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纳米银生物过程及影响的研究进展 预览
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作者 徐明 王哲 《中国材料进展》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期28-35,共8页
纳米银是目前全球产量和使用量最大的人工纳米材料之一。由于其优良的抗菌等特性,纳米银应用范围广泛,与人们的生产、生活密切相关。随着纳米银在工业品、医疗品和生活用品中日益广泛的应用,其伴随的环境与健康风险也日益受到人们的... 纳米银是目前全球产量和使用量最大的人工纳米材料之一。由于其优良的抗菌等特性,纳米银应用范围广泛,与人们的生产、生活密切相关。随着纳米银在工业品、医疗品和生活用品中日益广泛的应用,其伴随的环境与健康风险也日益受到人们的关注,并成为重要的研究热点。近年来,关于纳米银的生物过程、生物效应及其相关分子作用机制的研究都取得重要进展,为全面地阐明纳米银的环境和生物安全性提供了重要的理论依据。为了更深入地理解纳米银暴露的环境健康危害,系统地总结了纳米银进人生物体的途径以及在生物体内的组织分布;纳米银与生物分子的相互作用;纳米银进入细胞的途径以及引发致死效应的毒性机制等方面的研究现状和进展。此外,还阐述了纳米银的环境健康风险及其在低剂量暴露条件下引发生物体非致死效应的作用机制,并对未来可能的研究前景进行了展望。 展开更多
关键词 纳米银 生物过程 致死效应 非致死效应一 环境健康风险
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非毒性剂量重金属锑通过改变细胞脂代谢促进前列腺癌进展 预览 被引量:1
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作者 李晓建 姜行康 +4 位作者 高明 孔佑胜 潘东亮 李宁枕 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期129-135,共7页
本文旨在检测健康人群与前列腺癌患者血清中重金属锑的含量,并对重金属锑在前列腺癌发生发展中的作用和相关机制进行初步探索。本实验使用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)对健康人群和前列腺癌患者血清中重金属锑的含量进行了检测;此... 本文旨在检测健康人群与前列腺癌患者血清中重金属锑的含量,并对重金属锑在前列腺癌发生发展中的作用和相关机制进行初步探索。本实验使用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)对健康人群和前列腺癌患者血清中重金属锑的含量进行了检测;此外,分别通过MTT和Alamar-Blue方法对于重金属锑对人前列腺癌PC-3细胞的毒性效应进行了评价,并进一步探讨了非毒性剂量的重金属锑对前列腺癌细胞增殖能力(细胞计数及克隆形成实验)及脂类代谢过程(细胞内甘油三酯)的影响。研究结果显示:重金属锑在前列腺癌组患者血清中含量明显高于健康人群组且差异具有统计学意义;毒性实验结果表明高剂量的重金属锑能够显著抑制细胞活力且呈浓度依赖型方式,而非毒性剂量重金属锑能够显著促进前列腺癌细胞增殖,并导致细胞内甘油三酯的含量增加(P〈0.05)。综上所述,重金属锑在前列腺癌患者血清中具有相对较高水平,其机制可能是通过影响细胞脂类代谢从而促进前列腺癌的进展,这将对未来前列腺癌的预防和治疗提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 重金属 前列腺癌 脂代谢
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重金属暴露与前列腺癌发生和进展的关系综述 被引量:3
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作者 李晓建 潘东亮 +1 位作者 李宁忱 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1776-1783,共8页
前列腺癌是男性泌尿系统发病率最高的恶性肿瘤.目前关于其发病机制有很多不同的学说,其中环境中的重金属暴露引起前列腺癌的研究逐渐成为研究热点之一.文章重点阐述了镉、砷、铜等重金属导致前列腺癌发生和发展的最新研究进展.研究发现... 前列腺癌是男性泌尿系统发病率最高的恶性肿瘤.目前关于其发病机制有很多不同的学说,其中环境中的重金属暴露引起前列腺癌的研究逐渐成为研究热点之一.文章重点阐述了镉、砷、铜等重金属导致前列腺癌发生和发展的最新研究进展.研究发现,重金属暴露能够导致前列腺上皮细胞抗凋亡能力增强、雌激素受体增加、DNA甲基化异常、肿瘤干细胞形成,最终导致正常的前列腺上皮细胞发生恶性转化.关于重金属暴露引发前列腺癌的更多机制还有待进一步深入研究.因此,研究环境中重金属暴露导致前列腺癌发生机制对职业性暴露的人群提供健康指导以及预防前列腺癌的发生均具有重要的现实意义. 展开更多
关键词 前列腺癌 重金属 环境暴露
绝经后骨质疏松小鼠模型肝脏铁调素表达增加 预览 被引量:2
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作者 李君平 季虹 +3 位作者 侯艳丽 张书平 荣海钦 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期547-551,共5页
目的观察去卵巢小鼠铁代谢及铁调素表达量的改变,探讨铁代谢紊乱在绝经后骨质疏松中的作用机制。方法16w龄雌性C57BL/6小鼠分为双侧去卵巢手术(OVX组)和假手术(SHAM组)两组,6w后处死,取血清、子宫、肝脏、脾脏、股骨等组织。检... 目的观察去卵巢小鼠铁代谢及铁调素表达量的改变,探讨铁代谢紊乱在绝经后骨质疏松中的作用机制。方法16w龄雌性C57BL/6小鼠分为双侧去卵巢手术(OVX组)和假手术(SHAM组)两组,6w后处死,取血清、子宫、肝脏、脾脏、股骨等组织。检测股骨生物力学指标、血清骨代谢标志物、血清铁及肝脾铁的水平,肝脏铁调素的表达采用PCR技术进行检测。结果与SHAM组相比,OVX组股骨最大弯曲应力及弹性模量降低,血清骨钙素降低,1型胶原c端肽升高,同时,血清铁降低,肝脾铁含量升高,肝脏铁调素表达升高。结论雌激素不足增加铁调素的表达,导致组织内铁过载,与绝经后骨质疏松的发生发展有密切联系。 展开更多
关键词 雌激素 骨生物力学 铁调素 骨钙素 1型胶原C端肽
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四种常见纳米材料对骨代谢的影响
5
作者 曲晨 荣海钦 +3 位作者 季虹 侯艳丽 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期747-752,共6页
探讨4种常见纳米材料(单壁碳纳米管,多壁碳纳米管,纳米银,量子点)对小鼠骨代谢的影响.选取8周龄健康昆明小鼠给予不同剂量的上述4种纳米材料,各纳米材料分别设高、中、低剂量组,溶剂对照、离子对照组,以及阳性对照组,每周3次进行腹腔... 探讨4种常见纳米材料(单壁碳纳米管,多壁碳纳米管,纳米银,量子点)对小鼠骨代谢的影响.选取8周龄健康昆明小鼠给予不同剂量的上述4种纳米材料,各纳米材料分别设高、中、低剂量组,溶剂对照、离子对照组,以及阳性对照组,每周3次进行腹腔注射.用药6周后检测骨破坏情况、骨生物力学改变以及血清中钙的含量.结果显示,4种纳米材料与其相应溶剂对照组相比,多壁碳纳米管溶骨发生率显著增高,高、中剂量组骨灰干重比及3个剂量组生物力学指标有显著性差异,高剂量组血清钙显著升高;单壁碳纳米管溶骨发生率上升,高、中剂量组骨灰干重比及生物力学指标降低,各组血清钙水平无显著性差异;量子点各剂量组溶骨发生率无差异,高、中剂量组骨灰干重比、最大载荷、弹性载荷降低,血清钙水平无显著性差异;纳米银各剂量组溶骨发生率未增加,灰干重比、生物力学各指标及血清钙水平无统计学差异.多壁碳纳米管长期暴露可引起小鼠溶骨性破坏、骨量下降、骨强度减低;单壁碳纳米管与量子点对骨代谢的影响不显著,纳米银不会引起骨代谢改变. 展开更多
关键词 纳米材料 骨代谢 生物力学
纳米银的生物学特性及其潜在毒性的研究进展 被引量:10
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作者 曲晨 +1 位作者 荣海钦 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2010年第9期842-845,共4页
纳米银是指粒径在纳米级(1~100nm)的金属银单质。由于具有特殊的性能,纳米银在多个领域广泛应用。在医学领域中,纳米银作为抗菌剂的主要成分大量应用于临床治疗。因此,纳米银的潜在毒性及其对健康的影响引起了人们的广泛关注,研究表... 纳米银是指粒径在纳米级(1~100nm)的金属银单质。由于具有特殊的性能,纳米银在多个领域广泛应用。在医学领域中,纳米银作为抗菌剂的主要成分大量应用于临床治疗。因此,纳米银的潜在毒性及其对健康的影响引起了人们的广泛关注,研究表明纳米银存在不同程度的细胞毒性。该文综述了纳米银的医学生物学特性及其潜在毒性,认为透彻认识纳米银的潜在毒性及其机理才能保证纳米银在临床治疗中的安全应用。 展开更多
关键词 纳米银 生物学特性 细胞毒性
血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠抗超急性排斥反应能力 预览
7
作者 张志宏 马腾骧 +4 位作者 王广有 张玥 李胜芝 李光三 《天津医科大学学报》 2007年第2期 146-148,157,共4页
目的:检测血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠抗超急性排斥反应能力。方法:采用Langendorff心脏灌注装置,用20%稀释人血清灌注转基因小鼠离体心脏,观察其抗超急排斥反应能力。免疫组化方法检测灌注后心脏组织人IgM沉积情况... 目的:检测血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠抗超急性排斥反应能力。方法:采用Langendorff心脏灌注装置,用20%稀释人血清灌注转基因小鼠离体心脏,观察其抗超急排斥反应能力。免疫组化方法检测灌注后心脏组织人IgM沉积情况。结果:与普通鼠对比,转基因小鼠离体心脏在用20%稀释人血清灌注期间心脏存活时间明显延长,且60min灌注期间内做功仍维持在最大值20%以上,显示转基因小鼠具有一定抗超急排斥反应能力。免疫组化显示C3c(免疫组化一抗)在转基因组心肌组织间、血管管壁仅有少量沉积,普通小鼠组大量沉积,显示普通小鼠心脏遭受较为强烈的超急排斥反应损伤。结论:血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠有一定的抗超急排斥反应能力。 展开更多
关键词 异种移植 排斥反应 转基因 CD59 内皮细胞 离体心脏灌注 小鼠
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小鼠血管内皮细胞表达人DAF和CD59对其心脏在人血清灌注下做功的影响 预览
8
作者 张志宏 马腾骧 +5 位作者 王广有 李胜芝 张月 劳为德 李光三 《中华器官移植杂志》 CAS 北大核心 2007年第5期 303-307,共5页
目的探讨联合转人衰变加速因子(DAF)和CD59基因对小鼠心脏在人血清灌注下做功及组织结构的影响。方法采用受精卵显微注射技术,将人DAF和CD59基因注入昆明小鼠受精卵的原核中,选取注射后仍健康的受精卵植入假孕母鼠的输卵管中待分娩... 目的探讨联合转人衰变加速因子(DAF)和CD59基因对小鼠心脏在人血清灌注下做功及组织结构的影响。方法采用受精卵显微注射技术,将人DAF和CD59基因注入昆明小鼠受精卵的原核中,选取注射后仍健康的受精卵植入假孕母鼠的输卵管中待分娩。提取足月产小鼠(G0代)基因组DNA,以聚合酶链反应(PCR)及Southern印迹杂交确定外源基因整合情况,应用流式细胞术检测人DAF和CD59在转基因小鼠白细胞上的表达,免疫组织化学染色检测人DAF和CD59在转基因小鼠心脏、肝脏及肾脏组织中的表达。取出转基因成功小鼠的心脏,在体外以人血清进行灌注,测定其做功能力,HE染色及免疫组化染色观察灌注后心脏的组织学变化以及补体C3c的沉积情况。以单一转DAF基因的小鼠为对照。结果共获得G0代小鼠135只,经PCR及Southern印迹杂交分析,11只(8.1%,11/135)整合有人DAF和CD59外源基因,其中6只的白细胞膜表面人DAF和CD59表达阳性,强度分别为(86±6)%和(85±8)%,单转人DAF基因者(87±7)%,差异无统计学意义。人DAF及CD59仅表达于转基因小鼠心脏、肝脏及肾脏组织中的血管内皮细胞上。在人血清灌注后60min内,普通小鼠的心脏做功急剧下降,接近40min时心脏停止搏动;转DAF基因小鼠的心脏做功也下降,但仍维持在最大值的20%以上;转DAF和CD59双基因小鼠的心脏做功维持在最大值的40%以上。在人血清灌注的10~60min,转基因小鼠心脏做功能力明显强于普通小鼠心脏(P〈0.05);灌注20-60min时,转双基因小鼠的心脏做功能力明显强于转DAF基因小鼠心脏(P〈0.05)。普通小鼠心脏在人血清灌注后组织裂解较多见,肿胀严重,而转基因小鼠心脏组织的病理改变明显轻于普通小鼠,转双基因者的病理变化又明显轻于单一转DAF者,心肌血管中人C3c的沉积也明显少� 展开更多
关键词 转基因 小鼠 抗体 异嗜性 心室功能 内皮细胞 补体 血清灌注 做功
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RNA干扰抑制膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子基因表达对其增殖的影响 预览 被引量:6
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作者 张志宏 +8 位作者 吴长利 劳为德 王广有 李胜芝 张月 马志方 赵振理 秉乾 马小兵 《中华泌尿外科杂志》 CAS 北大核心 2006年第S1期,共4页
目的探讨体外培养膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子(NS)表达在肿瘤发生和肿瘤细胞自身维护中的作用,以及RNAi技术应用于肿瘤治疗的可行性。方法通过RT-PCR和North-ernblot方法检测体外培养的BIU-87细胞中NS的表达情况。采用分子克隆手段... 目的探讨体外培养膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子(NS)表达在肿瘤发生和肿瘤细胞自身维护中的作用,以及RNAi技术应用于肿瘤治疗的可行性。方法通过RT-PCR和North-ernblot方法检测体外培养的BIU-87细胞中NS的表达情况。采用分子克隆手段构建NS基因特异性siRNA表达载体,细胞转染获得稳定整合有pcDNA4/C-NS-Silencer载体和pcDNA4/C载体的细胞克隆,Northernblot方法检测阳性克隆NS基因表达丰度的变化,并观察其体外增殖能力的变化。结果RT-PCR和Northern印迹杂交结果均显示所检测的BIU-87细胞有较高水平的NS表达,NS在正常人膀胱组织中无表达。Northernblot检测证明获得稳定整合有pcDNA4/C-NS-Silencer载体的细胞克隆NS的表达丰度明显下调,且其体外增殖速率明显降低(P<0.05)。结论NS表达在BIU-87细胞体外增殖过程中发挥重要作用,通过RNAi技术实现NS基因沉默可能是一种较有前景的肿瘤治疗方法。 展开更多
关键词 核干细胞因子 增殖 RNA干扰 BIU-87细胞
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建立血管内皮细胞组织特异性表达人衰变加速因子的转基因小鼠 预览 被引量:3
10
作者 张志宏 马腾骧 +5 位作者 王广有 张月 李胜芝 李光三 劳为德 《中华器官移植杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期 356-359,共4页
目的为了研究异种移植,建立血管内皮细胞组织特异性表达人衰变加速因子(DAF)的转基因小鼠.方法采用受精卵显微注射技术,将含有人内皮细胞粘附分子-2(ICAM-2)基因启动子、人DAF cDNA(插有人DAF基因第一个内含子)、SV40splice/polyA的外... 目的为了研究异种移植,建立血管内皮细胞组织特异性表达人衰变加速因子(DAF)的转基因小鼠.方法采用受精卵显微注射技术,将含有人内皮细胞粘附分子-2(ICAM-2)基因启动子、人DAF cDNA(插有人DAF基因第一个内含子)、SV40splice/polyA的外源基因导入小鼠受精卵的原核中;选取注射后仍健康的受精卵移植入假孕母鼠的输卵管中待分娩.聚合酶链(PCR)技术及Southern印迹杂交法确定外源基因整合阳性转基因小鼠.RT-PCR方法和流式细胞术分别用于外源基因mRNA及蛋白质水平表达的检测.免疫组织化学方法观察人DAF在转基因小鼠心脏、肝脏、肾脏等器官的表达分布.采用Langendorff心脏灌流装置,用200 g/L的稀释人血清灌注转基因小鼠离体心脏,检测其抗超急性排斥反应能力.结果共产仔鼠133只,21只整合有外源基因,整合率16%(21/133).8只实现mRNA及蛋白质水平表达,蛋白质水平表达强度为人DAF基因在人白细胞表达强度的70%至95%,转基因效率6%(8/133).免疫组织化学法显示人DAF在转基因小鼠器官组织切片上有较强表达,且表达限于血管内皮细胞.与普通鼠对比,转基因小鼠离体心脏存活时间明显延长,且60 min 灌注期间内做功仍维持在最大值20%以上.结论成功地建立了血管内皮细胞组织特异性表达人DAF的转基因小鼠.这种小鼠有一定的抗超急性排斥反应能力. 展开更多
关键词 组织特异性表达 血管内皮细胞 人衰变加速因子 转基因小鼠 Southern印迹杂交法 LANGENDORFF 内皮细胞粘附分子 RT-PCR方法 免疫组织化学方法 抗超急性排斥 蛋白质水平 免疫组织化学法 显微注射技术 基因MRNA 心脏灌流装置
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异种移植血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠的建立 预览 被引量:2
11
作者 张志宏 马腾骧 +5 位作者 王广有 张月 李胜芝 李光三 劳为德 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2005年第12期 1578-1580,共3页
目的建立用于异种移植研究血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠.方法采用受精卵显微注射技术,将含有人ICAM-2启动子、人CD59基因第1个内含子、人CD59cDNA、BGH polyA终止信号的外源基因导入小鼠受精卵的原核中,选取注射后仍健... 目的建立用于异种移植研究血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠.方法采用受精卵显微注射技术,将含有人ICAM-2启动子、人CD59基因第1个内含子、人CD59cDNA、BGH polyA终止信号的外源基因导入小鼠受精卵的原核中,选取注射后仍健康的受精卵移植入假孕母鼠的输卵管中待分娩.聚合酶链反应(PCR)及Southern blot确定外源基因整合阳性转基因小鼠.流式细胞术用于外源基因蛋白质水平表达检测.免疫组织化学方法观察人CD59在转基因小鼠心脏、肝脏、肾脏等器官表达分布情况.结果产仔130只,9只外源基因整合阳性,整合率6%(9/130).6只获得蛋白质水平表达,蛋白质水平表达强度为人CD59在人白细胞表达强度的80%至95%,转基因效率5%(6/130).免疫组织化学检测显示人CD59在转基因小鼠心脏、肝脏、肾脏组织有较强表达,且表达限于血管内皮细胞.结论成功地建立了用于异种移植研究血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠. 展开更多
关键词 异种移植 排斥反应 补体调节蛋白 CD59 内皮细胞 转基因 小鼠
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Nucleostemin特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖能力的影响 被引量:12
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作者 蔡子微 +1 位作者 孙丽秋 劳为德 《中国病理生理杂志》 CAS 北大核心 2005年第7期 1331-1335,共5页
目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响.方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northern blot方法检测NS的表达.用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞,观察转染的HeLa细胞(简称NS-siR... 目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响.方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northern blot方法检测NS的表达.用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞,观察转染的HeLa细胞(简称NS-siRNA-HeLa细胞)体内外增殖的变化.结果:6种肿瘤细胞中NS明显高表达.体外培养的NS-siRNA-HeLa细胞中NS表达显著低于对照组,G0/G1期细胞百分率显著升高.体内致瘤实验显示,NS-siRNA-HeLa细胞在裸鼠体内增殖显著低于对照组.结论:NS在肿瘤细胞中高表达具有普遍性.NS特异性RNA干扰使HeLa细胞进入S期受阻,并可明显降低HeLa细胞体内外的增殖能力. 展开更多
关键词 NUCLEOSTEMIN 干细胞 HELA细胞 细胞周期
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正常饮食中短期补充钙剂对双侧卵巢切除大鼠骨质量及骨代谢的影响 预览
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作者 陈星飙 +3 位作者 亚军 王芊 薛延 劳为德 《中国新药杂志》 CAS 北大核心 2004年第S1期1295-1298,共4页
目的:研究正常饮食中短期内补充钙剂对卵巢切除大鼠骨质量和骨代谢的影响。方法:将25只SD大鼠分为3组,A组:假手术组(sham组),B组:双侧卵巢切除组(OVX组),C组:双侧卵巢切除+补钙组(OVX+补钙组)。钙剂为L-苏糖酸钙,补钙剂量为45mg.kg-1.d-... 目的:研究正常饮食中短期内补充钙剂对卵巢切除大鼠骨质量和骨代谢的影响。方法:将25只SD大鼠分为3组,A组:假手术组(sham组),B组:双侧卵巢切除组(OVX组),C组:双侧卵巢切除+补钙组(OVX+补钙组)。钙剂为L-苏糖酸钙,补钙剂量为45mg.kg-1.d-1。5周后测各组大鼠骨密度、骨生物力学参数、矿盐含量及血清生化指标等。结果:①B组骨密度显著低于A组(P【0.05),C组与B组骨密度无显著性差别。②A和C组矿盐含量均较B组高(P【0.05),C组灰重较B组高(P【0.05)。③B组血清P,Ca和ALP显著低于A组(P【0.01,P【0.01和P【0.05);C组血清P,Ca和ALP显著高于B组(P【0.05,P【0.01和P【0.01)。结论:短期补钙对骨质疏松大鼠骨质量有一定程度的改善,但效果不十分明显;补钙对骨质疏松大鼠骨代谢有明显的影响,可明显地增强成骨活动。 展开更多
关键词 短期补钙 骨密度 骨生物力学参数 骨代谢
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Nucleostemin特异性RNA干扰对肿瘤细胞增殖能力的影响 预览 被引量:2
14
作者 蔡子微 +1 位作者 孙丽秋 劳为德 《牡丹江医学院学报》 2004年第3期 1-6,共6页
目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对Hela细胞体内外增殖的影响.方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northern blot方法检测NS的表达.用NS特异性siRNA表达载体转染Hela细胞,观察转染的Hela细胞(简称NS-SiR... 目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对Hela细胞体内外增殖的影响.方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northern blot方法检测NS的表达.用NS特异性siRNA表达载体转染Hela细胞,观察转染的Hela细胞(简称NS-SiRNA-Hela细胞)体内外增殖的变化.结果:6种肿瘤细胞中NS显高表达.体外培养的NS-siRNA-Hela细胞中NS表达显著降低,G0/G1期细胞百分率显著升高.体内致瘤实验显示,NS-siRNA-Hela细胞在裸鼠体内增殖显著降低.结论:NS在肿瘤细胞中高表达具有普遍性.NS特异性RNA干扰使Hela细胞进入S期受阻,并可明显降低Hela细胞体内外的增殖能力. 展开更多
关键词 NUCLEOSTEMIN 特异性RNA干扰 肿瘤细胞 细胞增殖 检测 HELA细胞
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Effect of human osteopontin on proliferation, transmigration and expression of MMP-2 and MMP-9 in osteosarcoma cells 预览 被引量:1
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作者 胡国法 +6 位作者 亚军 高虹 张传生 魏影允 薛延 劳为德 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS 2004年第2期 235-240,共6页
Background To explore the effect of human osteopontin (hOPN) on the proliferation, transmigration and expression of matrix metallproteinase-2 (MMP-2) and matrix metallproteinase-9 (MMP-9) in osteosarcoma (OS) cells in... Background To explore the effect of human osteopontin (hOPN) on the proliferation, transmigration and expression of matrix metallproteinase-2 (MMP-2) and matrix metallproteinase-9 (MMP-9) in osteosarcoma (OS) cells in vitro. Methods The prokaryotic-expression vector of hOPN was produced, hOPN was then subcloned into E. coli BL21 (DE3) cells and purified with ProBondTM Columns. The proliferation, cell cycle and the expression of cyclin A in OS cells were investigated by using MTT assay, flow cytometry and Western blot respectively. The transmigration of OS cells was checked by using transwell cell culture chamber. The micro-pore-filter-membrane system was used to study the chemiotaxis of hOPN to OS cells. The levels of total protein were examined according to Coomassie Brilliant Blue manuals. The expression of MMP-2 and MMP-9 were evaluated by detecting the volume of degradation of gelatin on SDS-PAGE gel.Results The prokaryotic-expression vector of hOPN and purified hOPN protein were achieved hOPN promoted OS cells proliferation in a dose-dependent manner, and stimulated cyclin A expression in OS cells to accelerate cell division cycle, hOPN facilitated the trans-membrane migration of OS cells. hOPN also enhanced the secretion of MMP-2 and MMP-9 in OS cells. Conclusion hOPN could stimulate cyclin A expression in OS cells, hOPN has chemiotaxis to OS cells and increases their transmigration, hOPN enhances the secretion of MMP-2 and MMP-9 in OS cells. 展开更多
关键词 骨肉瘤 肿瘤细胞 细胞增殖 细胞迁移 基质金属蛋白酶 骨桥蛋白 作用机制
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血管内皮细胞组织特异性表达人CD59基因转基因小鼠传代及表达检测 预览
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作者 张志宏 马腾骧 +5 位作者 王广有 李胜芝 张月 李光三 劳为德 《天津医科大学学报》 2004年第1期 11-13,42,共4页
目的:探讨外源基因在转基因动物中的遗传规律.方法:将血管内皮细胞组织特异性表达人CD59基因转基因昆明种雄性小鼠,与普通昆明种雌性小鼠交配.Southern-blot杂交确定子一代外源基因整合阳性转基因小鼠.RT-PCR方法用于子一代转基因小鼠人... 目的:探讨外源基因在转基因动物中的遗传规律.方法:将血管内皮细胞组织特异性表达人CD59基因转基因昆明种雄性小鼠,与普通昆明种雌性小鼠交配.Southern-blot杂交确定子一代外源基因整合阳性转基因小鼠.RT-PCR方法用于子一代转基因小鼠人CD59转录水平筛选.以流式细胞术检测人CD59基因在子一代转基因小鼠蛋白质水平表达.结果:产子14只.7只外源基因整合阳性,其中雄性4只,雌性3只.转录水平检测发现3 只出现所需的条带.继而对上述3只转录水平阳性的F1代小鼠白细胞行流式细胞术检测,白细胞膜表面人CD59表达均阳性.结论:转基因动物的遗传规律复杂,基因沉默可能是导致子代转基因动物不表达的重要因素. 展开更多
关键词 转基因动物 遗传 表达 整合 调控
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人α-乳白蛋白在转基因小鼠乳汁中的动态表达图貌 被引量:5
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作者 魏影允 +3 位作者 胡国法 高虹 劳为德 《中国科学:C辑》 北大核心 2003年第4期317-322,共6页
利用人α-乳白蛋白基因(hα-Lac)探针从8×105个噬斑中筛选出两个阳性克隆,以此构建了包含有7.3kb的hα-lac的5′调控序列、2.0kb的编码区和227 bp的牛生长激素3′UTR的乳腺表达框架.通过显微注射方法获得5只hα-Lac转基因整合雌性... 利用人α-乳白蛋白基因(hα-Lac)探针从8×105个噬斑中筛选出两个阳性克隆,以此构建了包含有7.3kb的hα-lac的5′调控序列、2.0kb的编码区和227 bp的牛生长激素3′UTR的乳腺表达框架.通过显微注射方法获得5只hα-Lac转基因整合雌性小鼠.对其中1只转基因表达量较高(达到0.3 mg/mL)的小鼠的一个泌乳期中人乳白蛋白的表达过程分析表明:转基因并不遵从小鼠内源的α-Lac的表达图貌,而是以转基因特异的方式表达,表现为在分娩后的前3天转基因的表达低,自第4天开始逐渐增高,到第13~14天达到峰值后渐趋稳定,并持续到泌乳期结束.在第2个泌乳期中,转基因的表达量与首次泌乳期的水平相当.此外,转基因表达小鼠的泌乳量较正常小鼠和非表达整合小鼠有一定的增加,提示泌乳过程中较高浓度的α-Lac可能引发了产乳量的增加. 展开更多
关键词 人α-乳白蛋白 转基因小鼠 乳汁 基因表达 乳腺表达 产乳量
人类骨桥蛋白(hOPN)在细胞增殖中的功能研究 预览 被引量:23
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作者 胡国法 +3 位作者 魏影允 薛延 劳为德 《高技术通讯》 CAS 2003年第2期 25-28,40,共5页
为了研究人类骨桥蛋白(hOPN)与293细胞增殖、细胞周期及与细胞周期有关基因表达的关系,并对其机制进行探讨,成功地构建了hOPN真核表达载体并获得了稳定表达hOPN的细胞系,也同时获得了稳定表达EGFP的细胞系.hOPN对293细胞具有促增殖效应,... 为了研究人类骨桥蛋白(hOPN)与293细胞增殖、细胞周期及与细胞周期有关基因表达的关系,并对其机制进行探讨,成功地构建了hOPN真核表达载体并获得了稳定表达hOPN的细胞系,也同时获得了稳定表达EGFP的细胞系.hOPN对293细胞具有促增殖效应,hOPN蛋白激活了293细胞细胞周期蛋白A的表达.实验结果表明:hOPN通过一定的信号通路刺激了细胞周期蛋白A的表达,加快了细胞进入并通过S期,从而促进了细胞的增殖. 展开更多
关键词 细胞增殖 功能 肿瘤 基因表达 骨桥蛋白 293细胞 流式细胞术 细胞周期蛋白A 细胞周期 发生学
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淫羊藿总黄酮对体外培养的人成骨样细胞增殖和骨形成功能的影响 预览 被引量:11
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作者 贾桂英 +3 位作者 薛延 王芊 亚军 劳为德 《中国新药杂志》 CAS 北大核心 2003年第6期 432-435,共4页
目的:研究淫羊藿总黄酮对人成骨样细胞增殖和骨形成功能的影响.方法:以人成骨样细胞OS-732为实验材料,进行细胞生长曲线的绘制、MTT测定、形态学观察、碱性磷酸酶(ALP)测定和染色等.结果:d3时,与对照组相比,加药组的细胞数目明显增加;d... 目的:研究淫羊藿总黄酮对人成骨样细胞增殖和骨形成功能的影响.方法:以人成骨样细胞OS-732为实验材料,进行细胞生长曲线的绘制、MTT测定、形态学观察、碱性磷酸酶(ALP)测定和染色等.结果:d3时,与对照组相比,加药组的细胞数目明显增加;d6时加药组的细胞数目仍多于对照组.MTT测定得到了类似的结果.加药后d4,加药组与空白对照组相比细胞数目多、形态大而规则,染色质深而致密,核质比小.ALP染色结果显示,加药组细胞ALP颗粒染色明显深于对照组,并且ALP颗粒在胞浆中的分布均匀.ALP的定量测定表明加药组ALP水平明显高于对照组.结论:淫羊藿总黄酮对体外培养的人成骨样细胞OS-732具有促增殖和分化作用,并表现出浓度依赖性. 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 成骨样细胞 增殖 分化
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雌激素缺乏致细胞因子水平变化对骨代谢的影响 预览 被引量:4
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作者 贾桂英 亚军 《中国临床康复》 2003年第24期 3362-3363,共2页
众所周知,雌激素有助于维持骨量,由于绝经所导致的雌激素水平的降低引起细胞因子水平的变化,及这种变化对骨代谢的影响正成为一个很热门的研究课题.雌激素缺乏对白细胞介素- 1(interleukin- 1,IL- 1)、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis ... 众所周知,雌激素有助于维持骨量,由于绝经所导致的雌激素水平的降低引起细胞因子水平的变化,及这种变化对骨代谢的影响正成为一个很热门的研究课题.雌激素缺乏对白细胞介素- 1(interleukin- 1,IL- 1)、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α ,TNF-α )和白细胞介素- 6(interleukin- 6,IL- 6)水平、 RANKL和骨保护素 (osteoprotegrin,OPG)、转化生长因子 (transforming growth factor-β ,TGF-β )等细胞因子产生影响,这些细胞因子变化对破骨细胞功能、骨吸收中所发挥的作用. 展开更多
关键词 雌激素缺乏 细胞因子 骨代谢 影响 代谢性骨疾病
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