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蜜蜂幼虫芽孢杆菌微滴式数字PCR检测方法的建立
1
作者 王建峰 高峰 +4 位作者 郑剑 倪健波 黄素文 陈先锋 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第1期80-84,共5页
为建立新型高灵敏度的幼虫芽孢杆菌微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,针对幼虫芽孢杆菌16S rRNA基因设计特异性引物和探针。通过对反应体系优化,建立幼虫芽孢杆菌ddPCR检测方法,并对方法的灵敏度、线性关系、特异性及... 为建立新型高灵敏度的幼虫芽孢杆菌微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,针对幼虫芽孢杆菌16S rRNA基因设计特异性引物和探针。通过对反应体系优化,建立幼虫芽孢杆菌ddPCR检测方法,并对方法的灵敏度、线性关系、特异性及重复性进行评估。结果:建立的方法与其他6株非幼虫芽孢杆菌无交叉反应,具有良好的特异性;线性关系良好(R^2=0.991 4);灵敏度为2.9 copies/μL;ddPCR检测的相对标准偏差(RSD)在0.93%~5.27%,重复性好。试验表明本研究建立的ddPCR方法可以对幼虫芽孢杆菌进行绝对定量检测。 展开更多
关键词 幼虫芽孢杆菌 微滴式数字PCR 检测
降低中华绒螯蟹体内镉含量的安全养殖模式研究 预览
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作者 侯义宏 杨泽晓 +3 位作者 禹思宇 李亚兰 刘利荣 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期45-49,共5页
为探讨降低该地区存在的养殖河蟹Eriocheir sinensis体内重金属镉含量超标问题,根据河蟹污染的溯源分析,通过改变河蟹不同养殖阶段的饵料(螺蛳、小杂鱼等)结构,调整饲养模式(网箱养殖),降低河蟹体内Cd含量,确保其Cd含量符合国家标准。... 为探讨降低该地区存在的养殖河蟹Eriocheir sinensis体内重金属镉含量超标问题,根据河蟹污染的溯源分析,通过改变河蟹不同养殖阶段的饵料(螺蛳、小杂鱼等)结构,调整饲养模式(网箱养殖),降低河蟹体内Cd含量,确保其Cd含量符合国家标准。本文的安全养殖模式为:1—2月大湖养殖,每667m2投放100~200只/kg的长江系幼蟹2 kg;1—4月投喂螺蛳,4月兼投少量小杂鱼,5—11月投喂小杂鱼;1—8月自然水底养殖;9—11月期间,在上市前1个月进行网箱养殖。2016年和2017年跟踪监测显示:该模式养殖的河蟹体内Cd含量均符合国家标准。 展开更多
关键词 河蟹 镉污染 安全养殖
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副结核分枝杆菌MAP0862蛋白的重组表达及抗原性分析
3
作者 李丹丹 +2 位作者 王绥家 晁哲 高慎阳 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期79-81,共3页
为了验证MAP0862蛋白在副结核分枝杆菌感染鉴别诊断中的作用,试验以从发病山羊消化道病料中提取的副结核分枝杆菌基因组DNA为模板,克隆MAP0862基因并构建重组表达载体PET28a-MAP0862,然后对其进行诱导表达及Western-blot分析。结果表明... 为了验证MAP0862蛋白在副结核分枝杆菌感染鉴别诊断中的作用,试验以从发病山羊消化道病料中提取的副结核分枝杆菌基因组DNA为模板,克隆MAP0862基因并构建重组表达载体PET28a-MAP0862,然后对其进行诱导表达及Western-blot分析。结果表明:检测到的羊副结核分枝杆菌MAP0862基因与GenBank中K10菌株基因完全相同;重组表达载体pET28a-MAP0862经IPTG诱导表达出约40ku的目标蛋白,与预期结果相符;Western-blot对比分析显示,MAP0862蛋白只与羊副结核阳性血清发生显色反应。说明MAP0862蛋白具有良好的免疫反应原性和特异性。 展开更多
关键词 副结核分枝杆菌 MAP0862基因 克隆表达 免疫反应原性 特异性
以色列急性麻痹病毒(IAPV)RT-PCR检测方法的建立及应用
4
作者 李丹丹 +4 位作者 郑腾 白泉阳 志灯 王武军 于师宇 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1105-1108,共4页
为建立以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)特异性核酸检测方法,本研究以IAPV polvmerase polyprotein基因为靶基因设计合成1对特异性引物,建立了IAPV的RTPCR检测方法。结果显示,对蜜蜂的5种不同病毒进行RT-... 为建立以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)特异性核酸检测方法,本研究以IAPV polvmerase polyprotein基因为靶基因设计合成1对特异性引物,建立了IAPV的RTPCR检测方法。结果显示,对蜜蜂的5种不同病毒进行RT-PCR检测,只有IAPV病毒检测结果为阳性,具有良好的特异性;对IAPV的最低检测限为10^3拷贝/μL,具有较高的灵敏度;利用该检测方法对来自福建省不同养蜂场的8份蜜蜂样品进行检测,3份样品为阳性,通过序列比对分析,同源性超过99%,进一步证实为IAPV。结果表明,所建立的IAPV RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 以色列急性麻痹病毒 RT-PCR POLYMERASE polyprotein基因 蜜蜂
猴免疫缺陷病毒抗体免疫梳检测方法的建立及应用 预览 被引量:1
5
作者 李丹丹 王绥家 +4 位作者 陈平亚 杨俊兴 刘忠梅 高慎阳 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期217-223,共7页
目的 以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV的抗体IgG。方法 应用原核表达载体pGEX-4T-1构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达... 目的 以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV的抗体IgG。方法 应用原核表达载体pGEX-4T-1构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达,将该重组蛋白纯化后作为诊断抗原,建立免疫梳标准化检测程序,并应用于临床检测。结果 最佳抗原包被量为0.02 mg/mL;制备好的IC均能够特异性检测到相应的SIV阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,SIV30蛋白能够敏感地检测到1∶400倍稀释的SIV阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对10份可疑猴血清样品进行检测,IC与ELISA检测结果 展开更多
关键词 猴免疫缺陷病毒 SIV30蛋白 免疫梳 快速检测方法 抗体
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猴D型反转录病毒Ⅰ型抗体免疫梳检测方法的建立及应用
6
作者 李丹丹 安微 +5 位作者 陈平亚 杨俊兴 邱索平 徐义刚 高慎阳 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1300-1306,共7页
为建立猴D型反转录病毒Ⅰ型抗体(SRVl)的快速检测方法,本试验采用基因工程技术制备SRV1的SRV1—30基因原核表达产物重组SRV1—30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法用于特异性检测实验猴血清中抗SRV1的抗体IgG。结果显示,最佳抗... 为建立猴D型反转录病毒Ⅰ型抗体(SRVl)的快速检测方法,本试验采用基因工程技术制备SRV1的SRV1—30基因原核表达产物重组SRV1—30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法用于特异性检测实验猴血清中抗SRV1的抗体IgG。结果显示,最佳抗原包被量为100mg/L;制备好的免疫梳均能够特异性检测到相应的猴SRV1病毒阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,SRV130蛋白能够敏感地检测到1:200倍稀释的SRVl阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对12份可疑猴血清样品进行检测,免疫梳方法与ELISA检测结果一致率为100.0%,Kappa-1.000。该检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 猴D型反转录病毒Ⅰ型 SRV1-30蛋白 免疫梳 快速检测方法 抗体
猴B病毒抗体免疫梳检测方法的建立
7
作者 李丹丹 田朝阳 +3 位作者 陈文慧 杨俊兴 高慎阳 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第1期27-32,共6页
为了研究猴B病毒(BV)抗体的快速检测方法,试验以采用基因工程技术制备BV的BV32基因原核表达产物重组BV32蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳(IC)方法用于特异性检测试验猴血清中抗BV的抗体IgG。结果表明:最佳抗原包被量为0.01 mg/m L;制... 为了研究猴B病毒(BV)抗体的快速检测方法,试验以采用基因工程技术制备BV的BV32基因原核表达产物重组BV32蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳(IC)方法用于特异性检测试验猴血清中抗BV的抗体IgG。结果表明:最佳抗原包被量为0.01 mg/m L;制备好的免疫梳均能够特异性检测到相应的猴B病毒阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应;能够敏感地检测到1∶400倍稀释的BV阳性血清;同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法对40份猴血清样品进行检测,与ELISA法检测结果一致率为98%,Kappa系数为0.997。说明免疫梳检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 猴B病毒 BV32蛋白 免疫梳(IC) 快速检测方法 IGG
H7N9禽流感病毒纳米荧光颗粒试纸条的研制 被引量:1
8
作者 郑腾 +8 位作者 朱海 何明亮 险朋 付辉 李文最 金虹 白泉阳 王武军 志灯 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第10期69-73,共5页
为建立一种快速、敏感的H7N9禽流感病毒检测方法,以荧光纳米颗粒为标记物,采用免疫层析法制备H7N9荧光纳米颗粒试纸条,通过紫外灯下观察试纸条上的荧光信号来进行结果判定。结果表明:用制备的荧光纳米颗粒试纸条检测多个亚型禽流感病毒... 为建立一种快速、敏感的H7N9禽流感病毒检测方法,以荧光纳米颗粒为标记物,采用免疫层析法制备H7N9荧光纳米颗粒试纸条,通过紫外灯下观察试纸条上的荧光信号来进行结果判定。结果表明:用制备的荧光纳米颗粒试纸条检测多个亚型禽流感病毒,只有H7N9禽流感病毒结果呈阳性,证实该试纸条具有较好的特异性;用该荧光试纸条与国家标准禽流感RT-PCR方法同时对200份样品进行检测,符合率达到935%。本试验研制的纳米颗粒荧光试纸条可用于H7N9禽流感病毒现场快速检测,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7N9型 荧光纳米颗粒试纸条 免疫层析
进境蜜蜂疫病传入风险分析 预览 被引量:2
9
作者 郑腾 +3 位作者 白泉阳 王武军 志灯 林素洁 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期134-143,共10页
为有效防范疫病传入,保护国内生态和环境安全,本文根据新西兰风险分析模型,从传入释放的可能性、定殖和扩散的可能性以及对经济和生态的潜在危害性3个方面对进境蜜蜂所可能携带的病毒、细菌、真菌、寄生物和敌害等危害进行风险分析。结... 为有效防范疫病传入,保护国内生态和环境安全,本文根据新西兰风险分析模型,从传入释放的可能性、定殖和扩散的可能性以及对经济和生态的潜在危害性3个方面对进境蜜蜂所可能携带的病毒、细菌、真菌、寄生物和敌害等危害进行风险分析。结果表明,蜂群崩溃失调病Colony Collapse Disorder、美洲幼虫腐臭病American Foulbrood、欧洲幼虫腐臭病European Foulbrood、武氏蜂盾螨Acrapis woodi、小蜂螨Tropilaelaps spp.、狄斯瓦螨Varroa destructor、蚤蝇Apocephalus borealis和蜂巢小甲虫Small Hive Beetle(Aethina tumida Murray,SHB)等8种病虫害能给国内蜜蜂带来一定的风险,根据风险评估结果,提出了相应的风险管理措施。研究结果能为制定相应的检疫措施提供科学依据。 展开更多
关键词 进境蜜蜂 风险分析 病毒 细菌 真菌 寄生物 敌害
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从台湾地区输入牛肉及其产品传入动物疫病的风险分析 预览
10
作者 郑腾 +5 位作者 唐寰宇 李文最 志灯 白泉阳 王武军 李宋钰 《中国动物检疫》 CAS 2017年第9期46-49,共4页
根据风险分析基本原理,通过危害识别、风险评估和风险管理3个阶段,对从台湾地区输入牛肉及产品进行动物疫病传入风险分析。通过对29种牛病进行危害识别,结果发现有12种病存在潜在危害;通过进一步风险筛选,发现有7种疫病需要进行风... 根据风险分析基本原理,通过危害识别、风险评估和风险管理3个阶段,对从台湾地区输入牛肉及产品进行动物疫病传入风险分析。通过对29种牛病进行危害识别,结果发现有12种病存在潜在危害;通过进一步风险筛选,发现有7种疫病需要进行风险评估。评估结果显示,口蹄疫、副结核病、牛病毒性腹泻的风险高,能带来一定危害。根据风险分析结果,可以考虑在确定台湾地区动物检疫和卫生条件已经达到要求的情况下,采取相应的风险管理措施,有条件地从台湾地区进口相关牛肉及其产品。 展开更多
关键词 台湾 牛肉 动物疫病 传入风险分析
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应用PCR技术快速鉴定熊蜂微孢子虫Nosema bombi
11
作者 刘蓓 +5 位作者 田国宁 白泉阳 郑腾 王武军 志灯 于师宇 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1715-1719,1730共6页
基于熊蜂微孢子虫16SrRNA基因序列设计了1对引物,并对引物退火温度和引物浓度等反应条件进行了优化。对所建立方法的敏感性、特异性和稳定性进行了验证后,使用该方法对40份样品进行检测。结果显示,本研究建立了一种能够特异、敏感鉴... 基于熊蜂微孢子虫16SrRNA基因序列设计了1对引物,并对引物退火温度和引物浓度等反应条件进行了优化。对所建立方法的敏感性、特异性和稳定性进行了验证后,使用该方法对40份样品进行检测。结果显示,本研究建立了一种能够特异、敏感鉴定熊蜂微孢子虫的PCR方法,对熊蜂微孢子虫总DNA的敏感性达到2.86×10^-5mg/L,可以将熊蜂微孢子虫从西方蜜蜂微孢子虫和东方蜜蜂微孢子等其他可以感染熊蜂的寄生虫中区分出来,具有良好的特异性和稳定性。通过对40份熊蜂样品进行检测结果表明,整个检测过程可以在4h内完成并具有良好的适用性。本研究建立的熊蜂微孢子虫检测方法可用于进境熊蜂的检验检疫。 展开更多
关键词 熊蜂微孢子虫 PCR 16S核糖体RNA 进境熊蜂
从台湾地区输入羊肉及其制品传入动物疫病的风险分析 预览
12
作者 郑腾 +5 位作者 唐寰宇 李文最 志灯 白泉阳 王武军 李宋钰 《中国动物检疫》 CAS 2017年第11期32-34,78共4页
本文借鉴新西兰风险分析模型,从动物疫病传入释放可能性、定殖扩散可能性以及对经济和生态的潜在危害性等3个方面,对从台湾地区输入羊肉进行了动物疫病传入风险分析。结果表明,口蹄疫和绵羊/山羊痘2种动物疫病能给大陆地区养羊业带来较... 本文借鉴新西兰风险分析模型,从动物疫病传入释放可能性、定殖扩散可能性以及对经济和生态的潜在危害性等3个方面,对从台湾地区输入羊肉进行了动物疫病传入风险分析。结果表明,口蹄疫和绵羊/山羊痘2种动物疫病能给大陆地区养羊业带来较高风险。根据风险分析结果,提出了相应的风险管理措施。 展开更多
关键词 输入羊肉 动物疫病 传入 风险分析
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蜜蜂蜂房蜜蜂球菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立 预览
13
作者 何晓杰 +6 位作者 季新成 王科珂 叶尔保勒 阿斯喀 哈森 史秀丽 王振宝 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期645-648,共4页
为建立快速检测蜜蜂欧洲幼虫腐臭病(EFIB)病原菌蜂房蜜蜂球菌(M.pluton)的方法,本研究根据M.pluton 16S rRNA基因序列,设计并合成特异性引物和TaqMan探针,经反应参数优化,建立了检测M.pluton TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,该方... 为建立快速检测蜜蜂欧洲幼虫腐臭病(EFIB)病原菌蜂房蜜蜂球菌(M.pluton)的方法,本研究根据M.pluton 16S rRNA基因序列,设计并合成特异性引物和TaqMan探针,经反应参数优化,建立了检测M.pluton TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,该方法与其它蜜蜂常见病病原均无交叉反应;该方法的灵敏度为1.0×10~1拷贝/μL的阳性质粒,比普通PCR灵敏1 000倍;重复性试验表明该方法的批内和批间变异系数均小于1%。应用该方法对100份实验室模拟样品和150份临床样品进行了检测,与预期结果一致。本研究建立的方法可为蜂及蜂产品中M.pluton的检验检疫提供新的、有效的技术手段。 展开更多
关键词 欧洲幼虫腐臭病 蜂房蜜蜂球菌 TaqMan荧光定量PCR
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猴麻疹病毒抗体免疫梳检测方法的建立及应用
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作者 李丹丹 +3 位作者 杨俊兴 邱索平 刘忠梅 高慎阳 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2017年第11期1341-1348,共8页
为了建立猴麻疹病毒(MeV)抗体的快速检测方法,本研究采用基因工程技术制备MeV的MeV-32基因原核表达产物即重组MeV-32蛋白作为抗原诊断试剂,以期建立免疫梳方法用于特异性检测实验猴血清中抗MeV的抗体Ig G。结果显示,最佳抗原包被量为0... 为了建立猴麻疹病毒(MeV)抗体的快速检测方法,本研究采用基因工程技术制备MeV的MeV-32基因原核表达产物即重组MeV-32蛋白作为抗原诊断试剂,以期建立免疫梳方法用于特异性检测实验猴血清中抗MeV的抗体Ig G。结果显示,最佳抗原包被量为0.1 mg/m L;制备好的免疫梳均能够特异性检测到相应的猴MeV阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,MeV-32蛋白能够敏感地检测到1∶100倍稀释的MeV阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对10份可疑猴血清样品进行检测,免疫梳方法与ELISA检测结果一致率为100.0%,Kappa=1.000。上述结果表明,该检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 猴麻疹病毒 MeV-32蛋白 免疫梳 快速检测方法 抗体
基于gyrB基因建立快速检测沙雷菌的PCR方法 被引量:2
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作者 阮靖华 王武军 +6 位作者 白泉阳 郑腾 于师宇 林素洁 俞道进 黄一帆 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第7期103-108,共6页
选择gyr B基因作为靶基因设计特异性引物用于沙雷菌属的PCR检测,该特异性引物扩增产物的片段大小为279 bp。研究所选用的14株沙雷菌分别代表沙雷菌属的7个不同种。此外,2种沙门菌、2种克雷伯菌以及其他5种肠道菌用于进行引物特异性的验... 选择gyr B基因作为靶基因设计特异性引物用于沙雷菌属的PCR检测,该特异性引物扩增产物的片段大小为279 bp。研究所选用的14株沙雷菌分别代表沙雷菌属的7个不同种。此外,2种沙门菌、2种克雷伯菌以及其他5种肠道菌用于进行引物特异性的验证。结果表明:扩增的条带与预期的扩增产物片段大小一致,而非沙雷菌属的其他9个种属均没有扩增条带;该方法检测沙雷菌的最低检测限为9.785 pg。通过对4株从蜜蜂中分离所得的黏质沙雷菌和3株从进口鱼粉中分离所得的居泉沙雷菌进行检测,结果均为阳性。研究表明,基于gyr B基因建立的PCR方法在沙雷菌属的检测中具有特异性强、快速和灵敏度高等特点。 展开更多
关键词 沙雷菌 肠道菌 gyrB基因 PCR
进境甲壳类水生动物风险分析 预览
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作者 郑腾 +5 位作者 井伟 白泉阳 王武军 志灯 闫诚 于师宇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期118-120,共3页
我国是一个渔业大国,也是一个水产养殖大国,有数以百万计的人以渔业和水产养殖为生,然而水生动物疾病给水产养殖行业造成的经济损失越来越巨大,每年我国因渔业病害带来的经济损失达100多亿元。近年来我国从境外引进水产苗种逐年增多,随... 我国是一个渔业大国,也是一个水产养殖大国,有数以百万计的人以渔业和水产养殖为生,然而水生动物疾病给水产养殖行业造成的经济损失越来越巨大,每年我国因渔业病害带来的经济损失达100多亿元。近年来我国从境外引进水产苗种逐年增多,随之而来的是一些新的水生动物疫病开始传人我国,这些新的水生动物疫病来到了新的气候环境,面对新的养殖结构,摆脱了其在源发地的一些天然控制机制的束缚,呈现出暴发式的流行,给我国的养殖业带来巨大的经济损失。 展开更多
关键词 水产养殖 水产苗种 甲壳类 气候环境 风险分析 桃拉综合征 黄头病 造血组织 风险评估 风险等级
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进口蜂产品中蜂类疫病传入风险分析 被引量:1
17
作者 白泉阳 +4 位作者 郑腾 王武军 志灯 于师宇 林素洁 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第7期123-127,共5页
随着蜂产品进口量的大幅增长,蜂类疫病传入风险也逐步增大。采用新西兰风险分析模式,根据OIE规定的蜂产品国际贸易重点关注疫病名录,从传入释放的可能性、定殖和扩散的可能性以及对经济和生态的潜在危害性3个方面对进口蜂产品可能携带... 随着蜂产品进口量的大幅增长,蜂类疫病传入风险也逐步增大。采用新西兰风险分析模式,根据OIE规定的蜂产品国际贸易重点关注疫病名录,从传入释放的可能性、定殖和扩散的可能性以及对经济和生态的潜在危害性3个方面对进口蜂产品可能携带的蜂类疫病进行风险分析,通过风险评估,美洲幼虫腐臭病、欧洲幼虫腐臭病、小蜂螨病、狄斯瓦螨病和蜂房小甲虫病能给国内养蜂业带来一定风险,在此基础上,从产地要求、卫生证书要求和进口检疫等关键环节提出了相应的风险管理措施,降低疫病传入风险。 展开更多
关键词 进口蜂产品 风险分析 细菌 寄生螨 敌害
H7N9亚型禽流感病毒的研究现状及防控策略 被引量:15
18
作者 郑腾 +4 位作者 白泉阳 王武军 志灯 林素洁 于师宇 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第10期134-137,共4页
H7N9型禽流感病毒自2013年2—3月首次在中国上海地区发现感染发病至今,已经有763人确诊感染,分布于20省(市)。763名患者中,老年人占绝大部分,且男性多于女性;其中310人死亡,死亡率达到40.6%,引起了全球关注。本文就该病毒的病原学、... H7N9型禽流感病毒自2013年2—3月首次在中国上海地区发现感染发病至今,已经有763人确诊感染,分布于20省(市)。763名患者中,老年人占绝大部分,且男性多于女性;其中310人死亡,死亡率达到40.6%,引起了全球关注。本文就该病毒的病原学、流行病学、致病性和病毒的溯源以及预防和控制措施等方面的研究现状进行综述,为H7N9禽流感的防控提供参考。 展开更多
关键词 H7N9型禽流感病毒 病原学 流行病学 致病性
进口鱼粉中沙门菌监测与分析 预览
19
作者 王武军 +5 位作者 黄嫦娇 林素洁 白泉阳 郑腾 志灯 于师宇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期95-97,共3页
为了解进口鱼粉中沙门菌的污染状况,给制定相关的检验检疫措施提供必要的理论依据,对2011年到2014年期间来自18个国家的543份鱼粉样品进行沙门菌检测。鱼粉样品经过增菌、沙门菌平板分离、VITEKⅡ生化试验和血清学鉴定后,共分离鉴定到2... 为了解进口鱼粉中沙门菌的污染状况,给制定相关的检验检疫措施提供必要的理论依据,对2011年到2014年期间来自18个国家的543份鱼粉样品进行沙门菌检测。鱼粉样品经过增菌、沙门菌平板分离、VITEKⅡ生化试验和血清学鉴定后,共分离鉴定到27株沙门菌,分属于B、C、E 3个群。沙门菌的总检出率为4.97%,且来自不同国家的鱼粉阳性率不同。结果显示,进口鱼粉中存在着不同程度的沙门菌污染,应加强进口鱼粉的检疫和监管,减少沙门菌病的发生。 展开更多
关键词 进口鱼粉 沙门菌 检验检疫
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应用PCR技术快速检测熊蜂短膜虫
20
作者 刘蓓 +5 位作者 郑腾 白泉阳 田国宁 王武军 志灯 于师宇 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期692-698,共7页
【目的】近年来,熊蜂作为温室作物的理想授粉者在国外已被广泛利用,并且获得很好的经济效益和生态效益,所以国外熊蜂经常被进口用于设施农业。熊蜂短膜虫Crithidia bombi是熊蜂的一种重要寄生虫病,一旦随进口熊蜂传入,将给国内熊蜂蜂群... 【目的】近年来,熊蜂作为温室作物的理想授粉者在国外已被广泛利用,并且获得很好的经济效益和生态效益,所以国外熊蜂经常被进口用于设施农业。熊蜂短膜虫Crithidia bombi是熊蜂的一种重要寄生虫病,一旦随进口熊蜂传入,将给国内熊蜂蜂群带来严重危害,因此迫切需要建立一种熊蜂短膜虫检测方法。【方法】基于熊蜂短膜虫基因内转录间隔区(internal transcribed space,ITS)基因序列设计了一对引物(Cri-F/R),建立了熊蜂短膜虫的PCR检测方法,并对退火温度、引物浓度和循环个数等反应条件进行了优化,同时验证了该PCR方法的灵敏性、特异性和稳定性。【结果】以熊蜂短膜虫ITS基因保守区设计特异性引物建立的熊蜂短膜虫PCR检测方法是可行的。优化的PCR反应条件为:退火温度59℃,引物浓度0.5μmol/L,扩增循环数35次。对感染熊蜂短膜虫的熊蜂总DNA的灵敏度达到13.24×10-5ng/μL,并具有良好的特异性和稳定性。将该方法应用于熊蜂短膜虫的检测,整个检测过程不超过4 h,具有良好的适用性。【结论】研究建立了熊蜂短膜虫检测方法,能用于疫情监测和进境熊蜂的检验检疫。 展开更多
关键词 熊蜂短膜虫 PCR技术 内转录间隔区 熊蜂 检疫
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