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VPA0961对副溶血弧菌运动能力的调控 预览
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作者 唐浩 仇越 +2 位作者 袁睿韬 黄新祥 张义 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2019年第3期248-252,共5页
目的:构建vpa0961基因突变株及其回补株,并初步探究VPA0961对副溶血弧菌运动能力的调控作用。方法:以副溶血弧菌RIMD2210633野生株的基因组DNA为模板,PCR扩增得到vpa0961的同源臂融合片段,并克隆至自杀质粒pDS132多克隆位点。将pDS132... 目的:构建vpa0961基因突变株及其回补株,并初步探究VPA0961对副溶血弧菌运动能力的调控作用。方法:以副溶血弧菌RIMD2210633野生株的基因组DNA为模板,PCR扩增得到vpa0961的同源臂融合片段,并克隆至自杀质粒pDS132多克隆位点。将pDS132重组质粒通过结合转移的方式转入野生株,进而通过同源重组方法替换原始vpa0961,制备vpa0961无痕突变株(Δvpa0961)。PCR扩增vpa0961整个编码区序列,并将其直接克隆入pBAD33质粒,获得重组回补质粒。将回补质粒结合转移到Δvpa0961中,然后通过特异性引物PCR鉴定并外送测序以获得回补株。将副溶血弧菌的预培养物接种于游动(swimming)和爬动(swarming)平板,37℃静置培养,比较不同菌株间菌苔直径的差异。采用qRT-PCR分析鞭毛蛋白基因lafA、flaB和flaF的mRNA表达水平。结果:特异性扩增及序列分析显示,成功构建vpa0961基因突变株和回补株;与野生株相比,Δvpa0961游动能力和爬动能力明显减弱(t=14.06,36.37,P<0.05);与野生株相比,Δvpa0961 lafA、flaB和flaF mRNA转录水平明显降低(t=185.2,56.36,50.24,P<0.05)。结论:成功构建vpa0961的基因突变株和回补株,且VPA0961对鞭毛基因的转录具有正调控作用。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 VPA0961 鞭毛 游动 爬动
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副溶血性弧菌CalR调控vopB2的分子机制
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作者 张凌宇 唐浩 +2 位作者 仇越 张义 王丽 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1672-1677,共6页
【背景】副溶血性弧菌是一种非常重要的食源性致病菌,CalR蛋白是一种全局转录调节因子。III型分泌系统2 (Type 3 secretion systems 2 T3SS2)是副溶血性弧菌主要的毒力因子,vopB2是T3SS2中的一个关键效应蛋白。【目的】研究副溶血弧菌C... 【背景】副溶血性弧菌是一种非常重要的食源性致病菌,CalR蛋白是一种全局转录调节因子。III型分泌系统2 (Type 3 secretion systems 2 T3SS2)是副溶血性弧菌主要的毒力因子,vopB2是T3SS2中的一个关键效应蛋白。【目的】研究副溶血弧菌CalR对vopB2的转录调控机制。【方法】利用引物延伸实验鉴定vopB2及vtrA的转录起始位点,并根据产物的丰度判断CalR对靶基因的调控关系;采用实时定量RT-PCR研究靶基因mRNA在WT和ΔcalR中转录丰度,验证CalR对靶基因的转录调控关系,进一步利用LacZ实验通过比较β-半乳糖苷酶活性的差异来判定CalR对靶基因的调控关系;利用凝胶阻滞实验分析His-CalR对靶基因启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】vopB2有两个转录起始位点A(-130和-28)且其活性受CalR的直接抑制;引物延伸和LacZ结果表明CalR对vtrA的转录并无调控作用。【结论】CalR直接抑制vopB2的转录,该抑制作用与vtrA无关联。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 转录调控 CalR vopB2 vtrA
酶凝与酸凝牦牛乳硬质干酪成熟期间质量特性的比较 预览
3
作者 张义 梁琪 +3 位作者 赵春燕 吴晗 宋雪梅 张炎 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期190-197,共8页
【目的】比较酶凝和酸凝两种凝乳方式制作的牦牛乳硬质干酪成熟期间质量特性的差异.【方法】以牦牛乳为原料,制作酶凝和酸凝牦牛乳硬质干酪,对其感官品质、质构特性、理化特性以及苦味肽分子量分布进行比较.【结果】酶凝干酪出品率高于... 【目的】比较酶凝和酸凝两种凝乳方式制作的牦牛乳硬质干酪成熟期间质量特性的差异.【方法】以牦牛乳为原料,制作酶凝和酸凝牦牛乳硬质干酪,对其感官品质、质构特性、理化特性以及苦味肽分子量分布进行比较.【结果】酶凝干酪出品率高于酸凝干酪,在成熟过程中质构特性各指标也优于酸凝干酪,而水分含量低于酸凝干酪;成熟90 d时,酸凝干酪感官品质达到最佳,具有均匀色泽、适宜乳香味和乳酸味,但其组织状态较差,总体感官评分低于酶凝干酪;在整个成熟期酸凝干酪苦味值低于酶凝干酪,成熟120 d时,酶凝与酸凝干酪苦味肽分子量范围分别在428~3 908 u和1 127~9 375 u之间,酸凝干酪苦味肽分子量范围大于酶凝干酪分子量范围;酶凝干酪苦味肽分子量在663~1 352 u时苦味值达到最大,酸凝干酪苦味肽分子量在2 249~3 564 u时苦味值最大.【结论】酸凝牦牛乳硬质干酪组织状态松散,质构欠佳,但色泽均匀,滋气味清淡,苦味值低;酶凝牦牛乳硬质干酪出品率高,水分含量较低,质构品质较好,但苦味值较高. 展开更多
关键词 牦牛乳硬质干酪 酸凝 酶凝 质量特性
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瑞舒伐他汀对T2DM合并CHD患者血糖、血管内皮功能及炎症细胞因子的影响 预览
4
作者 张义 雷芳 丁娟 《现代医药卫生》 2019年第9期1346-1348,1351共4页
目的 探讨瑞舒伐他汀对2型糖尿病(T2DM)合并冠心病(CHD)患者血糖、血管内皮功能及炎症细胞因子水平的影响。方法 选取2016年1月至2017年12月该院收治T2DM合并CHD患者240例作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组与研究组,每组各12... 目的 探讨瑞舒伐他汀对2型糖尿病(T2DM)合并冠心病(CHD)患者血糖、血管内皮功能及炎症细胞因子水平的影响。方法 选取2016年1月至2017年12月该院收治T2DM合并CHD患者240例作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组与研究组,每组各120例。对照组患者给予常规治疗,研究组患者在常规治疗基础上加用瑞舒伐他汀钙片(每次10mg,1次/天),2组患者均连续治疗2个月。比较治疗前后2组患者的血糖指标[空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPG)、空腹胰岛素(FINS)、餐后2h胰岛素(INS)、糖化血红蛋白(HbA1c)],血管内皮功能指标[可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)、可溶性血管细胞间黏附分子(sVCAM-1)、单核细胞趋化因子(MCP-1)、肱动脉血流介导的血管舒张功能(FMD)],炎症细胞因子[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]及不良反应情况。结果 治疗前,2组各项观察指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,对照组的FBG、2hPG、HbA1c、CRP、TNF-α及IL-6水平显著降低,FINS及INS水平均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05),研究组FBG、2hPG、HbA1c、sICAM-1、sVCAM-1、MCP-1、CRP、TNF-α及IL-6水平显著降低,FINS、INS水平及FMD均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05);2组的血糖指标及不良反应发生率,比较差异均无统计学意义(P>0.05),血管内皮功能指标及炎症细胞因子水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 瑞舒伐他汀能够显著改善T2DM合并CHD患者的血管内皮功能及炎性反应,且不影响血糖。 展开更多
关键词 2型糖尿病 冠心病 瑞舒伐他汀 血糖 血管内皮功能 炎症细胞因子
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氨氯地平与替米沙坦对原发性高血压患者血管内皮功能及生活质量影响的对比研究 预览
5
作者 张义 雷芳 陈亮 《现代医药卫生》 2019年第10期1485-1487,1492共4页
目的比较氨氯地平与替米沙坦对原发性高血压患者血管内皮功能及生活质量的影响,为优化临床治疗方案提供参考。方法将2015年8月至2016年12月该院收治的168例原发性高血压患者采用随机数字法分为氨氯地平组和替米沙坦,每组84例。2组患者... 目的比较氨氯地平与替米沙坦对原发性高血压患者血管内皮功能及生活质量的影响,为优化临床治疗方案提供参考。方法将2015年8月至2016年12月该院收治的168例原发性高血压患者采用随机数字法分为氨氯地平组和替米沙坦,每组84例。2组患者分别使用氨氯地平(5~10mg/d)与替米沙坦(40~80mg/d)进行抗高血压治疗,共治疗3个月。比较2组患者临床疗效及治疗前后舒张压(DBP)、收缩压(SBP)、DBP、SBP、血管舒张功能(FMD)、内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)的变化及生活质量评分。结果2组患者治疗后临床总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05);2组患者治疗后DBP、SBP均明显降低,且氨氯地平组患者治疗后DBP、SBP均明显低于替米沙坦组,DBP、SBP均明显大于替米沙坦组,差异均有统计学意义(P<0.05);2组患者治疗后FMD、NO水平及生活质量评分均明显提高、ET-1水平明显降低,且氨氯地平组患者治疗后FMD、NO水平及生活质量评分均明显高于替米沙坦组,ET-1水平明显低于替米沙坦组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氨氯地平与替米沙坦对原发性高血压患者血管内皮功能均具有明显保护作用,且均能显著改善患者生活质量,且氨氯地平优于替米沙坦。 展开更多
关键词 高血压 内皮 血管 生活质量 氨氯地平 替米沙坦
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心脉隆注射液联合芪苈强心胶囊对老年慢性心力衰竭患者血清BNP、NF-κB及胱抑素C水平的影响 预览 被引量:5
6
作者 张义 雷芳 陈亮 《西部中医药》 2018年第2期1-5,共5页
目的探讨心脉隆注射液联合芪苈强心胶囊对老年慢性心力衰竭患者血清脑钠肽(BNP)、核因子资B(NF-κB)、血清胱抑素C(CysC)水平的影响.方法:选取66 例老年慢性心力衰竭患者,随机分成观察组和对照组,每组33 例.均予缓解病因和诱因... 目的探讨心脉隆注射液联合芪苈强心胶囊对老年慢性心力衰竭患者血清脑钠肽(BNP)、核因子资B(NF-κB)、血清胱抑素C(CysC)水平的影响.方法:选取66 例老年慢性心力衰竭患者,随机分成观察组和对照组,每组33 例.均予缓解病因和诱因、限盐限水、吸氧等基础治疗和利尿剂、血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)等常规治疗,对照组在此基础上予心脉隆注射液(5 mg/kg,2 次/d)静滴,观察组在上述治疗基础上再予芪苈强心胶囊(4 粒/ 次,3 次/d)口服.治疗2 周后,检测氧化应激指标、心功能相关指标,评估生活质量,比较临床疗效.结果:与治疗前比较,2 组血浆丙二醛(MDA)水平降低(P〈0.01),过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)水平升高(P〈0.01),BNP、NK-B、CysC 水平降低(P〈0.01),左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)降低(P〈0.05),射血分数(EF)、心排血量(CO)升高(P〈0.05),明尼苏达心衰生活质量表(MLHFQ)评分、Lee 氏心衰评分降低(P〈0.05),6分钟步行距离升高(P〈0.05);与对照组比较,观察组MDA 水平较低(P〈0.01),CAT、GSH-Px 水平较高(P〈0.01),脑钠肽(BNP)、NF-κB、CysC 水平较低(P〈0.01),LVEDD、LVESD 较低(P〈0.05),EF、CO 较高(P〈0.05),MLHFQ 评分、Lee 氏心衰评分较低(P〈0.05),6分钟步行距离较高(P〈0.05),总有效率较高(P〈0.05).结论:心脉隆注射液联合芪苈强心胶囊改善慢性心力衰竭患者心肌功能,抑制心肌重构,提高生活质量. 展开更多
关键词 心力衰竭 慢性 心脉隆注射液 芪苈强心胶囊 脑钠肽 核因子ΚB 血清胱抑素
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发酵剂、氯化钙及凝乳酶添加量对白牦牛乳Mozzarella干酪质构的影响 预览 被引量:1
7
作者 张义 梁琪 +1 位作者 张炎 宋雪梅 《包装与食品机械》 CAS 2017年第3期1-6,共6页
以白牦牛乳为原料制作Mozzarella干酪,在单因素试验基础上采用Box-Behnken响应面法对发酵剂、CaCl2、凝乳酶添加量进行优化,利用质构综合评分筛选最佳的工艺参数。结果表明,白牦牛乳Mozzarella干酪的最佳工艺参数为:发酵剂添加量0.2... 以白牦牛乳为原料制作Mozzarella干酪,在单因素试验基础上采用Box-Behnken响应面法对发酵剂、CaCl2、凝乳酶添加量进行优化,利用质构综合评分筛选最佳的工艺参数。结果表明,白牦牛乳Mozzarella干酪的最佳工艺参数为:发酵剂添加量0.24g/L、CaCl2添加量0.23g/L、凝乳酶添加量0.04g/L,此时白牦牛乳Mozzarella干酪质构综合评分为11.095,出品率为20.53%,感官评分为93.67。此工艺条件下制作的白牦牛乳Mozzarella干酪香味浓郁,质地均匀,软硬适度。 展开更多
关键词 白牦牛乳 MOZZARELLA干酪 响应面法 工艺参数
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拟核结合蛋白H-NS调控副溶血弧菌vp1667的转录
8
作者 詹明华 张伟 +4 位作者 周冬生 黄新祥 杨慧盈 殷喆 张义 《军事医学》 CSCD 北大核心 2017年第6期445-448,共4页
目的研究副溶血弧菌H-NS对vp1667的转录调控机制。方法提取副溶血弧菌hns突变株(Δhns)和野生株(WT)的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对vp1667的转录调控关系;采用引物延伸实验研究vp1667的转录起始位点,并根据产物的丰度... 目的研究副溶血弧菌H-NS对vp1667的转录调控机制。方法提取副溶血弧菌hns突变株(Δhns)和野生株(WT)的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对vp1667的转录调控关系;采用引物延伸实验研究vp1667的转录起始位点,并根据产物的丰度判断H-NS对vp1667的调控关系;将vp1667的启动子区克隆入p HRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建Lac Z重组质粒,并将该重组质粒转入Δhns和WT中获得Lac Z菌株。通过Lac Z报告基因融合实验研究H-NS对vp1667的调控关系。PCR扩增vp1667的启动子区序列并纯化His-H-NS蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)研究His-H-NS对vp1667启动子区是否具有直接的结合作用;采用DNaseⅠ足迹实验研究HisH-NS对vp1667启动子区的具体结合位点。结果与结论引物延伸结果显示,vp1667只有一个转录起始位点T(-28)(翻译起始位点为+1),且其转录活性受H-NS的抑制;EMSA和DNaseⅠ足迹实验结果显示,His-H-NS不能结合到vp1667的启动子区,表明H-NS只能间接抑制vp1667的转录。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 H-NS vp1667 转录调控
副溶血弧菌CalR蛋白的表达纯化及其DNA结合活性分析 预览
9
作者 张凌宇 侯书宁 +3 位作者 赵昕 孙佳遥 张义 黄新祥 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2017年第1期36-39,共4页
目的:原核表达和纯化副溶血弧菌的CalR蛋白并分析其DNA结合活性,为后续深入研究其对靶基因的分子调控机制奠定基础。方法:以副溶血弧菌野生株RIMD2210633基因组DNA为模板,PCR扩增calR的编码区序列,将其克隆入p ET28a中获得重组载体;... 目的:原核表达和纯化副溶血弧菌的CalR蛋白并分析其DNA结合活性,为后续深入研究其对靶基因的分子调控机制奠定基础。方法:以副溶血弧菌野生株RIMD2210633基因组DNA为模板,PCR扩增calR的编码区序列,将其克隆入p ET28a中获得重组载体;将重组载体导入大肠埃希菌BL21λDE3中,获得重组蛋白表达菌株,该菌株经IPTG诱导表达His6-CalR,用Ni-柱树脂进行蛋白纯化。PCR扩增T3SS1相关基因exsC、exsD和VP1687的启动子区序列,通过凝胶阻滞实验检测His6-CalR蛋白对它们的结合活性。结果:成功表达纯化出可溶性His6-CalR蛋白;凝胶阻滞实验结果显示,重组蛋白His6-CalR能够直接结合exsC、exsD和VP1687的启动子区。结论:本研究表达纯化的副溶血弧菌CalR蛋白具有DNA结合活性,可用于后续的转录调控机制研究。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 CalR DNA结合活性
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不同培养条件下鼠疫菌PhoP/PhoQ的自调控模式研究
10
作者 张义 方海红 +4 位作者 刘磊 黄新祥 杨瑞馥 周冬生 杨慧盈 《军事医学》 CSCD 北大核心 2017年第5期373-376,共4页
目的研究鼠疫耶尔森菌PhoP/PhoQ在不同培养条件下的自调控关系。方法 PCR扩增YPO1635启动子区DNA序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,构建LacZ重组质粒,进而将该重组质粒转入鼠疫菌野生株(WT)和phoP突变株(ΔphoP)中,... 目的研究鼠疫耶尔森菌PhoP/PhoQ在不同培养条件下的自调控关系。方法 PCR扩增YPO1635启动子区DNA序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,构建LacZ重组质粒,进而将该重组质粒转入鼠疫菌野生株(WT)和phoP突变株(ΔphoP)中,通过测定二者中β-半乳糖苷酶活性差异来判定PhoP对YPO1635的调控关系。提取WT和ΔphoP的总RNA,采用引物延伸实验研究phoP的转录起始位点,并根据产物的丰度判断PhoP对phoP的调控关系。结果 LacZ结果表明,在低Mg2+TMH和BHI培养基中,PhoP能激活YPO1635的转录,而在高Mg2+TMH中,PhoP对YPO1635的转录无调控作用。引物延伸结果显示,phoP有两个转录起始位点G(-90)和A(-118)(分别记为P1和P2,翻译起始位点为+1),在低Mg2+TMH中,PhoP能激活P1的转录,而对P2无调控作用;在高Mg2+TMH中,PhoP对二者均无调控作用;在BHI中,PhoP对二者的转录均具抑制作用。结论PhoP/PhoQ的自调控关系随周围环境的变化而表现出不同的模式,这有利于鼠疫菌快速适应外界生存环境的改变。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 YPO1635 PHOP 调控
H-NS蛋白对副溶血弧菌hcp1的转录调控 被引量:2
11
作者 王洁 董新波 +3 位作者 高丽晓 周冬生 殷喆 张义 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期143-149,共7页
【目的】研究调控子H-NS对副溶血弧菌T6SS1结构蛋白基因hcp1的转录调控机制。【方法】利用Western blot检测Hcp1蛋白在野生株(WT)和hns基因敲除株(Δhns)中表达水平的差异。提取WT和Δhns的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS... 【目的】研究调控子H-NS对副溶血弧菌T6SS1结构蛋白基因hcp1的转录调控机制。【方法】利用Western blot检测Hcp1蛋白在野生株(WT)和hns基因敲除株(Δhns)中表达水平的差异。提取WT和Δhns的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对hcp1的转录调控关系。进而采用引物延伸实验研究hcp1的转录起始位点,并根据产物的丰度判断H-NS对hcp1的调控关系。PCR扩增hcp1的整个启动子区DNA序列,并纯化His-H-NS蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-H-NS对hcp1启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】Western blot和实时定量RT-PCR结果显示H-NS能抑制hcp1的表达;引物延伸结果显示hcp1只有一个转录起始位点T(–62)(翻译起始位点为+1),且其转录活性是H-NS和σ54依赖性的;EMSA实验表明H-NS对hcp1的启动子区具有直接的结合作用。【结论】H-NS能直接结合到hcp1启动子区而抑制其转录表达。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 H-NS hcp1 转录调控
副溶血弧菌calR的基因敲除株与回补株构建 被引量:1
12
作者 侯书宁 孟彦言 +4 位作者 朱文君 张凌宇 周冬生 张义 黄新祥 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期374-378,共5页
目的构建副溶血弧菌calR的基因突变株和回补株,为研究CalR的功能奠定基础。方法 PCR扩增calR基因的同源臂融合片段,并直接克隆入自杀质粒p DS132中。通过接合转移的方式将重组自杀质粒转入副溶血弧菌RIMD2210633株(WT)中,利用同源重... 目的构建副溶血弧菌calR的基因突变株和回补株,为研究CalR的功能奠定基础。方法 PCR扩增calR基因的同源臂融合片段,并直接克隆入自杀质粒p DS132中。通过接合转移的方式将重组自杀质粒转入副溶血弧菌RIMD2210633株(WT)中,利用同源重组的方法替换原始calR基因以构建calR无痕突变株(ΔcalR)。PCR扩增calR的基因序列,并将其直接克隆入p BAD33质粒中,构建回补质粒。将回补质粒转入到ΔcalR中,即得回补株(ΔcalR/calR∷p BAD33)。将vop N的启动子区克隆入p HRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建Lac Z重组质粒,并将该重组质粒分别转入WT/p BAD33、ΔcalR/p BAD33和ΔcalR/calR∷p BAD33中,通过测定并比较3株菌中β-半乳糖苷酶活性的差异来判定CalR对vop N的调控关系。结果与结论 Lac Z结果表明,CalR负调控vop N的转录,且回补株的回补效果良好,表明成功构建了副溶血弧菌calR基因的突变株和回补株,为后续对CalR的功能研究打下了基础。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 calR 突变株 回补株
硝苯地平联合厄贝沙坦治疗糖尿病合并高血压的疗效 预览 被引量:12
13
作者 蒋玉春 张义 丁娟 《检验医学与临床》 CAS 2016年第A02期332-333,共2页
摘要:目的探讨对糖尿病合并高血压患者采用硝苯地平联合厄贝沙坦治疗的临床治疗效果。方法本次研究对象选取本院在2015年7月至2016年6月期间收治的66例糖尿病合并高血压患者,按照患者的入院顺序将其随机分成两组,治疗组和对照组患者... 摘要:目的探讨对糖尿病合并高血压患者采用硝苯地平联合厄贝沙坦治疗的临床治疗效果。方法本次研究对象选取本院在2015年7月至2016年6月期间收治的66例糖尿病合并高血压患者,按照患者的入院顺序将其随机分成两组,治疗组和对照组患者各33例。对照组患者采取厄贝沙坦进行治疗,治疗组患者在厄贝沙坦治疗基础上联合硝苯地平进行治疗,比较两组患者临床治疗效果。结果治疗组患者总有效率为94.0%明显优于对照组的78.8%;治疗后,治疗组患者舒张压与收缩压明显低于对照组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论硝苯地平联合厄贝沙坦治疗糖尿病合并高血压患者具有确切的临床治疗效果,能够有效地平稳降压,控制血糖。 展开更多
关键词 糖尿病 高血压 硝苯地平}厄贝沙坦l 临床疗效
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美托洛尔与盐酸胺碘酮片治疗冠心病心律失常的临床效果 预览 被引量:2
14
作者 张义 《现代医药卫生》 2016年第16期2561-2563,共3页
目的对比分析美托洛尔与盐酸胺碘酮片治疗冠心病心律失常患者的临床效果。方法选取2014年4月至2015年9月该院收治的因冠心病心律失常需治疗患者156例,将其分为观察组和对照组,各78例。观察组予以盐酸胺碘酮片治疗,对照组予以美托洛尔治... 目的对比分析美托洛尔与盐酸胺碘酮片治疗冠心病心律失常患者的临床效果。方法选取2014年4月至2015年9月该院收治的因冠心病心律失常需治疗患者156例,将其分为观察组和对照组,各78例。观察组予以盐酸胺碘酮片治疗,对照组予以美托洛尔治疗。比较两组治疗后临床效果、室性早搏数、房性早搏数、交界性早搏数、心率、QT间期离散度(QTd)及不良反应情况。结果观察组显效率和总有效率均高于对照组,室性早搏数、房性早搏数、交界性早搏数少于对照组,且心率低于对照组,QTd少于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);而两组不良反应发生情况比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论盐酸胺碘酮片治疗冠心病心律失常临床效果较好,症状恢复快,适合临床推广应用。 展开更多
关键词 美托洛尔 胺碘酮 冠心病 心律失常 心性
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辛伐他汀和阿托伐他汀对冠心病患者的降血脂功效 预览 被引量:1
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作者 张义 《现代医药卫生》 2016年第17期2707-2708,共2页
目的 探讨并比较辛伐他汀和阿托伐他汀对冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者的降血脂功效。方法 选取该院2015年4月至2016年4月收治的冠心病患者110例作为研究对象,采用区组随机法将其分为对照组和观察组,每组55例。观察组应用阿... 目的 探讨并比较辛伐他汀和阿托伐他汀对冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者的降血脂功效。方法 选取该院2015年4月至2016年4月收治的冠心病患者110例作为研究对象,采用区组随机法将其分为对照组和观察组,每组55例。观察组应用阿托伐他汀治疗,对照组应用辛伐他汀治疗。比较两组患者总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平的差异。结果 两组患者治疗后TC、TG、LDL-C水平均明显低于治疗前,HDL-C水平明显高于治疗前,差异均有统计学意义(P〈0.05)。观察组患者治疗后TC、TG、LDL-C水平明显低于对照组,HDL-C水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 阿托伐他汀对冠心病患者的降血脂功效优于辛伐他汀。 展开更多
关键词 降血脂药/治疗应用 冠心病/药物疗法 辛伐他汀 阿托伐他汀
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添加扩增内标的PCR方法快速检测食品中的沙门氏菌 预览
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作者 张德福 付绪磊 +7 位作者 汤轶伟 白凤翎 殷喆 杨文慧 赵丽红 张义 李春 励建荣 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期54-57,63共5页
为了建立一种含扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,以细菌16S r RNA为扩增内标对照,以沙门氏菌inv A基因为靶基因设计了一对引物,并优化了PCR反应体系。通过对20种细菌进行PCR检测显示,该方法对沙门氏菌具有良好的特异性。灵敏度实验表明,... 为了建立一种含扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,以细菌16S r RNA为扩增内标对照,以沙门氏菌inv A基因为靶基因设计了一对引物,并优化了PCR反应体系。通过对20种细菌进行PCR检测显示,该方法对沙门氏菌具有良好的特异性。灵敏度实验表明,该检测方法对沙门氏菌纯DNA模板的检测灵敏度为61.1 fg/μL,对沙门氏菌纯培养物的检测灵敏度为2×102 cfu/m L。对人工污染蛋清的检测实验显示,沙门氏菌接种量为2 cfu/25 m L的鸡蛋清样品经过8 h增菌培养后,可被该方法检出。结果表明,该检测方法特异性强、灵敏度高,能排除沙门氏菌PCR检测方法中可能出现的假阴性现象,适用于鸡蛋等食品中沙门氏菌的快速检测。 展开更多
关键词 沙门氏菌 PCR检测 扩增内标对照 假阴性
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QseBC双组分调控系统对伤寒沙门菌动力的调节作用
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作者 吉滢 倪斌 +2 位作者 张义 杨瑞馥 黄新祥 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期357-359,367共4页
目的:研究伤寒沙门菌QseBC双组分调控系统对伤寒菌动力的调节作用。方法比较伤寒沙门菌野生株(WT)、qseB缺陷株(ΔqseB)和qseC缺陷株(ΔqseC)动力差异,选取主要鞭毛基因flhD进行实时定量RT-PCR检测,同时检测qseB的表达水平;... 目的:研究伤寒沙门菌QseBC双组分调控系统对伤寒菌动力的调节作用。方法比较伤寒沙门菌野生株(WT)、qseB缺陷株(ΔqseB)和qseC缺陷株(ΔqseC)动力差异,选取主要鞭毛基因flhD进行实时定量RT-PCR检测,同时检测qseB的表达水平;构建qseB高表达株,比较其与空载体对照株动力和flhD表达差异。结果与WT相比,ΔqseB动力无变化,ΔqseC动力减弱;在ΔqseC中, flhD表达量下调至约1/4而qseB表达上调;qseB高表达株动力较WT减弱, flhD表达下调。结论 qseBC双组分调控系统能调节伤寒菌动力和主要鞭毛基因flhD的表达;qseB高表达时可抑制细菌动力。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 QseBC双组分系统 动力
AphA蛋白对副溶血弧菌vopT的转录调控研究
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作者 张伟 侯书宁 +5 位作者 何婷 徐淼 黄新祥 杨瑞馥 周冬生 张义 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1971-1976,共6页
【目的】研究副溶血弧菌AphA对vop T的转录调控机制。【方法】提取野生株(WT)和aphA突变株(ΔaphA)的总RNA,采用引物延伸实验研究vop T的转录起始位点,并根据产物的丰度差异判断AphA对其调控关系。分别将WT和ΔaphA的总RNA逆转录成c... 【目的】研究副溶血弧菌AphA对vop T的转录调控机制。【方法】提取野生株(WT)和aphA突变株(ΔaphA)的总RNA,采用引物延伸实验研究vop T的转录起始位点,并根据产物的丰度差异判断AphA对其调控关系。分别将WT和ΔaphA的总RNA逆转录成c DNA,利用实时定量RT-PCR进一步研究AphA对靶基因的调控关系。将vop T的启动子区克隆入p HRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建Lac Z重组质粒,并将该重组质粒转入WT和ΔaphA中,通过测定并比较两株菌中β-半乳糖苷酶活性的差异来判定AphA对vop T的调控关系。PCR扩增靶基因整个启动子区DNA序列,并纯化His-AphA蛋白,利用凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-AphA对靶基因启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】vop T只有一个转录起始位点A(-86),且其转录活性受AphA的间接抑制。RT-PCR和EMSA结果显示AphA对vtrA的转录也具有间接的抑制作用。【结论】AphA间接抑制vop T转录,且该间接抑制作用与VtrA无关。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 转录调控 AphA VOPT
H-NS对副溶血弧菌泳动能力的调控研究
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作者 王洁 林磊 +5 位作者 孙凤军 董新波 侯书宁 周冬生 殷喆 张义 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期694-697,共4页
目的:研究H-NS对副溶血弧菌( Vibrio parahaemolyticus,VP)泳动能力的调控作用。方法将VP接种于泳动实验平板上,37℃静置培养4.5 h后,通过比较不同菌株间菌苔直径的差异来判定H-NS对泳动表型的影响。提取WT和hns基因突变株(Δhn... 目的:研究H-NS对副溶血弧菌( Vibrio parahaemolyticus,VP)泳动能力的调控作用。方法将VP接种于泳动实验平板上,37℃静置培养4.5 h后,通过比较不同菌株间菌苔直径的差异来判定H-NS对泳动表型的影响。提取WT和hns基因突变株(Δhns)的总RNA,采用实时定量RT-PCR方法研究H-NS对极鞭毛蛋白基因flaA的转录调控关系。将flaA启动子区DNA克隆入pHRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建LacZ重组质粒,并将该重组质粒转入WT和Δhns中,通过比较二者中β-半乳糖苷酶活性的差异研究H-NS对flaA的调控关系。结果与结论动力表型结果显示,H-NS可促进VP的泳动能力;实时定量RT-PCR和LacZ报告基因融合实验结果表明H-NS正调控flaA的转录。这表明H-NS至少可通过激活flaA的转录而促进VP的泳动能力。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 泳动
副溶血弧菌ToxR截短体蛋白的表达纯化及其DNA结合活性 被引量:1
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作者 胡小许 张义 +5 位作者 黄倩 王丽 杨瑞馥 黎晓敏 周冬生 钟青萍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期956-961,共6页
【目的】利用大肠杆菌BL21λDE3表达系统,表达出有活性的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)ToxR截短体蛋白,为进一步研究ToxR的转录调控机制奠定基础。【方法】以VP基因组DNA为模板,PCR扩增ToxR蛋白DNA结合结构域(ToxR-N)的DN... 【目的】利用大肠杆菌BL21λDE3表达系统,表达出有活性的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)ToxR截短体蛋白,为进一步研究ToxR的转录调控机制奠定基础。【方法】以VP基因组DNA为模板,PCR扩增ToxR蛋白DNA结合结构域(ToxR-N)的DNA片段,并将其直接克隆入pET28a中,获得重组质粒;将重组质粒导入大肠杆菌BL21λDE3中,所得菌株经IPTG诱导后能表达出His-ToxR-N蛋白。利用限制级凝血酶切除His-ToxR-N中的His-标签,进而以VP的calR和VP1687为靶基因,通过体外的凝胶阻滞实验(EMSA)验证ToxR-N蛋白的DNA结合活性。分别构建克隆有calR和VP1687上游启动子区的LacZ重组质粒,并将重组质粒转入野生株(WT)和toxR突变株(ΔtoxR)中,通过测定β-半乳糖苷酶活性来比较两株重组菌中靶基因启动子活性,以验证ToxR对calR和VP1687的调控关系。【结果】成功表达出有活性的ToxR-N蛋白,该蛋白对calR启动子区具有结合活性。LacZ结果显示ToxR对calR的转录具有激活作用,而对VP1687的转录具有抑制作用。【结论】所表达的ToxR-N可用于后续的转录调控机制研究;ToxR通过直接激活calR的转录表达,而间接抑制T3SS1相关基因的表达。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 ToxR DNA结合活性 转录调控
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