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健康猪体内塞尼卡病毒的分离和鉴定 预览
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作者 张志 张丽丽 +7 位作者 张美晶 刘爽 张峰 董雅琴 张慧 崔进 李晓成 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期418-421,共4页
塞尼卡病毒(SVA)属于小核糖RNA病毒科塞尼卡病毒属,可以引起猪的水泡样病变、跛行和新生仔猪突然死亡等。为了解SVA的特性,本研究将从健康猪体内鉴定的SVA阳性样品接种BHK-21细胞分离SVA,采用PCR扩增其VP1基因,并分析其遗传变异特点。... 塞尼卡病毒(SVA)属于小核糖RNA病毒科塞尼卡病毒属,可以引起猪的水泡样病变、跛行和新生仔猪突然死亡等。为了解SVA的特性,本研究将从健康猪体内鉴定的SVA阳性样品接种BHK-21细胞分离SVA,采用PCR扩增其VP1基因,并分析其遗传变异特点。结果显示,10份SVA阳性样品中有2份(GXT91和GXT94)能够在BHK-21细胞增殖并产生明显的细胞病变,可达10^7.6TCID50/mL,其VP1基因与SVA参考株NC_011349的核酸同源性为90.2%~90.6%,推导氨基酸同源性为96.7%~97.1%,进化树显示新分离的GXT91和GXT94病毒株属于流行分支II。本研究为SVA的疫苗研制奠定了基础。 展开更多
关键词 塞尼卡病毒 分离 鉴定
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山东省一例山羊伪狂犬病的病原分离鉴定 预览
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作者 郑勤琴 +2 位作者 刘爽 段纲 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2019年第4期79-85,共7页
2017年4月,山东省某羊场饲养的山羊发生疑似伪狂犬病疫情。为确诊引发疫情的病原,采集死亡山羊组织样品,匀浆处理后接种家兔,并进行病原分离、PCR鉴定、效价测定、电镜观察及主要毒力基因测序分析。结果显示:家兔接种病料上清液后出现... 2017年4月,山东省某羊场饲养的山羊发生疑似伪狂犬病疫情。为确诊引发疫情的病原,采集死亡山羊组织样品,匀浆处理后接种家兔,并进行病原分离、PCR鉴定、效价测定、电镜观察及主要毒力基因测序分析。结果显示:家兔接种病料上清液后出现奇痒、麻痹,最后死亡;Marc145细胞接种病例样品后,产生变亮、变大、破裂,呈"包涵体"样等PRV特征性细胞病变,细胞分离物伪狂犬病病毒(PRV)g E PCR检测结果为阳性,病毒效价可达10-7.50 TCID50/0.1 m L,电镜观察可见病毒粒子呈圆形,有囊膜,直径约150 nm,将其命名为SDPD-17株。测序发现该毒株g E糖蛋白48、497位各插入了1个天冬氨酸,有12个氨基酸位点发生点突变;g C蛋白氨基酸序列64~70位出现了7个氨基酸(AASTPAA)插入;TK基因无碱基插入或缺失。分离鉴定结果证实,该病例由PRV野毒感染所致。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 山羊 细胞病变 PCR GC基因 GE基因 进化树
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犬的病料中检测到猪圆环病毒3型
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作者 张丽丽 张志 +4 位作者 刘爽 单虎 李晓成 王树双 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期631-634,654共5页
为进一步弄清我国犬是否感染猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3),本试验对山东省青岛市某宠物医院采集发病犬的48份样品进行PCV3荧光PCR检测,发现7份病料呈现明显阳性,对这7株阳性样品继续用普通PCR扩增,有3份可以扩增出228 bp... 为进一步弄清我国犬是否感染猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3),本试验对山东省青岛市某宠物医院采集发病犬的48份样品进行PCV3荧光PCR检测,发现7份病料呈现明显阳性,对这7株阳性样品继续用普通PCR扩增,有3份可以扩增出228 bp的特异性条带。这些条带测序后与圆环病毒的其他参考序列进行同源性分析,结果显示这3份样品的病毒序列与其他PCV3参考序列处于同一个进化分支,与PCV3的同源性为93.3%~99.5%,表明我国犬确实存在PCV3感染。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 荧光PCR
2016—2018年我国部分猪群塞尼卡病毒回顾性监测 预览
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作者 张志 张丽丽 +6 位作者 张峰 刘爽 董雅琴 张慧 崔进 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2019年第1期1-6,共6页
塞尼卡病毒(Senecavirus A,SVA)是最近新出现的可引起猪水泡样病变的单股小RNA病毒。为了解SVA的流行状况,采集对2016—2018年从我国辽宁等省份猪群的164份病料和2018年从我国福建等7省份35个屠宰场的458份组织混合样品和95份血清样品,... 塞尼卡病毒(Senecavirus A,SVA)是最近新出现的可引起猪水泡样病变的单股小RNA病毒。为了解SVA的流行状况,采集对2016—2018年从我国辽宁等省份猪群的164份病料和2018年从我国福建等7省份35个屠宰场的458份组织混合样品和95份血清样品,用荧光实时定量RT-PCR方法进行SVA检测和分析。结果显示:在2016年的48份样品中,从3个省份检测出7份阳性样品,阳性率为14.6%。2017年的32份病料中,从5个省份检测出7份阳性样品,占比为21.9%;2018年的84份病料中,从3个省份检测出19份阳性样品,占比为22.6%。屠宰场组织样品中,从6个省份检出55份SVA阳性样品,阳性率为12.0%;血清样品中,从1个省份检出7份阳性样品,阳性率为7.4%。结果表明,我国猪群SVA感染年份至少可追溯到2016年;SVA在我国流行面相对较广,且猪群中存在隐性带毒,因此须重视猪群的SVA监视和监测。 展开更多
关键词 猪塞尼卡病毒 监测 荧光实时定量RT-PCR 流行病学
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2015年、2016年我国部分地区猪群猪繁殖与呼吸综合征的分子流行病学研究
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作者 赵蕾 +3 位作者 张锋 董雅琴 杨增岐 李晓成 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第10期96-100,244共6页
为了解我国部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况和流行趋势,试验利用RT-PCR方法对2015年、2016年全国超过20个省份的3 078份疑似PRRS病料进行检测,并扩增部分阳性病料的ORF5基因进行测序和遗传变异分析。结... 为了解我国部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况和流行趋势,试验利用RT-PCR方法对2015年、2016年全国超过20个省份的3 078份疑似PRRS病料进行检测,并扩增部分阳性病料的ORF5基因进行测序和遗传变异分析。结果表明:PRRSV阳性样本共889份,阳性率为28.88%。扩增得到177个ORF5的基因序列,通过序列分析发现,我国流行的PRRSV主要为美洲型,其中90份与高致病性PRRSV(HP-PRRSV)高度同源,53份与经典PRRSV高度同源,34份与NADC30-like PRRSV高度同源,其中14份流行毒株的GP5蛋白糖基化位点N34发生缺失。说明监测地区主要流行HP-PRRSV,同时NADC30-like PRRSV已经形成一个相对独立的分支在我国流行,提示有必要加强PRRSV变异毒株的流行和变异的监测,同时对其致病性等生物学特性进行深入研究。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) NADC30-like株 流行病学 RT-PCR ORF5基因 遗传演化分析
华东部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查 预览
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作者 范玉凤 邹敏 +4 位作者 张玉玉 杨旭兵 宋健兰 家强 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第7期16-19,共4页
为了解华东部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株变异情况,本研究以RT-PCR技术对山东、福建发病猪场的41份组织样品进行PRRSV检测和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)相关毒株(HP-PRRSVLike)检测,对阳性样品进... 为了解华东部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株变异情况,本研究以RT-PCR技术对山东、福建发病猪场的41份组织样品进行PRRSV检测和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)相关毒株(HP-PRRSVLike)检测,对阳性样品进行PRRSV分离、ORF5基因测序及变异分析。结果显示,福建、山东样品的阳性率分别为56%、74%;共分离到16个美洲型毒株(福建10株、山东6株),分属于Lineage 8、Lineage 5、Lineage 3、Lineage 1四个谱系,其中以Lineage 8为主。这表明PRRSV流行毒株多样化,跨谱系毒株重组值得警惕。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5 序列分析
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某发病猪场链球菌的分离鉴定及药敏试验 预览 被引量:1
7
作者 张慧 杨旭兵 +3 位作者 董雅琴 刘爽 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2018年第1期78-80,99共4页
猪链球菌是一种能感染人和动物的常见病原菌。本实验从山东省某猪场病死猪中分离出两株细菌;通过培养特性观察,革兰染色镜检,特异性基因扩增等一系列分析,确定其为链球菌;进一步进行PCR分型检测,确定其中一株属马链球菌兽疫亚种,另一株... 猪链球菌是一种能感染人和动物的常见病原菌。本实验从山东省某猪场病死猪中分离出两株细菌;通过培养特性观察,革兰染色镜检,特异性基因扩增等一系列分析,确定其为链球菌;进一步进行PCR分型检测,确定其中一株属马链球菌兽疫亚种,另一株为猪链球菌7型。通过药敏试验发现,这两株菌对约95%的常用药物表现出耐药性,仅对链霉素、氯霉素、万古霉素和呋喃妥因较为敏感。 展开更多
关键词 猪链球菌 分离鉴定 药敏试验
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猪圆环病毒3型半巢式PCR方法的建立和应用 预览 被引量:1
8
作者 张志 郝占武 +3 位作者 杨旭兵 张美晶 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2018年第1期81-84,共4页
为建立快速检测猪圆环病毒3型(PCV-3)的方法,以GenBank上登陆的我国PCV-3全基因组为参考毒株,设计3条引物,建立了PCV-3半巢式PCR诊断方法。本方法可以扩增出大小为249 bp的特异性条带,与预期大小一致,而猪圆环病毒1型和2型、猪伪狂犬... 为建立快速检测猪圆环病毒3型(PCV-3)的方法,以GenBank上登陆的我国PCV-3全基因组为参考毒株,设计3条引物,建立了PCV-3半巢式PCR诊断方法。本方法可以扩增出大小为249 bp的特异性条带,与预期大小一致,而猪圆环病毒1型和2型、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒等对照样品均未扩增出特异性条带。将PCV-3的阳性DNA稀释后作为模板,发现半巢式PCR的检测极限可以达到5×10-3μg/mL。对临床80份样品进行检测,发现半巢式PCR的阳性检出率可以达到27.5%(22/80),而常规PCR的检出率仅为6.25%(5/80)。检测结果表明,本文建立的半巢式PCR方法较为准确、特异和敏感,适用于PCV-3的快速检测和流行病学调查。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 半巢式-聚合酶链式反应 快速检测 流行病学调查
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我国部分猪场猪圆环病毒3型流行病学调查 预览
9
作者 张志 郝占武 +5 位作者 张美晶 张丽丽 刘爽 李晓成 王树双 《中国动物检疫》 CAS 2018年第7期1-5,共5页
猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV-3)是近2年从猪体内新检测到的病原。为了解我国猪群的PCV-3感染现状、临床症状和病变特征,在分析流行病学资料基础上,运用荧光PCR技术,对部分猪场采集的80份病料进行PCV-3检测。结果表明,我... 猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV-3)是近2年从猪体内新检测到的病原。为了解我国猪群的PCV-3感染现状、临床症状和病变特征,在分析流行病学资料基础上,运用荧光PCR技术,对部分猪场采集的80份病料进行PCV-3检测。结果表明,我国至少已有山东、河南、福建、广西等4省份的猪群存在PCV-3感染;发病样品中的PCV-3个体感染率为27.50%,表明我国部分猪群中PCV-3感染较普遍;腹泻样品的感染率最高,为34.09%,而呼吸道症状、流产和高热样品的感染率分别为27.27%、22.22%和14.29%,提示腹泻可能与PCV-3感染的相关性最强,而腹泻样品可能是检测PCV-3的较佳采样器官;不同生长阶段仔猪的感染率不同,保育仔猪感染率最高(40.00%),其次是流产胎儿(20.00%),哺乳仔猪最低(12.50%)。这些结果为PCV-3的采样、监测和防控提供了依据。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 流行病学 监测 实时荧光PCR 感染率
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猪圆环病毒3型实时荧光定量PCR方法的建立和应用
10
作者 张志 郝占武 +4 位作者 张美晶 刘爽 李晓成 王树双 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期686-691,共6页
猪圆环病毒3型(PCV3)是近两年报道的一种新病毒,为实现快速检测PCV3的目的,笔者以我国PCV3全基因组为模板设计合成了1对引物和1条TaqMan探针,建立了检测PCV3的实时荧光定量PCR方法。经过标准曲线分析、敏感性、特异性和重复性等一系... 猪圆环病毒3型(PCV3)是近两年报道的一种新病毒,为实现快速检测PCV3的目的,笔者以我国PCV3全基因组为模板设计合成了1对引物和1条TaqMan探针,建立了检测PCV3的实时荧光定量PCR方法。经过标准曲线分析、敏感性、特异性和重复性等一系列试验,表明该方法具有特异性强、敏感性高以及重复性好的特点。试验结果表明,阳性PCV3标准品DNA稀释10-8后(浓度为50 copies/L)仍然可以被检出,不同浓度的组间和组内重复性试验结果显示变异系数均小于3%,最后用36份临床样品进行了应用性评价,结果从中检测出9份阳性样品,表明所建立的方法是一种高效的可用于PCV3的分子诊断技术。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 实时荧光定量聚合酶链式反应 TAQMAN探针
鸭坦布苏病毒RT-PCR检测方法的建立及应用 预览
11
作者 邹敏 张青 +4 位作者 王红 刘东 刘新文 范根成 《中国兽药杂志》 2018年第11期14-18,共5页
为建立一种能快速检测鸭坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)的分子生物学方法,从GenBank中下载了51个具有代表性的黄病毒全基因组序列及白洋淀病毒等5个禽源黄病毒株E基因序列,进行了黄病毒E基因序列分析,应用Primer 5.0软件设计了一对引... 为建立一种能快速检测鸭坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)的分子生物学方法,从GenBank中下载了51个具有代表性的黄病毒全基因组序列及白洋淀病毒等5个禽源黄病毒株E基因序列,进行了黄病毒E基因序列分析,应用Primer 5.0软件设计了一对引物,扩增目的片段为549 bp,进行了TMUV RT-PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了TMUV RT-PCR检测方法应用该方法对收集的14份临床疑似蛋鸭鸭坦布苏病毒病发病样品进行了检测,共检出6份TMUV核酸阳性样品,检出率达42.86%。结果表明,该方法可用于水禽坦布苏病毒病的临床快速诊断、检测及流行病学调查。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 E基因 RT-PCR
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犬源伪狂犬病病毒的分离鉴定及其主要毒力基因分子特征分析 预览 被引量:1
12
作者 邹敏 +2 位作者 董雅琴 刘爽 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2017年第9期96-101,共6页
对发生临床疑似伪狂犬病毒(PRV)感染的牧羊犬组织样品,进行研磨、细胞接种、传代培养、细胞病变效应(CPE)观察、PCR检测、效价测定、电镜观察、IFA检测、家兔接种以及基因测序分析等,结果成功分离到1株犬源PRV毒株,命名为XJ-14... 对发生临床疑似伪狂犬病毒(PRV)感染的牧羊犬组织样品,进行研磨、细胞接种、传代培养、细胞病变效应(CPE)观察、PCR检测、效价测定、电镜观察、IFA检测、家兔接种以及基因测序分析等,结果成功分离到1株犬源PRV毒株,命名为XJ-14株。该毒株可致PK-15细胞产生变圆、破碎、逐渐呈拉网式漂浮等特征性细胞病变;PRVgE-PCR检测阳性,病毒效价达10-7.45/0.1mL;病毒粒子在电镜下呈圆形,有囊膜,直径约150nm;PRV荧光抗体检测阳性,接种家兔后可致家兔奇痒、麻痹死亡。对该毒株gC、gE、TK基因进行全基因测序,发现gE糖蛋白的48、497位各插入了1个D,另有12个氨基酸位点发生点突变,其gC蛋白氨基酸序列64~70位出现了7个氨基酸(AASTPAA)插入。结果表明,此牧羊犬病例是由PRV感染所致。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 XJ-14株 分离鉴定 毒力基因
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三种伪狂犬病病毒gE抗体ELISA检测试剂盒的比较 预览 被引量:1
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作者 董雅琴 刘爽 +3 位作者 郑辉 张志 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2017年第11期79-81,88共4页
为比较3种品牌(A、B、C)伪狂犬病病毒(PRV)g E抗体ELISA检测试剂盒的临床使用效果,应用中和试验来标定伪狂犬病非免疫猪场的180份临床血清样品,同时用3种试剂盒进行检测,并对试剂盒的重复性、敏感性、特异性以及与中和试验结果的符... 为比较3种品牌(A、B、C)伪狂犬病病毒(PRV)g E抗体ELISA检测试剂盒的临床使用效果,应用中和试验来标定伪狂犬病非免疫猪场的180份临床血清样品,同时用3种试剂盒进行检测,并对试剂盒的重复性、敏感性、特异性以及与中和试验结果的符合度等指标进行测定与分析。结果显示:3种试剂盒的批内稳定性均较好,变异系数均小于10%;批间重复性差异较大,变异系数最小者为8.09%,最大者高达21.31%;3种试剂盒的诊断特性良好,敏感性为95.56%~97.78%,特异性为94.44%~100%;各试剂盒检测结果与中和试验结果均完全相符(Kappa值为0.91~0.96)。比较结果表明,3种试剂盒均适用于临床样品的PRV g E抗体检测,其中稳定性及敏感性俱佳的试剂盒C更适用于PRV的持续监测、早期发现、引种检疫及净化效果评估,而特异性与准确性最高的试剂盒B更适用于贵重病畜的诊断淘汰。因此,生产实践中应根据诊断目的合理选择最适试剂盒。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 g E抗体 ELISA检测试剂盒 比较
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PRV SD株gE基因主要抗原区域原核表达及间接ELISA方法的建立 预览
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作者 郑辉 张青 +5 位作者 邹敏 董雅琴 刘爽 范根成 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2017年第10期83-89,共7页
参考猪伪狂犬病病毒(PRV)SD株gE基因序列,设计1对引物,通过PCR方法扩增一段包含gE主要抗原表位编码区的618bp片段,将其用BamHⅠ和XhoLI双酶切后,插入到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行表达、SDS-PAGE... 参考猪伪狂犬病病毒(PRV)SD株gE基因序列,设计1对引物,通过PCR方法扩增一段包含gE主要抗原表位编码区的618bp片段,将其用BamHⅠ和XhoLI双酶切后,插入到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行表达、SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和纯化;利用表达的PRVSDgE蛋白进行gE-ELISA鉴别检测方法研究。结果发现:gE重组蛋白得到了高效表达,融合蛋白的分子量约为42ku;表达产物存在于上清液中,表达量可达菌体总蛋白的30%以上,并且能被PRV抗体所识别。将纯化后的gE蛋白作为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG为二抗,建立检测PRV抗体的间接ELISA方法。结果显示:确定的抗原最佳包被浓度为36μg/mL,最佳包被时间为37℃、1h并4℃过夜,待检血清(1:50稀释)37℃作用1h,二抗(1:3000)37℃作用1h。重复性试验、交叉试验证明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高。用gE-ELISA和IDEXXgE-ELISA同时对采集的92份猪血清进行平行检测,发现该方法的特异性为85.71%,敏感性为90.63%,二者符合率为89.13%。该方法为我国猪伪狂犬病的鉴别监测提供了一种可供选择的技术手段。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 GE基因 原核表达 间接ELISA 鉴别
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猪伪狂犬病毒纳米PCR检测方法的建立 预览 被引量:2
15
作者 张悦勇 南文龙 +4 位作者 秦立得 巩明霞 单虎 陈义平 《中国动物检疫》 CAS 2017年第3期102-105,共4页
[目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、... [目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒等常见猪病毒性病原均无交叉反应。应用纳米PCR和PRV国家标准中的PCR方法,对2014—2016年期间采集自17个省市发病猪场的148份临床样品进行平行检测,PRV纳米PCR的阳性检出率为49.3%(73/148),PRV国标PCR方法的阳性检出率为23.6%(35/148),并且PRV纳米PCR检测为阳性,而PRV国标PCR方法检测为阴性的38份样品,测序结果均确认为PRV阳性。[结论 ]本研究建立的纳米PCR检测方法敏感特异,可用于猪伪狂犬病的病原学检测。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 纳米PCR g B基因
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猪流行性腹泻病毒流行毒株的致病性研究 被引量:4
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作者 张志 程小娜 +6 位作者 樊雅婷 董雅琴 刘爽 邵卫星 王树双 李晓成 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第3期170-172,289共4页
为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株感染动物的致病性和组织显微变化,试验用分离的3株PEDV流行毒株接种不同日龄仔猪,记录接毒后仔猪的临床症状和死亡时间,采集肝脏、肾脏、胃、小肠、空肠等不同组织器官,观察病理组织学变化。... 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株感染动物的致病性和组织显微变化,试验用分离的3株PEDV流行毒株接种不同日龄仔猪,记录接毒后仔猪的临床症状和死亡时间,采集肝脏、肾脏、胃、小肠、空肠等不同组织器官,观察病理组织学变化。结果表明:PEDV流行毒株对仔猪的致病性极强,9日龄之前的仔猪接毒后均出现腹泻症状和死亡,新生仔猪接毒的致死时间最短,平均为26.8 h;随着仔猪日龄的增加,对仔猪的致病性降低,致死时间也随之延长,12日龄仔猪接毒后出现腹泻症状但不死亡。接毒后组织病理学变化除了肠道的肠绒毛萎缩、变短、断裂外,还可见胃、肝脏、肺脏、肾脏等组织的弥漫性出血。说明PEDV流行毒株感染可引起仔猪发病死亡,组织显微变化以肠道绒毛病变和胃等器官的出血为特征。 展开更多
关键词 仔猪 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 流行 接毒 组织病理学 致病性
动物RNA病毒反向遗传学操作技术及应用进展 预览
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作者 孙玉章 倪雪霞 +2 位作者 李金明 王永玲 《中国动物检疫》 CAS 2016年第5期68-71,共4页
本文简述了反向遗传操作技术的基本原理以及近年来动物RNA病毒基因复制与表达调控机理、病毒与宿主间的相互作用,以及构建新型病毒载体和研发新型疫苗等方面的研究进展。
关键词 动物RNA病毒 反向遗传学 病毒拯救 新型疫苗 应用进展
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2.1c亚群猪瘟病毒GXF29/2013株全基因组克隆测序及遗传进化分析 预览
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作者 黄耀华 邵卫星 +5 位作者 杨雨辉 董雅琴 刘爽 张志 李晓成 《动物医学进展》 北大核心 2015年第8期1-7,共7页
参考GenBank 登录的2.1 亚群猪瘟病毒(CSFV)的核苷酸序列,设计并合成4 对引物,应用RTPCR 技术,扩增出了CSFV 广西流行毒株GXF29/2013的全基因组,并进行核苷酸测序.结果GXF29/2013株的全基因组长度为12296个核苷酸.用MEGA5.0软件对GX... 参考GenBank 登录的2.1 亚群猪瘟病毒(CSFV)的核苷酸序列,设计并合成4 对引物,应用RTPCR 技术,扩增出了CSFV 广西流行毒株GXF29/2013的全基因组,并进行核苷酸测序.结果GXF29/2013株的全基因组长度为12296个核苷酸.用MEGA5.0软件对GXF29/2013与GenBank上登录的20株不同亚型(1.1、2.1、2.2、2.3和3.4)CSFV 参考株进行全基因组核苷酸序列及开放阅读框编码的氨基酸序列比较,发现GXF29/2013 与参考株核苷酸序列同源性在83.2% ~98.0% 之间,氨基酸序列同源性在91.2%~98.8%之间.用E2基因进行系统发生树分析,结果表明GXF29/2013属于最近出现的2.1c亚群.对E2蛋白进行分析,结果表明GXF29/2013株有2.1c亚群毒株的特征,与2.1b毒株的遗传进化关系比与1.1亚群毒株的近.该毒株既保留了CSFV E2蛋白的一些关键特征,又与疫苗毒株的一些关键抗原位点不同.GXF29/2013病毒株全基因序列的获得为下一步进行CSFV 反向遗传操作平台的建立奠定了基础. 展开更多
关键词 猪瘟病毒 全基因组 序列分析 2.1c亚群
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猪流行性腹泻病毒变异株的鉴定和分子特征分析 预览 被引量:6
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作者 张志 程小娜 +5 位作者 樊雅婷 董雅琴 刘爽 邵卫星 李晓成 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第7期1654-1660,共7页
为查明山东省某猪场流行性腹泻的病因,本研究对该猪场病死仔猪进行病理学检查,并对采集的7份仔猪腹泻样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)的套式RT-PCR检测。病理学检查发现病猪的肠道肿胀、变薄、出血,肠绒毛皱缩、变短、边缘粗糙。套... 为查明山东省某猪场流行性腹泻的病因,本研究对该猪场病死仔猪进行病理学检查,并对采集的7份仔猪腹泻样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)的套式RT-PCR检测。病理学检查发现病猪的肠道肿胀、变薄、出血,肠绒毛皱缩、变短、边缘粗糙。套式RT~PCR结果显示,7份样品均为PEDV阳性;对其中两份PEDV阳性病料进行S基因扩增,分析其遗传变异,结果显示这两株PEDV野毒株的s基因与参考疫苗株CV777的同源性为92.3%~92.4%,与其他野毒株的同源性为96.6%~98.6%。PEDV的遗传进化树结果显示,PEDV分为两个进化分支G1和G2,G1包括CV777等疫苗株及中国和韩国早期的部分毒株,G2则是PEDV变异株为主的分支,包括本试验分离的野毒株及近年来美国、中国等国的野毒株,这些毒株都存在两个插入突变和1个缺失突变。结果表明,变异株已成为PEDV的流行优势毒株,且这些变异位点有可能成为鉴定PEDV变异株的分子特征。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 鉴定 分子特征 S基因
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猪伪狂犬病毒野毒株套式PCR检测方法的建立和应用 预览 被引量:3
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作者 张志 樊雅婷 +6 位作者 刘爽 董雅琴 邵卫星 段纲 王树双 李晓成 《中国动物检疫》 CAS 2015年第5期73-77,共5页
为建立能鉴别猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株和疫苗株的实用方法,本文以疫苗株缺失的3.5kb片段为靶基因,设计了2对PCR引物,建立了能够特异性检测PRV野毒株的套式PCR方法。与常规PCR相比,该方法检测极限可达10个病毒拷贝/μL,是常规PCR的1... 为建立能鉴别猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株和疫苗株的实用方法,本文以疫苗株缺失的3.5kb片段为靶基因,设计了2对PCR引物,建立了能够特异性检测PRV野毒株的套式PCR方法。与常规PCR相比,该方法检测极限可达10个病毒拷贝/μL,是常规PCR的1000倍,并与猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒等不存在交叉反应现象。在对临床150份样品检测时,套式PCR的阳性率为21.33%,常规PCR的阳性率为10%。这表明该方法具有特异性高、敏感性强的特点,是一种值得基层推广应用的快速诊断技术,可用于PRV的诊断和流行病学调查等。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 野毒株 套式PCR 检测方法
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