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脾气虚证和脾不统血证模型大鼠脾主肌肉实质的探讨
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作者 小虎 黄玲 +2 位作者 陈慧 吕斌 金丽琴 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期217-222,共6页
目的研究脾气虚证和脾不统血证模型大鼠骨骼肌组织线粒体能量代谢变化,探讨中医脾主肌肉理论的内涵实质。方法将48只SD雄性大鼠按随机数表法分为正常对照组、低分子肝素钠组、脾气虚组和脾不统血组,每组12只。复制脾气虚证和脾不统血证... 目的研究脾气虚证和脾不统血证模型大鼠骨骼肌组织线粒体能量代谢变化,探讨中医脾主肌肉理论的内涵实质。方法将48只SD雄性大鼠按随机数表法分为正常对照组、低分子肝素钠组、脾气虚组和脾不统血组,每组12只。复制脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,测定各组大鼠骨骼肌ATP含量、线粒体呼吸链复合物(ComplexⅠ、ComplexⅡ、ComplexⅢ、ComplexⅣ)活性、柠檬酸合酶(CS)活性、mt DNA拷贝数、COXⅣ蛋白和Cyt-C蛋白及其mRNA表达量变化。结果与正常对照组比较,中期和末期脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌的ATP含量、线粒体复合物活性、CS活性、mt DNA拷贝数、COXⅣ蛋白及其mRNA表达量均降低,Cyt-C蛋白及其mRNA表达量均升高(P <0. 05,P <0. 01);与脾气虚组比较,中期和末期脾不统血组大鼠骨骼肌ATP含量、CS活性均降低(均P <0. 05);中期脾不统血组大鼠骨骼肌ComplexⅠ、ComplexⅡ、ComplexⅢ活性降低,末期脾不统血组大鼠骨骼肌ComplexⅠ、ComplexⅢ、ComplexⅣ活性降低(P <0. 05,P <0. 01);中期脾不统血组大鼠骨骼肌mt DNA拷贝数升高(P <0. 05);脾不统血组大鼠骨骼肌COXⅣ、Cyt-C蛋白及其mRNA表达量比较,差异无统计学意义(均P> 0. 05)。结论脾气虚证大鼠和脾不统血证大鼠骨骼肌线粒体能量代谢障碍存在多方面的影响变化,且脾气虚证发展成为脾不统血证的过程中,大鼠骨骼肌能量代谢障碍逐渐加重。 展开更多
关键词 脾气虚证 脾不统血证 骨骼肌 线粒体 能量代谢
口服AdipoRon对2型糖尿病小鼠脾脏和胰腺功能的影响 预览
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作者 谢克俭 黄玲 +3 位作者 小虎 李雪 王少杰 肖敏 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期60-64,共5页
目的:观察口服AdipoRon对2型糖尿病小鼠脾脏和胰腺功能的影响,为AdipoRon的临床应用提供基础资料。方法:将40只C57/BL6雄性小鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)和造模组(n=30),并分别给予普通饲料和高脂高糖饲料喂养。4周后,造模组小鼠腹... 目的:观察口服AdipoRon对2型糖尿病小鼠脾脏和胰腺功能的影响,为AdipoRon的临床应用提供基础资料。方法:将40只C57/BL6雄性小鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)和造模组(n=30),并分别给予普通饲料和高脂高糖饲料喂养。4周后,造模组小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ,40mg/kg)以诱导建立2型糖尿病模型。造模成功后将糖尿病模型小鼠随机分为糖尿病模型组(DM)、高剂量AdipoRon(50mg/kg)(DM+H)组、低剂量AdipoRon(20mg/kg)(DM+L)组,每组10只。DM+L组和DM+H组灌胃相应浓度的AdipoRon(使用去离子水溶解AdipoRon),NC组和DM组灌胃等体积去离子水,每日灌胃1次,灌胃10d。末次干预后禁食12h,处死小鼠取血液、胰腺和脾脏。HE染色光镜下观察胰腺的病理改变;ELISA法检测小鼠胰腺和脾脏组织中胰岛素受体(INSR)、胰岛素受体底物1(IRS-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白质含量;小鼠脾脏系数;Westernblot法检测胰腺组织中p-IRS-1蛋白质水平;实时荧光定量PCR检测胰腺组织中insulinmRNA表达。结果:光镜下可见正常组小鼠胰腺组织排列紧密、饱满、胰岛体积大,DM组小鼠胰腺组织排列较为疏散、胰岛体积较小,口服AdipoRon组小鼠胰腺组织基本紧密、饱满、胰岛体积略小。与NC比较,DM组小鼠胰腺和脾脏TNF-α水平明显升高,INSR、IRS-1水平均降低,脾脏系数、胰腺p-IRS-1蛋白质水平和insulinmRNA表达均降低,均具有统计学意义(P<0.05);与DM组比较,口服AdipoRon组小鼠胰腺和脾脏TNF-α水平明显下降,INSR和IRS-1水平均升高,脾脏系数升高,DM+H组胰腺p-IRS-1蛋白质水平和insulinmRNA表达均升高(P<0.05);与DM+L组比较,DM+H组小鼠TNF-α水平明显下降,INSR和IRS-1水平均升高(P<0.05)。结论:口服AdipoRon可通过减弱糖尿病小鼠炎症反应,上调INSR表达、提高p-IRS-1水平,从而对糖尿病小鼠脾脏和胰腺组织有一定的保护作用。 展开更多
关键词 AdipoRon 2型糖尿病 胰腺 脾脏 小鼠
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大鼠脾虚证发展进程与心肌能量代谢变化的关系 预览 被引量:1
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作者 小虎 陈慧 +2 位作者 黄玲 吕斌 金丽琴 《温州医科大学学报》 CAS 2018年第4期251-256,共6页
目的:通过复制脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,对脾虚证由轻到重的发生发展过程的心肌组织能量代谢功能的变化进行探讨。方法:复制脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,测定心肌组织ATP含量、柠檬酸合酶(CS)活性、线粒体呼吸链复合物(Comp... 目的:通过复制脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,对脾虚证由轻到重的发生发展过程的心肌组织能量代谢功能的变化进行探讨。方法:复制脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,测定心肌组织ATP含量、柠檬酸合酶(CS)活性、线粒体呼吸链复合物(Complex Ⅰ、Complex Ⅱ、Complex Ⅲ、Complex Ⅳ)活性、线粒体DNA(mt DNA)拷贝数、COXⅣ蛋白和Cyt-C蛋白及其mRNA表达量变化。结果:脾气虚证大鼠和脾不统血证大鼠心肌ATP含量、CS活性、Complex Ⅰ、Complex Ⅱ、Complex Ⅲ和Complex Ⅳ活性、COXⅣ蛋白及其mRNA表达量均显著低于正常大鼠(P〈0.05),脾不统血证大鼠mt DNA拷贝数、Cyt-C蛋白及其mRNA表达量显著高于正常大鼠(P〈0.05);脾不统血证大鼠心肌CS活性、Cyt-C蛋白及其mRNA表达量显著高于脾气虚证大鼠(P〈 0.05)。结论:大鼠脾气虚证早期,心肌组织能量代谢没有显著变化,随着脾虚病程加长及脾气虚证向脾不统血证的转变,大鼠心肌组织能量代谢功能开始发生障碍,ATP含量显著降低,三羧酸循环和电子传递链相关酶活性及其中重要蛋白和基因的表达都发生了改变,说明大鼠心肌组织在脾虚证发展加重的过程中受到了不利影响,符合中医脾气虚弱,则五脏无所滋养,积渐流于虚弱的理论观点。 展开更多
关键词 脾气虚证 脾不统血证 心肌 线粒体 能量代谢 大鼠
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脾气虚证和脾不统血证模型大鼠脾脏能量代谢的比较研究 被引量:2
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作者 小虎 陈慧 +2 位作者 黄玲 吕斌 金丽琴 《中华中医药学刊》 北大核心 2018年第6期1355-1358,共4页
目的:研究脾气虚证和脾不统血证模型大鼠脾脏组织能量代谢变化及其差异,为科学解释中医脾脏理论内涵提供基础资料。方法:构建脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,测定各组大鼠脾脏ATP含量、线粒体呼吸链复合物(ComplexⅠ、ComplexⅡ、Comp... 目的:研究脾气虚证和脾不统血证模型大鼠脾脏组织能量代谢变化及其差异,为科学解释中医脾脏理论内涵提供基础资料。方法:构建脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,测定各组大鼠脾脏ATP含量、线粒体呼吸链复合物(ComplexⅠ、ComplexⅡ、ComplexⅢ、ComplexⅣ)活性、柠檬酸合酶(CS)活性和mtDNA拷贝数。结果:脾气虚证大鼠和脾不统血证大鼠脾脏ATP含量显著降低,呼吸链复合物活性、CS活性和mtDNA拷贝数较正常大鼠均发生显著改变,脾不统血证大鼠脾脏ATP含量、CS活性和mtDNA拷贝数与脾气虚证大鼠存在显著差异。结论:脾气虚证大鼠和脾不统血证大鼠脾脏组织线粒体能量代谢发生障碍,其柠檬酸循环和氧化磷酸化功能受到损伤,而脾不统血证和脾气虚证线粒体能量代谢障碍程度的不同是二者存在差异的重要原因。本研究认为,对中医脾虚证脾脏组织能量代谢功能损伤的研究能够积极的揭示脾虚证的科学本质。 展开更多
关键词 脾气虚证 脾不统血证 脾脏 线粒体 能量代谢
AdipoRon对2型糖尿病小鼠肾脏损伤的干预作用 预览
5
作者 黄玲 小虎 +2 位作者 陈慧 谢克俭 肖敏 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期568-571,共4页
目的:研究脂联素受体激动剂(AdipoRon)对2型糖尿病小鼠肾脏损伤的干预作用。方法:将40只SPF级雄性C57/BL6小鼠随机分为正常对照组(n=10)和实验组(n=30):实验组给予高糖、高脂饲料喂养,联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病(T... 目的:研究脂联素受体激动剂(AdipoRon)对2型糖尿病小鼠肾脏损伤的干预作用。方法:将40只SPF级雄性C57/BL6小鼠随机分为正常对照组(n=10)和实验组(n=30):实验组给予高糖、高脂饲料喂养,联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病(T2DM)小鼠模型,再随机分为3组(n=10):模型对照(DM)组、低剂量AdipoRon治疗(DM+L)组及高剂量AdipoRon治疗(DM+H)组。检测血清中葡萄糖含量的变化;采用酶联免疫法检测小鼠血清中胰岛素受体(INSR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白质含量;HE染色镜下观察肾组织形态学变化;实时荧光定量PCR法检测肾组织胰岛素促进因子-1(PDX-1)和胰岛素(insulin)mRNA的表达;Western blot检测肾组织内磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)蛋白质;ELISA试剂盒检测小鼠血胰岛素含量。结果:病理学检查表明,AdipoRon可减轻2型糖尿病所致小鼠肾脏损伤。与DM组小鼠比较,DM+H组和DM+L组小鼠血糖、TNF-α水平均显著降低(P<0.05),INSR、IRS-1和p-IRS-1表达显著上升,PDX-1和insulinmRNA表达显著上升(P<0.05,P<0.01)。结论:给予AdipoRon治疗的小鼠血糖和血清TNF-α水平显著降低,IN-SR,IRS-1和p-IRS-1蛋白质含量,PDX-1和insulin mRNA表达均显著上升,表明AdipoRon对2型糖尿病小鼠肾脏损伤有一定的干预作用。 展开更多
关键词 AdipoRon 2型糖尿病 肾脏 胰岛素受体 小鼠
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AdipoRon对小鼠骨骼肌细胞胰岛素敏感性的影响及其机制 预览
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作者 肖敏 小虎 +1 位作者 陈慧 金丽琴 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第4期319-322,共4页
目的:观察脂联素受体激动剂AdipoRon对小鼠成肌细胞株(C2C12)胰岛素敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法:使用马血清将C2C12诱导分化为成肌细胞,分为6组(9个复孔):空白对照组、AdipoRon(脂联素受体激动剂)高剂量组、AdipoRon... 目的:观察脂联素受体激动剂AdipoRon对小鼠成肌细胞株(C2C12)胰岛素敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法:使用马血清将C2C12诱导分化为成肌细胞,分为6组(9个复孔):空白对照组、AdipoRon(脂联素受体激动剂)高剂量组、AdipoRon低剂量组、胰岛素组以及AdipoRon低剂量+PI3K(磷脂酰肌醇3激酶)抑制剂组和胰岛素+PI3K抑制剂组,作用12 h,收集上清检测葡萄糖消耗量,使用CCK8测定细胞增殖。六孔板中将C2C12诱导分化为肌管细胞,加入药物作用12 h,并用RT-PCR法检测GLUT4的mRNA水平。结果:与空白对照组相比,AdipoRon高剂量组、AdipoRon低剂量组、胰岛素组耗糖量均有所增加,具有统计学意义(P〈0.05)。加入PI3K抑制剂组后,耗糖量与空白对照组无统计学意义。与空白对照组相比,AdipoRon高剂量组、AdipoRon低剂量组、胰岛素组细胞均有增殖,但只有胰岛素组具有统计学意义(P〈0.05)。与对照空白组相比,AdipoRon高剂量组、AdipoRon低剂量组、胰岛素组GLUT4mRNA水平均有所提高,具有统计学意义(P〈0.05)。加入PI3K抑制剂组后,GLUT4mRNA水平与空白对照组无统计学意义。结论:AdipoRon能够不影响细胞增殖的情况下增加葡萄糖的消耗量,这可能是通过提高胰岛素敏感性发挥作用的,但具体机制尚待进一步的研究。 展开更多
关键词 胰岛素敏感性 脂联素受体激动剂 PI3K 小鼠成肌细胞株(C2C12)
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口服活性AdipoRon对2型糖尿病小鼠肝脏氧化应激的干预作用 预览
7
作者 肖敏 小虎 +2 位作者 陈慧 蔡强军 谢克俭 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第2期124-127,135共5页
目的:研究口服活性AdipoRon对2型糖尿病小鼠肝脏氧化应激是否有干预作用,为临床应用提供基础资料。方法:将健康雄性C57BL/6小鼠分为正常组(n=8),糖尿病组(n=8),AdipoRon高剂量治疗组(n=8),Adi—poRon低剂量治疗组(n=8)... 目的:研究口服活性AdipoRon对2型糖尿病小鼠肝脏氧化应激是否有干预作用,为临床应用提供基础资料。方法:将健康雄性C57BL/6小鼠分为正常组(n=8),糖尿病组(n=8),AdipoRon高剂量治疗组(n=8),Adi—poRon低剂量治疗组(n=8),以高脂饲料喂养6周后腹腔注射40mg/kg链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病模型,用高、低剂量的口服活性AdipoRon分别对治疗组灌胃治疗10d后,检测相关生化指标,Western—blot法检测肝脏组织中IRS-1蛋白的表达:实时荧光定量PCR检测胰腺组织中PDX—1 mRNA的表达。结果:DM组小鼠血糖值明显高于Nc组(P〈0.05),DM4-L组和DM+H组小鼠血糖值显著低于DM组。DM组小鼠肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性显著低于NC组(P〈0.05),丙二醛(MDA)及一氧化氮合酶(NOS)活性显著高于NC组(P〈0.05);DM+L组和DM+H组SOD、CAT活性明显高于DM组(P〈0.05),MDA及NOS活性显著低于DM组(P〈0.05)。肝脏组织中IRS-1的蛋白表达及胰腺PDX.1mRNA表达显著升高,存在统计学意义(P〈0.05)。结论:口服活性AdipoRon对糖尿病小鼠肝脏组织氧化应激有一定的干预作用,能降低小鼠的血糖水平。 展开更多
关键词 AdipoRon 2型糖尿病小鼠 肝脏 氧化应激
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吡非尼酮对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的影响 预览 被引量:2
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作者 肖敏 小虎 +3 位作者 吕聚坪 史杨 李长西 谢克俭 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期378-382,共5页
目的:研究吡非尼酮对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的影响。方法:选用8周健康雄性SPF级ICR小鼠40只,随机分为4组(n=10):肝纤维化模型组(CCL4组)、吡非尼酮低剂量组(PFD—L组)、吡非尼酮高剂量组(PFD—H组)及正常对照组。CCL4... 目的:研究吡非尼酮对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的影响。方法:选用8周健康雄性SPF级ICR小鼠40只,随机分为4组(n=10):肝纤维化模型组(CCL4组)、吡非尼酮低剂量组(PFD—L组)、吡非尼酮高剂量组(PFD—H组)及正常对照组。CCL4肝纤维化模型采用0.4ml/只10%的CCL4大豆油溶液进行小鼠腹腔注射制备,低剂量、高剂量吡非尼酮干预组在造模后采用120mg/kg,240mg/kg吡非尼酮(PFD)灌胃,正常对照组采用与前三组等量的生理盐水腹腔注射的方法。全自动生化仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP);取肝脏组织HE染色观察组织的病理学变化;荧光定量PCR法测定肝脏中α-平滑肌肌动蛋白(α—SMA)相关基因的表达,酶联反应法检测肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(IV—C)。结果:与正常组相比,CCL4组小鼠肝小叶结构明显破坏,胶原纤维沉积明显,可见假小叶形成;血清ALT、AST、ALP均显著升高(P〈0.05);血清肝纤维化指标HA、LN、IV-C均显著升高(P〈0.05);α-SMA基因的表达水平也显著升高(P〈0.05)。PFD—L组和PFD—H组小鼠AST、ALT、ALP相较于CCL4组明显降低,PFD—L组和PFD—H组小鼠血清肝纤维化指标HA、LN、IV-C相较于CCL4组明显降低,α—SMA基因的表达也受到抑制(P〈0.05)。病理学观察发现,PFD—L组小鼠的肝纤维化程度减轻,胶原纤维减少,仅见少量假小叶;PFD—H组小鼠细胞排列恢复,小叶结构轻度紊乱,未见明显假小叶,恢复效果比PFD—L组好。结论:吡非尼酮对于肝纤维化有一定的治疗作用,其可成为肝纤维化早期干预的新药物。 展开更多
关键词 吡非尼酮 四氯化碳 肝纤维化 肝星状细胞 小鼠
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AdipoRon对2型糖尿病小鼠的治疗及其可能的肝脏机制 预览 被引量:2
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作者 肖敏 小虎 +3 位作者 李长西 吕聚坪 史杨 谢克俭 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第3期198-201,I0001,I0002共6页
目的:观察口服脂联素受体激动剂(Adipo Ron)对2型糖尿病小鼠的治疗效果及对肝脏的影响。方法:40只SPF级雄性C57/BL6小鼠随机分为正常对照组和实验组,实验组给予高糖高脂饲养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立二型糖尿病(T2DM)小... 目的:观察口服脂联素受体激动剂(Adipo Ron)对2型糖尿病小鼠的治疗效果及对肝脏的影响。方法:40只SPF级雄性C57/BL6小鼠随机分为正常对照组和实验组,实验组给予高糖高脂饲养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立二型糖尿病(T2DM)小鼠模型,随机分为模型对照(DM)组,低剂量Adipo Ron治疗(DM+L)组,高剂量Adipo Ron治疗(DM+H)组(n=10)。检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)的变化;HE染色镜下观察肝细胞形态学变化;实时定量荧光PCR法检测肝脏中肝糖类相关基因(PEPCK)的表达。结果:与DM组小鼠比较,DM+H组和DM+L组小鼠ALT、AST、ALP、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)水平均降低(P〈0.05);与DM组小鼠比较,DM+H组小鼠和DM+L组小鼠血清游离脂肪酸(FFA)浓度显著下降(P〈0.05),而肝组织葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)活性DM+L组小鼠显著下降,DM+H组小鼠无显著差异;与DM组小鼠比较,DM+H组小鼠肝组织磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)m RNA表达显著降低(P〈0.05),而DM+L组小鼠无显著差异。结论:给予Adipo Ron治疗的小鼠血糖降低,ALT、AST、ALP的水平及G-6-P和PEPCK的表达下降,表明Adipo Ron对2型糖尿病具有显著的治疗效果,对糖尿病小鼠肝脏有一定的保护作用。 展开更多
关键词 2型糖尿病 脂联素受体激动剂 肝细胞损伤 小鼠
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