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植物组织培养中褐变现象的产生机理及克服方法 预览 被引量:74
1
作者 郭勇 张长远 《广东农业科学》 CAS CSCD 2001年第3期 16-18,共3页
结合近几年研究的新进展,从多酚氧化酶(PPO)的定位、性质及其底物出发,论述了植物组织培养过程中褐变的机理,认为褐变的主要原因是酶促褐变,即由多酚氧化酶催化多酚类物质生成褐色物质所致,褐变与多酚氧化酶的活性及酚类物质的... 结合近几年研究的新进展,从多酚氧化酶(PPO)的定位、性质及其底物出发,论述了植物组织培养过程中褐变的机理,认为褐变的主要原因是酶促褐变,即由多酚氧化酶催化多酚类物质生成褐色物质所致,褐变与多酚氧化酶的活性及酚类物质的含量密切相关,讨论了褐变的影响因子,提出了克服褐变的方法。 展开更多
关键词 植物组织培养 多酚氧化酶 褐变 产生机理 克服法
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提高植物细胞培养法生产次级代谢物产量的方法 预览 被引量:25
2
作者 郭勇 林炜铁 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期 479-482,共4页
介绍了提高植物细胞培养法生产次级代谢物中需要考虑的几个问题,如外植体的选择、高产细胞系的选育、培养条件的优化、培养技术的选择、前体物的添加、诱导剂和抑制剂的使用.
关键词 植物细胞培养 次级代谢产物 产量
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一株抗真菌的解淀粉芽孢杆菌的鉴定及其抗菌性研究 预览 被引量:39
3
作者 陈成 于平儒 《现代食品科技》 EI CAS 2011年第1期 36-39,共4页
本实验室从广州地区土壤中分离得到一株产抗真菌物质的菌株HN06。经检测其对黑曲霉(Aspergillus niger)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)和苦瓜枯萎病菌(cucurbit wilt)均有良好的抑制作用。... 本实验室从广州地区土壤中分离得到一株产抗真菌物质的菌株HN06。经检测其对黑曲霉(Aspergillus niger)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)和苦瓜枯萎病菌(cucurbit wilt)均有良好的抑制作用。经生理生化实验及16S rDNA同源性序列分析,鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌。并对其产生的抗真菌物质的部分性质进行了研究。 展开更多
关键词 抗真菌 解淀粉芽孢杆菌 鉴定
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出芽短梗霉的研究进展 预览 被引量:20
4
作者 郭勇 郑穗平 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期 41-47,共7页
出芽短梗霉是一类类酵母真菌,具有酵母样和真菌菌丝体两种形态.影响其形态的因素有碳源、氮源、离子种类及浓度和pH值等.出芽短梗霉的发酵产物多种多样,如多聚糖、酶、抗真菌素等,通过选育优良菌株可提高发酵产物的产量.
关键词 出芽短梗霉 研究进展 分类 两态性
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银杏黄酮的提取与大孔树脂吸附研究 预览 被引量:16
5
作者 石漫莹 +2 位作者 郭勇 郑穗平 赵树进 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2002年第4期 266-270,共5页
确定了银杏黄酮提取的最佳条件为:料液比1∶50,提取温度80 ℃,提取时间4 h,乙醇浓度60%,超声时间10 min.环己烷和石油醚去除提取液中脂溶性杂质的效果较好.比较了5种大孔吸附树脂对银杏黄酮的吸附及吸附动力学过程,结果表明:LSA-5B和NAK... 确定了银杏黄酮提取的最佳条件为:料液比1∶50,提取温度80 ℃,提取时间4 h,乙醇浓度60%,超声时间10 min.环己烷和石油醚去除提取液中脂溶性杂质的效果较好.比较了5种大孔吸附树脂对银杏黄酮的吸附及吸附动力学过程,结果表明:LSA-5B和NAK-12是银杏黄酮的良好吸附剂. 展开更多
关键词 银杏黄酮 提取 大孔树脂 吸附 脂溶性杂质
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嗜碱芽孢杆菌产碱性纤维素酶研究概况 预览 被引量:10
6
作者 郭成栓 郭勇 《氨基酸和生物资源》 CAS 2007年第1期 35-38,共4页
碱性纤维素酶是重要的洗涤剂添加剂,不仅可以去除衣物上的污渍,还可以软化衣物和增加衣物的鲜艳度。嗜碱芽孢杆菌是生产碱性纤维素酶的主要菌种。本文概述了其编码的碱性纤维素酶的性质,编码酶的基因、基因的克隆、表达以及作为洗涤... 碱性纤维素酶是重要的洗涤剂添加剂,不仅可以去除衣物上的污渍,还可以软化衣物和增加衣物的鲜艳度。嗜碱芽孢杆菌是生产碱性纤维素酶的主要菌种。本文概述了其编码的碱性纤维素酶的性质,编码酶的基因、基因的克隆、表达以及作为洗涤剂添加剂的去污机理,指出了今后的研究方向。 展开更多
关键词 碱性芽孢杆菌 碱性纤维素酶 性质 基因克隆
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稀土元素对银杏悬浮培养细胞生长和次级代谢产物积累的影响 预览 被引量:9
7
作者 张长远 +2 位作者 郑穗平 郭勇 蒋玲兰 《广东农业科学》 CAS CSCD 2002年第5期 29-31,共3页
稀土元素对银杏悬浮培养细胞生长和次级代谢产物积累的影响试验结果表明, 低浓度的硝酸铈铵对银杏细胞的生长影响不大, 高浓度则抑制细胞生长, 10.0 mg/L的硝酸镧对促进细胞生长的效果最好; 硝酸铈铵和硝酸镧对银杏黄酮积累的促进作用... 稀土元素对银杏悬浮培养细胞生长和次级代谢产物积累的影响试验结果表明, 低浓度的硝酸铈铵对银杏细胞的生长影响不大, 高浓度则抑制细胞生长, 10.0 mg/L的硝酸镧对促进细胞生长的效果最好; 硝酸铈铵和硝酸镧对银杏黄酮积累的促进作用不明显, 但能促进银杏萜内酯的积累, 硝酸铈铵的添加浓度以1.0 mg/L为好, 硝酸镧的适宜添加浓度则培养当天为10.0 mg/L、培养第10天为1.0 mg/L. 展开更多
关键词 悬浮培养 细胞生长 次级代谢产物积累 银杏 稀土元素 细胞培养 银杏黄酮 银杏萜内酯
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甲基营养型芽孢杆菌产氨肽酶的发酵优化 预览 被引量:14
8
作者 向军 张金虎 +2 位作者 柴海云 陈伟滨 《中国酿造》 CAS 2012年第5期45-50,共6页
氨肽酶能从多肽链的N端顺序水解并释放氨基酸,广泛应用于食品、工业、医学等领域。该研究利用单因素试验、正交试验及响应面设计试验方法,优化了甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophilus)CC发酵产氨肽酶的条件。其发酵最佳培养... 氨肽酶能从多肽链的N端顺序水解并释放氨基酸,广泛应用于食品、工业、医学等领域。该研究利用单因素试验、正交试验及响应面设计试验方法,优化了甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophilus)CC发酵产氨肽酶的条件。其发酵最佳培养基组成为1%蔗糖、1.5%黄豆饼粉、0.1%氯化钠、0.05%磷酸二氢钾和0.02%硫酸镁。最适发酵条件为初始pH值为8.5,发酵温度37℃,摇床转速180r/min,接种量6%,发酵时间15h。在上述条件下,氨肽酶的产量从优化前的83.09U/mL提高为310.05U/mL,比优化前增加了2.73倍。 展开更多
关键词 甲基营养型芽孢杆菌 氨肽酶 发酵 优化
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真菌诱导子对胡桐悬浮培养细胞产生红厚壳素的影响 预览 被引量:9
9
作者 罗焕亮 郭勇 +3 位作者 代建国 张俊松 许柏球 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期 305-308,共4页
目的探讨真菌诱导子对胡桐悬浮培养细胞产生红厚壳素的影响.方法通过对胡桐叶斑病病菌的分离培养,制成真菌诱导子补加到胡桐细胞悬浮培养基中,考察不同浓度、不同加入时间对胡桐细胞生物量及红厚壳素产量的影响.结果 S-I菌株诱导胡桐CR... 目的探讨真菌诱导子对胡桐悬浮培养细胞产生红厚壳素的影响.方法通过对胡桐叶斑病病菌的分离培养,制成真菌诱导子补加到胡桐细胞悬浮培养基中,考察不同浓度、不同加入时间对胡桐细胞生物量及红厚壳素产量的影响.结果 S-I菌株诱导胡桐CR2细胞合成红厚壳素的最佳浓度为60 mg GE·L-1,诱导子在细胞生长静止期初期(即培养d 18)加入对红厚壳素产量影响最大,可使产量提高27%,并促进了红厚壳素向胞外分泌.结论壳多孢菌的添加能有效提高胡桐细胞悬浮培养体系中红厚壳素的产量. 展开更多
关键词 真菌诱导子 胡桐 悬浮培养细胞 红厚壳素 影响因素
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蚕蛹蛋白酶解制备抗氧化肽的初步研究 预览 被引量:11
10
作者 李高扬 陈亮 《现代食品科技》 EI CAS 2011年第7期 810-814,共5页
将蚕蛹通过粉碎和丙酮脱脂后,得到蚕蛹蛋白粉。用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶酶解蚕蛹蛋白粉,以DPPH清除能力为指标对酶解过程进行分析,结果表明胃蛋白酶对蚕蛹蛋白有较好的酶解效果。然后通过正交优化胃... 将蚕蛹通过粉碎和丙酮脱脂后,得到蚕蛹蛋白粉。用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶酶解蚕蛹蛋白粉,以DPPH清除能力为指标对酶解过程进行分析,结果表明胃蛋白酶对蚕蛹蛋白有较好的酶解效果。然后通过正交优化胃蛋白酶的酶解条件,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性。 展开更多
关键词 蚕蛹蛋白 酶解 抗氧化
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枯草芽孢杆菌培养生产农用抗真菌素初步研究 预览 被引量:7
11
作者 刘煜平 +1 位作者 郭勇 刘治猛 《广东农业科学》 CAS CSCD 2007年第1期 51-54,共4页
对枯草芽孢杆菌BS-06产生抗真菌素的条件进行优化,确定最佳发酵条件为:培养时间为48h,装液量为50mL,初始pH值为8.0,培养基中添加2%麦芽糖、0.2%硝酸钾和1%吐温-80。指出枯草芽孢杆菌BS-06产生的抗真菌素具有较广的抗菌谱,对... 对枯草芽孢杆菌BS-06产生抗真菌素的条件进行优化,确定最佳发酵条件为:培养时间为48h,装液量为50mL,初始pH值为8.0,培养基中添加2%麦芽糖、0.2%硝酸钾和1%吐温-80。指出枯草芽孢杆菌BS-06产生的抗真菌素具有较广的抗菌谱,对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌、节瓜和冬瓜枯萎病菌、苦瓜枯萎病菌均有较好的抗菌效果,有望开发成生物农药来防治农作物病原真菌。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 农用抗生素 抗真菌素 病原真菌
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β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及表达 被引量:7
12
作者 郭成栓 郭勇 《华南理工大学学报:自然科学版》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第12期 112-115,145,共5页
从一株产碱性纤维素酶的短小芽孢杆菌菌株H9中,克隆到了编码葡聚糖内切酶的基因,对其基因序列及酶的结构域进行了分析预测,同时将该酶的基因构建于大肠杆菌表达载体pET20b中,获得重组表达载体pET20b-EglA,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3... 从一株产碱性纤维素酶的短小芽孢杆菌菌株H9中,克隆到了编码葡聚糖内切酶的基因,对其基因序列及酶的结构域进行了分析预测,同时将该酶的基因构建于大肠杆菌表达载体pET20b中,获得重组表达载体pET20b-EglA,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)中进行表达,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测.实验结果表明:该基因大小为1980bp,共编码659个氨基酸,在大肠杆菌中得到了良好的分泌表达;该酶的相对分子质量约为73000,由两个不连续的结构域组成,其一为N-端催化结构域,由糖基水解酶家族9组成,其二为C-端底物结合结构域,由碳水化合物绑定结构域家族3组成,其在不同温度和pH值下的活力和稳定性与原始菌株的比较接近. 展开更多
关键词 葡聚糖内切酶 大肠杆菌 短小芽孢杆菌 基因 克隆 表达
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枯草芽孢杆菌BS-06液体发酵生产农用抑真菌素的初步研究 预览 被引量:8
13
作者 刘煜平 +1 位作者 舒薇 郭勇 《江西农业学报》 CAS 2007年第10期 78-80,91,共4页
对枯草芽孢杆菌BS-06产生抑真菌素的条件进行优化,确定最佳发酵条件为:培养时间48h,初始pH为8.0,装液量为30mL,培养基中添加2%的麦芽糖、0.15%的硝酸钾、0.15%的吐温-80。枯草芽孢杆菌BS-06产生的抑真菌素具有较广的抗菌谱... 对枯草芽孢杆菌BS-06产生抑真菌素的条件进行优化,确定最佳发酵条件为:培养时间48h,初始pH为8.0,装液量为30mL,培养基中添加2%的麦芽糖、0.15%的硝酸钾、0.15%的吐温-80。枯草芽孢杆菌BS-06产生的抑真菌素具有较广的抗菌谱,对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌、节瓜枯萎病菌、冬瓜枯萎病菌、苦瓜枯萎病菌均有较好的抗菌效果,有望开发成生物农药来防治农作物病原真菌。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 农用抗生素 抗真菌素 病原真菌
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胡桐植物中抗HIV香豆素化合物研究进展 预览 被引量:5
14
作者 罗焕亮 郭勇 +2 位作者 代建国 许白球 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2004年第3期 249-253,共5页
Calanolide A及其结构类似物是从藤黄科胡桐属植物中分离的一种吡喃型香豆素类化合物,对HIV-1型病毒的反转录酶(Reverse Transcriptase,RT)有很强且特异的抑制性.该类化合物虽然结构相似但各自对HIV-1病毒的活性差异显著;具有不同于其... Calanolide A及其结构类似物是从藤黄科胡桐属植物中分离的一种吡喃型香豆素类化合物,对HIV-1型病毒的反转录酶(Reverse Transcriptase,RT)有很强且特异的抑制性.该类化合物虽然结构相似但各自对HIV-1病毒的活性差异显著;具有不同于其他非核苷类药物(NNRTIs)对HIV-1的作用机制;与其他NNRTIs一样,该类化合物也可诱导HIV-1病毒的抗药性突变株,但与其他HIV RT药物存在较好的协同性;有报道认为HIV的抗药性与RT一级结构的氨基酸残基的改变有关;为了解决资源问题,目前已有该类化合物化学合成成功的报道.本文综述有关该类化合物研究的最新进展. 展开更多
关键词 香豆素 胡桐植物 HIV 天然药物 病毒 艾滋病
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尖孢镰刀菌生产蒽醌色素的液体发酵条件研究 被引量:7
15
作者 刘清香 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期56-61,共6页
优化了尖孢镰刀菌液体发酵生产蒽醌类红色素的发酵条件。通过单因素实验和正交优化实验,确定最佳产色素发酵培养基为:可溶性淀粉30%,(NH4)2SO43%,MgSO40.3%,KH2PO44%,pH6.0。产色素最适培养条件为:初始pH6.0,装液量20%,接种量10%,吐... 优化了尖孢镰刀菌液体发酵生产蒽醌类红色素的发酵条件。通过单因素实验和正交优化实验,确定最佳产色素发酵培养基为:可溶性淀粉30%,(NH4)2SO43%,MgSO40.3%,KH2PO44%,pH6.0。产色素最适培养条件为:初始pH6.0,装液量20%,接种量10%,吐温-80添加量1%,温度28℃,摇床转速200r/min,发酵周期120h。此条件下,色素效价即可达到8.184U/ml,比优化前提高了1.8倍。国内首次对尖孢镰刀菌所产蒽醌色素进行研究,为其进一步应用奠定基础。 展开更多
关键词 尖孢镰刀菌 蒽醌色素 色素效价 液体发酵 条件优化
定点突变提高豆豉纤溶酶的酶活力和底物特异性的研究 预览 被引量:4
16
作者 郭勇 +1 位作者 罗文华 舒薇 《自然科学进展》 北大核心 2008年第7期 826-832,共7页
以pBE-DFE质粒为模板,采用反向长距离PCR技术对豆豉纤溶酶(Douchi Fibrinolytic Enzyme,DFE)基因进行定点突变,使位于酶的底物结合区第156位的谷氨酸和第166位的甘氨酸分别替换为丝氨酸和丙氨酸,使临近酶的底物结合区的第169位甘... 以pBE-DFE质粒为模板,采用反向长距离PCR技术对豆豉纤溶酶(Douchi Fibrinolytic Enzyme,DFE)基因进行定点突变,使位于酶的底物结合区第156位的谷氨酸和第166位的甘氨酸分别替换为丝氨酸和丙氨酸,使临近酶的底物结合区的第169位甘氨酸残基替换为丙氨酸,获得了三个突变体E156S,G166A和G169A.将含突变基因的表达载体转化枯草杆菌WB800,构建了豆豉纤溶酶基因突变体的表达菌株WB800(E156S);WB800(G166A)和WB800(G166A).将3种表达菌株进行液体发酵培养,结果发现发酵上清液中纤溶酶的纤溶活性为460,790和900U/mL,分别是未突变酶活性(660U/mL)的70%,115%和136%;3种突变酶对合成底物的H—D-Val-Leu—Lys—pNA的酰胺水解活性是未突变酶的17%,125%和121%. 展开更多
关键词 豆豉纤溶酶 定点突变 酶活力 特异性
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一株碱性纤维素酶产生菌的分离、鉴定及酶谱分析 预览 被引量:6
17
作者 郭成栓 欧阳蒲月 +1 位作者 郭勇 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期 57-59,共3页
目的:从土样中分离株碱性纤维素酶高产菌株。方法:利用CMC平板初筛,然后利用摇瓶复筛,筛选酶活力高的菌株,对分离出的一株高产菌株进行了鉴定并对其所产酶进行了酶谱分析。结果:获得一株碱性纤维素酶高产菌株H12,酶活力达到1.96U/ml... 目的:从土样中分离株碱性纤维素酶高产菌株。方法:利用CMC平板初筛,然后利用摇瓶复筛,筛选酶活力高的菌株,对分离出的一株高产菌株进行了鉴定并对其所产酶进行了酶谱分析。结果:获得一株碱性纤维素酶高产菌株H12,酶活力达到1.96U/ml。结论:该菌株呈长杆状、革兰氏染色为阳性、产芽孢;16S rDNA基因序列为1 419bp,与短小芽孢杆菌16S rDNA基因序列具有最高的同源性,基于16S rDNA基因序列的同源性分析以及系统发育分析等方面的多相分类研究,鉴定菌株H12为为短小芽孢杆菌;碱性纤维素酶的酶谱分析只有一条水解条带,酶分子量在75kD左右。 展开更多
关键词 碱性纤维素酶 分离 鉴定 短小芽孢杆菌 酶谱
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聚乙二醇修饰对木瓜凝乳蛋白酶酶学及药物生物学性质的影响 预览 被引量:5
18
作者 舒薇 贺丽苹 +1 位作者 郭勇 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 65-68,共4页
采用活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG-5000)对木瓜凝乳蛋白酶(Cp)进行了共价修饰,修饰产物经毛细管电泳检测与分析表明:主产物为平均每分子Cp偶联3—4个mPEG。长链的低修饰度修饰酶.以此修饰酶为研究对象,进行了Cp在修饰前后的主... 采用活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG-5000)对木瓜凝乳蛋白酶(Cp)进行了共价修饰,修饰产物经毛细管电泳检测与分析表明:主产物为平均每分子Cp偶联3—4个mPEG。长链的低修饰度修饰酶.以此修饰酶为研究对象,进行了Cp在修饰前后的主要酶学、药物生物学性质的比较研究.结果表明:Cp经mPEG,修饰后,Kn^app(酪蛋白为底物)有所增加,但与Cp相比,mPEG1修饰酶的pH稳定性、热稳定性以及抗胰蛋白酶的水解能力却均有增强;药代动力学结果还显示,mPEG1-Cp的体内活性半衰期延长,修饰酶体内半衰期是原酶的1.6倍,表明mPEG1修饰酶具有更好的临床应用前景. 展开更多
关键词 木瓜凝乳蛋白酶 单甲氧基聚乙二醇 化学修饰 酶学及药物生物学性质
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毛细管电泳在食品添加剂检测中的应用 预览 被引量:6
19
作者 韩双艳 +1 位作者 林小琼 吴虹 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期 237-241,共5页
毛细管电泳(CE)具有样品预处理简单、可同时分离测定多组分等优点,在食品分析中的应用日益广泛。综述了近年来毛细管电泳在一系列食品添加剂,包括色素、防腐剂、抗氧化剂、甜味剂等检测中的应用,重点是实际样品的分析。
关键词 毛细管电泳 食品添加剂 检测
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豆豉纤溶酶的定向进化 被引量:4
20
作者 张少平 +1 位作者 陈亮 郭勇 《华南理工大学学报:自然科学版》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期 138-141,146,共5页
为提高豆豉纤溶酶的药用价值,通过易错PCR方法对来源于Bacillus subtilis DC-12的豆豉纤溶酶DFE基因进行突变并构建突变体文库,利用底物H-D-Val-Leu-Lys-pNA对突变体文库进行筛选.通过3轮易错PCR最终获得催化效率提高的突变酶mDFE3.序... 为提高豆豉纤溶酶的药用价值,通过易错PCR方法对来源于Bacillus subtilis DC-12的豆豉纤溶酶DFE基因进行突变并构建突变体文库,利用底物H-D-Val-Leu-Lys-pNA对突变体文库进行筛选.通过3轮易错PCR最终获得催化效率提高的突变酶mDFE3.序列分析表明突变酶mDFE3基因发生了6处碱基突变,其中4处突变发生氨基酸取代,2处为同义突变;通过swiss-model repository模拟突变酶mDFE3的结构,显示3个突变氨基酸位于回环结构上,1个位于α螺旋上;酶动力学测定结果表明突变酶mDFE3的Km值由0.58mmol/L降低至0.45mmol/L,突变酶mDFE3的催化效率(kcat)是野生型的2.57倍. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 豆豉纤溶酶 易错PCR 定向进化 筛选
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