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橡胶树炭疽菌CsHog1基因的克隆和原核表达分析 预览
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作者 廖小淼 何其光 +6 位作者 刘耀 徐良向 周晓韵 刘文波 张宇 春花 缪卫国 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期932-938,共7页
HOG MAPK途径在植物病原真菌生长发育、致病过程和对杀菌剂敏感性等方面发挥重要功能,但在不同的病原真菌中具有一定差异。为研究Hog1蛋白在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)中的功能和调控机制,本研究利用同源克隆法克隆获得橡... HOG MAPK途径在植物病原真菌生长发育、致病过程和对杀菌剂敏感性等方面发挥重要功能,但在不同的病原真菌中具有一定差异。为研究Hog1蛋白在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)中的功能和调控机制,本研究利用同源克隆法克隆获得橡胶树炭疽菌(C. siamense)的CsHog1基因,构建GST-CsHog1融合表达载体,利用SDS-PAGE和WesternBlot检测蛋白表达情况。结果表明:橡胶树炭疽菌(C.siamense)的CsHog1基因大小1383 nt,编码459个氨基酸,包含5个内含子,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域;聚类分析显示橡胶树炭疽菌的CsHog1基因编码的氨基酸序列与黄瓜炭疽菌的ClOsc1(Hog1同源基因)同源性最高。所构建的蛋白融合表达载体在供试条件下(IPTG0.3、0.5、0.8、1.0 mmol/L;温度16、25、28℃)均可较好诱导表达,GST-CsHog1融合蛋白大小约为70 ku。用GST亲和层析柱纯化获得蛋白,经Western Blot检测显示该蛋白可与GST单克隆抗体特异性结合。 展开更多
关键词 橡胶树 橡胶树炭疽菌 Hog1基因 蛋白纯化 原核表达
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巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)HbMlo2基因克隆与表达分析
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作者 刘承圆 何其光 +1 位作者 春花 缪卫国 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1512-1518,共7页
Mlo (mildew resistance locus O)是一种植物防卫相关基因,对植物的抗病性有负向调控作用。本研究采用基因编辑技术等方法为培育橡胶树抗病品种作出铺垫,进一步填补Mlo家族成员。通过对拟南芥的AtMlo2基因在巴西橡胶树上进行比对,根据... Mlo (mildew resistance locus O)是一种植物防卫相关基因,对植物的抗病性有负向调控作用。本研究采用基因编辑技术等方法为培育橡胶树抗病品种作出铺垫,进一步填补Mlo家族成员。通过对拟南芥的AtMlo2基因在巴西橡胶树上进行比对,根据同源性克隆得到一个cDNA序列,将其命名为HbMlo2。根据生物信息学分析得出,该基因cDNA全长1 725 bp,编码574个氨基酸,该蛋白的分子量为65.78 kD,等电点为8.98,8个跨膜域,没有信号肽,HbMlo2基因与已知的木薯的Mlo基因相似性达到83%。白粉菌侵染橡胶树叶组织后,通过qRT-PCR发现HbMlo2基因显著上调。本研究结果初步表明,HbMlo2可能参与橡胶树的抗病反应机制,为橡胶树抗病育种的研究提供新思路。 展开更多
关键词 巴西橡胶树(Hevea brasiliensis) HbMlo2基因 生物信息学 MLO (mildew resistance LOCUS O)
橡胶树炭疽菌CsPbs2基因的原核表达分析
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作者 廖小淼 何其光 +6 位作者 刘耀 徐良向 龙熙平 刘文波 张宇 春花 缪卫国 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期2126-2132,共7页
HOG MAPK途径参与植物病原真菌生长发育、致病和对杀菌剂敏感性等过程,CsPbs2基因是HOG MAPK信号通路的关键成员。为研究CsPbs2蛋白的互作蛋白及其调控机制,本研究克隆了橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense) CsPbs2基因,构建融合蛋... HOG MAPK途径参与植物病原真菌生长发育、致病和对杀菌剂敏感性等过程,CsPbs2基因是HOG MAPK信号通路的关键成员。为研究CsPbs2蛋白的互作蛋白及其调控机制,本研究克隆了橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense) CsPbs2基因,构建融合蛋白表达载体,利用SDS-PAGE和Western Blot检测蛋白表达。结果显示橡胶树炭疽菌(C. siamense)的CsPbs2基因全长2 051 bp,编码667个氨基酸,包含个1个内含子,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域。CsPbs2基因在进化关系上与球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的Pbs2基因有最近的亲缘关系。构建的GST-CsPbs2蛋白融合表达载体在供试条件下(IPTG:0.6 mmol/L, 0.8 mmol/L,1.0 mmol/L温度16℃和25℃)均可较好诱导表达,GST-CsPbs2融合蛋白大小约为96 kD。用GST亲和层析柱纯化获得蛋白,经Western Blot检测显示该蛋白可与GST单克隆抗体特异性结合。本研究成功构建了GSTCsPbs2蛋白融合表达载体,纯化得到GST-CsPbs2融合蛋白,为后续利用Pull-down技术钓取Cs Pbs2的互作蛋白提供基础。 展开更多
关键词 橡胶树 橡胶树炭疽菌 Pbs2基因 蛋白纯化 原核表达
启动子探针载体的构建及橡胶树白粉菌启动子筛选鉴定 预览
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作者 徐良向 刘耀 +6 位作者 廖小淼 王义 M.J.N.Rajaofera 何其光 刘文波 春花 缪卫国 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期51-57,共7页
旨在构建适于快速检测橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)HO-73启动子的探针载体。以卡那霉素抗性基因Kan作为报告基因,在pUC19骨架载体,构建获得启动子探针载体pUC19-K,连入CaMV35S启动子做启动子探针载体功能验证;利用启动子探针载体pUC1... 旨在构建适于快速检测橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)HO-73启动子的探针载体。以卡那霉素抗性基因Kan作为报告基因,在pUC19骨架载体,构建获得启动子探针载体pUC19-K,连入CaMV35S启动子做启动子探针载体功能验证;利用启动子探针载体pUC19-K对预测的启动子片段LY1、LY2、LY3、LY4进行筛选鉴定。将CaMV35S启动子连入到启动子探针载体中,得到可检测启动子活性的启动子探针载体pUC19-K;应用生物信息学软件对部分橡胶树白粉菌HO-73全基因组数据预测,得到4个理论上具有活性的启动子序列LY1、LY2、LY3、LY4,利用构建的启动子活性探针载体进行活性比较,卡那耐受性实验检测发现含LY2和LY3的菌株随卡那霉素浓度的升高耐受性更强,最终得到2个活性较强的启动子LY2和LY3。以上结果表明,构建的启动子活性探针载体可以有效、灵敏地用于HO-73强启动子的筛选和启动子活性检测。 展开更多
关键词 橡胶树白粉菌 启动子 探针载体
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应用全基因组测序鉴定一例新发的染色体结构异常
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作者 张芹 偶健 +5 位作者 王玮 冯涛 段程颖 李培培 春花 李红 《中华医学遗传学杂志》 CSCD 2018年第1期96-99,共4页
目的探讨全基因组测序在鉴定新发染色体结构异常方面的应用价值。方法应用全基因组测序检测1例外周血染色体核型为46,XY,ins(3)(q21p13p21)的患儿,其异常表型包括眼裂小、睑下垂、鼻梁低平等。结果全基因组测序提示患儿的染色体... 目的探讨全基因组测序在鉴定新发染色体结构异常方面的应用价值。方法应用全基因组测序检测1例外周血染色体核型为46,XY,ins(3)(q21p13p21)的患儿,其异常表型包括眼裂小、睑下垂、鼻梁低平等。结果全基因组测序提示患儿的染色体断裂发生于3号染色体的55473257~78341929位置,这段序列插入到了3号染色体136876730~138643831的位置,所涉及的4个染色体断裂点均发生于基因间区,此外患儿在138643831~138694476之间的序列发生了缺失,其间包含睑裂狭小一睑下垂倒向型内眦赘皮综合征(blepharophimosis-ptosis epicanthus inversus syndrome)的重要致病基因FOXL2。结论染色体结构异常有可能造成断裂处基因的破坏或者在断裂区域发生染色体微缺失。要准确判断其致病性,需要同时进行基因和基因组层面的检测,而全基因组测序已成为其可选的方案。 展开更多
关键词 全基因组测序 新发突变 染色体结构异常 FOXL2基因 睑裂狭小-睑下垂-倒向 型内眦赘皮综合征
电感耦合等离子体串联质谱与电感耦合等离子体质谱法测定蜂蜜中微量硒的对比研究 预览
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作者 春花 谢贤清 +3 位作者 刘德永 邱春新 廖维 宋永海 《分析科学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期596-600,共5页
利用微波消解-电感耦合等离子体串联质谱(ICP-MS/MS)技术,建立了一种快速测定蜂蜜中微量Se的方法。在MS/MS模式下设置Q1为(m/z)78、80、82,使用O2作为池气体,设定流速为0.40mL/min,Se~+与O2反应后生成SeO+,再将Q2分别设置为(m/z... 利用微波消解-电感耦合等离子体串联质谱(ICP-MS/MS)技术,建立了一种快速测定蜂蜜中微量Se的方法。在MS/MS模式下设置Q1为(m/z)78、80、82,使用O2作为池气体,设定流速为0.40mL/min,Se~+与O2反应后生成SeO+,再将Q2分别设置为(m/z)94、96、98,然后进行测定。研究表明:Q1=78/Q2=94的质量对在0.041~5μg/L范围内线性关系良好(R=0.9999),检出限为0.013μg/L,样品加标回收率为89.3%~106.7%,相对标准偏差(RSD)为1.1%~3.6%。另外,比较MS/MS模式和MS模式(Q1作为离子导杆)下消除Ca、K元素产生的多原子离子干扰的差异性以及对Se含量测定的影响。与ICP-MS相比,ICP-MS/MS下采用两级质谱进行质量筛选,并结合O2反应,通过质量转移法能获得良好的灵敏度、更低的检测限、更低的背景等效浓度(BEC)和更准确的检测结果,为类似物质的分析提供了参考。 展开更多
关键词 电感耦合等离子体串联质谱法 电感耦合等离子体质谱法 微波消解 氧气质量转移法 蜂蜜
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福建家风家训文化品牌打造研究 预览
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作者 “打造福建特色丈化品牌研究”课题组 陈秋平 +3 位作者 俞杰 刘祖陛 孙众超 春花 《福建史志》 2018年第6期4-8,63共6页
福建家训是历代治家经验的总结和智慧的结晶,其内容丰富多彩,包含了勤俭忍让的齐家之道、知行合一的修身之道、礼敬谦和的处世之道、舍生取义的家国情怀等。近年来,福建省方志委等相关单位,通过深入挖掘、创新宣传传统家风家训,大力弘... 福建家训是历代治家经验的总结和智慧的结晶,其内容丰富多彩,包含了勤俭忍让的齐家之道、知行合一的修身之道、礼敬谦和的处世之道、舍生取义的家国情怀等。近年来,福建省方志委等相关单位,通过深入挖掘、创新宣传传统家风家训,大力弘扬优秀传统文化,带动良好社会风气的形成,并取得一定的社会影响和社会效应。为此,我们要进一步做好福建家风家训宣传工作,加大品牌建设的支持力度,加强品牌打造的理论研究,做好家风家训文化品牌的宣传推广。 展开更多
关键词 福建家风家训 传承 创新 品牌打造
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疏水表面诱导橡胶树炭疽菌侵染结构的发育分化过程
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作者 春花 牟保辉 +2 位作者 刘文波 缪卫国 郑服丛 《植物保护学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期470-477,共8页
为了解橡胶树2种炭疽病菌的侵染结构发育分化过程,采用平板菌落生长速率法测定了3株胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides和3株尖孢炭疽菌C.acutatum的菌丝生长速率,测量其分生孢子大小,显微观察2种炭疽菌在疏水表面诱导下侵染结... 为了解橡胶树2种炭疽病菌的侵染结构发育分化过程,采用平板菌落生长速率法测定了3株胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides和3株尖孢炭疽菌C.acutatum的菌丝生长速率,测量其分生孢子大小,显微观察2种炭疽菌在疏水表面诱导下侵染结构的发育分化过程。结果表明,胶孢炭疽菌菌丝生长速率为0.96-1.36 cm/d,显著高于尖孢炭疽菌的菌丝生长速率0.72-0.89 cm/d,但二者分生孢子大小无显著差异。在疏水表面诱导下,2种炭疽菌分生孢子在接种2-6 h后开始萌发,12 h孢子萌发率为71.70%-88.05%,13-16 h开始分化附着胞,24 h附着胞形成率为48.99%-70.74%,36 h菌丝诱发形成大量附着枝,48 h后分生孢子产生的次生菌丝也可诱发形成附着枝,附着枝呈圆形、姜瓣形、梨形或不规则形。分生孢子极易产生,可在菌丝顶端成簇或菌丝侧面排列产生,也可由分生孢子形成的芽管产生,或在芽管分化附着胞过程分枝形成分生孢子;附着胞多着生于芽管顶端,少数附着胞顶端可继续萌发类似短芽管结构,再次分化形成可黑色化的次级附着胞。表明橡胶树2种炭疽菌不同菌株间分生孢子萌发时间、孢子萌发率、附着胞形成时间和形成率有一定差异,但种间无明显差异;橡胶树炭疽菌分生孢子极易形成,在疏水表面容易分化形成附着胞和附着枝,说明具有极强的适生性。 展开更多
关键词 橡胶树 胶孢炭疽菌 尖孢炭疽菌 侵染结构 显微观察
转hpalXoo基因棉花在棉花炭疽病侵染下的过敏性反应检测及相关抗性基因表达研究 预览
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作者 刘文波 何其光 +4 位作者 蔡加挺 靳鹏飞 春花 邬国良 缪卫国 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期2478-2485,共8页
【目的】本文研究了转hpalXoo基因棉花对棉花炭疽病的抗性水平与其应用潜力。【方法】采用棉花炭疽菌(Colletotrichum gossypii)侵染转hpalxoo基因的棉花材料和普通棉花,将棉花炭疽菌接种于转基因棉花(出发品种为陆地棉品种854)和普通棉... 【目的】本文研究了转hpalXoo基因棉花对棉花炭疽病的抗性水平与其应用潜力。【方法】采用棉花炭疽菌(Colletotrichum gossypii)侵染转hpalxoo基因的棉花材料和普通棉花,将棉花炭疽菌接种于转基因棉花(出发品种为陆地棉品种854)和普通棉花(854)的叶片上,分别于接种后0、12、24、48、72 h取样,进行叶片H2O2含量和H2O2DAB定位检测,过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定及对棉花抗性相关基因的表达情况进行分析。【结果】在接种棉花炭疽菌后48 h,转hpalxoo基因棉花的H2O2含量及其定位检测可显示出峰值,随后又下降到和0 h相当的水平;POD与PAL活性也显示出类似的变化趋势。然而普通棉花叶片在接种后24 h,H2O2含量及其定位检测可显示出峰值;POD酶活性只有在72 h才略微上升。抗性相关基因荧光定量检测显示,在接种后24 h转hpalxoo基因棉花中防卫基因hsr203J表达高于普通棉,而在72 h转基因与普通棉花两者几乎都没有表达;另外,在接种后0~48 h转基因植株中NPR1基因的表达一直低于普通棉花,但其表达量比普通棉花增长速度快,在72 h两者的表达量相同。在接种后0~12 h转基因植株中PR-1b基因就有微弱的表达,在24 h表达量最大,后续逐渐减弱,而普通棉花一直处于低表达。在受到棉花炭疽菌侵染时,hpalxoo基因能够诱导寄主产生高水平活性氧及相关基因表达,说明hpalxoo编码的HarpinXoo表达赋予转基因棉花对棉花炭疽菌的抗性。【结论】转hpalxoo基因棉花为某些防卫基因超水平表达提供了分子基础。 展开更多
关键词 棉花炭疽病 转hpalXoo基因 活性氧 防卫基因
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高压氧治疗对女性月经情况影响的观察分析 预览
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作者 叶敏 李建梅 +1 位作者 罗云英 春花 《中国实用医药》 2018年第18期70-71,共2页
目的了解高压氧(HBO)治疗对女性月经情况的影响,为女性在月经期是否接受HBO治疗提供客观依据。方法 61例因病需接受HBO治疗的女性患者,患者均在月经期间接受HBO治疗,根据月经情况分为三组:(1)HBO治疗前月经已来潮11例患者作为A组;... 目的了解高压氧(HBO)治疗对女性月经情况的影响,为女性在月经期是否接受HBO治疗提供客观依据。方法 61例因病需接受HBO治疗的女性患者,患者均在月经期间接受HBO治疗,根据月经情况分为三组:(1)HBO治疗前月经已来潮11例患者作为A组;(2)HBO治疗期间月经来潮32例患者作为B组;(3)月经期末1-2 d开始接受HBO治疗18例患者作为C组。采用自行设计的"HBO治疗对女性月经影响调查表"进行调查,了解其既往月经情况、HBO治疗期间的月经情况,对其治疗期间的经量、经期、经血颜色、月经期伴随不适症状等进行观察,随访下一周期月经情况,并比较三组患者的经期异常和经量异常发生情况。结果 61例患者接受HBO治疗经期出现异常5例,总异常率为8.20%;A组、B组和C组患者的经期异常例数分别为1例(9.09%)、3例(9.38%)和1例(5.56%),三组患者经期异常发生率比较差异无统计学意义(χ2=0.888,P〉0.05)。61例患者接受HBO治疗经量出现异常7例,总异常率为11.48%;A组、B组和C组患者的经量异常例数分别为2例(18.18%)、4例(12.50%)和1例(5.56%),三组患者经量异常发生率比较差异无统计学意义(χ2=0.567,P〉0.05)。A组和B组患者月经血颜色较既往鲜红色,C组月经血颜色变化不明显。12例患者自觉既往月经期下腹部或腰骶部有坠胀不适的症状,HBO治疗期间这些症状减轻或消失;61例患者HBO治疗后随访下一个月经周期情况,与既往对比均无变化。结论 HBO治疗对女性月经影响有个体差异,有改变情况也是有限的、可逆的,患者病情需要执行HBO治疗时,月经期不应暂停治疗。 展开更多
关键词 高压氧 月经 影响
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一种适用于田间LAMP检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法
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作者 史梦玉 春花 +2 位作者 刘文波 缪卫国 郑服丛 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第21期7089-7093,共5页
为了探索建立一种快速、简便适用于田间LAMP (loop-mediated isothermal amplification)检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法,在无液氮也不需要研磨的情况下,利用渗透压破壁的方法提取橡胶树白粉菌DNA。通过改变渗透压对橡胶树白粉菌DN... 为了探索建立一种快速、简便适用于田间LAMP (loop-mediated isothermal amplification)检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法,在无液氮也不需要研磨的情况下,利用渗透压破壁的方法提取橡胶树白粉菌DNA。通过改变渗透压对橡胶树白粉菌DNA进行提取,使用特异性引物OH-666A (5'-ACTGACACCCCATCACGACTAAAA-3'), OH-666S (5'-CATATTCTCACGAAGGAAAGCATTG-3')进行PCR扩增,并与试剂盒提取DNA的PCR产物进行比较,对提取的DNA进行LAMP检测。20μL甘油加入600μL ddH20,离心10min,去上清,加50μL水离心2min即可提出橡胶树白粉菌的DNA,PCR扩增能获得清晰目的条带,对得到的扩增产物进行测序,同时对提取的DNA进行LAMP检测,并与实验室常规方法比对,所有结果均一致。破壁法可用于橡胶树白粉菌DNA的快速提取,由于不需要特殊仪器,且快速方便,在田间容易实现,所以更适用于田间橡胶树白粉菌DNA的田间粗提取,对开展橡胶树白粉病田间分子预测提供了技术支持。 展开更多
关键词 橡胶树白粉菌 甘油破壁法 DNA LAMP检测
海南橡胶树炭疽菌Colletotrichum siamense和C. fructicola的鉴定及系统发育分析 预览 被引量:1
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作者 春花 杨欢 +4 位作者 赵晓宇 潘潇涵 刘文波 缪卫国 郑服丛 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期129-136,共8页
橡胶树炭疽病是橡胶树上一种重要叶部病害,胶孢炭疽菌复合群为我国橡胶树炭疽病的重要病原菌,但至今未知具体是由复合群下哪些种引起。为了对前期已经确定为属于胶孢炭疽菌复合群的来自海南13株胶孢炭疽菌进行进一步种属鉴定,本研究继... 橡胶树炭疽病是橡胶树上一种重要叶部病害,胶孢炭疽菌复合群为我国橡胶树炭疽病的重要病原菌,但至今未知具体是由复合群下哪些种引起。为了对前期已经确定为属于胶孢炭疽菌复合群的来自海南13株胶孢炭疽菌进行进一步种属鉴定,本研究继续克隆了供试菌株的Ap Mat和GS 2个基因,并分别采用Ap MAT单基因、GS/Ap MAT双基因和采用ITS/CHS-1/GAPDH/ACT/GS/Ap MAT 6个基因的多基因拼接序列分别进行分析。结果表明:无论是采用Ap Mat单基因、GS/Ap Mat双基因还是6基因拼接序列,都能将供试的13株炭疽菌分属胶孢炭疽菌复合群下的C.siamense和C.fructicola 2个种。该结果说明危害海南橡胶树炭疽病的胶孢炭疽菌复合群主要有C.siamense和C.fructicola 2个种,同时也说明了利用Ap MAT基因和GS/Ap MAT双基因能对胶孢炭疽菌复合群下的种进行鉴定。 展开更多
关键词 橡胶树 胶孢炭疽菌复合群 多基因序列分析法 分子鉴定
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让分子检测技术渗入植物病理学本科课程体系 预览
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作者 刘晓妹 丁晓帆 春花 《科技风》 2018年第27期12-12,14共2页
分子检测技术已在植物病害诊断方面取得了大量研究成果,但在本科教学中缺乏渗入。利用这些先进的技术激发植保本科新生的专业兴趣,将其引入到植保学科主干课程的理论课、实验课、课程论文、毕业论文等教学环节,不仅可以为本科生打下前... 分子检测技术已在植物病害诊断方面取得了大量研究成果,但在本科教学中缺乏渗入。利用这些先进的技术激发植保本科新生的专业兴趣,将其引入到植保学科主干课程的理论课、实验课、课程论文、毕业论文等教学环节,不仅可以为本科生打下前瞻性的专业基础知识,架起科研成果应用于田间地头的桥梁,而且可以开拓学生专业素养的视野,提高学生追踪新知识、新技术的能力。 展开更多
关键词 分子检测 植物病理学 本科 课程
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中国2种橡胶树炭疽病菌对咪鲜胺敏感性比较 预览
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作者 春花 徐轩 +4 位作者 戈玉琪 牟保辉 刘文波 缪卫国 郑服丛 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期111-115,共5页
炭疽病是橡胶树上一种重要的叶部病害,主要病原有胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌。为了解中国各植胶区炭疽菌对咪鲜胺的敏感性,采用生长速率法室内测定来自海南、云南、广东和广西4省(区)22株橡胶树胶孢炭疽病菌和15株尖孢炭疽菌对咪鲜胺的... 炭疽病是橡胶树上一种重要的叶部病害,主要病原有胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌。为了解中国各植胶区炭疽菌对咪鲜胺的敏感性,采用生长速率法室内测定来自海南、云南、广东和广西4省(区)22株橡胶树胶孢炭疽病菌和15株尖孢炭疽菌对咪鲜胺的敏感性。结果表明:供试的37株橡胶炭疽病菌菌株对咪鲜胺的EC_(50)值为0.022 0~0.272 1 mg/L,平均为(0.061 7±0.055 4)mg/L,EC_(50)最大值是最小值的12.5倍。其中89.2%参试菌株的EC_(50)值介于0~0.100 0 mg/L。根据成组t检验分析结果表明,目前中国4个植胶区的2种橡胶炭疽病菌对咪鲜胺敏感性无明显差异。除了来自海南和云南地区的尖孢炭疽菌有显著性差异外,其他来自不同省份的胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌对咪鲜胺敏感性均无明显差异。研究显示中国橡胶炭疽菌对咪鲜胺仍具有较高的敏感性,但菌株间敏感性有一定的差异,存在一定的潜在抗性风险。 展开更多
关键词 橡胶树 胶孢炭疽菌 尖孢炭疽菌 咪鲜胺 敏感性
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UPC^2-MS法快速检测蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖 被引量:1
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作者 春花 范乃立 +2 位作者 刘德永 郭晓红 胡祥国 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期448-451,共4页
建立了蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的超高效合相色谱-质谱(UPC2-MS)快速检测的方法。样品先用少量的水溶解,再用正己烷/异丙醇(1:1,V/V)溶解,经ACQUITY UPC2BEH(100 mm×3.0 mm,1.7μm)色谱柱分离,以超临界CO2-甲醇(... 建立了蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的超高效合相色谱-质谱(UPC2-MS)快速检测的方法。样品先用少量的水溶解,再用正己烷/异丙醇(1:1,V/V)溶解,经ACQUITY UPC2BEH(100 mm×3.0 mm,1.7μm)色谱柱分离,以超临界CO2-甲醇(含0.1%NH3·H2O,V/V)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.8 m L/min,通过质谱检测器在负离子电喷雾模式下对目标化合物进行分析,外标法定量。检测结果表明:果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖在2-150 mg/L范围线性关系良好,R2〉0.9990,定量限(LOQ,S/N≥10)为0.22-0.42 mg/L,高、中、低3个浓度水平的加标平均回收率在90.0%-107.5%范围,相对标准偏差(RSD,n=6)均小于4.0%。该方法简单快速,分离效果好,为蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的分离测定提供了新的色谱技术平台。 展开更多
关键词 UPC^2-M S 蜂蜜 果糖 葡萄糖 蔗糖 麦芽糖
橡胶树红根病菌Fip-gpo基因的克隆及启动子分析 预览
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作者 刘文波 秦春秀 +5 位作者 薛文华 梁鹏 邬国良 春花 缪卫国 郑服丛 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期122-128,共7页
为预测橡胶树红根病菌(Ganoderma pseudoferreum)真菌免疫调节蛋白基因的序列特点和表达模式,采用同源克隆获得Fipgpo的c DNA和DNA的全长序列。结果表明:该基因编码区全长934 bp,编码111个氨基酸残基,分子量为12.54 k D,等电点4.66,... 为预测橡胶树红根病菌(Ganoderma pseudoferreum)真菌免疫调节蛋白基因的序列特点和表达模式,采用同源克隆获得Fipgpo的c DNA和DNA的全长序列。结果表明:该基因编码区全长934 bp,编码111个氨基酸残基,分子量为12.54 k D,等电点4.66,有4个ATM磷酸化位点,与赤灵芝(G.lucidum)的Fip序列相似性为91%;其启动子区域含有59 bp的内含子,除了含有TATA-box、CAAT-box基本元件外,还含有参与光应答/调控元件、赤霉素响应元件、茉莉酸甲酯应答元件、厌氧诱导作用元件、调控在胚乳中特异表达的顺式作用元件、分生组织特异激活顺式元件及生长素反应元件。推测Fip-gpo基因的表达受激素、非生物诱导、光照等的调控。 展开更多
关键词 橡胶树红根病菌 真菌免疫调节蛋白 Fip-gpo基因 启动子分析
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转hpa1Xm基因烟草后代的分子检测及苗期生理生化指标测定 被引量:1
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作者 刘晓 金洋 +5 位作者 冯霞 康迅 刘文波 春花 缪卫国 郑服丛 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2017年第5期1732-1737,共6页
本研究以野生型三生烟(Nicotiana tabacum cv.Xanthi nc.)及T_2、T_3代转hpa Xm(即hpa1Xm)基因烟草和转hpa Xm N-端缺失突变体(标记为hpa Xm△LP)烟草为试材,对目标基因的整合表达、叶绿素含量及防御酶活性进行检测。结果表明,卡... 本研究以野生型三生烟(Nicotiana tabacum cv.Xanthi nc.)及T_2、T_3代转hpa Xm(即hpa1Xm)基因烟草和转hpa Xm N-端缺失突变体(标记为hpa Xm△LP)烟草为试材,对目标基因的整合表达、叶绿素含量及防御酶活性进行检测。结果表明,卡那霉素抗性筛选、PCR及RT-PCR检测证明,外源目的基因hpa Xm和hpa Xm△LP整合到烟草基因组中,在转录水平上正常表达,且两个世代中稳定遗传。叶绿素含量测定中,转基因烟草含量显著高于野生型植株,同种转基因植株T_2代含量显著高于T_3代,而转hpa Xm基因烟草的总叶绿素含量比转hpa Xm△LP基因烟草的高,无显著性差异。防御酶活性的测定,表明转基因烟草的PAL、POD和PPO活性皆显著高于野生型植株;而转hpa Xm基因烟草的PAL和POD活性显著高于转hpa Xm△LP基因烟草;同品种转基因烟草中,T_2代PAL活性显著高于T_3代。说明hpa1Xm基因在烟草中表达能显著提高其叶绿素含量及抗病防御酶活性水平,且不同世代的转基因烟草之间表现有所差异。初步探索了hpa Xm的功能、遗传稳定性及信号肽类似序列对hpa Xm的表达及功能的影响。 展开更多
关键词 转hpaXm基因烟草 转hpaXm△LP基因烟草 叶绿素含量 防御酶活性
复杂额外小标记染色体的产前诊断和遗传咨询
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作者 刘一琳 偶健 +3 位作者 段程颖 姜东 傅文宇 春花 《中国优生与遗传杂志》 2017年第4期70-71,76共3页
目的应用高通量基因测序技术对产前诊断过程中发现的1例胎儿额外小标记染色体的来源和大小进行鉴定,进一步分析其遗传效应。方法通过羊水培养、染色体G显带技术进行羊水细胞核型分析,诊断出1例胎儿额外小标记染色体,染色体核型为47,XN,... 目的应用高通量基因测序技术对产前诊断过程中发现的1例胎儿额外小标记染色体的来源和大小进行鉴定,进一步分析其遗传效应。方法通过羊水培养、染色体G显带技术进行羊水细胞核型分析,诊断出1例胎儿额外小标记染色体,染色体核型为47,XN,+mar。应用高通量基因测序技术,对该羊水细胞进行测序分析,从而确定小标记染色体的大小、具体区域范围、遗传效应。结果羊水细胞染色体核型分析结果为47,XN,+mar。高通量基因测序结果显示14q11.2(19460001-20440000)×3,重复片断大小为0.98Mb;15q11.1q11.2(20180001-22500000)×3,重复片断大小为2.32Mb;16p11.2(32500001-33900000)×3,重复片断大小为1.40Mb。查询公共数据库显示:14号染色体重复区域,为多态性;15号染色体重复区域,为多态性;16号染色体重复区域,为多态性。结论产前诊断过程中,由于普通细胞遗传学方法的局限性,额外小标记染色体的遗传咨询充满挑战,而高通量测序技术可以在基因组水平明确额外小标记染色体的大小、具体区域范围,为判断额外小标记染色体的遗传效应和遗传咨询提供帮助。 展开更多
关键词 复杂额外小标记染色体 产前诊断 遗传咨询
高通量基因测序技术鉴定嵌合型额外小标记染色体
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作者 刘一琳 偶健 +3 位作者 段程颖 姜东 傅文宇 春花 《中国优生与遗传杂志》 2017年第1期36-37,F0004共3页
目的应用高通量基因测序技术在对1例嵌合型胎儿额外小标记染色体的来源和大小进行鉴定,进一步分析其遗传效应。方法 对1例羊水核型分析诊断为47,XY,+mar[33]/46,XY[17]的嵌合型额外小标记染色体,应用高通量基因测序技术进行测序分析,... 目的应用高通量基因测序技术在对1例嵌合型胎儿额外小标记染色体的来源和大小进行鉴定,进一步分析其遗传效应。方法 对1例羊水核型分析诊断为47,XY,+mar[33]/46,XY[17]的嵌合型额外小标记染色体,应用高通量基因测序技术进行测序分析,从而确定小标记染色体的大小、具体区域范围及遗传效应。结果 羊水细胞染色体核型分析结果为47,XY,+mar[33]/46,XY[17],高通量基因测序结果显示为4p12q12(46040001-571 00000)×3[60%],重复片断大小为11.06Mb。父母染色体核型分析结果正常,该额外小标记染色体为新生性,源自非近端着丝粒染色体片段4p12q12,此区域的重复可能有临床表型。结论 高通量测序技术可以在基因组水平明确嵌合型额外小标记染色体的大小、具体区域范围、嵌合比例,为判断额外小标记染色体的遗传效应和产前咨询提供帮助。 展开更多
关键词 产前诊断 核型分析 高通量基因测序 额外小标记染色体
淀粉芽孢杆菌HAB-7对18株植物病原真菌的抑制作用 预览 被引量:3
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作者 刘文波 秦春秀 +4 位作者 熊燕红 孙亮 春花 缪卫国 郑服丛 《热带农业科学》 2017年第2期52-57,66共7页
HAB-7是一株分离自豇豆根际土壤、具有较强抑菌作用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。研究HAB-7对18株植物病原真菌及其发酵液粗提蛋白对植物病原的抑制作用,并测定其对番茄种子的促生作用。采用平板对峙法测定其对18... HAB-7是一株分离自豇豆根际土壤、具有较强抑菌作用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。研究HAB-7对18株植物病原真菌及其发酵液粗提蛋白对植物病原的抑制作用,并测定其对番茄种子的促生作用。采用平板对峙法测定其对18株植物病原真菌的抑制活性,以橡胶树炭疽菌为指示菌,对其发酵上清液经60%、80%硫酸铵盐析获得的抗菌粗蛋白进行测试;并将HAB-7菌液稀释成6个浓度梯度,分别用来对番茄种子进行促生测试。结果显示:HAB-7对18株植物病原真菌的平均抑菌率为61.03%;其发酵上清液对橡胶树炭疽病菌的抑制率为56.80%,80%硫酸铵粗提蛋白对橡胶树炭疽病菌的抑制率为38.88%;10-4CFU/m L的HAB-7菌液浓度促进了番茄种子胚根的伸长,长度比CK提高67.76%。HAB-7菌株对植物病原菌有较广谱的抑菌活性,其分泌的活性物质除了活性蛋白外,可能还有其他的活性物质,低浓度的HAB-7菌液能促进植物根系生长。本研究结果为后续研究其致病机理起到重要的作用。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 抑菌活性 抑真菌蛋白 促生作用
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