期刊文献+
共找到104篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
凝结芽孢杆菌对肉兔生产性能、肠道生理的影响
1
作者 任永军 +8 位作者 邝良德 郭志强 古小彬 秦易 雷岷 李丛艳 郑洁 邓小东 《中国养兔》 2019年第5期7-11,共5页
本试验旨在研究不同水平凝结芽孢杆菌制剂对肉兔生产性能、肠道pH值、盲肠菌群和肠道消化酶的影响。选取体重相近、35日龄断奶的新西兰肉兔150只,随机分为3组,每组5个重复,每个重复10只(公母各半)。对照组饲喂基础饲粮,试验1、2组分别... 本试验旨在研究不同水平凝结芽孢杆菌制剂对肉兔生产性能、肠道pH值、盲肠菌群和肠道消化酶的影响。选取体重相近、35日龄断奶的新西兰肉兔150只,随机分为3组,每组5个重复,每个重复10只(公母各半)。对照组饲喂基础饲粮,试验1、2组分别饲喂添加250 mg/kg和300 mg/kg凝结芽孢杆菌的基础饲粮,试验期8周。结果表明:试验1、2组均可显著提高日增重和料重比(P<0.05);显著降低肠道各段pH值(P<0.05);试验1、2组均显著降低盲肠中大肠杆菌和总耗氧菌数量(P<0.05),同时显著增加乳酸杆菌、双歧杆菌及总厌氧菌数量(P<0.05);试验1、2组显著提高了十二指肠中淀粉酶、胰蛋白酶以及盲肠中纤维素酶的活性(P<0.05)。结果表明:在饲粮中添加凝结芽孢杆菌可通过调节肠道pH值,优化和改善盲肠微生物区系,提高消化酶活性等方式来提高生产性能。本试验条件下,凝结芽孢杆菌在肉兔饲粮中的适宜添加量为250~300 mg/kg。 展开更多
关键词 凝结芽孢杆菌 肉兔 生产性能 消化生理
兔脾脏成纤维型细胞RS-17系的建立及其生物学特性 预览
2
作者 罗怡琳 蒙正群 +5 位作者 周丽军 王印 姚学萍 罗燕 耿毅 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期130-135,共6页
采用胰酶消化法培养技术,对乳兔脾脏组织的细胞进行原代培养,从脾脏组织中分离出1株成纤维型细胞,命名为RS-17。通过对细胞传代培养条件优化,细胞标志性蛋白检测,细胞生长曲线分析,细胞核型以及细胞致瘤性等测定,结果显示,RS-17细胞具... 采用胰酶消化法培养技术,对乳兔脾脏组织的细胞进行原代培养,从脾脏组织中分离出1株成纤维型细胞,命名为RS-17。通过对细胞传代培养条件优化,细胞标志性蛋白检测,细胞生长曲线分析,细胞核型以及细胞致瘤性等测定,结果显示,RS-17细胞具有血清依懒性,成纤维细胞标志性蛋白检测阳性,具有正常的核型,无致瘤性,且目前细胞传至95代仍可稳定生长。这为RHDV(兔出血症病毒)感染机制等相关研究提供了细胞材料。 展开更多
关键词 乳兔 脾脏组织 细胞系 生物学特性
在线阅读 下载PDF
基于QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的7种猪病毒检测方法的建立与初步应用 预览
3
作者 邬旭龙 肖璐 +5 位作者 林华 姚学萍 王印 张鹏飞 姜睿姣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期824-829,共6页
为建立同时检测7种常见猪病毒的毛细管凝胶电泳方法,本研究针对猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及非洲猪瘟病毒保守基因,设计7对特异引物,并在引物的5’端加入一段非同... 为建立同时检测7种常见猪病毒的毛细管凝胶电泳方法,本研究针对猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及非洲猪瘟病毒保守基因,设计7对特异引物,并在引物的5’端加入一段非同源性标签序列,再设计一对可识别标签序列的通用引物。经反应条件优化,建立了一种基于QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的7种猪常见病毒多重PCR检测方法。该方法与O型猪口蹄疫病毒(FMDV-O)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等均无交叉反应,特异性强;所建立方法对7种病毒质粒标准品的检测下限分别为4.56×10^3拷贝/μL、6.35×10^3拷贝/μL、1.98×10^3拷贝/μL、1.32×10^4拷贝/μL、3.21×10^3拷贝/μL、4.51×10^3拷贝/μL、3.37×10^3拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验结果显示各靶条带数值间的变异系数均小于1%,该方法稳定,重复性高。该方法对65份临床样本检测结果与国标或行标单一PCR检测方法相比,二者对单一病原和混合病原检测的一致性分别为94.3%(33/35)、77.7%(14/18)。本研究建立的方法为毛细管凝胶电泳技术在动物疾病病原检测中的应用提供一定的参考。 展开更多
关键词 多重PCR QIAxcel毛细管凝胶电泳(QIAxcel CGE) 猪伪狂犬病病毒 猪乙型脑炎病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪细小病毒 非洲猪瘟病毒
在线阅读 下载PDF
副猪嗜血杆菌及巴氏杆菌双重荧光定量PCR检测方法的建立 预览
4
作者 姜睿姣 周丽军 +7 位作者 邬旭龙 张鹏飞 罗梓丹 肖璐 王印 姚学萍 罗燕 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期489-494,共6页
为建立副猪嗜血杆菌(Hps)、多杀性巴氏杆菌(Pm)的双重荧光定量PCR检测方法,本研究基于Hps的Omp P2基因,Pm的PlpE基因设计两对特异性引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种同时检测Hps及Pm的双重荧光定量PCR方法。该方法能够特异性... 为建立副猪嗜血杆菌(Hps)、多杀性巴氏杆菌(Pm)的双重荧光定量PCR检测方法,本研究基于Hps的Omp P2基因,Pm的PlpE基因设计两对特异性引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种同时检测Hps及Pm的双重荧光定量PCR方法。该方法能够特异性地检测Hps和Pm,其对重组质粒标准品的最低检测浓度分别为5.60×10^2拷贝/μL、7.58×10^2拷贝/μL。双重与单一荧光定量PCR最低检测限相同,且均是常规PCR的100倍。重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于2.5%。临床应用结果显示:该方法对阳性样品的检出率为53.57%,明显优于常规PCR和细菌分离鉴定。该方法能够用于两种疾病的同时检测和快速排查疾病。为两种疾病的防治提供有效检测工具。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 巴氏杆菌 双重荧光定量PCR
在线阅读 下载PDF
四川地区猪源致病性大肠埃希菌分子分群、生物被膜形成能力及耐药性研究 预览
5
作者 彭珂楠 周雪珂 +8 位作者 殷鑫欢 李飞 蔡瑶 曾喻兵 江朝源 张儒博 徐志文 朱玲 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第10期1599-1607,共9页
为了解四川地区猪源致病性大肠埃希菌分子流行特点及流行趋势,本研究在2016—2018年,从四川省各个地区无菌采集患病猪肝脏、脾脏、肺脏、肠道等组织样品208份。通过细菌分离鉴定方法筛选出87株大肠埃希菌,通过小鼠攻毒试验确定其中22株... 为了解四川地区猪源致病性大肠埃希菌分子流行特点及流行趋势,本研究在2016—2018年,从四川省各个地区无菌采集患病猪肝脏、脾脏、肺脏、肠道等组织样品208份。通过细菌分离鉴定方法筛选出87株大肠埃希菌,通过小鼠攻毒试验确定其中22株为致病性大肠埃希菌,并对其进行分子分群、生物被膜形成能力检测、耐药性试验、耐药基因及HPI毒力基因检测。结果显示,22株致病性大肠埃希菌多分布于A群(59.09%),且生物被膜形成阳性率为72.73%,其中强成膜能力菌株占40.91%。大肠埃希菌对19种抗生素药物均有不同程度的耐药性,其中对恩诺沙星、复方新诺明、氨苄西林、阿莫西林、红霉素、四环素等9种药物的耐药率较高,为81.82%~100%;对庆大霉素、左氧氟沙星、诺氟沙星、头孢曲松等4种药物的耐药率为63.64%~72.73%;对其他药物的耐药率为4.55%~54.55%,均呈现多重耐药。22株致病性大肠埃希菌检出的耐药基因包括β-内酰胺类TEM(36.36%)、SHV(9.09%)、OXA(9.09%),磺胺类sulⅠ(63.64%)、sulⅡ(95.45%),氨基糖苷类acc(3)-Ⅱ(68.18%)、aph(3′)-Ⅱ(50.00%),氯霉素类cmlA(45.45%)、floR(81.82%),四环素类tetA(81.82%)、tetB(86.36%),喹诺酮类qurB(40.91%)共12个基因型,检测出HPI毒力基因irp1(40.91%)、irp2(13.64%)、fyuA(13.64%)3种。研究结果表明,四川省猪源致病性大肠埃希菌多分布于A群,生物被膜形成阳性率较高,存在严重的多重耐药性,四环素类、氯霉素类、氨基糖苷类及磺胺类耐药基因的携带率较高,且存在多重耐药基因与毒力基因共存情况。研究结果可为四川地区猪病的预防和治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 耐药基因 HPI毒力岛基因 系统进化分群
在线阅读 下载PDF
豪猪源福氏志贺菌的分离鉴定及喹诺酮类耐药基因检测 预览
6
作者 张鹏飞 王印 +4 位作者 德西措姆 姚学萍 罗燕 廖倡宇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期204-208,共5页
为调查四川省某规模化豪猪养殖场中豪猪大面积腹泻死亡的原因,本研究采集病死豪猪的肠道内容物和肺脏等病料样品进行细菌的分离纯化,通过培养特性观察、革兰染色镜检、生化鉴定、16S rRNA基因的克隆测序进行鉴定,并对分离菌株进行致病... 为调查四川省某规模化豪猪养殖场中豪猪大面积腹泻死亡的原因,本研究采集病死豪猪的肠道内容物和肺脏等病料样品进行细菌的分离纯化,通过培养特性观察、革兰染色镜检、生化鉴定、16S rRNA基因的克隆测序进行鉴定,并对分离菌株进行致病性、耐药性分析,对其喹诺酮类耐药基因进行PCR检测并测序分析。结果显示,分离得到1株革兰阴性菌,该分离株符合福氏志贺菌的培养特性和生化特性,并且其16S rRNA基因序列与福氏志贺菌该基因序列的同源性为99%;对小鼠具有较强致病性;药敏试验结果显示分离株具有多重耐药性,仅对丁胺卡那敏感,对喹诺酮类、四环素类、头孢类、氨基糖苷类、青霉素类和氯霉素类药物均表现为耐药;分离株的DNA促旋酶Ⅱ和拓扑异构酶Ⅳ的喹诺酮耐药决定区均有突变,且携带有质粒介导的喹诺酮耐药基因qnr A和qnr S。本研究是国内首次关于豪猪源福氏志贺菌病的报道,为豪猪养殖中该细菌性疾病的诊断防治等相关研究提供参考。 展开更多
关键词 豪猪 福氏志贺菌 分离鉴定 人兽共患病 喹诺酮耐药
在线阅读 下载PDF
非洲猪瘟检测技术进展
7
作者 姜睿姣 张鹏飞 +5 位作者 朱光恒 罗梓丹 王印 姚学萍 罗燕 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期523-532,共10页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的一种急性、烈性、高病死率的传染病。ASFV能感染所有品种及各个年龄段的猪,目前暂无针对ASF的疫苗。在流行ASF的国家,防止其传播只能依靠准... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的一种急性、烈性、高病死率的传染病。ASFV能感染所有品种及各个年龄段的猪,目前暂无针对ASF的疫苗。在流行ASF的国家,防止其传播只能依靠准确的诊断和严格的检疫措施。因此,快速可靠的检测方法对于及时诊断和预防该病是至关重要的。本文旨在归纳总结非洲猪瘟检测方法和技术手段,为在不同现场情况下都能快速排查非洲猪瘟提供更多选择。 展开更多
关键词 非洲猪瘟(ASF) 非洲猪瘟病毒(ASFV) 诊断技术 检测方法
猪源蜡样芽孢杆菌的分离鉴定与部分生物学特性分析 预览
8
作者 江地科 项明源 +6 位作者 王印 姚学萍 张鹏飞 廖倡宇 朱光恒 姜睿娇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1063-1066,共4页
为探究引起四川省某规模化猪场哺乳仔猪死亡病原,本研究从病死哺乳仔猪心脏中分离到一株革兰阳性菌,将其命名为SN1711,对该菌进行形态学观察、生化鉴定、16S r RNA测序鉴定、小鼠致病性试验、药敏试验及部分耐药基因检测。结果显示,该... 为探究引起四川省某规模化猪场哺乳仔猪死亡病原,本研究从病死哺乳仔猪心脏中分离到一株革兰阳性菌,将其命名为SN1711,对该菌进行形态学观察、生化鉴定、16S r RNA测序鉴定、小鼠致病性试验、药敏试验及部分耐药基因检测。结果显示,该分离株鉴定为猪源蜡样芽孢杆菌(B.cereus),16S rRNA基因序列与Gen Bank中B.cereus B158 (KF494191.1)相似度为98.13%,对小鼠致病性强。药敏试验显示分离株对氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类药物敏感,对青霉素类、头孢类药物耐药。β-内酰胺酶类耐药基因PCR检测仅扩增出569 bp的BLA-tem基因片段,与GenBank登录的BLA-tem基因序列相似性达99.63%,表明耐药表型与耐药基因型一致。本研究为针对该菌的临床用药、检测和疾病防控奠定基础。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 分离鉴定 16S rRNA 耐药性
在线阅读 下载PDF
降低中华绒螯蟹体内镉含量的安全养殖模式研究 预览
9
作者 侯义宏 +3 位作者 禹思宇 李亚兰 张体银 刘利荣 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期45-49,共5页
为探讨降低该地区存在的养殖河蟹Eriocheir sinensis体内重金属镉含量超标问题,根据河蟹污染的溯源分析,通过改变河蟹不同养殖阶段的饵料(螺蛳、小杂鱼等)结构,调整饲养模式(网箱养殖),降低河蟹体内Cd含量,确保其Cd含量符合国家标准。... 为探讨降低该地区存在的养殖河蟹Eriocheir sinensis体内重金属镉含量超标问题,根据河蟹污染的溯源分析,通过改变河蟹不同养殖阶段的饵料(螺蛳、小杂鱼等)结构,调整饲养模式(网箱养殖),降低河蟹体内Cd含量,确保其Cd含量符合国家标准。本文的安全养殖模式为:1—2月大湖养殖,每667m2投放100~200只/kg的长江系幼蟹2 kg;1—4月投喂螺蛳,4月兼投少量小杂鱼,5—11月投喂小杂鱼;1—8月自然水底养殖;9—11月期间,在上市前1个月进行网箱养殖。2016年和2017年跟踪监测显示:该模式养殖的河蟹体内Cd含量均符合国家标准。 展开更多
关键词 河蟹 镉污染 安全养殖
在线阅读 下载PDF
四川部分地区禽源空肠弯曲菌MLST分型及遗传进化分析 预览
10
作者 姚学萍 张博 +6 位作者 王寒 邬旭龙 周丽军 曹随忠 王印 德西措姆 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期5-10,共6页
目的 为了解四川部分地区分离到的48株禽源空肠弯曲菌间的分子特征,以对来源不同的空肠弯曲菌进行分子分型及遗传进化分析。方法 本研究参照MLST数据库,选取了空肠弯曲菌MLST分型7个管家基因aspA,glnA,glyA,gltA,tkt,pgm和uncA作为目的... 目的 为了解四川部分地区分离到的48株禽源空肠弯曲菌间的分子特征,以对来源不同的空肠弯曲菌进行分子分型及遗传进化分析。方法 本研究参照MLST数据库,选取了空肠弯曲菌MLST分型7个管家基因aspA,glnA,glyA,gltA,tkt,pgm和uncA作为目的基因分别扩增及测序,并将所得序列经比对后进行遗传进化分析。结果 48株分离株中共含24种不同的序列型分属于9种不同的克隆系及11种独特型,其中22株分离株含有新序列型,占分离株的45.83%(22/48);9种不同的克隆系中以CC-21、CC-353、CC-464克隆系所含菌株相对较多,而克隆系CC-45、CC-48最少,均为1株分离株;11种独特型共存于21株分离株中,其中以ST-8675序列型最多,为8株。遗传进化树显示,属同一克隆系的不同型别间的分离株亲缘关系较近,如同属于CC-21克隆系的ST-298与ST-760型别分离株处于同一小分支、亲缘关系较近,但不同克隆系的分离株间遗传进化关系较远,鹌鹑源分离株(V13-20)单独处于一大分支与其余禽源分离株间的亲缘关系最远。总体而言,不同地区、宿主来源的分离株呈现遗传多样性。结论 本研究中分离株间具有基因多样性,MLST分型为了解该地区空肠弯曲菌的遗传特性和分布特点提供了参考依据。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 MLST分型 管家基因 遗传进化
在线阅读 下载PDF
2016—2018年四川地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查与ORF3、S1部分基因序列分析 预览
11
作者 德西措姆 王印 +8 位作者 姚学萍 罗燕 廖倡宇 张鹏飞 江地科 项明源 姜瑞姣 宋勇 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第9期1423-1428,共6页
为分析四川地区猪流行性腹泻流行状况及分子遗传演化特征,对2016年6月至2018年6月收集的71份猪腹泻病例进行RT-PCR检测与相关的流行病学调查,并对其中4份阳性样品进行ORF3、S1基因的检测与序列分析。结果显示,近2年的发病高峰日分别在1... 为分析四川地区猪流行性腹泻流行状况及分子遗传演化特征,对2016年6月至2018年6月收集的71份猪腹泻病例进行RT-PCR检测与相关的流行病学调查,并对其中4份阳性样品进行ORF3、S1基因的检测与序列分析。结果显示,近2年的发病高峰日分别在1月28日和2月11日,发病高峰期在12月至3月;猪场连年感染数量下降,新疫源地增加;ORF3基因可分为2个基因型,部分毒株发生少量碱基突变;从S1基因高变区段分型结果显示,2016年底至2018年初流行的PEDV毒株为GⅡ群,与目前流行的PEDV变异毒株在同一分支,同源性为92.8%~99.3%,碱基变异数量较大,与国内的经典疫苗株CV777亲缘关系较远,同源性为82.7%~87.3%,发病时期更集中,较传统PEDV有轻度后移。结果表明,四川地区规模化猪场PED发病率呈下降趋势,对于该病的防控取得初步成效。目前流行PEDV毒株有变异的趋势,为PEDV的防控奠定基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 流行病学调查 基因序列分析
在线阅读 下载PDF
母猪不同阶段免疫猪瘟对其繁殖性能的影响 预览
12
作者 廖利 费磊 +7 位作者 何磊 赵世平 王印 姚学萍 张鹏飞 廖倡宇 项明源 《猪业科学》 2018年第11期100-103,共4页
为了比较“普免”和产后跟胎免疫这2种免疫接种方式对母猪繁殖性能的影响,该试验研究选取饲养管理规范、生产水平较高的乐山市某规模化猪场对近3年来的母猪配种分娩率、窝均总仔、窝均健仔、窝均死胎、木乃伊胎等进行了统计分析,对采取... 为了比较“普免”和产后跟胎免疫这2种免疫接种方式对母猪繁殖性能的影响,该试验研究选取饲养管理规范、生产水平较高的乐山市某规模化猪场对近3年来的母猪配种分娩率、窝均总仔、窝均健仔、窝均死胎、木乃伊胎等进行了统计分析,对采取“普免”程序后2年内同时间段所配种的7 405胎次,作横向比较分娩率分别为90.23%和91.06%,差异不显著;同时纵向统计(即采取普免程序的2015年5月-2017年5月母猪所配种的7 405窝与跟胎免疫的2014年4月-2015年4月所配种的4 320窝)分娩率分别为90.37%和87.72%,提高分娩率2.65%.产后20 d免疫、妊娠1~30d、31~60d、61~90 d和91 d至分娩免疫的窝平总产仔数分别为12.21、12.19、12.17、12.07和12.10,差异不显著;窝平均活产仔率分别为95.17%、95.49%、95.89%、94.53%和95.37%,差异不显著.综合结果表明猪瘟传代细胞疫苗“普免”对母猪的分娩率、产仔数和产仔质量无显著影响,可以作为规模猪场母猪猪瘟免疫程序之一. 展开更多
关键词 猪瘟 不同阶段免疫 繁殖性能
在线阅读 下载PDF
支气管败血波氏杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立 预览
13
作者 尹清清 德西措姆 +5 位作者 罗怡琳 邬旭龙 张鹏飞 姚学萍 王印 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期917-921,共5页
为建立支气管败血波氏杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,本研究根据波氏菌属毒力基因DNT设计一对特异性引物,通过优化,确定最佳反应条件,建立了支气管败血波氏杆菌荧光定量 PCR 检测方法。并对其进行敏感性、特异性、重复性试... 为建立支气管败血波氏杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,本研究根据波氏菌属毒力基因DNT设计一对特异性引物,通过优化,确定最佳反应条件,建立了支气管败血波氏杆菌荧光定量 PCR 检测方法。并对其进行敏感性、特异性、重复性试验以及临床样品的检测。以支气管败血波氏杆菌标准质粒为模板,建立标准曲线结果显示:标准品浓度在1.13×10^8拷贝/μL~1.13×10^2 拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,相关数R^2=0.997;该方法的灵敏度可达1.13×10^1拷贝/μL。建立的荧光定量PCR方法与副猪嗜血杆菌、猪链球菌、金黄色葡萄球菌等 12 种细菌和伪狂犬病毒、猪瘟病毒等4种病毒无交叉反应,具有良好的特异性;批内变异系数(CV)均小于 2 % ,批间变异系数均小于4 %,具有良好的稳定性。对临床样品的检测结果显示该方法检测的阳性率为57.7 %,与普通PCR的符合率为93.24 %。本研究建立的方法可以用作支气管败血波氏杆菌感染的早期诊断、快速检测与定量分析。 展开更多
关键词 支气管败血波氏杆菌 荧光定量PCR 皮肤坏死毒素基因 定量分析
在线阅读 下载PDF
空肠弯曲菌CRISPR-Cas系统生物信息学分析 预览
14
作者 张博 姚学萍 +2 位作者 曹随忠 王印 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期960-964,共5页
为分析GenBank中登录的国内外空肠弯曲菌及其亚种中所含CRISPR-Cas系统的结构特征及同源关系,本研究利用生物信息学方法预测GenBank中已登录的空肠弯曲菌所含的CRISPR-Cas系统的基因序列,对其进行比对、保守性分析、RNA二级结构预测... 为分析GenBank中登录的国内外空肠弯曲菌及其亚种中所含CRISPR-Cas系统的结构特征及同源关系,本研究利用生物信息学方法预测GenBank中已登录的空肠弯曲菌所含的CRISPR-Cas系统的基因序列,对其进行比对、保守性分析、RNA二级结构预测、重复序列的GC含量分析及其遗传进化分析。结果显示,空肠弯曲茵及其亚种中所含CRISPR-Cas系统的重复序列高度保守、GC含量较低(28.57%以下),差异性主要呈现于两端游离部分;CRISPR中的间隔序列差异性较大致使CRISPR具有多态性;Cas蛋白序列同源性较高(96.8%以上),遗传动态变化较低,与基因水平转移产生的趋同进化有潜在相关性。空肠弯曲茵CRISPR-Cas系统中的间隔序列具有多态性与该菌的遗传进化差异有关,重复序列及cas基因保守性较强,与其共同进化有潜在相关性。通过对不同空肠弯曲菌CRISPR-Cas系统生物信息学分析,为进一步研究该茵CRISPR-Cas系统结构特征、基因进化关系奠定了基础。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 CRISPR-Cas系统 重复序列 间隔序列 生物信息学
在线阅读 下载PDF
2株兔出血症病毒全基因测定与遗传进化分析 预览
15
作者 蒙正群 周丽军 +6 位作者 罗怡琳 冷依伊 张鹏飞 王印 姚学萍 耿毅 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期854-861,共8页
对2株兔出血症病毒(RHDV)SCH04、Sch07进行全基因组序列测定,并进行同源性及遗传进化分析。按照病毒核酸组成,将病毒基因分7段进行RT-PCR扩增,将分段扩增产物分别克隆到p MD-19T载体进行测序,用DNAStar进行拼接,得到全基因组序列;参照... 对2株兔出血症病毒(RHDV)SCH04、Sch07进行全基因组序列测定,并进行同源性及遗传进化分析。按照病毒核酸组成,将病毒基因分7段进行RT-PCR扩增,将分段扩增产物分别克隆到p MD-19T载体进行测序,用DNAStar进行拼接,得到全基因组序列;参照Gen Bank上登陆的31株RHDV毒株全基因核苷酸序列、VP60基因核苷酸序列以及ORF2编码基因核苷酸序列对2株病毒进行同源性和遗传进化分析。结果显示,SCH04基因组全长7 439 bp,Sch07基因组全长7 438 bp,2株病毒全基因的核苷酸序列同源性为99.8%,与31株参考毒株全基因的核苷酸序列同源性为78.3%-97.0%;2株病毒的VP60基因核苷酸序列同源性为99.7%,ORF2编码基因核苷酸序列同源性为99.2%。进化树显示2株病毒同属于抗原变异株RHDVa(GI.1a)基因群,且亲缘关系最近。VP60基因核苷酸序列与ORF2编码基因核苷酸序列均可以作为RHDV遗传进化分析。 展开更多
关键词 兔出血症病毒 全基因 序列 遗传进化
在线阅读 下载PDF
裂谷热病毒两种PCR检测方法的建立及比较分析 预览
16
作者 冷依伊 王印 +5 位作者 项明源 张鹏飞 蒋子睿 江地科 姚学萍 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期504-508,共5页
裂谷热(RVF)具有较高的发病率与死亡率,极大危害着当地养殖业和生态系统的稳定。为建立一种能够快速有效检测裂谷热病毒(RVFV)的方法,本研究根据RVFV的保守序列设计了特异性引物与探针,分别建立了探针PCR和荧光PCR,并对这两种检测... 裂谷热(RVF)具有较高的发病率与死亡率,极大危害着当地养殖业和生态系统的稳定。为建立一种能够快速有效检测裂谷热病毒(RVFV)的方法,本研究根据RVFV的保守序列设计了特异性引物与探针,分别建立了探针PCR和荧光PCR,并对这两种检测方法进行比较分析。结果显示,两种检测方法均不存在非特异扩增;最低检测浓度分别为1.03×10^-2拷贝/μL和1.03×10^0拷贝/μL,前者比后者有更高的灵敏度;探针PCR和荧光PCR组内和组间变异系数均小于3%。实验表明,探针PCR具有特异性强、灵敏度高、稳定性好、准确度高、检测速度快等优点。因此,探针PCR是一种灵敏度和可靠性均较高的RVFV检测方法。 展开更多
关键词 裂谷热病毒 探针PCR 荧光PCR
在线阅读 下载PDF
基于牛源布氏杆菌重组膜蛋白的胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量:2
17
作者 刘亚东 王慧煜 +3 位作者 刘佳佳 梅琳 韩雪清 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第7期805-810,共6页
为研制一种快速检测牛源布氏杆菌的免疫层析技术,本研究对牛布氏杆菌外膜蛋白omp22进行表达纯化,并用新西兰大白兔制备omp22多克隆抗体,将omp22蛋白作为胶体金标记物,家兔抗牛Ig G用于检测线,多抗用于质控线,制备了胶体金免疫层析检测... 为研制一种快速检测牛源布氏杆菌的免疫层析技术,本研究对牛布氏杆菌外膜蛋白omp22进行表达纯化,并用新西兰大白兔制备omp22多克隆抗体,将omp22蛋白作为胶体金标记物,家兔抗牛Ig G用于检测线,多抗用于质控线,制备了胶体金免疫层析检测抗体试纸条。结果显示,成功诱导表达大小为74 ku的可溶性重组蛋白omp22,且纯化后的重组蛋白omp22的浓度为2 mg/m L,纯度在85%以上;该胶体金试纸条在阳性血清稀释至1∶64时仍可见清晰条带;与牛结核、牛蓝舌病、牛病毒性腹泻、牛口蹄疫、牛巴氏杆菌病、牛地方流行性白血病阳性血清均无交叉反应;与国外商品化试剂盒比较,试纸条检测结果与ELISA检测试剂盒(IDEXX)的符合率为94.2%(49/52),与牛羊布病抗体检测卡(KERNEL)的符合率为96%(49/50)。整个检测过程可在10 min内完成,肉眼即可判断。以上结果表明,该试纸条具有良好的重复性、敏感性和特异性,可适用于牛源血清中布氏杆菌病抗体的现场快速检测和筛选工作。 展开更多
关键词 布氏杆菌 外膜蛋白omp22 多克隆抗体 胶体金 免疫层析试纸条
15株禽源空肠弯曲菌的分离鉴定及CheW基因序列分析 预览 被引量:2
18
作者 张博 姚学萍 +5 位作者 王印 邬旭龙 莫亚霞 周丽军 廖倡宇 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期78-81,共4页
为了了解四川地区禽源空肠弯曲菌流行菌株的感染情况及其CheW基因的变异特点,本研究于四川地区采集禽源盲肠及内容物对空肠弯曲菌进行分离并纯化培养,将分离菌株进行染色镜检、生化试验、16S rRNA基因 PCR鉴定,并对分离株的CheW基因... 为了了解四川地区禽源空肠弯曲菌流行菌株的感染情况及其CheW基因的变异特点,本研究于四川地区采集禽源盲肠及内容物对空肠弯曲菌进行分离并纯化培养,将分离菌株进行染色镜检、生化试验、16S rRNA基因 PCR鉴定,并对分离株的CheW基因进行克隆测序,选取GenBank中登录的10株国内外空肠弯曲菌菌株与分离株进行CheW基因的序列分析及遗传进化分析。结果显示:分离株经纯化培养于哥伦比亚血琼脂培养基上后出现无溶血现象的菌落;革兰染色为阴性;生化代谢类型较稳定且与相关报道一致;16S rRNA基因序列与空肠弯曲菌(NCTC11168、YQ2210)等菌株同源性为99 %以上。15株分离菌株的CheW基因的核苷酸序列与所选参考株一致性为98.68 %,其推导的氨基酸序列同源性一致性在98.9 %以上。其中鹌鹑源分离株CJ-1、CJ-2、CJ-4、CJ-13、CJ-14在第22位和161位均出现单个碱基的置换为A→G。本实验中分离菌株均为空肠弯曲菌且分离菌株之间CheW基因保守性强,遗传变异动态性较弱。本研究为空肠弯曲菌遗传变异方面的相关动态研究提供参考依据。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 分离鉴定 CheW基因 序列分析
在线阅读 下载PDF
猪源嗜麦芽寡养单胞菌的分离鉴定与生物学分析
19
作者 张鹏飞 王印 +2 位作者 姚学萍 张博 《中国农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期45-52,共8页
从四川省某规模化养猪场病死猪肺脏分离得到1株嗜麦芽寡养单胞菌,分析其生物学特性,为临床鉴别诊断和治疗提供参考。观察分离株的染色特点、培养特性,并通过生化试验进行鉴定;测定分离株对小鼠的LD;。并进行药物敏感试验,以分析... 从四川省某规模化养猪场病死猪肺脏分离得到1株嗜麦芽寡养单胞菌,分析其生物学特性,为临床鉴别诊断和治疗提供参考。观察分离株的染色特点、培养特性,并通过生化试验进行鉴定;测定分离株对小鼠的LD;。并进行药物敏感试验,以分析分离株的致病性与耐药性;测序分析分离株16SrRNA基因序列,构建系统进化发育树。结果表明:该分离株的16SrRNA基因序列与嗜麦芽寡养单胞茵的同源性为99%;在TSA琼脂培养基上培养18h后可长成灰白色、光滑的露珠样小菌落,在血琼脂上菌落周围呈现a溶血;对小鼠的致病性试验测得LD5。为6.62×10’du/只;药敏试验发现分离株对多粘菌素B较为敏感,对喹诺酮类、四环素类、头孢类、碳青酶烯类和氨基糖苷类药物均表现为耐药。经鉴定,分离株为嗜麦芽寡养单胞菌,致病性较强,对多种药物耐药。该研究为该菌的临床诊断、选药治疗、疾病控制等奠定了基础。 展开更多
关键词 嗜麦芽寡养单胞菌 16S RRNA 分离鉴定 人兽共患病
猪源莫拉菌的分离鉴定与部分生物学特性分析 预览 被引量:3
20
作者 廖倡宇 张鹏飞 +7 位作者 王印 姚学萍 姜睿姣 邬旭龙 张博 周丽军 宋勇 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期36-42,共7页
从病死仔猪心脏中分离到一株革兰阴性菌,对该细菌进行形态学观察、生化鉴定、16S rDNA序列测定,确认该菌为猪源莫拉菌属亚种,将该菌株命名为猪源莫拉菌-ZY20001。对菌株进行致病性试验、药敏试验和部分耐药基因的检测。结果显示,该菌引... 从病死仔猪心脏中分离到一株革兰阴性菌,对该细菌进行形态学观察、生化鉴定、16S rDNA序列测定,确认该菌为猪源莫拉菌属亚种,将该菌株命名为猪源莫拉菌-ZY20001。对菌株进行致病性试验、药敏试验和部分耐药基因的检测。结果显示,该菌引起小鼠胸腔积液,不致死,对红霉素、青霉素、多粘菌素等21种抗生素药物表现不同程度的敏感,对哌拉西林耐药。菌株ZY20001具有TEM型β-内酰胺酶耐药基因,表型与基因型不符。该实验可为深入研究莫拉菌的分类进化及药物治疗提供参考依据,同时对青霉素耐药表型与基因型关系所做的初步探讨也丰富了流行病学调查资料。 展开更多
关键词 莫拉菌属 分离鉴定 16S RDNA 耐药性
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈