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国内7省市老年人抑郁症的检出率及影响因素分析 被引量:1
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作者 胡雅娴 罗森林 +8 位作者 庞婧 于建民 宫环 曾平 韩怡文 黎健 铁梅 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第7期1272-1277,1313共7页
目的:调查分析国内7省市老年人抑郁症的检出率及特点,并从老年人基本情况、躯体健康、认知功能等方面综合分析抑郁症的影响因素。方法:采用GDS-30量表分析2011-2012年在北京、上海、哈尔滨、西安、成都、长沙和重庆市及周边乡镇的920... 目的:调查分析国内7省市老年人抑郁症的检出率及特点,并从老年人基本情况、躯体健康、认知功能等方面综合分析抑郁症的影响因素。方法:采用GDS-30量表分析2011-2012年在北京、上海、哈尔滨、西安、成都、长沙和重庆市及周边乡镇的9200名60岁以上老年抑郁症的发生情况,并分析影响抑郁检出率的相关因素。结果:调查老年对象的抑郁症检出率为17.2%,其中男性为15%,女性为19.6%。女性老年人在各个年龄段的抑郁症检出率均高于男性。抑郁症检出率随着年龄的增加逐渐增加。文化水平、健康自评、认知功能与抑郁症检出率密切相关。结论:抑郁症是国内7省市老年人常见的心理疾病,女性、高龄、低文化水平、健康自评差、认知功能障碍的老年人患抑郁症的几率更高。 展开更多
关键词 抑郁症 老年人 影响因素
城市人群血清营养水平指标与膳食习惯关系的分析
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作者 王文浩 王大光 +12 位作者 罗森林 刘幼硕 董碧蓉 杨云梅 曾学军 曾平 庞婧 韩怡文 宫环 郭健 铁梅 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第15期2866-2872,共7页
目的:分析血清营养状态指标与膳食习惯的关联关系与意义。方法:采用横断面调查的数据,用标准问卷询问1694人相关信息,内容包括人口学资料、自报疾病现患史、膳食习惯、健康自评、认知功能信息;同时采集被调查人群血样本;测定血红蛋白... 目的:分析血清营养状态指标与膳食习惯的关联关系与意义。方法:采用横断面调查的数据,用标准问卷询问1694人相关信息,内容包括人口学资料、自报疾病现患史、膳食习惯、健康自评、认知功能信息;同时采集被调查人群血样本;测定血红蛋白、白蛋白、叶酸和维生素B12水平。采用R 3.2.5和SPSS 20.0软件进行相关和显著性差异分析。结果:人体血红蛋白、白蛋白、叶酸和维生素B12水平与被调查个体进食水果和鸡蛋习惯有密切关联;天天进食水果、鸡蛋的个体上述指标水平明显高于不进食此类食物的个体,且血红蛋白、白蛋白水平随增龄下降程度减低;天天进食水果习惯的个体同时具有天天进食蛋、奶、菜习惯;有进食水果习惯的人群表现为受教育程度高;自评健康状态好和相对自报患病率低等特点。结论:合理膳食习惯可保持较高的血营养状态指标水平;且延缓相关指标水平随增龄下降的程度。天天进食水果习惯可被视为合理膳食的指标,为膳食评估提供简易、可行、有效的指标。 展开更多
关键词 合理膳食 营养指标 老年人
人胱抑素C参考物质制备方法的建立
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作者 邹丽辉 王萌 +4 位作者 黄薇 肖飞 王玉梅 传宝 《生物技术》 2018年第5期455-459,449共6页
[目的]建立重组人胱抑素C(cystatin C)表达体系,获得可溶、稳定、高纯度的胱抑素C。[方法]密码子优化并人工合成人胱抑素C编码序列,与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至PRSF-Duet载体以构建重组人pMBP-CYSC PRSF表达质粒。使用大肠杆菌... [目的]建立重组人胱抑素C(cystatin C)表达体系,获得可溶、稳定、高纯度的胱抑素C。[方法]密码子优化并人工合成人胱抑素C编码序列,与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至PRSF-Duet载体以构建重组人pMBP-CYSC PRSF表达质粒。使用大肠杆菌E. coliBL21(DE3)pLysS对其进行诱导表达,SDS-PAGE鉴定蛋白纯度和分子量,全自动生化仪测定纯化蛋白浓度及稳定性。[结果]成功构建重组人pMBP-CYSC PRSF表达质粒并诱导表达,胱抑素C蛋白浓度可达500 mg/L,纯度可达90%,在4℃和-20℃储存条件下监测64 w,胱抑素C蛋浓度稳定,均在允许相对偏差5%以内。[结论]通过密码子优化,成功获得浓度为500 mg/L、纯度为90%、存储稳定性至少达到64 w的胱抑素C蛋白,可充分满足该产品诊断试剂制备的需求。 展开更多
关键词 人胱抑素C蛋白 重组蛋白表达 参考物质
环状RNA hsa_circ_0031739与2型糖尿病关系的初步研究
4
作者 房远 王晓霞 +5 位作者 潘琦 李文卿 金军华 邹丽辉 肖飞 《中华检验医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期863-869,共7页
目的筛选高糖处理人脐静脉内皮细胞中差异表达环状RNA,分别在细胞模型中和2型糖尿患者外周血中进行验证,为探索2型糖尿病的生物学诊断标志物奠定基础。方法以脐静脉内皮细胞作为实验模型,设置对照组(n=3)与高糖组(n=3),分别... 目的筛选高糖处理人脐静脉内皮细胞中差异表达环状RNA,分别在细胞模型中和2型糖尿患者外周血中进行验证,为探索2型糖尿病的生物学诊断标志物奠定基础。方法以脐静脉内皮细胞作为实验模型,设置对照组(n=3)与高糖组(n=3),分别使用正糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)条件进行处理,运用高通量测序技术初步筛选差异表达环状RNA。通过PCR和实时定量PCR(q-PCR)技术,在内皮细胞模型中对差异表达环状RNA进行验证。随后,在2型糖尿患者外周血(n=32)及正常人外周血(n=28)中,进一步验证上述差异表达环状RNA。运用t-检验、相关性分析和ROC曲线,对实验结果进行分析。结果高通量测序共筛选出1 087个差异表达环状RNA,其中554个上调,533个下调。从中挑选出6个上调环状RNA在脐静脉内皮细胞模型中初步验证,发现,PCR结果及q-PCR结果与测序结果基本一致。再从中挑选出3个上调最为明显的环状RNA在外周血中进一步验证。本研究发现,环状hsa_circ_0031739在外周血样本中的差异表达也具有统计学意义(0.015±0.002 5 vs. 0.006±0.001 3,P=0.005 9〈0.05),ROC曲线下面积为0.730,并且与血糖和糖化血红蛋白水平正相关(r=0.317,P=0.013 7〈0.05;r=0.348,P=0.006 4〈0.05)。结论人脐静脉内皮细胞作为糖尿病研究中常用的细胞模型,高糖处理后存在差异表达环状RNA谱。环状RNA hsa_circ_0031739在细胞模型和2型糖尿病外周血样本中的差异表达均具有统计学意义,与血糖及糖化血红蛋白相关,具有一定的诊断意义。因此,环状RNA hsa_circ_0031739有望成为糖尿病新型生物学诊断标志物,有助于2型糖尿病的综合诊断和疾病机理研究。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 RNA 生物标记 高通量核苷酸序列分析
一种高效制备人β2微球蛋白标准物质的方法和应用 预览
5
作者 邹丽辉 王萌 +3 位作者 黄薇 肖飞 王玉梅 《中国医药生物技术》 2018年第5期412-417,共6页
目的构建重组人β2微球蛋白表达体系,高效快速获取β2微球蛋白,为临床实验室检测参考物质的制备奠定基础。方法优化人β2微球蛋白序列,人工合成优化序列片段并与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至pRSF-Duet载体以构建重组人β2做球蛋... 目的构建重组人β2微球蛋白表达体系,高效快速获取β2微球蛋白,为临床实验室检测参考物质的制备奠定基础。方法优化人β2微球蛋白序列,人工合成优化序列片段并与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至pRSF-Duet载体以构建重组人β2做球蛋A表达质粒。使用大肠杆菌E.coli BL21(DE3)对重组质粒进行诱导表达,TEV蛋白酶切除MBP,全自动生化仪测定β2微球蛋白浓度。对重组蛋A在4℃和-20℃储存条件下的稳定性进行检测,对β2做球蛋白纯品与校准品的互通性进行分析。结果成功构建重组人β2微球蛋白表达质粒,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)成功诱导重组蛋白表达,MBP-β2微球蛋白(MBP-β2-MG)浓度可达100mg/L,β2微球蛋白浓度可达185mg/L。在4℃和-20℃储存条件下监测64周,β2微球蛋白稳定存在。β2微球蛋白纯品与RANDOX生化校准品互通性良好。结论通过密码子优化,成功构建了重组β2微球蛋白的高效表达系统,β2微球蛋白可溶性高,稳定性好,与国际通用校准品互通性好,可充分满足该产品诊断试剂制备的需求。 展开更多
关键词 Β2微球蛋白 重组蛋白质类 参考物质
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长链非编码核糖核酸与心血管疾病
6
作者 于雪婧 邹彤 +1 位作者 杨杰孚 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2017年第1期99-101,共3页
长链非编码核糖核酸(lnc RNA)是一类长度大于200 nt的非编码核糖核酸(RNA),它参与多种细胞生命活动和疾病的进展。由于科学技术的飞速发展,高通量测序以及微阵列技术的成熟,lnc RNA在心血管领域的研究中具有极大潜力。目前,lnc RNA... 长链非编码核糖核酸(lnc RNA)是一类长度大于200 nt的非编码核糖核酸(RNA),它参与多种细胞生命活动和疾病的进展。由于科学技术的飞速发展,高通量测序以及微阵列技术的成熟,lnc RNA在心血管领域的研究中具有极大潜力。目前,lnc RNA在心肌梗死、心肌缺血再灌注损伤、心力衰竭、高血压等疾病中均有涉及和研究报道。lnc RNA也是一类重要的生物标志物,对于心血管疾病的诊断、治疗及远期预后的评估发挥重要作用。lnc RNA的出现,为心血管疾病的诊疗带来希望。关于lnc RNA参与心血管疾病的深入机制,还有待进一步研究。 展开更多
关键词 综述 心血管疾病 长链非编码核糖核酸
西格列汀及胰高血糖素样肽1对脐静脉内皮细胞铁代谢相关基因的调控作用 被引量:1
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作者 李莉 金军华 +5 位作者 邹丽辉 俊华 黄薇 潘琦 肖飞 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2017年第5期292-297,共6页
目的 观察西格列汀及胰高血糖素样肽1(GLP-1)对正常糖浓度(正糖)及高糖条件下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)铁代谢相关共济蛋白(FXN)及顺乌头酸梅1(ACO1)蛋白表达的影响.方法 用西格列汀(1μmol/L)和(或)GLP-1(100 nmol/L)... 目的 观察西格列汀及胰高血糖素样肽1(GLP-1)对正常糖浓度(正糖)及高糖条件下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)铁代谢相关共济蛋白(FXN)及顺乌头酸梅1(ACO1)蛋白表达的影响.方法 用西格列汀(1μmol/L)和(或)GLP-1(100 nmol/L)处理HUVECs,正糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)状态下分别设相应对照组、GLP-1处理组、西格列汀处理组以及GLP-1+西格列汀联合处理组.检测药物对正常状态下HUVECs细胞增殖的影响,用实时定量逆转录PCR和Western blotting法分别于24 h及48 h后检测HUVECs内FXN和ACO1的mRNA及蛋白表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较使用Bonferroni检验(满足方差齐性检验时)或Dunnett T3检验(不满足方差齐性检验时).结果 (1)正糖下经西格列汀和(或)GLP-1处理24 h后,与对照组(表达水平设为1)相比,各组的HUVECs细胞增殖水平均无明显变化(分别为0.99±0.04、1.07±0.08、1.06±0.05,F=4.059,均P〉0.05);而各加药组的FXN mRNA表达均呈下降趋势,其中,西格列汀+GLP-1组FXN的mRNA表达水平降低为0.68±0.18(t=3.59,P〈0.05);西格列汀单独或联合GLP-1组ACO1的mRNA表达水平也明显降低(分别为0.49±0.13、0.59±0.15,F=10.802,均P〈0.05);各加药组的FXN及ACO1的蛋白水平均低于对照组,但差异无统计学意义(均P〉0.05).(2)高糖下经西格列汀和(或)GLP-1处理48 h后,与对照组(表达水平设为1)相比,西格列汀+GLP-1组FXN mRNA表达升高(1.75±0.26,t=-5.71,P〈0.05);但各组的ACO1 mRNA表达变化均不明显且差异无统计学意义(均P〉0.05).结论 西格列汀和GLP-1可在不影响正常状态内皮细胞增殖的条件下,通过调节正常或高糖状态下HUVECs中FXN及ACO1的表达水平影响细胞内的铁代谢. 展开更多
关键词 西格列汀 胰高血糖素样肽1 共济蛋白 顺乌头酸梅1 人脐静脉内皮细胞
一种高效制备人乳酸脱氢酶LDH_5参考物质的方法及应用
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作者 刘赪阳 王玉梅 +4 位作者 黄薇 王萌 郭健 肖飞 《生物技术》 北大核心 2017年第2期174-179,共6页
[目的]研究高效、廉价制备人乳酸脱氢酶LDH5参考物质的方法。[方法]选取人乳酸脱氢酶基因(LDHA)CDS序列进行分析及优化,合成优化后的基因,克隆至表达载体pRSF-Duet中构建重组乳酸脱氢酶LDH5表达载体。使用大肠杆菌E.coli BL21(DE3)... [目的]研究高效、廉价制备人乳酸脱氢酶LDH5参考物质的方法。[方法]选取人乳酸脱氢酶基因(LDHA)CDS序列进行分析及优化,合成优化后的基因,克隆至表达载体pRSF-Duet中构建重组乳酸脱氢酶LDH5表达载体。使用大肠杆菌E.coli BL21(DE3)菌株对目的基因进行表达,异丙基硫代半乳糖苷酶(IPTG)诱导,镍离子亲和层析纯化,SDS-PAGE鉴定酶纯度,BCA法分析酶浓度,全自动生化仪分析酶活性、稳定性。[结果]经优化后的LDHA基因的大肠杆菌密码子适应指数为1;纯化蛋白达到电泳纯,比活性达19.01 U/mg,在4℃及25℃可稳定保存8 d。[结论]重组乳酸脱氢酶的表达效率为100 mg/L,酶活性、稳定性、纯度达到临床生化检测的参考物质的条件,可以作为血清乳酸脱氢酶检测的标准物质。 展开更多
关键词 乳酸脱氢酶 基因重组 密码子 参考物质
老年人健康状况与步速的关系探讨 被引量:3
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作者 铁梅 于普林 +12 位作者 罗森林 王怀庆 刘幼硕 董碧蓉 杨云梅 曾学军 曾平 庞婧 韩怡文 宫环 黎健 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期656-661,共6页
目的 分析老年快步速个体的健康状况,为老年人功能维护与干预提供正性因素依据。 方法 采用横断面调查的数据,用标准问卷询问相关信息,内容包括人口学资料、自报疾病现患史、生活习惯、感官运动能力等信息。测量6 m步行速度,以25%... 目的 分析老年快步速个体的健康状况,为老年人功能维护与干预提供正性因素依据。 方法 采用横断面调查的数据,用标准问卷询问相关信息,内容包括人口学资料、自报疾病现患史、生活习惯、感官运动能力等信息。测量6 m步行速度,以25%步速上限值作为快步速老年组的标准,进一步分析比较快步速组老年人与低于此步速老年人的健康状态的关系和影响因素。 结果 确定了1.39 m/s作为老年人快步速状态的参考截点值。步速快的老年人在躯体运动功能、脑卒中患病率方面优于一般步速的老年人。Logistic回归分析结果显示,教育程度、健康自我评价、体能和生活态度与维持快步速水平有关。 结论 步速快反映了老年人较好的健康状况,通过步速与健康状态分析后的快步速截点值确定可为老年人健康状态综合评估提供简易、可行、有效的指标。 展开更多
关键词 健康状况 步行
步速降低与老年人健康及相关状况的关系 被引量:3
10
作者 曾平 韩怡文 +5 位作者 庞婧 宫环 铁梅 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期773-777,共5页
目的分析步速降低与老年人健康及相关状况的关系,旨在为及早识别老年人健康及功能减退提供依据。方法采用横断面调查的方法,用标准问卷询问相关信息,内容包括人口学资料、现患史、生活习惯等信息。测量20m折返步行速度,将〈0.70m/... 目的分析步速降低与老年人健康及相关状况的关系,旨在为及早识别老年人健康及功能减退提供依据。方法采用横断面调查的方法,用标准问卷询问相关信息,内容包括人口学资料、现患史、生活习惯等信息。测量20m折返步行速度,将〈0.70m/s定义为步速降低。结果步速降低与老年人健康密切相关,常见慢病患病率可比对照高10%以上(调整性别、年龄影响后的均P〈0.05)。Logistic回归分析结果显示,老年人生活不规律(OR=1.39,P〈0.01)、共患慢病多(OR=2.00,P〈0.01)、工具性日常活动能力(IADL)降低(OR=1.15,P〈0.01)、抑郁状态(OR=1.02,P=0.001)等,均与步速降低有关。而受教育水平高(OR=0.95,P=0.044)、经常饮酒(OR=0.78,P=0.002)、认知状态好(OR=0.95,P〈0.01)与步速下降呈相反关系。结论步速与老年人健康状况、认知能力、日常活动能力及心理状况之间的呈明显的相关性,测定步速有助于及早发现老年人健康和功能减退等问题。 展开更多
关键词 步行 认知 日常生活活动 抑郁
OR2T3基因与动脉性肺动脉高压的关联性分析 被引量:2
11
作者 建华 许小毛 +4 位作者 邹丽辉 方保民 金军华 肖飞 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第16期1256-1260,共5页
目的寻找动脉性肺动脉高压(PAH)的致病基因并验证OR2T3基因与PAH的关联性。方法对两个PAH家系中的4例患者和1名正常对照进行全外显子测序,利用生物信息学分析和组间比较,筛选出患者特有的变异,并对筛选出的变异使用Sanger测序法在3... 目的寻找动脉性肺动脉高压(PAH)的致病基因并验证OR2T3基因与PAH的关联性。方法对两个PAH家系中的4例患者和1名正常对照进行全外显子测序,利用生物信息学分析和组间比较,筛选出患者特有的变异,并对筛选出的变异使用Sanger测序法在30例特发性肺动脉高压患者、90例健康对照和30例慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者中基因分型验证,进一步分析变异与PAH的相关性。结果全外显子组测序筛选到57个变异可能与PAH疾病相关。57个变异中OR2T3rs18748995变异在30例特发性肺动脉高压患者中存在6例AG杂合子,而在两家系其余健康人(AⅠ-1,AⅡ-3和BⅡ-1)及90例健康对照中未发现G等位基因携带者,差异有统计学意义(P〈0.05);在30例慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者中亦未发现该变异。结论OR2T3基因可能是PAH的致病基因,OR2T3rs148748995可能与PAH关联。 展开更多
关键词 高血压 肺性 OR2T3基因 外显子 家系
北京市老年人群中肌少症及其相关指标的现患特征 被引量:5
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作者 曾平 吴司南 +6 位作者 韩怡文 宫环 庞婧 铁梅 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期478-482,共5页
目的了解北京市老年人群中肌少症及其相关指标的现患特征。方法采用横断面调查的方法,用标准问卷询问相关信息,内容包括人口学资料、现患史、生活习惯等信息。应用生物电阻抗仪测量肌肉质量,6m直线平常步行速度即步速来表示肌肉功能... 目的了解北京市老年人群中肌少症及其相关指标的现患特征。方法采用横断面调查的方法,用标准问卷询问相关信息,内容包括人口学资料、现患史、生活习惯等信息。应用生物电阻抗仪测量肌肉质量,6m直线平常步行速度即步速来表示肌肉功能,用握力器测量握力来表示肌力。结果肌肉质量随增龄下降(F=6.77、P:0.001),城市老年人肌肉质量低于农村(t=4.32、P=0.038);肌力和步速也随增龄下降(F=7.62、15.79,p=0.0005、0.000),以女性和农村老年人更加明显。Logistic回归分析结果显示,年龄增加、女性握力降低的发生风险高(OR=1.13、1.92,均Pd0.05),而城市老年人握力降低的发生风险低(OR=0.10,P〈0.05);年龄增加、体质指数(BMI)值高、生活无规律的老年人步速降低的发生风险高(OR=1.12、1.25、2.77,均P〈O.05),城市老年人、经常进行体育锻炼、有兴趣爱好者步速降低的发生风险低(OR=0.08、0.27、0.1l,均P〈0.05)。结论肌少症相关指标存在明显的增龄趋势和人群差异,积极、健康的生活方式有助于维护老年人躯体功能。 展开更多
关键词 肌疾病 握力
热量限制对大鼠血清支链氨基酸、芳香族氨基酸、甘氨酸水平的影响及意义 预览
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作者 宫环 杨睿悦 +5 位作者 韩怡文 孙亮 崔菊 铁梅 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第32期11-13,共3页
目的观察热量限制(CR)对大鼠血清支链氨基酸[缬氨酸(Val)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)]、芳香族氨基酸[酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)]及甘氨酸(Gly)水平的影响,并探讨其与胰岛素敏感性的关系。方法将20只雄性SD大鼠随机分为观察组和对... 目的观察热量限制(CR)对大鼠血清支链氨基酸[缬氨酸(Val)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)]、芳香族氨基酸[酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)]及甘氨酸(Gly)水平的影响,并探讨其与胰岛素敏感性的关系。方法将20只雄性SD大鼠随机分为观察组和对照组各10只,对照组给予自由饮食,观察组限制热量摄入为对照组的60%。喂饲12周后称取两组体质量及附睾旁脂肪垫质量;行胰岛素耐量试验,绘制血糖值曲线并计算曲线下面积。采用液相色谱串联质谱法检测两组血清Val、Ile、Leu、Tyr、Phe及Gly。结果观察组体质量、附睾旁脂肪垫质量均低于对照组,P均<0.01。观察组血糖值曲线下面积为728.1±65.7,对照组为955.1±39.0,P<0.01。观察组血清Ile、Leu、Tyr水平均低于对照组,Gly水平高于对照组,P均<0.05。两组血清Val、Phe水平比较,P均>0.05。结论 CR可能通过升高大鼠血清Gly水平,降低Ile、Leu、Tyr水平而提高其胰岛素敏感性。 展开更多
关键词 热量限制 胰岛素敏感性 支链氨基酸 芳香族氨基酸 甘氨酸 大鼠
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胰高血糖素样肽1通过调控葡萄糖调节蛋白78表达改善高糖及波动性高糖诱导的内皮细胞内质网应激及凋亡 被引量:3
14
作者 唐甜甜 郭立新 +4 位作者 潘琦 王晓霞 金军华 宫环 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2015年第11期684-688,共5页
目的探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)对持续性高糖和波动性高糖诱导的内皮细胞内质网应激及凋亡的保护作用和机制。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECS)分成6组:正常葡萄糖对照组(5.5mmol/L葡萄糖培养)、持续性高糖tN30mmol... 目的探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)对持续性高糖和波动性高糖诱导的内皮细胞内质网应激及凋亡的保护作用和机制。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECS)分成6组:正常葡萄糖对照组(5.5mmol/L葡萄糖培养)、持续性高糖tN30mmol/L葡萄糖培养)、波动性高糖组(5.5mmol/L和30mmol/L葡萄糖培养,每12h交替1次)、正常葡萄糖+10nmol/LGLP-1组、持续性高糖+10nmol/LGLP-1组、波动性高糖+10nmol/LGLP.1组。后3组均先加入10nmol/LGLP-1预处理半小时,后以相应浓度葡萄糖培养。各组细胞经处理48h后,流式细胞仪测定细胞凋亡率,Westernblotting法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平的变化。应用30mmol/L高糖处理HUVECS不同时间(0、3、6、12、24、48h),Westernblotting法检测加入GLP-1前后GRP78蛋白表达水平的变化。两组问比较采用LSD—t检验,多组比较采用单因素方差分析。结果将正常对照组的细胞凋亡率设定为1,波动性高糖组细胞凋亡率增至1.20+0.05,与对照组差异有统计学意义(F=45.086,P〈0.05);波动性高糖+GLP-1组细胞凋亡率降至0.87-+0.01,与波动性高糖组差异有统计学意义(t=17.400,P〈0.05)。与对照组(0h组,设定为1)相比,高糖处理HUVECS3hGRP78的表达量升高至1.62±0.48,差异有统计学意义(t=2.584,P〈0.05);6h达到高峰(2.82±0.59),与对照组差异有统计学意义(t=6.123,P〈0.05);12h后开始下降,高糖作用48h下降至0.98±0.59,与对照组相比无统计学差异(t=0.378,P〉0.05)。波动性高糖组GRP78的表达水平降至(0.77±0.04),与持续性高糖组(0.96±0.10)相比,差异有统计学意义(t=3.134,P〈0.05)。结论持续性高糖和波动性高糖均可引起内皮细胞发生内质网应激和凋亡,后者通过进一步抑制防御蛋白GRP7 展开更多
关键词 胰高血糖素样肽1 波动性高糖 葡萄糖调节蛋白78 人脐静脉内皮细胞
血管性血友病因子三个常见变异位点与肺血栓栓塞症的相关性 被引量:3
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作者 孙月杰 许小毛 +4 位作者 孙亮 翟振国 方保民 肖飞 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第30期2428-2432,共5页
目的 探讨血管性血友病因子(VWF)基因三个常见变异位点rs216321、rs216325和rs1800378与肺血栓栓塞症(PTE)的相关性.方法 选取2008年11月至2012年3月卫生部北京医院及北京朝阳医院呼吸科确诊的95例PTE患者为PTE组,同期90名健康体检... 目的 探讨血管性血友病因子(VWF)基因三个常见变异位点rs216321、rs216325和rs1800378与肺血栓栓塞症(PTE)的相关性.方法 选取2008年11月至2012年3月卫生部北京医院及北京朝阳医院呼吸科确诊的95例PTE患者为PTE组,同期90名健康体检人群为对照组,均采集空腹静脉血,提取基因组DNA.挑选VWF中次要等位基因频率(MAF)> 0.05的三个单核苷酸多态性位点:rs216321 (T/C)、rs216325 (G/A)和rs1800378(T/C),经聚合酶链反应(PCR)-Sanger法测序验证,分析两组各位点等位基因及基因型分布频率的差异,并分析其单倍型与PTE的相关性.结果 VWF基因rs216325 (G/A)、rs1800378 (T/C)位点的等位基因频率在两组间的分布差异有统计学意义(P =0.039、0.006);rs216325中AA基因型与PTE的发生正相关(r=1.914,P=0.047),rs1800378中TT基因型与PTE的发生正相关(r=0.282,P=0.008).TGT单倍型在两组间的分布差异有统计学意义,该单倍型与PTE的发生正相关(r=0.239,P<0.001).结论 VWF基因rs216325及rs1800378位点的变异与PTE具有相关性,其中rs216325中AA基因型携带、rs1800378中TT基因型携带及TGT单倍型携带预示较高的PTE发病风险. 展开更多
关键词 肺栓塞 血管性血友病 多态性 单核苷酸 连锁不平衡
不同葡萄糖培养条件对L6骨骼肌细胞中活性氧的生成作用 预览
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作者 庞婧 代杨 +2 位作者 宫环 铁梅 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第37期 6947-6950,共4页
背景:活性氧在不同葡萄糖培养条件下的生成状况是研究2型糖尿病发病机制的基础。目的:观察不同浓度葡萄糖培养条件下,细胞内活性氧的生成情况。方法:取体外培养的L6骨骼肌细胞和诱导分化的肌管细胞,分别用含有3,5.5,25mmol/L葡萄糖的... 背景:活性氧在不同葡萄糖培养条件下的生成状况是研究2型糖尿病发病机制的基础。目的:观察不同浓度葡萄糖培养条件下,细胞内活性氧的生成情况。方法:取体外培养的L6骨骼肌细胞和诱导分化的肌管细胞,分别用含有3,5.5,25mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养,检测细胞内活性氧的生成情况。结果与结论:随着高糖培养时间的延长,细胞内活性氧生成有增加的趋势,其中25mmol/L葡萄糖培养细胞4d的活性氧生成明显高于5.5mmol/L葡萄糖培养细胞的水平;3,5.5mmol/L葡萄糖培养对细胞内活性氧生成无显著影响。诱导肌管细胞较成肌细胞在高糖培养条件下更易产生活性氧。说明体外培养细胞葡萄糖浓度、培养时间和培养细胞分化程度是影响细胞内活性氧生成的因素,可用于模拟体内高糖损伤的积累效应。 展开更多
关键词 高糖 低糖 活性氧 骨骼肌细胞 肌管细胞 损伤
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不同胰岛素敏感状态下3T3-L1脂肪细胞中蛋白激酶B的表达 被引量:1
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作者 郭敏杰 周立红 +3 位作者 金军华 宫环 铁梅 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期610-612,共3页
目的建立不同胰岛素敏感状态的细胞模型,研究不同状态下蛋白激酶B(PKB)的表达。方法对3T3-L1脂肪细胞采用不同浓度葡萄糖(3.0mmol/L、5.5mmol/L和50.0mmol/L)进行培养,应用胰岛素介导的。H-2脱氧D葡萄糖摄取率,评价低糖组... 目的建立不同胰岛素敏感状态的细胞模型,研究不同状态下蛋白激酶B(PKB)的表达。方法对3T3-L1脂肪细胞采用不同浓度葡萄糖(3.0mmol/L、5.5mmol/L和50.0mmol/L)进行培养,应用胰岛素介导的。H-2脱氧D葡萄糖摄取率,评价低糖组、对照组和高糖组3T3-L1脂肪细胞的胰岛素敏感性,并以RTPCR方法检测葡萄糖刺激前后各组细胞中PKB的表达。结果3T3-L1脂肪细胞^3H-2脱氧-D葡萄糖摄取率依次为,低糖组0.80±0.28,对照组0.53±0.33,高糖组0.32±0.13;在相同条件下,3组细胞间的PKBmRNA表达差异无统计学意义;但在葡萄糖刺激后普遍降低,低糖组、对照组和高糖组分别降低了52%、46%和59%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论体外不同的葡萄糖浓度培养条件,可产生3T3L1脂肪细胞不同的胰岛素敏感状态,而细胞在此条件下的PKB表达并无明显差异。 展开更多
关键词 胰岛素敏感性 蛋白激酶类 临床分析 治疗方法
热量限制对人二倍体成纤维细胞衰老相关基因表达的影响 预览 被引量:1
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作者 金军华 铁梅 +4 位作者 韩彩和 宗玉 童坦君 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期 520-523,共4页
目的观察热量限制对人二倍体成纤维细胞IMR-90衰老相关基因表达的影响。方法应用RT-PCR和Western blot的方法,对含低浓度(3.0mmol/L)、高浓度(22.5mmol/L)葡萄糖和正常对照组(含5.0mmol/L葡萄糖)培养条件下的IMR-90细胞衰... 目的观察热量限制对人二倍体成纤维细胞IMR-90衰老相关基因表达的影响。方法应用RT-PCR和Western blot的方法,对含低浓度(3.0mmol/L)、高浓度(22.5mmol/L)葡萄糖和正常对照组(含5.0mmol/L葡萄糖)培养条件下的IMR-90细胞衰老相关基因p16、p21和p53的mRNA和蛋白表达水平进行分析。结果与对照组和高糖培养条件下的早期和晚期细胞相比较,低浓度葡萄糖培养条件下的早期和晚期细胞p16和p21在mRNA水平均显著下降(P〈0.05);低浓度葡萄糖组、对照组和高浓度葡萄糖培养组晚期细胞p16蛋白水平分别为4.2、7.4、9.7,比各自早期细胞表达(0.6、1.0、1.8)增加5~7倍;低浓度葡萄糖组,对照组和高浓度葡萄糖培养早期细胞和低糖培养晚期细胞p21蛋白水平差异无统计学意义,分别为1.1、1.0、1.3、0.9,但与对照组和高糖培养晚期细胞p21蛋白水平(3.1、4.2)相比较则降低3~4倍;各组培养条件下的早期和晚期细胞中p53表达差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论各组晚期细胞比各自早期细胞p16基因表达增高;对照组和高糖培养条件下的晚期细胞比各自早期细胞p21基因表达增高;低浓度葡萄糖培养延缓IMR-90细胞衰老并伴有p16和p21基因表达下调;p53基因可能不是IMR-90细胞复制衰老主要调节因子。 展开更多
关键词 热量限制 成纤维细胞 基因 P16 基因 p53 二倍性 衰老
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不同葡萄糖浓度对3T3-L1脂肪细胞诱导分化中解偶联蛋白2基因表达的影响 预览 被引量:1
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作者 铁梅 +3 位作者 金军华 韩彩和 韩怡文 《中国老年保健医学》 2007年第4期 25-27,共3页
目的 观察体外培养条件下葡萄糖浓度对3T3-L1脂肪细胞诱导分化过程中UCP2mRNA表达水平的变化.方法 体外培养3T3-L1脂肪细胞,在诱导3T3-L1脂肪细胞分化成熟的基础上,经不同葡萄糖浓度5.5,25,45mmol/L培养后,3T3-L1脂肪细胞干第3,5,7天抽... 目的 观察体外培养条件下葡萄糖浓度对3T3-L1脂肪细胞诱导分化过程中UCP2mRNA表达水平的变化.方法 体外培养3T3-L1脂肪细胞,在诱导3T3-L1脂肪细胞分化成熟的基础上,经不同葡萄糖浓度5.5,25,45mmol/L培养后,3T3-L1脂肪细胞干第3,5,7天抽提总RNA,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测UCP2mRNA的表达.结果 随着脂肪细胞逐渐分化成熟,在第7天,45mmol/L葡萄糖终浓度培养条件下,3T3-L1脂肪细胞UCP2mRNA的表达受到抑制(P<0.05);5.5mmol/L葡萄糖终浓度培养条件下,3T3-L1脂肪细胞可增加UCP2mRNA的表达(P<0.01).结论 体外培养中,葡萄糖浓度的变化对脂肪细胞中UCP2mRNA的表达与调控具有一定的影响. 展开更多
关键词 3T3-L1脂肪前体细胞 UCP2 葡萄糖 肥胖
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解偶联蛋白5在能量代谢中的研究进展 预览
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作者 铁梅 《中国老年保健医学》 2007年第1期 30-31,共2页
  能量代谢是一个十分复杂的过程,只有使能量的摄取和消耗相等,才能达到能量平衡.UCPs作为一种线粒体转运蛋白,在调节产热和能量代谢方面发挥着重要作用.研究表明,肥胖和2型糖尿病患者体内UCPs的表达下降,表明UCPs可能与这些疾病的发...   能量代谢是一个十分复杂的过程,只有使能量的摄取和消耗相等,才能达到能量平衡.UCPs作为一种线粒体转运蛋白,在调节产热和能量代谢方面发挥着重要作用.研究表明,肥胖和2型糖尿病患者体内UCPs的表达下降,表明UCPs可能与这些疾病的发生相关,其中报道新发现的解偶联蛋白5(uncoupllng protein 5,UCP5)基因特异表达于脑组织中,并参与机体能量代谢的调节,本文就其研究进展综述如下.…… 展开更多
关键词 解偶联蛋白5 能量代谢 解偶联蛋白(UCPs)
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