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东莞区域菜鸟驿站服务质量问题与对策研究 预览
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作者 陈楚玲 俊伟 +1 位作者 尹静 钟耀广 《现代商贸工业》 2019年第26期32-33,共2页
通过了解东莞菜鸟驿站的服务质量对消费者的使用意愿程度的关系,分别从配送服务质量、站点人员与顾客的信息沟通服务质量、人员服务质量、突发事件处理质量等几个方面对东莞菜鸟驿站的物流服务质量进行研究,并为东莞菜鸟驿站物流服务质... 通过了解东莞菜鸟驿站的服务质量对消费者的使用意愿程度的关系,分别从配送服务质量、站点人员与顾客的信息沟通服务质量、人员服务质量、突发事件处理质量等几个方面对东莞菜鸟驿站的物流服务质量进行研究,并为东莞菜鸟驿站物流服务质量的建设问题进行分析和提出相应的解决策略,这对东莞菜鸟驿站在未来的物流服务发展具有一定的借鉴意义。 展开更多
关键词 菜鸟驿站 电商物流 服务质量 消费者使用意愿
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猪繁殖与呼吸综合征病毒人工感染试验 预览 被引量:2
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作者 陈申秒 马景霞 +3 位作者 王金生 俊伟 郝圣峰 李炳更 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第1期 110-114,共5页
为探讨单纯猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染与猪"高热病"及猪群死亡率的关系,用经检测为PRRSV阳性的猪病料接种2头断奶仔猪,每日测定体温,将发病猪处死剖检,用PCR方法进行PRRSV检测和ELISA检测抗体,发现攻毒猪均迅速出现持续高... 为探讨单纯猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染与猪"高热病"及猪群死亡率的关系,用经检测为PRRSV阳性的猪病料接种2头断奶仔猪,每日测定体温,将发病猪处死剖检,用PCR方法进行PRRSV检测和ELISA检测抗体,发现攻毒猪均迅速出现持续高热症状,无死亡趋向,剖检试验猪以肺脏损伤为主,无细菌的继发感染,PCR检测PRRSV为阳性,ELISA检测PRRS抗体呈阳性。 展开更多
关键词 PRRSV 抗体 PCR 感染
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Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达 预览 被引量:3
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作者 胡来根 俊伟 +3 位作者 尹秀凤 刘大伟 毛火云 张小飞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期 364-368,共5页
根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-I)基因组序列设计并合成一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增DHV-I(A66株)VP1基因。用限制性内切酶EcoRⅠ/HindⅢ消化VP1基因和转移载体pFastbacⅠ,在T4DNA连接酶作用下将二者连接构建转移质粒pFastbac-VP1。... 根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-I)基因组序列设计并合成一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增DHV-I(A66株)VP1基因。用限制性内切酶EcoRⅠ/HindⅢ消化VP1基因和转移载体pFastbacⅠ,在T4DNA连接酶作用下将二者连接构建转移质粒pFastbac-VP1。经PCR、双酶切及测序鉴定后将其转化至含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10bac中,蓝白斑筛选获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP1,在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf 9,获得重组杆状病毒rvBac-VP1。SDS-PAGE分析结果表明,VP1基因在昆虫细胞中获得表达,表达产物分子量约为2.7×104。Western-blot检测结果表明,表达产物能与抗DHV-I阳性血清发生反应,具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 Ⅰ型鸭肝炎病毒 VP1基因 重组杆状病毒 昆虫细胞 表达
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Ⅰ型鸭肝炎病毒A66弱毒株全基因组分子克隆及序列分析 预览
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作者 黄显明 张小飞 +3 位作者 魏建忠 李春芬 俊伟 毛火云 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期 8-10,共3页
采用RT-PCR法对Ⅰ型DHV A66弱毒株基因组全序列进行了分子克隆与测序。研究结果表明,不含Poly(A)尾巴的A66株的基因组全长为7 704个核苷酸残基,包括626个核苷酸残基的5′端非编码区、6 750个核苷酸残基的开放阅读框和314个核苷酸残基... 采用RT-PCR法对Ⅰ型DHV A66弱毒株基因组全序列进行了分子克隆与测序。研究结果表明,不含Poly(A)尾巴的A66株的基因组全长为7 704个核苷酸残基,包括626个核苷酸残基的5′端非编码区、6 750个核苷酸残基的开放阅读框和314个核苷酸残基的3′非编码区。应用分子生物学软件将A66株与GenBank公布的其他DHV-Ⅰ全基因序列进行同源性比较分析,结果表明,除了90D和04G两株变异株外,A66株ORF的核苷酸序列与其他各株的同源性在94.3%~99.7%之间,氨基酸序列的同源性在97.3%~99.6%之间,并且A66与C80、JX弱毒株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均很高,在99.4%以上,各毒株氨基酸序列同源性比核苷酸同源性略高。Ⅰ型DHV病毒基因组的一级结构高度保守。 展开更多
关键词 鸭肝炎病毒 RT-PCR 全基因组 序列分析 A66
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Ⅰ型鸭肝炎病毒VP3基因的克隆与原核表达 预览 被引量:7
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作者 俊伟 张小飞 +4 位作者 黄显明 毛火云 尹秀凤 刘大伟 魏建忠 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第7期 49-52,共4页
根据GenBank上登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV—Ⅰ)基因组序列,设计一对特异性引物。通过RT—PCR的方法扩增DHV—T(A66株)VP3基因并将其5′端起始处稀有密码子同义突变。用限制性内切酶BamHⅠ/SalⅠ消化VP3基因片段和表达载体pGEX-6p—... 根据GenBank上登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV—Ⅰ)基因组序列,设计一对特异性引物。通过RT—PCR的方法扩增DHV—T(A66株)VP3基因并将其5′端起始处稀有密码子同义突变。用限制性内切酶BamHⅠ/SalⅠ消化VP3基因片段和表达载体pGEX-6p—1后构建重组表达质粒pGEX—VP3,转化E.coli BL21(DE3)。经IPTG诱导后,SDS—PAGE分析表明,VP3基因在大肠埃希菌中大量表达,表达产物的分子质量约为52ku。Western blot检测表明,表达产物能与DHV—Ⅰ阳性血清发生反应,具有反应原性。 展开更多
关键词 Ⅰ型鸭肝炎病毒 VP3基因 克隆与表达
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安徽省部分地区鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 预览 被引量:10
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作者 李春芬 李郁 +3 位作者 魏建忠 张小飞 黄显明 俊伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期 197-200,共4页
2007年3月~12月从安徽省不同地区临床疑似鸭疫里氏杆菌感染病/死鸭中分离到26株鸭疫里氏杆菌,通过细菌形态、PCR鉴定、培养特性、生化试验和动物试验,鉴定为鸭疫里氏杆菌。各地区分离株表现为较一致的形态特征和相似的生理生化特性... 2007年3月~12月从安徽省不同地区临床疑似鸭疫里氏杆菌感染病/死鸭中分离到26株鸭疫里氏杆菌,通过细菌形态、PCR鉴定、培养特性、生化试验和动物试验,鉴定为鸭疫里氏杆菌。各地区分离株表现为较一致的形态特征和相似的生理生化特性。对不同地区分离到的26株鸭疫里氏杆菌进行了14种常用抗菌药物的药敏试验,结果26株鸭疫里氏杆菌分离株对青霉素G、氨苄青霉素、先锋噻肟、阿莫西林和罗红霉素等几种药物敏感性较高,对庆大霉素和卡那霉素的耐受率最高,对阿米卡星、复方新诺明、链霉素和新霉素等均不同程度地产生了耐药性。本研究为安徽省鸭疫里氏杆菌病的药物防治提供了理论依据。 展开更多
关键词 鸭疫里氏杆菌 分离鉴定 生物学特性
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IBV安徽分离株膜蛋白基因的克隆及序列分析 预览
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作者 毛火云 潘玲 +4 位作者 张小飞 俊伟 尹秀凤 黄显明 陈申秒 《畜牧与兽医》 北大核心 2009年第3期 22-25,共4页
利用设计的1对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增出4株鸡传染性支气管炎病毒(my)安徽地方分离株膜蛋白M基因全长片段并进行了克隆测序。将各IBV安徽地方分离株与GenBank中注册的一些毒株M基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行比较和系... 利用设计的1对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增出4株鸡传染性支气管炎病毒(my)安徽地方分离株膜蛋白M基因全长片段并进行了克隆测序。将各IBV安徽地方分离株与GenBank中注册的一些毒株M基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行比较和系统进化关系分析,发现毒株间核苷酸序列同源性为88.5%~100%,其相应的氨基酸序列同源性为90.3%~100%;不同毒株间存着重组、缺失、插入及点突变等变异,从ATG至第140bp区段的核苷酸序列变异频率最高;4株分离毒株属于同一个进化群的2个不同进化亚群,与我国常用疫苗毒株H120、M41和W93不属同一个进化亚群。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 安徽分离株 膜蛋白基因 克隆 序列分析
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Ⅰ型鸭肝炎病毒逆转录套式PCR检测方法的建立 预览 被引量:15
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作者 黄显明 张小飞 +2 位作者 李春芬 俊伟 毛火云 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期 25-28,共4页
根据GenBank中登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV—Ⅰ)A66株的RNA聚合酶基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合DHV-I快速检测的逆转录套式PCR方法(RT-nested-PCR),采用该方法对DHV-Ⅰ A66弱毒株和R85952强毒株进行了检测。结果显示,均... 根据GenBank中登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV—Ⅰ)A66株的RNA聚合酶基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合DHV-I快速检测的逆转录套式PCR方法(RT-nested-PCR),采用该方法对DHV-Ⅰ A66弱毒株和R85952强毒株进行了检测。结果显示,均能扩增到304bp的条带,而正常鸭胚、健康鸭肝组织、鸭瘟病毒、鹅细小病毒、禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性腔上囊病病毒、减蛋综合征病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里氏杆菌和鸭源多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性。该方法第1次扩增的敏感性是100Pg,第2次扩增的敏感性是1fg,第2次比第1次扩增的敏感性高10^6倍。表明,所建立的逆转录套式PCR方法可用于鸭病毒性肝炎(DVH)的临床诊断、病料检测和分子流行病学调查等。 展开更多
关键词 Ⅰ型鸭肝炎病毒 逆转录套式PCR 检测
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猪繁殖与呼吸综合征的研究进展 预览 被引量:2
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作者 俊伟 张小飞 +2 位作者 黄显明 李春芬 魏建忠 《养猪》 2007年第5期 49-52,共4页
猪繁殖与呼吸综合征(PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome,PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道综合征为主要特征。近几年,由于PRRSV不断变异,毒力更强的新型PRRSV毒株严重危害着养猪... 猪繁殖与呼吸综合征(PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome,PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道综合征为主要特征。近几年,由于PRRSV不断变异,毒力更强的新型PRRSV毒株严重危害着养猪业。2006年入夏以来,我国南方一些猪场暴发了一种以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病,运用分子生物学方法诊断与鉴定,最后证实猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株为主要病原之一。为更好地防制猪繁殖与呼吸综合征在我国的发生与流行,笔者对PRRSV的病原学、流行病学、致病机制和遗传变异等方面的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 病原学 遗传变异 发病机制
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Ⅰ型鸭病毒性肝炎研究进展 预览 被引量:7
10
作者 黄显明 张小飞 +2 位作者 魏建忠 李春芬 俊伟 《动物医学进展》 CSCD 2007年第11期 78-81,共4页
鸭病毒性肝炎(DVH)是由鸭肝炎病毒(DHV)引起雏鸭一种高度致死、高度传播性的病毒性传染病。该病以肝炎为主要特征,具有高发病率和高病死率。DHV分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型,3个型之间无交叉保护作用。Ⅰ型DHV呈世界性分布,并常和其他... 鸭病毒性肝炎(DVH)是由鸭肝炎病毒(DHV)引起雏鸭一种高度致死、高度传播性的病毒性传染病。该病以肝炎为主要特征,具有高发病率和高病死率。DHV分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型,3个型之间无交叉保护作用。Ⅰ型DHV呈世界性分布,并常和其他病毒、细菌混合感染,严重影响了养鸭业,造成了巨大的经济损失。文章对Ⅰ型DVH病原学、致病机理、分子生物学诊断技术和防控等方面进行了综述。 展开更多
关键词 Ⅰ型鸭肝炎病毒 致病机理 基因结构 分子生物学诊断 防控
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在合唱教学中培养学生团队意识的探究 预览
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作者 俊伟 《科学咨询》 2018年第22期66-66,共1页
合唱作为音乐教育的一个重要手段,作为学生进行音乐实践的重要方式,以及学校艺术教育成果的重要体现形式,不但能够提高学生对音乐的鉴赏能力,培养正确的音准与节奏感,还可以激发他们的乐观精神,丰富他们的形象思维能力。同时,合唱教学... 合唱作为音乐教育的一个重要手段,作为学生进行音乐实践的重要方式,以及学校艺术教育成果的重要体现形式,不但能够提高学生对音乐的鉴赏能力,培养正确的音准与节奏感,还可以激发他们的乐观精神,丰富他们的形象思维能力。同时,合唱教学还能让学生在人际交往中学会尊重别人,学会与他人合作,形成和谐相处、齐心协力等良好的个人品质。 展开更多
关键词 中学教学 音乐教学 合唱教学 团队意识
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