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竹类植物中CYP85A1基因的克隆及表达分析 预览
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作者 陈炜 赵建文 +2 位作者 林新春 郭小勤 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期653-663,共11页
油菜素内酯(BRs)是一种促进植物茎秆伸长的甾类植物激素,CYP85A1基因参与了BRs合成中重要的催化反应步骤。为阐明CYP85A1基因在竹类植物节间伸长中的作用,本研究以20个竹类植物为试验材料,利用生物信息学分析了CYP85A1基因的特点,并利... 油菜素内酯(BRs)是一种促进植物茎秆伸长的甾类植物激素,CYP85A1基因参与了BRs合成中重要的催化反应步骤。为阐明CYP85A1基因在竹类植物节间伸长中的作用,本研究以20个竹类植物为试验材料,利用生物信息学分析了CYP85A1基因的特点,并利用实时荧光定量PCR技术分析了该基因在孝顺竹及其变种凤尾竹的不同组织和不同发育阶段的相对表达量。结果表明,20个竹种中CYP85A1基因序列在DNA水平上的同源性为92. 23%,cDNA序列的同源性为98. 79%,氨基酸序列的同源性为97. 86%;这些基因均含有9个外显子和8个内含子,编码465~480个氨基酸,蛋白分子量约为54 k Da,理论等电点均约为9. 2。氨基酸序列中均含有细胞色素P450家族保守的血红素结合域、富含脯氨酸和氧的结构域及Glu-X-X-Arg结构域;CYP85A1基因孝顺竹和凤尾竹母竹的叶中表达量均最高,茎中次之,在根中的表达量最低。孝顺竹和凤尾竹幼竹中,该基因在顶部的表达量明显高于第2、第4、第5节间中的表达量;CYP85A1基因在快速伸长阶段的表达量明显高于生长缓慢时期,节间伸长速率越快该基因的表达量越高。综上,CYP85A1基因在竹类植物茎秆及节间伸长发育过程中具有促进作用。本研究结果为阐明CYP85A1在竹类植物中的生物学功能奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 竹类植物 孝顺竹 油菜素内酯 CYP85A1 节间伸长
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竹花叶病毒SYBR GreenⅡ反转录实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 朱丰晓 陈家璐 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期752-760,共9页
竹花叶病毒(Bamboo mosaic virus, BaMV)是目前为止被发现感染竹类植物唯一的RNA病毒,严重影响竹类植物经济价值。因此,快速准确检测BaMV,对其预防和控制具有重要意义。本研究参考BaMV外壳蛋白基因(coat protein, CP)保守区设计2对特异... 竹花叶病毒(Bamboo mosaic virus, BaMV)是目前为止被发现感染竹类植物唯一的RNA病毒,严重影响竹类植物经济价值。因此,快速准确检测BaMV,对其预防和控制具有重要意义。本研究参考BaMV外壳蛋白基因(coat protein, CP)保守区设计2对特异性引物,运用反转录实时荧光定量PCR (reverse transcription real-time fluorescence quantitative PCR, RT-qPCR)法对该病毒进行定性和定量分析,建立了一套基于SYBR GreenⅡ的BaMV的RT-qPCR检测体系。该检测体系的标准曲线循环阈值(Ct)与模板浓度的对数呈现良好的线性关系,扩增效率和相关系数分别为100%和0.999。重复性实验表明组内及组间变异系数均在1.5%以内。同时,利用此方法首次检测到8个不同竹种中亦存在BaMV。结果表明,SYBR GreenⅡRT-qPCR检测竹花叶病毒的方法灵敏、特异、重复性好,可用于竹花叶病毒的快速检测。 展开更多
关键词 竹花叶病毒(BaMV) SYBR Green 反转录实时荧光定量PCR (RT-qPCR)
电缆隧道运行巡检机器人技术的研究 预览
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作者 曹家军 《电力系统装备》 2019年第12期151-152,共2页
为了保证地下电缆隧道可靠与安全,往往需要对其进行周期性的巡检排查。由于传统人工巡检方式存在一定安全隐患,且巡检效率不高,因此一些地区开始施行机器人巡检模式,电缆隧道巡检效率得到大幅度提高。本文就电缆隧道运行中巡检机器人相... 为了保证地下电缆隧道可靠与安全,往往需要对其进行周期性的巡检排查。由于传统人工巡检方式存在一定安全隐患,且巡检效率不高,因此一些地区开始施行机器人巡检模式,电缆隧道巡检效率得到大幅度提高。本文就电缆隧道运行中巡检机器人相关技术进行探讨。 展开更多
关键词 电缆隧道 巡检机器人 技术研究
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从“三螺旋模式结构”到“集群创新”的建筑演绎——江苏硅谷核心区展示中心建筑设计 预览
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作者 查金荣 筠之 《世界建筑》 2019年第7期134-136,F0003共4页
1布局:启动窗口、引领园区基地被西部干线划分为科研办公和配套居住两个区域,然而科研办公用地又被现状河流分为3个地块。设计之初,希望将3块科研用地作为一个地块设计。通过对场地及周边现状的分析,设计时首先引入一条自由的曲线,将3... 1布局:启动窗口、引领园区基地被西部干线划分为科研办公和配套居住两个区域,然而科研办公用地又被现状河流分为3个地块。设计之初,希望将3块科研用地作为一个地块设计。通过对场地及周边现状的分析,设计时首先引入一条自由的曲线,将3个独立的地块有机地串联在一起,使之形成一个整体,同时又在中间地块引入一条南北方向的轴线与自由的曲线相呼应形成园区的主要结构轴线. 展开更多
关键词 建筑设计 模式结构 三螺旋 中间地块 硅谷 江苏 演绎 创新
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云冈石窟千年不朽的艺术密码 预览
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作者 《资源与人居环境》 2019年第4期70-75,共6页
“万亿化身,罗刻满山,鬼斧神工,骇人心目。一如来,一世界,一翼,一花,一叶,各具精严,写不胜写,画不胜画。后顾方作无限之留恋,前瞻又引起无量之企求。目不能注,足不能停,如偷儿骤入宝库,神魂丧失,莫知所携,事后追忆,亦如梦入天宫,醒后心... “万亿化身,罗刻满山,鬼斧神工,骇人心目。一如来,一世界,一翼,一花,一叶,各具精严,写不胜写,画不胜画。后顾方作无限之留恋,前瞻又引起无量之企求。目不能注,足不能停,如偷儿骤入宝库,神魂丧失,莫知所携,事后追忆,亦如梦入天宫,醒后心自知而口不能道,此时方知文字之无用了!” 展开更多
关键词 云冈石窟 密码 艺术
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毛竹qRT-PCR分析中内参基因的选择 被引量:2
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作者 吴林军 +4 位作者 朱丰晓 蒙蒙 余玉超 裘叶维 陆健康 《农业生物技术学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期502-510,共9页
实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR, qRT-PCR)是目前研究基因表达的常用方法,而在特定的实验材料及条件下选择合适的内参基因是准确分析目标基因相对表达量的首要条件。本研究以毛竹(Phyllostachys edulis)的根、茎、叶... 实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR, qRT-PCR)是目前研究基因表达的常用方法,而在特定的实验材料及条件下选择合适的内参基因是准确分析目标基因相对表达量的首要条件。本研究以毛竹(Phyllostachys edulis)的根、茎、叶和笋等器官和组织为实验材料,通过qRT-PCR技术对5种常用内参基因:甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH)、肌动蛋白(actin, ACT)、热休克蛋白(heat shock protein, HSP)、18S核糖体RNA(18S ribosomal RNA, 18S rRNA)和真核起始因子4α(eukaryotic initiation factor 4α, eIF-4α)在毛竹不同器官和组织中的表达情况进行了分析。经GeNorm、NormFinder和BestKeeper 3个软件对比分析发现,对5种常用内参基因而言,在利用qRT-PCR分析比较毛竹不同叶片之间的基因表达差异时,可选取eIF-4α作为校正内参基因;比较笋不同部位之间的基因表达差异时,可选取18S rRNA或ACT作为校正内参基因;而比较毛竹根、茎、叶不同器官组织分化中的基因表达差异时,可选取18S rRNA作为校正内参基因。而上述发现与多数文献中把ACT作为毛竹唯一内参基因的研究不一致。本研究为在毛竹qRT-PCR分析中选择合适的内参基因提供了理论依据。 展开更多
关键词 毛竹 QRT-PCR 内参基因 GENORM NORMFINDER BestKeeper
沧州市主城区中小学体育场地对外开放现状的调查研究 预览
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作者 刘汝丰 王永 《沧州师范学院学报》 2018年第1期77-82,共6页
学校体育场地对社会开放是一件得民心、顺民意的好事,也是构建和谐社会,促进全民健身活动开展的重大举措.通过对沧州市主城区开放体育场地中小学的实地调查,了解开放现状,分析影响学校体育场地对外开放的因素,提出针对性的建议,... 学校体育场地对社会开放是一件得民心、顺民意的好事,也是构建和谐社会,促进全民健身活动开展的重大举措.通过对沧州市主城区开放体育场地中小学的实地调查,了解开放现状,分析影响学校体育场地对外开放的因素,提出针对性的建议,为职能部门制定政策和学校加强体育场地对外开放的管理提供有益参考,使这一惠民工程发挥好促进群众体育开展、增强人民群众体质的积极作用. 展开更多
关键词 沧州市 学校体育场地 对外开放 现状调查
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基于LP&GR算法的多优先级虚拟机迁移策略研究 预览
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作者 李敬兆 《计算机应用研究》 CSCD 北大核心 2018年第12期3777-3780,共4页
如何对云计算中心的虚拟机(virtual machine,VM)资源进行合理分配是近年来研究的一个热点问题。针对这一问题,提出了一种基于负载预测和灰色关联度(load prediction and gray relational,LP&GR)的虚拟机资源分配算法。首先,通过预... 如何对云计算中心的虚拟机(virtual machine,VM)资源进行合理分配是近年来研究的一个热点问题。针对这一问题,提出了一种基于负载预测和灰色关联度(load prediction and gray relational,LP&GR)的虚拟机资源分配算法。首先,通过预测虚拟机的负载状态防止虚拟机发生过载;其次,建立了基于虚拟机负载评价函数的决策分配模型;最后,为虚拟机的迁移队列设置了多个优先级,结合了抢占式与非抢占式的执行策略,保证了虚拟机的有序迁移,并提高了资源利用率。实验结果表明,结合多优先级的LP&GR算法同比其他算法能够有效地实现云中心的负载均衡。 展开更多
关键词 虚拟机 负载预测 LP&GR算法 决策分配模型 多优先级 负载均衡
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微创与常规全髋关节置换术的临床疗效比较 预览
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作者 王英振 《临床医药文献杂志(电子版)》 2018年第21期40-41,共2页
目的对微创全髋关节置换术与常规全髋关节置换术的临床疗效进行比较。方法选取我院2015年7月~2016年7月收治的需行全髋关节置管术的患者110例作为研究对象,将其分为两组各55例,对对照组患者给予常规全髋关节置换术,对实验组患者给予微... 目的对微创全髋关节置换术与常规全髋关节置换术的临床疗效进行比较。方法选取我院2015年7月~2016年7月收治的需行全髋关节置管术的患者110例作为研究对象,将其分为两组各55例,对对照组患者给予常规全髋关节置换术,对实验组患者给予微创全髋关节置换术,对两组患者的临床治疗效果进行对比。结果实验组患者切口长度短于对照组、出血量少于对照组、术后引流量少于对照组、住院时间短于对照组、并发症发生人数少于对照组患者。结论给予患者微创全髋关节置管术能够提高患者的手术质量及预后,其具有良好的应用及临床推广价值。 展开更多
关键词 微创全髋关节置换术 常规全髋关节置换术 临床疗效
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单相电压型PWM整流器无源控制算法研究 预览
10
作者 《测控技术》 CSCD 2018年第2期147-150,156共5页
以单相电压型PW M 整流器为研究对象,针对其控制策略和控制性能不佳等问题,提出由无源电流控制器控制的单相电压型PW M 整流器无源控制算法.首先,构建虚拟d - g 坐标系获得整流器输入电流的轴电流分量; 其次,通过无源电流控制器消除或... 以单相电压型PW M 整流器为研究对象,针对其控制策略和控制性能不佳等问题,提出由无源电流控制器控制的单相电压型PW M 整流器无源控制算法.首先,构建虚拟d - g 坐标系获得整流器输入电流的轴电流分量; 其次,通过无源电流控制器消除或抑制输入电流谐波,实现对轴电流分量的无差跟踪, 使得整流器输出恒定的直流电压;最后,引入评价函数,对控制器的开关函数进行最优选取,从而选择最优开关状态.仿真和实验结果表明,该方法较传统的P I 控制算法具有更高的准确性和有效性. 展开更多
关键词 单相电压型PWM整流器 无源电流控制算法W-g轴电流 无差跟踪 评价函数
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菠萝EST资源的SSR信息分析与开发 预览
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作者 陆洋 +4 位作者 倪燕婕 钟雅萍 鲍晶晶 罗淑萍 《浙江农林大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期332-339,共8页
表达序列标签-简单重复序列(EST-SSRs)存在于表达序列标签中,是一种最常用的新型微卫星标记。它可以被嵌入到功能基因序列中,有效并高效地提供更多的相关信息。通过对已公开的5 659条菠萝Ananas comosus的表达序列标签(ESTs)进行电... 表达序列标签-简单重复序列(EST-SSRs)存在于表达序列标签中,是一种最常用的新型微卫星标记。它可以被嵌入到功能基因序列中,有效并高效地提供更多的相关信息。通过对已公开的5 659条菠萝Ananas comosus的表达序列标签(ESTs)进行电子筛选,获得了617条含有简单重复序列(SSR)的菠萝EST。平均7.39 kb EST序列中含有1个SSR,其中二核苷酸,三核苷酸和六核苷酸是SSR的主要重复类型,分别占SSR总数的42.61%,29.25%和20.13%。所有重复类型中重复次数最少的是四核苷酸序列(3.46%)。AG/TC是二核苷酸中的优势单元。根据搜索出的EST序列,共设计出30对物,其中27对引物扩增产物具有多态性。本次实验中开发的EST-SSR标记是迄今为止有关于菠萝的第1次大规模SSR标记开发。研究结果为利用EST-SSR分子标记进行菠萝连锁图谱构建,数量基因定位,种质资源遗传多样性,亲缘关系研究和指纹图谱构建奠定了基础。 展开更多
关键词 分子生物学 菠萝 表达序列标签 简单重复序列
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毛竹脱氧辛糖酸-8-磷酸合酶的原核表达、纯化及酶的特性
12
作者 朱丰晓 凤雪 +1 位作者 吴林军 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期1989-1998,共10页
脱氧辛糖酸-8-磷酸合酶(3-Deoxy-D-manno-octulosonate 8-phosphate synthase,KDO8PS)是一种参与细胞壁八碳糖(KDO)合成代谢的关键酶之一。为了解该酶催化特性和功能,本实验采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法首次分离得到毛竹... 脱氧辛糖酸-8-磷酸合酶(3-Deoxy-D-manno-octulosonate 8-phosphate synthase,KDO8PS)是一种参与细胞壁八碳糖(KDO)合成代谢的关键酶之一。为了解该酶催化特性和功能,本实验采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法首次分离得到毛竹Pe KDO8PS基因。序列分析表明该基因CDS区全长876 bp,编码291个氨基酸。通过IPTG诱导,含有该基因的原核表达载体在大肠杆菌中获得了大量可溶性活性蛋白表达;经Ni-NTA亲和层析和分子筛层析(SEC)方法进行酶蛋白的两步分离纯化,得到纯度大于90%以上的高纯度酶;SEC结果发现,纯化后目的蛋白KDO8PS在溶液中主要以二聚体形式存在。戊二醛交联实验证实该酶具有形成二聚体/四聚体的可能性,进一步通过超速离心(AUC)分析,发现水溶液中KDO8PS在高浓度时二聚体会聚合转化形成四聚体。推测形成二聚体/四聚体可能是保持酶稳定性的一种机制。通过测定毛竹KDO8PS酶学性质,发现该酶催化反应的p H值范围在4.0-9.0,最适p H值为8.0;热稳定性范围25-65℃,最适作用温度为55℃;各种二价金属阳离子在低浓度下均对酶活性存在不同程度的抑制作用,其中以Fe3+对酶活性的抑制作用最强,而低浓度EDTA可通过螯合作用消除金属离子的抑制作用。以上研究结果为植物KDO8PS蛋白结构与功能及其在新型抗生素领域中的工业化应用提供了重要理论基础。 展开更多
关键词 毛竹 脱氧辛糖酸-8-磷酸合酶 原核表达 纯化 酶学性质
石家庄市中小学体育场地场馆对外开放现状调查及对策研究 预览 被引量:1
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作者 石晓圆 路致远 《沧州师范学院学报》 2016年第1期75-79,共5页
随着人们对健康的重视,对健身场所的需求也在增加,为了充分利用学校场地场馆资源,中小学体育场地场馆由过去单纯作为教师和学生享用的教学资源,逐渐发展为向社会公众开放的公共资源.对石家庄市区28所已开放体育场地的学校调查,总结石家... 随着人们对健康的重视,对健身场所的需求也在增加,为了充分利用学校场地场馆资源,中小学体育场地场馆由过去单纯作为教师和学生享用的教学资源,逐渐发展为向社会公众开放的公共资源.对石家庄市区28所已开放体育场地的学校调查,总结石家庄市中小学体育场地场馆对社会开放的现状及制约条件,提出了相应的建议. 展开更多
关键词 中小学 体育场地场馆 对外开放 现状 对策
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拟南芥阿拉伯糖-5-磷酸异构酶的原核表达、纯化及酶催化特性 被引量:2
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作者 屈亚平 +2 位作者 王超莉 王蕾 吴林军 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1060-1069,共10页
阿拉伯糖-5-磷酸异构酶(Kds D)是2-酮-3-脱氧辛糖酸(KDO)生物合成途径的第一个关键限速酶,通过无缝克隆技术将拟南芥Kds D基因构建至原核表达载体p ET-HTT,经过IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了大量重组蛋白的可溶性表达;表... 阿拉伯糖-5-磷酸异构酶(Kds D)是2-酮-3-脱氧辛糖酸(KDO)生物合成途径的第一个关键限速酶,通过无缝克隆技术将拟南芥Kds D基因构建至原核表达载体p ET-HTT,经过IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了大量重组蛋白的可溶性表达;表达产物经Ni-NTA亲和层析和分子筛层析(SEC)方法进行酶蛋白的分离纯化步骤,得到纯度85%以上的高纯度酶;分子筛层析结果发现纯化后的目的蛋白Kds D在溶液中主要以多聚体、二聚体和单体形式存在,这同微生物来源Kds D酶在溶液中以四聚体形式存在很大差异;进一步使用Western blotting和MALDI-TOF MASS技术对纯化的蛋白进行鉴定;测定了拟南芥Kds D酶学性质,证明该酶催化反应的最适p H值为8.0,最适作用温度为37℃,各种金属离子在低浓度均对酶活性存在不同程度的抑制作用,其中以Co2+、Cd2+对酶活性的抑制作用最强,而5 mmol/L金属螯合剂EDTA对酶有激活作用。此外,以阿拉伯糖-5-磷酸(A5P)为底物时,拟南芥Kds D酶动力学常数Vmax和Km值分别为0.18 mmol/(L·min)、0.16 mmol/L,比较发现该酶与底物的亲和性高于大肠杆菌Kds D。以上研究结果为Kds D蛋白结构与功能及其在新型抗生素研制领域中的工业化应用奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 阿拉伯糖-5-磷酸异构酶 重组表达 分离纯化 MALDI-TOF MASS 酶学性质
毛竹阿拉伯糖-5-磷酸异构酶的基因克隆、原核表达及纯化 预览 被引量:1
15
作者 屈亚平 +2 位作者 王超莉 王蕾 吴林军 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期928-934,共7页
毛竹Phyllostachys edulis阿拉伯糖-5-嶙酸异构酶(PeKdsD)是2-酮-3-脱氧辛糖酸(KDO)生物合成途径的第1个关键酶.采用逆转录实时聚合酶链式反应(qRT-PCR)克隆得到毛竹KdsD基因.该基因cDNA全长1038bp,编码346个氨基酸;对不同物种来... 毛竹Phyllostachys edulis阿拉伯糖-5-嶙酸异构酶(PeKdsD)是2-酮-3-脱氧辛糖酸(KDO)生物合成途径的第1个关键酶.采用逆转录实时聚合酶链式反应(qRT-PCR)克隆得到毛竹KdsD基因.该基因cDNA全长1038bp,编码346个氨基酸;对不同物种来源的KdsD氨基酸序列进行比对和系统进化树分析.结果表明:毛竹的KdsD与玉米等植物来源的KdsD有很高的序列一致性,而与微生物来源的KdsD序列一致性较低.毛竹不同组织实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)结果表明:PeKdsD基因在叶中表达量远远高于其他组织.在大肠埃希菌Escherichia coli原核表达系统中获得了KdsD的可溶性高表达蛋白,将大量表达的重组蛋白经过Ni-NTA亲和层析和分子筛层析(SEC)进行纯化,发现KdsD在溶液(30mmol·L^-1三羟甲基氨基甲烷pH8.0,200mmol·L^-1氯化钠)中以多种聚体的形式存在;酶学性质测定的结果表明:毛竹KdsD酶最适pH值为pH8.5,最适作用温度为37℃.此结果为后期研究植物KdsD蛋白的结构与功能奠定了基础。 展开更多
关键词 林木育种学 毛竹 阿拉伯糖-5-磷酸异构酶 基因克隆 原核表达 蛋白纯化
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高职院校体育教学存在的问题及对策探究 预览
16
作者 《考试周刊》 2015年第68期106-,164共2页
高职体育教学是高职教育重要组成部分。但当前高职院校体育教学存在一些问题,要促进高职院校体育教学的发展,体育教学应该彰显职业特色,教学目标凸显职业性,教学内容体现丰富性、教学方法呈现多样性,从而调动学生学习体育的积极性与主... 高职体育教学是高职教育重要组成部分。但当前高职院校体育教学存在一些问题,要促进高职院校体育教学的发展,体育教学应该彰显职业特色,教学目标凸显职业性,教学内容体现丰富性、教学方法呈现多样性,从而调动学生学习体育的积极性与主动性等。 展开更多
关键词 高职教育 体育教学 问题 对策
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毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化 预览
17
作者 王超莉 +1 位作者 屈亚平 王蕾 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期749-755,共7页
丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白(pyruvate,orthophosphate dikinase regulatory proteins,RP)是通过调控丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate,orthophosphate dikinase,PPDK)参与C4途径光合碳循环途径。毛竹Phyllostachys edulis作为一种重要的经... 丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白(pyruvate,orthophosphate dikinase regulatory proteins,RP)是通过调控丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate,orthophosphate dikinase,PPDK)参与C4途径光合碳循环途径。毛竹Phyllostachys edulis作为一种重要的经济竹种,分析克隆RP基因对于竹类植物光合作用的研究具有重大理论和应用价值。通过逆转录实时聚合酶链式反应(RT-PCR)成功克隆得到毛竹Pe RP1,该基因c DNA全长1 275 bp,编码425个氨基酸;经生物信息学预测,该蛋白属于kinase-PPPase超家族,主要含有UDF 299保守结构域;经多序列比对发现毛竹Pe RP1蛋白与C3植物中RP1亲缘关系较近,而与C4植物亲缘关系较远。为了研究Pe RP1的蛋白质结构,我们将Pe RP1蛋白进行原核表达,利用Ni-NTA树脂亲和层析结合分子筛(SEC)层析的方法纯化得到了Pe RP1重组蛋白。SEC纯化的结果表明:Pe RP1蛋白在溶液中主要以多聚体形式存在,二聚体及单体含量较少,推测Pe RP1蛋白可能以多聚体形式参与调控PPDK蛋白。这为今后研究该蛋白的结构与功能打下了良好基础。 展开更多
关键词 植物学 毛竹 丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白 基因克隆 原核表达 蛋白纯化
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河北省普通高校普及“亚专项体育”的可行性分析 预览
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作者 《沧州师范学院学报》 2015年第1期91-94,共4页
亚专项体育在普通高校的开展,为高校体育教学改革提供了契机,使多年来以竞技性为主的高校体育教学逐步向竞技、健身、娱乐相结合的多元方向发展,丰富了体育教学内容,有利于《新纲要》的贯彻落实.在调查河北省30所普通高校开展亚专项体... 亚专项体育在普通高校的开展,为高校体育教学改革提供了契机,使多年来以竞技性为主的高校体育教学逐步向竞技、健身、娱乐相结合的多元方向发展,丰富了体育教学内容,有利于《新纲要》的贯彻落实.在调查河北省30所普通高校开展亚专项体育情况的基础上对在全省普通高校普及亚专项体育的可行性进行了研究. 展开更多
关键词 普通高校 亚专项体育 普及 可行性分析
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沧州市1-9年级软式排球开展现状的调查与研究 预览 被引量:1
19
作者 《沧州师范学院学报》 2014年第1期97-100,104共5页
采用调查问卷的方式,对沧州市1-9年级开展软式排球的情况进行了调查,结果显示:1-9年级的学校都有软式排球器材,但是正式开设软式排球课,形成教学体系的却很少.分析了影响软式排球开展的因素,并提出了相应的发展对策.
关键词 沧州市 1-9年级 软式排球 现状 对策
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毛竹KDO8PS的原核表达纯化及晶体生长 预览 被引量:1
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作者 凤雪 徐英武 +3 位作者 肖冬长 王超莉 屈亚平 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期515-520,共6页
3-deoxy-D-manno-octulosonate (KDO) 8-phosphate synthase (KDO8PS)[EC 4.1.2.16]是KDO生物合成途径中的关键酶.采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,以毛竹Phyllostachys edulis新鲜实生苗为材料,分离得到竹子KDO8PS基因.通... 3-deoxy-D-manno-octulosonate (KDO) 8-phosphate synthase (KDO8PS)[EC 4.1.2.16]是KDO生物合成途径中的关键酶.采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,以毛竹Phyllostachys edulis新鲜实生苗为材料,分离得到竹子KDO8PS基因.通过对不同物种来源的KDO8PS进行氨基酸序列比对分析和半定量RT-PCR技术对该基因进行组织特异性表达分析.将PeKDO8PS基因构建入原核表达载体pET-28a,并在大肠埃希菌Escherichia coli原核表达系统中获得了KDO8PS的可溶性高表达.经nickel亲和层析和分子筛纯化2种方法对表达蛋白进行纯化.结果分析表明:该基因编码区全长876 bp,可编码291个氨基酸.PeKDO8PS与拟南芥Arabidopsis thaliana等植物来源的KDSA2的基因有很高序列一致性,而与微生物来源的KDO8PS序列一致性较低.分析毛竹各组织中KDO8PS基因的表达结果表明,该基因在根、茎和叶片中均有表达,但在根中相对表达量较高,此表达模式亦同拟南芥A tKDSA2类似.另外,发现KDO8PS在溶液(30 mmol·L-1Tris-HCl pH 8.0,200 mmol·L-1氯化钠)中以二聚体的形式存在,并且初步筛选出该酶晶体生长条件.此结果为PeKDO8PS蛋白的最终结构分析奠定了基础. 展开更多
关键词 林木育种学 毛竹 脱氧辛糖酸-8-磷酸合酶 组织特异性表达 原核表达 蛋白纯化 结晶
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