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拟南芥bzip 19-2/bzip 23-1/bzip24-2三突变体植株获取及其PCR鉴定 预览
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作者 家升 任永兵 +2 位作者 孟云 阳立波 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第1期125-129,共5页
近年来植物所受非生物胁迫的影响日益严峻,是造成农业减产的主要因素之一。bZIP类转录因子参与多种生物学功能并起着重要调控作用,尤其是对植物生长发育以及逆境胁迫应答的调控。因此文章以拟南芥bZIP19、bZIP23、bZIP24基因的突变体为... 近年来植物所受非生物胁迫的影响日益严峻,是造成农业减产的主要因素之一。bZIP类转录因子参与多种生物学功能并起着重要调控作用,尤其是对植物生长发育以及逆境胁迫应答的调控。因此文章以拟南芥bZIP19、bZIP23、bZIP24基因的突变体为实验材料,通过遗传杂交技术构建bzip19-2/bzip23-1/bzip24-2三突变体,结合聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定技术,最终获得纯合三突变体实验材料,为研究bZIP类转录因子的功能及其间相互作用奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 bZIP转录因子 杂交 聚合酶链式反应(PCR) 三突变体
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拟南芥CTSP3基因GUS载体构建及转基因植株的筛选鉴定 预览
2
作者 孟云 陶曼芝 +2 位作者 吴席 樊婷婷 《安徽农业科学》 CAS 2019年第3期84-86,共3页
[目的]深入研究植物基因CTSP3的基因表达模式及其对重金属镉胁迫的响应机制,以野生型拟南芥为材料构建CTSP3-GUS重组质粒及GUS转基因植株。[方法]通过提取野生型拟南芥的DNA,克隆其启动区基因片段,将基因片段和pART27-GUS质粒双酶切后连... [目的]深入研究植物基因CTSP3的基因表达模式及其对重金属镉胁迫的响应机制,以野生型拟南芥为材料构建CTSP3-GUS重组质粒及GUS转基因植株。[方法]通过提取野生型拟南芥的DNA,克隆其启动区基因片段,将基因片段和pART27-GUS质粒双酶切后连接,转化到大肠杆菌感受态细胞中,菌落PCR和测序获得阳性单克隆。然后将CTSP3-GUS重组质粒转入农杆菌感受态GV3101,获得阳性单菌落。接着采用浸花法侵染野生型拟南芥,最后通过抗性筛选和PCR鉴定获取CTSP3-GUS转基因植株。[结果]成功克隆CTSP3启动区基因片段,构建出重组质粒,获得了CTSP3-GUS转基因植株。[结论]获得CTSP3-GUS转基因植株,为接下来进一步研究该基因在植物响应镉胁迫机制中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 CTSP3 载体 转基因植株
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拟南芥SPM12基因GFP载体构建及转基因植株筛选 预览
3
作者 方雪 徐洁娜 +2 位作者 孟杏楠 樊婷婷 《安徽农业科学》 CAS 2019年第2期86-88,共3页
[目的]为了进一步研究SPM12基因的功能,利用哥伦比亚(Columbia,Col)遗传背景的野生型拟南芥材料构建SPM12基因GFP载体及其转基因植株。[方法]以野生型拟南芥的RNA反转录成的cDNA为模板,PCR扩增出SPM12基因的CDS全长序列,将其连接到GFP... [目的]为了进一步研究SPM12基因的功能,利用哥伦比亚(Columbia,Col)遗传背景的野生型拟南芥材料构建SPM12基因GFP载体及其转基因植株。[方法]以野生型拟南芥的RNA反转录成的cDNA为模板,PCR扩增出SPM12基因的CDS全长序列,将其连接到GFP载体的质粒上;然后将构建成功的重组质粒转化到大肠杆菌DH5α受态细胞中,挑取阳性菌落经PCR鉴定并测序后,将其质粒转入农杆菌GV3101感受态细胞中。PCR鉴定出阳性菌落后,通过浸花法将其转入野生型拟南芥植株中。收种子后,使用带有抗性的选择性培养基筛选出阳性植株。[结果]通过SPM12基因CDS片段和SPM12-GFP重组质粒的获得,构建了SPM12-GFP载体和其转基因植株。[结论]成功获得拟南芥SPM12-GFP转基因植株,为进一步研究拟南芥SPM12基因的功能与分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 SPM12 载体 GFP转基因植株
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拟南芥MDH2基因GFP载体构建及转基因植株的筛选鉴定 预览
4
作者 王媛媛 韩洋洋 +3 位作者 耿庆鎏 朱香豫 樊婷婷 《安徽农业科学》 CAS 2019年第2期96-98,共3页
[目的]以野生型拟南芥为材料构建MDH2基因GFP载体及GFP转基因植株,研究MDH2基因在植物响应镉胁迫机制中的功能。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为cDNA,并以cDNA为模板,利用PCR扩增MDH2基因,将扩增所获得MDH2基因和pXB94-GFP... [目的]以野生型拟南芥为材料构建MDH2基因GFP载体及GFP转基因植株,研究MDH2基因在植物响应镉胁迫机制中的功能。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为cDNA,并以cDNA为模板,利用PCR扩增MDH2基因,将扩增所获得MDH2基因和pXB94-GFP质粒双酶切后连接,并转化进大肠杆菌感受态细胞中,鉴定正确后再转入农杆菌感受态细胞中,通过菌落PCR鉴定出阳性单菌落。再通过浸花法转入野生型拟南芥中,最后利用抗性筛选和PCR鉴定获得MDH2转基因阳性植株。[结果]成功克隆MDH2基因,并构建了MDH2-GFP重组质粒,抗性筛选获得了MDH2-GFP转基因植株。[结论]成功获得MDH2-GFP转基因植株,为进一步研究该基因在植物响应镉胁迫机制中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 MDH2 载体 转基因植株
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航道水底地形建模比较研究 预览
5
作者 冯凯 +2 位作者 刘阳 朱楠 王洁茹 《中国水运》 2018年第8期52-53,共2页
本文论述当前航道多波束水深测量数据特点、DEM结构模型以及建模方法,选择了格网DEM作为航道水底建模数据格式;然后依托ArcGIS平台内嵌的两种国内外广泛应用的建立格网DEM的方法—由TIN(不规则三角网)生成格网DEM和基于ANUDEM生成格网D... 本文论述当前航道多波束水深测量数据特点、DEM结构模型以及建模方法,选择了格网DEM作为航道水底建模数据格式;然后依托ArcGIS平台内嵌的两种国内外广泛应用的建立格网DEM的方法—由TIN(不规则三角网)生成格网DEM和基于ANUDEM生成格网DEM,对长江某段航道进行了水底DEM构建;最后通过回放两类方法生成DEM的等深线与现有的等深线对比,分析了其精度。 展开更多
关键词 长江航道 DEM TIN 多波束 ArcGIS
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甘露糖促进小白菜对重金属镉耐受研究 预览
6
作者 马文佳 盛义保 +3 位作者 韩洋洋 倪娇娇 樊婷婷 《合肥工业大学学报:自然科学版》 北大核心 2018年第8期1130-1133,1148共5页
近年来土壤重金属镉污染问题日益严峻,植物修复技术以低成本、安全等特点被广泛研究。文章选用小白菜的3个品种四月慢油菜、黄心乌菜和黑心乌菜分别进行研究,在镉污染土壤中分别施加不同质量比的甘露糖,比较分析四月慢油菜、黄心乌菜和... 近年来土壤重金属镉污染问题日益严峻,植物修复技术以低成本、安全等特点被广泛研究。文章选用小白菜的3个品种四月慢油菜、黄心乌菜和黑心乌菜分别进行研究,在镉污染土壤中分别施加不同质量比的甘露糖,比较分析四月慢油菜、黄心乌菜和黑心乌菜的生物量变化和植物组织镉质量比的变化。研究表明,土壤中施加甘露糖后小白菜的3个品系的生物量均增加,测定植物组织镉质量比发现,甘露糖的质量比在200 mg/kg以内随着甘露糖质量比的增加,小白菜对重金属镉的吸收量也随之升高,黄心乌菜中镉质量比变化尤其显著。由此说明,土壤中施加甘露糖可以促进小白菜对重金属镉的耐受性,从而提高植物对镉的富集作用。 展开更多
关键词 植物修复 甘露糖 小白菜 耐受
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青岛市中心城区公共文化设施空间分布特征研究——基于POI数据的分析 预览 被引量:1
7
作者 《青岛农业大学学报:社会科学版》 2018年第2期85-88,共4页
以青岛市中心城区482个公共文化设施空间信息点POI(Point Of Information)为研究对象,利用ArcGIS10.0软件的空间地理分析模型对信息点的区际分布形态、集中程度、分布密度、影响因素等空间特征进行研究。结果显示:青岛市公共文化设... 以青岛市中心城区482个公共文化设施空间信息点POI(Point Of Information)为研究对象,利用ArcGIS10.0软件的空间地理分析模型对信息点的区际分布形态、集中程度、分布密度、影响因素等空间特征进行研究。结果显示:青岛市公共文化设施区际分布差异大,集中程度较高;分布密度呈"中高周低"格局,基本围绕城区中心集中分布;公共文化设施空间分布与经济发展指标关联度不高而受交通的便捷性影响较大。政府后续优化、完善空间分布格局的主要方向应是公共文化资源更加公平、均等、普惠地分布。 展开更多
关键词 公共文化 设施 空间分布 POI ARCGIS
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一个耐镉基因过表达载体构建及转基因植株的筛选鉴定 预览
8
作者 严星星 欧阳剑 +3 位作者 黄莹 盛义保 张乘 《安徽农业科学》 CAS 2018年第21期116-118,共3页
[目的]进一步研究MNB1基因在植物应对镉胁迫响应中的功能,构建拟南芥中MNB1基因过量表达载体,通过筛选鉴定最终获得相应的转基因植株。[方法]以野生型拟南芥cDNA为模板,PCR扩增MNB1基因全长,将该基因连接到过量表达载体上;然后将构建成... [目的]进一步研究MNB1基因在植物应对镉胁迫响应中的功能,构建拟南芥中MNB1基因过量表达载体,通过筛选鉴定最终获得相应的转基因植株。[方法]以野生型拟南芥cDNA为模板,PCR扩增MNB1基因全长,将该基因连接到过量表达载体上;然后将构建成功的重组载体转化至农杆菌菌株GV3101,浸花法转化野生型植株;最后利用转基因筛选与遗传鉴定获得MNB1转基因阳性植株。[结果]MNB1基因CDS全长1 368 bp,酶切连接后转化大肠杆菌鉴定得到阳性菌落,测序结果经比对完全正确。通过抗性筛选及PCR电泳检测获得阳性转基因植株。[结论]MNB1基因过表达载体构建成功并获得相应转基因植株,为进一步研究该基因调控植物镉胁迫响应中的功能及其分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 拟南芥 MNB1基因 过表达 转基因植株
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拟南芥SSP1基因GFP载体构建及GFP植株筛选 预览
9
作者 吴席 樊婷婷 +2 位作者 方雪 徐洁娜 《安徽农业科学》 CAS 2018年第21期119-121,共3页
[目的]以野生型拟南芥为材料构建SSP1基因GFP载体及GFP转基因植株。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为cDNA,并以cDNA为模板,利用高保真酶,进行SSP1基因的克隆,将克隆所获得SSP1基因和pXB94-GFP质粒进行双酶切,利用T4-DNA lig... [目的]以野生型拟南芥为材料构建SSP1基因GFP载体及GFP转基因植株。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为cDNA,并以cDNA为模板,利用高保真酶,进行SSP1基因的克隆,将克隆所获得SSP1基因和pXB94-GFP质粒进行双酶切,利用T4-DNA ligase进行连接,并转化进大肠杆菌DH5α感受态细胞中,通过菌落PCR和测序获得阳性单克隆。通过质粒抽提试剂盒提出构建好的重组质粒,并将其转入农杆菌GV3101中,通过菌落PCR鉴定出阳性单菌落。将获得的阳性菌通过花序浸染法转入野生型拟南芥中,并通过抗性筛选获得阳性植株。[结果]克隆SSP1基因成功,菌落PCR显示SSP1基因成功连接到pXB94-GFP质粒上并成功转入农杆菌中,抗性筛选获得了SSP1-GFP转基因植株。[结论]成功获得SSP1-GFP转基因植株,为接下来进一步研究SSP1基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 SSP1 载体 GFP转基因植株
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蔚县青砂 匠心传承
10
作者 萧山 《河北画报》 2018年第5期80-83,共4页
青砂器,河北省蔚县独有的一种传统手工艺制品,广泛使用于烹饪、熬药、饮茶,常见的有青砂锅、青砂壶、青砂吊等,迄今已有500多年的历史,2013年入列河北省非物质文化遗产名录。随着社会的发展,在面临传统手艺失传的境遇下,蔚县青砂"粗中... 青砂器,河北省蔚县独有的一种传统手工艺制品,广泛使用于烹饪、熬药、饮茶,常见的有青砂锅、青砂壶、青砂吊等,迄今已有500多年的历史,2013年入列河北省非物质文化遗产名录。随着社会的发展,在面临传统手艺失传的境遇下,蔚县青砂"粗中做细",走出了一条继往开来、推陈出新的现代化发展之路。 展开更多
关键词 蔚县 非物质文化遗产 传承 现代化发展 工艺制品 河北省 传统
盐胁迫对拟南芥Profilins和ADFs转录水平的影响 预览
11
作者 倪娇娇 马文佳 +1 位作者 樊婷婷 《合肥工业大学学报:自然科学版》 北大核心 2018年第10期1425-1428,共4页
盐胁迫是影响植物生长发育的重要影响因子,是造成农业减产的重要因素之一。因此抗盐基因的功能研究具有重要的理论意义和应用价值。以往的研究表明,肌动蛋白细胞骨架在植物对盐胁迫的响应中起着重要作用,但肌动蛋白结合蛋白在盐胁迫中... 盐胁迫是影响植物生长发育的重要影响因子,是造成农业减产的重要因素之一。因此抗盐基因的功能研究具有重要的理论意义和应用价值。以往的研究表明,肌动蛋白细胞骨架在植物对盐胁迫的响应中起着重要作用,但肌动蛋白结合蛋白在盐胁迫中的作用尚不清楚。文章以拟南芥为试验材料,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术探讨profilins和ADFS基因在盐胁迫处理下的表达。结果表明,用150 mmol/L NaCl处理2周野生型拟南芥幼苗时profilins和ADFs基因的表达量明显升高,说明profilins和ADFs基因可能受到NaCl诱导。该实验结果为进一步研究该基因调控植物抗盐的机制提供了基础。 展开更多
关键词 盐胁迫 ADFs基因 拟南芥 profilins基因 基因表达
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槽罐车泄露危险化学品致污 赔付四百多万成典型案例
12
作者 《绿色视野》 2017年第11期100-102,共3页
据安徽省高级人民法院公布的数据,2016年该省各级法院共受理各类刑事、民事、行政环境资源案件8665件,其中刑事544件,民事6975件,行政案件1146件,2013年—2015年全省环境资源刑事案件年平均增长率9%以上,2016年仅增长2%。
关键词 槽罐车 行政环境 高级人民法院 行政案件 环境资源 刑事案件 环境公益诉讼 案例 滁州 直接利害关系
拟南芥PTR3基因过表达载体构建及转基因植株的获得 预览
13
作者 管灵霞 樊婷婷 +2 位作者 倪娇娇 马文佳 《安徽农业科学》 CAS 2016年第11期129-131,共3页
[目的]构建PTR3基因的过表达栽体,并建立PTR3基因过表达植株,为进一步研究PTR3基因在调控重金属胁迫应答中的功能提供理论依据.[方法]提取野生型拟南芥总mRNA,并以反转录的cDNA为模板扩增出PTR3基因CDS全长,通过限制性核酸内切酶酶切、T... [目的]构建PTR3基因的过表达栽体,并建立PTR3基因过表达植株,为进一步研究PTR3基因在调控重金属胁迫应答中的功能提供理论依据.[方法]提取野生型拟南芥总mRNA,并以反转录的cDNA为模板扩增出PTR3基因CDS全长,通过限制性核酸内切酶酶切、T4DNA连接酶连接,将该基因连接到带有35S启动子的pBI121载体上.[结果]将重组载体转化至农杆菌GV3101菌株,通过浸花法将重组载体转化到野生型植株中,通过抗性筛选和遗传鉴定获得纯合的PTR3转基因阳性植株.[结论]PTR3过表达载体构建成功并获得转基因阳性植株,为研究PTR3基因的分子功能奠定基础. 展开更多
关键词 拟南芥 PTR3基因 过表达载体 转基因植株
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多波束水深测量与GPS-RTK高程测量比测研究 预览 被引量:1
14
作者 舒晓明 +1 位作者 梁向棋 梁达炜 《人民长江》 北大核心 2016年第S1期50-52,共3页
随着长江洪枯季水位的变化,长江航道整治建筑物在枯水季时露出水面,在洪水季时没入水下。在多年多波束水下扫测经验的基础上,结合长江航道整治建筑物的特点,提出了一种检验多波束测深精度的方法。枯水季时用GPS—RTK对航道整治建筑物进... 随着长江洪枯季水位的变化,长江航道整治建筑物在枯水季时露出水面,在洪水季时没入水下。在多年多波束水下扫测经验的基础上,结合长江航道整治建筑物的特点,提出了一种检验多波束测深精度的方法。枯水季时用GPS—RTK对航道整治建筑物进行高程测量;洪水季时用多波束测深系统对航道整治建筑物进行扫测。二者高程进行对比,从而确定多波束扫测作业方式的精度及作业流程的规范性。 展开更多
关键词 多波束扫测 GPS—RTK高程测量 测量精度 长江航道
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我国饮用水水源保护城乡统筹立法研究 预览
15
作者 《中州学刊》 CSSCI 北大核心 2015年第9期62-66,共5页
保护饮用水水源是保障饮用水安全的关键环节。我国目前饮用水水源保护和管理乏力,水源污染趋势加重,饮用水安全形势严峻。现有涉及饮用水水源保护的法律规范分散在若干单行法和规范性文件中,相互之间存在目的不统一、内容不协调等问题,... 保护饮用水水源是保障饮用水安全的关键环节。我国目前饮用水水源保护和管理乏力,水源污染趋势加重,饮用水安全形势严峻。现有涉及饮用水水源保护的法律规范分散在若干单行法和规范性文件中,相互之间存在目的不统一、内容不协调等问题,不能形成系统、完整的制度体系,尤其是缺乏对农村饮用水水源保护的关注。为了长期、有效地保护好城乡饮用水水源,我国应当对饮用水水源保护进行专门立法。专门立法应当遵循城乡统筹的思路,兼顾城乡饮用水水源保护的共性和农村饮用水水源保护的个性,构建以饮用水水源保护区制度为核心,包括饮用水水源地城乡共同所有、开发、利用和保护的产权制度,饮用水水源保护规划制度,饮用水水源保护区制度,饮用水水源地修复制度,污染或破坏饮用水水源的法律责任制度等在内的严密、系统的制度体系。 展开更多
关键词 饮用水水源保护 专门立法 城乡统筹
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一个抗旱/抗寒基因过表达载体构建及转基因植株的筛选鉴定 预览 被引量:1
16
作者 韩娇 阳立波 +6 位作者 樊婷婷 江海坤 张其安 方凌 任永兵 马文佳 《安徽农业科学》 CAS 2015年第13期48-50,共3页
[目的]进一步研究LWTl基因在调控低温和干旱应答中的功能,构建拟南芥LWTl基因过表达载体,获得相应的转基因株系。[方法]以野生型拟南芥的cDNA为模板,利用PCR扩增LWTI基因全长,将该基因连接到pART27载体上。将获得的重组载体转化至... [目的]进一步研究LWTl基因在调控低温和干旱应答中的功能,构建拟南芥LWTl基因过表达载体,获得相应的转基因株系。[方法]以野生型拟南芥的cDNA为模板,利用PCR扩增LWTI基因全长,将该基因连接到pART27载体上。将获得的重组载体转化至农杆菌菌株GV3101,通过浸花转化法将LWT1重组载体转化到拟南芥野生型植株中,利用转基因筛选与遗传鉴定获得£聊转基因阳性植株。[结果]LWT1基因CDS全长990bp,PCR电泳结果一致,测序比对结果正确。通过抗性筛选和分子鉴定获得转基因植株。[结论]LWT1过表达载体构建成功并获得相应的转基因株系,为进一步研究该基因的分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 拟南芥 LWT1基因 过表达 转基因植株
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拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定 预览 被引量:1
17
作者 董万春 樊婷婷 +6 位作者 阳立波 江海坤 张其安 方凌 倪娇娇 管灵霞 《安徽农业科学》 CAS 2015年第13期63-64,104共3页
[目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株。[方法]提取拟南芥mR—NA,反转录成eDNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T-DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连... [目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株。[方法]提取拟南芥mR—NA,反转录成eDNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T-DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的pXB094载体上;然后转化至Transl—T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认。将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株。[结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至pXB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株。[结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 CDR6基因 过量表达载体 转基因植株
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AtbZIP19和AtbZIP23蛋白的原核表达 预览
18
作者 孙成磊 董万春 +3 位作者 韩娇 管灵霞 阳立波 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期113-116,共4页
bZIP类转录因子参与调控多种生物学过程,包括植物生长、花的发育、种子的成熟、衰老、光信号传导、损伤修复、病菌防御以及对各种环境胁迫的响应等。文章构建AtbZIP19和AtbZIP23基因的原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了蛋... bZIP类转录因子参与调控多种生物学过程,包括植物生长、花的发育、种子的成熟、衰老、光信号传导、损伤修复、病菌防御以及对各种环境胁迫的响应等。文章构建AtbZIP19和AtbZIP23基因的原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了蛋白表达;提取拟南芥植株总RNA,通过RT-PCR克隆AtbZIP19与AtbZIP23基因cDNA全长;将pET-32a+载体和聚合酶链反应(PCR)产物进行双酶切,通过DNA连接反应将2个基因定向克隆到pET-32a+质粒中;经菌液PCR和测序鉴定获得阳性克隆后,将重组质粒转化至大肠杆菌原核表达菌株BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后表达得到目的蛋白。 展开更多
关键词 拟南芥 AtbZIP19蛋白 AtbZIP23蛋白 原核表达
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拟南芥抗旱相关基因的表达载体构建及转基因植株鉴定 预览
19
作者 顾进宝 阳立波 《合肥工业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期250-253,共4页
文章以拟南芥Col-0植株的基因组DNA和cDNA为模板扩增出LWT2基因全长和CDS片段,用pEASY-Blunt Zero Cloning Kit试剂盒连接至中间载体,转化到Trans1-T1感受态细胞内,通过单克隆挑选、菌落聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR... 文章以拟南芥Col-0植株的基因组DNA和cDNA为模板扩增出LWT2基因全长和CDS片段,用pEASY-Blunt Zero Cloning Kit试剂盒连接至中间载体,转化到Trans1-T1感受态细胞内,通过单克隆挑选、菌落聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定及质粒测序验证获得DNA阳性克隆。利用限制性内切酶双酶切获得含有黏性末端的目的片段和载体片段,进行DNA连接反应可得最终的互补和过表达构建。提取质粒DNA测序确认后将2个构建分别转化至农杆菌菌株GV3101,菌落PCR鉴定后通过浸花转化法转化拟南芥lwt2-1突变体植株,最后通过转基因筛选与遗传鉴定获得相应构建的转基因阳性植株。 展开更多
关键词 拟南芥 转基因 过表达 LWT2基因
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高校科研经费腐败的成因及对策研究 被引量:11
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作者 张忠 《中国科学基金》 CSSCI CSCD 北大核心 2015年第4期265-269,共5页
高校科研经费腐败有虚构科研活动、利用关联公司和不实的科研成果套取现金三种典型形式。原因是高校科研经费管理的规范性文件缺乏顶层设计;科研经费管理和监督跟不上科研经费急剧增长的步伐;预算中很少或没有对科研人员智力创新的脑... 高校科研经费腐败有虚构科研活动、利用关联公司和不实的科研成果套取现金三种典型形式。原因是高校科研经费管理的规范性文件缺乏顶层设计;科研经费管理和监督跟不上科研经费急剧增长的步伐;预算中很少或没有对科研人员智力创新的脑力劳动进行成本补偿;高校内控制度不健全、没有对科研经费的经济合理性进行专业审核、没有针对纵向和横向科研经费的不同特点进行分类管理;科研人员没有编制严密的经费预算报表,没有明确的“公共财产”、“贪污罪”等法律意识。最后提出了遏制和消除高校科研经费腐败的针对性措施。 展开更多
关键词 科研经费 腐败 高校 成因 对策
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