄性SD大鼠,随机分为3组.对照组用生理盐水灌胃;模型组用56%红星二锅头+玉米油+吡唑灌胃;干预组在模型组的基础上同时给予蜂王浆1.0g/kg/... 目的观察COX-2和TNF—α在酒精性肝损伤大鼠肝脏中的表达及蜂王浆对其表达的影响。方法雄性SD大鼠,随机分为3组.对照组用生理盐水灌胃;模型组用56%红星二锅头+玉米油+吡唑灌胃;干预组在模型组的基础上同时给予蜂王浆1.0g/kg/d灌胃,共12周。实验结束后处死大鼠,全自动生化分析仪检测血清中天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血清白蛋白(A)等。HE染色观察肝脏组织病理学改变,免疫组织化学SABC法检测COX-2和TNF—α的表达,利用Olympus DP70显微成像系统和Image—prodiscovery 5.1图像分析系统对其行定量分析。结果模型组肝细胞损伤明显,治疗组有所改善。模型组大鼠血清AST、ALT、A较对照组明显升高(P〈0.05);与模型组相比,蜂王浆组大鼠血清ALT、AST明显降低,A升高(P均〈0.05)。免疫组化和图像分析均显示,模型组肝组织中COX-2及TNF—α表达较对照组明显升高(P〈0.01),蜂王浆组较模型组明显下降(P〈0.05)。结论蜂王浆在酒精性肝病的形成过程中能够抑制COX-2和TNF—α的表达,对酒精性肝损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 肝损伤 酒精性 环氧合酶-2 肿瘤坏死因子
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