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抗菌肽Cec4的结构改造及抗菌活性研究
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作者 彭建 赵行行 +3 位作者 王涛 尚小丽 国果 《生物技术》 CAS 2019年第4期330-335,共6页
[目的]对抗菌肽Cec4进行结构改造,并评估优化小肽的稳定性及溶血性。[方法]采用序列截短、氨基酸替换的方式来改造Cec4。采用微量稀释法,检测改造后的Cec4对各类鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)。绘制时间-杀菌曲线,并... [目的]对抗菌肽Cec4进行结构改造,并评估优化小肽的稳定性及溶血性。[方法]采用序列截短、氨基酸替换的方式来改造Cec4。采用微量稀释法,检测改造后的Cec4对各类鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)。绘制时间-杀菌曲线,并评估不同因素对抗菌肽抑菌活性的影响,最后通过溶血实验检测其安全性。[结果]①截短后的Cec4失去抑菌效果。②Cec4氨基酸替换后的Cec4-1、Cec4-2未能提升抑菌能力。Cec4-4的MIC值为Cec4的50%。③在24h,时间-杀菌曲线显示,Cec4-4的抑菌活性较Cec4高30%。④血清会影响抗菌肽活性,并且高浓度胰蛋白酶(1. 0 mg/m L)会抑制Cec4-4抗菌活性。⑤溶血实验表明Cec4-4在1 mg/m L浓度下无溶血反应。[结论]截短使Cec4失去抑菌活性,氨基酸替换后的Cec4-4对各测试菌的抑菌活性较母肽提升了1倍,且抗菌肽在1mg/m L浓度下对人体无溶血反应。 展开更多
关键词 抗菌肽 结构改造 MIC 鲍曼不动杆菌 体外溶血
抗菌肽Cecropin4与抗生素联合的体外抗菌效果 预览
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作者 彭建 +3 位作者 刘巍巍 赵海 朱贵明 曾柱 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第10期1151-1155,共5页
目的:探究抗菌肽Cecropin4(Cec4)分别与3种抗生素联合使用对鲍曼不动杆菌(AB)的体外抗菌效果。方法:采用微量肉汤稀释法测定抗菌肽Cec4、注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠(SCF)、注射用亚胺培南西司他丁钠(IMP)及注射用硫酸多黏菌素B(PB)单用时... 目的:探究抗菌肽Cecropin4(Cec4)分别与3种抗生素联合使用对鲍曼不动杆菌(AB)的体外抗菌效果。方法:采用微量肉汤稀释法测定抗菌肽Cec4、注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠(SCF)、注射用亚胺培南西司他丁钠(IMP)及注射用硫酸多黏菌素B(PB)单用时对AB的最小抑菌浓度(MIC),运用棋盘法检测抗菌肽Cec4分别与这3种抗生素联用时对AB的抑菌效果,用部分抑菌浓度指数(FICindex)反映抗菌肽Cec4分别与这3种抗生素联用对AB的用药效果。结果:抗菌肽Cec4、SCF、IMP及PB对标准、多重耐药和泛耐药AB时菌株的MIC分别为4、16~64、16~64及0.625mg/L;抗菌肽Cec4与PB联合作用于标准AB时、FICindex为0.50,抗菌肽Cec4分别与3种抗生素联合作用于多重耐药和泛耐药AB时,FICindex范围均在0.5~1.0。结论:抗菌肽Cec4与PB联合使用对标准AB表现为协同作用,抗菌肽Cec4分别与3种抗生素联合对多重耐药和泛耐药AB表现为相加作用。 展开更多
关键词 抗菌肽Cec4 鲍曼不动杆菌 抑菌活性 联合用药 耐药菌 多黏菌素B
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家蝇天蚕素Cec4的原核表达与纯化
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作者 彭建 刘巍巍 +3 位作者 杨燕琴 尚小丽 建伟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期182-185,共4页
目的构建家蝇天蚕素(Cecropin)Cec4原核表达质粒,表达及纯化Cec4蛋白。方法从家蝇cDNA文库中筛选家蝇天蚕素基因Cec4,设计并合成特异性引物,PCR扩增Cec4基因,连接克隆载体后转入DH5α感受态细胞,通过重组子鉴定及测序完成目的基因的克... 目的构建家蝇天蚕素(Cecropin)Cec4原核表达质粒,表达及纯化Cec4蛋白。方法从家蝇cDNA文库中筛选家蝇天蚕素基因Cec4,设计并合成特异性引物,PCR扩增Cec4基因,连接克隆载体后转入DH5α感受态细胞,通过重组子鉴定及测序完成目的基因的克隆。用限制性内切酶BamHI和HindⅢ双酶切目的基因和质粒,构建GST表达载体pGEX 4T-1-Cec4,转化到大肠埃希菌BL-21中,利用IPTG诱导表达重组Cec4蛋白,经亲和层析纯化后进行SDS-PAGE电泳分析。结果 PCR扩增获得的Cec4基因全长为192 bp,连接到表达载体pGEX 4T-1获得重组质粒pGEX 4T-1-Cec4,转化大肠埃希菌BL-21后经30℃、0.6 mmol/L的IPTG诱导18 h,表达相对分子质量约为26×10~3上清表达的融合蛋白,亲和层析纯化后的蛋白浓度为0.117 mg/ml。结论成功构建重组质粒pGEX 4T-1-Cec4并表达和纯化获得Cec4蛋白,为其进一步研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 家蝇 CEC4 克隆 原核表达
从《巴龙·伽南》看卡德纳斯改革的影响
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作者 《短篇小说:原创版》 2016年第6Z期89-92,
<正>一、引言墨西哥作为美洲文明古国之一,曾经孕育了奥尔梅克、玛雅、托尔特克、阿兹特克等辉煌的印第安文明。哥伦布发现新大陆之后,西班牙人把欧洲文化移植到了墨西哥,两种文明冲突碰撞之后诞生了新的墨西哥文化。墨西哥独立之... <正>一、引言墨西哥作为美洲文明古国之一,曾经孕育了奥尔梅克、玛雅、托尔特克、阿兹特克等辉煌的印第安文明。哥伦布发现新大陆之后,西班牙人把欧洲文化移植到了墨西哥,两种文明冲突碰撞之后诞生了新的墨西哥文化。墨西哥独立之后,政权主要掌握在大庄园主、天主教会和军队手中,政局动荡,经济困难,尤其是在迪亚斯独裁统治时期,民不聊生,土地高度集中,民族资本主义经济也受到极大的压制。1910—1917年墨西哥大革命推翻了迪亚斯三十多年的独裁统 展开更多
《永恒的女性》中女性的探寻自我之旅 预览
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作者 《天津外国语大学学报》 2014年第5期68-72,共5页
墨西哥著名女作家、诗人罗萨里奥·卡斯特亚诺斯最后一部戏剧作品《永巨的女性》通过女主人公卢皮塔在美发厅神奇的经历展示了墨西哥女性在现代社会中的处境。剧中的女性人物或是按照男性为本体的价值体系为女性制定的标准来要求自... 墨西哥著名女作家、诗人罗萨里奥·卡斯特亚诺斯最后一部戏剧作品《永巨的女性》通过女主人公卢皮塔在美发厅神奇的经历展示了墨西哥女性在现代社会中的处境。剧中的女性人物或是按照男性为本体的价值体系为女性制定的标准来要求自己,成为男性所需要的女人;或是勇于打破大众文化对于女性定型化的思维,选择成为自己,决定自己的存在,实现自我价值。这部三幕喜剧突破了亚里士多德式戏剧准则,多侧面地展现了现代墨西哥不同职业女性的生活,是一部女性主义的佳作。 展开更多
关键词 罗萨里奥·卡斯特亚诺斯 自我实现 女性主义
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女性的悲剧——论《巴龙·伽南》中的女性观点 预览
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作者 《天津外国语学院学报》 2005年第2期 66-70,共5页
试图分析墨西哥女作家罗萨里奥·卡斯特亚诺斯作为女权/女性主义者在她的土著主义小说中表现出的女性观点:对男权主义社会中女性悲剧命运的揭露和对男性中心主义家庭的否定.同时,她还关注到处于性别和种族双重压迫下的印第安妇女的... 试图分析墨西哥女作家罗萨里奥·卡斯特亚诺斯作为女权/女性主义者在她的土著主义小说中表现出的女性观点:对男权主义社会中女性悲剧命运的揭露和对男性中心主义家庭的否定.同时,她还关注到处于性别和种族双重压迫下的印第安妇女的生存状态,这也是对男性作家的土著主义小说视角上一个重要的补充. 展开更多
关键词 女权/女性主义 男性中心主义 土著主义
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