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Triton-x100与丹参酚酸B制备脱细胞血管支架及其生物力学性能 预览
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作者 赵亮 李霞飞 +2 位作者 周坤 闫欢欢 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第6期951-956,共6页
背景:脱细胞血管支架具有优良性能,但是在其制备过程中其生物力学性能出现不同程度的降低。目的:观察在组织工程制备脱细胞血管支架中丹参酚酸B的应用前景。方法:经Triton-x100单独处理,Triton-x100-丹参酚酸B联合处理制备脱细胞血管支... 背景:脱细胞血管支架具有优良性能,但是在其制备过程中其生物力学性能出现不同程度的降低。目的:观察在组织工程制备脱细胞血管支架中丹参酚酸B的应用前景。方法:经Triton-x100单独处理,Triton-x100-丹参酚酸B联合处理制备脱细胞血管支架,分别设为Tx组和Tx-sal组,对其进行形态学观察、组织厚度测量、孔隙率检测及生物力学特性检测,比较在应用丹参酚酸B后处理之后脱细胞血管支架在形态学等各种指标上的变化。结果与结论:Tx组和Tx-sal组的血管管壁厚度及血管孔隙率差异无显著性意义(P>0.05),形态学无明显变化。Tx-sal组的脱细胞血管支架可以较完好地保留血管壁的胶原纤维和弹性纤维,抗拉强度、最大变形量、断裂伸长比、爆裂压力及缝合强度均优于Tx组(P<0.05)。结果证实,Triton-x100联合丹参酚酸B处理能够成功制备脱细胞效果良好、生物力学性能优良的脱细胞血管支架。 展开更多
关键词 丹参酚酸B 脱细胞血管支架 血管移植材料 孔隙率 抗拉强度 主动脉 细胞-材料复合物 缝合强度 组织构建 支架 生物力学 组织工程
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应用Triton-x100加丹参酚酸B制备脱细胞血管支架及其血液相容性研究 预览
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作者 赵亮 李霞飞 +2 位作者 李成成 闫欢欢 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期201-207,共7页
应用传统的Triton-x100法与应用Triton-x100和丹参酚酸B法制备脱细胞血管支架,比较这两种支架的理化性质及其血液相容性,展望应用丹参酚酸B后处理脱细胞血管支架在临床上治疗心脑血管疾病方面的应用前景,以及在组织工程血管材料方面的... 应用传统的Triton-x100法与应用Triton-x100和丹参酚酸B法制备脱细胞血管支架,比较这两种支架的理化性质及其血液相容性,展望应用丹参酚酸B后处理脱细胞血管支架在临床上治疗心脑血管疾病方面的应用前景,以及在组织工程血管材料方面的开发空间。选择SD大鼠16只,雄性,鼠龄7周,体质量250 g左右。解剖大鼠,取腹主动脉;随机分为2组,每组8个。用Triton-x100法(Tx组)、Triton-x100加入丹参酚酸B法(Tx-sal组),加工制成两种脱细胞血管支架。观察脱细胞血管支架的宏观形貌;亲水性实验测定亲水性;体外溶血实验计算体外溶血率;复钙化凝血时间实验测定复钙化凝血时间;血小板黏附实验测定动态凝血时间,以及体外血小板的黏附;补体激活实验测定补体激活程度情况;比较两组脱细胞血管支架的血液相容性。Tx组接触角为76.36°±4.65°,Tx-sal组接触角为71.26°±3.55°,Tx组接触角度数略高于Tx-sal组,差异无显著统计学意义。Tx-sal组溶血率为1.5%,Tx组溶血率为2.1%。Tx组复钙化凝血时间为(212±11.32)s,Tx-sal组复钙化凝血时间为(231±13.53)s,Tx组与Tx-sal组的复钙化凝血时间差异有显著统计学意义。Tx-sal组相比Tx组延缓了凝血时间,抗凝血性更加优良。Tx-sal组黏附的血小板数目低于Tx组的相应数目。Tx-sal组补体激活水平低。与传统的Triton-x100法制备的脱细胞血管支架相比,加入丹参酚酸B后处理的脱细胞血管支架具有更加优良的血液相容性,更适合作为组织工程材料应用于心脑血管疾病的治疗,在临床医学上的应用前景更加广阔。 展开更多
关键词 丹参酚酸B Triton-x100 脱细胞血管支架 血液相容性
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自噬抑制剂巴弗洛霉素A1对巨噬细胞极化的影响 预览
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作者 王帆 王豪 +4 位作者 宋雪斌 孙慧珍 光姣娜 南文滨 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1023-1028,共6页
目的:探讨自噬下游抑制剂巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1,Baf A1)对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7极化的影响。方法:用Baf A1作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,酶联免疫吸附实验检测M1/M2极化相关细胞因子的含量;流式细胞术检测细胞表面M1/M2... 目的:探讨自噬下游抑制剂巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1,Baf A1)对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7极化的影响。方法:用Baf A1作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,酶联免疫吸附实验检测M1/M2极化相关细胞因子的含量;流式细胞术检测细胞表面M1/M2极化相关标志物;免疫荧光观察自噬小体形成情况;Western blot检测自噬相关蛋白水平变化。结果:Baf A1处理后,RAW264.7细胞分泌的促炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)显著增高(P<0.01),而抑炎性细胞因子IL-10和IL-13的含量变化无显著差异。Baf A1处理的细胞表面标志物中CD197和HLA-DR(M1标志物)双阳性率与对照组相比显著升高(P<0.05),说明Baf A1可以诱导巨噬细胞向M1方向极化。免疫荧光结果显示,Baf A1处理后细胞自噬小体显著增多(P<0.05)。Western blot结果显示Baf A1处理后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达显著升高(P<0.05),而P62蛋白表达无显著差异。在自噬激活剂雷帕霉素处理组中,自噬体同样显著增多(P<0.05),但P62蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:巴弗洛霉素A1可以诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7向M1方向极化,可能与其抑制自噬下游自噬溶酶体的形成有关。 展开更多
关键词 自噬 巨噬细胞 极化 炎症
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载表阿霉素乙酰普鲁兰叶酸偶合体抗宫颈癌的作用研究 预览
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作者 唐红波 冯欣 +4 位作者 王爱华 胡海鹏 周密 阴赪宏 《肿瘤药学》 CAS 2019年第4期555-559,共5页
目的研究包载表阿霉素的乙酰普鲁兰叶酸偶合体纳米粒子(FPA/EPI)体内抗宫颈癌的作用及其机制。方法以人宫颈癌HeLa细胞移植瘤裸鼠为模型,分析尾静脉注射5 mg·kg^-1 FPA/EPI对荷瘤裸鼠体重、血液学、移植瘤体积和重量的影响,采用苏... 目的研究包载表阿霉素的乙酰普鲁兰叶酸偶合体纳米粒子(FPA/EPI)体内抗宫颈癌的作用及其机制。方法以人宫颈癌HeLa细胞移植瘤裸鼠为模型,分析尾静脉注射5 mg·kg^-1 FPA/EPI对荷瘤裸鼠体重、血液学、移植瘤体积和重量的影响,采用苏木精-伊红染色(HE)和原位末端标记法(TUNEL)观察FPA/EPI对移植瘤细胞凋亡的影响。结果FPA/EPI对HeLa细胞移植瘤裸鼠的体重未见明显影响,对肿瘤的生长具有抑制作用,肿瘤重量抑制率为32.37%。EPI及FPA/EPI均可诱导HeLa细胞凋亡。与对照组相比,FPA/EPI组网织红细胞显著降低(P<0.01)。结论FPA/EPI具有抗宫颈癌细胞移植瘤作用,但其药效和安全性尚需进一步的研究以明确。 展开更多
关键词 纳米粒子 乙酰普鲁兰 叶酸 宫颈癌 表阿霉素
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低强度脉冲超声对浅层关节软骨损伤的作用
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作者 杜福崇 王自强 +3 位作者 杨文裕 杜博 李学敏 《生物医学工程与临床》 CAS 2019年第4期399-405,共7页
目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对浅层关节软骨(p-AC)损伤的作用。方法选择健康日本大耳白兔16只,雌雄不限,体质量2.5~3.3kg。手术创建兔膝关节p-AC损伤,使用功率30mW/cm^2、脉冲通断比20%、脉冲频率1kHz、超声固有频率1.5MHz的LIPUS进... 目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对浅层关节软骨(p-AC)损伤的作用。方法选择健康日本大耳白兔16只,雌雄不限,体质量2.5~3.3kg。手术创建兔膝关节p-AC损伤,使用功率30mW/cm^2、脉冲通断比20%、脉冲频率1kHz、超声固有频率1.5MHz的LIPUS进行术后处理,每天20min。于LIPUS处理1周和3周,用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)检测损伤周围软骨组织mRNA的表达;处理6周和12周后,对损伤处进行组织学评估。分离、培养关节软骨细胞并进行LIPUS处理,分别在干预后第1、3、5天,检测软骨细胞的增殖及基因表达情况。结果在该实验参数下,6周和12周实验组和对照组均没有透明样软骨再生,但是对照组的白色纤维组织较多;与对照组相比,LIPUS下调了软骨组织中Ⅰ型胶原的基因表达,但是差异无统计学意义(P>0.05);在第1周时下调Ⅱ型胶原的表达(P=0.046);在第3周时下调蛋白多糖(ACAN)(P=0.017)、SOX9(P=0.001)的表达。组织学病理切片分析发现LIPUS没有促进p-AC修复;但是,与对照组相比,LIPUS对钙化软骨(CC)层与软骨下骨(SB)层有一定的保护作用。最后LIPUS在体外第5天时显著抑制软骨细胞增殖(P=0.0023),不能促进Ⅱ型胶原和ACAN的表达,但可以下调MMP-13的表达并在第5天时差异有显著统计学意义(P=0.000036)。结论在该实验条件下,LIPUS对p-AC损伤无明显的修复作用,但具有一定的组织保护和减弱组织退化的作用。 展开更多
关键词 关节软骨 浅层软骨损伤 低强度脉冲超声(LIPUS) 钙化软骨 软骨下骨
透明质酸-MMP敏感肽仿生杂化水凝胶的制备及其对骨髓间充质干细胞分化调控的影响 预览
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作者 任颖 杜博 +2 位作者 秦文娟 刘玲蓉 《功能材料》 CSCD 北大核心 2018年第4期4134-4138,4143共6页
设计合成了3种不同序列的基质金属蛋白酶(MMP)敏感肽,与活性基团马来酰亚胺修饰后的透明质酸进行共价交联,制备一类对MMP具有响应性的透明质酸仿生杂化水凝胶,并研究其对诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨方向分化的影响。以N-羟基... 设计合成了3种不同序列的基质金属蛋白酶(MMP)敏感肽,与活性基团马来酰亚胺修饰后的透明质酸进行共价交联,制备一类对MMP具有响应性的透明质酸仿生杂化水凝胶,并研究其对诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨方向分化的影响。以N-羟基硫代琥珀酰亚胺(Sulfo-NHS)与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)为催化剂,活化透明质酸羧基后,与N-(2-氨基乙基)马来酰亚胺三氟乙酸盐(AEM)常温搅拌反应,得到接枝马来酰亚胺基团的透明质酸(HA-MAL),马来酰亚胺基团与MMP敏感肽上的巯基在常温下即可发生加成反应。共价交联MMP敏感肽的水凝胶具有良好的机械性能,能够包埋细胞3D培养达4周以上。对水凝胶3D及孔板2D培养的BMSCs进行实时荧光定量PCR测定软骨方向分化的特征性基因Marker表达,结果显示,3种水凝胶对COL1A2、COL2A1、ACAN、SOX9 4种基因表达具有不同程度的上调作用,可促进BMSCs的软骨分化。 展开更多
关键词 透明质酸 基质金属蛋白酶 水凝胶 软骨分化
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牡蛎壳羟基磷灰石多孔骨修复材料制备工艺研究
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作者 薛启煌 邢永振 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2018年第4期291-295,300共6页
目的 验证水热反应法(220 ℃、6h)制备牡蛎壳羟基磷灰石(HA)的可行性,建立一种制备牡蛎壳HA多孔骨修复材料的方法,并实现对材料孔隙率和抗压强度的调控.方法 先采用水热反应法(220℃、6h)制备牡蛎壳HA,再以海绵浸渍和高温煅烧来获... 目的 验证水热反应法(220 ℃、6h)制备牡蛎壳羟基磷灰石(HA)的可行性,建立一种制备牡蛎壳HA多孔骨修复材料的方法,并实现对材料孔隙率和抗压强度的调控.方法 先采用水热反应法(220℃、6h)制备牡蛎壳HA,再以海绵浸渍和高温煅烧来获得HA多孔骨修复材料,并通过对浸浆次数和海绵吸附的浆料质量来调控材料的孔隙率和抗压强度.结果 220℃、6h的水热反应条件可使牡蛎壳CaC03有效转化为HA.浸浆次数为1、2、3次的正方体HA多孔骨修复材料(体积为1 cm^3)所吸收的浆料质量分别为0.184 8、0.318 1、0426 1 g,对应的材料孔隙率分别为91.5%、82.9%、78.5%,抗压强度分别为1.06、3.99、8.49 MPa.结论 牡蛎壳粉末在220℃、6h的水热反应条件下可有效转化为HA,采用海绵浸渍法制备HA多孔骨修复材料可得到理想的孔隙率和机械强度,但需通过调控海绵浸浆次数和吸收HA浆料的质量方可实现. 展开更多
关键词 牡蛎壳 羟基磷灰石 骨修复材料 孔隙率 抗压强度
成纤维细胞生长因子2不同作用时长对软骨细胞的影响
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作者 曹一汀 杨文裕 +3 位作者 史艳萍 李学敏 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2017年第2期91-97,I0005共8页
目的 比较成纤维细胞生长因子2(FGF2)体外不同作用时长对兔关节软骨细胞增殖及基因表达变化的影响.方法 分离、培养兔膝关节软骨细胞.取第3代软骨细胞分为3组进行研究:短时间(1 d)作用组细胞经FGF2处理1d后转移至无FGF2的培养基中... 目的 比较成纤维细胞生长因子2(FGF2)体外不同作用时长对兔关节软骨细胞增殖及基因表达变化的影响.方法 分离、培养兔膝关节软骨细胞.取第3代软骨细胞分为3组进行研究:短时间(1 d)作用组细胞经FGF2处理1d后转移至无FGF2的培养基中继续培养7d;长时间(7 d)作用组细胞用含FGF2的培养基连续培养7d;对照组细胞用无FGF2的培养基连续培养7d.分别于培养过程中的第1、3、7天,收集软骨细胞进行细胞增殖情况检测;提取软骨细胞mRNA,并通过实时荧光定量PCR检测骨形态发生蛋白2(BMP2)、骨形态发生蛋白4(BMP4)、Ⅱ型胶原α1(COL2A1)和性别决定区Y框蛋白9(SOX9)的表达情况;采用免疫荧光染色测定软骨细胞Ⅱ型胶原的含量.结果 与对照组相比,不同时长的FGF2处理均能促进软骨细胞的增殖,且短时间作用组和长时间作用组间差异无统计学意义(P>0.05).实时荧光定量结果显示,不同的处理方式引起了不同的基因表达变化,在连续培养7d后,与对照组和长时间作用组比较,短时间作用组的BMP2、BMP4、COL2A1和SOX9基因表达均上调,差异均具有统计学意义(均P<0.05).免疫荧光染色结果表明,连续培养7d后,短时间作用组的Ⅱ型胶原含量明显高于对照组和长时间作用组.结论 FGF2短时间作用于软骨细胞较长时间作用更有利于软骨细胞表型的维持和细胞外基质的合成. 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子2 软骨细胞 长时间作用 短时间作用
维生素与胎儿发育的关系 预览 被引量:1
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作者 陈丽玉 蔡际 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 2017年第1期78-81,共4页
胎儿在母体宫内发育经过受精卵、胚胎、胎儿三个阶段,任何影响母胎健康的病因都影响宫内受精卵、胚胎和胎儿的发育,严重者甚至导致胚胎停育、胎死宫内。缺乏维生素容易诱发人体各种疾病,孕期母体维生素的需要量增加,如果孕期母体维生素... 胎儿在母体宫内发育经过受精卵、胚胎、胎儿三个阶段,任何影响母胎健康的病因都影响宫内受精卵、胚胎和胎儿的发育,严重者甚至导致胚胎停育、胎死宫内。缺乏维生素容易诱发人体各种疾病,孕期母体维生素的需要量增加,如果孕期母体维生素摄入不足、补充不够、未得到及时增加或增加过量,都会影响胎儿器官的正常发育,导致胎儿发育不良。有些严重的胎儿畸形是致死性的,因此孕期要注意筛查及时处理。孕期加强母胎保健,重视优生优育,改善孕妇和儿童营养状况,合理调配膳食,适当补充维生素,了解各种维生素的功效和胎儿发育的相关性,有助于降低新生儿出生缺陷、防治妇女儿童营养缺乏病。 展开更多
关键词 维生素类 胚胎发育 先天畸形 产前保健
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Fe3O4-壳聚糖-胶原-纳米羟基磷灰石原位复合支架的仿生制备及表征 被引量:3
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作者 范田堂 陈景帝 +2 位作者 刘小翠 赵耀 《复合材料学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期2593-2597,共5页
为了制备具有磁热效应的多相杂化纳米复合材料,以可溶性钙盐和磷酸盐作为纳米羟基磷灰石(nHAP)的前驱体、可溶性铁盐和亚铁盐作为纳米Fe_3O_4的前驱体,并结合壳聚糖(CS)和胶原(Col)两种有机基体的优越特性,通过原位复合和冷冻干... 为了制备具有磁热效应的多相杂化纳米复合材料,以可溶性钙盐和磷酸盐作为纳米羟基磷灰石(nHAP)的前驱体、可溶性铁盐和亚铁盐作为纳米Fe_3O_4的前驱体,并结合壳聚糖(CS)和胶原(Col)两种有机基体的优越特性,通过原位复合和冷冻干燥技术,制备了纳米Fe_3O_4-CS-Col-nHAP复合支架材料。通过FTIR、XRD、SEM、物理性能测试仪(PPMS)等方法对复合支架的组成、结构、形貌和磁性等方面进行表征。结果表明:纳米Fe_3O_4-CS-Col-nHAP复合支架具有多级孔径结构,孔径尺寸约为100~150μm,孔隙率约为95%;低结晶度的nHAP晶体和纳米Fe_3O_4颗粒均匀分布在有机基体上;通过原位复合技术制备的纳米Fe_3O_4具有超顺磁性,随着磁性粒子含量的不断增加,磁饱和强度不断增强,饱和磁化强度为0.025emu/g。通过原位复合和冷冻干燥技术制备的多相杂化的纳米Fe_3O_4-CS-Col-nHAP复合材料具有良好的磁热效应,有望在骨修复组织工程中得到广泛应用。 展开更多
关键词 原位复合 纳米FE3O4 纳米羟基磷灰石 磁性复合材料 骨组织工程
生长因子在关节软骨损伤修复中的应用进展 被引量:1
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作者 曹一汀 杨文裕 +1 位作者 李学敏 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2017年第4期280-285,I0007共7页
关节是人体重要的运动器官,其组织结构特殊,成熟关节软骨组织没有血供,一旦损伤难以自愈。临床上常用的关节软骨损伤修复手段有微骨裂术、关节软骨移植、关节置换术、软骨组织工程等,但这些方法的修复效果都不理想。生长因子是体内... 关节是人体重要的运动器官,其组织结构特殊,成熟关节软骨组织没有血供,一旦损伤难以自愈。临床上常用的关节软骨损伤修复手段有微骨裂术、关节软骨移植、关节置换术、软骨组织工程等,但这些方法的修复效果都不理想。生长因子是体内组织分泌的一种具有生物活性的物质,可促进细胞生长、增殖、迁移和分化。软骨发育过程中有许多生长因子参与,如成纤维细胞生长因子(FGF)、骨形态发生蛋白(BMP)、胰岛素样生长因子(IGF)等。研究显示,在关节软骨修复过程中加入外源性生长因子可有效促进关节软骨损伤的修复。对目前应用于关节软骨损伤修复研究中的生长因子进行综述,讨论这些生长因子在关节软骨发育及其在关节软骨修复中的作用,分析生长因子在关节软骨修复应用中存在的问题。 展开更多
关键词 关节软骨损伤 修复 软骨细胞 生长因子
新型纳米复合水凝胶的可控制备及应用
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作者 高扬 孙蕾 +1 位作者 陈咏梅 《中国科学:技术科学》 CSCD 北大核心 2017年第10期1017-1037,共21页
纳米复合水凝胶作为一种柔性有机无机两相复合材料,充分利用了水凝胶及无机纳米粒子各自的物理化学功能以及两者之间的协同增益作用,从而可适应于更复杂的应用条件及满足更多样化的应用需求.本文综述了新型纳米复合水凝胶可控制备的设... 纳米复合水凝胶作为一种柔性有机无机两相复合材料,充分利用了水凝胶及无机纳米粒子各自的物理化学功能以及两者之间的协同增益作用,从而可适应于更复杂的应用条件及满足更多样化的应用需求.本文综述了新型纳米复合水凝胶可控制备的设计思路以及在探测检测、环境保护、能源开发、生物医学等领域方面的应用,并对其未来发展进行了展望. 展开更多
关键词 高分子水凝胶 纳米材料 水声探测 能源环境 生物医学
乙酰普鲁兰纳米粒子与牛血清白蛋白的相互作用
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作者 唐红波 +3 位作者 陶晓军 杜博 冯欣 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2016年第2期83-86,106,F0003共6页
目的考查乙酰普鲁兰纳米粒子(PANs)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,为研究PANs体内药代动力学特征奠定基础。方法将不同浓度的PANs溶液和BSA溶液混合,应用荧光法和圆二色谱(CD)法考察二者间的相互作用,计算PANs与BSA结合的缔... 目的考查乙酰普鲁兰纳米粒子(PANs)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,为研究PANs体内药代动力学特征奠定基础。方法将不同浓度的PANs溶液和BSA溶液混合,应用荧光法和圆二色谱(CD)法考察二者间的相互作用,计算PANs与BSA结合的缔合常数(Kq),观测PANs-BSA抗尿素变性的作用。结果PANs对BSA荧光的影响具有浓度相关性,PANs溶液(0.015~0.25mg/m1)与BSA(O.25mg/m1)的缔合常数Kq从2.64×10^4增高至3.55×10^5;在尿素或加热条件下,PANs-BSA溶液和BSA溶液的cD光谱具有相似的变化趋势。结论PANs对BSA的荧光光谱具有显著影响,但PANs未影响尿素和高温对BSA的变性作用。 展开更多
关键词 乙酰普鲁兰 牛血清白蛋白 纳米粒子 荧光光谱 圆二色谱
富血小板血浆联合人重组骨形态形成蛋白-2诱导羊脂肪基质干细胞成骨化趋势的研究 被引量:3
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作者 郭洪刚 姚芳莲 +4 位作者 汪涛 粱玉柱 杨少光 郑永发 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2016年第2期138-142,共5页
目的探讨如何优化羊等大型哺乳类动物的脂肪基质干细胞(ADSCs)的生物活性及适应体外成骨分化,并建立一种羊脂肪基质干细胞体外诱导成骨的改良方法。方法从2013年3月至2014年9月,取安哥拉羊静脉血制备自体源性富血小板血浆(PRP),... 目的探讨如何优化羊等大型哺乳类动物的脂肪基质干细胞(ADSCs)的生物活性及适应体外成骨分化,并建立一种羊脂肪基质干细胞体外诱导成骨的改良方法。方法从2013年3月至2014年9月,取安哥拉羊静脉血制备自体源性富血小板血浆(PRP),并取羊腹部脂肪,经系列原代与传代培养,如下诱导羊骨化脂肪基质干细胞.并分为4组:联合诱导组(富血小板血浆加人重组骨形态发生蛋白-2加ADSCs)、成骨因子组(人重组骨形态发生蛋白-2加ADSCs)、常规诱导组(地塞米松加抗坏血酸加甘油磷酸钠加ADSCs)及非诱导组(空白诱导),第1、3、5、7、9、13、17和21天,倒置显微镜观察,茜素红及VonKossa染色,测定增殖、I型胶原及骨钙素(OC)含量。对各组间差异进行单因素方差分析和最小显著差异t检验,SPSS11.0统计软件进行统计学分析。结果与其他组相比,联合诱导组细胞体积明显增大,胞浆中的细胞器发达,细胞生长旺盛、细胞外基质矿化结节丰富,呈集落状层叠分布:矿化结节出现时间及分布规律:联合诱导组〉成骨因子组〉常规组〉非诱导组;ALP表达时效及强度情况:联合诱导组〉成骨因子组〉常规组〉非诱导组;此外,第13天时联合诱导组增殖活力、I型胶原分别为(0.82±0.19)AU、(79.82±1.36)μg/ml,第17天时0C含量为(78.51±4.32)μg/ml],均高于其它组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论PRP联合rhBMP-2能通过协同机制,发挥强化ADSCs诱导成骨效应,为一种可行的优化成骨诱导方法。 展开更多
关键词 富血小板血浆 脂肪基质干细胞 诱导成骨 人重组骨形态形成蛋白-2
载TGF-β1纳米粒的胶原/丝素蛋白复合支架的制备与表征
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作者 方哲翔 王建华 +1 位作者 程娘梅 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2016年第5期271-275,I0007,I0008共7页
目的 构建一种载转化生长因子β1(TGF-β1)纳米粒的双层胶原/丝素蛋白复合支架.方法 制备载TGF-β1的壳聚糖-肝素(Ch-Hep)纳米粒,检测其形态、粒径、Zeta电位和包封率.制备不同胶原和丝素蛋白质量比(2∶8、3∶7、7∶3、8∶2、10∶... 目的 构建一种载转化生长因子β1(TGF-β1)纳米粒的双层胶原/丝素蛋白复合支架.方法 制备载TGF-β1的壳聚糖-肝素(Ch-Hep)纳米粒,检测其形态、粒径、Zeta电位和包封率.制备不同胶原和丝素蛋白质量比(2∶8、3∶7、7∶3、8∶2、10∶0)的5种胶原/丝素蛋白复合材料,分别检测其吸水率、孔隙率、热水溶失率和生物相容性;选择其中2种综合性能良好的复合材料分别作为复合支架的疏松层和致密层,构建载TGF-β1纳米粒的双层胶原/丝素蛋白复合支架,观察其形态并进行体外释放动力学研究.结果 Ch-Hep纳米粒的平均粒径为(718.2±73.6) nm,Zeta电位为(25.5±0.8) mV,对TGF-β1的包封率为(84.82±1.57)%.随着胶原/丝素蛋白复合材料中胶原含量的增加,材料的吸水率、孔隙率逐渐增加,热水溶失率逐渐降低;5种材料对骨髓间充质干细胞(BMSCs)均有促生长和增殖的作用.综合考虑后选用质量比为3∶7和7∶3的胶原/丝素蛋白复合材料分别作为复合支架的致密层和疏松层,构建的胶原/丝素蛋白复合支架为双层结构,一侧结构致密,另一侧疏松多孔.体外释放动力学研究表明,复合支架对TGF-β1具有定向时空控制性释放作用.结论 载TGF-β1纳米粒的双层胶原/丝素蛋白复合支架对TGF-β1具有良好的时空控制释放作用,有望作为生长因子的控缓释支架材料应用于软骨组织工程. 展开更多
关键词 胶原 丝素蛋白 转化生长因子Β1 纳米粒
医用胶原修复膜病毒灭活/去除工艺的验证和评价 被引量:3
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作者 方哲翔 王建华 +1 位作者 袁平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第12期1341-1345,共5页
目的验证和评价医用胶原修复膜制备工艺中过氧化氢溶液、低p H孵放和γ射线辐照灭活/去除病毒的可行性。方法以水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)、伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、呼肠弧病毒Ⅲ(respiratory... 目的验证和评价医用胶原修复膜制备工艺中过氧化氢溶液、低p H孵放和γ射线辐照灭活/去除病毒的可行性。方法以水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)、伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、呼肠弧病毒Ⅲ(respiratory enteric orphan virusⅢ,Reo 3)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)作为指示病毒,采用非洲绿猴肾细胞(Vero)和猪肾细胞(PK-15)进行病毒增殖和感染性评价,Karber法测定病毒滴度;分别对牛腱片样品进行3%过氧化氢、低p H孵放处理(pH 3.4±0.3),检测病毒灭活/去除效果;将医用胶原修复膜中间品进行^60Coγ射线辐照(剂量为25 k Gy),检测病毒灭活/去除效果。结果经3%过氧化氢溶液处理1 h后,样品VSV和PRV的病毒灭活值均大于4 Logs;经低p H孵放处理14 d后,样品中已检测不到VSV和PRV,病毒灭活值分别为6.55和5.59 Logs;经25 k Gy剂量^60Coγ射线辐照处理后,样品中VSV、PRV、Reo3和PPV均被有效灭活,病毒灭活值分别为5.64、4.35、4.87和5.36 Logs。结论医用胶原修复膜制备工艺中的3种灭活/去除病毒步骤均有效,经灭活/去除病毒后的产品质量安全可靠。 展开更多
关键词 医用胶原修复膜 病毒灭活/去除 过氧化氢溶液 低pH孵放 Γ射线辐照
乙酰普鲁兰纳米粒子BeWo b30细胞毒性及摄取研究 预览
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作者 蒋子雯 周志敏 +3 位作者 唐红波 杜博 代荫梅 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第4期418-423,共6页
目的通过乙酰普鲁兰纳米粒子对人绒毛膜癌细胞(BeWo b30)的细胞毒性以及细胞摄取研究,为普鲁兰基纳米药物跨胎盘屏障机制及妊娠期用药提供科学依据。方法以透析法制备异硫氰酸荧光素标记的乙酰普鲁兰纳米粒子(fluorescein isothiocya... 目的通过乙酰普鲁兰纳米粒子对人绒毛膜癌细胞(BeWo b30)的细胞毒性以及细胞摄取研究,为普鲁兰基纳米药物跨胎盘屏障机制及妊娠期用药提供科学依据。方法以透析法制备异硫氰酸荧光素标记的乙酰普鲁兰纳米粒子(fluorescein isothiocyanate labelled pullulan acetate nanoparticles,PA-FITC NPs),分别利用激光粒度分析仪、扫描电镜、透射电镜考察乙酰普鲁兰纳米粒子粒径、Zeta电位、形貌及结构;用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞生长曲线,考察不同浓度纳米粒子(0.4~2.0 mg/m L)对BeWo b30细胞的细胞毒性;考察纳米粒子浓度、孵育时间、孵育温度对BeWo b30细胞摄取纳米粒子的影响。结果 PA-FITC纳米粒子水合直径为(348.0±114.3)nm,Zeta电位为(-26.0±5.1)m V,呈表面光滑、内部结构规整的球形。PA-FITC纳米粒子在0.4~2.0 mg/m L浓度范围内细胞存活率为95.0%~100.5%,差异无统计学意义(P〉0.05);BeWo b30细胞摄取实验表明:细胞吞噬纳米粒子的量随着PA-FITC NPs的浓度升高和孵育时间延长而增大;当孵育温度从37℃降低至4℃,PA-FITC NPs的细胞摄取量显著降低(P〈0.05)。结论乙酰普鲁兰纳米粒子呈球形,对BeWo b30细胞无明显细胞毒性;BeWo b30细胞摄取PA-FITC纳米粒子与纳米粒子浓度、孵育时间和孵育温度呈正相关。 展开更多
关键词 普鲁兰 BEWO b30细胞 纳米药物 妊娠期用药
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甲氨喋呤长循环脂质体对人骨肉瘤细胞的体外抗瘤活性 预览 被引量:1
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作者 秦迎州 陈汉 +2 位作者 刘玲蓉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第30期4489-4495,共7页
背景:脂质体作为一种新型给药系统,具有不良反应小、无免疫原性和可生物降解等优点,将甲氨喋呤包载入脂质体中可显著降低药物毒性,改善药物抗肿瘤效果。目的:制备甲氨喋呤长循环脂质体,考察其对人骨肉瘤细胞MG-63的抗瘤活性。方法:... 背景:脂质体作为一种新型给药系统,具有不良反应小、无免疫原性和可生物降解等优点,将甲氨喋呤包载入脂质体中可显著降低药物毒性,改善药物抗肿瘤效果。目的:制备甲氨喋呤长循环脂质体,考察其对人骨肉瘤细胞MG-63的抗瘤活性。方法:采用薄膜分散法制备传统甲氨喋呤脂质体,后插入法制备甲氨喋呤长循环脂质体(甲氨喋呤初始质量浓度分别为9.1,1.82,0.364 g/L),分别采用超速离心法、葡聚糖凝胶G-10微柱离心法和葡聚糖凝胶G-50微柱离心法去除甲氨喋呤长循环脂质体未包载的游离药物,对3种方法纯化后脂质体的回收率、粒径、形态、包封率及药脂比等理化性质进行表征。分别以0,1,5,25 mg/L甲氨喋呤长循环脂质体(选择超速离心法与葡聚糖凝胶G-50微柱离心法纯化的脂质体)和游离甲氨喋呤稀释液培养人骨肉瘤细胞MG-63,24,48 h后采用MTS法检测细胞毒性。结果与结论:(1)甲氨喋呤长循环脂质体的粒径在200 nm左右,为均匀的球形或近球形;(2)回收率实验结果显示,葡聚糖凝胶G-50微柱离心法是最合适的甲氨喋呤长循环脂质体纯化方法,具有回收完全和快速的优点;(3)甲氨喋呤初始质量浓度相同时,超速离心法、葡聚糖凝胶G-10微柱离心法纯化的脂质体包封率与药脂比明显低于葡聚糖凝胶G-50微柱离心法纯化的脂质体;(4)体外细胞毒性实验表明,在同质量浓度条件下,甲氨喋呤长循环脂质体的细胞毒性远高于游离甲氨喋呤,葡聚糖凝胶G-50微柱离心法纯化的甲氨喋呤长循环脂质体细胞活性普遍比超速离心法纯化的脂质体细胞毒性高;(5)结果表明,甲氨喋呤长循环脂质体对于人骨肉瘤细胞具有较强的体外抗瘤活性。 展开更多
关键词 脂质体 甲氨喋呤 骨肉瘤 组织工程 生物材料 材料相容性 长循环 人骨肉瘤细胞MG-63 国家自然科学基金
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多糖分子质量与配基连接臂长度对改性普鲁兰药物载体的性质影响 被引量:1
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作者 明明 沈伟 +2 位作者 白永刚 杨文智 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2015年第1期5-10,共6页
目的 研究普鲁兰分子质量和胆固醇配基连接臂长度对胆固醇改性普鲁兰自组装、载药及体外释放等性质的影响.方法 将胆固醇通过2种长度的连接臂共价修饰到2种分子质量的普鲁兰多糖上,合成不同取代度的胆固醇改性普鲁兰(共8种),使其在水... 目的 研究普鲁兰分子质量和胆固醇配基连接臂长度对胆固醇改性普鲁兰自组装、载药及体外释放等性质的影响.方法 将胆固醇通过2种长度的连接臂共价修饰到2种分子质量的普鲁兰多糖上,合成不同取代度的胆固醇改性普鲁兰(共8种),使其在水中组装成纳米粒,并考察多糖分子质量及连接臂长度对纳米粒形态、粒径的影响.同时,以阿霉素、米托蒽醌为模型药物,考察其在改性普鲁兰多糖纳米粒中的包封及释放行为特征.结果 所有改性普鲁兰多糖均可形成纳米粒,包封药物后可形成载药纳米粒;多糖分子质量和连接臂长度对其性质具有一定的影响.结论 载药前,分子质量较大、连接臂较短的改性多糖具有更好的稳定性;载药后,其对药物的包封、粒径、体外释放行为的影响规律与药物种类相关. 展开更多
关键词 普鲁兰 纳米粒 分子质量 连接臂长度 药物释放
聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖取代度测定方法与分析 预览 被引量:1
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作者 杨心督 《河北医药》 CAS 2015年第12期1885-1886,共2页
目的探讨和分析聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖取代度的测定方法。方法采用胶体滴定法和核磁共振谱法测定三种不同取代程度的聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖,并对测定结果进行分析。结果聚乙二醇单甲醚取代度核磁共振法测定结果分别为19%、35%、4... 目的探讨和分析聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖取代度的测定方法。方法采用胶体滴定法和核磁共振谱法测定三种不同取代程度的聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖,并对测定结果进行分析。结果聚乙二醇单甲醚取代度核磁共振法测定结果分别为19%、35%、42%,胶体滴定法测定结果为5%、9%、13%。结论核磁共振谱法和胶体滴定法均可测定聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖取代度,在合成过程中采用胶体滴定法对取代程度进行测定,方法简单,易于操作。 展开更多
关键词 聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖 取代度 测定方法
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