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湖南醴陵农村儿童非故意伤害的流行特征 被引量:2
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作者 邓芳明 龚学民 +1 位作者 胡平成 于嘉 《实用预防医学》 CAS 2015年第11期1336-1338,共3页
目的调查湖南醴陵农村儿童非故意伤害的流行特征,为农村儿童非故意伤害的预防和干预措施的制定提供依据。方法采取随机整群抽样的方法,于2013年10月在湖南省醴陵市3个乡镇抽取4所中学和2所小学各年级全体学生作为调查对象,采用自制... 目的调查湖南醴陵农村儿童非故意伤害的流行特征,为农村儿童非故意伤害的预防和干预措施的制定提供依据。方法采取随机整群抽样的方法,于2013年10月在湖南省醴陵市3个乡镇抽取4所中学和2所小学各年级全体学生作为调查对象,采用自制的调查表调查儿童一般情况、家庭情况及非故意伤害发生情况。结果发放3550份问卷,收回有效问卷3257份,有效应答率为91.7%。年龄范围为5~16岁,平均(11.4±2.3)岁。其中男童1575人(48.4%),女童1682人(51.6%)。非故意伤害发生率为10.9%(356/3257)。男童非故意伤害发生率显著高于女童(P=0.003)。跌伤(45.5%)、交通伤(14.3%)为常见的伤害类型。伤害发生于四肢的比例最高(70.2%)。伤害的发生常见于道路(34.3%)、家中(32.3%)和学校(22.8%)。伤害程度以轻度为主(42.7%),其次为中度(29.5%)、极轻度(19.4%)。79.8%的儿童伤害后痊愈,12.6%的儿童损伤处常有不适感,7.3%的儿童出现活动受限。结论湖南醴陵农村儿童非故意伤害发生率为10.9%,居全国各地区中等偏低水平。男童较女童更易发生伤害。跌伤是最常见的伤害类型。伤害常发生于道路、家中和学校。伤害程度以轻度为主,部分儿童损伤处常有不适感或活动受限。 展开更多
关键词 非故意伤害 流行特征 问卷调查 农村地区 儿童
人牙髓干细胞的体外培养及神经样诱导分化 预览 被引量:4
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作者 方成志 于嘉 +1 位作者 姚跃 何学华 《中国组织工程研究》 CSCD 2014年第23期3723-3726,共4页
背景:牙髓组织来源干细胞的发现及概念的确立有助于从细胞水平上认识牙齿发育和再生修复机制。目的:了解人牙髓干细胞向神经元样细胞诱导分化能力和诱导分化条件。方法:取健康青年人的第三磨牙的牙髓组织后,制成单细胞悬液,加入含有... 背景:牙髓组织来源干细胞的发现及概念的确立有助于从细胞水平上认识牙齿发育和再生修复机制。目的:了解人牙髓干细胞向神经元样细胞诱导分化能力和诱导分化条件。方法:取健康青年人的第三磨牙的牙髓组织后,制成单细胞悬液,加入含有体积分数为15%胎牛血清α-MEM培养基在6孔板培养,传代培养后加入丁羟基茴香醚、forskolin、β-巯基乙醇、碱性成纤维细胞生长因子诱导剂进行培养。结果与结论:免疫荧光和反转录-聚合酶链反应检测显示,诱导2周后人牙髓细胞除了stro-1,Col-Ⅰ,牙本质涎蛋白表达阳性外,还有巢蛋白,神经元特异性烯醇化酶的表达也是阳性,而牙龈纤维细胞表达均为阴性。说明人牙髓组织中存在成体干细胞,在一定的诱导培养条件下,牙髓干细胞有向神经元样细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 干细胞 培养 干细胞培养与分化 人牙髓细胞 免疫表型 多向分化
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湖南醴陵农村儿童意外伤害的危险因素调查 被引量:9
3
作者 邓芳明 龚学民 +2 位作者 崔虹艳 于嘉 胡平成 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期524-528,共5页
目的 调查湖南醴陵农村儿童意外伤害发生的危险因素,为农村儿童意外伤害的预防和干预措施的制定提供依据。方法 采取分层抽样和整群抽样的方法,于2013年10月在湖南醴陵市东部和西部农村地区抽取4所中学和2所小学各年级全体学生3 257... 目的 调查湖南醴陵农村儿童意外伤害发生的危险因素,为农村儿童意外伤害的预防和干预措施的制定提供依据。方法 采取分层抽样和整群抽样的方法,于2013年10月在湖南醴陵市东部和西部农村地区抽取4所中学和2所小学各年级全体学生3 257人(年龄5~16岁)作为调查对象,采用自制的问卷调查表调查儿童一般情况、家庭情况、居住地周围环境及意外伤害发生情况。采用非条件多因素logistic 回归分析儿童意外伤害发生的危险因素。结果 3 257名学生中,过去1年中发生意外伤害356人(10.93%)。单因素分析发现,儿童性别、是否留守、网吧上网频率、监护人是否父母亲、监护人年龄、父母相处和谐程度、父亲是否外出打工、母亲是否外出打工、家里是否储存烟花爆竹、居住地周围是否常有打架斗殴及自己是否参与打架斗殴等11个因素是儿童意外伤害发生的影响因素。非条件多因素logistic 回归分析显示男性(OR=0.751,P=0.013)、留守儿童(OR=1.779,POR=1.337,P=0.028)、居住地周围常有打架斗殴(OR=1.517,P结论 影响湖南醴陵农村儿童意外伤害的发生是多因素的,其中男孩、留守儿童、家里储存烟花爆竹及居住地周围常有打架斗殴者是意外伤害发生的高危人群,应重点关注。 展开更多
关键词 意外伤害 危险因素 问卷调查 农村地区 儿童
实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠非髓鞘组织病变的特征及意义
4
作者 张金凤 黄榕 +2 位作者 于嘉 徐俊 金世杰 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期 306-309,共4页
目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠非髓鞘组织病理变化的特征及临床意义。方法48只Wistar大鼠随机分为对照组(CON,24只)和EAE组(24只),比较两组大鼠行为学;用苏木精一伊红染色、LOYEZ髓鞘染色、免疫组化及TUNEL方法观... 目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠非髓鞘组织病理变化的特征及临床意义。方法48只Wistar大鼠随机分为对照组(CON,24只)和EAE组(24只),比较两组大鼠行为学;用苏木精一伊红染色、LOYEZ髓鞘染色、免疫组化及TUNEL方法观察EAE大鼠脊髓的炎症反应、脱髓鞘改变、神经丝蛋白和神经元的损伤。结果行为学及组织学证实EAE大鼠模型复制成功。同时发现EAE组大鼠免疫诱导7d后神经丝蛋白密度开始减低,排列紊乱,可见轴索断裂及轴索脱失,14d达高峰,免疫诱导7d、14d及21d神经丝蛋白密度均明显低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.01);免疫诱导7d、14d及21d神经元的凋亡指数与对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论EAE大鼠模型除了炎性脱髓鞘病变外,在疾病早期开始出现明显轴索损伤及神经元的凋亡,与神经功能障碍有关。 展开更多
关键词 实验性变态反应性脑脊髓炎 髓鞘 轴索损伤 凋亡 大鼠
2005年中国城市产科新生儿出生状况调查 被引量:71
5
作者 李娟 王庆红 +4 位作者 吴红敏 于嘉 杜立中 姚裕家 魏克伦 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 7-10,共4页
目的通过对我国全国范围内在城市医院分娩的新生儿的调查,了解中国城市出生新生儿状况。方法回顾性分析2005年中国22个省市的72家城市医院产科分娩新生儿的围产及新生儿资料,由专人负责并建立数据库。结果 2005年1~12月期间出生的新生... 目的通过对我国全国范围内在城市医院分娩的新生儿的调查,了解中国城市出生新生儿状况。方法回顾性分析2005年中国22个省市的72家城市医院产科分娩新生儿的围产及新生儿资料,由专人负责并建立数据库。结果 2005年1~12月期间出生的新生儿45722名,新生儿男女性别比为1.13∶1。早产儿发生率为8.1%,极低出生体重儿发生率为0.7%。足月儿中自然受孕占99.7%,辅助生殖占0.3%;早产儿中自然受孕占98.4%,辅助生殖占1.6%。分娩方式:自然分娩占50.8%,剖宫产占49.2%(其中因社会因素剖宫产占38.1%)。新生儿1分钟Apgar评分≤7分者为4.8%,5分钟≤7分者为1.6%。转入新生儿科治疗的新生儿占7.14%。新生儿死亡率为0.74%。结论 2005年我国城市早产儿出生率较2002~2003年增高;我国城市孕妇剖宫产率远高于美国及大多数亚洲国家。 展开更多
关键词 流行病学调查 中国 新生儿
电穿孔转染SD大鼠神经干细胞条件优化 预览 被引量:3
6
作者 张晓英 罗琼 +5 位作者 张季红 徐佩茹 多力坤 刘玉 孙光辉 于嘉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期27-30,共4页
目的以原代培养的SD大鼠神经干细胞为研究对象,优化电穿孔转染条件。方法通过设置不同的电压、脉冲时间、电压脉冲时间组合等电转染条件,将表达绿色荧光蛋白(GFP)的靶向大鼠β-catenin基因的siRNA质粒导入SD大鼠神经干细胞,48 h后观... 目的以原代培养的SD大鼠神经干细胞为研究对象,优化电穿孔转染条件。方法通过设置不同的电压、脉冲时间、电压脉冲时间组合等电转染条件,将表达绿色荧光蛋白(GFP)的靶向大鼠β-catenin基因的siRNA质粒导入SD大鼠神经干细胞,48 h后观察并比较神经干细胞的转染效率,确定最佳电转染条件。结果 300 V电压、60μs脉冲时间或300 V电压、80μs脉冲时间的转染条件下,SD大鼠神经干细胞可获得较好的转染效率,分别为(62.21±11.56)%和(53.34±9.0)%。结论电穿孔转染是一种高效的基因转染方法,通过条件的优化,可以提高SD大鼠神经干细胞的电转染效率 展开更多
关键词 神经干细胞 电穿孔转染 优化 SD大鼠
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2005年中南地区产科新生儿流行病学调查 被引量:14
7
作者 王庆红 于嘉 +2 位作者 魏克伦 姚裕家 杜立中 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期458-461,共4页
目的通过对我国中南地区城市医院分娩的新生儿的调查,了解我国中南地区新生儿出生情况。方法抽取我国中南地区的23所医院进行调查。回顾性调查了2005年1月1日至同年12月31日期间出生的产科住院新生儿15582名。结果 (1)新生儿男女性别... 目的通过对我国中南地区城市医院分娩的新生儿的调查,了解我国中南地区新生儿出生情况。方法抽取我国中南地区的23所医院进行调查。回顾性调查了2005年1月1日至同年12月31日期间出生的产科住院新生儿15582名。结果 (1)新生儿男女性别比为1.16∶1;(2)早产儿发生率为8.11%;(3)极低出生体重儿发生率为0.73%;(4)分娩方式:自然分娩占57.52%,剖宫产占40.82%(其中因社会因素剖宫产占29.91%),其他产式占1.66%;(5)新生儿窒息发生率为3.78%,其中重度窒息占0.75%;(6)新生儿死亡率为0.55%,其中早产儿死亡率为5.56%。结论 (1)我国中南地区早产儿发生率和新生儿窒息发生率均较高;(2)我国中南地区剖宫产比例较高,尤其是社会因素所占的比例过高。 展开更多
关键词 流行病学调查 中国中南地区 产科 新生儿
中国七大城市早产儿脑损伤发生率的多中心调查报告 预览 被引量:15
8
作者 陈惠金 魏克伦 +10 位作者 周丛乐 姚裕家 于嘉 范秀芳 高喜容 刘晓红 钱继红 吴本清 张青梅 张小兰 吴高强 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期 1001-1011,共11页
目的中华医学会儿科学分会新生儿学组组织国内7个城市的10家三级甲等医院进行了早产儿脑损伤多中心协作研究。该文报告其中早产儿脑损伤发生率的调查结果。方法 2005年1月至2006年8月期间,各参加单位对所有胎龄〈37周的早产儿在生后3 d... 目的中华医学会儿科学分会新生儿学组组织国内7个城市的10家三级甲等医院进行了早产儿脑损伤多中心协作研究。该文报告其中早产儿脑损伤发生率的调查结果。方法 2005年1月至2006年8月期间,各参加单位对所有胎龄〈37周的早产儿在生后3 d内常规进行初次床边头颅B超检查,以后每隔3~7 d复查1次,直至出院。结果 9单位总脑室内出血(IVH)发生率和重度IVH发生率分别为10.8%(406/3 768)和2.4%(92/3 768),其中I级IVH 22.6%(92/406),Ⅱ级54.7%(222/406),Ⅲ级17.2%(70/406),Ⅳ级5.4%(22/406);10医院中总脑室周围白质软化(PVL)发生率和囊性PVL发生率分别为2.3%(112/4 933)和0.3%(16/4 933),其中Ⅰ级PVL 85.7%(96/112),Ⅱ级12.5%(14/112),Ⅲ级1.8%(2/112)。发生重度IVH的可能高危因素为阴道分娩(OR=1.874,95%CI=1.172~2.997,P〈0.01)、围产期窒息(OR=1.598,95%CI=1.077~2.372,P〈0.05)、机械呼吸(OR=3.988,95%CI=2.448~6.948,P〈0.01)以及羊水污染(OR=2.192,95%CI=1.054~4.544,P〈0.05)等。发生囊性PVL的可能高危因素为阴道分娩(OR=1.400,95%CI=1.186~1.652,P〈0.001)和机械呼吸(OR=3.000,95%CI=1.015~8.864,P〈0.05)。结论该调查数据基本可以客观反映中国主要大城市早产儿脑损伤发生率的情况。由于中国60%以上的人口居住在农村,受农村医疗条件的限制,早产儿IVH发生率很有可能高于目前的调查结果,尚有待进一步组织包括乡村医院的多中心调查研究。 展开更多
关键词 早产儿 脑室内出血 脑室周围白质软化 发病率 多中心调查 中国
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高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内β-连接素活化的影响 被引量:1
9
作者 王晓莉 郭媛媛 +2 位作者 陈玉玺 赵岩松 于嘉 《中华物理医学与康复杂志》 CSCD 北大核心 2011年第2期81-85,共5页
目的探讨高压氧(HBO)治疗后缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠神经干细胞增殖与β-连接素(β-catenin)蛋白的关系。方法共选取7日龄SD新生夫鼠180只,将其分为正常对照组(对照组)、模型组及HBO组。采用Rice法制作HIBD模型,HBO组... 目的探讨高压氧(HBO)治疗后缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠神经干细胞增殖与β-连接素(β-catenin)蛋白的关系。方法共选取7日龄SD新生夫鼠180只,将其分为正常对照组(对照组)、模型组及HBO组。采用Rice法制作HIBD模型,HBO组于造模后3h内给予HBO治疗,治疗压力为2个绝对大气压,稳压60min,每日治疗1次,连续治疗7d;模型组制模后不给予任何处理。于HBO治疗后第3、21小时,第3、5、7及14天时采用巢蛋白/β-catenin免疫荧光双标法动态检测各组大鼠侧脑室室管膜下区巢蛋白、β-catenin蛋白表达,并对p—eatenin与巢蛋白的荧光强度进行相关性分析;采用Westernblot法检测各组大鼠左侧脑组织β-catenin总蛋白与核蛋白的表达情况。结果免疫荧光双标结果显示HBO治疗后第21小时时,HBO纠与模型组神经干细胞内β-catenin蛋白表达开始增强;HBO治疗后第5天时,HBO组β-catenin蛋白表达达到较高水平并显苫高丁模型组(P〈0.01);HBO治疗后第14天时,HBO组β-catenin蛋白表达显著减少;HBO组巢货门表达于HBO治疗后第21小时时开始增强,于治疗后第7天时达到较高水平,显著高于模型组(P〈0.05)。另外本研究还发现HBO组β-catenin蛋白与巢蛋白荧光强度具有直线相关性(r^2=0.66,P〈0.01);Western blot结果显示HBO组β-catenin总蛋白及核蛋白均于HBO治疗后第5天时达到较高水平,并显著高于模型组(P〈0.05)。结论HBO治疗可促进HIBD新生大鼠神经于细胞增殖,其治疗机制可能与促进β-catenin蛋白活化有关。 展开更多
关键词 高压氧 缺氧缺血性脑损伤 神经干细胞 Β-连接素
黄芩苷对自身免疫性脑脊髓炎大鼠细胞凋亡的影响 被引量:2
10
作者 徐俊 黄榕 +2 位作者 于嘉 金世杰 张金凤 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期665-668,共4页
目的观察黄芩苷(BAC)对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的疗效及其对脊髓炎症细胞凋亡的影响。方法 44只Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)、EAE组(n=12)、地塞米松治疗组(DXM,n=12)、BAC治疗组(n=10)。DXM组和BAC组在抗... 目的观察黄芩苷(BAC)对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的疗效及其对脊髓炎症细胞凋亡的影响。方法 44只Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)、EAE组(n=12)、地塞米松治疗组(DXM,n=12)、BAC治疗组(n=10)。DXM组和BAC组在抗原免疫后1周分别予以DXM(1 mg/kg)和BAC(200 mg/kg)治疗7 d;观察各组动物脊髓病理变化及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的情况和脊髓炎症细胞凋亡情况。结果 EAE组、DXM组和BAC组较NC组体重均下降,BAC组体重较EAE组及DXM组明显上升(P〈0.05)。DXM组和BAC组大鼠神经功能评分明显优于EAE组(P〈0.05);DXM组和BAC组脊髓MBP阳性数均较EAE组显著增多(P〈0.05)。DXM组和BAC组脊髓炎症细胞凋亡数均较EAE组显著增多(P〈0.05)。结论 BAC对EAE大鼠有治疗作用,并且能促进大鼠脊髓炎症细胞凋亡。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 细胞凋亡 地塞米松 黄芩苷 大鼠
高压氧对大鼠骨髓间充质干细胞分化和Wnt3表达的影响 预览 被引量:1
11
作者 谌崇峰 于嘉 +2 位作者 姚跃 王庆红 李萌 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS 北大核心 2010年第14期 2523-2527,共5页
背景:高压氧治疗可以促进缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞的增殖和分化,且其机制与Wnt信号通路的活化有关,但在体外高压氧对干细胞分化的影响是否也通过Wnt信号通路起作用目前尚未见相关报道。目的:观察高压氧对大鼠骨髓间... 背景:高压氧治疗可以促进缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞的增殖和分化,且其机制与Wnt信号通路的活化有关,但在体外高压氧对干细胞分化的影响是否也通过Wnt信号通路起作用目前尚未见相关报道。目的:观察高压氧对大鼠骨髓间充质干细胞分化的影响,认识其相关机制。方法:全骨髓法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,贴壁纯化,取传至第3~5代细胞,加入含bFGF,EGF,B27的DMEM/F12培养基诱导培养24h。诱导后细胞随机分为2组,对照组未做任何处理,高压氧组给予0.10MPa的压力治疗,稳压时间60min,稳压期间平均氧浓度不低于90%。免疫荧光染色检测巢蛋白、NSE,GFAP,O4等抗体的表达,Western-blot法检测Wnt3蛋白的表达。结果与结论:骨髓间充质干细胞用神经干细胞经典培养基诱导后巢蛋白呈阳性表达。与对照组比较,高压氧组NSE,O4阳性细胞分化率均显著增加(P〈0.01),GFAP阳性细胞分化率无明显差异(P〉0.05),Wnt3蛋白的表达明显升高(P〈0.05)。高压氧可以促进骨髓间充质干细胞向神经元细胞和少突胶质细胞分化,但对星形胶质细胞的分化无明显影响,其机制可能与Wnt3蛋白的活化有关。 展开更多
关键词 高压氧 Wnt3 诱导 分化 神经元 少突胶质细胞 骨髓间充质干细胞
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内皮细胞特异性表达血管内皮生长因子基因载体的构建及表达特性验证 预览 被引量:1
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作者 郑湘榕 张珊珊 +1 位作者 于嘉 谭洁璐 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第21期3205-3209,3213共6页
目的构建在内皮细胞特异性表达人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因的真核表达载体,验证HRE.ppET-1调控元件的内皮细胞表达特异性。方法用聚合酶链反应(PCR)方法直接合成缺氧反应元件(hypoxia-respon... 目的构建在内皮细胞特异性表达人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因的真核表达载体,验证HRE.ppET-1调控元件的内皮细胞表达特异性。方法用聚合酶链反应(PCR)方法直接合成缺氧反应元件(hypoxia-responsive element,HRE),人前内皮素原-1基因(human preproendothe-lin-1,ppET-1)启动子、VEGF元件,通过PCR、酶切、连接等一系列核酸分子操作,将各元件亚克隆至pcD-NA3.1载体上,最终组合而成真核表达载体pcDNA3.1-VEGF+Pa,pcDNA3.1(-CMV)-ppET-1+VEGF+Pa,pcDNA3.1(-CMV)-HRE+ppET-1+VEGF+Pa;脂质体转染离体培养的脐静脉内皮细胞(HUVEC)和肝细胞,荧光显微镜下观察GFP表达,验证HRE.ppET-1调控元件在内皮细胞中的特异性。结果各载体经酶切鉴定和测序证实。GFP的表达显示HRE.ppET-1调控元件在内皮细胞中可有效转录外源基因,在非内皮细胞中表达极弱。结论成功构建能在内皮细胞特异性表达人VEGF基因的真核表达载体;HRE.ppET-1调控元件具有内皮细胞表达特异性,为进一步利用VEGF进行缺血性脑损伤的基因治疗奠定良好基础。 展开更多
关键词 缺氧反应元件 人前内皮素原-1基因启动子 血管内皮生长因子 内皮细胞
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靶向大鼠β-catenin基因的shRNA真核表达质粒的构建与筛选 被引量:3
13
作者 张晓英 于嘉 +2 位作者 谌崇峰 姚跃 王庆红 《医学分子生物学杂志》 CAS 2010年第2期136-142,共7页
目的构建靶向β-连环蛋白(β-catenin)基因的shRNA的真核表达质粒,并筛选出沉默β-catenin基因效果最明显的shRNA表达质粒。方法设计3对针对β-catenin基因不同位点的shRNA片段,构建携带此shRNA片段的真核表达质粒(shRNA1—3)并... 目的构建靶向β-连环蛋白(β-catenin)基因的shRNA的真核表达质粒,并筛选出沉默β-catenin基因效果最明显的shRNA表达质粒。方法设计3对针对β-catenin基因不同位点的shRNA片段,构建携带此shRNA片段的真核表达质粒(shRNA1—3)并行测序分析,电穿孔转染神经干细胞(neural stem cells NSCs),测定转染率,并分别采用RT—PCR及Western印迹检测β-catenin mRNA和蛋白表达情况,免疫组化方法检测shRNA对神经干细胞分化的影响。结果构建靶向β-catenin基因的shRNA真核表达重组质粒shRNA1,2,3。经筛选,NSCs转染shRNA3后,B—catenin RNA水平和蛋白水平均明显低于阴性对照组和空白对照组(0.08±0.00 vs 0.75±0.01,0.74±0.02;0.12±0.10,vs 0.56±0.02,0.65±0.01,P均〈0.01;与空白组和阴性对照组相比,shRNA3组NSCs分化为GFAP阳性细胞的百分率明显增加,分化为NSE阳性细胞的百分率明显减少(P〈0.05)。结论β—catenin RNA3对神经干细胞的β—catenin表达具有明显抑制作用,可影响细胞的分化。为研究wnt/β-catenin信号途径在NSCs生长分化中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 Β-连环蛋白 短发夹状RNA 电穿孔 神经干细胞
高压氧影响离体神经干细胞分化的量效及时效关系 被引量:2
14
作者 谌崇峰 于嘉 +2 位作者 王庆红 姚跃 李萌 《中国当代儿科杂志》 CAS 北大核心 2010年第5期368-372,共5页
目的探讨不同压力和不同稳压时间下高压氧(HBO)对离体神经干细胞(NSCs)分化的影响,旨在找出HBO治疗的最佳压力与稳压时间。方法取出生3日内新生Sprague-Dawley大鼠的脑皮质组织,在含B27、bFGF和EGF的DMEM/F12培养基中悬浮培养NSCs... 目的探讨不同压力和不同稳压时间下高压氧(HBO)对离体神经干细胞(NSCs)分化的影响,旨在找出HBO治疗的最佳压力与稳压时间。方法取出生3日内新生Sprague-Dawley大鼠的脑皮质组织,在含B27、bFGF和EGF的DMEM/F12培养基中悬浮培养NSCs。将传至2~3代的NSCs随机分为不做处理的对照组(CON)和HBO处理组。HBO处理组根据所用压力和稳压时间分为6组:NSCs分别给予1个绝对大气压(ATA)、2 ATA、3 ATA的HBO处理,每种压力再分别给予30和60 min两种稳压时间。HBO后继续培养24 h,7组细胞在同一时间行免疫荧光染色,荧光显微镜下观察NSCs分化为NSE阳性细胞的百分率。结果 NSCs分化为NSE阳性细胞的分化率从低到高依次为CON组(3.72±0.88%),1ATA-30 min组(3.85±0.44%),1ATA-60 min组(5.45±0.52%),3ATA-30 min组(6.08±0.57%),2ATA-30 min组(6.72±0.76%),3ATA-60 min组(7.89±0.62%),2ATA-60min(9.17±0.50%);除1ATA-30 min组外,其余各HBO组与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.01);同一压力下60min组与30min组之间的差异及2ATA-60 min组与其他各组之间的差异均有统计学意义(P〈0.01)。结论 2 ATA压力下稳压时间为60 min的HBO促进NSCs向神经元分化的作用最强。 展开更多
关键词 高压氧 分化 压力 时间 神经干细胞
不同疗程高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经干细胞增殖和分化的影响 被引量:12
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作者 王庆红 于嘉 +2 位作者 谌崇峰 李萌 姚跃 《实用儿科临床杂志》 CAS 北大核心 2009年第7期538-541,共4页
目的探讨不同疗程高压氧(HBO)对缺氧缺血脑损伤(HIBD)新生大鼠神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。方法7日龄SD大鼠随机分为正常对照组(CON组)、HIBD组、HBO组,其中HBO组又分为HBO1疗程组[HBO-1,在HIBD2 h开始HBO治疗,HBO压力为... 目的探讨不同疗程高压氧(HBO)对缺氧缺血脑损伤(HIBD)新生大鼠神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。方法7日龄SD大鼠随机分为正常对照组(CON组)、HIBD组、HBO组,其中HBO组又分为HBO1疗程组[HBO-1,在HIBD2 h开始HBO治疗,HBO压力为0.1 MPa(2 ATA),稳压60 min,1次/d,7次为1疗程],2疗程组(HBO-2,予2个疗程HBO)和3疗程组(HBO-3,予3个疗程HBO)。疗程结束后(鼠龄35 d)取脑组织标本,采用5-溴-2-脱氧嘧啶核苷(BrdU)/神经巢蛋白(Nestin)免疫荧光双标法检测缺血侧侧脑室室管膜下区(SVZ区)和海马齿状回区(DG区)的内源性NSCs的变化。Western blot法检测缺血侧大脑半球Nes-tin蛋白变化。BrdU/神经元特异性烯醇化酶(NSE)和BrdU/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光双标法检测大脑皮层神经元和星形胶质细胞数量;TUNEL法检测皮层神经细胞凋亡;并进行T迷宫试验、放射臂迷宫测试、足错误等行为学测试。结果1.HBO治疗后SVZ区BrdU+/Nestin+细胞随疗程增加而逐渐增加,以HBO-3组的阳性细胞数最多;2.各组大鼠的海马DG区均仅有极少量的BrdU+/Nestin+细胞表达,且随着HBO疗程的增加,BrdU+/Nestin+细胞表达无增加;3.大脑皮层BrdU+/NSE+细胞表达随HBO疗程增加逐渐增多,其中以HBO-3组的阳性细胞数最多;4.HIBD组可见较多GFAP+细胞,高于CON组和HBO组;且各组均仅有个别BrdU+/GFAP+细胞表达;5.Western blot显示HBO-3组Nestin蛋白表达高于其余各组;6.T迷宫、放射臂迷宫和足错误测试结果均表明随着HBO疗程的增加,疗效愈加显著。结论增加HBO疗程可促进HIBD新生大鼠SVZ区内源性NSCs皮层神经元细胞的增殖和分化。 展开更多
关键词 脑损伤 缺氧缺血性 高压氧 疗程 神经干细胞 大鼠 新生
增加高压氧疗程对治疗时间窗延迟的新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用 被引量:11
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作者 王庆红 于嘉 +2 位作者 谌崇峰 姚跃 李萌 《中国当代儿科杂志》 CAS 北大核心 2009年第6期464-470,共7页
目的探讨多疗程的高压氧(HBO)治疗对96h时间窗的缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的保护作用。方法7日龄Sprague-Dawley大鼠88只,随机分为正常对照组(CON)、HIBD组和HBO组。HBO组根据HBO治疗时间窗的不同分为2H,48H和96H组,即分别... 目的探讨多疗程的高压氧(HBO)治疗对96h时间窗的缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的保护作用。方法7日龄Sprague-Dawley大鼠88只,随机分为正常对照组(CON)、HIBD组和HBO组。HBO组根据HBO治疗时间窗的不同分为2H,48H和96H组,即分别于HIBD后2,48和96h给予HBO;各亚组又根据不同疗程分成1疗程组(HBO-1)、2疗程(HBO-2)和3疗程组(HBO-3)。HBO组(压力为2ATA)每天给予HBO1次,连续7d为一疗程,休息3d后进入下一疗程。各组待96H组的3疗程亚组完成全部疗程后,即鼠龄38d(HIBD后31d)时一同处死。采用TUNEL染色检测大脑皮层和海马CA1区神经细胞凋亡;并采用NSE免疫组化方法检测各组皮层神经元数量。结果①HIBD组凋亡细胞数量明显高于CON组,同时NSE阳性细胞明显少于CON组(P〈0.01)。②随着治疗时间窗的延迟,单疗程HBO对凋亡的抑制作用及对神经元的保护作用逐渐减弱。③在48H和96HHBO组,HBO对神经细胞凋亡的抑制作用及对神经细胞的保护作用随着疗程的增加而逐渐增强;但2HHBO组经过一疗程HBO治疗后,凋亡细胞数量已经减少至CON组水平,而且NSE阳性细胞数量增加也接近CON组,随着疗程增加不再有明显变化。结论①HIBD后2h给予一疗程的HBO治疗即可明显抑制神经细胞的凋亡及保护神经元;②增加疗程可增强治疗窗延迟的HBO对神经细胞凋亡的抑制与对神经元的保护作用。 展开更多
关键词 高压氧 缺氧缺血性脑损伤 疗程 新生大鼠
TLR2和TLR9在生殖器疱疹患者外周血单一核细胞的表达 被引量:2
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作者 汤建萍 于嘉 +3 位作者 孙磊 张丹 赵蕊 苏玉文 《中华皮肤科杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期702-704,共3页
目的探讨Toll样受体TLR2和TLR9在生殖器疱疹中的作用。方法流式细胞仪检测生殖器疱疹患者单一核细胞上TLR2和TLR9表达水平,同时采用ELISA法检测其血清IL-6、IL-10和TNF-α水平,并探讨其相关性。结果①生殖器疱疹患者PBMC上TLR2和TLR9... 目的探讨Toll样受体TLR2和TLR9在生殖器疱疹中的作用。方法流式细胞仪检测生殖器疱疹患者单一核细胞上TLR2和TLR9表达水平,同时采用ELISA法检测其血清IL-6、IL-10和TNF-α水平,并探讨其相关性。结果①生殖器疱疹患者PBMC上TLR2和TLR9表达水平明显高于正常成人(P〈0.05)。②生殖器疱疹患者血清IL-6和IL-10水平明显升高,TNF-α水平明显降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。③生殖器疱疹患者TLR2和TLR9表达水平与其血清IL-6,IL-10水平存在线性相关关系(P〈0.01)。结论TLR2和TLR9介导生殖器疱疹血清IL-6、IL-10的产生和释放。 展开更多
关键词 疱疹 生殖器 单核细胞 TOLL样受体2 TOLL样受体9
高压氧治疗对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞增殖的影响 被引量:5
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作者 王晓莉 赵岩松 +1 位作者 于嘉 谢岷 《中华物理医学与康复杂志》 北大核心 2009年第5期309-312,共4页
目的探讨高压氧(HBO)治疗缺氧缺血性脑损伤新生大鼠后,内源性神经干细胞增殖的动态变化。方法将7日龄Sprague—Dawley新生大鼠随机分为正常对照组(对照组)、缺氧缺血脑损伤组(模型组)与HBO治疗组(HBO组)。采用经典的Rice-Vannu... 目的探讨高压氧(HBO)治疗缺氧缺血性脑损伤新生大鼠后,内源性神经干细胞增殖的动态变化。方法将7日龄Sprague—Dawley新生大鼠随机分为正常对照组(对照组)、缺氧缺血脑损伤组(模型组)与HBO治疗组(HBO组)。采用经典的Rice-Vannucci法制作缺氧缺血性脑损伤模型,HBO组在脑损伤后3h内进行HBO治疗,治疗压力为2个绝对大气压,稳压60min,每日1次,连续7d。分别于HBO治疗后第3小时、第21小时、第3天、第7天和第14天,采用5-溴-2-脱氧脲苷(BrdU)/巢蛋白免疫荧光双重标记法动态检测缺血侧侧脑室室管膜下区与海马齿状回内源性神经干细胞增殖的动态变化;采用Western blot法检测缺血侧大脑半球巢蛋白的动态变化。结果HBO组室管膜下区与海马齿状回BrdU^+/巢蛋白标记的神经干阳性细胞数分别于HBO治疗后第3小时及第21小时显著增加,第7天达最高水平,并显著高于模型组和对照组(P〈0.01),第14天BrdU^+/巢蛋白阳性细胞数开始下降,仍高于模型组和对照组(P〈0.01);巢蛋白的Western blot分析发现,缺血侧大脑半球巢蛋白于HBO治疗后第21小时开始增加,第7天达峰值后下降。结论缺氧缺血性脑损伤后3h内给予HBO治疗,可以促进缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞的增殖。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 高压氧 神经干细胞
高压氧治疗促进HIBD新生大鼠内源性神经干细胞的迂移与分化 被引量:12
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作者 王晓莉 于嘉 +2 位作者 谢岷 王庆红 余小河 《中国当代儿科杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期749-752,共4页
目的该研究探讨了高压氧(HBO)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠内源性神经干细胞(NSCs)的迁移与分化的影响。方法7日龄Sprague—Dawley新生大鼠随机分为对照组,模型组及HBO组。采用Rice—Vannucci方法制成HIBD模型。造模后3h内... 目的该研究探讨了高压氧(HBO)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠内源性神经干细胞(NSCs)的迁移与分化的影响。方法7日龄Sprague—Dawley新生大鼠随机分为对照组,模型组及HBO组。采用Rice—Vannucci方法制成HIBD模型。造模后3h内行HBO治疗。分别于HBO治疗后7d、14d、28d,采用Brdu/DCX,BrdU/β-tubulin,BrdU/GFAP和BrdU/O4免疫荧光双标法,用共聚焦显微镜动态检测侧脑室室管膜下区(subventrieular zone,SVZ)与大脑皮层内源性NSCs的迁移与分化。结果治疗后7d,HBO组损伤侧SVZ区BrdU^+ DCX^+细胞数(84±21个/mm^2)增加,多于对照组(39±14个/mm^2)与模型组(68±17个/mm^2)(P〈0.05);治疗后14d,SVZ区BrdU^+ DCX^+细胞数减少,而皮层区BrdU^+ DCX^+细胞数增加,HBO组明显多于对照组(P〈0.01);治疗后28d,各组大脑皮层BrdU^+ DCX^+细胞数减少,大脑皮层出现BrdU^+ β-tubulin^+,BrdU^+GFAP^+,BrdU^+O4^+细胞。HBO组BrdU^+β-tubulin^+与BrdU^+O4^+细胞数显著高于对照组与模型组(P〈0.05)。结论高压氧可促进HIBD新生大鼠内源性NSCs迁移到大脑皮层并分化为成熟的神经细胞。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 高压氧 神经干细胞 新生大鼠
腺病毒载体介导血管内皮生长因子165基因治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 被引量:3
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作者 郑湘榕 张珊珊 +4 位作者 尹飞 于嘉 钟乐 王霞 余小河 《中华医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期128-132,共5页
目的研究腺病毒介导血管内皮生长因子(VEGF)。基因转移对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的治疗作用。方法采用细菌内同源重组技术构建腺病毒重组载体Ad—VEGF。7日龄SD大鼠随机分成3组:假手术组(20只)、H1BD(20只)、Ad—VEGF... 目的研究腺病毒介导血管内皮生长因子(VEGF)。基因转移对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的治疗作用。方法采用细菌内同源重组技术构建腺病毒重组载体Ad—VEGF。7日龄SD大鼠随机分成3组:假手术组(20只)、H1BD(20只)、Ad—VEGF移植组(Ad—VEGF组,20只),Ad.VEGF移植组在HIBD后3d于大鼠左侧感觉运动皮层区(坐标AP:+0.3mm,ML:-2mm,DV:-1.5mm)立体定位注射2μl重组体腺病毒悬液。移植后7d采用免疫组织化学法检测鼠脑VEGF蛋白;采用原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测鼠脑神经元凋亡情况;大鼠3~4周龄时采用T迷宫觅食实验及足错误、姿势反射、肢体放置实验对其学习记忆、空间能力和感觉运动功能等行为学进行评估;采用尼氏染色法检测鼠脑海马CA1区和皮层单位面积内神经元数目。结果免疫组织化学法结果显示皮层与海马Ad—VEGF组VEGF阳性细胞数均明显多于HIBD组(68.09±3.37比24.65±3.37,68.37±3.17比25.14±1.86,均P〈0.05)。TUNEL结果显示Ad—VEGF组鼠脑神经元凋亡数目明显低于HIBD组(151.4±21.7比264.4±16.3,P〈0.05);行为学检测结果显示Ad—VEGF组的各项行为学测试成绩均较HIBD组有明显改善(均P〈0.05),尼氏染色结果显示Ad-VEGF组鼠脑海马CA1区和皮层单位面积内神经元数目明显多于HIBD组(70.6±2.3比55.3±2.1,95.1±2.8比70、1±2.7,均P(O.05)。结论腺病毒载体介导的VEGF165基因治疗可增加VEGF蛋白的表达,减少脑细胞凋亡、改善脑损伤后的远期行为学功能,减轻缺氧缺血后的脑损伤,具有神经保护作用。 展开更多
关键词 缺氧缺血 血管内皮生长因子类 基因治疗
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