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碳酸饮料对雄鼠生长发育和睾酮分泌作用的研究 预览
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作者 魏锁成 +6 位作者 魏黎敏 张涛杰 杨妍梅 梁浩勤 王欢 赖露菊 郑秧秧 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1163-1168,共6页
将100只28日龄健康雄性小白鼠随机分为5组(n=20),COC-1和COC-2自由饮用50%和100%可口可乐,PEP-1和PEP-2自由饮用50%和100%百事可乐,CG为空白对照,实验持续15 d。于第3、5、7、10、13和15 d随机从每个组抓取3只小鼠断颈采血,4 000 r/mi... 将100只28日龄健康雄性小白鼠随机分为5组(n=20),COC-1和COC-2自由饮用50%和100%可口可乐,PEP-1和PEP-2自由饮用50%和100%百事可乐,CG为空白对照,实验持续15 d。于第3、5、7、10、13和15 d随机从每个组抓取3只小鼠断颈采血,4 000 r/min离心10min,分离血清,无菌采集内脏器官,分别称重;ELISA法测定血清睾酮含量。结果表明至实验第7 d,COC-2和PEP-2组小鼠的体重均高于CG(P〈0.01,P〈0.05),15 d时,实验组小鼠体重均大于对照组(CG);第10 d时COC-1日增重明显低于PEP-2和CG,第15 d各实验组日增重均略小于对照组;第7 d时,COC-1、COC-2和PEP-2两侧睾丸平均重明显高于CG(P〈0.05),到15d实验组睾丸重均大于对照组(CG);PEP-2胃质量在第15 d大于其余4组;第7 d时COC-1、COC-2和PEP-2肾脏质量明显高于PEP-1(P〈0.05);在实验期间各组的心、肝、脾和肺脏均无显著差异;第10d时PEP-1,PEP-2血清睾酮含量显著高于COC-1和CG(P〈0.05),且COC-2和PEP-2在15 d明显高于CG(P〈0.05)。短时期饮用高浓度可口可乐和百事可乐可以促进小鼠生长,轻度促进睾丸发育,增加血清睾酮含量。 展开更多
关键词 碳酸饮料 生长发育 生殖功能 睾酮 小鼠
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西曲瑞克和曲普瑞林对小鼠免疫效应的对比实验研究
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作者 魏锁成 陈鲁杰 +5 位作者 安利锋 魏黎敏 张涛杰 张峰玮 刘建坤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期585-590,共6页
目的探讨促性腺激素释放激素拮抗剂和激动剂抗原主动免疫对小鼠免疫效果、生长与器官发育和生殖内分泌的作用。方法 105只昆明雌鼠随机均分为西曲瑞克组(CET)、曲普瑞林组(TRI)和对照组(CG),在CET-1、CET-2及CET-3小组分别皮下注... 目的探讨促性腺激素释放激素拮抗剂和激动剂抗原主动免疫对小鼠免疫效果、生长与器官发育和生殖内分泌的作用。方法 105只昆明雌鼠随机均分为西曲瑞克组(CET)、曲普瑞林组(TRI)和对照组(CG),在CET-1、CET-2及CET-3小组分别皮下注射曲普瑞林抗原0.1、0.2及0.4 ml,TRI-1、TRI-2及TRI-3小组分别皮下注射西曲瑞克抗原0.1、0.2及0.4 ml,CG组注射生理盐水0.2 ml,各组均连续注射7 d。精确测定体质量,于0、21及35 d从各小组分别抓取5只小鼠眼眶后静脉丛采血,分离血清;同时断颈处死,无菌采集心脏、肝脏、脾脏、肾脏、子宫及卵巢,分别称质量,计算日增质量和内脏指数。ELISA试剂盒测定血清Gn RH抗体、LH和Gn RH质量浓度。结果实验期间CET-3组体质量大于CG组(P〈0.01),CET-1和CET-2组小鼠体质量在12 d和21 d时小于CG组(P〈0.05);8 d后TRI-1小组体质量低于CG组(P〈0.05);TRI-2和TRI-3组分别于16 d和21 d降至低谷。CET-3和TRI-1组肝脏与脾脏质量均明显大于CG(P〈0.05),35 d时CET-3、TRI-1、TRI-2和TRI-3组子宫质量分别减小31.63%、21.55%、63.1%和61.71%;CET-1和CET-2组子宫质量比CG增加40.78%和11.94%。CET和TRI的血清Gn RH抗体浓度高于CG,且TRI组的高于CET组,尤其是TRI-3组更明显(P〈0.01)。21 d各实验组Gn RH质量浓度均低于CG,TRI-3组显著低于CG(P〈0.05)。至35 d,CET-1、CET-2、TRI-2和TRI-3组Gn RH质量浓度显著低于CG(P〈0.05),CET-3组则高于CG。CET-3和TRI-3组血清LH质量浓度显著低于CG。结论西曲瑞克和曲普瑞林主动免疫能剂量依赖性地促进机体产生Gn RH抗体,免疫抑制Gn RH和LH合成与分泌,低剂量免疫注射初期抑制小鼠生长,高剂量后期明显促进肝脏和脾脏的生长发育、抑制子宫发育,且曲普瑞林的作用更加明显。 展开更多
关键词 西曲瑞克 曲普瑞林 生长发育 脏器指数
阿拉瑞林免疫影响FSHR表达及FSHR生物信息学分析 预览 被引量:1
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作者 雷池月 +4 位作者 韦敏 欧阳霞辉 谢坤 陈士恩 魏锁成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期937-941,共5页
目的:探讨阿拉瑞林主动免疫绵羊对垂体和卵巢FSHR表达的作用,分析绵羊FSHR的生物信息学特点。方法:42只5~6月龄母绵羊随机分为6组(n=7),EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别于0 d和14 d皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg;EG-Ⅳ... 目的:探讨阿拉瑞林主动免疫绵羊对垂体和卵巢FSHR表达的作用,分析绵羊FSHR的生物信息学特点。方法:42只5~6月龄母绵羊随机分为6组(n=7),EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别于0 d和14 d皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg,0、7、14、21 d各一次,共4次;对照组在0 d和14 d皮下注射抗原溶媒2.0ml。于70 d(实验结束时)屠宰动物,无菌采集垂体和卵巢。从绵羊垂体中提取FSH,进行PCR扩增、克隆和测序,荧光定量PCR分析,将得到的序列运用生物信息学软件行分析,用Western blot检测卵巢FSHR蛋白表达。结果:实验组垂体FSHR mRNA的2^-ΔΔCt均低于对照组, EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的2^-ΔΔCt值逐渐下降;而且EG-Ⅳ低于EG-Ⅰ,EG-Ⅴ低于EG-Ⅱ,即注射阿拉瑞林4次后FSHR mRNA的2^-ΔΔCt值分别低于注射2次后的值。各实验组卵巢FSHR蛋白表达量随阿拉瑞林注射剂量的增加而逐渐增加,EG-IV和EG-V卵巢FSHR蛋白显著高于对照组相比(P<0.01)。 FSHR序列为1091 bp,开放阅读框(0RF)780 bp,位于41~820位点,其半衰期、理论等电点、不稳定指数、疏水性平均值和脂肪指数分别为1.2 h、5.05、47.75、0.836和30.61。结论:阿拉瑞林免疫可抑制垂体FSHR mRNA的表达,但是增加卵巢FSHR蛋白表达;FSHR蛋白为不稳定的疏水性蛋白。 展开更多
关键词 GNRH激动剂 主动免疫 蛋白表达 生物信息学 绵羊
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阿拉瑞林免疫对FSHR表达与子宫发育的影响 预览
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作者 魏锁成 +2 位作者 安利峰 谢坤 李玉孔 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期77-83,共7页
为研究GnRHa主动免疫对绵羊子宫FSHR表达与分布及子宫发育的作用,探讨GnRHa调节生殖功能的机制,将42只5~6月龄母绵羊(Ovis aries)随机分为6组(n=7)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ动物分别皮下注射阿拉瑞林(alarelin)抗原200、300和400μg... 为研究GnRHa主动免疫对绵羊子宫FSHR表达与分布及子宫发育的作用,探讨GnRHa调节生殖功能的机制,将42只5~6月龄母绵羊(Ovis aries)随机分为6组(n=7)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ动物分别皮下注射阿拉瑞林(alarelin)抗原200、300和400μg,0 d和14 d各1次;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ动物皮下注射alarelin抗原200μg和300μg,0、7、14和21 d各1次;对照组皮下注射药物溶媒,0 d和14 d各1次。于70 d在颈动脉放血处死绵羊,无菌切取两侧子宫角。免疫组织化学SP法染色并进行图像分析,光学显微镜和电子显微镜分别观察子宫显微和超微结构变化。Western blot分析FSHR蛋白表达。结果发现各试验组FSHR蛋白表达量随着alarelin免疫剂量和次数的增多而逐渐增加。EG-Ⅲ和EG-Ⅴ极显著高于对照组(P〈0.01)。FSHR主要分布于子宫内膜细胞和子宫腺上皮细胞的胞质和胞核;EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ灰度值逐渐升高,EG-Ⅲ和EG-V(P〈0.01)显著高于CG,证明alarelin主动免疫能增强子宫FSHR的分布与表达,加大注射剂量和次数作用更明显。EG-I、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的子宫质量、UWT和EET均变小,EG-Ⅲ和EG-Ⅴ显著小于对照组(P〈0.05)。试验组出现不同程度的子宫壁和上皮变薄,细胞胞质减少,腺体数量减少,腺腔缩小,平滑肌细胞及核均变小。线粒体和线粒体嵴减少,微绒毛变短,以EG-Ⅲ最明显。结果表明,Alarelin主动免疫母羊能增强子宫FSHR的分布与蛋白表达,使子宫超微和超微结构明显改变,抑制子宫发育,尤其是子宫内膜的生长显著受阻。 展开更多
关键词 阿拉瑞林 FSH受体 蛋白表达 组织学结构 子宫 母羊
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牛轮状病毒VP7基因荧光定量RT-PCR检测方法的建立 预览 被引量:1
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作者 魏锁成 +1 位作者 车团结 田风林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期151-154,共4页
为建立快速特异的定量检测牛轮状病毒(BRV)VP7基因的荧光定量PCR检测方法,本研究设计扩增BRV VP7基因的特异性引物,将扩增的VP7基因片段(342 bp)克隆于pMD18-T载体中(pMD-VP7),作为重组质粒标准品,建立EvaGreen荧光定量RT-PCR(qR... 为建立快速特异的定量检测牛轮状病毒(BRV)VP7基因的荧光定量PCR检测方法,本研究设计扩增BRV VP7基因的特异性引物,将扩增的VP7基因片段(342 bp)克隆于pMD18-T载体中(pMD-VP7),作为重组质粒标准品,建立EvaGreen荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法。经反应条件优化,结果表明该方法的最低检测量为8.03拷贝/μL。该方法对牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、猪流行性腹泻病毒及牛结核分枝杆菌的检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性。批内和批间重复变异系数均小于3%。采用该方法对12份ELISA阳性样本检测出10份阳性,符合率83.33%。本研究建立的BVR VP7 qRT-PCR检测方法具有特异、灵敏、快速和对标本的检测能力较强等特点,可以用于临床诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 轮状病毒 VP7基因 实时荧光定量PCR
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GnRH激动剂主动免疫母羊对生殖激素分泌的作用 预览 被引量:4
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作者 魏锁成 +6 位作者 欧阳霞辉 董江陵 李琼毅 韦敏 谢坤 张锋 孙建龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 132-136,共5页
目的:探讨GnRH激动剂(GnRHa)主动免疫对绵羊生殖激素合成与分泌的作用,并深入研究GnRH-A免疫调节动物生殖功能的机理。方法:42只5~6月龄母绵羊(Ovis aries)随机分为6组(n=7),EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别于0和14天皮下注射阿拉瑞... 目的:探讨GnRH激动剂(GnRHa)主动免疫对绵羊生殖激素合成与分泌的作用,并深入研究GnRH-A免疫调节动物生殖功能的机理。方法:42只5~6月龄母绵羊(Ovis aries)随机分为6组(n=7),EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别于0和14天皮下注射阿拉瑞林抗原200、300和400μg;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200、300、0、7、14和21天各一次,共4次;对照组在0和14天皮下注射抗原溶媒(除不用阿拉瑞林外,其余成分和制备方法与阿拉瑞林抗原相同)2.0 ml。无菌采集不同时段的血液,分离血清。以ELISA测定血清GnRH抗体浓度,用激素检测试剂盒(ELISA)分别测定血清GnRH、FSH、LH和E2浓度。结果:①阿拉瑞林首次免疫7天后,各实验组的抗体浓度逐渐升高,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别在28、28和35天达到峰值(P〈0.05),EG-IV和EG-V则在在45天达到峰值(P〈0.01),至60天时仍明显高于对照组(P〈0.05)。14~60天间EG-IV和EG-V抗体浓度均高于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ(P〈0.05)。②EG-Ⅰ、EG-Ⅱ的GnRH在21和28天抵谷值(P〈0.05),EG-Ⅲ、EG-Ⅳ和EG-Ⅴ则在45天抵谷值(P〈0.01),且以EG-Ⅴ为最低。谷值之后逐渐上升趋势,70天时达到免疫注射前水平。③实验组血清FSH浓度始终高于对照组(P〈0.05)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ于28、28和35天达到峰值(P〈0.05),而EG-IV和EG-V在60天达到高峰值(P〈0.01)。④实验组绵羊血清LH呈下降趋势,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别在21、21和28天达到谷值(P〈0.01),EG-Ⅳ和EG-Ⅴ在35天达到谷值(P〈0.01)。35天时EG-Ⅳ和EG-Ⅴ低于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ。⑤各组的血清E2含量无显著差异。结论:GnRH激动剂(阿拉瑞林)抗原主动免疫可促进GnRH抗体的生成,抑制母羊GnRH和LH的合成与分泌,增强FSH的合成与分泌,且随着注射剂量和注射次数的增加,这种作用更加明显,而对血清E2无明显影响。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂 阿拉瑞林 生殖激素 绵羊
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社区老年高血压病人LIPS干预效果分析 预览
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作者 魏黎敏 《西北民族大学学报:自然科学版》 2012年第4期74-78,共5页
目的:探讨LIPS模式干预对社区老年高血压病人的KAP影响及预防效果,有效减少高血压病的发病率.方法:53~68岁的高血压患者167例,应用LIPS模式进行干预及社区护理,分析其干预前后KAP、吸烟量、戒烟人数、饮酒量、戒酒人数、食盐摄入量... 目的:探讨LIPS模式干预对社区老年高血压病人的KAP影响及预防效果,有效减少高血压病的发病率.方法:53~68岁的高血压患者167例,应用LIPS模式进行干预及社区护理,分析其干预前后KAP、吸烟量、戒烟人数、饮酒量、戒酒人数、食盐摄入量、收缩压、舒张压、血清胆固醇、血清甘油三酯、体质指数等指标.结果:老年高血压人群的KAP分别从15.5分、5.3分和4.7分升高至26.8分、9.1分和8.3分(P〈0.05);收缩压与舒张压分别从19.56和12.25下降到15.92和10.35(kPa);食盐摄入量由10.9g下降至6.9g;高血压患者吸烟人数与吸烟量、戒酒人数与饮酒量及食盐摄入量显著减少(P〈0.05);体质指数从平均26.4kg/m2降低至21.7kg/m2(P〈0.05);血清胆固醇、血清甘油三酯和体质指数均明显下降.结论:应用LIPS模式干预高血压患者,对该病的预防和控制具有良好效果. 展开更多
关键词 高血压 LIPS模式 干预 社区
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GnRH激动剂主动免疫对GnRHR在腺垂体与子宫表达及分布的作用研究 被引量:3
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作者 魏锁成 +4 位作者 董江陵 韦敏 谢坤 张杰 王江川 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期 558-562,共5页
目的探讨GnRH激动剂主动免疫对绵羊腺垂体与子宫GnRHR表达及分布的影响,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 28只5~6月龄健康母绵羊(Ovis aries)随机分为4组(n=7),实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、实验Ⅱ组(EG-Ⅱ)... 目的探讨GnRH激动剂主动免疫对绵羊腺垂体与子宫GnRHR表达及分布的影响,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 28只5~6月龄健康母绵羊(Ovis aries)随机分为4组(n=7),实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、实验Ⅱ组(EG-Ⅱ)和实验Ⅲ组(EG-Ⅲ)于0 d和14 d分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg(0 d和14 d各1次);对照组(CG)皮下注射2.0 ml药物的溶媒(0 d和14 d各1次)。各组于70 d无菌切取腺垂体和子宫。提取腺垂体总RNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测GnRHR mRNA表达的变化,Western blotting分析子宫GnRHR蛋白表达,免疫组织化学SP法染色检测GnRHR表达的变化。结果 EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ腺垂体GnRHR mRNA表达量均低于对照组,以EG-Ⅲ最小(P〈0.01)。与CG相比,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ子宫GnRHR蛋白表达水平分别减少3.46%、4.90%和24.78%(P〈0.05)。子宫组织中有GnRHR分布主要见于子宫内膜细胞和子宫腺上皮细胞的胞质和胞核,EG-Ⅲ灰度值显著低于CG(P〈0.05)。结论 GnRH激动剂主动免疫可以剂量依赖性地抑制垂体GnRHR mRNA和子宫组织中GnRHR蛋白的表达。GnRHR主要分布在子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞的胞核和胞质,GnRHR激动剂免疫对子宫中GnRHR的分布具有抑制作用。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂 GNRH受体 免疫组织化学 子宫 母羊
阿拉瑞林主动免疫对绵羊垂体GnRHR、FSHR和LHR表达及卵巢GnRHR分布的影响 预览 被引量:3
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作者 魏锁成 +4 位作者 董江陵 谢坤 韦敏 张杰 王江川 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期 114-120,共7页
为探讨促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂主动免疫对绵羊腺垂体GnRH受体(GnRHR)、促卵泡激素受体(FSHR)和促黄体激素受体(LHR)表达及分布的影响,将42只5~6月龄母绵羊分为6组(n=7),即EG-Ⅰ组、EG-Ⅱ组、EG-Ⅲ组、EG-Ⅳ组、EG-... 为探讨促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂主动免疫对绵羊腺垂体GnRH受体(GnRHR)、促卵泡激素受体(FSHR)和促黄体激素受体(LHR)表达及分布的影响,将42只5~6月龄母绵羊分为6组(n=7),即EG-Ⅰ组、EG-Ⅱ组、EG-Ⅲ组、EG-Ⅳ组、EG-Ⅴ组和对照组(CG)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组绵羊分别皮下注射200μg、300μg和400μg阿拉瑞林抗原,分2次皮下注射(0 d和14 d),EG-Ⅳ和EG-Ⅴ组绵羊分别皮下注射200μg和300μg阿拉瑞林抗原,分4次皮下注射(0 d、7 d、14 d和21 d),对照组(CG)绵羊皮下注射2.0 ml溶剂,分2次(0 d和14 d)。于70 d无菌切取腺垂体、子宫及卵巢,提取垂体总RNA,PCR扩增,反转录,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,免疫组织化学SP法染色。结果表明,GnRHR、FSHR和LHR mRNA PCR扩增曲线的起始循环数分别为20、28和24。5个试验组Gn-RHR、FSHR和LHR mRNA值均低于对照,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组的mRNA值逐渐下降;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ组的mRNA值分别低于EG-Ⅰ和EG-Ⅱ组。GnRHR阳性染色主要分布在卵泡细胞以及卵母细胞胞质和胞核及胞膜。各组的染色强度不同,以EG-Ⅲ阳性染色最为明显。阴性对照全部为阴性。显微图像的绿色值和亮度无显著差异,各组灰度值差异显著(P〈0.05),以EG-Ⅱ均为最小,EG-Ⅴ最高。EG-Ⅰ的饱和度最小(P〈0.05),EG-Ⅲ最高。上述结果说明阿拉瑞林抗原免疫抑制垂体GnRHR、FSHR和LHR mRNA表达,GnRHR阳性染色主要在卵母细胞和卵泡细胞的胞核和胞质。阿拉瑞林免疫可抑制卵巢GnRHR的分布与表达,增加注射剂量和次数作用更明显。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂 阿拉瑞林 受体 免疫组织化学 表达 卵巢 绵羊
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Alarelin免疫绵羊对垂体GnRHR、FSHR和LHR基因表达与生殖激素分泌的作用 预览 被引量:3
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作者 魏锁成 +3 位作者 董江陵 谢坤 李琼毅 韦敏 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第10期1137-1142,共6页
目的探讨GnRHa主动免疫对绵羊腺垂体GnRHR、FSHR和LHR表达及生殖激素的作用。方法 42只5~6月龄母绵羊均分为6组。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200、300和400μg,0和14 d各1次;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ皮下注射阿拉瑞林抗原200、30... 目的探讨GnRHa主动免疫对绵羊腺垂体GnRHR、FSHR和LHR表达及生殖激素的作用。方法 42只5~6月龄母绵羊均分为6组。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200、300和400μg,0和14 d各1次;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ皮下注射阿拉瑞林抗原200、300μg,0、7、14和21 d各1次;对照组皮下注射药物的溶媒。于70 d无菌切取腺垂体、子宫及卵巢。实时荧光定量PCR测定GnRHR、FSHR和LHR mRNA的表达。ELISA测定血清GnRH、FSH、LH和E2浓度。结果实验组GnRHR、FSHR和LHR mRNAs的2-(ΔΔCt)值均低于对照组,EG-Ⅳ和EG-Ⅴ的GnRHR、FSHR和LHR mRNA的2-(ΔΔCt)值低于EG-Ⅰ和EG-Ⅱ(P〈0.05)。EG-Ⅰ和EG-Ⅱ血清GnRH在21和28 d达到谷值(P〈0.05),EG-Ⅲ、EG-Ⅳ和EG-Ⅴ则在45d达到谷值(P〈0.01)。实验组血清FSH始终高于对照组(P〈0.05),EG-IV和EG-V在45和60 d达到峰值(P〈0.01)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ血清LH分别在21、21和28 d抵至谷值(P〈0.05),EG-Ⅳ和EG-Ⅴ在35 d抵至谷值(P〈0.01);35 d时,EG-Ⅳ和EG-Ⅴ低于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ。结论阿拉瑞林主动免疫可抑制垂体GnRHR、FSHR和LHR mRNAs表达,促进FSH的合成与释放,降低GnRH和LH的合成与释放,增加抗原的注射剂量和次数,作用更明显。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂 受体 表达 生殖激素 绵羊
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垂体GnRHR、FHS—β和LH—β基因表达与GnRHR生物信息学研究 预览 被引量:2
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作者 魏锁成 韦敏 《生物信息学》 2011年第3期 205-209,共5页
为探讨GnRH—A激动剂主动免疫对雌免垂体GnRHR、FSH—β和LH-βmRNA表达的影响及调节动物生殖功能的分子机理。24只日本大耳白兔分为4组,在EG—Ⅰ、EG-Ⅱ和EG一Ⅲ免的颈背侧注射1007g、1007g和507gGnRH—A抗原,EG—Ⅱ和EG—m20d加强... 为探讨GnRH—A激动剂主动免疫对雌免垂体GnRHR、FSH—β和LH-βmRNA表达的影响及调节动物生殖功能的分子机理。24只日本大耳白兔分为4组,在EG—Ⅰ、EG-Ⅱ和EG一Ⅲ免的颈背侧注射1007g、1007g和507gGnRH—A抗原,EG—Ⅱ和EG—m20d加强注射一次,用荧光定量PCR分析垂体中GnRHR、FSH—β和LH-βmRNA的表达,并测定GnRHR的核苷酸序列。结果表明雌兔垂体中存在GnRHR、FSH—β和LH—β基因。EG-Ⅱ和EG—Ⅲ的GnRHR、FSH—β和LH-βAACt均显著高于EG—Ⅰ(P〈0.05)。GnRHR、FSH—β和LH—β的核苷酸序列的同源性分别为98%、100%和94%:GnRHR中α-螺旋占36.63%,理论等电点(pI)5.01,不稳定指数57.08,脂肪指数29.1,疏水性平均值(GRAVY)0.872,表明该蛋白为不稳定的疏水性信号蛋。GnRH—A能明显的影响兔GnRHR、FSH—β和LH-βmRNA在垂体中的表达,而目重复注射会加大这种变化。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂 GNRH受体 垂体 基因表达 生物信息学 雌兔
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GnRHa主动免疫对幼鼠子宫发育的作用 被引量:2
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作者 魏锁成 +3 位作者 韦敏 李久海 张峰 王瑞博 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期 1067-1070,共4页
目的探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)主动免疫对幼鼠子宫发育的作用。方法 60只昆明雌鼠随机均分为四组,分别颈部皮下注射不同剂量阿拉瑞林抗原,各组均连续注射7 d。在0 d、7 d、14 d和21 d测定体重,于21 d处理小鼠,显微镜观察... 目的探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)主动免疫对幼鼠子宫发育的作用。方法 60只昆明雌鼠随机均分为四组,分别颈部皮下注射不同剂量阿拉瑞林抗原,各组均连续注射7 d。在0 d、7 d、14 d和21 d测定体重,于21 d处理小鼠,显微镜观察子宫的组织结构变化,并用Motic imagles软件测定分析图像数据。结果阿拉瑞林能明显抑制子宫的发育,且剂量越大作用越明显。EG-Ⅲ的UWT明显缩小(P〈0.05);实验组EET均小于对照组(P〈0.05)。EG-Ⅰ子宫腔轻度缩小;EG-Ⅱ子宫腔和腺体管腔缩小,子宫管壁明显变薄;内膜皱襞减少,上皮变薄;EG-Ⅲ子宫壁变薄,子宫腺减少,内膜细胞胞核变小,上皮变薄,胞质明显减少。结论阿拉瑞林主动免疫能显著抑制幼鼠的子宫发育,且连续重复免疫对小鼠具有毒性作用,剂量越大,作用越明显。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂 显微结构 子宫 小鼠
雄兔垂体GnRHR的序列测定与生物信息学分析 预览 被引量:3
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作者 魏锁成 韦敏 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第1期 45-50,共6页
目的探讨GnRH-A激动剂(阿拉瑞林)主动免疫对垂体GnRHR基因表达的影响和生物信息学特性。方法 30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机均分为三组,在EG-Ⅰ和EG-Ⅱ皮下注射1.0 mL(100μg/mL)阿拉瑞林抗原,EG-Ⅱ于20 d以原剂... 目的探讨GnRH-A激动剂(阿拉瑞林)主动免疫对垂体GnRHR基因表达的影响和生物信息学特性。方法 30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机均分为三组,在EG-Ⅰ和EG-Ⅱ皮下注射1.0 mL(100μg/mL)阿拉瑞林抗原,EG-Ⅱ于20 d以原剂量加强免疫1次;从兔垂体中提取总RNA,PCR扩增GnRHR基因,进行反转录、克隆和测序;实时荧光定量PCR分析垂体中GnRHR、FSH-β和LH-βmRNA的表达,用DNAman、Tm-pred、Signal P 3.0、Target P 1.1、Expasy、PSORT II prediction等生物信息学分析软件和在线工具,对GnRHR序列及其蛋白的理化特性、跨膜结构、信号肽和二级结构等进行分析与预测。结果①雄兔GnRHR的核苷酸为1179 bp,同源性达96%。ssDNA分子量362.66×103,dsDNA 726.78×103。②GnRHR二级结构中151(40.27%)个氨基酸组成α-螺旋,15(4.00%)个氨基酸组成β-折叠。③GnRHR由389个氨基酸组成,蛋白质的序列长度为375;理论等电点(pI)5.02,不稳定指数58.08,脂肪指数28.67,疏水性平均值(GRAVY)0.869,表明该蛋白为不稳定的疏水性蛋白。④GnRHR蛋白TM螺旋长度为17~23,有34个强跨膜螺旋区,从内到外有35个螺旋。⑤GnRHR信号肽的概率0.999,最可能的酶切部位在17和18位点。结论阿拉瑞林免疫可以明显降低垂体GnRHR、FSH-β和LH-β基因表达,加强免疫效果更佳。GnRHR是一种含有信号肽序列的不稳定的疏水性跨膜蛋白,具有明显的生物信息学特征。 展开更多
关键词 阿拉瑞林 GNRH受体 垂体 基因表达 生物信息学 雄兔
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GnRH-A促进雌兔FSH与LH分泌及卵巢发育的作用 预览 被引量:8
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作者 魏锁成 韦敏 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第1期13-18,共6页
目的探讨GnRH类似物(GnRH-A)对FSH与LH分泌及卵巢发育的影响,及GnRH-A调节生育的机制。方法 24只雌兔均分为实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、Ⅱ组(EG-Ⅱ)、Ⅲ组(EG-Ⅲ)和对照组(CG)(n=6),实验组分别于颈背侧皮下注射0.1、0.1和0.05 g/L Gn... 目的探讨GnRH类似物(GnRH-A)对FSH与LH分泌及卵巢发育的影响,及GnRH-A调节生育的机制。方法 24只雌兔均分为实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、Ⅱ组(EG-Ⅱ)、Ⅲ组(EG-Ⅲ)和对照组(CG)(n=6),实验组分别于颈背侧皮下注射0.1、0.1和0.05 g/L GnRH-A抗原1.0 mL,EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组于20 d加强注射1次。ELISA法测定血清FSH和LH含量。于70 d无菌切取卵巢,光镜和电镜观察。结果 40 d时EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组血清FSH和LH浓度均达到峰值,明显高于EG-Ⅰ和CG组的FSH和LH(P〈0.01),且EG-Ⅱ组高于EG-Ⅲ组(P〈0.05)。EG-Ⅱ组和EG-Ⅲ组卵巢皮质变厚,卵泡纵径和横径均增大,且与剂量相关。实验组卵巢卵泡数增加,生长加快。细胞核、线粒体和线粒体嵴变大,细胞质中的皮质颗粒和分泌物增多,透明带和微绒毛变大。结论 GnRH-A能促进FSH和LH的合成及卵巢与卵泡的发育,加强注射效果更明显。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素类似物 卵泡刺激素 黄体生成素 卵巢 组织结构
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GnRH-A免疫对GnRHR、FSH-β和LH-β表达及生物信息学特性的影响 预览 被引量:4
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作者 魏锁成 韦敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期 232-235,共4页
目的:探讨GnRH-A主动免疫对垂体GnRHR、FSHβ-和LHβ-基因表达和生物信息学特性的影响,进而研究GnRH-A的作用机理。方法:30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机均分为三组,在EG-Ⅰ和EG-Ⅱ皮下注射1.0 ml(100μg/ml)GnRH-A... 目的:探讨GnRH-A主动免疫对垂体GnRHR、FSHβ-和LHβ-基因表达和生物信息学特性的影响,进而研究GnRH-A的作用机理。方法:30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机均分为三组,在EG-Ⅰ和EG-Ⅱ皮下注射1.0 ml(100μg/ml)GnRH-A抗原,EG-Ⅱ于20天以相同剂量加强免疫一次,对照组不做任何处理。70天颈动脉放血致死实验兔,无菌采集垂体。从兔垂体中提取总RNA,GnRHR,FSHβ-和LHβ-mRNA基因扩增、克隆和测序,实时荧光定量PCR分析mRNA基因的表达。用DNAMAN、Tmpred、SignalP、TargetP、Expasy等生物信息学分析软件和在线工具,对GnRHR序列和蛋白的理化特性、跨膜结构、信号肽及二级结构等进行分析和预测。结果:EG-Ⅰ和EG-Ⅱ的GnRHR mRNA低于对照组(P〈0.01),EG-Ⅱ又低于EG-Ⅰ(P〈0.05);EG-Ⅰ和EG-ⅡFSHβ-mRNA和LHβ-mRNA极显著低于对照组(P〈0.01),EG-Ⅰ与EG-Ⅱ间也具有显著差异(P〈0.05)。GnRHR核苷酸为1 179 bp,与NM-001082738的同源性达96%,核苷酸中含A 28.7%,C 24.9%,G 19.0%,T 27.5%。Gn-RHR的线粒体转运肽、信号肽及转运肽长度发生了明显改变。与NM-001082738的比较显示,GnRHR mRNA的核苷酸、氨基酸、分子量、脂肪指数和平均疏水性均变小,而不稳定指数、α螺旋和β折叠数均增加。结论:GnRH-A免疫可明显降低雄兔垂体GnRHR、FSHβ-和LHβ-mRNA基因的表达,而且对GnRHR的生物信息学特性具有一定的影响,加强免疫作用更明显;GnRHR是一种含有信号肽的不稳定的疏水性跨膜蛋白。 展开更多
关键词 阿拉瑞林 GNRH受体 垂体 基因表达 生物信息学 雄兔
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猪轮状病毒的细胞培养特性与FQ-PCR检测方法的建立 被引量:3
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作者 魏锁成 宋昌军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期373-377,共5页
为了探讨动物轮状病毒的细胞培养特性和分离方法,建立FQ-PCR检测方法,旨在为研发诊断试剂盒和疫苗奠定基础。37℃5%CO_2下用细胞培养液C培养ELISA检测的阳性猪粪便样本,观察细胞形态的变化;用RV感染MA-104细胞,分离纯化病毒,测定VP6基... 为了探讨动物轮状病毒的细胞培养特性和分离方法,建立FQ-PCR检测方法,旨在为研发诊断试剂盒和疫苗奠定基础。37℃5%CO_2下用细胞培养液C培养ELISA检测的阳性猪粪便样本,观察细胞形态的变化;用RV感染MA-104细胞,分离纯化病毒,测定VP6基因序列并分析其同源性,在普通PCR和实时定量PCR的基础上,建立FQ-PCR检测方法。结果,MA-104细胞培养的最佳条件为37℃5%CO_2;接毒后18 h出现细胞膜缩融合、细胞层裂开、细胞核固缩及空泡化等明显的细胞病变(CPE),CPE达到90%时可收毒;分离到1株猪轮状病毒(暂命名为GSPRV01株),得到VP6为1 200 bp,与标准株(AV-55)的同源性为88.50%。 展开更多
关键词 轮状病毒 MA-104细胞 实时荧光定量PCR
不同模式护理查房在护理质量管理中的作用 预览
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作者 《卫生职业教育》 2011年第14期 116-117,共2页
目的通过组织护理人员查房来提高整体护理质量、护士的整体素质及患者的满意度,以期拓展护士的专业知识面、提高其护理技能,为今后制订护理诊断和护理工作计划构建技术平台。方法由护士长组织每日小查房,每周由护理部主任进行大查房,以... 目的通过组织护理人员查房来提高整体护理质量、护士的整体素质及患者的满意度,以期拓展护士的专业知识面、提高其护理技能,为今后制订护理诊断和护理工作计划构建技术平台。方法由护士长组织每日小查房,每周由护理部主任进行大查房,以疑难危重患者护理为中心,以护理并发症为基础,以健康教育为内容,以饮食营养为辅助,必要时进行治疗干预。结果护理人员的业务水平、人际沟通能力、文字写作能力、法律意识、自我保护意识得到提高,以保证医疗安全。结论不同模式护理查房是提高护理质量管理的有效方法,在整体护理工作中得到很好的体现。 展开更多
关键词 护理查房 护理质量管理 整体护理
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GnRH-A免疫母兔对血清LH和FSH浓度的作用 预览
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作者 魏锁成 +1 位作者 韦敏 王明亮 《西北民族大学学报:自然科学版》 2010年第2期 55-59,共5页
目的:探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物性腺激素分泌的作用与机理,为临床应用奠定基础.方法:以EDC-HCL为偶合剂,将GnRH—A与BSA连接为复合物,制备GnRH—A抗原.24只日本大耳白兔分为四组,在实验I组、实验Ⅱ组和实... 目的:探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物性腺激素分泌的作用与机理,为临床应用奠定基础.方法:以EDC-HCL为偶合剂,将GnRH—A与BSA连接为复合物,制备GnRH—A抗原.24只日本大耳白兔分为四组,在实验I组、实验Ⅱ组和实验Ⅲ组兔子的颈背部分别皮下注射1.0mL(100μg,/mL、100μg/mL和50μg/mL)GnRH—A抗原,实验Ⅱ组和实验Ⅲ组于第3周以相同剂量加强注射一次,在实验的不同时间采血、分离血清,用ELISA法测定促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量.结果:EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的FSH浓度在注射后30d开始升高,至40d达到峰值。EG-Ⅱ和EG-Ⅲ明显高于EG-Ⅰ和对照组及EG-Ⅲ(P〈0.05),整个实验期间EG-Ⅰ和对照组无显著差异.EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的LH注射后不断升高,在40d至峰值(P〈0.05),此后降低,30d~50d时EG-Ⅱ明显高于EG-Ⅰ和EG-Ⅲ及对照组.结论:兔体内注射GnRH-A可以明显增强LH和FSH的合成与分泌,加强注射效果更明显,而且与注射剂量相关,持续时问为40d左右. 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素类似物-A(GnRH-A) FSH LH
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GnRH及其受体在兔卵巢和子宫的分布 被引量:6
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作者 魏锁成 +1 位作者 韦敏 谢坤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期846-849,共4页
目的探讨GnRH与其受体(GnRHR)在卵巢和子宫组织中的分布,研究GnRH-A(激动剂Alarelin)主动免疫对GnRH和GnRHR分布的影响。方法 24只日本大耳白雌兔(Oryctolagus cuniculus)随机分为4组(n=6),实验组和对照组。其中实验1组(EG-1... 目的探讨GnRH与其受体(GnRHR)在卵巢和子宫组织中的分布,研究GnRH-A(激动剂Alarelin)主动免疫对GnRH和GnRHR分布的影响。方法 24只日本大耳白雌兔(Oryctolagus cuniculus)随机分为4组(n=6),实验组和对照组。其中实验1组(EG-1)、实验2组(EG-2)和实验3组(EG-3)分别在兔颈背侧皮下注射1.0m(l100μg/ml、100μg/ml和50μg/ml)GnRH-A抗原,EG-2和EG-3于20d以原剂量加强注射1次,102d无菌采集垂体、卵巢和子宫。用SP法染色,图像分析技术进行定位与分析。结果卵巢和子宫均有GnRH和GnRHR阳性细胞分布,主要见于卵母细胞、卵泡细胞、子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞;GnRH-A的剂量不同,GnRH和GnRH阳性细胞的染色强度也不同,即GnRHR和GnRH的表达量不同。GnRH-A能增加GnRH和GnRH的分布与表达,EG-2的作用更为明显。结论卵巢和子宫中均有GnRH和GnRHR细胞分布,GnRH-A免疫能增强GnRH和GnRHR的表达。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素 受体 免疫组织化学
GnRH-A免疫与母兔生殖激素浓度的变化 预览 被引量:4
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作者 魏锁成 +1 位作者 韦敏 赵兴绪 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2010年第3期 247-250,共4页
目的探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物生殖功能调节的效果和作用机制。方法 24只日本大耳白兔分为四组,分别在实验Ⅰ组(EG-I)、实验Ⅱ组(EG-II)和实验III(EG-III)组兔的颈背侧注射1.0 mL(100、100和50μg/mL)GnRH-... 目的探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物生殖功能调节的效果和作用机制。方法 24只日本大耳白兔分为四组,分别在实验Ⅰ组(EG-I)、实验Ⅱ组(EG-II)和实验III(EG-III)组兔的颈背侧注射1.0 mL(100、100和50μg/mL)GnRH-A抗原,实验II组和实验III组于第3周以原剂量加强注射一次,用ELISA法测定血清GnRH抗体效价、促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量。结果注射GnRH-A后10 d实验组兔均出现GnRH抗体,而对照组未检测到;EG-I在第30天达到高峰,而EG-II和EG-III于40~50 d至峰值,但在实验结束时(70 d)实验组均高于对照组,40~70 d时EG-II显著高于EG-I和EG-III。30~50 d时EG-II的LH明显高于EG-I和EG-III及对照组。EG-II和EG-III的FSH浓度在40 d达到峰值,但EG-II高于EG-I、对照组及EG-III,EG-I和对照组无显著差异。结论兔体内注射GnRH-A可以明显提高GnRH抗体效价,增强LH和FSH的合成与分泌,加强注射效果更明显,且与注射剂量相关,持续时间为40 d左右。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素类似物 促卵泡刺激素 促黄体生成素 母兔
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