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多发性内分泌腺瘤病2A型家系RET基因突变筛查的临床意义
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作者 丁燕 冯俊 《肿瘤学杂志》 CAS 2019年第3期234-238,共5页
[目的]探讨多发性内分泌腺瘤病2A的临床诊治特点及RET原癌基因检测的意义。[方法]对1个MEN2A家系进行家系调查,并提取外周血进行RET原癌基因测序和降钙素检测,并绘制家系图。[结果] 10名家族成员均存在RET原癌基因第11外显子第634位点TG... [目的]探讨多发性内分泌腺瘤病2A的临床诊治特点及RET原癌基因检测的意义。[方法]对1个MEN2A家系进行家系调查,并提取外周血进行RET原癌基因测序和降钙素检测,并绘制家系图。[结果] 10名家族成员均存在RET原癌基因第11外显子第634位点TGC→TAC杂合错义突变,即p.C634Y突变,其中病理确诊MEN2A患者7例,另3名成员为该基因突变携带者。家系分析显示Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ代中均有基因突变者,并符合单基因显性遗传病的传递规律。经随访发现,接受手术4例患者术后降钙素及CEA升高,其中3例B超示甲状腺肿块,1例甲状腺残留。3名基因突变携带者中,2名降钙素升高,1名经B超示双侧甲状腺小结节,但降钙素水平正常。[结论]对MEN2A家系进行RET基因测序和降钙素检测,有利于早期诊断以改善预后;对无症状的RET基因突变携带者,应根据其降钙素水平,实施个体化的预防性甲状腺全切除除或严密随访观察。 展开更多
关键词 多发性内分泌腺瘤病2A型 RET原癌基因 突变
林奇综合征临床诊断、筛查与治疗的研究进展 预览
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作者 冯俊 +3 位作者 姚俊 魏志平 徐欣华 吕小锦 《癌症进展》 2018年第12期1461-1464,共4页
林奇综合征 (LS) 是最常见的遗传性肿瘤综合征, 其阳性患者患结直肠癌、 子宫内膜癌以及胃癌的风险增高.LS是指存在错配修复基因缺失的个体, 包括已经因错配修复基因突变而发生肿瘤或未发生肿瘤的个体.由于中国对LS的研究起步较晚, ... 林奇综合征 (LS) 是最常见的遗传性肿瘤综合征, 其阳性患者患结直肠癌、 子宫内膜癌以及胃癌的风险增高.LS是指存在错配修复基因缺失的个体, 包括已经因错配修复基因突变而发生肿瘤或未发生肿瘤的个体.由于中国对LS的研究起步较晚, 目前并未形成完整的诊疗标准或指南, 所以主要参考国外已经形成的标准或指南.但由于人种差异, 极易造成误诊和漏诊现象.本文就LS的遗传基础、 临床分型以及目前诊断策略、 筛查方式、 临床治疗手段进行文献综述. 展开更多
关键词 林奇综合征 结直肠癌 错配修复
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浙江省温岭市2011~2016年大肠癌早诊早治筛查结果分析 被引量:1
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作者 丁燕 冯俊 +4 位作者 姚俊 魏志平 吕小锦 徐欣华 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期652-655,共4页
[目的]分析浙江省温岭市大肠癌筛查和早诊早治工作开展情况。[方法]根据《大肠癌早诊早治项目技术方案》,采用危险度评估问卷调查和免疫法大便隐血试验(FOBT)检查相结合的方法进行大肠癌初筛,对初筛结果阳性的高危人群采用电子肠镜作... [目的]分析浙江省温岭市大肠癌筛查和早诊早治工作开展情况。[方法]根据《大肠癌早诊早治项目技术方案》,采用危险度评估问卷调查和免疫法大便隐血试验(FOBT)检查相结合的方法进行大肠癌初筛,对初筛结果阳性的高危人群采用电子肠镜作进一步检查。[结果]2011年12月1日-2016年6月30日对温岭市296个村进行筛查,完成初筛36 757人,初筛顺应性为46.34%(36757/79314)。初筛阳性2673例,其中1039人接受肠镜检查,肠镜检查顺应性为38.87%(1039/2673)。共检出早期大肠癌14例(乙状结肠癌7例,直肠癌7例),检出率为1.35%(14/1039)。肠道腺瘤287例,增生性息肉68例,结肠溃疡3例,检出率分别为27.62%(287/1039)、6.54%(68/1039)和0.29%(3/1039)。男性大肠肿瘤的检出率高于女性(P〈0.01)。随着年龄增长,早期大肠癌的检出率明显增加(P〈0.01)。[结论 ]开展大肠癌早诊早治筛查,有利于早期发现大肠癌及癌前病变。 展开更多
关键词 大肠癌 早诊早治 筛查 浙江
检测结直肠癌患者外周血CEA mRNA和CEA水平的临床意义
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作者 冯海洋 范永田 《江苏医药》 CAS 2018年第12期1435-1438,共4页
目的探讨检测结直肠癌患者外周血癌胚抗原(CEA)mRNA和CEA水平的临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应和微粒酶免疫法分别检测57例结直肠癌患者外周血CEA mRNA和CEA水平。CEA mRNA正常值为0copies/μl,CEA正常值为0~5ng/ml;高于正常... 目的探讨检测结直肠癌患者外周血癌胚抗原(CEA)mRNA和CEA水平的临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应和微粒酶免疫法分别检测57例结直肠癌患者外周血CEA mRNA和CEA水平。CEA mRNA正常值为0copies/μl,CEA正常值为0~5ng/ml;高于正常值即为表达阳性。分析结直肠癌患者外周血CEA mRNA和CEA水平与Dukes病理分期和生存率的关系。结果 57例结直肠癌患者外周血CEA mRNA阳性率为42.11%,CEA阳性率为43.86%。结直肠癌患者外周血CEA mRNA阳性表达与其病理分期密切相关(P<0.01),CEA阳性表达与病理类型、浸润深度、病理分期均密切相关(P<0.05)。外周血CEA mRNA和CEA阳性结直肠癌患者生存率低于正常患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血CEA mRNA和CEA水平检测可为评估结直肠癌患者病情和预后提供有益的参考。 展开更多
关键词 结直肠癌 癌胚抗原
胃癌患者血清FAS、CEA、CA72-4水平变化及其临床诊断价值 被引量:3
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作者 魏志平 +2 位作者 谢英园 姚俊 胡哲 《中国医师杂志》 CAS 2017年第9期1358-1360,1365共4页
目的分析胃癌患者血清脂肪酸合酶(FAS)、癌胚抗原(CEA)及糖类抗原72-4(CA72-4)水平变化及其临床诊断价值。方法选择2016年1月至2016年12月在医院接受治疗的胃癌患者45例、胃良性肿瘤患者45例,健康体检者45例,分别对三组FAS、CEA... 目的分析胃癌患者血清脂肪酸合酶(FAS)、癌胚抗原(CEA)及糖类抗原72-4(CA72-4)水平变化及其临床诊断价值。方法选择2016年1月至2016年12月在医院接受治疗的胃癌患者45例、胃良性肿瘤患者45例,健康体检者45例,分别对三组FAS、CEA、CA72-4进行检测分析。结果胃癌组患者的FAS、CEA、CA72-4水平[(12.73±5.48)mg/L、(31.36±14.51)ng/ml、(39.32±18.76)U/ml]均高于胃良性肿瘤组[(2.26±1.15)mg/L、(3.24±1.47)ng/ml、(3.75±1.69)U/ml]和正常对照组[(1.83±0.92)mg/L、(2.71±1.54)ng/ml、(3.13±1.82)U/ml],差异有统计学意义(P〈0.05);胃癌组淋巴转移患者的FAS、CEA、CA72-4水平[(13.58±6.09)mg/L、(36.25±11.54)ng/ml、(41.31±13.67)U/ml]高于无淋巴转移的患者[(9.21±5.42)mg/L、(28.38±9.72)ng/ml、(26.75±11.86)U/ml],差异有统计学意义(P〈0.05);胃癌组FAS、CEA、CA72-4单独检测敏感度低于联合检测,胃癌组FAS、CEA、CA72-4单独检测特异度高于联合检测,差异有统计学意义(P〈0.05);胃癌组淋巴结转移患者FAS、CEA、CA72-4单独检测敏感度均低于联合检测,FAS、CEA、CA72—4单独检测特异度高于联合检测,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论FAS、CEA、CA72-4对胃癌诊断及判断淋巴结转移有一定参考意义。 展开更多
关键词 胃肿瘤/代谢/诊断 脂肪酸合成酶复合物/代谢 癌胚抗原/代谢 抗原 肿瘤相关 碳水化合物/代谢
Akt抑制剂哌立福新通过减少乳酸生成抑制胃癌细胞增殖与迁移
6
作者 林伟仁 庞梦霞 +3 位作者 朱锋 杨幼萍 曾玲晖 《肿瘤学杂志》 CAS 2017年第5期394-400,共7页
[目的]探究Akt抑制剂哌立福新对胃癌细胞增殖、凋亡及迁移的作用及其可能机制。[方法]采用不同浓度哌立福新处理胃癌MGC803和SGC7901细胞。细胞增殖采用磺酰罗丹明B法检测,流式细胞仪Annexin V-/PI双染法检测细胞凋亡,细胞迁移和侵袭分... [目的]探究Akt抑制剂哌立福新对胃癌细胞增殖、凋亡及迁移的作用及其可能机制。[方法]采用不同浓度哌立福新处理胃癌MGC803和SGC7901细胞。细胞增殖采用磺酰罗丹明B法检测,流式细胞仪Annexin V-/PI双染法检测细胞凋亡,细胞迁移和侵袭分别采用细胞划痕实验法和Transwell小室实验检测,乳酸含量的测定采用ELISA法,以蛋白印迹法检测糖酵解通路相关蛋白水平的变化。[结果]哌立福新在2.0μmol/L浓度剂量时即能有效抑制胃癌细胞MGC803和SGC7901细胞增殖。经哌立福新低中高剂量(2.0、10.0、20.0μmol/L)处理后,MGC803细胞凋亡明显增加(P〈0.05)。划痕间距分别为407.2±34.4μm,657.2±49.2μm和910.8±51.4.1μm,与对照组240.3±27.8μm相比均有显著性差异(P〈0.05),且呈量效关系。Transwell小室实验显示每个视野下侵袭的MGC803细胞数对照组为2584±228个,而经哌立福新低中高剂量处理后分别为2052±158(P〈0.05),1410±105(P〈0.01)和887±87(P〈0.01),与对照组相比均有显著性差异,并呈剂量依赖性。不同剂量哌立福新均可显著性降低培养基和细胞中乳酸含量,同时,蛋白质印迹结果提示哌立福新显著性抑制与糖酵解乳酸生成相关的乳酸脱氢酶-A,葡萄糖转运蛋白(Glucose transporter,GLUT)1,GLUT4和IGF-1的表达(P〈0.05),且呈剂量依赖性。[结论]哌立福新能有效抑制MGC803细胞迁移与侵袭,其机制与降低糖酵解从而减少乳酸生成相关。 展开更多
关键词 Akt抑制剂 哌立福新 胃癌细胞 增殖 迁移 糖酵解
EZH2抑制剂GSK126对Neuro-2a细胞增殖分化的影响及其可能机制 预览
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作者 林伟仁 朱锋 +2 位作者 陈亚天 曾玲晖 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期289-290,共2页
神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是常见的儿童恶性肿瘤,在手术、放化疗及介入等多种手段综合治疗下,总体疗效仍然极差。近年来研究发现,果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)能抑制相关抑癌基因,明显增加... 神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是常见的儿童恶性肿瘤,在手术、放化疗及介入等多种手段综合治疗下,总体疗效仍然极差。近年来研究发现,果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)能抑制相关抑癌基因,明显增加神经母细胞瘤发生、发展的风险。GSK126是一种新型的选择性EZH2抑制剂,其在实体瘤方面的药效探究目前相对较少。 展开更多
关键词 EZH2抑制剂 GSK126 Neuro-2a细胞 MTOR信号通路 凋亡 分化
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经肛门微创手术治疗直肠肿瘤疗效分析
8
作者 魏志平 +1 位作者 姚俊 胡哲 《中国基层医药》 CAS 2017年第12期1782-1785,共4页
目的 探讨经肛门微创手术治疗直肠肿瘤的疗效.方法 选择100例直肠肿瘤患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组各50例.对照组行传统经腹根治术,观察组行经肛门微创手术.比较两组患者的手术效果.结果 观察组手术时间、住院时间、术后进... 目的 探讨经肛门微创手术治疗直肠肿瘤的疗效.方法 选择100例直肠肿瘤患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组各50例.对照组行传统经腹根治术,观察组行经肛门微创手术.比较两组患者的手术效果.结果 观察组手术时间、住院时间、术后进食时间均短于对照组[(78.45±12.34)min比(98.24±25.31)min,(3.12±0.43)d比(7.53±1.12)d,(1.23±0.30)d比(3.56±0.57)d](t=4.970、25.992、25.578,均P〈0.05),术中出血量少于对照组[(11.23±2.31)mL比(26.58±4.04)mL](t=23.323,P〈0.05);观察组术后并发症发生率明显低于对照组[6.00%(3/40)比20.00%(10/50)](x2=4.332,P〈0.05);手术后,观察组生活质量评分高于对照组高[(57.82±6.84)分比(48.23±4.50)分](t=8.282,P〈0.05);随访1年结果显示,两组患者转移率、复发率、生存率差异均无统计学意义[2.00%(1/50)比6.00%(3/50),0.00%(0/50)比4.00%(2/50),98.00%(49/50)比92.00%(46/50)](x2=1.042、2.041、1.895,均P〉0.05).结论 在直肠肿瘤患者中给予经肛门微创手术治疗效果显著,值得应用推广. 展开更多
关键词 直肠肿瘤 外科手术 微创性 结直肠外科手术
zeste 基因增强子同源物2抑制剂 GSK126对前列腺癌细胞的作用及机制 预览
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作者 林伟仁 陈亚天 +2 位作者 曾玲晖 朱锋 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期356-363,共8页
目的:探究zeste基因增强子同源物2( EZH2)抑制剂GSK126对前列腺癌细胞增殖、凋亡及迁移的作用及机制。方法:以磺酰罗丹明B实验考察GSK126对PC-3和DU145细胞增殖的影响,以Annexin V/PI双染法考察GSK126对细胞凋亡的影响,以Transw... 目的:探究zeste基因增强子同源物2( EZH2)抑制剂GSK126对前列腺癌细胞增殖、凋亡及迁移的作用及机制。方法:以磺酰罗丹明B实验考察GSK126对PC-3和DU145细胞增殖的影响,以Annexin V/PI双染法考察GSK126对细胞凋亡的影响,以Transwell实验和细胞划痕实验观察GSK126对细胞迁移和侵袭的影响,以荧光定量PCR检测GSK126对肿瘤相关基因mRNA表达的影响,以蛋白质印迹法检测相关蛋白水平的变化。结果:GSK126仅在50.0μmol/L的高浓度剂量时能有效抑制PC-3和DU145细胞增殖,并促进其凋亡。经GSK126小、中、大剂量(5.0、20.0、50.0μmol/L)处理后,PC-3细胞划痕间距分别为(247.2±24.4)μm、(347.2±19.2)μm、(410.5±18.1)μm,与对照组(171.3±17.8)μm比较差异均有统计学意义(均P<0.05),且呈一定的量效关系。 Transwell实验结果显示,每视野下侵袭的PC-3细胞数对照组为322.0±17.9,而经GSK126小、中、大剂量处理后分别为198.3±15.4、82.7±6.2、30.2±4.1,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。 GSK126处理前列腺癌细胞后,与上皮细胞间质转化相关的E-cadherin基因mRNA表达量上升,N-cadherin、Vimentin基因mRNA表达量下降,但Snail、Fibronectin、VEGF-A基因的mRNA表达无变化。同时,蛋白质印迹法检测结果提示,E-cadherin 的蛋白表达量增加,而 VEGF-A 蛋白表达量无明显改变。DU145细胞上述实验结果相似。结论:GSK126能有效抑制PC-3细胞和DU145细胞迁移和侵袭,其机制与抑制上皮细胞间质转化相关。 GSK126可作为潜在的前列腺癌临床治疗用药。 展开更多
关键词 基因 肿瘤抑制/药物作用 前列腺肿瘤/药物疗法 肿瘤蛋白质类/生物合成 蛋白甲基转移酶类 细胞运动 细胞增殖 细胞凋亡 细胞系 肿瘤
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多发性内分泌腺瘤2A型双侧肾上腺嗜铬细胞瘤一期切除术的护理 预览 被引量:3
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作者 赵学燕 郑海燕 +7 位作者 杜文君 刘乃芳 许芳 倪卫红 陈振光 马炬明 戚晓平 《护理与康复》 2015年第2期138-140,共3页
总结多发性内分泌腺瘤2A型双侧肾上腺嗜铬细胞瘤一期切除术患者的护理。术前建立家族健康管理档案,进行RET基因检测,严格执行降压、扩容护理;术后加强生命体征监测,保持各引流管引流通畅,积极预防并发症,制定个体化的皮质激素替代方案... 总结多发性内分泌腺瘤2A型双侧肾上腺嗜铬细胞瘤一期切除术患者的护理。术前建立家族健康管理档案,进行RET基因检测,严格执行降压、扩容护理;术后加强生命体征监测,保持各引流管引流通畅,积极预防并发症,制定个体化的皮质激素替代方案、详细的随访计划及遗传咨询指导。14例患者手术顺利,除1例在术前排便时发生高血压危象、2例术中发生血压波动需紧急处置外,其余患者围手术期均未发生并发症。 展开更多
关键词 多发性内分泌腺瘤2A型 嗜铬细胞瘤 肾上腺切除术 护理
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RET基因C634Y突变MEN2A家系甲状腺髓样癌合并乳头状癌一例 被引量:2
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作者 冯俊 +1 位作者 戚晓平 黄海涛 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期398-399,共2页
患者男,41岁。上腹隐痛3d,于2011年11月28日入院。患者3d前无明显诱因出现上腹部隐痛,间断性为主,偶伴有左手小指及无名指麻木。
关键词 甲状腺肿瘤 诊断 基因 突变
多发性内分泌腺瘤2A 型家系的临床筛查及预防性甲状腺全切除术 被引量:5
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作者 赵坚强 戚晓平 +9 位作者 楼建林 陈振光 郭良 余秀华 陈波 金杭阳 王可敬 韩春 张咸宁 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2014年第2期145-149,共5页
目的:探讨多发性内分泌腺瘤2A型(multiple endocrine neoplasia type 2A,MEN 2A)家系筛查的临床意义和进行预防性甲状腺全切除的可行性和有效性。方法对一个MEN 2A家系行家系调查,提取外周血行RET原癌基因和降钙素检测,并对无症... 目的:探讨多发性内分泌腺瘤2A型(multiple endocrine neoplasia type 2A,MEN 2A)家系筛查的临床意义和进行预防性甲状腺全切除的可行性和有效性。方法对一个MEN 2A家系行家系调查,提取外周血行RET原癌基因和降钙素检测,并对无症状的基因突变携带者行预防性甲状腺全切除术。结果基因检测该家系为RET原癌基因第11外显子第634位点TGC→CGC杂合错义突变,即p.C634R突变,与MEN 2A患者临床表型-甲状腺髓样癌( medullary thyroid carcinoma ,MTC)或MTC伴肾上腺嗜铬细胞瘤( pheochromocytom ,PHEO)完全共分离。6例MEN 2A中,男4例,女2例;首次诊断平均年龄33.5(19~65)岁;MTC平均直径2.3(0.7~5.2)cm。其中3例以颈部占位或伴腹泻就诊,接受了不规范的甲状腺切除术或+双侧Ⅵ区淋巴结清扫或+侧颈部淋巴结清扫;T2N1bM02例,T3N1bM01例。3例无症状者中2例行预防性甲状腺切除+双侧Ⅵ区淋巴结清扫,另1例行双侧甲状腺全切除+双侧Ⅵ区淋巴结清扫+右侧颈淋巴结清扫术;T1N0M02例,T1N1bM01例。仅见1例无症状者伴发左侧PHEO(1/6)并优先于MTC接受了左侧PHEO切除。6例术后4例降钙素仍升高,其中有症状中的1例( T3N1bM0)先后接受了4次颈部手术,仍于首次术后130个月出现多处骨转移伴骨痛(T3N1bM1),服用范得他尼2个月后骨痛消失,至今带瘤生存32个月;另外有症状和无症状者各1例(T2N1bM0和T1N1bM0),分别在首次术后6、7个月接受了再次手术,包括另1例未再次手术的有症状者(T2N1bM0),3例至今分别已22、22和20个月,降钙素仍升高。其余2例无症状患者(T1N0M0)术后已随访20个月,降钙素均<2.0 ng/L。结论对MEN 2A家系进行临床筛查,有利于早期诊断和治疗,改善预后;术前整合RET基因和降钙素检测,对无症状基因突变携带者进行预防性全甲状腺切除是可行、有效的� 展开更多
关键词 多发性内分泌瘤2A型 髓样癌 RET原癌基因 预防性甲状腺切除术
多发性内分泌腺瘤2A型家系筛查和RET基因突变研究 被引量:1
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作者 戚晓平 +5 位作者 丁燕 杨仁 冯俊 陈振光 郑海燕 黄海涛 《中华全科医师杂志》 2014年第2期111-115,共5页
目的 探讨多发性内分泌腺瘤2A型(MEN2A)的临床诊治特点及RET基因检测的意义.方法 对1976年6月至2013年2月间诊治的1个MEN2A家系共21例家庭成员进行系统家系调查,提取外周血进行RET基因和血清基础降钙素(Ct)水平检测.结果 基因检测... 目的 探讨多发性内分泌腺瘤2A型(MEN2A)的临床诊治特点及RET基因检测的意义.方法 对1976年6月至2013年2月间诊治的1个MEN2A家系共21例家庭成员进行系统家系调查,提取外周血进行RET基因和血清基础降钙素(Ct)水平检测.结果 基因检测家系内共10例家庭成员存在RET基因第11外显子p.C634Y 突变(10/21),与临床完全符合.10例MEN2A患者中,男8例,女2例.7例甲状腺髓样癌(MTC)首次平均诊断年龄34.3(21-55)岁;肿瘤平均最大直径2.8(0.8-3.7)cm,5例接受了不规范的甲状腺切术,2例接受双侧甲状腺切除+改良的双侧颈部淋巴结清扫,其中1例同期伴发甲状腺乳头状癌.平均随访172.4(10-440)个月,术后4例血清Ct水平升高,3例正常.7例中3例伴发双侧肾上腺嗜铬细胞瘤(PHEO;2例同时,1例异时),平均首次诊断年龄48.3(42-58)岁,肿瘤平均最大直径7.0(4.4-8.5)cm;均接受了保留肾上腺皮质功能的PHEO切除术.分别随访15、17、120个月,未发生肾上腺皮质功能低下和复发、转移.通过家系调查发现的其中3例无症状RET基因突变携带者,平均年龄11.7(8-15)岁,均已随访17个月,Ct水平仍均轻度升高,均拒绝手术.结论 提高对MEN2A的认识和认知水平,整合临床筛查和RET基因检测,有利于MEN2A的及早诊断和规范化治疗,可减少手术并发症和提高远期治愈率. 展开更多
关键词 多发性内分泌腺瘤2a型 髓样 甲状腺 嗜铬细胞瘤 肾上腺 原癌基因 RET
整合素连接激酶基因敲降和黑色素瘤分化相关基因过表达慢病毒载体构建和鉴定 预览 被引量:2
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作者 杨幼萍 丁燕 +7 位作者 王继 曾玲晖 林红霞 朱杨丽 吴宏卫 王若燕 张建民 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期193-199,共7页
目的:建立整合素相关激酶( ILK)基因敲降和黑色素瘤分化相关基因( mda7)过表达慢病毒包装表达系统。方法:针对人ILK基因序列,设计基因敲降靶点序列(A、B、C),通过限制性内切酶HpaⅠ和XhoⅠ双酶切、T4 DNA连接酶连接,将ILK插... 目的:建立整合素相关激酶( ILK)基因敲降和黑色素瘤分化相关基因( mda7)过表达慢病毒包装表达系统。方法:针对人ILK基因序列,设计基因敲降靶点序列(A、B、C),通过限制性内切酶HpaⅠ和XhoⅠ双酶切、T4 DNA连接酶连接,将ILK插入慢病毒载体pSicoR-eGFP,构建siILK-pSicoR-eGFP重组质粒;根据人mda7基因序列,设计引物扩增mda7全长,并插入慢病毒载体pLVX-Puro,构建mda7-pLVX-Puro重组质粒。经双酶切及测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒四质粒系统共转染人胚肾细胞系293 T细胞,进行慢病毒包装并测定病毒滴度、观察感染效率。各组病毒载体转染PC-3细胞后,用定量PCR和蛋白质印迹法检测ILK基因和mda7 mRNA转录水平及蛋白表达水平。通过MTT法和Transwell实验考察ILK和mda7对PC-3细胞增殖和迁移的影响。结果:成功构建ILK基因敲降及mda7过表达的慢病毒载体,四质粒系统共转染293 T细胞后可见大量绿色荧光染色阳性细胞。浓缩病毒后293 T细胞的感染效率在90%以上,并能高效率感染PC-3前列腺癌细胞。 ILK-A-pSicoR-eGFP和ILK-B-pSicoR-eGFP组ILK干扰效果最佳(P<0.05),mda7的表达水平远高于对照组(P<0.05),且持续稳定表达至少1个月。 ILK和mda7对PC-3细胞的增殖在96 h内有明显抑制作用,并对其迁移亦有显著抑制(均P<0.05)。结论:成功构建并鉴定人ILK 基因敲降和mda7过表达慢病毒载体,可为探讨ILK和mda7基因在肿瘤细胞中的生物学功能提供良好工具,也为探索安全、高效的肿瘤治疗途径奠定实验基础。 展开更多
关键词 整合素类 磷酸转移酶类 前列腺肿瘤 白细胞介素类 基因 肿瘤抑制 慢病毒属 遗传学 遗传载体 基因表达
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多发性内分泌腺瘤2A型一家系中的原癌基因RET p.C618R突变 被引量:2
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作者 陈振光 戚晓平 +7 位作者 费军 余秀华 赵燕 赵坚强 金杭阳 王金泉 张咸宁 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期348-351,共4页
目的探讨多发性内分泌腺瘤2A型(multiple endocrine neoplasia type2A,MEN2A)的临床特点及RET原癌基因检测的意义。方法对1个MEN2A家系进行系统的临床家系调查和种系水平的RET基因检测。结果基因检测该家系5位成员中3例存在RET基因p... 目的探讨多发性内分泌腺瘤2A型(multiple endocrine neoplasia type2A,MEN2A)的临床特点及RET原癌基因检测的意义。方法对1个MEN2A家系进行系统的临床家系调查和种系水平的RET基因检测。结果基因检测该家系5位成员中3例存在RET基因p.C618R杂合错义突变,与临床完全相符。男1例,女2例。首次诊断年龄分别为21岁、26岁和36岁。甲状腺髓样癌最大直径分别为2.2cm、2.5cm和3.9cm。36岁女患者首次手术仅接受了右侧甲状腺全切+右颈部淋巴结清扫术,4年后先、后接受了左侧肾上腺嗜铬细胞瘤切除术、左侧甲状腺全切+左侧颈部淋巴结清扫术;21岁男患者接受了右侧甲状腺全切+右侧颈部改良淋巴结清扫术。2例患者分别随访146、26个月,降钙素仍均升高伴双侧颈部淋巴结肿大或伴左侧甲状腺占位。26岁女患者伴双侧甲状腺占位和降钙素升高,但拒绝治疗。结论结合临床筛查和RET基因检测,有利于MEN2A的及早诊断和规范化治疗,提高远期治愈率。 展开更多
关键词 多发性内分泌腺瘤2型 甲状腺髓样癌 肾上腺嗜铬细胞瘤 RET原癌基因 点突变
三个多发性内分泌腺瘤2A型家系的临床诊治及RET原癌基因突变检测 被引量:2
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作者 陈振光 杨昌平 +8 位作者 戚晓平 费军 杜振方 成军 金杭阳 郑海燕 王金泉 赵坚强 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第10期782-786,共5页
目的 探讨3个多发性内分泌腺瘤2A型(MEN2A)家系的诊治及RET基因检测的临床意义.方法 分析1990年4月至2011年12月诊治的3个家系10例MEN2A患者的临床资料.男4例,女6例.5例以颈部占位就诊:3例接受了不规范的甲状腺全切除术,2例接受双侧... 目的 探讨3个多发性内分泌腺瘤2A型(MEN2A)家系的诊治及RET基因检测的临床意义.方法 分析1990年4月至2011年12月诊治的3个家系10例MEN2A患者的临床资料.男4例,女6例.5例以颈部占位就诊:3例接受了不规范的甲状腺全切除术,2例接受双侧甲状腺全切+双侧颈部改良淋巴结清扫;5例无甲状腺肿瘤症状的RET基因突变携带者行双侧甲状腺全切+至少双侧颈部Ⅵ区淋巴结清扫.6例伴发肾上腺嗜铬细胞瘤(PHEO):5例行双侧PHEO一期切除,1例行单侧PHEO切除.3个家系共23例成员接受外周血RET基因检测.结果 病理均明确诊断双侧甲状腺髓样癌(10/10).有、无症状的甲状腺髓样癌(MTC)患者间的首次平均诊断年龄[39.0(31 ~64)岁比18.2(5.5 ~36)岁]、肿瘤最大直径[2.8(1.2~5.6) cm比0.7(0.2 ~ 1.3) cm]、淋巴结阳性转移率[100% (5/5)比20% (1/5)],差异均有统计学意义(均P<0.05).MTC随访7~ 66个月,术后降钙素有症状组均升高(5/5),无症状组仅见1例升高(P<0.05).6例PHEO(60%)的平均诊断年龄42.0岁,5例为双侧多发,1例为单侧单发;3例双侧PHEO术后需终生口服激素替代.PHEO随访19 ~ 104个月,6例均无复发或转移.基因检测均为RET基因p.C634Y突变(10/23),1个家系为RET基因p.C634Y新发突变(de novo).结论 基于RET基因和血清降钙素检测及早进行规范手术可有效治愈MEN2A-MTC;对伴有双侧PHEO者,应优先选择保留肾上腺皮质功能的腹腔镜下双侧PHEO一期切除术. 展开更多
关键词 多发性内分泌瘤病2A型 甲状腺肿瘤 嗜铬细胞瘤 原癌基因 点突变
多发性内分泌腺瘤2A型家系中嗜铬细胞瘤的临床及RET原癌基因突变特点 被引量:7
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作者 戚晓平 陈振光 +8 位作者 金杭阳 李峰 成军 赵坚强 郭定刚 罗世云 陈责平 张咸宁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第28期2200-2204,共5页
目的探讨多发性内分泌腺瘤2A型(MEN2A)中肾上腺嗜铬细胞瘤(PHEO)的临床特征及RET原癌基因突变检测的意义。方法收集分析1989年8月至2013年1月诊治的13个MEN2A家系32例PHEO患者的临床资料、家系谱,并进行RET基因检测分析。结果13个M... 目的探讨多发性内分泌腺瘤2A型(MEN2A)中肾上腺嗜铬细胞瘤(PHEO)的临床特征及RET原癌基因突变检测的意义。方法收集分析1989年8月至2013年1月诊治的13个MEN2A家系32例PHEO患者的临床资料、家系谱,并进行RET基因检测分析。结果13个MEN2A家系68例MEN2A患者中32例(47.1%)伴有PHEO,其中男19例,女13例;首次诊断年龄18—78岁,平均(41±12)岁;PHEO肿瘤最大直径2.5~11.0cm,平均(4.6±2.2)cm;先诊断甲状腺髓样癌、后诊断PHEO的12例(37.5%),同时诊断的12例(37.5%),初始诊断为PHEO的7例(21.9%),阑尾切除术中PHEO诱发高血压危象死亡的1例(3.1%)。临床筛查前确诊的22例PHEO中有PHEO症状者12例,筛查后发现的10例PHEO中仅1例有PHEO症状(12/22比1/10,P=0.024)。除外死于非PHEO术中的5例无症状者,17例伴双侧PHEO(3例为异时双侧PHEO)患者中有症状者7例,10例伴单侧PHEO患者中有症状者6例(7/17比6/10,P=0.440)。25例接受了PHEO手术:开放切除11例(双侧一期切除2例),腹腔镜下切除14例(双侧一期切除8例)。术后10例需激素替代治疗。平均随访72(1~282)个月,2例出现肾上腺皮质功能低下表现,未见PHEO局部复发和远处转移。RET基因突变分属4种基因型,32例MEN2A—PHEO患者中31例(96.9%)为P.C634Y/R/F突变(来自12个家系);1例(3.1%)为P.C618R突变(来自1个家系)。结论MEN2A—PHEO的RET基因突变大多位于第634位点。通过家系调查和RET基因检测,尤其有利于无症状PHEO的及早发现和治疗,可优先选择腹腔镜下行保留肾上腺皮质功能的肾上腺切除术。 展开更多
关键词 多发性内分泌瘤病2a型 嗜铬细胞瘤 保留肾上腺皮质功能的肾上腺切除术 RET原癌基因
RET原癌基因p.C618Y突变的家族性甲状腺髓样癌一家系的临床诊治分析 被引量:12
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作者 赵坚强 郭良 +9 位作者 戚晓平 陈振光 王可敬 楼建林 余秀华 成军 金杭阳 李小龙 张成宁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期440-444,共5页
目的探讨家族性甲状腺髓样癌(FMTC)的临床诊治特点及RET原癌基因检测的意义。方法对1个FMTC家系进行系统的家系调查,提取外周血进行RET原癌基因和降钙素检测,并绘制家系图。结果基因检测该家系为RET原癌基因第10外显子第618位点TGC... 目的探讨家族性甲状腺髓样癌(FMTC)的临床诊治特点及RET原癌基因检测的意义。方法对1个FMTC家系进行系统的家系调查,提取外周血进行RET原癌基因和降钙素检测,并绘制家系图。结果基因检测该家系为RET原癌基因第10外显子第618位点TGC→4TAC杂合错义突变,即P.C618Y突变,与临床完全符合。7例MTC中,男1例,女6例;首次诊断平均年龄49.6(24-78)岁;临床均表现为颈部肿块;肿瘤最大直径1.4-4.4cm,平均2.6cm;7例均伴颈部淋巴结转移。除1例(78岁)拒绝手术外,1例行右侧甲状腺全切除术+左侧甲状腺次全切除术,1例行右侧甲状腺全切除术(既往左侧甲状腺因“良性肿瘤”已全切除),其余4例行双侧甲状腺全切除术;6例均+至少双侧颈部Ⅵ区淋巴结清扫或+单/双侧颈部改良淋巴结清扫术。接受手术的6例患者首次术后降钙素仍升高:其中1例首次术后64个月因MTC转移死亡;3例在首次术后6个月行再次手术,2例降钙素降至正常,1例降钙素仍升高;另外2例分别在首次术后214、60个月,影像学检查示双侧甲状腺叶残留、局部淋巴结肿大并降钙素升高。2例无症状中的1例因术前血清降钙素高,行双侧甲状腺全切除术,术后病理诊断为双侧甲状腺C细胞增生;另1例已随访10个月,未发现影像学和降钙素异常。结论基于家系调查并整合RET基因和降钙素检测,有利于早期诊断以改善预后;对无症状的RET基因突变携带者,应根据其降钙素水平,实施个体化的预防性甲状腺全切除或严密随访观察。 展开更多
关键词 多发性内分泌瘤病 髓样 系谱 RET原癌基因 点突变
PIGF及Maspin在结肠癌中的表达及意义 预览
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作者 +1 位作者 冯俊 李建军 《中国高等医学教育》 2012年第7期143-144,共2页
目的:探讨结肠癌组织中Maspin蛋白、PIGF的表达及其与肿瘤侵袭性的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测60例结肠癌和30例癌旁正常组织中Maspin蛋白,PIGF的表达,并对其与结肠癌临床病理分期的关系进行统计学分析。结果:在正常结肠... 目的:探讨结肠癌组织中Maspin蛋白、PIGF的表达及其与肿瘤侵袭性的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测60例结肠癌和30例癌旁正常组织中Maspin蛋白,PIGF的表达,并对其与结肠癌临床病理分期的关系进行统计学分析。结果:在正常结肠黏膜、结肠腺瘤和结肠癌组织中,Maspin表达的阳性率逐渐下降,而HGF表达的阳性率逐渐上升。Maspin蛋白和PIGF在结肠癌组织中的表达均与浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关,两者在结肠癌组织中的表达呈负相关。结论:结肠癌的发生、浸润和转移可能和Maspin蛋白表达下调及PIGF表达上调密切相关,联合检测可作为一组有效的结肠癌肿瘤标记和判断预后的指标。 展开更多
关键词 结肠癌 MASPIN PIGF 免疫组织化学 侵袭性 淋巴结转移
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术后早期炎症性肠梗阻的诊断与治疗体会 被引量:5
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作者 李建军 梁学书 +6 位作者 赵湘婉 张春兰 姚俊 陶洒洒 黄海涛 罗世云 《中华中医药学刊》 CAS 2012年第4期 920-922,共3页
目的:通过86例临床病例观察分析,探讨术后早期炎症性肠梗阻的诊断与治疗体会。方法:1997年6月-2011年9月共收治86例术后早期炎症性肠梗阻患者,按照随机分组原则分为治疗组与对照组两组,每组各43例。对照组采用禁食、胃肠减压、纠正水... 目的:通过86例临床病例观察分析,探讨术后早期炎症性肠梗阻的诊断与治疗体会。方法:1997年6月-2011年9月共收治86例术后早期炎症性肠梗阻患者,按照随机分组原则分为治疗组与对照组两组,每组各43例。对照组采用禁食、胃肠减压、纠正水液平衡、应用抗生素等西医常规治疗,治疗组采用中西医结合疗法,即在西医常规治疗基础上应用大承气汤加减治疗,观察两组患者的治疗效果。结果:治疗组采用中西医结合治疗全部治愈,治愈率100%,治愈时间为(9.23±3.12)天。对照组采用西医常规治疗,治愈35例,治愈率81.40%,治愈时间为(13.23±4.10)天。在治愈率与治疗时间方面,治疗组明显优于对照组,结论:中西医结合治疗早期炎症性肠梗阻具有一定的优势,值得在临床中推广应用。 展开更多
关键词 术后早期炎症性肠梗阻 诊断 治疗 中西医结合
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