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发酵条件对Bacillus amyloliquefaciens SYBCH47降解亚硝酸盐的影响 预览
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作者 王爽 徐君 +3 位作者 张言周 管政兵 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期141-146,共6页
研究了Bacillus amyloliquefaciens SYBCH47对亚硝酸盐的降解能力及影响因素。结果表明,B.amyloliquefaciens SYBCH47具有降解亚硝酸盐的能力,当亚硝酸盐质量浓度为50~200 mg/L时,菌株对亚硝酸盐的降解率均高于99%。有氧培养条件下菌种... 研究了Bacillus amyloliquefaciens SYBCH47对亚硝酸盐的降解能力及影响因素。结果表明,B.amyloliquefaciens SYBCH47具有降解亚硝酸盐的能力,当亚硝酸盐质量浓度为50~200 mg/L时,菌株对亚硝酸盐的降解率均高于99%。有氧培养条件下菌种最终OD600为2.34,缺氧培养下为1.07,但两者最终降解率均高于99%并且降解率与生长曲线趋势一致。在30~40℃范围内,亚硝酸盐降解率达到99%以上。接种体积分数选择1%为最佳。 展开更多
关键词 亚硝酸盐 降解率 发酵条件 解淀粉芽孢杆菌
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果聚糖蔗糖酶基因的克隆表达及酶学性质分析 预览
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作者 徐君 张言周 +3 位作者 黎循航 管政兵 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期124-129,共6页
将来源于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的果聚糖蔗糖酶(levansucrase)基因进行克隆,并将其在Escherichia coli BL21(DE3)中表达。对发酵产酶后的菌体进行破壁和离心,粗酶液经镍柱纯化后,进行酶学性质研究。结果表明,重组... 将来源于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的果聚糖蔗糖酶(levansucrase)基因进行克隆,并将其在Escherichia coli BL21(DE3)中表达。对发酵产酶后的菌体进行破壁和离心,粗酶液经镍柱纯化后,进行酶学性质研究。结果表明,重组酶的水解酶活和转移酶活最适温度分别为45 ℃和40 ℃,最适pH分别为6.5和6.0。此外,果聚糖蔗糖酶的Km和Vmax分别为150.74 mmol/L和21.23 μmol/(mL·min)。最后,在pH 6.0、40 ℃条件下,果聚糖蔗糖酶催化反应12 h后,体系中果聚糖质量分数可达34.05%。 展开更多
关键词 果聚糖蔗糖酶 解淀粉芽孢杆菌 重组表达 性质
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大孔吸附树脂分离纯化薰衣草中迷迭香酸 预览
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作者 熊天真 管政兵 +1 位作者 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期69-75,共7页
研究不同大孔吸附树脂对薰衣草中迷迭香酸静态吸附与解吸特性,筛选出一种吸附及解吸效果良好的树脂LX-60,其静态吸附量与解吸量分别达到5.12mg/g和4.86mg/g。对LX-60进行吸附和解析条件考察,最终得到纯度为15.6%的迷迭香酸产品,其得率为... 研究不同大孔吸附树脂对薰衣草中迷迭香酸静态吸附与解吸特性,筛选出一种吸附及解吸效果良好的树脂LX-60,其静态吸附量与解吸量分别达到5.12mg/g和4.86mg/g。对LX-60进行吸附和解析条件考察,最终得到纯度为15.6%的迷迭香酸产品,其得率为86.79%。比纯化前的迷迭香酸质量浓度0.37%提高了42倍。本研究表明,利用大孔吸附树脂能够纯化薰衣草中的迷迭香酸,为通过薰衣草提取分离来生产迷迭香酸提供理论和实验基础。 展开更多
关键词 薰衣草 迷迭香酸 大孔树脂 分离 纯化
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Ganoderma sp.SYBC L48漆酶酶学性质及其对酸性红1的脱色性能
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作者 窦欣 田乔鹏 +3 位作者 王琦 管政兵 蔡宇杰 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期856-864,共9页
对灵芝菌Ganoderma sp. SYBC L48漆酶进行了纯化和酶学性质分析,并利用该漆酶对偶氮染料酸性红1进行脱色处理;考察了脱色体系中各因素对脱色效率的影响;采用小麦种子和水稻种子对酶处理后的染料进行了毒性测试。结果表明,以ABTS为底物时... 对灵芝菌Ganoderma sp. SYBC L48漆酶进行了纯化和酶学性质分析,并利用该漆酶对偶氮染料酸性红1进行脱色处理;考察了脱色体系中各因素对脱色效率的影响;采用小麦种子和水稻种子对酶处理后的染料进行了毒性测试。结果表明,以ABTS为底物时,该酶的最适pH为2.5,最适温度为60℃,在pH5~9和20~60℃具有良好的稳定性,Co2+、Cr3+和Fe3+离子对酶活性有较强的抑制作用。在染料浓度100 mg·L-1,酶浓度0.5 U·mL-1,介体HOBT浓度0.25 mmol·L-1,pH为4,50℃的条件下反应30 min后,该漆酶对酸性红1的脱色率可达90.3%;1 mmol·L-1的Cr3+、Cu2+、Al3+和Ni2+存在下,漆酶仍能催化酸性红1脱色;脱色后染料的植物毒性下降。上述结果表明该漆酶在纺织废水处理中具有一定的应用前景。 展开更多
关键词 灵芝漆酶 酶学性质 酶脱色 偶氮染料废水治理 酸性红1
产耐热β-半乳糖苷酶蜜源芽孢杆菌的鉴定及酶学性质 预览
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作者 李云 朱少华 +2 位作者 管政兵 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期49-57,共9页
从分离自蜂蜜的芽孢杆菌中筛选到一株高产β-半乳糖苷酶的菌株,鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),并命名为Bacillus licheniformis SYBC hb15。纯化该酶并研究其酶学性质,以邻硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG)为底物,B.lichenifor... 从分离自蜂蜜的芽孢杆菌中筛选到一株高产β-半乳糖苷酶的菌株,鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),并命名为Bacillus licheniformis SYBC hb15。纯化该酶并研究其酶学性质,以邻硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG)为底物,B.licheniformis SYBC hb15所产β-半乳糖苷酶的最适水解反应温度是60℃;70℃放置60 min后酶活力仍保留65%,具有较高的热稳定性;与嗜热菌Talaromyces thermophilus来源的β-半乳糖苷酶相比,葡萄糖对其水解活性的抑制较弱。因此,B.licheniformis SYBC hb15所产的β-半乳糖苷酶具有较高的热稳定性和葡萄糖耐受性,有很好的工业应用潜力。 展开更多
关键词 Β-半乳糖苷酶 酶学性质 地衣芽孢杆菌
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Bacillus amyloliquefaciens MBRC1的鉴定与抗菌活性研究 预览
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作者 陈建军 郝之奎 +1 位作者 吴翰桂 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期126-132,共7页
从台州市剑门港海区的海底淤泥中采集样品分离得到4株具抗菌活性的微生物,其中一株具有较强的抗菌活性。对该菌作了形态学、生理生化、分子生物学、(G+C)mol%含量等研究,确定该菌株属于芽孢杆菌属,命名为Bacillus amyloliquefaciens MB... 从台州市剑门港海区的海底淤泥中采集样品分离得到4株具抗菌活性的微生物,其中一株具有较强的抗菌活性。对该菌作了形态学、生理生化、分子生物学、(G+C)mol%含量等研究,确定该菌株属于芽孢杆菌属,命名为Bacillus amyloliquefaciens MBRC1。采用BLAST Clustal W(V1.83)及Mega(V 5.1)等软件对其进行了系统发育树的分析,确立了该菌株在系统发育上的地位。采用不同的培养基对该菌株进行发酵培养,利用牛津杯法对该菌胞外的抑菌活性物质的抑菌效果进行了研究,结果显示:Bacillus amyloliquefaciens MBRC1胞外具有较强的抑菌活性物质,且对金黄色葡萄球菌(S. aureus)、枯草杆菌(B. subtilis)和大肠杆菌(E. coli)均有较好的抑菌效果。 展开更多
关键词 BACILLUS amyloliquefaciens MBRC1 抗菌 鉴定
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活性氧对白腐真菌漆酶合成的影响 预览
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作者 田乔鹏 汪新悦 +3 位作者 张永 管政兵 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期103-110,共8页
分别将不同活性氧在发酵第4天加入发酵产酶培养基中,一定时间后通过测生物量和漆酶酶活研究外界活性氧对白腐真菌漆酶合成的影响,并通过活性电泳进一步验证。结果表明:低浓度的活性氧可以通过信号传导方式调控漆酶合成,超氧阴离子抑制... 分别将不同活性氧在发酵第4天加入发酵产酶培养基中,一定时间后通过测生物量和漆酶酶活研究外界活性氧对白腐真菌漆酶合成的影响,并通过活性电泳进一步验证。结果表明:低浓度的活性氧可以通过信号传导方式调控漆酶合成,超氧阴离子抑制白腐真菌产漆酶,过氧化氢和羟自由基促进白腐真菌产漆酶。实验结果对漆酶合成调控、植物-病原菌相互作用以及生物防护具有重要意义。 展开更多
关键词 漆酶 活性氧 白腐真菌
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杏鲍菇菌渣产漆酶及其在染料脱色中的应用 预览
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作者 张永 田乔鹏 +5 位作者 任海燕 欧阳汀兰 胡琪 管政兵 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期116-121,共6页
以杏鲍菇菌渣为原料,探讨了其固态发酵产漆酶的条件,并对粗酶液在染料脱色中的应用进行了初步探索。结果表明,当添加质量分数4%甘蔗渣、质量分数1.2%硝酸铵、质量分数1.0%碱木素时,杏鲍菇菌渣产酶能力最强,达到386.9 U/gds。相对于杏鲍... 以杏鲍菇菌渣为原料,探讨了其固态发酵产漆酶的条件,并对粗酶液在染料脱色中的应用进行了初步探索。结果表明,当添加质量分数4%甘蔗渣、质量分数1.2%硝酸铵、质量分数1.0%碱木素时,杏鲍菇菌渣产酶能力最强,达到386.9 U/gds。相对于杏鲍菇菌渣初始漆酶酶活18.6 U/gds,优化后提高了20倍以上。最适条件下,发酵粗酶液在无介体存在下对甲基红、活性艳蓝K3R、酸性蓝209、活性艳蓝KNR的脱色率分别达到85.8%、85.6%、68.3%、71.2%,在添加介体的条件下活性艳蓝K3R、酸性蓝209、活性艳蓝KNR的脱色率分别达到88.8%、93.4%、89.7%。显示出杏鲍菇菌渣漆酶良好的环保应用前景。 展开更多
关键词 菌渣 漆酶 发酵条件 脱色
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铁载体产生菌筛选、鉴定及防治Botryosphaeria dothidea 预览
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作者 黎循航 张言周 +4 位作者 李韵雅 孙萌 管政兵 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期144-151,共8页
葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.)真菌在全球范围广泛引起多种果树发生溃疡病和流胶病等病症,严重制约种植业的健康发展。作者从蜂蜜中分离出产儿茶酚型铁载体的H47菌株和产异羟肟酸型铁载体的H114菌株,经16S rRNA基因分析和生理生化... 葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.)真菌在全球范围广泛引起多种果树发生溃疡病和流胶病等病症,严重制约种植业的健康发展。作者从蜂蜜中分离出产儿茶酚型铁载体的H47菌株和产异羟肟酸型铁载体的H114菌株,经16S rRNA基因分析和生理生化鉴定,两菌株均为解淀粉芽孢杆菌。菌株用MM9培养基发酵,上清液经有机溶剂萃取、真空干燥获得铁载体的粗品。铁载体粗品对B. dothidea Ces.& De Not ACCC 38026进行平板抑菌实验,结果表明:H47和H114菌株产生的不同类型铁载体粗品对葡萄座腔菌均有抑菌作用,毒力回归方程分别为y=1.432x+0.578和y=1.744x+0.063。由此可见,H47菌株和H114菌株有成为生物防治剂的潜力。 展开更多
关键词 葡萄座腔菌 铁载体 抑菌活性 解淀粉芽孢杆菌
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解淀粉芽孢杆菌YP6中碱性磷酸酯酶AP3的酶学性质及其溶磷作用 被引量:1
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作者 江威 吴秋兰 +3 位作者 窦欣 管政兵 蔡宇杰 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1408-1415,共8页
【背景】微生物溶磷机制多种多样,利用其解磷能力可有效促进植物生长。【目的】探究溶磷菌解淀粉芽孢杆菌YP6的溶磷机制,提高磷资源的利用率。【方法】在大肠杆菌BL21(DE3)中克隆并表达YP6中磷酸酯酶AP3基因,研究AP3的酶学性质并验证... 【背景】微生物溶磷机制多种多样,利用其解磷能力可有效促进植物生长。【目的】探究溶磷菌解淀粉芽孢杆菌YP6的溶磷机制,提高磷资源的利用率。【方法】在大肠杆菌BL21(DE3)中克隆并表达YP6中磷酸酯酶AP3基因,研究AP3的酶学性质并验证AP3的溶磷作用。【结果】AP3为碱性磷酸酯酶,最适反应pH为10.3,最适反应温度为40°C,AP3对pNPP亲和性较高,Vm为4 033.4μmol/(min·mg),Km为12.2 mmol/L。用纯酶AP3处理24 h后,磷矿粉中的有效磷显著增加。接种菌株YP6发酵7 d后,也使土样中有效磷明显增长。【结论】揭示了碱性磷酸酯酶AP3的溶磷能力,丰富了溶磷微生物库及对微生物溶磷机制的认识。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 解磷酶 碱性磷酸酯酶
薰衣草产酚酸内生真菌的分离及产物初步鉴定 预览
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作者 熊天真 谢诗语 +5 位作者 薛亚娟 白蓉 冯佳婷 管政兵 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期250-255,共6页
利用人工种植的薰衣草及无锡本地采集的相同品种薰衣草,对其各组织内生真菌进行分离、纯化。分别分离得到18和23株内生真菌。时所筛选出的菌株进行固态发酵,并对其发酵培养产物进行提取.通过化学反应的方法从野外采集薰衣草内生真菌... 利用人工种植的薰衣草及无锡本地采集的相同品种薰衣草,对其各组织内生真菌进行分离、纯化。分别分离得到18和23株内生真菌。时所筛选出的菌株进行固态发酵,并对其发酵培养产物进行提取.通过化学反应的方法从野外采集薰衣草内生真菌中筛选出一株产酚酸的菌株.并通过分子生物学方法对其进行初步鉴定,并对其固态发酵提取物进行初步研究。研究结果表明了薰衣草内生真菌的多样性,为通过微生物固态发酵产酚酸类物质提供理论和实验基础 展开更多
关键词 薰衣草 内生真菌 固态发酵 酚酸
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微生物转化浮萍资源生产蛋白酶的条件 预览
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作者 李桂英 蔡宇杰 《生物资源》 CAS 2018年第1期64-69,共6页
利用微生物转化富含蛋白质的浮萍生产蛋白酶,为浮萍的高值化利用开辟一条新途径。在摇瓶转化的基础上,探索在5L发酵罐上沙雷氏菌(Serratiasp.)SYBC H转化浮萍生产蛋白酶的最佳转化条件。通过对温度、通风量、搅拌转速、pH等参数的研究... 利用微生物转化富含蛋白质的浮萍生产蛋白酶,为浮萍的高值化利用开辟一条新途径。在摇瓶转化的基础上,探索在5L发酵罐上沙雷氏菌(Serratiasp.)SYBC H转化浮萍生产蛋白酶的最佳转化条件。通过对温度、通风量、搅拌转速、pH等参数的研究,发现在5L发酵罐上,沙雷氏菌SYBC H转化浮萍生产蛋白酶的最佳条件为通风量6vvm,搅拌转速400r/min,发酵温度30℃。转化过程中,采用全自动控制pH值(9.0),蛋白酶的产量比不控制pH的对照组提高了23.3%。进一步研究发现,利用微生物沙雷氏菌SYBC H转化浮萍生产的蛋白酶具有耐有机溶剂的特性,在某些亲水性有机溶剂中保留90%以上的活性,是一种稀少珍贵的极端酶。 展开更多
关键词 蛋白酶生产 浮萍 沙雷氏菌 5L发酵罐
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无锡地区常见树木根际土壤酸杆菌多样性
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作者 魏志文 李韵雅 +1 位作者 江威 《生态学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期2649-2656,共8页
为了研究植物类型和土壤理化性质对酸杆菌门(Acidobacteria)细菌在植物根际土壤中分布特征的影响,采用Illumina高通量测序技术,对无锡地区常见的落叶树和常绿树根际土壤酸杆菌门微生物的相对丰度和亚群分布特征进行分析。结果表明,酸... 为了研究植物类型和土壤理化性质对酸杆菌门(Acidobacteria)细菌在植物根际土壤中分布特征的影响,采用Illumina高通量测序技术,对无锡地区常见的落叶树和常绿树根际土壤酸杆菌门微生物的相对丰度和亚群分布特征进行分析。结果表明,酸杆菌为无锡常见树木根际土壤中的第二大细菌类群,在各样品土壤中的比例为15.4%-28.78%;7种土壤样品中共检测到20个酸杆菌亚群,Gp1、Gp2、Gp3、Gp4、Gp5和Gp6为该土壤环境中优势亚群,占整个酸杆菌门比例的80.23%-94.85%;亚群Gp1、Gp2、Gp3在常绿树根际土中比例较高,而Gp4、Gp5和Gp6在落叶树根际土中丰度更高;亚群Gp14仅在常绿树根际土中存在,而亚群Gp9、Gp18、Gp20和Gp22只存在于落叶树的根际土中,说明植物类型对酸杆菌亚群在根际土壤中的分布存在影响。在各项土壤理化指标中,土壤总氮对酸杆菌的丰度有显著影响(P〈0.05);土壤中酸杆菌亚群的分布受到土壤pH的极显著影响(P〈0.01)。以上研究结果表明,无锡地区常见树土壤中酸杆菌门微生物组成和多样性主要受到土壤pH、总氮含量和树木类型的影响,其中土壤pH是影响酸杆菌多样性的关键因素。 展开更多
关键词 酸杆菌 根际土壤 高通量测序
IMBH-2固态发酵产漆酶条件的优化及酶学性质的初步研究 预览 被引量:1
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作者 王蕾 张永 +2 位作者 田乔鹏 蔡禄 《科学技术与工程》 北大核心 2018年第3期184-188,共5页
通过单因素和正交实验对菌株IMBH-2固态发酵培养基优化;并对IMBH-2漆酶进行了酶学性质的初步研究。结果表明在固态培养基中添加蔗糖和有机氮源可以促进漆酶发酵。优化后的培养基为蔗糖2.5%(w/w),牛肉膏0.8%(w/w),KH2PO40.4%(w/w),... 通过单因素和正交实验对菌株IMBH-2固态发酵培养基优化;并对IMBH-2漆酶进行了酶学性质的初步研究。结果表明在固态培养基中添加蔗糖和有机氮源可以促进漆酶发酵。优化后的培养基为蔗糖2.5%(w/w),牛肉膏0.8%(w/w),KH2PO40.4%(w/w),Mg SO4·7H2O 0.15%(w/w),麦麸100 g,固液比1∶1.5。优化后发酵漆酶活力较优化前提高了3倍。漆酶的最适反应温度为40℃,最适p H为4.0,且在低pH下比较稳定。 展开更多
关键词 漆酶 固态发酵 优化 酶学性质
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芭蕉芋叶绿素的分析鉴定及提取工艺
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作者 武旭攀 熊天真 +2 位作者 管政兵 蔡宇杰 《生物技术》 2018年第5期497-502,共6页
[目的]确定提取芭蕉芋叶绿素的最佳溶剂,准确鉴定芭蕉芋中的叶绿素,优化叶绿素提取工艺。[方法]对比氯仿、甲醇、90%乙醇、95%乙醇、100%乙醇、90%丙酮、95%丙酮、100%丙酮的提取效果,确定最佳提取剂;通过高效液相色谱与质谱联用手段,... [目的]确定提取芭蕉芋叶绿素的最佳溶剂,准确鉴定芭蕉芋中的叶绿素,优化叶绿素提取工艺。[方法]对比氯仿、甲醇、90%乙醇、95%乙醇、100%乙醇、90%丙酮、95%丙酮、100%丙酮的提取效果,确定最佳提取剂;通过高效液相色谱与质谱联用手段,准确鉴定叶绿素a和b;在研究单因素提取温度、提取时间、固液比对叶绿素提取率影响的基础上以芭蕉芋叶为材料,95%乙醇为提取剂,采用正交实验设计研究各因素的显著性及叶绿素提取最佳工艺。[结果]确定了95%乙醇为最佳提取剂;准确鉴定了提取液中的叶绿素a和b;优化最佳提取条件为提取温度60℃,提取时间4 h,固液比1∶20。[结论]采用95%乙醇作为提取剂,在优化后条件下得到叶绿素提取率为75. 71%。 展开更多
关键词 芭蕉芋 叶绿素 高效液相色谱 正交实验 提取工艺
血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC—L10产纤维二糖脱氢酶的发酵优化 预览
16
作者 冯圆圆 唐明月 +2 位作者 管政兵 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期303-308,共6页
研究了血红密孔菌Pynoporus sanguineusSYBC—L10产纤维二糖脱氢酶的发酵优化.该酶是诱导酶,微晶纤维素是其最好的诱导底物。通过对发酵培养基中培养成分的优化,添加大分子碳源微晶纤维素和小分子碳源葡萄糖作为复合碳源,发酵优化后... 研究了血红密孔菌Pynoporus sanguineusSYBC—L10产纤维二糖脱氢酶的发酵优化.该酶是诱导酶,微晶纤维素是其最好的诱导底物。通过对发酵培养基中培养成分的优化,添加大分子碳源微晶纤维素和小分子碳源葡萄糖作为复合碳源,发酵优化后提高到78±5.94U/L,是未优化前的2倍(39±4.78U/L)通过对氮源的优化,即有机氮源黄豆粉和无机氮源磷酸氢二铵的添加.使酶活达到700±35.78U/L.比优化前提高了近17倍。而通过四因素四水平的碳氮源正交实验之后酶活达到1245±35.78U/L,比优化前提高了近32倍。由此,确定了当微晶纤维素为7g/L,葡萄糖5g/L,黄豆粉6g/L,磷酸氢二铵2g/L时,其他不变,此时的产酶最高,达到1245±35.78U/L. 展开更多
关键词 纤维二糖脱氢酶 发酵优化 正交实验 血红密孔菌
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Serratia sp. SYBC H发酵浮萍生产蛋白酶的研究
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作者 李桂英 蔡宇杰 《现代食品科技》 北大核心 2018年第1期161-167,共7页
以富含蛋白质的浮萍作为有机氮源,接种一株通过自然筛选而得的新颖菌株Serratia sp.SYBC H,进行微生物发酵生产稀有的蛋白酶,为浮萍的高值化利用开创一条新途径。先采用单因素实验,研究影响Serratia sp.SYBC H发酵浮萍生产蛋白酶的发酵... 以富含蛋白质的浮萍作为有机氮源,接种一株通过自然筛选而得的新颖菌株Serratia sp.SYBC H,进行微生物发酵生产稀有的蛋白酶,为浮萍的高值化利用开创一条新途径。先采用单因素实验,研究影响Serratia sp.SYBC H发酵浮萍生产蛋白酶的发酵时间,碳源,C/N比,无机盐,产酶添加剂,结果发现:以小麦粉为碳源,小麦粉与浮萍比例为1:2,Na Cl,表面活性剂吐温80,显著促进Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶。接着采用正交试验,研究影响Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶的发酵培养基的主要组成及其使用量。结果显示,在实验范围内,影响Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶的发酵培养基组成及其最佳使用量为小麦粉15 g/L,浮萍30 g/L,吐温80,0.8%(V/V),Na Cl 0.05 mol/L。接种发酵18 h后,蛋白酶的生产值达到最大值,发酵液中最高蛋白酶活达到1459.94U/mL。 展开更多
关键词 蛋白酶生产 浮萍 沙雷氏菌 单因素试验 正交实验
高产铁载体产生菌的筛选及其在发酵绿茶中的初步应用 预览
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作者 李韵雅 曹刚刚 +1 位作者 蔡宇杰 《食品与生物技术学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期610-616,共7页
铁载体在植物营养、诱导植物抗性及人体保健方面具有广泛的应用前景。利用CAS双层平板法从69株苏铁根际微生物中筛选出8株高产铁载体的芽孢杆菌,经鉴定发现8株菌所产铁载体主要为儿茶酚盐型。综合考察8株芽孢杆菌铁载体的产量和发酵后... 铁载体在植物营养、诱导植物抗性及人体保健方面具有广泛的应用前景。利用CAS双层平板法从69株苏铁根际微生物中筛选出8株高产铁载体的芽孢杆菌,经鉴定发现8株菌所产铁载体主要为儿茶酚盐型。综合考察8株芽孢杆菌铁载体的产量和发酵后绿茶感官特征,最终筛选出一株两者俱佳的菌,通过分子和生理生化鉴定、菌落形态比较初步鉴定为特基拉芽孢杆菌。最后对特基拉芽孢杆菌液态发酵产茶的条件进行优化。在40℃,接种0.5 mL/g,发酵5 d时利用该菌发酵绿茶得到的茶叶口感、香气、色泽最佳。 展开更多
关键词 菌株筛选 发酵优化 绿茶 铁载体 特基拉芽孢杆菌
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一株高效解磷肠膜明串珠菌的分离鉴定及解磷能力研究
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作者 郭渊 李韵雅 +4 位作者 江威 罗权 管政兵 蔡宇杰 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2018年第10期2131-2141,共11页
【背景】植物根际土壤含有多种溶磷微生物,但是具有溶磷能力的肠膜明串珠菌未见报道。【目的】从脐橙根际土壤分离高效解磷菌,研究其解磷应用。【方法】通过初筛和复筛从23株菌中筛选解磷能力较强的菌株,同时采用钼蓝比色法测定磷含量... 【背景】植物根际土壤含有多种溶磷微生物,但是具有溶磷能力的肠膜明串珠菌未见报道。【目的】从脐橙根际土壤分离高效解磷菌,研究其解磷应用。【方法】通过初筛和复筛从23株菌中筛选解磷能力较强的菌株,同时采用钼蓝比色法测定磷含量。通过测定发酵液中小分子有机酸含量、磷酸酯酶酶活及pH值的变化,探究菌株的解磷机理。【结果】经过筛选得到9株具有一定解磷能力的菌株。通过菌种16S rRNA基因序列分析和生理生化实验确定其中一株菌为肠膜明串珠菌,命名为肠膜明串珠菌G7。培养基初始pH6.0、碳源为葡萄糖、氮源为硫酸铵时G7的解磷能力较佳。G7发酵过程中产生大量有机酸,而其酸性磷酸酯酶活性高于碱性磷酸酯酶。【结论】碳源、氮源以及初始pH值都能影响G7的解磷能力,其解磷能力主要缘于在发酵过程中产生了大量小分子有机酸,关于G7的解磷机理还需要更深入的研究。 展开更多
关键词 解磷菌 解磷能力 菌种鉴定 磷源 肠膜明串珠菌
解淀粉芽孢杆菌SYBC H47铁载体合成酶基因dhbA、dhbB、dhbC的克隆表达与序列分析 被引量:2
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作者 孙萌 李韵雅 +4 位作者 吴祎 张言周 管政兵 蔡宇杰 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第10期4175-4183,共9页
铁载体是微生物在缺铁环境中产生的小分子螯合物,利用CAS双平板法鉴定出已有菌株产铁载体,经鉴定所产铁载体为儿茶酚型。以解淀粉芽孢杆菌SYBC H47基因组DNA序列为模板,通过PCR克隆得到了铁载体产生途径中前体物质2,3-二羟基苯甲酸(DH... 铁载体是微生物在缺铁环境中产生的小分子螯合物,利用CAS双平板法鉴定出已有菌株产铁载体,经鉴定所产铁载体为儿茶酚型。以解淀粉芽孢杆菌SYBC H47基因组DNA序列为模板,通过PCR克隆得到了铁载体产生途径中前体物质2,3-二羟基苯甲酸(DHB)合成所需酶的3个基因dhb A、dhb B、dhb C,结果表明三基因全长分别为786 bp、927 bp、1 197 bp,诱导表达,经SDS-PAGE电泳表明三蛋白大小分别为27.1 k D、34.3 k D、42.9 k D。用KMB培养基诱导表达三株重组菌株,表明三株重组菌株铁载体产量均有明显提高。经同源性比对和生物信息学分析发现,dhb A、dhb B、dhb C三基因分别编码2,3-二氢-2,3-二羟基苯甲酸脱氢酶、异分支酸酶、异分支酸合酶,dhb A、dhb C蛋白结构稳定,而dhb B蛋白结构则不是很稳定,其二级结构主要由α螺旋、β折叠、延伸链及无规卷曲构成但比例各不相同。以上结果为铁载体合成的研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 铁载体 合成酶基因 克隆 表达 解淀粉芽孢杆菌
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