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野生大豆AP2/RAV亚家族转录因子GsRAV3负调控拟南芥对ABA的敏感性 预览
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作者 朱延 于纪洋 +3 位作者 于洋 段香波 曹蕾 陈超 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期8-18,共11页
RAV亚家族蛋白包括1个AP2DNA结合域和1个B3DNA结合域。研究表明,GsRAV3是植物响应碱和ABA胁迫的重要调节因子。在碱和ABA处理下,野生大豆根系GsRAV3基因被诱导上调表达。与野生型相比,超量表达野生大豆GsRAV3的拟南芥在ABA胁迫下种子萌... RAV亚家族蛋白包括1个AP2DNA结合域和1个B3DNA结合域。研究表明,GsRAV3是植物响应碱和ABA胁迫的重要调节因子。在碱和ABA处理下,野生大豆根系GsRAV3基因被诱导上调表达。与野生型相比,超量表达野生大豆GsRAV3的拟南芥在ABA胁迫下种子萌发状况和幼苗鲜重指标表现良好,对ABA敏感性降低。进一步研究表明,GsRAV3基因超量表达显著影响ABA合成和应答相关基因表达量。此外,GsRAV3定位于植物细胞核中,但在酵母细胞中未表现出明显的转录激活活性。综上所述,GsRAV3可能通过影响ABA合成及应答相关基因转录水平降低植物对外源ABA敏感性,表明GsRAV3在种子萌发和幼苗早期ABA信号传递过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 ABA胁迫 野生大豆 RAV亚家族 功能分析
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习近平关于提升党的战略思维能力相关论述研究 预览
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作者 温雅兴 于泉蛟 朱延 《世纪桥》 2019年第3期11-12,共2页
广大党员的战略思维能力是习近平系列重要讲话突出的内容之一,讲话中强调要加强广大党员要运用战略思维去分析和破解各方面的问题和挑战的能力。本文从世情、国情、党情新变化的背景;从全局、大局、整体的维度;从趋势、方向、长远的角度... 广大党员的战略思维能力是习近平系列重要讲话突出的内容之一,讲话中强调要加强广大党员要运用战略思维去分析和破解各方面的问题和挑战的能力。本文从世情、国情、党情新变化的背景;从全局、大局、整体的维度;从趋势、方向、长远的角度;从本质、规律以及政治的高度,分析习近平总书记所提出的战略思维能力,以使人们深刻理解其内涵并有效地运用到实践中。 展开更多
关键词 习近平 中国共产党 战略思维能力
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碱胁迫应答基因GsSnRK1.1与上游调控因子GsGRIK1互作功能分析 预览
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作者 朱延 杜建英 +6 位作者 陈超 于洋 孙晓丽 丁晓东 殷奎德 王子君 朱娉慧 《东北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1-11,共11页
研究针对野生大豆蛋白激酶GsGRIK1与GsSnRK1.1相互作用是否参与植物响应碱胁迫,采用生物信息学、分子生物学以及基因工程等技术手段开展系统研究。首先作碱胁迫应答基因GsSnRK1.1和GsGRIK1全长基因克隆功能验证,证明其有显著耐碱功能;... 研究针对野生大豆蛋白激酶GsGRIK1与GsSnRK1.1相互作用是否参与植物响应碱胁迫,采用生物信息学、分子生物学以及基因工程等技术手段开展系统研究。首先作碱胁迫应答基因GsSnRK1.1和GsGRIK1全长基因克隆功能验证,证明其有显著耐碱功能;构建酵母表达载体PYX212和PYX242,利用酵母四重突变株(sak1/tos3/elm1/snf1)作表型分析。结果表明,共转化GsSnRK1.1和GsGRIK1的转化子可在非葡萄糖碳源和碱胁迫处理的选择培养基上正常生长。由此证明野生大豆GsSnRK1.1受上游调控因子GsGRIK1激活调控,且发现其可能参与植物耐碱胁迫应答机制。通过Western blot体外生化分析,证明上游调控因子GsGRIK1通过钙离子依赖途径磷酸化激活GsSnRK1.1。利用组织染色法,对GsSnRK1.1和GsGRIK1作碱胁迫下表达模式分析,结果表明,GsSnRK1.1和GsGRIK1基因表达显著响应碱胁迫。通过碱胁迫处理过量表达GsSnRK1.1和GsGRIK1大豆毛状根,作功能表型鉴定,结果表明,共表达GsSnRK1.1和GsGRIK1的大豆毛状根耐碱能力最显著。研究首次阐明GsGRIK1通过钙离子依赖途径磷酸化调控GsSnRK1.1参与碱胁迫应答通路,为完善碱胁迫应答通路奠定重要基础。 展开更多
关键词 野生大豆 碱胁迫 GsSnRK1.1 GsGRIK1 蛋白互作
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转GsERF71基因苜蓿的培育及耐碱性 预览
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作者 王子君 陈冉冉 +8 位作者 朱娉慧 于洋 陈超 孙晓丽 段香波 杜建英 任皓 刘琪 朱延 《草业科学》 CSCD 2018年第11期2683-2693,共11页
基于东北农业大学农业生物功能基因重点实验室前期野生大豆(Glycine soja)碱胁迫转录组数据,从中获得碱胁迫应答基因GsERF71,选用USER载体构建GsERF71植物超量表达载体,利用农杆菌介导的子叶节侵染法转化紫花苜蓿(Medicago savita),最... 基于东北农业大学农业生物功能基因重点实验室前期野生大豆(Glycine soja)碱胁迫转录组数据,从中获得碱胁迫应答基因GsERF71,选用USER载体构建GsERF71植物超量表达载体,利用农杆菌介导的子叶节侵染法转化紫花苜蓿(Medicago savita),最终得到69株抗性植株;其中13株通过PCR检测为阳性植株。Southern blot检测获得2株阳性植株,RT-PCR检测发现,这2个株系均为阳性,说明GsERF71已成功整合至苜蓿基因组并能在转录水平上有表达。对非转基因和转基因株系对野生型和转基因株系进行扦插扩繁,分别用0、100、150 mmol·L-1 NaHCO 3的营养液处理转基因植株14 d,进行耐碱性形态指标及生理指标的分析,包括株高、根长和脯氨酸含量、相对质膜透性、丙二醛叶绿素含量、过氧化物酶活性的分析。结果表明,非转基因植株的相对质膜透性和丙二醛含量显著高于转基因苜蓿(P<0.05),而叶绿素含量、株高、根长、脯氨酸含量以及过氧化物酶活性显著低于转基因苜蓿(P<0.05)。因此,GsERF71基因的超量表达提高了苜蓿的耐碱能力。 展开更多
关键词 肇东苜蓿 GsERF71 遗传转化 PCR RT-PCR SOUTHERN BLOT 耐碱性
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利用CRISPR/Cas9双基因敲除系统初步解析大豆GmSnRK1.1和GmSnRK1.2对ABA及碱胁迫的响应 预览 被引量:2
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作者 李慧卿 陈超 +4 位作者 陈冉冉 宋雪薇 李佶娜 朱延 丁晓东 《遗传》 CSCD 北大核心 2018年第6期496-507,共12页
蔗糖非发酵相关激酶(sucrose non-fermenting related protein kinases,Sn RKs)是广泛存在于植物中的一类Ser/Thr蛋白激酶,在植物的生长、发育、代谢和抗逆等方面具有重要调节作用。大豆(Glycine max L.)基因组中含有4个Sn RK1同源... 蔗糖非发酵相关激酶(sucrose non-fermenting related protein kinases,Sn RKs)是广泛存在于植物中的一类Ser/Thr蛋白激酶,在植物的生长、发育、代谢和抗逆等方面具有重要调节作用。大豆(Glycine max L.)基因组中含有4个Sn RK1同源基因,其中GmSnRK1.1和GmSnRK1.2为两个主要表达基因,可能参与大豆多种抗逆途径。为解析大豆GmSnRK1.1和GmSnRK1.2对ABA及碱胁迫的响应,本研究构建了双靶点CRISPR载体定向敲除GmSnRK1.1和GmSnRK1.2基因,利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导大豆遗传转化,获得双基因敲除突变体毛状根,经测序鉴定双基因突变率为48.6%;同时,利用实验室前期构建的植物超量表达载体获得超量表达GmSnRK1基因大豆毛状根。经25μmol/L ABA处理15 d,对照组和超量表达毛状根的生长受到明显抑制,其根长与根鲜重均显著低于双基因敲除突变体毛状根;经50 mmol/L Na HCO3处理15 d,对照组和双基因敲除突变体毛状根的生长受到明显抑制,其根长与根鲜重均显著低于超量表达毛状根。本研究建立的CRISPR/Cas9系统能够有效地对大豆进行GmSnRK1.1和GmSnRK1.2双基因敲除,基因敲除突变降低了植物对ABA的敏感性及对碱胁迫的耐性,研究结果初步说明Sn RK1激酶在植物响应非生物胁迫中具有重要作用。 展开更多
关键词 大豆 CRISPR/Cas9 GmSnRK1.1 GmSnRK1.2 ABA信号 碱胁迫
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盐酸溴己新、复方异丙托溴铵及布地奈德混悬液三联治疗小儿毛细支气管炎的临床疗效 预览
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作者 朱延 《临床医学研究与实践》 2018年第29期64-65,共2页
目的 观察盐酸溴己新、复方异丙托溴铵及布地奈德混悬液三联治疗小儿毛细支气管炎的临床疗效。方法 将我院2016年10月至2017年12月收治的138例毛细支气管炎患儿随机分为对照组和观察组,每组69例。对照组患儿给予常规治疗,观察组患儿在... 目的 观察盐酸溴己新、复方异丙托溴铵及布地奈德混悬液三联治疗小儿毛细支气管炎的临床疗效。方法 将我院2016年10月至2017年12月收治的138例毛细支气管炎患儿随机分为对照组和观察组,每组69例。对照组患儿给予常规治疗,观察组患儿在此基础上给予盐酸溴己新、复方异丙托溴铵及布地奈德混悬液。治疗1周后,比较两组患儿的疗效及治疗前、后的肺功能指标。结果 治疗后,观察组患儿的治疗总有效率为94.20%,明显高于对照组的82.61%(P〈0.05)。治疗后,观察组患儿的PO2、FEV1和FVC水平均高于治疗前,PCO2水平均低于治疗前(P〈0.05),且观察组患儿上述指标均优于对照组(P〈0.05)。结论 盐酸溴己新、复方异丙托溴铵及布地奈德混悬液三联治疗毛细支气管炎患儿的临床疗效显著,可明显改善患儿肺功能,值得临床推广。 展开更多
关键词 毛细支气管炎 盐酸溴己新 复方异丙托溴铵 布地奈德混悬液
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碱胁迫应答基因GsARHP的克隆及转基因紫花苜蓿的耐碱性分析 预览 被引量:2
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作者 陈冉冉 朱娉慧 +6 位作者 贾博为 宋雪薇 王子君 李佶娜 李强 丁晓东 朱延 《草业学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期92-103,共12页
本研究基于实验室前期野生大豆碱胁迫转录组数据,筛选出一个碱胁迫下上调表达的假定蛋白基因,暂命名为GsARHP(alkali stress related hypothetical protein gene)。首先利用Real-time PCR方法验证了GsARHP基因受碱胁迫诱导表达。生物... 本研究基于实验室前期野生大豆碱胁迫转录组数据,筛选出一个碱胁迫下上调表达的假定蛋白基因,暂命名为GsARHP(alkali stress related hypothetical protein gene)。首先利用Real-time PCR方法验证了GsARHP基因受碱胁迫诱导表达。生物信息学分析表明,该基因编码一个含有130个氨基酸的亲水蛋白,含有信号肽但无跨膜结构域;构建了GsARHP植物超量表达载体,利用农杆菌介导的子叶节侵染法转化肇东紫花苜蓿,通过PCR,Southern Blot和RT-PCR方法检测获得了3个超量表达GsARHP基因的转基因株系,并对其耐碱性进行了分析。结果表明,在0,100和150mmol/L NaHCO3处理14d后,非转基因株系明显萎蔫、黄化甚至死亡,而转基因株系则长势良好;进一步分析其生理指标显示,相对质膜透性与丙二醛含量均显著低于非转基因株系(P〈0.01),而叶绿素含量与CAT活性显著高于非转基因株系(P〈0.01),说明GsARHP基因的超量表达可以增强紫花苜蓿的耐碱能力。 展开更多
关键词 野生大豆 GsARHP基因 碱胁迫 紫花苜蓿 遗传转化
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碱胁迫相关基因GsWRKY15的克隆及其转基因苜蓿的耐碱性分析 预览 被引量:3
8
作者 朱娉慧 陈冉冉 +6 位作者 于洋 宋雪薇 李慧卿 杜建英 李强 丁晓东 朱延 《作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1319-1327,共9页
WRKY蛋白属于锌指型转录调控因子,能够参与植物多种逆境响应。本研究利用前期野生大豆盐碱胁迫RNA-seq测序数据,从构建的碱胁迫基因调控网络中筛选并克隆到GsWRKY15基因。分析GsWRKY15在碱胁迫下野生大豆根中的表达模式,发现该基因受碱... WRKY蛋白属于锌指型转录调控因子,能够参与植物多种逆境响应。本研究利用前期野生大豆盐碱胁迫RNA-seq测序数据,从构建的碱胁迫基因调控网络中筛选并克隆到GsWRKY15基因。分析GsWRKY15在碱胁迫下野生大豆根中的表达模式,发现该基因受碱胁迫诱导显著上调表达,且在胁迫后1h表达量最高。分析GsWRKY15基因在野生大豆各组织中的表达特异性,发现该基因在各组织中均有表达,花中表达量最高。采用根癌农杆菌侵染苜蓿子叶节方法,将GsWRKY15转化肇东苜蓿,获得39株抗性植株。通过PCR、Southernblot和RT-PCR方法分析抗性植株,获得了超量表达GsWRKY15基因的转基因株系并对其进行了耐碱性分析。在150mmolL–1NaHCO3处理2周后转基因苜蓿生长状态良好,而非转基因苜蓿出现萎蔫、变黄,甚至死亡;非转基因苜蓿的相对质膜透性和丙二醛含量显著高于转基因苜蓿,而叶绿素含量显著低于转基因苜蓿;同时分析碱胁迫下转基因植株中胁迫相关基因的表达模式,发现H+-Ppase、NADP-ME、KIN1、RD29A基因的表达量高于非转基因苜蓿。结果表明GsWRKY15基因的超量表达能够显著增强苜蓿的耐碱能力。 展开更多
关键词 野生大豆 GsWRKY15 肇东苜蓿 农杆菌 耐碱性
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大豆MYB转录因子的全基因组鉴定及生物信息学分析 被引量:3
9
作者 成舒飞 端木慧子 +3 位作者 陈超 刘艾林 肖佳雷 朱延 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期52-57,共6页
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,近年的研究表明其广泛参与多种生物学过程。MYB转录因子在其N端含有其特有的DNA结合基序(MYB-binding domain),能够与DNA分子大沟结合而调控基因表达。本研究通过生物信息学手段,在全... MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,近年的研究表明其广泛参与多种生物学过程。MYB转录因子在其N端含有其特有的DNA结合基序(MYB-binding domain),能够与DNA分子大沟结合而调控基因表达。本研究通过生物信息学手段,在全基因组水平上筛选鉴定出了304个大豆MYB类转录因子,并对其进行了分类和保守结构域分析;通过与拟南芥的MYB基因进行系统发生分析,将304个大豆MYB转录因子分为了22个亚类;染色体定位分析表明大豆MYB转录因子在所有染色体上都有分布,部分染色体间的MYB蛋白序列高度相似,表明此类基因在进化上具有相同的来源;利用野生大豆盐、碱胁迫下转录组数据,分析MYB基因的表达模式,发现部分MYB转录因子能够响应盐、碱胁迫的诱导,且在盐、碱胁迫下具有不同的表达模式。 展开更多
关键词 大豆 MYB 转录因子 生物信息学
耐碱GsCHX19基因的克隆及对苜蓿的遗传转化 预览 被引量:1
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作者 程庚哲 杨浩 朱延 《影像技术》 CAS 2016年第3期37-39,共3页
基于实验室前期野生大豆G07256碱胁迫转录组数据,结合生物信息学方法筛选得到响应碱胁迫的cation/H+逆向转运蛋白基因Gs CHX19,克隆了Gs CHX19基因全长CDS编码序列并将其构建到p CAMBIA330035Su植物超量表达载体中。以肇东紫花苜蓿为... 基于实验室前期野生大豆G07256碱胁迫转录组数据,结合生物信息学方法筛选得到响应碱胁迫的cation/H+逆向转运蛋白基因Gs CHX19,克隆了Gs CHX19基因全长CDS编码序列并将其构建到p CAMBIA330035Su植物超量表达载体中。以肇东紫花苜蓿为受体材料,通过农杆菌介导法将重组的植物表达载体转化其子叶节,用含0.5mg/L草铵膦的筛选培养基进行筛选,获得20株抗性植株。采用PCR方法检测抗性植株中bar基因的表达,获得16株PCR阳性植株。对获得的PCR阳性植株进行RT-PCR及real-time PCR检测,鉴定共获得11株RT-PCR阳性植株,且证明Gs CHX19基因在各转基因植株中均有不同程度的表达。结果表明,Gs CHX19基因成功转化苜蓿,并且得到表达,该转基因植株将为耐盐碱转基因苜蓿新品种的培育提供重要的试验材料。 展开更多
关键词 Cation/H^+逆向转运蛋白 GsCHX19 野生大豆 苜蓿 遗传转化
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耐碱GsCHX19基因的克隆及对苜蓿的遗传转化
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作者 杨浩 朱延 《作物杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期37-44,F0003共9页
基于实验室前期野生大豆G07256碱胁迫转录组数据,结合生物信息学方法筛选得到响应碱胁迫的cation/H+逆向转运蛋白基因Gs CHX19,克隆了Gs CHX19基因全长CDS编码序列并将其构建到p CAMBIA330035Su植物超量表达载体中。以肇东紫花苜蓿为... 基于实验室前期野生大豆G07256碱胁迫转录组数据,结合生物信息学方法筛选得到响应碱胁迫的cation/H+逆向转运蛋白基因Gs CHX19,克隆了Gs CHX19基因全长CDS编码序列并将其构建到p CAMBIA330035Su植物超量表达载体中。以肇东紫花苜蓿为受体材料,通过农杆菌介导法将重组的植物表达载体转化其子叶节,用含0.5mg/L草铵膦的筛选培养基进行筛选,获得20株抗性植株。采用PCR方法检测抗性植株中bar基因的表达,获得16株PCR阳性植株。对获得的PCR阳性植株进行RT-PCR及real-time PCR检测,鉴定共获得11株RT-PCR阳性植株,且证明Gs CHX19基因在各转基因植株中均有不同程度的表达。结果表明,Gs CHX19基因成功转化苜蓿,并且得到表达,该转基因植株将为耐盐碱转基因苜蓿新品种的培育提供重要的试验材料。 展开更多
关键词 Cation/H^+逆向转运蛋白 GsCHX19 野生大豆 苜蓿 遗传转化
前路手术治疗无脊髓损伤的Allen-FergusonⅡ度及Ⅲ度下颈椎损伤 被引量:4
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作者 朱延 岳二松 孔权威 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1408-1411,共4页
目的 探讨前路手术治疗无脊髓损伤的Allen-FergusonⅡ、Ⅲ度下颈椎骨折脱位的临床疗效和安全性。方法 2013年6月-2015年6月,采用单纯经前路减压、复位及椎间植骨融合内固定术治疗25例无脊髓损伤的Allen-FergusonⅡ、Ⅲ度下颈椎骨折脱位... 目的 探讨前路手术治疗无脊髓损伤的Allen-FergusonⅡ、Ⅲ度下颈椎骨折脱位的临床疗效和安全性。方法 2013年6月-2015年6月,采用单纯经前路减压、复位及椎间植骨融合内固定术治疗25例无脊髓损伤的Allen-FergusonⅡ、Ⅲ度下颈椎骨折脱位患者。男17例,女8例;年龄31~57岁,平均41.2岁。致伤原因:高处坠落伤11例,摔伤5例,砸伤6例,交通事故伤3例。新鲜骨折24例,陈旧性骨折1例。神经功能Frankel分级:D级6例,E级19例。损伤节段:C4、5 5例,C5、6 14例,C6、7 6例。关节突交锁:单侧9例,双侧16例。记录手术时间、术中出血量及并发症发生情况,采用Odom标准评价临床疗效。X线片复查,观测Cobb角、D值(颈椎后凸或前凸程度)的变化及植骨融合情况。结果 患者均顺利完成手术;手术时间66~115 min,术中出血量80~220 m L。25例均获随访,随访时间12~36个月,平均19.3个月。术后1例发生一过性吞咽困难,2例发生供骨区疼痛;无其他并发症发生。术前神经功能Frankel D级者均于3个月内恢复至E级。X线片复查示植骨均融合;颈椎间高度无丢失,未发生内植物松动、断裂。术后3个月参照Odom标准评价临床疗效,获优18例,良6例,可1例,优良率96.0%。术后Cobb角和D值均较术前显著改善(P〈0.05);术后即刻、6周、3个月、6个月间比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论 单纯经前路手术治疗无脊髓损伤的Allen-FergusonⅡ、Ⅲ度下颈椎骨折脱位患者临床疗效好,安全性高,创伤小,术后康复快。 展开更多
关键词 颈椎 骨折脱位 关节突交锁 脊髓损伤 前路手术
不稳定性踝部骨折术后早期负重锻炼的作用分析 预览
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作者 朱延 《中国继续医学教育》 2016年第9期79-80,共2页
目的探讨不稳定性踝部骨折术后早期负重锻炼对功能恢复与骨折愈合的影响。方法选择60例接受手术治疗的不稳定性踝关节骨折患者,随机分为观察组与对照组,每组各30例,均行切开复位内固定手术,术后观察组早期行负重锻炼,对照组予以石膏固定... 目的探讨不稳定性踝部骨折术后早期负重锻炼对功能恢复与骨折愈合的影响。方法选择60例接受手术治疗的不稳定性踝关节骨折患者,随机分为观察组与对照组,每组各30例,均行切开复位内固定手术,术后观察组早期行负重锻炼,对照组予以石膏固定6周之后允许患者负重。比较两组患者骨折愈合和关节功能恢复的情况。结果术后8周,观察组踝关节周径差为(0.56±0.29)cm,低于对照组的(1.23±0.42)cm,差异具有统计学意义(t=7.190 0,P〈0.01)。术后8周观察组踝关节Kofoed评分为(88.3±7.5)分,高于对照组的(76.9±6.8)分,差异具有统计学意义(t=6.167 7,P〈0.01)。结论不稳定性踝部骨折术后早期负重锻炼能促进关节功能恢复,加快愈合。 展开更多
关键词 不稳定踝部骨折 切开复位 内固定 负重锻炼
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野生大豆碳酸盐胁迫应答基因GsMIPS2的克隆及功能分析 预览 被引量:1
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作者 陈晨 孙晓丽 +4 位作者 刘艾林 端木慧子 于洋 肖佳雷 朱延 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1343-1352,共10页
为挖掘野生大豆(Glycine soja L.G07256)耐碳酸盐关键功能基因,利用前期高通量转录组测序数据,从构建的碳酸盐胁迫基因表达谱中,选取了一个碳酸盐胁迫下显著上调表达的肌醇-1-磷酸合酶类基因。采用同源克隆的方法,获得该基因的全长cD... 为挖掘野生大豆(Glycine soja L.G07256)耐碳酸盐关键功能基因,利用前期高通量转录组测序数据,从构建的碳酸盐胁迫基因表达谱中,选取了一个碳酸盐胁迫下显著上调表达的肌醇-1-磷酸合酶类基因。采用同源克隆的方法,获得该基因的全长cDNA,命名为GsMIPS2。实时荧光定量PCR结果显示该基因受碳酸盐胁迫诱导表达,并且其表达量具有组织特异性。将GsMIPS2基因转化拟南芥,并结合拟南芥中T-DNA插入突变体atmips2来验证其耐碳酸盐功能。结果表明,碳酸盐胁迫条件下,GsMIPS2超量表达拟南芥种子萌发率显著高于野生型,而拟南芥突变体atmips2种子萌发率显著低于野生型。上述结果表明,GsMIPS2基因在植物应答碳酸盐胁迫过程中起重要作用。 展开更多
关键词 野生大豆 GsMIPS2基因 肌醇-1-磷酸合成酶 碳酸盐胁迫
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大豆CML家族基因的生物信息学分析 被引量:1
15
作者 陈超 端木慧子 +3 位作者 朱丹 刘艾林 肖佳雷 朱延 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期957-963,共7页
CMLs蛋白是一类具有Ca2+结合的EF-hand保守结构域蛋白,广泛参与钙依赖的信号传导途径,在植物生长发育及生物胁迫与非生物胁迫响应中起着重要的作用。通过NCBI和植物基因组注释数据库等筛选并获得了68个大豆GmCML蛋白;分析了所有蛋白的... CMLs蛋白是一类具有Ca2+结合的EF-hand保守结构域蛋白,广泛参与钙依赖的信号传导途径,在植物生长发育及生物胁迫与非生物胁迫响应中起着重要的作用。通过NCBI和植物基因组注释数据库等筛选并获得了68个大豆GmCML蛋白;分析了所有蛋白的基本特性;通过与拟南芥CMLs基因的进化树分析表明,GmCML家族基因属于8个亚类;对GmCML家族基因进行了染色体定位与重复基因进化关系分析,发现其具有较高的进化速率;序列比对发现GmCML类蛋白含有2~4个保守的EF-hand结构域;利用芯片数据对野生大豆在碱胁迫下的叶和根中的CMLs基因表达模式进行了分析,得到26个GsCML基因在碱胁迫下有显著的差异表达,且在根和叶中的差异表达模式不同,表明这些基因参与植物碱胁迫应答,且具组织表达特异性。 展开更多
关键词 大豆 CMLs EF-HAND 生物信息学 进化分析
野生大豆叶片蛋白质组双向电泳技术体系的优化研究 被引量:3
16
作者 张宁 孙晓丽 +3 位作者 端木慧子 于洋 纪巍 朱延 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期874-880,共7页
为给野生大豆蛋白质组学分析提供技术支撑,以耐盐碱野生大豆叶片为材料,对Tris-饱和酚法、rids-HCl法和TCA-丙酮法3种蛋白质提取方法进行了比较,并对蛋白上样量、等电聚焦参数及凝胶浓度进行了优化。结果表明:使用Tris-饱和酚法提... 为给野生大豆蛋白质组学分析提供技术支撑,以耐盐碱野生大豆叶片为材料,对Tris-饱和酚法、rids-HCl法和TCA-丙酮法3种蛋白质提取方法进行了比较,并对蛋白上样量、等电聚焦参数及凝胶浓度进行了优化。结果表明:使用Tris-饱和酚法提取蛋白质,上样量为2000μg,等电聚焦90000V·h,凝胶浓度为10%时,可获得背景清晰、蛋白点数较多、重复性较好的蛋白双向电泳图谱。 展开更多
关键词 野生大豆 叶片 蛋白质提取 双向电泳 蛋白组学
大豆GmUGD基因家族生物信息学分析 预览 被引量:2
17
作者 朱延 朱毅 +3 位作者 端木慧子 肖佳雷 于洋 刘艾林 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期23-29,共7页
尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UGD)是多糖合成中的一个关键酶,广泛参与植物生长发育与非生物胁迫响应过程。采用生物信息学方法,在全基因组水平预测出10个大豆Gm UGD基因;序列分析结果显示,Gm UGD基因均具有UDP-葡萄糖/GDP-甘露糖脱氢酶家... 尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UGD)是多糖合成中的一个关键酶,广泛参与植物生长发育与非生物胁迫响应过程。采用生物信息学方法,在全基因组水平预测出10个大豆Gm UGD基因;序列分析结果显示,Gm UGD基因均具有UDP-葡萄糖/GDP-甘露糖脱氢酶家族的3个典型结构域;基因复制分析表明,80%Gm UGD基因存在复制事件;系统发生分析结果显示,Gm UGD基因分为三类,分类结果与基因复制分析结果基本吻合;基于Uni Gene数据库与GEO数据库的表达模式分析显示,根中Gm UGD基因的ESTs最多,上胚轴中最少;另外,Gm UGD基因能够响应盐碱胁迫诱导,在大豆根和叶中表达模式不同。结果可为进一步研究大豆Gm UGD基因功能提供理论依据。 展开更多
关键词 GmUGD基因 大豆 生物信息学 序列分析 表达分析
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GsPPCK1和GsPPCK3基因转化苜蓿及其耐碱性分析 预览 被引量:2
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作者 王家佳 张利莉 +4 位作者 钱雪 才华 赵超越 朱延 《塔里木大学学报》 2014年第2期20-31,共12页
基于课题组构建的野大豆碱胁迫基因转录谱和调控网络,筛选出两个碱胁迫应答关键基因:丝苏氨酸磷酸激酶(GsPPCK1和GsPPCK3)。本研究构建了以35S为启动子,bar基因为筛选标记基因的植物超表达载体,以紫花苜蓿龙牧806子叶节为外植体,通... 基于课题组构建的野大豆碱胁迫基因转录谱和调控网络,筛选出两个碱胁迫应答关键基因:丝苏氨酸磷酸激酶(GsPPCK1和GsPPCK3)。本研究构建了以35S为启动子,bar基因为筛选标记基因的植物超表达载体,以紫花苜蓿龙牧806子叶节为外植体,通过农杆菌介导法进行了GsPPCK1和GsPPCK3的苜蓿遗传转化;通过固沙草筛选GsPPCK1获得抗性植株45株,GsPPCK3获得53株;对抗性植株进行PCR和Real-time PCR检测,最终确定基因超量表达各2个株系。为进一步研究该基因的耐碱性,用NaHCO3分别为0 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、250 mmol/L的4个浓度处理转基因苜蓿,9 d后不同NaHCO3胁迫下对转基因株系进行耐碱性相关的生理指标分析,包括质膜透性、叶绿素含量、丙二醛含量、脯氨酸含量、柠檬酸含量、SOD活性及PEPC活性,结果表明:GsPPCK1和GsPPCK3在苜蓿中的超量表达显著提高了苜蓿的耐碱性。 展开更多
关键词 苜蓿 GsPPCK基因 农杆菌介导 转基因株系 耐碱性
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转GsbZIP33基因苜蓿的耐盐性分析 预览 被引量:3
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作者 成舒飞 +3 位作者 王家佳 赵超越 才华 朱延 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2077-2081,共5页
本研究以前期获得的耐盐转基因苜蓿(Medicago sativa)的两个株系b32和b77及其受体对照野生型苜蓿品种为材料,经200mmol·L-1 NaCl处理15d后,系统地测定了与耐盐性相关的生理生化指标,包括叶片净光合速率(Pn),抗氧化酶(SOD,CAT,POD)... 本研究以前期获得的耐盐转基因苜蓿(Medicago sativa)的两个株系b32和b77及其受体对照野生型苜蓿品种为材料,经200mmol·L-1 NaCl处理15d后,系统地测定了与耐盐性相关的生理生化指标,包括叶片净光合速率(Pn),抗氧化酶(SOD,CAT,POD)活性、可溶性糖含量,Na+、K+含量等。结果表明,与野生型相比,转基因苜蓿新株系b32、b77的可溶性糖含量分别增加了48.8%和39.6%;SOD活性分别升高了71%和89%;CAT活性分别升高了21%和13%;POD活性分别升高了32.9%和34.1%,Na+含量分别降低了57%和44%,K+含量分别增长了21%和13%;两个转基因株系(b32、b77)的光合速率是对照的2.4倍和2.5倍,以上指标差异均极显著(P【0.01),表明转GsbZIP33的两个株系b32和b77提高了耐盐性。 展开更多
关键词 净光合速率 抗氧化酶 可溶性糖 离子含量 耐盐性
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转GsCBRLK/SCMRP双价基因苜蓿耐碱性及氨基酸含量分析 预览 被引量:2
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作者 赵阳 朱延 +4 位作者 柏锡 纪巍 吴婧 唐立郦 才华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期431-438,共8页
从野生大豆盐碱胁迫基因表达谱中筛选并克隆到GsCBRLK基因, 与人工合成的高甲硫氨酸含量SCMRP基因构建成双价植物表达载体, 将其转入苜蓿, 获得超量表达的转基因苜蓿, 并进行耐碱性分析。结果显示, 经过100、150 mmol L–1 NaHCO3处理1... 从野生大豆盐碱胁迫基因表达谱中筛选并克隆到GsCBRLK基因, 与人工合成的高甲硫氨酸含量SCMRP基因构建成双价植物表达载体, 将其转入苜蓿, 获得超量表达的转基因苜蓿, 并进行耐碱性分析。结果显示, 经过100、150 mmol L–1 NaHCO3处理14 d后, 转基因株系生长状态良好, 而非转基因对照株系萎蔫、失绿、甚至死亡;转基因株系的丙二醛含量和相对质膜透性显著低于非转基因株系(P〈0.05), 而SOD酶活性显著高于非转基因对照(P〈0.05), 说明超量表达GsCBRLK基因增强了苜蓿的耐碱能力;各转基因株系的甲硫氨酸含量均比对照植株高, 表明SCMRP基因的导入提高了苜蓿叶片甲硫氨酸的含量。 展开更多
关键词 CBRLK SCMRP 转基因苜蓿 氨基酸含量 耐碱性
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