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脂肪和滑膜来源间充质干细胞成软骨分化能力的比较 预览
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作者 王洋 +3 位作者 连晓磊 李江南 丁康 李广恒 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第3期394-398,共5页
目的:比较人膝关节脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)和滑膜来源间充质干细胞(SDSCs)的成软骨分化能力,寻找更为合适的种子细胞来治疗骨性关节炎软骨病损。方法:取20例骨性关节炎患者的髌下脂肪垫、滑膜组织和剥离的软骨,分离、培养ADSCs、SD... 目的:比较人膝关节脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)和滑膜来源间充质干细胞(SDSCs)的成软骨分化能力,寻找更为合适的种子细胞来治疗骨性关节炎软骨病损。方法:取20例骨性关节炎患者的髌下脂肪垫、滑膜组织和剥离的软骨,分离、培养ADSCs、SDSCs和炎性软骨细胞(ICs),观察增殖和分化情况。收集体外3D培养7、14、21 d的3种细胞培养液上清,应用ELISA检测IL-1、IL-6和IL-10的分泌情况。取3D培养21 d获得的细胞团块,测量其直径并经番红O、阿尔新蓝及Ⅱ型胶原免疫组化染色分析细胞成软骨分化情况。结果:3种细胞均呈现类成纤维细胞形态,其中ICs多为短梭形多分支,而ADSCs和SDSCs多为长梭形。不同时间点ICs分泌的IL-1和IL-6高于SDSCs和ADSCs,ADSCs分泌的IL-10高于SDSCs及ICs(P<0.05)。3D培养21 d后,SDSCs细胞团块直径大于ICs和ADSCs(P<0.05)。阿尔新蓝和番红O染色结果发现,SDSCs和ICs的阳性区域面积大于ADSCs(P<0.05);Ⅱ型胶原免疫组化染色结果发现ICs和SDSCs阳性区域面积均大于ADSCs(P<0.05)。结论:SDSCs成软骨分化能力较强,ADSCs的抗炎作用较强。 展开更多
关键词 脂肪来源间充质干细胞 滑膜来源间充质干细胞 成软骨分化 骨性关节炎 种子细胞
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姜黄素和硫酸镁联合应用协同促进炎性软骨细胞的逆分化 预览
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作者 王洋 李广恒 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1410-1415,共6页
背景:骨性关节炎是老年人疼痛和致残的常见原因,其根本原因在于不适当的机械应力、炎症递质和生化因子的共同作用。姜黄素已被证明具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤、神经保护、心脏保护、辐射防护以及治疗骨关节炎等作用,硫酸镁(MgSO4)... 背景:骨性关节炎是老年人疼痛和致残的常见原因,其根本原因在于不适当的机械应力、炎症递质和生化因子的共同作用。姜黄素已被证明具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤、神经保护、心脏保护、辐射防护以及治疗骨关节炎等作用,硫酸镁(MgSO4)同样具有缓解关节疼痛,促进关节破坏的作用。目的:探究姜黄素和MgSO4联合应用协同促进炎性软骨细胞逆分化的作用机制。方法:原代培养炎性软骨细胞,在体外单层培养条件下,细胞增殖实验检测炎性软骨细胞的增殖情况。实验细胞分为4组,进行体外3D诱导逆分化培养,炎性软骨细胞组为炎性软骨细胞单独培养,姜黄素组采用姜黄素干预培养,MgSO4组为采用MgSO4干预培养,联合治疗组为姜黄素+MgSO4联合干预培养,共培养18 d。结果与结论:①细胞增殖实验显示,第3代炎性软骨细胞早期增殖速率较高,分化程度较低;②定量PCR检测显示,联合治疗组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖和SOX9 mRNA表达量均高于姜黄素组或MgSO4组(P<0.01);③体外3D诱导分化培养中联合治疗组的大体标本的尺寸和软骨逆分化的阿尔新蓝染色、番红O染色的阳性区域均明显高于其他3组(P<0.01);④TUNEL染色显示,联合治疗组及MgSO4组凋亡特异性染色的阳性区域均明显小于另外2组(P<0.01);⑤结果证实,联合应用姜黄素和MgSO4具有协同促进炎性软骨细胞逆分化的作用。 展开更多
关键词 骨性关节炎 姜黄素 硫酸镁 3D培养 软骨细胞 炎性软骨细胞 软骨细胞逆分化 软骨退变 细胞增殖 组织工程
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两粤黄檀香材挥发油成分及抗氧化活性研究
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作者 马换换 +4 位作者 张丹雁 梁耀勇 赵维波 徐展翅 莫伟 《中药新药与临床药理》 CSCD 北大核心 2018年第5期608-613,共6页
目的测定分析两粤黄檀香材挥发油含量及组分,并评价其抗氧化能力。方法采用水蒸气蒸馏法提取两粤黄檀香材挥发油,并应用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析其组分,峰面积归一化法计算各组分的相对含量。利用清除DPPH自由基、总抗氧化... 目的测定分析两粤黄檀香材挥发油含量及组分,并评价其抗氧化能力。方法采用水蒸气蒸馏法提取两粤黄檀香材挥发油,并应用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析其组分,峰面积归一化法计算各组分的相对含量。利用清除DPPH自由基、总抗氧化能力及还原力评价两粤黄檀香材挥发油的体外抗氧化活性。结果两粤黄檀香材挥发油含量为(12.9±1.1)mL·kg^-1,挥发油中共分离鉴定出23个组分,主要为榄香素(69.89%)、甲基丁香酚(20.45%)、1,2-二甲氧基-4-N-丙烯基苯(2.68%)、芳樟醇(1.40%)及去氢白菖烯(1.10%)等。两粤黄檀香材挥发油表现出较强的清除DPPH自由基及还原力的能力,其清除能力及还原能力与挥发油呈良好的量效关系。结论两粤黄檀香材中挥发油的主要成分为榄香素,其总挥发油具有良好的抗氧化活性。 展开更多
关键词 两粤黄檀 挥发油 化学成分 抗氧化活性
人脂肪间充质干细胞和滑膜间充质干细胞协同抑制炎性软骨细胞的退变 预览 被引量:2
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作者 王洋 +2 位作者 连晓磊 丁康 李广恒 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第17期2661-2668,共8页
背景:将具有目的功能的细胞通过注射的方法注入关节腔内来改变病变的微环境,作用于早期骨性关节炎的炎性软骨细胞,通过发挥植入细胞本身的特性来影响疾病的进程。目的:探讨联合应用人膝关节脂肪来源间充质干细胞及滑膜来源间充质干细... 背景:将具有目的功能的细胞通过注射的方法注入关节腔内来改变病变的微环境,作用于早期骨性关节炎的炎性软骨细胞,通过发挥植入细胞本身的特性来影响疾病的进程。目的:探讨联合应用人膝关节脂肪来源间充质干细胞及滑膜来源间充质干细胞对炎性软骨细胞的退变是否具有协同抑制作用。方法:原代培养脂肪来源间充质干细胞、滑膜来源间充质干细胞和炎性软骨细胞。体外二维培养条件下,采用MTS细胞增殖实验检测3种细胞的增殖情况,定量PCR及免疫荧光分析3种贴壁细胞成软骨标志物基因水平及蛋白水平的差异。体外3D混合培养条件下分3组:脂肪来源间充质干细胞+炎性软骨细胞组(A+C组),滑膜来源间充质干细胞+炎性软骨细胞组(S+C组),脂肪来源间充质干细胞+滑膜来源间充质干细胞+炎性软骨细胞组(A+S+C组)。收集3组混合培养的细胞团块,进行阿尔新蓝染色、番红O染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色,并做定量分析。采用定量PCR检测成软骨分化标志物的基因水平差异。收集培养液上清通过酶联免疫吸附技术检测促炎因子及抗炎因子的分泌情况。结果与结论:(1)体外二维培养条件下,脂肪来源间充质干细胞的增殖速率高于炎性软骨细胞和滑膜来源间充质干细胞,差异有显著性意义(P〈0.05);炎性软骨细胞的成软骨标志物Ⅱ型胶原、蛋白聚糖m RNA表达量以及Ⅱ型胶原蛋白表达量明显高于脂肪来源间充质干细胞和滑膜来源间充质干细胞(P〈0.01);(2)体外3D混合培养条件下,A+S+C组的成软骨分化特异性染色阳性区域面积百分比均明显高于S+C组和A+C组(P〈0.05);A+S+C组成软骨分化标志物蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表达量明显高于S+C组和A+C组(P〈0.05);S+C组促炎因子白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平明显高于A� 展开更多
关键词 脂肪组织 滑膜 间质干细胞 软骨细胞 共同培养技术 骨关节炎 组织工程 骨性关节炎 脂肪间充质干细胞 滑膜间充质干细胞 炎性软骨细胞 三维培养 软骨退变 软骨再生 炎症反应 成软骨分化 干细胞 国家自然科学基金
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广陈皮与普通陈皮的HPLC指纹图谱对比分析 被引量:1
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作者 徐展翅 马换换 +3 位作者 李伟 赵维波 张丹雁 《广州中医药大学学报》 CAS 2018年第4期721-726,共6页
【目的】建立广陈皮的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为鉴别广陈皮与普通陈皮提供参考依据。【方法】以茶枝柑(广东新会)的干燥成熟果皮(广陈皮),及大红袍(四川眉山)、温州蜜柑(浙江义乌)、蕉柑(广东汕头)、年桔(广东广州)... 【目的】建立广陈皮的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为鉴别广陈皮与普通陈皮提供参考依据。【方法】以茶枝柑(广东新会)的干燥成熟果皮(广陈皮),及大红袍(四川眉山)、温州蜜柑(浙江义乌)、蕉柑(广东汕头)、年桔(广东广州)、贡柑(广东广州)的干燥成熟果皮(陈皮)为考察对象。采用C18(5μm,4.6 mm×250 mm)岛津色谱柱,流动相为乙腈—体积分数0.1%甲酸水,流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长283 nm,记录广陈皮的HPLC图谱并生成共有模式图,进行相似度对比,并与其他5个品种的陈皮进行比较。【结果】广陈皮各批样品HPLC图谱与共有模式相似度均在0.985以上,其他5个品种的陈皮相似度介于0.720-0.873之间。表明广陈皮与其他5个品种的普通陈皮HPLC指纹图谱存在一定的差异。【结论】本研究所建立的广陈皮HPLC指纹图谱可用于区分广陈皮与四川大红袍、温州蜜、柑年桔、贡柑、蕉柑等的普通陈皮。 展开更多
关键词 广陈皮(茶枝柑) 四川大红袍 温州蜜柑 蕉柑 年桔 贡柑 高效液相 色谱
人骨骼肌来源不同表面标志物间充质干细胞特定亚群的多向分化潜能 预览 被引量:2
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作者 赵亚光 李毅 +1 位作者 李广恒 《中国组织工程研究》 北大核心 2017年第13期2108-2113,共6页
背景:骼肌来源的间充质干细胞,在骨形态发生蛋白4等因子的调节下具有多向分化潜能,但具体细胞亚群的分化情况尚不十分明确。目的:观察人骨骼肌来源的不同表面标志物的间充质干细胞特定亚群的多向分化潜能。方法:应用流式细胞分选技术... 背景:骼肌来源的间充质干细胞,在骨形态发生蛋白4等因子的调节下具有多向分化潜能,但具体细胞亚群的分化情况尚不十分明确。目的:观察人骨骼肌来源的不同表面标志物的间充质干细胞特定亚群的多向分化潜能。方法:应用流式细胞分选技术,分选出具有不同细胞表面标志物的人骨骼肌干细胞亚群,根据CD56及CD34/CD144的表达差异,将细胞分成CD56^+,CD56^+CD34^+CD144^+,CD34^+CD144^+及未分选组共4组,对比不同细胞亚群组在骨形态发生蛋白4成骨诱导或骨形态发生蛋白4^+转化生长因子β3成软骨诱导后的差异。通过碱性磷酸酶染色后碱性磷酸酶阳性细胞的百分比评估细胞骨代谢情况。将各亚群细胞进行3D培养和细胞因子处理后,通过硝酸银染色评估其成骨分化程度,通过阿尔新蓝染色评价成软骨分化程度。结果与结论:(1)细胞骨代谢:经骨形态发生蛋白4处理后,4组细胞的碱性磷酸酶阳性细胞的百分比差异无显著性意义(P〉0.05);(2)细胞分化:不同表面标记物的4组细胞成骨及成软骨分化有明显差异,在相同成骨培养条件下,CD56^+组成骨能力最强;相同成软骨培养条件下,CD56^+,CD56^+CD34^+CD144^+组呈阿尔新蓝染色阳性,CD56^+CD34^+CD144^+组的染色更深且区域更大;(3)结果证实,成骨与成软骨潜能与不同的人骨骼肌间充质干细胞类型有关。人骨骼肌来源的间充质干细胞CD56^+亚群和成骨潜能有密切关系。同时CD56^+CD34^+CD144^+亚群分化能力更强,具有更强的成软骨潜能。 展开更多
关键词 干细胞 分化 骨骼肌 骨缺损 软骨缺损 间充质干细胞 标记物 骨形态发生蛋白4 成骨分化 成软骨分化 国家自然科学基金
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山里红总黄酮季节动态及其与气候因子相关性分析 预览 被引量:1
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作者 罗猛 胡娇阳 +6 位作者 牟璠松 于雪莹 乔琪 阮鑫 杨璇 祖元刚 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期476-480,共5页
研究山里红中总黄酮含量随季节动态变化的规律,明确影响其总黄酮含量的气候因子。采收2013年5~10月的山里红,采用超声辅助提取法从山里红中提取总黄酮,三氯化铝比色法检测总黄酮的含量,并对山里红叶总黄酮含量与气候因子进行相关性分... 研究山里红中总黄酮含量随季节动态变化的规律,明确影响其总黄酮含量的气候因子。采收2013年5~10月的山里红,采用超声辅助提取法从山里红中提取总黄酮,三氯化铝比色法检测总黄酮的含量,并对山里红叶总黄酮含量与气候因子进行相关性分析。山里红不同部位总黄酮含量差异较大,9月份山里红叶黄酮类成分的含量最高,其值为31.52 mg·g-1。统计九月份山里红叶总黄酮含量与气候因子之间相关性分析,结果表明总黄酮含量与温度相关性显著。综合考虑,选择9月份为山里红叶的最佳采收期。该结果可为山里红叶总黄酮的深入开发利用奠定理论基础。 展开更多
关键词 山里红 总黄酮 气候因子 季节动态 相关性
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超声法提取山里红叶总黄酮及其抗氧化活性研究 预览 被引量:3
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作者 罗猛 +3 位作者 胡娇阳 牟璠松 乔琪 祖元刚 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期632-637,共6页
采用超声辅助提取法从山里红叶中提取总黄酮。通过Box-Behnken实验设计(BBD)结合响应面法(RSM)来优化超声提取的条件。影响山里红叶总黄酮提取效率的4个主要变量为液固比,温度,乙醇浓度和时间,得到的最佳值分别为15,40℃,40%,32 mi... 采用超声辅助提取法从山里红叶中提取总黄酮。通过Box-Behnken实验设计(BBD)结合响应面法(RSM)来优化超声提取的条件。影响山里红叶总黄酮提取效率的4个主要变量为液固比,温度,乙醇浓度和时间,得到的最佳值分别为15,40℃,40%,32 min。在此条件下,总黄酮的产率为15.50 mg·g-1。体外抗氧化实验表明,山里红叶提取物的DPPH自由基清除能力为0.69 mg·m L-1(以IC50值表示),与传统的浸渍提取和热回流提取方法相比,超声提取的方法具有更好的抗氧化活性。实验结果表明超声提取法适用于提取山里红叶中的总黄酮,并且其提取物具有较好的抗氧化活性。 展开更多
关键词 山里红叶 超声提取 总黄酮 BOX-BEHNKEN设计 抗氧化活性
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