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烟草谷氧还蛋白NbGRX1的亚细胞定位及抗旱功能研究 预览 被引量:2
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作者 郭玉双 余婧 +7 位作者 蒲伟 邹颉 付强 余世洲 林世锋 孝廉 赵杰宏 夏范讲 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期34-39,共6页
[目的]本文旨在分析烟草NbGRX1基因的亚细胞定位及抗旱功能。[方法]在前期研究中,我们从烟草中克隆了1个谷氧还蛋白基因NbGRX1,并对其表达特性进行了研究。在此基础上,对NbGRX1蛋白的亚细胞定位及抗旱功能进行研究。利用病毒介导的... [目的]本文旨在分析烟草NbGRX1基因的亚细胞定位及抗旱功能。[方法]在前期研究中,我们从烟草中克隆了1个谷氧还蛋白基因NbGRX1,并对其表达特性进行了研究。在此基础上,对NbGRX1蛋白的亚细胞定位及抗旱功能进行研究。利用病毒介导的基因沉默,在烟草中沉默了该基因,并调查NbGRX1基因沉默后烟草对干旱的响应。同时采用农杆菌介导法,将NbGRX1基因转化至拟南芥中,筛选单拷贝插入的纯合转基因拟南芥进行后续研究,对转基因拟南芥及对照进行干旱处理,并分析其表型。[结果]亚细胞定位研究表明,空载体中的GFP(绿色荧光蛋白)定位在细胞质和细胞核中,GFP:NbGRX1的融合蛋白均匀分布在细胞质和细胞核中,因此可以推测NbGRX1蛋白能定位在植物的细胞核和细胞质中。病毒介导的基因沉默研究表明,NbGRX1基因沉默烟草与对照相比对干旱胁迫更为敏感,更容易出现黄化和萎蔫的症状,叶片相对含水量下降;NbGRX1基因超量表达的株系干旱能力明显高于对照。[结论]烟草NbGRX1基因能够提高植物的抗旱性。 展开更多
关键词 谷氧还蛋白基因 干旱 病毒介导的基因沉默 超量表达
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我国主流媒体品牌融合趋势和方向刍议 预览
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作者 孝廉 《新闻世界》 2016年第7期41-44,共4页
党的十八大以来,以习近平同志为总书记的党中央高度重视传统媒体和新兴媒体的融合发展,媒体融合已经从传媒发展理念上升到了国家发展战略。本文选取品牌这一媒体要素作为切入点,探讨我国主流媒体如何适应新闻传播规律和新兴媒体发展规律... 党的十八大以来,以习近平同志为总书记的党中央高度重视传统媒体和新兴媒体的融合发展,媒体融合已经从传媒发展理念上升到了国家发展战略。本文选取品牌这一媒体要素作为切入点,探讨我国主流媒体如何适应新闻传播规律和新兴媒体发展规律,加快推进品牌融合发展,以品牌建设带动提升新闻舆论工作的整体水平。 展开更多
关键词 主流媒体 品牌融合 发展趋势
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地方晒烟种质资源SRAP标记的遗传多样性分析 被引量:4
3
作者 吉顺 孝廉 +3 位作者 杨春元 王仁刚 王轶 任学良 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1906-1913,共8页
解析地方晒烟种质资源的遗传背景,为晒烟种质的高效利用提供依据。本研究筛选多态性丰富的14对SRAP引物组合,对贵州省内广泛地理来源的136份地方性晒烟资源进行遗传多样性分析,根据Model-base和NJ聚类进行遗传结构分析。结果表明:参试... 解析地方晒烟种质资源的遗传背景,为晒烟种质的高效利用提供依据。本研究筛选多态性丰富的14对SRAP引物组合,对贵州省内广泛地理来源的136份地方性晒烟资源进行遗传多样性分析,根据Model-base和NJ聚类进行遗传结构分析。结果表明:参试材料具有较高的遗传多样性,共扩增出250个稳定的多态性位点,多态性位点比率为97.6%,有效等位基因数(Ne)为1.22,Nei’s基因多样性指数(H)为0.15,Shannon’s信息指数(I)为0.26,材料间平均遗传距离为0.778,多数材料间亲缘关系较远。Model-base遗传结构分析和NJ聚类结果一致,将总材料划分为三大亚群,亚群Ⅰ包含46份资源,亚群Ⅱ包含47份资源,亚群Ⅲ包含43份资源,划分结果与材料的地理来源关系不大,三个亚群多样性依次为:亚群Ⅱ>亚群Ⅰ>亚群Ⅲ。 展开更多
关键词 晒烟 SRAP标记 遗传多样性 遗传结构
环境胁迫影响植物开花的分子机制 预览 被引量:2
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作者 吉顺 孝廉 +3 位作者 王仁刚 谢升东 王轶 任学良 《浙江大学学报:农业与生命科学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期289-305,共17页
鉴于植物对开花时间的调节是其适应逆境的重要机制,且在复杂的遗传网络调控下,植物检测并整合外源(如光周期和温度)和/或内源(如年龄和激素水平)信号来诱导或抑制成花转变。今从分子生物学角度详细介绍光、温、水、盐和营养等环境... 鉴于植物对开花时间的调节是其适应逆境的重要机制,且在复杂的遗传网络调控下,植物检测并整合外源(如光周期和温度)和/或内源(如年龄和激素水平)信号来诱导或抑制成花转变。今从分子生物学角度详细介绍光、温、水、盐和营养等环境胁迫对植物开花时间的影响,这些过程涉及遗传学和表观遗传学上的改变;其目的在于从植物与环境互作的角度对植物开花时间的分子遗传调控网络进行补充,以期为科研工作者更好地研究环境与植物开花时间的关系提供参考。 展开更多
关键词 植物 开花时间 环境胁迫 分子机制
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烟草赖氨酸脱羧酶基因NtLDC1的克隆和表达分析
5
作者 吉顺 孝廉 +4 位作者 林世锋 付强 余婧 邹颉 李勇 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期445-453,共9页
赖氨酸脱羧酶(lysine decarboxylase,LDC)是生物碱合成第一步所需的关键酶。为研究LDC基因在烟草中特性和功能,本研究采用同源克隆和RT-PCR方法从栽培烟草‘K326’中克隆得到一个LDC基因,命名为Nt LDC1,Gen Bank登录号为KU507075。序... 赖氨酸脱羧酶(lysine decarboxylase,LDC)是生物碱合成第一步所需的关键酶。为研究LDC基因在烟草中特性和功能,本研究采用同源克隆和RT-PCR方法从栽培烟草‘K326’中克隆得到一个LDC基因,命名为Nt LDC1,Gen Bank登录号为KU507075。序列分析表明烟草Nt LDC1基因ORF全长666 bp,编码221个氨基酸的蛋白,相对分子质量为24 264.9 Da,等电点为5.43。不同植物中LDC蛋白较为保守,Nt LDC1与番茄和马铃薯的LDC蛋白高度相似,进化分析表明Nt LDC1与番茄中LDC的亲缘关系最近。利用实时荧光定量PCR对Nt LDC1基因进行组织表达分析,结果显示Nt LDC1基因在烟草根、茎、叶、花中均有表达,在叶片中的表达水平最高。低温可以诱导Nt LDC1基因的表达,在低温处理8 h基因的表达量达到最高,表明Nt LDC1可能在烟草低温胁迫应答中发挥作用。 展开更多
关键词 烟草 赖氨酸脱羧酶(LDC) 基因克隆 表达分析
两个烟草Nup96基因的分子克隆及其表达分析 预览
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作者 林世锋 王仁刚 +4 位作者 史跃伟 孝廉 邹颉 任学良 余婧 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期83-88,共6页
为研究烟草低温早花的分子机理,采用RT-PCR结合RACE法,从烟草品种NC82中克隆到2个Nup96基因c DNA全长序列,分别命名为Nt Nup96a和Nt Nup96b,Gen Bank登陆号分别为KU558693和KU558694。序列分析表明2个基因均编码1037个氨基酸残基的蛋白... 为研究烟草低温早花的分子机理,采用RT-PCR结合RACE法,从烟草品种NC82中克隆到2个Nup96基因c DNA全长序列,分别命名为Nt Nup96a和Nt Nup96b,Gen Bank登陆号分别为KU558693和KU558694。序列分析表明2个基因均编码1037个氨基酸残基的蛋白,氨基酸序列一致性为97%,与拟南芥Nup96蛋白(NP_178183)的序列一致性为60%;2个基因编码蛋白具有典型的植物Nup96结构特性,包含1个Nup96结构域和1个自酶解结构域。荧光定量PCR分析表明:在正常的生长条件下,Nt Nup96a和Nt Nup96b在烟草各组织中均有表达,在叶片中的表达量较弱,且随着植株生长其表达量显著下降;在12℃处理10天后,在烟草叶片中2基因的表达都出现了明显的下调,这一结果提示Nup96可能是烟草开花时间调控的抑制因子,其受低温诱导下调表达可能与NC82低温敏感,易早花特性相关。 展开更多
关键词 烟草 Nup96 基因克隆 表达分析
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蛋白泛素化和类泛素化修饰在植物开花时间调控中的作用 预览
7
作者 孝廉 吉顺 +2 位作者 邹颉 赵杰宏 任学良 《浙江大学学报:农业与生命科学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期371-384,共14页
开花是植物由营养生长向生殖生长转变的关键过程,植物经过长期的演化已经进化出了精确调节开花时间的复杂网络.其中,泛素化和类泛素化作为广泛存在的蛋白质翻译后修饰形式,在植物开花时间调控过程中发挥了重要作用.本文详细介绍了... 开花是植物由营养生长向生殖生长转变的关键过程,植物经过长期的演化已经进化出了精确调节开花时间的复杂网络.其中,泛素化和类泛素化作为广泛存在的蛋白质翻译后修饰形式,在植物开花时间调控过程中发挥了重要作用.本文详细介绍了泛素/26S蛋白酶体途径和类泛素化在光周期途径、春化途径、环境温度途径和赤霉素途径等各开花时间调控中的作用,为更好地理解开花途径中蛋白质翻译后修饰作用提供参考. 展开更多
关键词 开花途径 泛素化 类泛素化
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自动化工作站批量提取烤后烟叶DNA方法的建立与应用 预览 被引量:1
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作者 余婧 赵杰宏 +2 位作者 邹颉 付强 孝廉 《贵州农业科学》 CAS 2015年第5期217-219,222共4页
为建立高效、快速、准确的烤后烟叶DNA提取方法,采用BioMek NXP自动化工作站与国产DNA磁珠法提取试剂盒相结合,建立了自动化批量提取烤后烟叶基因组DNA(作为PCR模板)的方法,以获取高质量的烤后烟叶DNA满足PCR检测需求。结果表明:水... 为建立高效、快速、准确的烤后烟叶DNA提取方法,采用BioMek NXP自动化工作站与国产DNA磁珠法提取试剂盒相结合,建立了自动化批量提取烤后烟叶基因组DNA(作为PCR模板)的方法,以获取高质量的烤后烟叶DNA满足PCR检测需求。结果表明:水浴时间30min、样本量70-80mg、80%乙醇洗涤4次能获得OD260/OD280为1.7-1.9,浓度大于100ng/μL的烤后烟叶基因组DNA,合格率达95.8%。经PCR定性扩增烟草硝酸还原酶基因(NR),该方法所提的DNA溶液中无PCR反应抑制物残留,可直接用于PCR定性分析。烟叶粉末经预处理,取上清液上机后约110min可完成96份样品的DNA提取工作。 展开更多
关键词 自动化工作站 烤后烟叶 DNA提取方法
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烟草中一个LTR类反转录转座子基因的克隆与功能分析 预览 被引量:1
9
作者 郭玉双 陈静 +8 位作者 刘筱嘉 余世洲 余婧 林世锋 邹颉 付强 孝廉 赵杰宏 任学良 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期936-942,共7页
[目的]分析烟草中LTR类反转录转座子对植物生长发育的影响.[方法]利用同源克隆及RACE的方法,从烟草栽培品种‘贵烟1号’cDNA中克隆得到了1个烟草反转录转座子的全长cDNA序列,命名为Ntrt1(GenBank登录号:KC899077).利用实时定量RT-PC... [目的]分析烟草中LTR类反转录转座子对植物生长发育的影响.[方法]利用同源克隆及RACE的方法,从烟草栽培品种‘贵烟1号’cDNA中克隆得到了1个烟草反转录转座子的全长cDNA序列,命名为Ntrt1(GenBank登录号:KC899077).利用实时定量RT-PCR研究了该基因在烟草不同组织中的表达水平;构建了基于双生病毒卫星诱导的Ntrt1的基因沉默载体,以中国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)为辅助病毒在烟草中沉默了该基因,并调查了基因沉默后的表型.[结果]序列分析表明:该基因全长5 046 bp,编码3个ORF,分别为Gag/pol多聚蛋白、反转录转座子的中心蛋白以及一个整合酶.该基因能在烟草的根、茎、叶中表达,在叶片中的表达量最高.Ntrt1基因沉默烟草与对照相比,烟草植株明显变矮.[结论]Ntrt1在烟草的生长发育中具有重要作用. 展开更多
关键词 反转录转座子 烟草植株 基因沉默 同源克隆 R类 全长CDNA序列 实时定量RT-PCR 中国番茄黄化曲叶病毒
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烟草转基因研究常用遗传元件筛查策略 预览 被引量:2
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作者 余婧 孝廉 +2 位作者 赵丹 邹颉 赵杰宏 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期78-83,共6页
通过检索国内外近10年烟草转基因研究的相关文献,建立了转基因烟草常用转化遗传元件的数据库,统计了每个遗传元件及组合元件的使用频率后,发现利用7种遗传元件,包括:启动子P-35S、标记基因NPT II、HPT、Bar和aadA、报告基因GUS及... 通过检索国内外近10年烟草转基因研究的相关文献,建立了转基因烟草常用转化遗传元件的数据库,统计了每个遗传元件及组合元件的使用频率后,发现利用7种遗传元件,包括:启动子P-35S、标记基因NPT II、HPT、Bar和aadA、报告基因GUS及终止子T-NOS作为靶标元件组合,能使目前烟草转基因事件的理论筛查率达到100%,从而构建出转基因烟草的优化筛查策略。 展开更多
关键词 转基因烟草 遗传元件 转基因筛查
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烟草牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶小亚基基因的克隆及组织表达谱 预览 被引量:8
11
作者 林世锋 王仁刚 +6 位作者 孝廉 邹颉 钟晓武 郭玉双 付强 赵杰宏 任学良 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2014年第2期70-75,共6页
为揭示牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(GGPPS)小亚基在烟草(Nicotiana tabacum)中的生理功能,采用电子克隆的方法,结合RT—PCR和SMARTRACE技术,从烟草中克隆到1个栊牛儿基栊牛儿基焦磷酸合成酶小亚基基因的cDNA序列,命名为NtGGP... 为揭示牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(GGPPS)小亚基在烟草(Nicotiana tabacum)中的生理功能,采用电子克隆的方法,结合RT—PCR和SMARTRACE技术,从烟草中克隆到1个栊牛儿基栊牛儿基焦磷酸合成酶小亚基基因的cDNA序列,命名为NtGGPPS5(GenBank登陆号:KF316932)。该基因全长1320bp,编码332个氨基酸,与番茄(Solanumlycopersicum,XP-004246572)及其野生种(Solanum pennellii,ADZ24721)的GGPPS小亚基的氨基酸序列一致性均为92%,具有一个特征性的异戊二烯合成酶保守的天门冬氨酸富集区。进化分析表明,植物GGPPS分为大亚基和小亚基两个分支,而且NtGGPPS5属于小亚基。实时荧光定量PCR试验表明,NtGGPPS5基因在烟草根、茎、叶和芽中均有表达,表达量为芽〉叶〉茎〉根。 展开更多
关键词 烟草 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶小亚基 基因克隆 组织表达
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基于焓湿图的被动式建筑设计策略分析 预览 被引量:3
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作者 同伟 赵玉芬 孝廉 《建筑节能》 CAS 2013年第3期35-37,共3页
利用Weathertool工具中的焓湿图对佳木斯地区的气象数据进行分析,数据为CSWD(Chinese Standard Weather Data)。通过焓湿图的分析,确定出适合佳木斯地区的具体被动式设计策略,主要有被动式太阳能采暖、使用围护结构的蓄热材料和自... 利用Weathertool工具中的焓湿图对佳木斯地区的气象数据进行分析,数据为CSWD(Chinese Standard Weather Data)。通过焓湿图的分析,确定出适合佳木斯地区的具体被动式设计策略,主要有被动式太阳能采暖、使用围护结构的蓄热材料和自然通风,为建筑师在建筑方案设计阶段提供有效的参考。 展开更多
关键词 Weathertool软件 焓湿图 被动式设计策略 佳木斯
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北部湾之声开播一周年巡礼 预览 被引量:2
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作者 孝廉 《对外传播》 2011年第1期 51-52,共2页
2009年10月23日,广西南宁,一个清脆的声音“这里是北部湾之声……”划破云层。随着调频旋钮被启动,用英语、泰语、越南语、广州话、普通话等五个语种和方言播报的调频台呼号,第一次响彻在北部湾上空。
关键词 北部湾 2009年 越南语 广州话 普通话 调频 泰语 方言
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间接免疫荧光法检测冠心病患者外周血单个核细胞PP65抗原 预览 被引量:2
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作者 姚磊 孝廉 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期 85-86,共2页
目的:了解冠心病患者外周血单个核细胞巨细胞病毒活动感染情况,并探讨动脉粥样硬化与HCMV感染的关系。方法:运用间接免疫荧光的方法,对29例冠心病患者、39例其他心血管病患者以及42例正常对照组外周血单个核细胞巨细胞病毒PP65抗原... 目的:了解冠心病患者外周血单个核细胞巨细胞病毒活动感染情况,并探讨动脉粥样硬化与HCMV感染的关系。方法:运用间接免疫荧光的方法,对29例冠心病患者、39例其他心血管病患者以及42例正常对照组外周血单个核细胞巨细胞病毒PP65抗原进行检测,并运用免疫散射比浊法对各组CRP进行测定。结果:29例冠心病患者中巨细胞病毒pp65抗原阳性者7例,占24.1%;与其他心血管患者中巨细胞病毒pp65抗原阳性率(5.1%)以及正常对照组巨细胞病毒pp65抗原阳性率(2.4%)相比明显升高,29例冠心病患者CRP水平(5.06±1.79mg/L)也明显高于其它两组(P〈0.05)。结论:冠心病患者外周血单个核细胞巨细胞病毒活动感染可能在动脉粥样硬化的发展过程中有重要作用。 展开更多
关键词 冠心病 巨细胞病毒 PP65抗原 单个核细胞
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浅谈广播宣传档案及其管理 预览 被引量:1
15
作者 孝廉 《兰台世界:上半月》 北大核心 2008年第10期 24-25,共2页
广播宣传档案是各级各类广播电台在宣传活动中采录、播出的具有保存价值的各种节目的文字稿、录音带、录像带等。它是广播电台宣传活动的历史记录,是日常播出、工作查考、经验总结、历史研究的真实凭证。随着我国广播事业的持续繁荣发... 广播宣传档案是各级各类广播电台在宣传活动中采录、播出的具有保存价值的各种节目的文字稿、录音带、录像带等。它是广播电台宣传活动的历史记录,是日常播出、工作查考、经验总结、历史研究的真实凭证。随着我国广播事业的持续繁荣发展,广播宣传档案的数量日益增多,重视和加强广播宣传档案的管理不容忽视。 展开更多
关键词 广播宣传档案 管理 宣传活动 广播电台 保存价值 历史记录 历史研究 广播事业
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关于做好广播电台信息工作的几点思考 预览
16
作者 孝廉 《办公室业务》 2008年第3期 44-45,共2页
20多年前,美国未来学家奈斯比特就曾在其《大趋势——改变我们生活的10个新方向》一书中预言:信息社会将成为人类社会的未来社会形态,新的权力来源不是少数人手中的金钱,而是多数人手中的信息。时至今日,人类社会已真正进入信息时代,... 20多年前,美国未来学家奈斯比特就曾在其《大趋势——改变我们生活的10个新方向》一书中预言:信息社会将成为人类社会的未来社会形态,新的权力来源不是少数人手中的金钱,而是多数人手中的信息。时至今日,人类社会已真正进入信息时代,信息着充斥人们生活的每个角落,其重要性不言而喻。笔者从事办公室工作,对信息工作的重要性有深刻体会。在此,笔者结合实际工作谈谈关于做好广播电台信息工作的一些认识,希望能引起大家对信息工作的关注和重视。 展开更多
关键词 信息工作 广播电台 人类社会 办公室工作 社会形态 信息社会 未来学家 权力来源
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构建档案研究前沿——2004年4月10日北京亚太地区档案教育国际学术研讨会的发言稿 预览
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作者 圣安尼·吉利兰德-史怀兰德 柳凤敏 孝廉 《山西档案》 北大核心 2004年第3期 12-15,共4页
文章分析了近15年来档案研究(而非档案学和档案管理)发展的诸因素,介绍了在未来有可能出现的一些研究领域,认为需要在档案研究中构建持续性研究前沿.当新的研究领域融入到已经出现的研究领域中去的时候,档案学术前沿就毫无疑问地现身于世.
关键词 2004年 北京 亚太地区 档案教育 学术研讨会 国际会议 档案研究 国际合作
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人事档案诚信面面观 被引量:8
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作者 梅园 曹宇 +10 位作者 金萍 俞兆娜 段义严 柳凤敏 金云 肖茉莉 王旭 夏静 章燕华 崔静 孝廉 《档案学通讯》 CSSCI 北大核心 2004年第3期58-62,共5页
关键词 人事档案 诚信建设 档案管理 档案真实性 归档制度
液压支架支撑座损坏的分析与处理 预览
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作者 孔淑敏 孝廉 青雨 《水力采煤与管道运输》 2002年第1期 37-39,共3页
通过对支架平衡顶后支撑座大面积开焊损坏的各种原因的分析,找出了有在井下处理支架损坏的最佳方案,并对老架型的改造、修理及使用提出了应注意的问题。
关键词 支撑座 液压支架 顶板压力 安全阀 释放压力
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科学史研究新路径 预览
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作者 孝廉 《现代交际:下半月》 2009年第11期 122,共1页
米库林斯基认为内史论和外史论这两种研究进路都不能作为研究科学史的正确方法,原因是这两个路径都代表了一种简单的、局限的和片面的设想,都无法代表科学编史学领域方法论流派丰富和多样的思想。
关键词 内史论 外史论 内外史论关系
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