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大麻组分检测及化学分型研究进展 预览
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作者 维来 郑晓雨 +4 位作者 赵彦彪 曾令华 高利生 刘耀 郑珲 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期402-411,共10页
大麻植物是非法加工制造大麻制品的基本原料,对其精神活性物质进行准确定性与精确定量分析,可为司法部门量刑提供依据。本研究对当前大麻检测相关的前处理和分析方法进行总结,并在此基础上研究大麻植物化学表型的划分,以及大麻植物中大... 大麻植物是非法加工制造大麻制品的基本原料,对其精神活性物质进行准确定性与精确定量分析,可为司法部门量刑提供依据。本研究对当前大麻检测相关的前处理和分析方法进行总结,并在此基础上研究大麻植物化学表型的划分,以及大麻植物中大麻酚类在不同储存条件和储存形式下的稳定性变化。 展开更多
关键词 大麻 前处理 检测方法 化学表型 稳定性
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超高效液相色谱-质谱法同时测定大麻植物中Δ9-四氢大麻酚和Δ9-四氢大麻酚酸A
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作者 维来 郑晓雨 +4 位作者 赵彦彪 曾令华 高利生 刘耀 郑珲 《理化检验:化学分册》 CSCD 北大核心 2018年第6期644-649,共6页
10mg样品粉末用5mL甲醇超声萃取,离心后,上清液在Waters ACQUTIY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm)上分离,以含0.1%(体积分数)甲酸的甲醇和水(体积比为87∶13)为流动相进行等度洗脱,流量为0.2mL·min-1。利用光电... 10mg样品粉末用5mL甲醇超声萃取,离心后,上清液在Waters ACQUTIY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm)上分离,以含0.1%(体积分数)甲酸的甲醇和水(体积比为87∶13)为流动相进行等度洗脱,流量为0.2mL·min-1。利用光电二极管阵列检测器在波长220nm处对Δ9-四氢大麻酚(Δ9-THC)和Δ9-四氢大麻酚酸A(Δ9-THCA-A)进行定性和定量分析,并采用质谱检测器QDa进行确证。Δ9-THC和Δ9-THCA-A的质量浓度分别在0.50~20.0mg·L-1和2.0~40.0 mg·L-1内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)分别为0.10,1.0mg·L-1。加标回收率在81.5%~97.9%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在0.77%~4.1%之间。采用该方法对20个大麻植物样品进行分析,由Δ9-THC和Δ9-THCA-A的测定值计算得总Δ9-THC含量略高于标准方法测定结果。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-质谱法 Δ9-四氢大麻酚 Δ9-四氢大麻酚酸A 大麻植物
TFPR1通过激活树突状细胞并促进其成熟发挥佐剂功能
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作者 李悄 王月鹏 +4 位作者 朱青 宁秀哲 维来 周育森 寇志华 《军事医学》 CSCD 北大核心 2018年第2期101-104,共4页
目的研究树突状细胞(DC)在重组蛋白TFPR1发挥佐剂功能中的作用。方法在无菌条件下取4~5周龄雄性BALB/c小鼠的骨髓细胞,小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-CSF)与重组白介素4(rm IL-4)诱导分化6 d后,加入TFPR1共孵育24 h... 目的研究树突状细胞(DC)在重组蛋白TFPR1发挥佐剂功能中的作用。方法在无菌条件下取4~5周龄雄性BALB/c小鼠的骨髓细胞,小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-CSF)与重组白介素4(rm IL-4)诱导分化6 d后,加入TFPR1共孵育24 h,并以LPS处理为阳性对照、PBS为阴性对照,普通光学显微镜观察DC形态变化,罗丹明标记鬼笔环肽(TRITC Phalloidin)和DAPI共染色后,激光共聚焦显微镜观察细胞肌动蛋白和细胞核的分布情况,流式细胞术检测细胞表面CD40、CD80、CD86、MHCⅡ的表达水平,ELISA检测细胞培养上清中的细胞因子。结果在普通光镜和共聚焦显微镜下,加入TFPR1的DC与加入PBS的阴性对照DC相比具有显著的不同,而和加入LPS的阳性对照相似:光镜下发现大多数TFPR1处理的DC伪足变短直至消失,并变成圆形、悬浮于培养基中;激光共聚焦显微镜观察发现TFPR1处理的DC肌动蛋白由分布于细胞两极转至均匀分布于细胞膜上,从形态学上表明TFPR1可促进DC成熟;流式细胞术检测到TFPR1处理的DC表面CD40、CD80、CD86、MHCⅡ的表达量上调,进一步证明TFPR1具有促进DC成熟的作用。ELISA检测发现TFPR1处理的DC可产生高水平的IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子。结论 TFPR1不但能促进DC成熟,且能激活DC产生细胞因子,说明DC在TFPR1的佐剂功能中发挥重要作用。 展开更多
关键词 TFPR1 树突状细胞 佐剂 作用机制
基于超高效液相色谱-质谱联用技术对大麻植物中3种成分及化学表型分析 预览
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作者 维来 郑晓雨 +4 位作者 赵彦彪 曾令华 高利生 郑珲 刘耀 《分析化学》 CSCD 北大核心 2017年第7期1052-1058,共7页
建立了超高效液相色谱-质谱联用(UPLC/PDA-QDa)同时对大麻植物中Δ9-四氢大麻酚(Δ9-THC)、大麻酚(CBN)和大麻二酚(CBD)进行定性与定量分析的方法。缴获的大麻植物用甲醇超声萃取,采用甲醇(含0.1%甲酸)和超纯水为流动相,等度... 建立了超高效液相色谱-质谱联用(UPLC/PDA-QDa)同时对大麻植物中Δ9-四氢大麻酚(Δ9-THC)、大麻酚(CBN)和大麻二酚(CBD)进行定性与定量分析的方法。缴获的大麻植物用甲醇超声萃取,采用甲醇(含0.1%甲酸)和超纯水为流动相,等度洗脱,流速为0.2 m L/min,经Waters UPLC BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,利用光电二极管阵列检测器(PDA)在220 nm波长下检测,并通过质谱检测器(QDa)对目标洗脱峰进行追踪确证。在0.520μg/m L浓度范围内,3种大麻酚类化合物的质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,R≥0.999;低、中、高添加水平的平均回收率为82%102%,相对标准偏差(RSD)在0.4%4.1%之间。本方法稳定、简便、灵敏,能够满足检测需求。根据Δ9-THC、(Δ9-THC+CBN)/CBD、Δ9-THC/CBD或CBN/CBD表型指数,区分不同产地大麻的化学表型,为大麻植物的检测分析和质量控制提供了有效手段。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-质谱联用 大麻植物 Δ9-四氢大麻酚 大麻酚 大麻二酚 化学表型
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不同储存条件对大麻化学稳定性的影响 预览
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作者 维来 赵彦彪 +4 位作者 郑晓雨 曾令华 高利生 刘耀 郑珲 《广西植物》 CSCD 北大核心 2017年第9期1204-1212,共9页
为探讨光照和温度对大麻植物中大麻酚类稳定性的影响,该研究将大麻植物检材以固体粉末和甲醇提取溶液的形式分别在室温(22±2)℃见光、室温(22±2)℃避光、4℃避光、-20℃避光条件下储存20 d后,采用超高效液相(UPLC-PDA)... 为探讨光照和温度对大麻植物中大麻酚类稳定性的影响,该研究将大麻植物检材以固体粉末和甲醇提取溶液的形式分别在室温(22±2)℃见光、室温(22±2)℃避光、4℃避光、-20℃避光条件下储存20 d后,采用超高效液相(UPLC-PDA)检测分析样本中Δ9-四氢大麻酚(Δ9-THC)、大麻二酚(CBD)和大麻酚(CBN)的含量变化情况。结果表明:3种大麻酚类在不同化学表型大麻中的含量变化趋势相同,固体粉末样本的Δ9-THC、CBD含量在室温光照条件下显著下降,CBN含量基本不变;甲醇提取样本中Δ9-THC、CBN和CBD含量在室温光照条件下均显著下降。避光条件下的室温(22±2)℃及低温(4℃、-20℃)可稳定保存两种形式的大麻样本。大麻中的精神活性成分Δ9-THC的降解满足一级反应动力学规律,光照是影响Δ9-THC降解的重要因素,如果在室温避光条件下储存,大麻或其甲醇提取物可稳定保存,可以更好地指导司法实践活动中短期内大麻检材的取证、运送、保存及鉴定。 展开更多
关键词 大麻 Δ9-四氢大麻酚 大麻酚 大麻二酚 稳定性 降解动力学
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新型佐剂蛋白TFPR1在毕赤酵母系统中的表达及鉴定 被引量:1
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作者 宁秀哲 寇志华 +7 位作者 维来 朱青 杨裔 邱洪杰 郭晶晶 郭彦 于虹 周育森 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期294-299,共6页
目的:利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1( PR-1)功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生... 目的:利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1( PR-1)功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生型X33菌株,经甲醇诱导表达重组蛋白TFPR1,采用ELISA法筛选阳性菌株后,SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果重组表达质粒pPICZαA-TFPR1经双酶切和测序鉴定证明构建正确;重组蛋白以分泌形式表达,相对分子质量约16&#215;103。结论利用巴斯德毕赤酵母表达系统成功表达TFPR1蛋白,为进一步研究其功能和作为佐剂的应用提供参考资料。 展开更多
关键词 佐剂 致病相关蛋白 毕赤酵母系统 分泌表达 PATHOGENESIS related PROTEIN 1 (PR-1)
公交车放火案现场重建实施体系探索 预览 被引量:1
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作者 曾令华 维来 王明直 《四川警察学院学报》 2016年第4期62-69,共8页
目的:以公交车放火案现场重建的理论方法和实施体系为研究内容,为案件的侦破与诉讼提供支持。方法:运用犯罪现场重建的基础理论,结合公交车放火案件的构成要素及其关系的特点,对该类案件的现场重建的方法内容及实施体系进行研究。结... 目的:以公交车放火案现场重建的理论方法和实施体系为研究内容,为案件的侦破与诉讼提供支持。方法:运用犯罪现场重建的基础理论,结合公交车放火案件的构成要素及其关系的特点,对该类案件的现场重建的方法内容及实施体系进行研究。结果:根据现场重建的科学理论体系和案件特点,提出证据认识与获取、证据审查与归类、提出假设并验证、逻辑推理与实验、得出结论制作报告五个步骤的现场重建实施体系。 展开更多
关键词 公交车放火案 现场重建 方法
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活化相关分泌蛋白1单克隆抗体的制备及其在保守结构域鉴定中的应用 预览 被引量:1
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作者 郭晶晶 于虹 +5 位作者 杨裔 维来 肖文珺 郭彦 寇志华 周育森 《生物技术通讯》 CAS 2014年第2期189-193,共5页
目的:制备重组活化相关分泌蛋白1(ASP-1)的单克隆抗体,并用其鉴定保守结构域。方法:用原核表达并纯化的重组ASP-1不加佐剂免疫BALB/e小鼠,采用杂交瘤技术及有限稀释传代法筛选稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水后... 目的:制备重组活化相关分泌蛋白1(ASP-1)的单克隆抗体,并用其鉴定保守结构域。方法:用原核表达并纯化的重组ASP-1不加佐剂免疫BALB/e小鼠,采用杂交瘤技术及有限稀释传代法筛选稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水后用间接ELISA进行抗体特异性鉴定和效价检测,利用肽结合ELISA和Western印迹鉴定单抗识别的保守结构域。结果:获得5株能稳定分泌抗ASP-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,且5株单抗的识别区域均为21-28氨基酸残基的保守性结构域。结论:制备了抗ASP-1的单克隆抗体,为深入研究ASP-1佐剂的活性功能区及作用机制提供了有效工具。 展开更多
关键词 活化相关分泌蛋白1 单克隆抗体 保守结构域
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改革猪瘟免疫程序初探 预览
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作者 纪同存 维来 《上海畜牧兽医通讯》 北大核心 1997年第6期 17,共1页
关键词 猪瘟 疫苗 免疫程序改革
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蛇毒蛋白triflin功能区TFPR1在大肠杆菌中的表达及其功能初步研究 预览 被引量:2
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作者 维来 杨裔 +5 位作者 宁秀哲 郭晶晶 于虹 郭彦 寇志华 周育森 《生物技术通讯》 CAS 2015年第3期329-333,共5页
目的:获得具有生物学活性的蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1(PR-1)功能区TFPR1。方法:分析triflin空间结构及其保守结构域,获得TFPR1序列,并进行密码子优化、全基因合成,构建原核表达质粒p ET-TFPR1,在大肠杆菌BL21中以IPTG诱导表达... 目的:获得具有生物学活性的蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1(PR-1)功能区TFPR1。方法:分析triflin空间结构及其保守结构域,获得TFPR1序列,并进行密码子优化、全基因合成,构建原核表达质粒p ET-TFPR1,在大肠杆菌BL21中以IPTG诱导表达,表达产物经Western印迹鉴定后,镍柱纯化、复性,对复性后的产物进行特性分析;以复性的TFPR1肌肉途径接种BALB/c雌性小鼠,分析其生物学活性。结果:TFPR1以包涵体形式表达,复性后蛋白纯度大于95%,无需佐剂免疫小鼠即可诱导机体产生效价为20万的抗TFPR1抗体。结论:制备了具有生物学活性的重组蛋白TFPR1,为后续研究TFPR1的生物学功能奠定了物质基础。 展开更多
关键词 蛇毒蛋白triflin 致病相关蛋白1 原核表达 佐剂
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