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4’-甲醚-黄岑素对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响
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作者 冯播 杨最素 《中国妇幼保健》 CAS 2017年第21期5406-5410,共5页
目的探讨4'-甲醚-黄岑素(4'-MS)对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响。方法采用流式细胞术、实时定量PCR法及RT-PCR技术体外观察4'-MS对JAR细胞的影响。结果流式细胞术分析,加药组细胞凋亡率随4'-MS浓度的增加而逐渐升高,G2/M期细胞比例... 目的探讨4'-甲醚-黄岑素(4'-MS)对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响。方法采用流式细胞术、实时定量PCR法及RT-PCR技术体外观察4'-MS对JAR细胞的影响。结果流式细胞术分析,加药组细胞凋亡率随4'-MS浓度的增加而逐渐升高,G2/M期细胞比例显著升高。20、40 mg/ml 4'-MS作用48 h后c-myc及h TERT mRNA的表达量明显低于对照组(P〈0.01)。RT-PCR结果显示,20 mg/ml和40 mg/ml 4'-MS作用后,人绒毛膜癌JAR细胞中Survivin mRNA表达显著下降,而Caspase 9、Caspase 3及p38 MAPK mRNA表达显著上升(P〈0.05)。结论绒毛膜癌JAR细胞在4-MS的作用下发生凋亡的机制与降低c-myc及h TERT mRNA的表达、上调Caspase 9表达、Caspase 3表达、激活p38 MAPK信号通路及抑制Survivin表达相关。 展开更多
关键词 人绒毛膜癌细胞 4’-甲醚-黄芩素(4’-MS) 凋亡
4'-甲醚-黄芩素对耐药性人绒毛膜癌的耐药逆转作用 被引量:3
2
作者 李卓 朱利群 +2 位作者 张燕 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期182-187,共6页
目的:研究4'-甲醚-黄芩素(4'-methylether-scutellarein,4'-M-S)对耐药性人绒毛膜癌的体内耐药逆转作用并探讨其相关作用机制。方法:在BALB/c裸鼠左侧腋窝皮下注射耐药性人绒毛膜癌细胞JAR/VP-16建立耐药性人绒毛膜癌裸鼠皮下移... 目的:研究4'-甲醚-黄芩素(4'-methylether-scutellarein,4'-M-S)对耐药性人绒毛膜癌的体内耐药逆转作用并探讨其相关作用机制。方法:在BALB/c裸鼠左侧腋窝皮下注射耐药性人绒毛膜癌细胞JAR/VP-16建立耐药性人绒毛膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,瘤体直径至1.0 cm时,随机分为空白对照组、依托泊苷(etoposide,VP16)化疗组、4'-M-S组和4'-M-S+VP16联合治疗组,每组10只荷瘤鼠。动态观测各治疗组荷瘤鼠肿瘤生长情况,并记录存活时间。治疗3周后,通过光镜、透射电镜观察移植瘤组织形态学改变,流式细胞术检测移植瘤细胞凋亡率的变化,用RT-PCR、Western blotting检测并比较4组移植瘤组织中多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)mRNA、肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein,LRP)mRNA及其产物P-糖蛋白(permeability-glycoprotein,P-gp)和LRP的表达情况。结果:治疗3周后发现,4'-M-S对耐药性人绒毛膜癌有一定的体内抑制作用,与VP16联合用药可使裸鼠移植瘤生长明显受抑,抑瘤率达48.21%,同时可减轻化疗毒性反应、明显改善荷瘤鼠生活质量,并显著延长其平均存活时间;与其他3组相比,4'-M-S+VP16联合治疗组移植瘤细胞凋亡率显著升高(均P〈0.05),移植瘤组织中MDR1 mRNA、LRP mRNA及其编码蛋白P-gp和LRP表达水平均显著下降(均P〈0.05)。结论:4'-M-S能有效逆转人绒毛膜癌对化疗药物VP16的耐药性,其机制可能与4'-M-S诱导细胞凋亡和下调耐药基因MDR1 mRNA、LRP mRNA及相应产物P-gp和LRP的表达有关。 展开更多
关键词 绒毛膜癌 多药耐药 裸鼠 多药耐药逆转 4'-甲醚-黄芩素 依托泊苷
左炔诺孕酮下调survivin基因促进人子宫肌瘤细胞凋亡 预览 被引量:4
3
作者 仇黎丽 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第8期926-929,共4页
目的探讨左炔诺孕酮(LNG)诱导人子宫肌瘤细胞(UtLMC)凋亡过程中survivin的表达变化。方法原代培养人子宫肌瘤细胞传代后,加入不同浓度LNG,以AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞;RT-PCR检测抑凋亡基因survivinmRNA的表达... 目的探讨左炔诺孕酮(LNG)诱导人子宫肌瘤细胞(UtLMC)凋亡过程中survivin的表达变化。方法原代培养人子宫肌瘤细胞传代后,加入不同浓度LNG,以AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞;RT-PCR检测抑凋亡基因survivinmRNA的表达,Westernblot测定survivin蛋白的表达。结果10mg/LLNG作用UtLMC后早期凋亡细胞多于阴性对照组,随着LNG剂量的增加,晚期凋亡细胞也逐渐增多,核浓聚、偏位,被染成桔红色;在10mg/L以上LNG诱导的UtLMC凋亡中,survivinmRNA表达显著下降,蛋白表达由对照组的33.82±0.02下降至10.37±0.03(P〈0.05)。结论一定浓度的左炔诺孕酮所诱导的人子宫肌瘤细胞凋亡,可能与抑制survivin抗凋亡活性相关。 展开更多
关键词 左炔诺孕酮 子宫肌瘤 细胞凋亡 SURVIVIN
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p38MAPK及Caspase3在LNG诱导人子宫肌瘤细胞凋亡中的作用 被引量:2
4
作者 仇黎丽 《中国妇幼健康研究》 2012年第4期492-494,共3页
目的探讨p38MAPK及Caspase3在高浓度左炔诺孕酮(LNG)诱导体外培养人子宫肌瘤细胞(UtLMC)凋亡过程中的作用。方法原代培养UtLMC传代后,加入不同浓度LNG,流式细胞术测定其对细胞凋亡率的影响,并以AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细... 目的探讨p38MAPK及Caspase3在高浓度左炔诺孕酮(LNG)诱导体外培养人子宫肌瘤细胞(UtLMC)凋亡过程中的作用。方法原代培养UtLMC传代后,加入不同浓度LNG,流式细胞术测定其对细胞凋亡率的影响,并以AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞;Western blot测定p38MAPK、Caspase3在LNG诱导细胞凋亡中的活性变化。结果流式细胞术分析,加药组细胞凋亡率随LNG浓度的增加而逐渐升高,与对照组相比有显著性差异(t值分别为8.458、25.582、58.415、127.390,均P〈0.05);AO/EB双染后发现,对照组无明显凋亡细胞,10μg/mL LNG作用UtLMC后,早期凋亡细胞多于阴性对照组,随着LNG剂量的增加,晚期凋亡细胞也逐渐增多,核浓聚、偏位,被染成桔红色;在10μg/mL以上LNG诱导UtLMC凋亡中,p38MAPK磷酸化水平升高(t值分别为96.278、165.878,均P〈0.05),Caspase3被明显激活(t值分别为31.527、53.190,均P〈0.05)。结论高浓度LNG诱导UtLMC凋亡的机制涉及多途径、多靶点,可能与直接激活p38MAPK信号通路,诱导Caspase3活化有关。 展开更多
关键词 左炔诺孕酮 细胞凋亡 P38MAPK信号通路 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3
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4’-甲醚-黄芩素对绒毛膜癌JAR细胞c-myc表达的影响 被引量:4
5
作者 杨最素 冯播 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期501-505,共5页
目的探讨4’-甲醚-黄芩素(4-MS)诱导人绒毛膜癌JAR细胞凋亡的分子机制。方法应用透射电镜、流式细胞术、实时定量PCR法和Westernblotting方法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果电镜下可见用药后JAR细胞凋亡的形态学改变;流式细胞... 目的探讨4’-甲醚-黄芩素(4-MS)诱导人绒毛膜癌JAR细胞凋亡的分子机制。方法应用透射电镜、流式细胞术、实时定量PCR法和Westernblotting方法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果电镜下可见用药后JAR细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术显示,随着作用时间和药物剂量的增加,早期凋亡细胞和坏死细胞增加,明显高于对照组(P〈0.01)。20、40mg·L^-14-MS作用48h后c—myc mRNA的表达量为0.87±0.12和0.45±0.08;c—myc蛋白的表达量是0.37±0.02和0.25±0.02,均低于对照组(P〈0.01)。结论4-MS诱导JAR细胞凋亡,其机制与降低c—myc的表达有关。 展开更多
关键词 4’-甲醚-黄芩素(4-MS) JAR细胞 凋亡 c—myc
4'-甲醚-黄芩素诱导人绒毛膜癌细胞凋亡的信号转导机理研究 被引量:2
6
作者 杨最素 冯播 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期 20-23,共4页
目的:探讨4'-甲醚-黄芩素(4'-methyl ether-scutellarein,4-MS)诱导人绒毛膜癌JAR细胞凋亡的信号传导机制。方法:光镜、电镜观察细胞形态、超微结构,RT-PCR技术检测Survivin、Caspase 9、Caspase 3、p38 MAPK基因的表达,Western b... 目的:探讨4'-甲醚-黄芩素(4'-methyl ether-scutellarein,4-MS)诱导人绒毛膜癌JAR细胞凋亡的信号传导机制。方法:光镜、电镜观察细胞形态、超微结构,RT-PCR技术检测Survivin、Caspase 9、Caspase 3、p38 MAPK基因的表达,Western blot检测Survivin、Caspase 9、Caspase 3、p38 MAPK、Bax和cytochrome C蛋白水平的表达差异。结果:光镜和电镜下可见凋亡细胞的形态学改变;RT-PCR结果显示,不同质量浓度(20、40μg/ml)的4-MS作用24h后,JAR细胞中Survivin mRNA表达显著下降,而Caspase 9、Caspase 3及p38 MAPK mRNA表达显著上升。Western blot证实,JAR细胞的Survivin蛋白表达量显著下降,Bax、cytochrome C蛋白表达量及p38磷酸化水平升高,Caspase 3与Caspase 9被明显激活。结论:4-MS通过上调Bax、cytochrome C、Caspase 9、Caspase 3表达,激活p38 MAPK信号通路及抑制Survivin表达,对JAR细胞内源性细胞凋亡信号转导通路进行正向调节而诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 4'-甲醚-黄芩素(4-MS) JAR细胞 内源性细胞凋亡通路 P38MAPK信号通路
绒毛膜癌JAR细胞表皮生长因子受体的表达变化及意义 预览
7
作者 刘岚 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第10期 85-86,共2页
目的 观察绒毛膜癌JAR细胞表皮生长因子受体(EGFR)的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测绒毛膜癌JAR细胞及早孕绒毛滋养层细胞的EGFR蛋白,用RT—PCR法检测EGFRmRNA。结果JAR细胞EGFR蛋白及其mRNA的表达高于早孕绒毛滋... 目的 观察绒毛膜癌JAR细胞表皮生长因子受体(EGFR)的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测绒毛膜癌JAR细胞及早孕绒毛滋养层细胞的EGFR蛋白,用RT—PCR法检测EGFRmRNA。结果JAR细胞EGFR蛋白及其mRNA的表达高于早孕绒毛滋养层细胞(P均〈0.01)。结论绒毛膜癌JAR细胞EGFR表达增强,可能导致绒毛膜癌细胞增殖力及侵蚀性增强。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 绒毛膜癌 JAR细胞
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4’-甲醚-黄芩素逆转人绒毛膜癌耐药细胞株多药耐药性的相关机制研究 被引量:6
8
作者 朱利群 +1 位作者 李卓 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2009年第9期1215-1219,共5页
目的:探讨4’-甲醚-黄芩素(4’-M-S)逆转人绒毛膜癌耐药细胞株JAR/VP16多药耐药性的可能机制.方法:采用流式细胞术测定4’-M-S作用前后耐药细胞内罗丹明(rh123)潴留量的变化,以检测4’-M-S对P-糖蛋白(P-gp)功能的影响... 目的:探讨4’-甲醚-黄芩素(4’-M-S)逆转人绒毛膜癌耐药细胞株JAR/VP16多药耐药性的可能机制.方法:采用流式细胞术测定4’-M-S作用前后耐药细胞内罗丹明(rh123)潴留量的变化,以检测4’-M-S对P-糖蛋白(P-gp)功能的影响;用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测多药耐药基因mdr1 mRNA的表达,并进一步采用western blot及免疫组织化学法测定mdr1基因产物P-gp的表达.结果:流式细胞术结果表明,20 μg/ml 4’-M-S可明显增加耐药细胞内潴留的rh123浓度;RT-PCR及western blot结果显示,4’-M-S可抑制耐药细胞中mdr1 mRNA和p-gp的表达;免疫组化实验显示,4’-M-S 处理后,耐药细胞中p-gp的表达下降,表现为细胞膜上阳性颗粒数量减少.着色变浅.结论:4’-M-S对人绒毛膜癌耐药细胞株多药耐药性的逆转,与抑制mdr1 mRNA及其产物P-gp的表达.增加细胞内化疗药物的浓度有关. 展开更多
关键词 4’-甲醚-黄芩素 绒毛膜癌 多药耐药 耐药逆转 P-糖蛋白
马鞭草C部位单体4′-甲醚-黄芩素对人绒毛膜癌细胞增殖的抑制作用 预览 被引量:3
9
作者 冯播 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS 2008年第5期 444-450,共7页
目的:探讨马鞭草有效成分所提取的单体4′-甲醚-黄芩素(4′-methylether-scutellarein,4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及其相关机制。方法:JAR细胞传代后加入不同浓度4-MS作用一定时间,应用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用... 目的:探讨马鞭草有效成分所提取的单体4′-甲醚-黄芩素(4′-methylether-scutellarein,4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及其相关机制。方法:JAR细胞传代后加入不同浓度4-MS作用一定时间,应用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞周期变化,AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞,RT-PCR技术分析4-MS对人绒毛膜癌JAR细胞凋亡相关基因Caspase3、p38MAPK及Survivin表达的影响,并进一步用Western blotting测定Caspase3、p38MAPK及Survivin在用药前后蛋白水平的表达差异。结果:不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,并随药物浓度和作用时间的增加而不断增强(P〈0.05,P〈0.01);流式细胞术显示,随着药物浓度的增加细胞凋亡率亦逐渐升高,G2/M期细胞所占比例增大(P〈0.05);AO/EB双染后发现,随着4-MS剂量的增加,晚期凋亡细胞逐渐增多;20和40mg/L的4-MS作用48h后,JAR细胞中p38MAPK及Caspase3mRNA表达下降,Survivin mRNA表达上升,与对照组相比均有统计学意义(P〈0.05);Western blotting证实,20mg/L和40mg/L4-MS作用48h后Survivin蛋白表达量显著下降,p38磷酸化水平升高,Caspase3被明显激活。结论:4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖并诱导凋亡,可能与其阻滞细胞生长于G/M期、抑制Survivin抗凋亡活性,直接激活p38MAPK信号通路和Caspase3活化有关。 展开更多
关键词 4′-甲醚-黄芩素(4-MS) 人绒毛膜癌JAR细胞 CASPASE3 SURVIVIN P38MAPK信号通路
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妊娠高血压综合征大鼠的心肌超微结构改变 预览
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作者 虞斌 王秋伟 +2 位作者 袁佩 许培箴 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第12期 40-41,共2页
注射一氧化氮合成酶抑制剂(L-NAME)构建妊娠高血压综合征(妊高征)大鼠模型,电镜下观察心肌细胞超微结构,同时监测其血清cTnT、Myo。结果成功构建了妊高征大鼠模型;电镜下见妊高征大鼠心肌细胞间质水肿,点状出血;肌原纤维结构... 注射一氧化氮合成酶抑制剂(L-NAME)构建妊娠高血压综合征(妊高征)大鼠模型,电镜下观察心肌细胞超微结构,同时监测其血清cTnT、Myo。结果成功构建了妊高征大鼠模型;电镜下见妊高征大鼠心肌细胞间质水肿,点状出血;肌原纤维结构不完整,肌丝扭曲,肌节明暗带结构模糊,中线及Z线消失;线粒体大量堆积,排列紊乱,大小不一,部分嵴结构不清楚,发生断裂或消失;妊高征大鼠血清cTnT、Myo均明显高于正常妊娠孕鼠(P〈0.05)。认为妊高征大鼠心肌细胞损伤明显,血清cTnT、Myo含量与心肌损伤严重程度有关。 展开更多
关键词 妊娠并发症 高血压 大鼠 心肌 超微结构
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马鞭草有效成分对人绒毛膜癌耐药细胞株JAR/VP16的逆转作用研究 预览 被引量:3
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作者 朱利群 +3 位作者 罗莉 李卓 仇黎丽 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2007年第5期 419-423,F0002,共6页
目的:研究马鞭草有效成分4'-甲醚-黄芩素(4'-methylether-scutellarein,4'-M-S)对人绒毛膜癌多药耐药细胞株JAR/VP16的耐药逆转作用。方法:MTT法检测4'-M-S对JAR/VP16细胞的增殖抑制作用,确定药物逆转浓度及其对耐药细胞的逆转... 目的:研究马鞭草有效成分4'-甲醚-黄芩素(4'-methylether-scutellarein,4'-M-S)对人绒毛膜癌多药耐药细胞株JAR/VP16的耐药逆转作用。方法:MTT法检测4'-M-S对JAR/VP16细胞的增殖抑制作用,确定药物逆转浓度及其对耐药细胞的逆转倍数和逆转效率;单克隆抗体酶免定量法测定耐药细胞中绒毛膜促性腺激素(hCG)分泌变化;流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率;光镜和透射电镜观察耐药细胞形态学改变。结果:4'-M-S对JAR/VP16细胞具有明显增殖抑制作用,20μg/ml4'-M-S可显著逆转JAR/VP16细胞对鬼臼乙叉甙(VP16)、氨甲喋呤(MTX)及放线菌素D(ACTD)的耐受性,逆转倍数为:5.02、3.67、2.48;逆转效率为:81.19%、76.89%、64.08%;4'-M-S联合作用后,耐药细胞hCG分泌量明显下降;细胞周期阻滞于G0~G1期和G2~M期,细胞凋亡率达19.71%;透射电镜观察发现细胞质空泡化、内质网扩张、核物质浓缩边聚等早期凋亡现象。结论:4'-M-S对JAR/VP16细胞具有耐药逆转作用,可能的机制是抑制耐药细胞生长及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 4'-甲醚-黄芩素 绒毛膜癌 多药耐药 逆转 细胞凋亡
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多药耐药性人绒毛膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立及其生物学特性 预览 被引量:3
12
作者 李卓 +3 位作者 朱利群 张燕 仇黎丽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS 2007年第4期 347-351,共5页
目的:建立一种耐药性稳定的人绒毛膜癌裸鼠皮下移植瘤模型JAR/VP16/nude,为研究体内肿瘤耐药机制和逆转药物的筛选奠定实验基础。方法:将人绒毛膜癌多药耐药细胞系JAR/VP16接种于裸鼠左侧腋窝皮下,观察成瘤情况及肿瘤生长特性;利用光... 目的:建立一种耐药性稳定的人绒毛膜癌裸鼠皮下移植瘤模型JAR/VP16/nude,为研究体内肿瘤耐药机制和逆转药物的筛选奠定实验基础。方法:将人绒毛膜癌多药耐药细胞系JAR/VP16接种于裸鼠左侧腋窝皮下,观察成瘤情况及肿瘤生长特性;利用光镜、电镜对移植瘤进行组织学和超微结构观察;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测多药耐药基因mdr1 mRNA的表达;流式细胞术(FCM)分析细胞内罗丹明123(Rhodamine123,Rh123)的潴留情况。结果:裸鼠移植瘤模型构建成功率为98.39%,8~10d开始成瘤,15~20d瘤体长径达1.0~1.5cm;H-E染色及透射电镜观察发现瘤组织形态及细胞超微结构与人绒毛膜癌耐药细胞JAR/VP16相似;RT-PCR和FCM检测表明移植瘤组织mdr1 mRNA表达阳性,且对Rh123有显著的外排作用。结论:以JAR/VP16细胞建立的耐药性绒毛膜癌裸鼠移植瘤模型,保持了耐药性人绒毛膜癌细胞JAR/VP16的组织学特征和多药耐药性,为耐药性人绒毛膜癌耐药机制和逆转的研究提供了理想的动物模型。 展开更多
关键词 多药耐药 绒毛膜癌 裸鼠 移植瘤
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端粒酶与妇科肿瘤诊治的研究进展 预览
13
作者 杨最素 《浙江海洋学院学报:自然科学版》 CAS 2007年第1期 74-77,共4页
端粒酶是一种RNA依赖的逆转录酶,其激活是细胞永生化和肿瘤形成的关键步骤。在妇科肿瘤的发生过程中,端粒酶活性和hTERT的表达与肿瘤的进展具有相关性。端粒酶及其催化亚单位成为妇科肿瘤早期诊断和预后判断的生物学指标。因此,抑制... 端粒酶是一种RNA依赖的逆转录酶,其激活是细胞永生化和肿瘤形成的关键步骤。在妇科肿瘤的发生过程中,端粒酶活性和hTERT的表达与肿瘤的进展具有相关性。端粒酶及其催化亚单位成为妇科肿瘤早期诊断和预后判断的生物学指标。因此,抑制端粒酶活性有望成为妇科肿瘤治疗的新策略。 展开更多
关键词 端粒酶 妇科肿瘤 诊断 治疗
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4’-甲醚-黄芩素对绒毛膜癌JAR细胞内Ca^2+浓度的影响 预览 被引量:1
14
作者 杨最素 罗莉 +2 位作者 朱利群 仇黎丽 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2007年第3期 228-231,F0003,共5页
目的:探讨4'-甲醚-黄芩素对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及细胞内Ca^2+浓度的影响。方法:应用MTT法、流式细胞术和激光共聚焦扫描显微镜技术,体外观察该化合物对JAR细胞的影响。结果:4'-甲醚-黄芩素对JAR细胞的生长具有抑制... 目的:探讨4'-甲醚-黄芩素对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及细胞内Ca^2+浓度的影响。方法:应用MTT法、流式细胞术和激光共聚焦扫描显微镜技术,体外观察该化合物对JAR细胞的影响。结果:4'-甲醚-黄芩素对JAR细胞的生长具有抑制作用。随着药物浓度与作用时间的增加,Annexin V-FITC^+/PI-细胞、细胞内Ca^2+浓度逐渐增加,与对照组相比差异有显著性。结论:4’-甲醚-黄芩素能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca^2+浓度有关。 展开更多
关键词 4'-甲醚-黄芩素 JAR细胞 凋亡 细胞内CA^2+浓度
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4'-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究 预览 被引量:6
15
作者 杨最素 罗莉 +2 位作者 朱利群 仇黎丽 《中草药》 CAS 北大核心 2007年第8期 1203-1206,共4页
目的探讨4’-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4... 目的探讨4’-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,呈剂量依赖,作用72h后其增殖抑制率分别为(14.14±0.75)%、(34.34±2.99)%、(61.11±2.99)%(P〈0.01);4-MS作用72h后细胞内Ca^2+浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0,与对照组相比差异有显著性(P〈0.05)。40mg/L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为(2.36±0.19)%、(4.22±2.44)%、(7.34±0.56)%,明显高于对照组(P〈0.01)。20、40mg/L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01,明显低于对照组(P〈0.01)。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca^2+浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 4'甲醚-黄芩素(4-MS) JAR细胞 早期凋亡 细胞内CA^2+浓度 人端粒酶逆转录酶(hTERT)
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左炔诺孕酮对人子宫肌瘤细胞体外增殖与凋亡的影响 预览 被引量:5
16
作者 仇黎丽 +2 位作者 朱利群 李卓 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS 2007年第6期 550-556,共7页
目的:建立稳定、成功率高的人子宫肌瘤细胞原代培养方法,探讨不同浓度左炔诺孕酮(levonorgestrel,LNG)对体外培养人子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:分别采用酶解法和贴块法原代培养人子宫肌瘤细胞(uterine leiomyoma cell,Ut... 目的:建立稳定、成功率高的人子宫肌瘤细胞原代培养方法,探讨不同浓度左炔诺孕酮(levonorgestrel,LNG)对体外培养人子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:分别采用酶解法和贴块法原代培养人子宫肌瘤细胞(uterine leiomyoma cell,UtLMC),以α-Actin单抗进行免疫组织化学染色鉴定原代细胞;细胞传代后,加入不同浓度左炔诺孕酮,H-E染色和透射电镜观察细胞的形态学改变,MTT法检测LNG对细胞增殖的调节作用,流式细胞术测定细胞凋亡率,RT-PCR技术分析LNG对人子宫肌瘤细胞凋亡相关基因Bcl-2、IGF-1及Survivin mRNA表达的影响。结果:酶解法和贴块法均成功获得UtLMC,经免疫组化鉴定,纯度达95%以上,并能稳定传12代;5μg/ml左炔诺孕酮对子宫肌瘤细胞无明显作用,当质量浓度达到10μg/ml时可显著抑制细胞增殖,并呈时间、剂量依赖;随着药物浓度的增加,细胞凋亡率亦逐渐升高,与对照组相比有显著性差异(P〈0.05);10μg/ml和20μg/ml左炔诺孕酮作用UtLMC后,Bcl-2、IGF-1及Survivin mRNA表达下降。结论:酶解法和贴块法均能获得功能良好的人子宫肌瘤细胞,一定浓度的左炔诺孕酮可抑制其增殖并诱导凋亡,机制与下调Bcl-2、IGF-1及Survivin基因表达有关。 展开更多
关键词 左炔诺孕酮 子宫肌瘤细胞 细胞凋亡 基因表达
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子宫平滑肌瘤细胞原代培养及鉴定 预览 被引量:4
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作者 仇黎丽 +2 位作者 罗莉 朱利群 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2007年第9期 967-969,共3页
目的:建立人子宫平滑肌瘤细胞原代培养方法,为子宫肌瘤发病机制及治疗药物筛选的研究提供理想的细胞株系.方法:采用消化法及组织块贴壁2种方法进行子宫平滑肌瘤细胞培养.倒置显微镜下观察原代培养的细胞,并用免疫组化染色对其进行鉴定... 目的:建立人子宫平滑肌瘤细胞原代培养方法,为子宫肌瘤发病机制及治疗药物筛选的研究提供理想的细胞株系.方法:采用消化法及组织块贴壁2种方法进行子宫平滑肌瘤细胞培养.倒置显微镜下观察原代培养的细胞,并用免疫组化染色对其进行鉴定.结果:2种方法均可获得大量子宫肌瘤细胞,所培养的细胞在倒置显微镜下呈梭形和典型“峰-谷”样生长,α-Actin免疫组化染色呈强阳性.结论:采用该2种方法均可成功进行人子宫平滑肌瘤细胞的原代培养,且培养的人子宫平滑肌细胞生长良好,纯度高,可用于子宫肌瘤发病机制及治疗药物筛选的研究. 展开更多
关键词 子宫平滑肌瘤 原代培养 免疫组织化学
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4'-甲醚-黄芩素对绒癌耐药细胞株多药耐药性的逆转作用研究 预览 被引量:15
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作者 罗莉 +4 位作者 朱利群 李卓 仇黎丽 陈琪 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS 北大核心 2006年第11期 1061-1073,共13页
为探讨马鞭草中4'-甲醚-黄芩素对人绒癌JAR/VP16耐药细胞株的多药耐药逆转作用及可能的逆转机制,采用四甲基偶氮唑盐比色、透射电镜观察、逆转录多聚酶链反应、流式细胞术、基因芯片以及实时定量PCR等方法,检测到4'-甲醚-黄芩素对... 为探讨马鞭草中4'-甲醚-黄芩素对人绒癌JAR/VP16耐药细胞株的多药耐药逆转作用及可能的逆转机制,采用四甲基偶氮唑盐比色、透射电镜观察、逆转录多聚酶链反应、流式细胞术、基因芯片以及实时定量PCR等方法,检测到4'-甲醚-黄芩素对化疗药物具有协同增效作用,显著逆转耐药细胞对鬼臼乙叉甙(VP16)、甲氨蝶呤(MTX)及更生霉素(KSM)的耐药性,该药物作用后,耐药细胞超微结构呈现凋亡样改变,细胞凋亡率增高并出现明显凋亡峰.此外,耐药细胞中MDR1、MRP1、MRP2、MRP6、AHR、COMT、FGF2等耐药相关基因以及Bcl-2、BFL1、NAIP、p63等凋亡抑制基因表达降低,而Apaf-1、ASC、ATM、Bad、Bak、Bax、BimL等凋亡促进基因表达升高.上述实验结果表明:4'-甲醚-黄芩素对绒毛膜癌耐药细胞具有显著的耐药逆转作用,这种逆转作用可能是通过降低耐药基因表达、促进细胞凋亡实现的. 展开更多
关键词 4'-甲醚-黄芩素 绒毛膜癌 多药耐药 耐药逆转 细胞凋亡
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人绒毛膜癌JAR/VP16多药耐药细胞株的建立及相关基因表达检测 预览 被引量:8
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作者 朱利群 +2 位作者 罗莉 陈琪 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2006年第7期 485-490,F0002,共7页
目的:建立人绒毛膜癌鬼臼乙叉甙(VP16)耐药细胞株,检测其生物学特性及耐药和凋亡相关基因的表达,探讨多药耐药性产生与凋亡基因改变之间的相关性.方法:体外采用VP16浓度梯度递增法诱导建立JAR/VP16耐药细胞株,终浓度药物维持培养4个... 目的:建立人绒毛膜癌鬼臼乙叉甙(VP16)耐药细胞株,检测其生物学特性及耐药和凋亡相关基因的表达,探讨多药耐药性产生与凋亡基因改变之间的相关性.方法:体外采用VP16浓度梯度递增法诱导建立JAR/VP16耐药细胞株,终浓度药物维持培养4个月,MTT法测定多药耐药谱及耐药稳定性;倒置相差显微镜观察并结合HE染色探讨耐药细胞在光镜下的形态学变化,电镜观察细胞的超微结构;基因芯片检测耐药相关基因及凋亡相关基因的表达.结果:①历经14个月、70多代耐药诱导培养,成功构建人绒毛膜癌JAR细胞耐VP16的耐药细胞株,命名为“JAR/VP16耐药细胞株”,与JAR细胞相比有显著的形态学改变,其对VP16的耐药性能稳定,耐药指数(RI)为73.67;并且对紫杉醇(TAX)、甲氨蝶呤(MTX)和更生霉素(KSM)具有显著的交叉耐药性,耐药指数分别为26.18、18.67和14.73;对5-氟尿嘧啶(5-FU)和长春新碱(VCR)的耐受性有所增加(RI:2.88;3.45);对阿霉素(ADM)则无明显的交叉耐药(RI:1.39).②基因芯片结果表明,JAR/VP16细胞MRP1、MRP2、MRP6、BCRP、LRP和Rb等耐药基因表达明显高于亲本细胞,并且Bcl-2、Bcl-x、MyD88、TRAF-4、TRAF-6、Trip等凋亡抑制基因表达上调,Bax、BimL、Blk、Caspase-7、-8、-13、-14以及Fas和FasL等凋亡促进基因表达下调.结论:①JAR/VP16细胞呈现多药耐药性且耐药性能稳定,为研究耐药机制及筛选药物提供了理想的实验模型.②JAR/VP16细胞中凋亡相关基因表达的改变可能是其产生多药耐药性的一个重要机制. 展开更多
关键词 绒毛膜癌 多药耐药 耐药基因 凋亡基因 基因芯片 鬼臼乙叉甙(VP16)
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马鞭草药材中齐墩果酸、熊果酸的RP-HPLC测定 预览 被引量:12
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作者 邓旭坤 +2 位作者 陈斌 陈琪 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2006年第3期 165-168,共4页
目的:采用重复性好、精密度高且较稳定的反相高效液相色谱法测定马鞭草中齐墩果酸、熊果酸含量,并进行方法学考察。建立有效控制马鞭草质量的方法。方法:液相条件:Agilent ZORBAX80A Extend-C18分析柱(4.6mm×250mm,5μm)... 目的:采用重复性好、精密度高且较稳定的反相高效液相色谱法测定马鞭草中齐墩果酸、熊果酸含量,并进行方法学考察。建立有效控制马鞭草质量的方法。方法:液相条件:Agilent ZORBAX80A Extend-C18分析柱(4.6mm×250mm,5μm)。流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(89:11);柱温40℃;流速0.8ml/min:检测波长210nm。结果:齐墩果酸与熊果酸进样量在0.1192-4.768邮范围内均呈良好线性关系,其中齐墩果酸平均回收率为97.1%,RSD为2.4%(n=5);熊果酸平均回收率为98.9%,RSD为3.0%(n=5)。结论:本方法使马鞭草中质控成分齐墩果酸和熊果酸达到基线分离.操作简便、结果可靠,可为马鞭草质量控制和评价提供有效手段. 展开更多
关键词 马鞭草 齐墩果酸 熊果酸 反相高效液相色谱遗
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