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100种中草药对无乳链球菌和海豚链球菌体外抑杀研究 预览
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作者 崔淼 刘茹 +3 位作者 辉杰 叶长鹏 许德麟 其中 《生态科学》 CSCD 2019年第4期71-76,共6页
无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)和海豚链球菌(Streptococcus iniae)给罗非鱼(Oreochromis sp.)养殖带来了严重的经济损失,而抗生素等药物的使用会造成细菌的耐药性和环境污染,因此,研究了100种中草药对罗非鱼链球菌体外抑杀效果... 无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)和海豚链球菌(Streptococcus iniae)给罗非鱼(Oreochromis sp.)养殖带来了严重的经济损失,而抗生素等药物的使用会造成细菌的耐药性和环境污染,因此,研究了100种中草药对罗非鱼链球菌体外抑杀效果,以筛选出替代抗生素的绿色中草药。其中16种中草药具有较好的抑菌作用,但将其pH值调至7.0±0.04后,大部分中草药的抑菌效果会显著下降(P<0.01),只有桑白皮(Morus alba)、藿香(Agastache rugosa)、豨莶草(Siegesbeckia orientalis)、槐角(Sophora japonica)的抑菌效果比较明显。将pH值调至7.0±0.04后,采用二倍梯度稀释法测定这4种中草药的最低抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimal Bactericidal Concentration,MBC),结果显示,桑白皮抑杀无乳链球菌的效果最好,MIC和MBC均为0.3906mg·mL^-1;豨莶草抑杀无乳链球菌的效果次之, MIC为0.3906 mg·mL^-1, MBC为0.7813 mg·mL^-1;藿香、豨莶草、槐角抑杀海豚链球菌的效果最好, MIC和MBC均为0.3906 mg·mL^-1。 展开更多
关键词 中草药 无乳链球菌 海豚链球菌 最低抑菌浓度 最小杀菌浓度
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40种中草药杀灭离体多子小瓜虫效果研究 预览
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作者 王彬 其中 +1 位作者 陈本亮 付耀武 《广东农业科学》 CAS 2017年第7期147-153,共7页
研究了40种中草药不同浓度水提物对多子小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)的离体杀灭效果,结果表明:夏枯草、仙鹤草和三七等18种中草药在浓度为50g/L时才能在4h内杀灭多子小瓜虫滋养体;药物浓度为10g/L时,槐花、皂角刺和毛冬青... 研究了40种中草药不同浓度水提物对多子小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)的离体杀灭效果,结果表明:夏枯草、仙鹤草和三七等18种中草药在浓度为50g/L时才能在4h内杀灭多子小瓜虫滋养体;药物浓度为10g/L时,槐花、皂角刺和毛冬青等13种中草药可杀灭滋养体;药物浓度为1g/L时,紫荆和鹅不食草即可杀灭滋养体;药物浓度为0.1g/L时,只有生姜能杀灭多子小瓜虫滋养体。生姜水提物对滋养体和幼虫的最低致死浓度分别为100、50mg/L,半数有效浓度分别为30.3、15.7mg/L,100mg/L可完全抑制包囊孵化。由此可见生姜是一种可有效杀灭多子小瓜虫的中草药。 展开更多
关键词 中草药 生姜 杀虫活性 多子小瓜虫
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磺胺甲噁唑(SMZ)和甲氧苄啶(TMP)在彭泽鲫组织中的残留消除研究 预览
3
作者 侯廷龙 其中 付耀武 《生态科学》 CSCD 2017年第4期52-57,共6页
采用高效液相色谱技术研究了磺胺甲噁唑(Sulfamethoxazole,SMZ)及其增效剂甲氧苄啶(Trimethoprim,TMP)在彭泽鲫体(Carassius auratus var.pengze)内的残留消除规律。在(18±1)℃水温条件下,将实验鱼随机分为2组,分别用于多... 采用高效液相色谱技术研究了磺胺甲噁唑(Sulfamethoxazole,SMZ)及其增效剂甲氧苄啶(Trimethoprim,TMP)在彭泽鲫体(Carassius auratus var.pengze)内的残留消除规律。在(18±1)℃水温条件下,将实验鱼随机分为2组,分别用于多剂量混饲和口灌给药,剂量为150 mg·kg-1SMZ和30 mg·kg~(-1) TMP,每天1次,连给10 d。用高效液相色谱法检测残留量,此法检测限为0.05μg·m L~(-1)。结果表明:在两种给药方式下,停药后第1天SMZ和TMP都在彭泽鲫各组织中达到峰值,SMZ在肌肉中最高,肾脏中最低,而TMP在肾脏中最高,血液中最低。混饲给药彭泽鲫各组织SMZ和TMP残留量都分别低于口灌给药各相应组织中的残留量,两种给药方式下SMZ残留的消除速度不同,混饲给药比口灌给药慢,前者需要24—25 d各组织中才检测不到SMZ残留,而后者仅需要22 d;与此相反,TMP残留的消除速度在两种给药方式中相似,即至各组织中检测不出TMP残留都需21 d。根据这些结果综合确定对彭泽鲫多次用SMZ+TMP后,休药期至少22 d。 展开更多
关键词 磺胺甲噁唑 甲氧苄啶 彭泽鲫 残留 消除
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博识而畅行 广征而顺达(四)——“了解之同情”与历史教学中“人”的对话 被引量:1
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作者 李惠军 其中 施洪昌 《中学历史教学参考》 2016年第12期16-20,共5页
作为一位著名的资深特级教师,李惠军先生经年累月杏坛传教、史苑问道,穿越于实践与思考,游走于博学与笔耕。他均课堂充满了哲思、雄辩和激情的大气;他的文章透射出弘达、博闻和张扬的底气。他常以“泥腿子”自嘲,但却在遍及大江南... 作为一位著名的资深特级教师,李惠军先生经年累月杏坛传教、史苑问道,穿越于实践与思考,游走于博学与笔耕。他均课堂充满了哲思、雄辩和激情的大气;他的文章透射出弘达、博闻和张扬的底气。他常以“泥腿子”自嘲,但却在遍及大江南北的学术报告中,以特有的思想魅力和独有的诙谐搞笑。“培育”出无数“铁粉”;他常以“学步者”自喻,但却在长城内外面对教师进行专题讲座时,主动要求走进课堂并现场为学生上课,用鲜活的课例诠释他的教学思想;他常以“苦行者”自称,但却在《笃学行恩录》《灵魂的追问》等论著中彰显着一位思想者的霸气。他在闺学中博览,在教学中前行。在笔耕中立言,在坐而论道和立而行道之间穷湛。近来,李老师就历史教学中存在的诸如“史料过度开发”“人的缺失缺位”“历史底色的退化”以及如何让历史回归学生、还原历史课的本真等问题,作了深入思考并提出警示。本刊将从本期开始,陆续推出他以《博识而畅行广征而顺达》为题的系列文章,与读者朋友共享惠军先生的智慧。水本无华,相荡乃生涟漪;石本无火,相撞而发灵光。我们期望大家借此深入交流,碰撞出更多历史涟漪和教学灵光。 展开更多
关键词 历史教学 对话 同情 特级教师 学术报告 思想魅力 专题讲座 教学思想
博识而畅行 广征而顺达(三)——求问唯物史观与时空观念、史料实证、历史解释之间的关系 被引量:1
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作者 李惠军 其中 施洪昌 《中学历史教学参考》 2016年第11期4-8,共5页
作为一位著名的资深特级教师,李惠军先生经年累月杏坛传教、史苑问道,穿越于实践与思考,游走于博学与笔耕。他的课堂充满了哲思、雄辩和激情的大气;他的文章透射出弘达、博闻和张扬的底气。,他常以“泥腿子”自嘲,但却在遍及大江... 作为一位著名的资深特级教师,李惠军先生经年累月杏坛传教、史苑问道,穿越于实践与思考,游走于博学与笔耕。他的课堂充满了哲思、雄辩和激情的大气;他的文章透射出弘达、博闻和张扬的底气。,他常以“泥腿子”自嘲,但却在遍及大江南北的学术报告中,以特有的思想魅力和独有的诙谐搞笑,“培育”出无数“铁粉”;他常以“掌步者”自喻.但却在长城内外面对教师进行专题讲座时,主动要求走进课堂并现场为学生上课,用鲜活的课例诠释他的教学思想; 展开更多
关键词 时空观念 唯物史观 历史解释 实证 史料 特级教师 学术报告 思想魅力
职业经理人如何走向成功 预览
6
作者 其中 《宁波经济:财经视点》 2016年第4期58-59,共2页
要想成为一名优秀的职业经理人需要具备很多的能力,而在担当职业经理人的职务时,职业经理人需要克服很多原来的习惯,从而迈向成功。职业经理人走向成功需要走好两步。
关键词 职业经理人 成功 职务
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100种中草药水提物体外抑杀无乳链球菌的药效研究 预览 被引量:5
7
作者 华亚南 陈辉 其中 《生态科学》 CSCD 2015年第3期26-30,共5页
无乳链球菌(Streptococcus agalactiate)对罗非鱼产业以及人类健康有重要威胁,为了减少抗生素抑杀无乳链球菌用量,试验了100种中草药水提物体外抑杀罗非鱼无乳链球菌的药效。结果表明,黄连、大黄、黄柏、乌梅、五倍子、防己、公丁香... 无乳链球菌(Streptococcus agalactiate)对罗非鱼产业以及人类健康有重要威胁,为了减少抗生素抑杀无乳链球菌用量,试验了100种中草药水提物体外抑杀罗非鱼无乳链球菌的药效。结果表明,黄连、大黄、黄柏、乌梅、五倍子、防己、公丁香、天花粉、白头翁、鱼腥草和苏木水提药原液有明显抑菌效果,但将这些中药水提药液的pH值调至中性后,大部分中草药抑菌效果显著下降(p〈0.01),甚至消失,仅黄连、公丁香、五倍子和防己药液在调节pH值后还有显著抑菌效果。采用二倍梯度稀释法测定pH值调至中性后仍有抑菌作用的4种中草药的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),发现黄连的MIC和MBC值分别为3.125 mg·m L–1和6.250 mg·m L–1,效果最好;五倍子的MIC和MBC值均为6.250 mg·m L–1,效果其次;防己的MIC和MBC值均为25.000 mg·m L–1;公丁香的MIC和MBC分别为50.000 mg·m L–1和100.000 mg·m L–1。 展开更多
关键词 无乳链球菌(Streptococcus agalactiate) 中草药水提物 抑菌效果 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度
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近江牡蛎金属硫蛋白(MT)的原核表达、纯化及多克隆抗体制备 被引量:3
8
作者 麦杰晖 于波 其中 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1104-1111,共8页
双壳贝类金属硫蛋白(metallothionein,MT)可作为指示重金属污染的生物标志物,为了进一步研究MT作为重金属污染指示分子特点及其他生物学功能,需要抗MT的特异抗体。本研究构建了双壳贝类近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)金属硫... 双壳贝类金属硫蛋白(metallothionein,MT)可作为指示重金属污染的生物标志物,为了进一步研究MT作为重金属污染指示分子特点及其他生物学功能,需要抗MT的特异抗体。本研究构建了双壳贝类近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)金属硫蛋白重组表达质粒p GEX-4T-1/MT,将其转化到大肠杆菌(Escherichia coli)菌株M15中诱导表达,优化诱导条件后,在20℃、0.2 mmol/L异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导16 h后产生大量可溶的谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase(GST)-tagged MT,GST-MT)融合蛋白。12%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western blot分析结果表明,成功获得了重组表达蛋白GST-MT。采用谷胱甘肽琼脂糖树脂(glutathione sepharose 4B)纯化该融合蛋白,于25℃凝血酶原位酶切16 h获得了重组MT,其分子量为9 k D。用纯化的重组MT免疫新西兰兔(Oryctolagus cuniculus),获得效价大于1∶128 000的抗近江牡蛎MT的多克隆抗血清,该抗体能与近江牡蛎组织中的MT分子特异结合,实现了近江牡蛎MT的原核高效表达和多抗制备。 展开更多
关键词 近江牡蛎 金属硫蛋白(MT) 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体制备
水霉拮抗菌的筛选及其拮抗活性物质稳定性初步研究 被引量:4
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作者 贺凤 许德麟 其中 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1067-1074,共8页
【目的】从海底沉积物中分离、筛选水霉拮抗放线菌菌株,鉴定目标菌株及其无菌发酵液对水霉生长的抑制效果,并初步分析拮抗活性物质的稳定性。【方法】用稀释涂布法从采集的海底沉积物中分离得到海洋放线菌,以水霉为靶菌,通过平板对峙法... 【目的】从海底沉积物中分离、筛选水霉拮抗放线菌菌株,鉴定目标菌株及其无菌发酵液对水霉生长的抑制效果,并初步分析拮抗活性物质的稳定性。【方法】用稀释涂布法从采集的海底沉积物中分离得到海洋放线菌,以水霉为靶菌,通过平板对峙法在PDA平板上筛选出对水霉有拮抗作用的菌株;利用其发酵液对水霉菌丝和孢子进行初步拮抗效果研究;通过16S rRNA基因序列分析对目标菌株的种属进行初步鉴定。【结果】从分离到的数十株海洋放线菌中筛选到5株水霉拮抗菌,其中拮抗效果最强的为S26菌株,16S rRNA基因序列分析结果显示其为链霉菌,并与紫色链霉菌具有较近的亲缘关系;S26马铃薯葡萄糖液体培养基发酵液在平板抑菌圈实验中,对水霉孢子萌发的抑菌圈直径达32.00 mm±0.81 mm,其5倍浓缩无菌发酵液对水霉菌丝的抑菌圈直径达39.75 mm±0.50 mm;5倍浓缩无菌发酵液抑菌活性的3.125%即能完全抑制水霉孢子的萌发;5倍浓缩液对温度具有较强耐受性,经100℃高温30 min处理后平板抑菌圈直径为25.50 mm±0.58 mm;经不同pH值处理12 h后,pH 5.0–9.0之间仍保持较好的拮抗活性;在37℃下蛋白酶处理2 h后实验组与对照组存在显著性差异,但平板抑菌圈直径仍可达33.25 mm以上,推测拮抗物质活性成分由多肽和非多肽类代谢物共同组成。【结论】海洋链霉菌株S26产生的活性物质对病原水霉真菌有较强的抑制作用,并对外界环境变化有较强的适应能力,因而在水霉病的生物防治中具有潜在的应用价值。研究结果同时也显示海洋链霉菌在水产病害生物防治应用领域有较好的发展前景和更广阔的挖掘空间。 展开更多
关键词 水霉 海洋放线菌 拮抗作用 生物防治
近江牡蛎热休克蛋白70基因对三丁基锡的响应
10
作者 邵中宝 其中 《环境科学研究》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 2015年第5期745-751,共7页
为研究TBT(Tributyltin,三丁基锡)在双壳贝类HSP70s(热休克蛋白70)分子的高表达响应,以近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)为材料,用不同质量浓度(0、10-2、10-1、100、101、102、103ngL)的TBT对近江牡蛎处理不同时间(12... 为研究TBT(Tributyltin,三丁基锡)在双壳贝类HSP70s(热休克蛋白70)分子的高表达响应,以近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)为材料,用不同质量浓度(0、10-2、10-1、100、101、102、103ngL)的TBT对近江牡蛎处理不同时间(12、24、48、96、192 h)后,采用实时荧光定量PCR检测其3种器官(消化腺、外套膜和鳃)中HSP70和HSC70基因mRNA的表达水平.结果显示:10-1~102ngL的TBT能诱导近江牡蛎HSP70和HSC70基因mRNA水平显著高于对照组(P〈0.05),其表达水平均为先升后降,在96 h达到峰值;103ngL的TBT也能诱导近江牡蛎HSP70和HSC70基因显著高表达(P〈0.05),但随着处理时间延长,mRNA表达出现抑制现象.能诱导HSP70和HSC70基因表达水平显著高于对照(P〈0.05)的TBT临界浓度均在10-2~10-1ngL范围内,可见2种基因对TBT的响应灵敏度高且相同,反应强度也没有显著差异(P〉0.05).3种器官对TBT的响应灵敏度也相同,但在消化腺和鳃中的响应强度都极显著(P〈0.01)高于外套膜.研究表明,近江牡蛎HSP70和HSC70基因对极低质量浓度的TBT就有高表达响应,可以作为TBT污染的早期预警指标;近江牡蛎较适宜的指示器官是消化腺和鳃,其次是外套膜. 展开更多
关键词 双壳贝类 HSP70s 有机锡 实时荧光定量PCR
草鱼外周血白细胞组成及其受胁迫和感染的影响 预览
11
作者 蔡心星 其中 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期148-151,共4页
为了得到可反映草鱼(Ctenopharyngodon idellus)健康状况的血细胞指标的基础数据,对4种不同质量规格的草鱼进行白细胞分类计数研究,并观察草鱼在硫酸铜、敌百虫处理以及多子小瓜虫感染后白细胞组成的变化.结果表明,1 000 g组和500 g... 为了得到可反映草鱼(Ctenopharyngodon idellus)健康状况的血细胞指标的基础数据,对4种不同质量规格的草鱼进行白细胞分类计数研究,并观察草鱼在硫酸铜、敌百虫处理以及多子小瓜虫感染后白细胞组成的变化.结果表明,1 000 g组和500 g组规格草鱼的淋巴细胞比例显著高于250 g组,1 000 g组和500 g组规格草鱼的中性粒细胞比例显著低于60 g组和250 g组.硫酸铜处理组的淋巴细胞分类计数显著高于对照组;高浓度敌百虫处理组草鱼的淋巴和血栓细胞分类计数显著高于对照组;多子小瓜虫感染组草鱼中性粒细胞分类计数极显著下降,淋巴细胞分类计数显著上升.说明个体大小、理化胁迫因子和病原感染都会影响草鱼白细胞组成比例. 展开更多
关键词 草鱼 白细胞分类计数 硫酸铜 敌百虫 多子小瓜虫
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肉桂活性成分肉桂醛杀灭离体多子小瓜虫效果 预览 被引量:9
12
作者 梁靖涵 其中 +1 位作者 付耀武 王彬 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期457-463,共7页
研究从肉桂中分离纯化出具有抑杀多子小瓜虫活性的化合物。以乙醇为提取剂,用索氏超声提取法从肉桂中提取浸膏,再用石油醚、乙酸乙酯、甲醇为萃取剂,萃取不同有效组分,以不同浓度分别进行杀灭离体多子小瓜虫实验,发现石油醚萃取物... 研究从肉桂中分离纯化出具有抑杀多子小瓜虫活性的化合物。以乙醇为提取剂,用索氏超声提取法从肉桂中提取浸膏,再用石油醚、乙酸乙酯、甲醇为萃取剂,萃取不同有效组分,以不同浓度分别进行杀灭离体多子小瓜虫实验,发现石油醚萃取物的杀虫效果最优。然后对石油醚萃取物采用硅胶层析柱和制备型高效液相色谱进行分离纯化,利用质谱和核磁波谱分析,最终鉴定其杀虫活性成分为肉桂醛;将肉桂醛溶于二甲基亚砜并用二倍梯度稀释法配成不同浓度的药液测试其对离体小瓜虫的杀灭活性。结果表明,100%杀灭滋养体和感染性幼虫的剂量分别为50和8mg/L,半数有效浓度分别为13.9和1.8mg/L;使用剂量在50mg/L可完全抑制小瓜虫包囊孵化。 展开更多
关键词 肉桂醛 分离 鉴定 杀虫活性 多子小瓜虫
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近江牡蛎(Crassostreahongkongensis)热休克蛋白70对壬基酚的响应 预览
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作者 夏欢 其中 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期252-256,共5页
以β-actin 为内参基因,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术,检测不同时间(12、24、48、96 和192h)不同浓度(0. 01、0. 1、1、10、100、300 μg·L-1)壬基酚(NP)处理下近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)鳃、外... 以β-actin 为内参基因,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术,检测不同时间(12、24、48、96 和192h)不同浓度(0. 01、0. 1、1、10、100、300 μg·L-1)壬基酚(NP)处理下近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis)鳃、外套膜和消化腺中HSC70 和HSP70 基因mRNA 的表达水平.结果显示,0. 01 μg·L-1 NP 能诱导近江牡蛎鳃和消化腺中HSC70 和HSP70 基因显著高表达(P〈0. 05).随着NP 处理浓度的升高,其表达水平逐渐升高,处理一定时间后100 μg·L-1NP 诱导近江牡蛎HSC70 和HSP70 基因表达量显著高于300 μg·L-1 NP 诱导表达量(P 〈0. 05).HSC70 基因在鳃和消化腺中显著高表达峰值出现在96 h 时,在外套膜中出现在48 h 时;HSP70 基因在鳃中显著高表达峰值出现在48 h 时,在外套膜和消化腺中出现在24 h 时.可见,近江牡蛎HSC70 和HSP70 基因对NP 具有显著反应性. 展开更多
关键词 HSC70基因 HSP70基因 响应 壬基酚(NP) 近江牡蛎
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黄颡鱼IgM基因的个体发生和抗体的代间传递 预览 被引量:4
14
作者 李春涛 其中 曾伯平 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期638-643,共6页
为了解黄颡鱼IgM基因表达的个体发生和IgM抗体代间传递机制,实验利用Real-time PCR和ELISA等技术研究了黄颡鱼IgM重链基因在卵巢、胚胎和仔鱼的表达变化,以及黄颡鱼IgM抗体在卵巢、胚胎和仔鱼中的含量变化。结果显示,黄颡鱼3-7 d仔鱼中... 为了解黄颡鱼IgM基因表达的个体发生和IgM抗体代间传递机制,实验利用Real-time PCR和ELISA等技术研究了黄颡鱼IgM重链基因在卵巢、胚胎和仔鱼的表达变化,以及黄颡鱼IgM抗体在卵巢、胚胎和仔鱼中的含量变化。结果显示,黄颡鱼3-7 d仔鱼中,没有检测到IgM mRNA;14 d仔鱼IgM基因开始表达。用细菌免疫亲鱼后,对仔鱼IgM mRNA表达没有影响。黄颡鱼IgM抗体在卵巢、胚胎和仔鱼中都有分布,且呈现下降趋势,至9 d仔鱼中抗体水平最低(是卵抗体含量的0.31倍)。14 d仔鱼中IgM抗体水平上升(是9 d仔鱼抗体含量的1.6倍)。用细菌免疫亲鱼后,能显著提高胚胎、仔鱼中的IgM抗体水平,在卵中抗体含量提高了2.3倍,9 d仔鱼中提高了1.8倍。研究表明,黄颡鱼IgM抗体可以在母本和后代之间传递,早期仔鱼IgM抗体主要来自于亲本;因此,免疫亲鱼能显著增加子代的抗体水平。 展开更多
关键词 黄颡鱼 IGM 基因表达 抗体传递
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大鳍鳠IgL2型基因cDNA的克隆及表达分析 预览
15
作者 李春涛 蒋自立 +1 位作者 曾伯平 其中 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2014年第1期20-25,58共7页
应用RT和RACE-PCR方法获得大鳍鳠(Mystus macrpoterus Bleeker)免疫球蛋白轻链(IgL)2型基因cDNA序列,分析了该基因在组织中的表达。该基因cDNA全长为929 bp,包含5'非编码区43 bp,3'非编码区159 bp,开放阅读框720 bp,编码239... 应用RT和RACE-PCR方法获得大鳍鳠(Mystus macrpoterus Bleeker)免疫球蛋白轻链(IgL)2型基因cDNA序列,分析了该基因在组织中的表达。该基因cDNA全长为929 bp,包含5'非编码区43 bp,3'非编码区159 bp,开放阅读框720 bp,编码239个氨基酸。编码的氨基酸序列分为可变区( VL)和恒定区( CL)。系统进化树分析显示,大鳍鳠IgL蛋白质序列与斑点叉尾 IgL 2型( G型)合为一支,与其它硬骨鱼类IgL2型聚为一簇。组织分布研究表明,大鳍鳠IgL2基因表达量在脾脏最高,其次是鳃和头肾,这明显与大鳍鳠IgL3型基因表达方式不同。注射嗜水气单胞菌后,大鳍鳠IgL2基因转录表达量在脾脏、鳃和头肾都随时间发生变化。 IgL2基因转录表达量在脾脏4 d就到达高峰,在鳃1 d就达到峰值。这些应答规律与IgL3基因差异显著,推测, IgL2的表达主要参与鳃、肠和皮肤主导的粘膜免疫。 展开更多
关键词 大鳍鳠( Mystus macropterus) 克隆 表达
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斜带石斑鱼IgZ重链基因的表达纯化和抗体制备 预览 被引量:1
16
作者 姚占娟 其中 崔淼 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期149-152,共4页
为获得斜带石斑鱼IgZ重链基因的多克隆抗体,成功构建了斜带石斑鱼免疫球蛋白IgZ重链重组蛋白表达质粒pQE30/IgZ,将其转化到大肠杆菌表达菌株M15中,确定了最佳诱导表达条件:IPTG0.2mmol/L,诱导温度30℃,诱导时间6h。所获得的Ig... 为获得斜带石斑鱼IgZ重链基因的多克隆抗体,成功构建了斜带石斑鱼免疫球蛋白IgZ重链重组蛋白表达质粒pQE30/IgZ,将其转化到大肠杆菌表达菌株M15中,确定了最佳诱导表达条件:IPTG0.2mmol/L,诱导温度30℃,诱导时间6h。所获得的IgZ重链重组蛋白经Ni-NTA亲和层析后,纯度达到85%1~上;以纯化的IgZ重链重组蛋白为抗原免疫新西兰兔,制备出相应的多克隆抗体,经ELISA测定抗血清效价约为1:320000。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 免疫球蛋白Z 原核表达 多克隆抗体制备
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盐度对近江牡蛎耗氧率、排氨率、O:N和吸收率的影响 预览 被引量:11
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作者 王刚 其中 +1 位作者 喻子牛 林小涛 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期101-106,共6页
以半现场流水槽法研究了不同盐度(5、10、15、20、25、30、35)对近江牡蛎(Crassostreahongkongensis)耗氧率、排氨率、O:N、吸收率的影响,并测定了盐度为20条件下牡蛎耗氧率和排氨率的周日变化。结果表明,近江牡蛎耗氧率、排氨率、... 以半现场流水槽法研究了不同盐度(5、10、15、20、25、30、35)对近江牡蛎(Crassostreahongkongensis)耗氧率、排氨率、O:N、吸收率的影响,并测定了盐度为20条件下牡蛎耗氧率和排氨率的周日变化。结果表明,近江牡蛎耗氧率、排氨率、O:N先随着盐度的升高而下降,在20左右降到最低,随着盐度继续上升,又升高;而近江牡蛎的吸收率先随着盐度的升高而升高,在20左右达到最高,然后随盐度升高而下降。根据数据得出耗氧率与盐度的拟合方程:y=0.0033x2-0.1161x+1.5523,R2=0.9018;排氨率与盐度:y=0.0001x2-0.0041x+0.0871,R2=0.9889;O:N与盐度:y=0.0016x3-0.0782x2+0.9051x+10.818,R2=0.955;吸收率与盐度:y=-0.0011x2+0.0399x+0.4393。R2=0.9453。一日内,8时、14时、19时、22时4个时间点,近江牡蛎耗氧率和排氨率变化较大,在14时最大,表明该时点其代谢活动最强。 展开更多
关键词 近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis) 盐度 流水槽 半现场法 耗氧率 排氨率 O N 吸收率
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黄颡鱼免疫球蛋白M重链基因原核表达研究 预览 被引量:1
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作者 于波 其中 《生态科学》 CSCD 北大核心 2013年第1期44-50,共7页
在前期研究克隆得到黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)全长cDNA的基础上,为进一步研究黄颡鱼免疫球蛋白M(IgM)重链的生物学功能,设计特异性引物PCR扩增获得了编码成熟免疫球蛋白M重链基因的编码序列。将该基因编码片段连接到原核表... 在前期研究克隆得到黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)全长cDNA的基础上,为进一步研究黄颡鱼免疫球蛋白M(IgM)重链的生物学功能,设计特异性引物PCR扩增获得了编码成熟免疫球蛋白M重链基因的编码序列。将该基因编码片段连接到原核表达载体pQE30中,构建黄颡鱼IgM重链的重组表达质粒IgM-pQE30。该重组质粒经酶切和测序鉴定后,转入表达宿主大肠杆菌M15中诱导表达,在30℃下,经0.2 mmol/L IPTG诱导表达8 h,可获得大量以包涵体形式存在的黄颡鱼IgM重链蛋白,经SDS-PAGE电泳和Western blotting分析表明,新增的62 kDa蛋白条带与预期值相符,且能与鼠源抗6×His的单克隆抗体特异性结合,证明黄颡鱼IgM重链基因获得了高效原核表达。为进一步纯化该蛋白制备特异抗体,研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 免疫球蛋白M 重链 重组质粒 原核表达 黄颡鱼
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水霉拮抗菌的筛选与拮抗物特点初步分析 预览 被引量:2
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作者 雷翠霞 其中 许德麟 《生态科学》 CSCD 北大核心 2013年第2期189-193,共5页
水霉病是淡水和咸淡水鱼类被水霉菌感染引起的常见疾病。该研究从多个养殖水体中分离得到6株水霉拮抗菌,SZK15、XL03、TG08、DJ12、HD05和DS08,以SZK15的拮抗作用最强。对SZK15研究发现,在PDA平板上,其对水霉菌丝抑制距离为11.5 mm,对... 水霉病是淡水和咸淡水鱼类被水霉菌感染引起的常见疾病。该研究从多个养殖水体中分离得到6株水霉拮抗菌,SZK15、XL03、TG08、DJ12、HD05和DS08,以SZK15的拮抗作用最强。对SZK15研究发现,在PDA平板上,其对水霉菌丝抑制距离为11.5 mm,对水霉孢子抑制圈直径为29.7 mm,其10倍浓缩的无细胞发酵液的抑水霉菌圈直径达30.2 mm;在液体培养条件下,SZK15无细胞发酵原液能完全抑制水霉菌丝和孢子的萌发生长,其5倍稀释液中,水霉菌丝生长受抑制而长度稳定在2.0 mm,有30%的孢子萌发,且萌发后菌丝受抑制而未形成菌丝网,其10倍稀释液中水霉菌丝生长慢于对照组。SZK15分泌的拮抗活性物质对121℃高温敏感,对80℃、100℃高温、蛋白酶K和胰蛋白酶均部分敏感。本研究为水霉病害的生物防治提供了潜在新途径。 展开更多
关键词 水霉 拮抗菌 拮抗物 生物防治
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鲈鱼IgM重链基因cDNA的克隆及其原核表达 预览
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作者 刘悦 其中 崔淼 《生态科学》 CSCD 北大核心 2013年第2期218-223,共6页
采用同源克隆和RACE技术扩增到鲈鱼(Lateolabrax japonicus)免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)重链(Heavychain,H)基因全长cDNA序列。鲈鱼IgM cDNA全长为1 901 bp,开放阅读框包含1 749 bp,编码582个氨基酸。根据鲈鱼IgM和其他硬... 采用同源克隆和RACE技术扩增到鲈鱼(Lateolabrax japonicus)免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)重链(Heavychain,H)基因全长cDNA序列。鲈鱼IgM cDNA全长为1 901 bp,开放阅读框包含1 749 bp,编码582个氨基酸。根据鲈鱼IgM和其他硬骨鱼免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸序列构建的系统发育树表明IgM、IgZ和IgD分别聚为一枝,其中IgM与IgZ分支的进化关系较近,而与IgD分支的进化关系较远。RT-PCR检测IgM在鲈鱼各组织器官的表达情况,其中在头肾及脾脏中表达量最高,心脏、肌肉及脑中几乎不表达。利用已获得的鲈鱼IgM cDNA序列,构建原核表达载体pQE30-IgM,并在M15大肠杆菌中成功诱导表达了分子量为63kD的重组蛋白His-IgM,Western-blotting显示鲈鱼IgM重组蛋白能与鼠源抗6×His的单克隆抗体特异性结合,说明已经获得了基因工程表达IgM重链蛋白。 展开更多
关键词 鲈鱼 免疫球蛋白M 克隆 组织分布 原核表达
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