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一例禽白血病的诊断
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作者 王美红 黄雯晶 +6 位作者 李文锋 傅禹铭 李晓文 郭锦玥 张雪莲 黄淑坚 李智丽 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期64-66,165-166共4页
为了对广东某麻黄种鸡场疑似禽白血病的患鸡进行确诊,试验采用了剖检、反转录PCR(RTPCR)、病理组织切片观察等方法进行诊断。结果表明:患鸡剖检可见皮下、心脏、肾脏、肺脏、胰腺均出现不同程度的灰白色肿瘤结节,肝脏、脾脏、肾脏严重肿... 为了对广东某麻黄种鸡场疑似禽白血病的患鸡进行确诊,试验采用了剖检、反转录PCR(RTPCR)、病理组织切片观察等方法进行诊断。结果表明:患鸡剖检可见皮下、心脏、肾脏、肺脏、胰腺均出现不同程度的灰白色肿瘤结节,肝脏、脾脏、肾脏严重肿大,质地变硬,颜色变淡;随机收集该场5只疑似病鸡的病料进行PCR检测,4只病鸡的病料可扩增出目的条带;采集病鸡的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、气管、肾脏、脑、肠进行病理组织切片观察,内脏器官和软骨组织的骨化部分中含有数量不等的髓细胞样瘤细胞,呈单个散在或局灶样分布,大脑有单个散在的髓细胞样瘤细胞出现,小脑组织轻度水肿。综合以上结果确诊该鸡场病鸡所患疾病为禽白血病。 展开更多
关键词 麻黄种鸡 禽白血病 临床病变 RT-PCR 病理组织切片 鉴别诊断
基于神经网络的铝合金电器罐体铸造工艺优化
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作者 李智丽 陈保家 《热加工工艺》 北大核心 2019年第13期70-73,共4页
以浇注温度、模具温度、充型压力为输入参数,以抗拉强度、伸长率、硬度为输出参数,构建了3×12×3三层拓扑结构的铝合金电器罐体铸造工艺优化的神经网络模型,并进行了试验验证和生产线应用研究。结果表明,神经网络模型具有较好... 以浇注温度、模具温度、充型压力为输入参数,以抗拉强度、伸长率、硬度为输出参数,构建了3×12×3三层拓扑结构的铝合金电器罐体铸造工艺优化的神经网络模型,并进行了试验验证和生产线应用研究。结果表明,神经网络模型具有较好的预测精度和工艺优化能力,抗拉强度预测的相对误差是4.1%~5.7%,预测平均相对误差为4.9%;伸长率预测的相对误差是3.1%~3.7%,预测平均相对误差为3.4%;硬度预测的相对误差是4.5%~5.4%,预测平均相对误差为4.9%。与神经网络优化前相比,经神经网络优化后的铝合金电器罐体的强度得到了提高。 展开更多
关键词 神经网络 铝合金 电器罐体 铸造 力学性能
两相区淬火对14MnCrMoNiNb钢组织和性能的影响 预览
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作者 贺景春 姜涛 +3 位作者 李智丽 余泽金 姜海龙 米永峰 《包钢科技》 2019年第4期1-3,共3页
试验采用14MnCrMoNiNb钢,进行了淬火+两相区淬火+回火工艺(QQ’T)研究,试验结果表明,QQ’T工艺可以获得回火索氏体+少量铁素体的复相组织,在不损失材料强度和韧性的前提下,可以使材料的屈强比降低到0. 80左右,从而大幅提高材料的使用安... 试验采用14MnCrMoNiNb钢,进行了淬火+两相区淬火+回火工艺(QQ’T)研究,试验结果表明,QQ’T工艺可以获得回火索氏体+少量铁素体的复相组织,在不损失材料强度和韧性的前提下,可以使材料的屈强比降低到0. 80左右,从而大幅提高材料的使用安全性能。 展开更多
关键词 14MnCrMoNiNb 淬火 两相区淬火 回火 屈强比
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广州从化良口镇5个猪场蚊媒介调查 预览
4
作者 李飞龙 黄淑坚 +4 位作者 王洁希 刘彬 陈远深 李智丽 赵云翔 《国外畜牧学:猪与禽》 2019年第4期68-72,共5页
为了解广州从化良口镇5个猪场蚊媒介种类的构成、密度分布等情况,为对生猪传染病的监测和有效防控蚊虫工作提供科学依据。笔者采用紫外灯诱法、网捕法等方法分别捕获275只蚊虫。通过分类鉴定,它们隶属2亚科4属15种,分别为致倦库蚊(占19.... 为了解广州从化良口镇5个猪场蚊媒介种类的构成、密度分布等情况,为对生猪传染病的监测和有效防控蚊虫工作提供科学依据。笔者采用紫外灯诱法、网捕法等方法分别捕获275只蚊虫。通过分类鉴定,它们隶属2亚科4属15种,分别为致倦库蚊(占19.6%)、二带喙库蚊(占14.39%)、三带喙库蚊(占5.04%)、薛氏库蚊(占5.40%)、褐尾库蚊(占13.31%)、小拟态库蚊(占0.72%)、拟态库蚊(占8.27%)、环带库蚊(占3.60%)、五指库蚊(占7.55%)、哈氏阿蚊(占5.40%)、骚扰阿蚊(占8.27%)、孟加拉按蚊(占4.32%)、迷走按蚊(占3.60%)、白蚊伊蚊(占0.72%)和刺管伊蚊(占0.36%),其中致倦库蚊为广州良口镇一带优势蚊虫。这一鉴定结果为防控蚊虫工作提供了极高的参考价值。 展开更多
关键词 猪场 蚊媒介 种类 密度
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胎次、季节和产仔数对大白母猪分娩产程的影响 预览
5
作者 赵云翔 罗元宇 +3 位作者 杨广明 朱晓萍 李智丽 李镇养 《家畜生态学报》 北大核心 2019年第3期45-48,共4页
收集广西某规模化猪场2248胎大白母猪分娩产程数据,探讨胎次、季节、产仔总数和死胎等因素对母猪产程的影响。结果表明:(1)初产母猪和≥7胎次母猪产程时间较长,与2~6胎母猪产程时间差异显著;(2)母猪产程在夏季比冬、春两季都长;夏季分... 收集广西某规模化猪场2248胎大白母猪分娩产程数据,探讨胎次、季节、产仔总数和死胎等因素对母猪产程的影响。结果表明:(1)初产母猪和≥7胎次母猪产程时间较长,与2~6胎母猪产程时间差异显著;(2)母猪产程在夏季比冬、春两季都长;夏季分娩母猪产程与冬、春两季都存在显著性差异(P<0.05),冬季与春季分娩母猪产程差异不显著(P>0.05);(3)产仔总数、死胎数均与母猪产程呈正相关关系(P<0.01),产仔数为16~24头的母猪产程与产仔数分别为2~9头、10~12头、13~15头的母猪产程均差异显著(P<0.05);当母猪产程>360min时,窝产死胎数与产程分别为0~120min、121~240min、241~360min母猪的窝产死胎数均存在显著性差异(P<0.05);(4)大部分母猪会选择在安静且温度适宜的环境下分娩。试验结果提示,母猪产程受胎次、温度、产仔总数和死胎数的影响,优化猪场环境管理可以缩短母猪产程,提高母猪分娩福利。 展开更多
关键词 大白母猪 产程 胎次 季节
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探讨思维方式对培养高素质研究生人才的重要性——以发散思维和收敛思维为例 预览
6
作者 娄华 李智丽 廖洁丹 《教育教学论坛》 2019年第14期234-236,共3页
高等院校作为培养高素质的专门人才的基地,怎样才能在有限的时间内,实现对研究生的全方位高素质培养?笔者结合动物医学专业的特点,结合必要的调查和分析、并进行了探索和尝试,认为“教育的根本应该是培养受教育者拥有自主提高、创新和... 高等院校作为培养高素质的专门人才的基地,怎样才能在有限的时间内,实现对研究生的全方位高素质培养?笔者结合动物医学专业的特点,结合必要的调查和分析、并进行了探索和尝试,认为“教育的根本应该是培养受教育者拥有自主提高、创新和超越的意识”。同时认为,不同思维的活动方式又直接或间接地影响到这种意识的培养和发挥,最终影响到学生综合素质的提高。 展开更多
关键词 思维方式 研究生 人才培养
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塑料垃圾加工再利用的机械设备设计与开发初探 预览
7
作者 李智丽 《科技创新与应用》 2019年第30期87-88,共2页
结合目前塑料垃圾加工再利用的实际需求,借助于一体化设计的方式,省去塑料加工再利用的清洗环节以及破碎环节,以提升塑料垃圾加工再利用效率。文章全面阐述了塑料垃圾加工再利用机械设备的结构设计,详细分析了温度控制系统设计以及热风... 结合目前塑料垃圾加工再利用的实际需求,借助于一体化设计的方式,省去塑料加工再利用的清洗环节以及破碎环节,以提升塑料垃圾加工再利用效率。文章全面阐述了塑料垃圾加工再利用机械设备的结构设计,详细分析了温度控制系统设计以及热风循环系统设计,并进行了样机检测工作,针对检测中出现的问题及时加以改进与优化,为塑料垃圾加工再利用机械设备最终实现产业化打下良好的基础。 展开更多
关键词 塑料垃圾 加工再利用 机械设备 设计
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新型鸭呼肠孤病毒QY株σB蛋白基因特征、二级结构预测及其细胞抗原表位分析 预览
8
作者 吴阳开 范文胜 +4 位作者 张雪莲 李智丽 郭锦玥 李文锋 黄淑坚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第10期2851-2859,共9页
本研究旨在对新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)QY株σB蛋白的遗传变异规律和结构及功能进行分析。从GenBank数据库中获取QY株和25株参考株的σB蛋白编码序列,通过Mega 6.0软件进行序列比对分析和系统进化树构建;使用Datamonkey软件进行选择压力分... 本研究旨在对新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)QY株σB蛋白的遗传变异规律和结构及功能进行分析。从GenBank数据库中获取QY株和25株参考株的σB蛋白编码序列,通过Mega 6.0软件进行序列比对分析和系统进化树构建;使用Datamonkey软件进行选择压力分析;运用生物信息学软件预测QY株σB蛋白二级结构功能及B细胞和T细胞抗原表位。相似性分析结果显示,NDRV QY株与国内其他地区分离的鸭呼肠孤病毒(DRV)氨基酸相似性达到94.9%~98.9%,与禽呼肠孤病毒(ARV)及番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的相似性仅为66.5%~68.4%和67.6%~68.4%;选择压力分析显示,σB蛋白承受净化选择压力,但存在一个正向选择位点;σB蛋白属于亲水蛋白,不具有信号肽和跨膜区,含有潜在的O-糖基化位点;结构预测分析显示,σB蛋白具有α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规则卷曲等丰富的二级结构;表位分析显示,σB蛋白含有潜在的B细胞和T细胞抗原表位。本研究成功进行了QY株σB蛋白的基因特征和结构功能预测及其细胞表位分析,为深入了解该蛋白的免疫学特性及研发NDRV新型疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒(NDRV) σB蛋白 基因特征 二级结构 抗原表位
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我国重型卡车悬架应用现状及展望 预览
9
作者 董蓬 严文超 +2 位作者 李智丽 汪静 黄镇 《南方农机》 2019年第7期71-71,76共2页
本文介绍了几种常见重型卡车悬架,对国内外重型卡车悬架应用现状进行了分析,并对我国重型卡车悬架发展及应用前景进行了探讨。
关键词 重型卡车 悬架 应用 现状 展望
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对动物医学专业本科毕业实习工作改革的探索 预览
10
作者 李智丽 娄华 +1 位作者 廖洁丹 叶亚琼 《教育教学论坛》 2019年第25期251-253,共3页
面对目前本科生毕业实习环节中存在的种种问题,经过调查、分析、探索和尝试,大胆地提出调整毕业实习的时间,在学生自愿的基础上,将传统的在第八学期进行的毕业实习调整到第六学期结束后的暑假中。尝试的结果既基本解决和避免了目前存在... 面对目前本科生毕业实习环节中存在的种种问题,经过调查、分析、探索和尝试,大胆地提出调整毕业实习的时间,在学生自愿的基础上,将传统的在第八学期进行的毕业实习调整到第六学期结束后的暑假中。尝试的结果既基本解决和避免了目前存在的种种矛盾,又达到了毕业实习的真正目的,获得了比较理想的效果。 展开更多
关键词 动物医学专业 毕业实习 改革
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新致病型番鸭呼肠孤病毒对雏番鸭致病性的研究
11
作者 梅敏敏 叶颖 +7 位作者 黄翠英 黄雯晶 李晓文 李文锋 郭锦玥 张雪莲 李智丽 黄淑坚 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第6期95-97,103,172共5页
为了研究新致病型番鸭呼肠孤病毒(N-MDRV)对雏番鸭的致病性,试验利用N-MDRV SH12和DH13株分别感染1日龄雏番鸭,并设对照组(肌肉注射生理盐水),第1,3,7,11,14天后测定血清中白细胞介素(IL)-4、IL-10、肿瘤坏死因子(TGF)-β、干扰素(IFN)... 为了研究新致病型番鸭呼肠孤病毒(N-MDRV)对雏番鸭的致病性,试验利用N-MDRV SH12和DH13株分别感染1日龄雏番鸭,并设对照组(肌肉注射生理盐水),第1,3,7,11,14天后测定血清中白细胞介素(IL)-4、IL-10、肿瘤坏死因子(TGF)-β、干扰素(IFN)-γ的含量及免疫器官指数,并观察试验组及对照组鸭群临床症状、剖检病变及病理组织学变化。结果表明:感染后第7天部分试验鸭明显消瘦,剖检可见肝脏坏死、出血,脾脏肿大、坏死,法氏囊萎缩(SH12组)或坏死出血(DH13组)。肝脏、脾脏、法氏囊(DH13组)正常结构被破坏,坏死灶内有大量红细胞和单核细胞浸润,感染后期脾脏可见肉芽肿。免疫器官指数与对照组比较均无显著差异(P>0.05),但感染后第7天试验鸭血清中IL-4、IL-10,TGF-β、IFN-γ含量均高于对照组,且DH13组IL-10、IFN-γ含量显著高于对照组(P<0.05);感染后期部分试验鸭的IL-4、IL-10、TGF-β、IFN-γ含量均有所恢复,但其整体水平仍高于对照组。说明N-MDRV感染可导致雏番鸭免疫器官的淋巴细胞含量明显减少,血清中IL-4、IL-10、TGF-β、IFN-γ含量增多与N-MDRV株致病性和免疫抑制相关。 展开更多
关键词 新致病型番鸭呼肠孤病毒 雏番鸭 细胞因子 病理组织学 免疫器官指数
由智能制造的内涵分析工业机器人技术专业的课程设置
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作者 吕雪松 李智丽 +1 位作者 何唯 穆家祥 《湖北三峡职业技术学院学报》 2019年第1期34-36,共3页
随着物联网、大数据等新技术的发展,智能制造的内涵在不断地演进和完善,高职工业机器人技术专业应紧跟时代发展,对课程设置进行适时调整,反映企业现状,满足企业需求。本文分析了当前智能制造的内涵、关键技术,围绕这些关键技术对工业机... 随着物联网、大数据等新技术的发展,智能制造的内涵在不断地演进和完善,高职工业机器人技术专业应紧跟时代发展,对课程设置进行适时调整,反映企业现状,满足企业需求。本文分析了当前智能制造的内涵、关键技术,围绕这些关键技术对工业机器人技术专业的课程设置进行了研究,并列举了8门核心课程。 展开更多
关键词 智能制造 高职教育 工业机器人 课程设置
新型鸭呼肠孤病毒可视化检测方法的建立与应用
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作者 蔡跃佳 梁国智 +5 位作者 梅敏敏 黄雯晶 李晓文 李文锋 黄淑坚 李智丽 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期71-74,168-169共5页
为了快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV),试验针对NDRV保守序列设计特异性引物,将RT-LAMP技术与荧光染料钙黄绿素结合,建立NDRV钙黄绿素可视化RT-LAMP快速检测方法,并对该方法的反应温度、时间及体系进行优化,检测该方法的特异性和敏感性,... 为了快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV),试验针对NDRV保守序列设计特异性引物,将RT-LAMP技术与荧光染料钙黄绿素结合,建立NDRV钙黄绿素可视化RT-LAMP快速检测方法,并对该方法的反应温度、时间及体系进行优化,检测该方法的特异性和敏感性,同时采集12份临床疑似NDRV感染的病料分别用钙黄绿素可视化RT-LAMP方法和常规RT-PCR方法进行检测,比较两者的阳性检出率。结果表明:成功构建NDRV钙黄绿素可视化RT-LAMP快速检测方法;优化后的反应温度为66℃,反应时间为50min,反应体系中Mg^2+浓度为3.0mmol/L,甜菜碱浓度为0.5mmol/L,dNTPs浓度为0.3mmol/L,BstDNA聚合酶的浓度为0.32U/μL,AMV反转录酶的浓度为0.14U/μL,内外引物浓度比为10∶1,环外引物浓度比为4∶1。该方法可特异性检测出NDRV;对NDRV的最低检测量约为200fg;用该方法对临床疑似NDRV感染的病料进行检测,阳性率为91.67%,而常规RT-PCR方法阳性率为83.33%,并且钙黄绿素可视化RT-LAMP方法能通过颜色变化观察反应结果。说明试验建立的RT-LAMP检测方法特异性好,敏感性强,读取结果更方便直观。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 钙黄绿素可视化技术 环介导等温扩增技术 敏感性 特异性
论广西“壮族三月三”文化认同与民族节庆旅游开发 预览
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作者 李智丽 《歌海》 2019年第2期107-110,共4页
独具特色的地方文化是人们识别自身身份、实现地方认同的重要标识。展示有地方特有传统文化的民族节庆活动是民族地区增强群体凝聚力和塑造地方文化身份的重要策略。现就广西“壮族三月三”文化旅游开发现状和存在瓶颈问题,尝试提出构... 独具特色的地方文化是人们识别自身身份、实现地方认同的重要标识。展示有地方特有传统文化的民族节庆活动是民族地区增强群体凝聚力和塑造地方文化身份的重要策略。现就广西“壮族三月三”文化旅游开发现状和存在瓶颈问题,尝试提出构建广西“壮族三月三”独特文化认同的策略选择。 展开更多
关键词 壮族三月三 文化认同 广西 旅游
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相变温度对U76CrRE钢轨组织和性能的影响 预览
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作者 薛虎东 李智丽 +1 位作者 王嘉伟 周乐育 《包钢科技》 2018年第1期35-37,共3页
利用MMS-200热模拟试验机,对U76CrRE钢轨进行热处理模拟。通过对热模拟试样进行组织观察和硬度检测分析,得出珠光体转变温度对其组织和硬度的影响规律。结果表明,转变温度越低,U76CrRE钢轨珠光体组织片层间距越细,硬度逐渐增加。在... 利用MMS-200热模拟试验机,对U76CrRE钢轨进行热处理模拟。通过对热模拟试样进行组织观察和硬度检测分析,得出珠光体转变温度对其组织和硬度的影响规律。结果表明,转变温度越低,U76CrRE钢轨珠光体组织片层间距越细,硬度逐渐增加。在560℃时,显微组织中存在少量马氏体组织。 展开更多
关键词 U76CrRE钢轨 热模拟 珠光体转变温度
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高效液相色谱荧光检测法测定牛奶中4种氟喹诺酮类药物残留 预览 被引量:2
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作者 廖洁丹 李智丽 +2 位作者 张济培 陈建红 杨鸿 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第3期104-107,111共5页
为了建立一种同时测定牛奶中4种氟喹诺酮类药物(恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、二氟沙星)多残留高效液相色谱检测方法,将牛奶中的残留药物用磷酸-甲醇溶液重复提取2次,正己烷除去脂肪净化后浓缩,流动相溶解后用高效液相色谱-荧光检... 为了建立一种同时测定牛奶中4种氟喹诺酮类药物(恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、二氟沙星)多残留高效液相色谱检测方法,将牛奶中的残留药物用磷酸-甲醇溶液重复提取2次,正己烷除去脂肪净化后浓缩,流动相溶解后用高效液相色谱-荧光检测器测定。结果表明,4种氟喹诺酮类药物在0.01~1.00μg/mL浓度范围内具有良好的线性关系(R=0.999 9),在0.01,0.05,0.10,0.50μg/mL和1.00μg/mL 5个浓度添加水平上,平均回收率为77%~93%,样品的批内和批间变异系数均值分别为5.29%和7.83%,定量限均为10 ng/mL。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星检测限均为5 ng/mL,二氟沙星检测限为8 ng/mL。本研究建立的检测方法简单、快速、灵敏度和回收率高,适用于牛奶中4种氟喹诺酮类药物残留检测。 展开更多
关键词 高效液相色谱 牛奶 氟喹诺酮类药物 残留
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不同品系杜洛克终端父本三元杂交商品猪生产指标的比较 被引量:2
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作者 赵云翔 刘小红 +3 位作者 苏朝全 李智丽 江威 江科 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第19期89-91,共3页
为了比较不同品系杜洛克公猪三元杂交商品猪的哺乳期生长性能、育肥性能、胴体性状和肉质性状等的差异,试验选择丹系杜洛克、美系杜洛克同美系二元杂交母猪配种生产两种(丹系和美系)三元杂交商品猪,在相同批次分娩且在相同饲喂和饲养... 为了比较不同品系杜洛克公猪三元杂交商品猪的哺乳期生长性能、育肥性能、胴体性状和肉质性状等的差异,试验选择丹系杜洛克、美系杜洛克同美系二元杂交母猪配种生产两种(丹系和美系)三元杂交商品猪,在相同批次分娩且在相同饲喂和饲养管理条件下测定了后代的生长性能、育肥性能、胴体性状和肉质性状。结果表明:哺乳期丹系和美系三元杂交仔猪日增重分别为266,233 g,二者间差异极显著(P〈0.01),丹系三元杂交商品猪的校正100 kg日龄和校正100 kg背膘厚极显著低于美系三元杂交商品猪(P〈0.001),校正100 kg眼肌面积和全程日增重极显著高于美系杜洛克三元杂交商品猪(P〈0.001);两品系间肉质指标差异不显著(P〉0.05)。说明丹系杜洛克公猪配种后代哺乳期间生长性能、育肥性能、屠宰率明显优于美系杜洛克公猪配种后代。 展开更多
关键词 丹系杜洛克 美系杜洛克 公猪 三元杂交商品猪 生长性能 胴体性状 肉质性状
基于工学结合的模具制造专业建设探索与研究 预览 被引量:1
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作者 李智丽 《智库时代》 2018年第27期187-188,共2页
在进行现阶段地方高职院校的模具制造专业建设过程中,要求其能够适应区域经济发展的培养目标,在此基础上来进行专业课程体系的合理构建,借此来获得良好的模具制造专业建设效果.本文主要就基于工学结合的模具制造专业建设工作进行了深入... 在进行现阶段地方高职院校的模具制造专业建设过程中,要求其能够适应区域经济发展的培养目标,在此基础上来进行专业课程体系的合理构建,借此来获得良好的模具制造专业建设效果.本文主要就基于工学结合的模具制造专业建设工作进行了深入的探究. 展开更多
关键词 工学结合 模具制造 专业建设
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新型鸭呼肠孤病毒σB蛋白基因密码子的优化及原核表达 预览 被引量:1
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作者 李文锋 梅敏敏 +5 位作者 黄兴国 黄雯晶 李晓文 Saeed El-Ashram 黄淑坚 李智丽 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第10期2700-2706,共7页
试验旨在优化新型鸭呼肠孤病毒(new-type duck reovirus,NDRV)XX株σB蛋白的原核表达系统,并评价sσB蛋白的免疫原性。根据已测得的NDRV-XX的σB蛋白基因序列,在不改变氨基酸序列的前提下,按照大肠杆菌密码子偏好性对σB蛋白全基因进行... 试验旨在优化新型鸭呼肠孤病毒(new-type duck reovirus,NDRV)XX株σB蛋白的原核表达系统,并评价sσB蛋白的免疫原性。根据已测得的NDRV-XX的σB蛋白基因序列,在不改变氨基酸序列的前提下,按照大肠杆菌密码子偏好性对σB蛋白全基因进行优化、合成并连接至pET-32a(+)质粒中,构建原核表达重组质粒pET-32a(+)-sσB,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达并优化表达条件。SDS-PAGE结果显示,最佳诱导表达时间、温度及IPTG浓度分别为3 h、32℃和0.25 mmol/L;可溶性分析结果表明,重组蛋白主要以包涵体形式存在于菌体中。表达菌经超声破碎、变性、复性和Ni 2+柱亲和层析后,得到纯度高于90%的sσB可溶性蛋白,sσB重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)菌株上的表达量较σB蛋白提升了14.6%,前者占细菌总蛋白量的32.3%。Western blotting结果显示,sσB重组蛋白具备NDRV抗原免疫反应原性。本试验成功构建并优化了NDRV-XX株σB蛋白的原核表达系统,提高了σB蛋白的表达量,并获得具有良好NDRV抗原免疫反应原性的σB重组蛋白,为后续NDRVσB蛋白功能及其应用的深入研究、基因工程疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒(NDRV) σB蛋白 密码子优化 原核表达 纯化
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糖原合酶激酶-3介导β-catenin抑制猪流行性腹泻病毒的增殖 预览
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作者 左叶雯 孔宁 +11 位作者 李智丽 童武 焦亚娟 王桦 郑浩 高飞 孙大格 于海 李丽薇 虞凌雪 童光志 单同领 《中国动物传染病学报》 北大核心 2018年第5期16-22,共7页
糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,能够促进细胞内多种蛋白质的磷酸化,从而参与调控细胞的多种抗病毒功能。其中β-catenin是GSK-3信号通路下游的一个重要转录调节因子,能够被GSK-3磷酸... 糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,能够促进细胞内多种蛋白质的磷酸化,从而参与调控细胞的多种抗病毒功能。其中β-catenin是GSK-3信号通路下游的一个重要转录调节因子,能够被GSK-3磷酸化,磷酸化的β-catenin能够被细胞内泛素化蛋白酶体降解途径降解。为探究GSK-3/β-catenin在猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhoea virus,PEDV)复制过程中所发挥的作用,本研究通过在Marc-145细胞上分别抑制GSK-3的活性和Wnt/β-catenin通路后感染PEDV,检测结果显示,抑制GSK-3的活性后,β-catenin含量增加,并且能够抑制PEDV的增殖;抑制Wnt/β-catenin通路后,β-catenin含量降低,促进PEDV在Marc-145细胞上的增殖。结果表明,PEDV感染Marc-145细胞后,宿主细胞能够下调GSK-3的活性,并进一步上调β-catenin的含量,从而抑制病毒在细胞内的增殖。本研究从分子层面上解释了GSK-3介导β-catenin在病毒复制过程中的作用,为PED的防控与治疗提供了一定的指导意义。 展开更多
关键词 糖原合成酶激酶-3 Β-CATENIN 猪流行性腹泻病毒
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