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海洋生物提取物对免疫调节作用的研究进展 预览
1
作者 叶蕾 王佳佳 +2 位作者 叶盛旺 里展 《浙江海洋大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2018年第2期172-177,共6页
免疫系统是人体进行自我防卫的重要系统,免疫调节能识别、阻挡及消灭有害病菌,维护体内大环境的稳定。从海洋生物体中获取低毒、高效的免疫活性物质,作为天然的免疫调节剂已成为一种趋势。目前已从海洋鱼类、海洋贝类、海洋藻类、海洋... 免疫系统是人体进行自我防卫的重要系统,免疫调节能识别、阻挡及消灭有害病菌,维护体内大环境的稳定。从海洋生物体中获取低毒、高效的免疫活性物质,作为天然的免疫调节剂已成为一种趋势。目前已从海洋鱼类、海洋贝类、海洋藻类、海洋甲壳类动物等海洋生物中提取了多种具有免疫调节的物质,本文就该方面的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 海洋生物 免疫调节 研究进展
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北太平洋鱿鱼缠卵腺抗氧化酶解寡肽的制备 预览
2
作者 刘倩茹 柏圣达 +2 位作者 赵国雨 徐云峰 《湖北农业科学》 2018年第13期70-74,78共6页
为探讨北太平洋鱿鱼(Todarodes pacificus)缠卵腺酶解寡肽的制备和抗氧化活性,以北太平洋鱿鱼缠卵腺为原料,选择碱性蛋白酶进行酶解,以水解度和DPPH自由基清除率为指标,经单因素和正交试验方法获得最佳酶解条件,超滤得到不同分子段多... 为探讨北太平洋鱿鱼(Todarodes pacificus)缠卵腺酶解寡肽的制备和抗氧化活性,以北太平洋鱿鱼缠卵腺为原料,选择碱性蛋白酶进行酶解,以水解度和DPPH自由基清除率为指标,经单因素和正交试验方法获得最佳酶解条件,超滤得到不同分子段多肽,通过测定还原能力、DPPH清除率、Fe^(2+)螯合能力、OH自由基清除率、超氧阴离子清除率评价不同分子量酶解多肽的抗氧化性,得出最佳分子段;采用琼脂糖凝胶G-25对最佳分子段进行分离,检测各峰对DPPH清除能力,得出最佳峰段后经HPLC进一步分离获得单一组分,由氨基酸测序仪进行N端降解测序得出目标肽序列。结果表明,碱性蛋白酶的酶解条件为温度50℃、酶解时间7 h、加酶量3 500 U/g、pH 9.0、料液比1∶6。经超滤得到的3~5 ku分子段抗氧化活性最强,经琼脂糖凝胶G-25分离得到3个峰,其中峰Ⅰ组分对DPPH清除率最好,当浓度为0.5 mg/m L时其DPPH的清除率为61.87%。经HPLC纯化得到单一峰,氨基酸序列测定为Ala-Tyr-Ala-Ser-Ser,相对分子质量为497.50。北太平洋鱿鱼缠卵腺酶解寡肽有较好的抗氧化活性。 展开更多
关键词 北太平洋鱿鱼(Todarodes pacificus) 缠卵腺 抗氧化 寡肽 HPLC G-25
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文蛤寡肽对高脂饮食诱导小鼠肾损伤的修护作用 预览
3
作者 王佳佳 叶蕾 +2 位作者 余方苗 丁国芳 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第15期145-151,共7页
目的:研究文蛤寡肽(Meretrix meretrix oligopeptides,MMO)对高脂饮食诱导小鼠肾损伤的修护作用。方法:建立高脂饲料致小鼠慢性肾损伤模型,通过MMO灌胃30 d后,测定小鼠肾脏指数,检测小鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total ... 目的:研究文蛤寡肽(Meretrix meretrix oligopeptides,MMO)对高脂饮食诱导小鼠肾损伤的修护作用。方法:建立高脂饲料致小鼠慢性肾损伤模型,通过MMO灌胃30 d后,测定小鼠肾脏指数,检测小鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)浓度,以及小鼠肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,计算小鼠动脉粥样硬化指数(atherosclerosis index,AI),苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠肾脏病理学改变,免疫组化法测定肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转录生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)蛋白表达量。结果:MMO组与模型组比较,小鼠肾脏指数,血清中TG、TC、LDL-C浓度及AI显著下降,HDL-C浓度显著升高,肾组织匀浆中SOD、GSH-Px活力显著升高,MDA含量显著降低,HE染色观察肾组织结构明显好转,免疫组化结果显示MMO可降低肾损伤小鼠α-SMA、TGF-β1蛋白表达水平。结论:MMO对高脂饮食诱导的小鼠肾损伤有较为明显的修护作用。 展开更多
关键词 文蛤寡肽 高脂饲料 肾损伤 修护作用
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青蛤免疫调节肽的酶解制备工艺研究 被引量:1
4
作者 叶盛旺 +3 位作者 李维 唐云平 余方苗 丁国芳 《食品工业》 北大核心 2018年第5期1-4,共4页
为研究酶法制备具有免疫调节作用的青蛤多肽,以青蛤肉为原料,分别采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解,以小鼠巨噬细胞RAW 264.7的相对增殖率为指标,筛选出最佳酶种,再通过单因素试验和L(16)(4^5)... 为研究酶法制备具有免疫调节作用的青蛤多肽,以青蛤肉为原料,分别采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解,以小鼠巨噬细胞RAW 264.7的相对增殖率为指标,筛选出最佳酶种,再通过单因素试验和L(16)(4^5)正交试验确定该酶的最佳酶解条件。结果表明:最佳酶种是胃蛋白酶,最佳酶解条件为p H2、温度42℃、料液比1︰10(g/m L)、加酶量1 600 U/g、时间8 h,所得酶解产物对RAW 264.7细胞的相对增殖率为76.15%。该工艺研究为青蛤免疫调节多肽的分离纯化及开发具有免疫调节作用的功能食品提供试验依据。 展开更多
关键词 青蛤 酶解 免疫调节肽 单因素试验 正交试验
鳕鱼皮胶原蛋白肽在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制 预览
5
作者 陈锐 丁国芳 +6 位作者 余方苗 黄芳芳 唐云平 张小军 陈思 梅光明 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第19期154-161,共8页
目的:鳕鱼皮胶原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)对肝损伤具有较好的保护作用,但其吸收机制尚不明确,本实验拟采用人结肠腺癌Caco-2细胞单层模型对CSCP在肠道中的吸收机制进行研究,为CSCP在动物肠道内的吸收机制提供依... 目的:鳕鱼皮胶原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)对肝损伤具有较好的保护作用,但其吸收机制尚不明确,本实验拟采用人结肠腺癌Caco-2细胞单层模型对CSCP在肠道中的吸收机制进行研究,为CSCP在动物肠道内的吸收机制提供依据。方法:在进行转运实验前,先对CSCP在人工胃、肠液、不同pH值条件及在Caco-2细胞单层中的稳定性进行评价;采用CCK-8(cell counting kit-8)法确定CSCP在转运实验中的最高质量浓度,然后建立Caco-2细胞单层模型并测定跨膜电阻值和碱性磷酸酶活力以检验细胞单层的致密性、完整性和极化现象;考察转运时间、CSCP质量浓度、维拉帕米、MK-571、氧化苯砷和去氧胆酸钠对转运的影响,利用高效液相色谱法检测CSCP质量浓度并计算累积转运量和表观渗透系数。结果:在3 h内,CSCP在人工胃、肠液及接近胃肠道pH值环境中基本保持稳定,转运过程中未见多肽发生水解。CSCP的转运具有时间和浓度依赖性,不受维拉帕米和氧化苯砷的影响,去氧胆酸钠和MK-571对CSCP的转运具有非常显著的促进作用(P<0.05)。结论:CSCP跨Caco-2细胞单层转运的机制为细胞旁路途径,其外排受到多药耐药蛋白的介导。 展开更多
关键词 鳕鱼皮 胶原蛋白肽 胃肠道稳定性 CACO-2细胞 转运机制
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大西洋鳕鱼皮多肽体外抗氧化活性研究 预览
6
作者 阎洁 沈楚仪 +3 位作者 李彤 徐大海 邹舒舒 《安徽农业科学》 CAS 2018年第23期144-147,共4页
[目的]探讨大西洋鳕鱼皮多肽的体外抗氧化活性。[方法]选择胰蛋白酶酶解鳕鱼皮,分别以氨基氮滴定法和DPPH自由基清除率作为筛选指标,通过正交试验,筛选出酶解的最优条件;将超滤液分成5段,分别进行DPPH自由基清除率、ABTS自由基力及亚铁... [目的]探讨大西洋鳕鱼皮多肽的体外抗氧化活性。[方法]选择胰蛋白酶酶解鳕鱼皮,分别以氨基氮滴定法和DPPH自由基清除率作为筛选指标,通过正交试验,筛选出酶解的最优条件;将超滤液分成5段,分别进行DPPH自由基清除率、ABTS自由基力及亚铁离子螯合能力的体外抗氧化活性。[结果]胰蛋白酶酶解大西洋鳕鱼皮的最优条件为料液比1∶1,加酶量2 500 U/g、酶解时间4 h、温度45℃、pH 9.0。当分子量小于5 k D时,DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和Fe^2+离子螯合能力最强。[结论]经胰蛋白酶酶解,获得的大西洋鳕鱼皮多肽存在较好的抗氧化活性。 展开更多
关键词 鳕鱼皮 多肽 胰蛋白酶 抗氧化
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长鳍金枪鱼多肽的酶解制备工艺研究
7
作者 丁国芳 +3 位作者 余方苗 唐云平 陈锐 《食品工业》 北大核心 2018年第10期11-14,共4页
通过酶解法制备具有对H2O2诱导的张氏肝细胞保护作用的长鳍金枪鱼多肽。以长鳍金枪鱼下脚料为原料,采用胰蛋白酶进行酶解,以张氏肝细胞的相对增殖率为指标,通过单因素试验和响应面优化试验确定该酶的最佳酶解条件, HE染色观察张氏肝细... 通过酶解法制备具有对H2O2诱导的张氏肝细胞保护作用的长鳍金枪鱼多肽。以长鳍金枪鱼下脚料为原料,采用胰蛋白酶进行酶解,以张氏肝细胞的相对增殖率为指标,通过单因素试验和响应面优化试验确定该酶的最佳酶解条件, HE染色观察张氏肝细胞形态变化。结果表明,最佳酶解条件为:料酶解pH 7.28,酶解温度45.29℃,时间5.05 h,所得酶解产物对张氏肝细胞的相对增殖率为53.1%。HE染色显示长鳍金枪鱼多肽对H2O2诱导的张氏肝细胞起一定保护作用。该工艺研究为长鳍金枪鱼多肽的分离纯化及开发护肝功能食品提供试验依据。 展开更多
关键词 长鳍金枪鱼 酶解多肽 增殖率 护肝
鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备与活性研究进展 预览 被引量:1
8
作者 沈楚仪 《安徽农业科学》 CAS 2018年第1期16-17,51共3页
鳕鱼皮富含胶原蛋白及胶原蛋白肽,经蛋白酶酶解获得的胶原蛋白肽,具有分子量小、易乳化、适热能力增加及易被肠道吸收等优势。主要阐述鳕鱼皮胶原蛋白肽的性质、功效等,以期为鳕鱼皮胶原蛋白肽的综合利用提供参考。
关键词 鳕鱼皮 胶原蛋白肽 制备 功效
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鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠慢性肝损伤的保护机制
9
作者 刘晨晨 丁国芳 +3 位作者 贾盈露 王加斌 赵玉勤 《中国食品学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期24-32,共9页
目的:探究鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠慢性肝损伤的保护作用机制,为肝病患者功能食品的开发提供理论和试验依据。方法:采用腹腔注射CCl4建立小鼠慢性肝损伤模型,检测鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠血清中转氨酶和肝组织匀浆中抗氧化酶以及丙二醛... 目的:探究鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠慢性肝损伤的保护作用机制,为肝病患者功能食品的开发提供理论和试验依据。方法:采用腹腔注射CCl4建立小鼠慢性肝损伤模型,检测鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠血清中转氨酶和肝组织匀浆中抗氧化酶以及丙二醛的影响;HE染色观察小鼠肝组织病理学变化;蛋白印迹法测定肝组织Bax,Bcl-2,Cleavage Caspase-3,Caspase-9,Cytosolic Cyt c,TNF-α,JNK,P-JNK蛋白的表达情况。结果:与模型组比较,高剂量组(400 mg/kg)小鼠血清中AST、ALT活性、肝组织匀浆中MDA含量显著降低,而肝组织匀浆中SOD活性显著升高,且有显著的剂量关系;小鼠肝组织损伤情况得到明显改善;Bcl-2蛋白表达量增加,Bax,Cleavage Caspase-3,Caspase-9,Cytosolic Cyt c,TNF-α,P-JNK蛋白表达量降低。结论:鳕鱼皮胶原蛋白肽可增强慢性肝损伤小鼠的抗氧化活性,抑制氧化应激,对慢性肝损伤有较好的保护作用。 展开更多
关键词 鳕鱼皮 胶原蛋白肽 慢性肝损伤 氧化应激
基础医学课程开放性实验的探索与实践 预览 被引量:1
10
作者 郁迪 闫海强 +2 位作者 立业 王铣 《管理观察》 2017年第30期157-158,共2页
实验室开放是深化课程体系建设和实验教学改革的重要途径,基础医学实验教学是医学实践教学环节的重要组成部分。基础医学课程开放性实验的开设不仅有利于培养医学生的团队合作精神,更有助于提升其科学研究能力。本文旨在探讨基础医学... 实验室开放是深化课程体系建设和实验教学改革的重要途径,基础医学实验教学是医学实践教学环节的重要组成部分。基础医学课程开放性实验的开设不仅有利于培养医学生的团队合作精神,更有助于提升其科学研究能力。本文旨在探讨基础医学课程开放性实验的实施过程。 展开更多
关键词 基础医学 开放性实验 探索 实施过程
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鱿鱼内脏活性物质的制备与功能研究进展 预览
11
作者 刘倩茹 柏圣达 +2 位作者 赵国雨 徐云峰 《安徽农业科学》 CAS 2017年第33期90-92,共3页
综述了鱿鱼内脏中生物活性物质的制备和功能研究进展,以期进行回收利用,提高经济价值,并减少下脚料引起的环境污染。
关键词 鱿鱼 内脏 制备 功能
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绿侧花海葵(Anthopleura anjunae)寡肽制备的关键技术与抗前列腺癌作用研究 预览
12
作者 吴宗泽 丁国芳 +5 位作者 余方苗 唐云平 贾盈露 郑媛媛 陈锐 《海洋与湖沼》 CSCD 北大核心 2017年第5期1114-1123,共10页
本文探讨绿侧花海葵(Anthopleura anjunae)抗前列腺癌酶解寡肽制备与工艺优化。以绿侧花海葵肉为原料进行酶解,筛选最佳蛋白酶,通过正交实验优化酶解条件,并通过超滤、阴离子交换层析、G-25凝胶过滤和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分... 本文探讨绿侧花海葵(Anthopleura anjunae)抗前列腺癌酶解寡肽制备与工艺优化。以绿侧花海葵肉为原料进行酶解,筛选最佳蛋白酶,通过正交实验优化酶解条件,并通过超滤、阴离子交换层析、G-25凝胶过滤和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化,通过LC-MS和氨基酸序列测定鉴定寡肽的氨基酸序列,并以MTT法检测产物对前列腺癌细胞系DU-145增殖抑制率,以确定活性最强组分,最后通过倒置显微镜观察纯化肽的抗前列腺癌活性。结果表明,碱性蛋白酶为最佳酶种;工艺条件为:最适料液比1︰5、最适p H=11、最适加酶量2000U/g、最适温度35oC、最适酶解时间6h;经高效液相纯化得到由五个氨基酸组成的绿侧花海葵抗前列腺癌寡肽,其氨基酸序列为:Tyr-Val-Pro-Gly-Pro(AAP-H);倒置显微镜结果显示经AAP-H作用24h后的DU-145细胞具有明显的凋亡形态学特征。结论:采用碱性蛋白酶酶解并通过超滤和色谱分离技术能从绿侧花海葵肉中制备抗肿瘤活性肽;且AAP-H对DU-145细胞的增殖抑制作用呈时间与剂量依赖关系,作用后细胞出现了凋亡的形态学特征。因此,AAP-H能明显抑制前列腺癌细胞DU-145增殖,可以诱导其发生凋亡而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 绿侧花海葵 酶解 抗肿瘤 寡肽 工艺
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文蛤寡肽对小鼠急性肝损伤的保护作用 预览 被引量:3
13
作者 王佳佳 赵莎莎 +2 位作者 余方苗 丁国芳 《食品科学》 CSCD 北大核心 2017年第13期190-195,共6页
对文蛤寡肽(Meretrixmeretrixoligopeptides,MMO)在小鼠急性肝损伤中的保护作用进行研究。首先通过酶解、超滤、SephadexG-25柱分离技术从文蛤中分离纯化出具有肝修复作用的文蛤寡肽,经检测该目标肽的氨基酸序列为Gln-Leu-Asn-Trp-... 对文蛤寡肽(Meretrixmeretrixoligopeptides,MMO)在小鼠急性肝损伤中的保护作用进行研究。首先通过酶解、超滤、SephadexG-25柱分离技术从文蛤中分离纯化出具有肝修复作用的文蛤寡肽,经检测该目标肽的氨基酸序列为Gln-Leu-Asn-Trp-Asp。然后建立四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤模型,测定小鼠肝脏指数;检测小鼠血清谷丙转氨酶(alanineaminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartateaminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-glutamyltransferase,γ-GT)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活力及甘油三酯(triglyceride,TG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;苏木精-伊红染色观察肝脏病理学改变;免疫组化法测定肝组织TNF-α、NF-κB蛋白表达量。结果表明:MMO组与模型组比较,小鼠肝指数显著降低(P<0.05);血清中ALT、AST、γ-GT活力显著降低(P<0.05),γ-GT活力最高降幅达到47.16%;SOD活力显著升高(P<0.05);TG、MDA水平显著降低(P<0.05),最高降幅分别达到31.88%和28.83%。;苏木精-伊红染色观察肝组织结构明显好转;TNF-α、NF-κB蛋白表达量显著降低。因此,MMO对CCl4小鼠急性肝损伤有较为明显的保护作用。 展开更多
关键词 文蛤寡肽 四氯化碳 急性肝损伤
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文蛤多肽的制备及对非酒精性脂肪肝细胞模型的修复作用
14
作者 赵莎莎 赵玉勤 +3 位作者 张亚茹 黄芳芳 丁国芳 《中国食品学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期33-39,共7页
目的:探讨文蛤酶解多肽的制备工艺及对非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型的修复作用。方法:用质量浓度15μg/m L的软脂酸诱导正常肝Chang liver细胞建立NAFLD模型,以TG含量为指标,筛选酶解文蛤内脏的最佳酶种,通过正交试验、超滤、G-2... 目的:探讨文蛤酶解多肽的制备工艺及对非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型的修复作用。方法:用质量浓度15μg/m L的软脂酸诱导正常肝Chang liver细胞建立NAFLD模型,以TG含量为指标,筛选酶解文蛤内脏的最佳酶种,通过正交试验、超滤、G-25葡聚糖凝胶层析、高效液相等技术获得酶解产物。将其作用于NAFLD细胞模型,油红O染色后镜下观察形态,检测细胞中的MDA,GSH-ST,ALT,AST,SOD,γ-GT等含量。结果:软脂酸诱导Chang liver细胞48 h后获得NAFLD细胞模型;最佳酶种为碱性蛋白酶,酶解条件为40℃、pH9.5、料液比1∶2、酶解时间12 h,加酶量1 000 U/g;超滤后得到〈5 ku酶解液,经G-25葡聚糖凝胶层析得到4个峰;峰Ⅰ组分的氨基酸序列为Gln-Leu-Asn-Trp-Asp。该多肽能明显降低NAFLD细胞模型内的TG含量,使MDA,ALT,AST,γ-GT的含量下降,SOD,GSH-ST的含量上升,与未用药的模型组细胞相比有统计学意义。结论 :经碱性蛋白酶酶解文蛤得到的多肽,对NAFLD细胞模型具有明显的修复作用。 展开更多
关键词 文蛤 多肽 CHANG liver细胞 NAFLD细胞模型 修复
鳕鱼皮胶原蛋白肽制备及其对肝细胞损伤的保护作用
15
作者 滕芳芳 胡晓斐 +3 位作者 刘晨晨 黄芳芳 丁国芳 《中国食品学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期92-100,共9页
目的:研究鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺及不同浓度的鳕鱼皮胶原蛋白多肽对经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞的修复作用。方法:以料液比、加酶量、酶解时间和酶解温度为因素,MTT试验所得细胞OD值为指标,通过正交试验探讨鳕鱼皮胶原蛋白... 目的:研究鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺及不同浓度的鳕鱼皮胶原蛋白多肽对经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞的修复作用。方法:以料液比、加酶量、酶解时间和酶解温度为因素,MTT试验所得细胞OD值为指标,通过正交试验探讨鳕鱼皮胶原蛋白肽的最佳酶解工艺,并经超滤、阴离子交换、分子层析对其纯化。通过试剂盒法检测该纯化肽作用Chang Liver细胞后,细胞内抗氧化酶和细胞上清液中转氨酶变化情况;采用Hoechst 33258染色法和Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术观察鳕鱼皮胶原蛋白肽作用损伤Chang Liver细胞后的细胞凋亡情况。结果:最优酶解条件:以胰蛋白酶为水解酶,酶解温度50℃,p H 6,加酶量2 000 U/g,酶解时间8 h,经纯化得到蛋白肽GM2-2-3;GM2-2-3作用经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞后,细胞氧化损伤明显减轻,细胞内SOD、CAT、GSH-PX活性上升,MDA的含量下降,并呈剂量依赖性;细胞上清液中AST、ALT、ALP、γ-GT、LDH活性有所下降,且呈剂量依赖性;与损伤组细胞相比,Chang Liver细胞形态较舒展,细胞染色质出现明显的聚集及边集化,细胞核皱缩现象减少,早期凋亡率降低,早期凋亡细胞变少。 展开更多
关键词 鳕鱼皮 胶原蛋白肽 制备技术 辅肝
双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用 预览 被引量:1
16
作者 郑媛媛 丁国芳 +4 位作者 余方苗 贾盈露 吴宗泽 陈锐 《食品科学》 CSCD 北大核心 2017年第23期171-177,共7页
目的:探讨双齿围沙蚕抗凝血肽(anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis,PAAP)的制备及其 抗血栓作用。方法:以抗凝活力为检测指标,筛选最佳酶对沙蚕进行酶解。酶解产物经超滤、阴离子交换层析、 凝胶过滤层析和反... 目的:探讨双齿围沙蚕抗凝血肽(anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis,PAAP)的制备及其 抗血栓作用。方法:以抗凝活力为检测指标,筛选最佳酶对沙蚕进行酶解。酶解产物经超滤、阴离子交换层析、 凝胶过滤层析和反相高效液相色谱法分离纯化,得到具有最强抗凝活力的沙蚕寡肽,将此肽命名为PAAP并测定 其急性毒性作用。采用角叉菜胶所致的小鼠尾部血栓形成实验、三氯化铁所致的大鼠动脉血栓形成实验及二磷 酸腺苷(adenonisine disphosphate,ADP)诱导的血小板聚集实验,研究PAAP的抗血栓作用。结果:选取碱性蛋 白酶作为最佳酶对沙蚕进行酶解,经过分离纯化后得到一条氨基酸序列:脯氨酸-缬氨酸-谷氨酸-精氨酸-赖氨酸 (Pro-Val-Glu-Arg-Lys)。经测定,该寡肽的体外抗凝活力可达(1 320.0±20.3)U/g。PAAP的最大耐受量为 11.0 g/(kg·d)且未出现小鼠异常及死亡现象,体内实验表明PAAP对小鼠尾部血栓的形成、大鼠动脉血栓的形成 及ADP诱导的血小板聚集均有明显抑制作用。结论:从双齿围沙蚕中提取出的抗凝肽PAAP具有抗血栓作用。 展开更多
关键词 双齿围沙蚕 抗凝血肽 碱性蛋白酶 分离纯化 抗血栓
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双齿围沙蚕多肽的制备及其抗肺癌A549细胞活性 预览 被引量:1
17
作者 贾盈露 丁国芳 +4 位作者 余方苗 郑媛媛 吴宗泽 陈锐 《食品科学》 CSCD 北大核心 2017年第12期27-35,共9页
探讨双齿围沙蚕酶解多肽制备的关键技术及其对肺癌A549细胞的作用。以增殖抑制率为指标,确定最佳酶种并根据单因素试验和正交试验确定其最佳酶解工艺。经超滤获得1~3ku的酶解液,通过阴离子色谱、凝胶过滤色谱和制备色谱对其进行进一... 探讨双齿围沙蚕酶解多肽制备的关键技术及其对肺癌A549细胞的作用。以增殖抑制率为指标,确定最佳酶种并根据单因素试验和正交试验确定其最佳酶解工艺。经超滤获得1~3ku的酶解液,通过阴离子色谱、凝胶过滤色谱和制备色谱对其进行进一步的分离纯化。采用四甲基偶氮唑蓝法测定沙蚕多肽PAP对肺癌A549细胞的增殖抑制率并通过倒置显微镜、吖啶橙/溴化乙锭荧光染色及Hoechst荧光染色观察其细胞形态的变化。实验结果表明最佳酶种是碱性蛋白酶,其最佳酶解条件为:酶解温度50℃、pH11、料液比1∶1(g/mL)、酶解时间6h、加酶量300U/g。经纯化获得的多肽命名为PAP,其氨基酸序列为Ile-Glu-Pro-Gly-Thr-Val-Gly-Met-Met-Phe,且PAP对A549细胞的作用呈时间与剂量依赖关系,作用后细胞出现了凋亡的形态学特征。因此,PAP能明显抑制肺癌细胞A549增殖,可以诱导其发生凋亡而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 双齿围沙蚕 多肽 抗肿瘤 A549细胞 细胞凋亡
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4’-甲醚-黄岑素对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响
18
作者 冯播 徐昌芬 《中国妇幼保健》 CAS 2017年第21期5406-5410,共5页
目的探讨4'-甲醚-黄岑素(4'-MS)对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响。方法采用流式细胞术、实时定量PCR法及RT-PCR技术体外观察4'-MS对JAR细胞的影响。结果流式细胞术分析,加药组细胞凋亡率随4'-MS浓度的增加而逐渐升高,G2/M期细胞比例... 目的探讨4'-甲醚-黄岑素(4'-MS)对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响。方法采用流式细胞术、实时定量PCR法及RT-PCR技术体外观察4'-MS对JAR细胞的影响。结果流式细胞术分析,加药组细胞凋亡率随4'-MS浓度的增加而逐渐升高,G2/M期细胞比例显著升高。20、40 mg/ml 4'-MS作用48 h后c-myc及h TERT mRNA的表达量明显低于对照组(P〈0.01)。RT-PCR结果显示,20 mg/ml和40 mg/ml 4'-MS作用后,人绒毛膜癌JAR细胞中Survivin mRNA表达显著下降,而Caspase 9、Caspase 3及p38 MAPK mRNA表达显著上升(P〈0.05)。结论绒毛膜癌JAR细胞在4-MS的作用下发生凋亡的机制与降低c-myc及h TERT mRNA的表达、上调Caspase 9表达、Caspase 3表达、激活p38 MAPK信号通路及抑制Survivin表达相关。 展开更多
关键词 人绒毛膜癌细胞 4’-甲醚-黄芩素(4’-MS) 凋亡
海洋活性物质对肝损伤修复作用的研究进展 预览 被引量:1
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作者 王佳佳 陈锐 +2 位作者 余方苗 丁国芳 《浙江海洋学院学报:自然科学版》 CAS 2016年第1期76-80,共5页
肝脏是人体重要的解毒器官,是各种药物、化学物质代谢的场所。随着人们生活方式及饮食习惯的改变,肝脏疾病如脂肪肝、肝硬化、肝纤维化及肝肿瘤等严重危害人类健康。从海洋中获得高效、低毒的保肝活性物质成为当今研究的热点。本文就国... 肝脏是人体重要的解毒器官,是各种药物、化学物质代谢的场所。随着人们生活方式及饮食习惯的改变,肝脏疾病如脂肪肝、肝硬化、肝纤维化及肝肿瘤等严重危害人类健康。从海洋中获得高效、低毒的保肝活性物质成为当今研究的热点。本文就国内外对肝损伤有修复作用的海洋活性物质,如多糖、多肽、萜类化合物、不饱和脂肪酸、脑苷脂、核苷类、牛磺酸、维生素等研究进展进行综述。 展开更多
关键词 海洋活性物质 肝损伤 修复
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酶解青蛤制备ACE抑制肽的工艺优化 被引量:5
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作者 罗李王 +3 位作者 张亚茹 王飞 余方苗 丁国芳 《食品工业》 CAS 北大核心 2016年第6期56-59,共4页
研究酶解青蛤制备血管紧张素转化酶(Angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽。以ACE抑制率为指标,先筛选最适酶种;探究温度、时间、p H、加酶量和料液比等因素对ACE活性的影响,通过L16(45)正交试验优化酶解工艺。结果表明,最适... 研究酶解青蛤制备血管紧张素转化酶(Angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽。以ACE抑制率为指标,先筛选最适酶种;探究温度、时间、p H、加酶量和料液比等因素对ACE活性的影响,通过L16(45)正交试验优化酶解工艺。结果表明,最适酶为胰蛋白酶,最佳制备工艺条件为:反应温度45℃,反应时间9 h,p H 8.0,加酶量1 200U/g,料液比为1︰2(g/m L)。最佳工艺所得酶解物的ACE抑制率为36.8%。为青蛤的高值化利用提供了理论依据。 展开更多
关键词 青蛤 酶解 血管紧张素转化酶抑制肽 单因素试验 正交试验
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