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花生AhbHLH63基因的克隆与表达分析 预览
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作者 崔维佩 谷朝阳 +3 位作者 唐桂英 徐平丽 单雷 《山东农业科学》 2019年第9期35-41,共7页
bHLH转录因子在调节植物生长发育中起着重要作用。本研究利用转录组测序结果从栽培种花生丰花1号中克隆得到AhbHLH63基因。序列分析显示,AhbHLH63基因有两个剪接体AhbHLH63-1.1和AhbHLH63-1.2,其ORF分别长1 188 bp和1 152 bp,分别编码39... bHLH转录因子在调节植物生长发育中起着重要作用。本研究利用转录组测序结果从栽培种花生丰花1号中克隆得到AhbHLH63基因。序列分析显示,AhbHLH63基因有两个剪接体AhbHLH63-1.1和AhbHLH63-1.2,其ORF分别长1 188 bp和1 152 bp,分别编码395个氨基酸和383个氨基酸组成的蛋白。亲缘关系分析表明,AhbHLH63蛋白含有一个预测的bHLH结构域,与其他植物的bHLH63具有较高的同源性,与苜蓿等的同源蛋白亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析表明,AhbHLH63-1.1和AhbHLH63-1.2表达模式基本一致,均为组成型表达,在花中表达量最高,茎和叶中次之,在根中表达量最低;在花生种子的不同发育时期,发育中期表达量较高。 展开更多
关键词 花生 bHLH转录因子 基因克隆 表达分析
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陆地棉NAC转录因子基因GhSNAC1的克隆及其抗旱耐盐分析
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作者 王立国 傅明川 +2 位作者 李浩 刘任重 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期571-580,共10页
NAC (NAM/ATAF/CUC)家族是植物中特有的一类转录因子,其功能涉及植物生长发育调控、激素信号转导、逆境胁迫响应等重要生理过程。本研究利用反转录PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)技术从陆地棉(Gossypium hirsutum)中克隆了1... NAC (NAM/ATAF/CUC)家族是植物中特有的一类转录因子,其功能涉及植物生长发育调控、激素信号转导、逆境胁迫响应等重要生理过程。本研究利用反转录PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)技术从陆地棉(Gossypium hirsutum)中克隆了1个逆境胁迫响应(stress-responsive) NAC类转录因子基因,命名为GhSNAC1 (GenBank No. KU759894)。该基因长度为1 104 bp,预测编码蛋白含有299个氨基酸,分子量为33.9 kD,等电点为6.18。蛋白序列分析表明,GhSNAC1具有典型的NAC转录因子特征,N端含有保守的NAC结构域。进化分析表明,GhSNAC1与拟南芥(Arabidopsis thaliana) ATAF1 (Arabidopsis transcription activation factor 1)高度相似。qRT-PCR结果显示,GhSNAC1受到干旱、高盐、低温和黄萎病菌(Verticillium dahliae)胁迫诱导,提示该基因可能参与生物和非生物胁迫响应。在烟草(Nicotiana tabacum)中过表达GhSNAC1,分析干旱或盐胁迫条件下转基因和野生型烟草株系种子的萌发率和幼苗生长差异,实验结果显示,在100 mmol/L NaCl或200 mmol/L甘露醇胁迫下,野生型烟草的种子萌发受到明显抑制,萌发率低于50%,而转基因株系显著优于野生型,其种子萌发率均在80%以上;野生型烟草幼苗弱小,而转基因株系长势强,其单株鲜重和根长分别是野生型的2倍和1.5倍以上。上述结果表明,过表达GhSNAC1可显著提高转基因烟草的抗旱耐盐能力。本研究为深入探究GhSNAC1抗旱耐盐的分子机制提供了基础资料。 展开更多
关键词 棉花 NAC转录因子 干旱 盐胁迫 过表达分析
海岛棉WRKY转录因子的全基因组鉴定及响应黄萎病菌侵染的表达分析
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作者 傅明川 李浩 +3 位作者 陈义珍 王立国 刘任重 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1289-1300,共12页
WRKY蛋白是植物中一类重要的转录因子,其在很多生物过程中都发挥有重要作用。目前,关于海岛棉(Gossypium barbadense L.)WRKY转录因子的研究相对较少。本研究利用生物信息学方法在海岛棉基因组中鉴定出180个WRKY转录因子(GbWRKY)。根据... WRKY蛋白是植物中一类重要的转录因子,其在很多生物过程中都发挥有重要作用。目前,关于海岛棉(Gossypium barbadense L.)WRKY转录因子的研究相对较少。本研究利用生物信息学方法在海岛棉基因组中鉴定出180个WRKY转录因子(GbWRKY)。根据基因结构及系统进化关系,可将GbWRKY基因分为3组(I~III),II组又可细分为5个亚组(IIa~IIe)。GbWRKY基因在染色体上分布不均匀。基因重复事件分析表明,全基因组复制及区段重复事件是GbWRKY基因数量增多的主要原因。表达分析发现,有61个GbWRKY基因在黄萎病菌(Verticillium dahliae)侵染条件下呈现差异表达,表明它们在黄萎病菌胁迫应答过程中发挥作用。本研究结果揭示了海岛棉WRKY转录因子的结构、进化及表达特征,为进一步研究棉花WRKY基因的功能提供了理论指导。 展开更多
关键词 WRKY转录因子 棉花 黄萎病 生物信息学
花生AhDGAT3基因在花生种子油脂积累过程中的功能研究 被引量:1
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作者 唐桂英 +2 位作者 徐平丽 彭振英 单雷 《农业生物技术学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期1834-1845,共12页
二酰基甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase, DGAT)是广泛存在于生物界的一类酰基转移酶,在甘油三酯合成过程中起重要作用。为研究该酶在花生油脂积累过程中的作用,探索花生油脂含量提高及脂肪酸成分的优化方案,本研究... 二酰基甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase, DGAT)是广泛存在于生物界的一类酰基转移酶,在甘油三酯合成过程中起重要作用。为研究该酶在花生油脂积累过程中的作用,探索花生油脂含量提高及脂肪酸成分的优化方案,本研究在从鲁花14未成熟花生(Arachis hypogaea)种子中克隆到AhDGAT3A和AhDGAT3B基因的基础上,分别构建了组成型花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus, CaMV)35S启动子和种子特异型表达大豆凝集素Lectin启动子驱动两个基因过量的植物表达载体,并将它们转入花生,获得了携带4种表达结构的稳定遗传的转基因纯合体株系。对转基因株系分析表明,转基因花生主要田间农艺性状与非转基因对照基本一致;相比,转基因花生籽粒中蛋白含量和含油量没有明显变化,而转基因花生油酸含量提高了5.13%~21.26%,亚油酸含量降低了3.87%~31.18%,致使油酸/亚油酸比值提高5.01%~76.19%。这一结果可能归于AhDGAT3对油酸脂肪酰底物具有偏好性选择,能够在种子油脂中积累更多的油酸。AhDGAT3B作用更强,转该基因的株系中,油酸/亚油酸比值提升幅度明显高于转AhDGAT3A的株系。本研究可为花生油脂品质优化的遗传育种提供理论依据。 展开更多
关键词 花生 二酰基甘油酰基转移酶(DGAT) 启动子 油酸/亚油酸比值
花生AhFAD2基因抑制表达的转基因后代分析
5
作者 徐平丽 唐桂英 +2 位作者 毕玉平 单雷 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期1469-1477,共9页
FAD2(Δ^12 fatty acid desaturase,Δ^12 FAD或FAD2)是催化油酸在脂肪酸碳链Δ^12位脱氢生成亚油酸的关键酶。在花生中,FAD2酶活性下降或失活可提高籽粒中油酸的相对含量,改善花生籽粒及制品的品质和氧化稳定性。通过将种子特异性表... FAD2(Δ^12 fatty acid desaturase,Δ^12 FAD或FAD2)是催化油酸在脂肪酸碳链Δ^12位脱氢生成亚油酸的关键酶。在花生中,FAD2酶活性下降或失活可提高籽粒中油酸的相对含量,改善花生籽粒及制品的品质和氧化稳定性。通过将种子特异性表达Lectin启动子和Ca MV35S启动子驱动的倒位重复Ah FAD2基因RNAi干扰结构转入花生,获得了以丰花1号(FH1)和花育23(HY23)为受体、携带上述2种转化结构、稳定遗传的花生转基因纯合体株系,转基因花生主要农艺性状与非转基因对照基本一致。实时荧光定量分析发现,各转基因株系发育种子中Ah FAD2基因的转录水平普遍下调。气相色谱法进一步测定了部分转基因后代株系种子的脂肪酸含量及组成,籽粒中油酸含量分别平均提高了15.09%(HY23为受体)、36.40%(FH1为受体),相应地,亚油酸含量平均下降了16.19%、29.81%,油亚比平均增加了38.02%、98.10%。各转基因株系的油酸含量显著提高;且在以FH1为受体的转基因株系后代籽粒以及种子特异性启动子驱动的转化结构中,RNAi的抑制效果更明显。通过RNAi技术抑制花生FAD2基因的表达,可以有效提高花生籽粒油酸含量。该技术体系可以为花生品质育种提供借鉴。 展开更多
关键词 花生 Δ^12脂肪酸脱氢酶 RNA干扰 转基因 油酸与亚油酸比值
高通量分子标记技术辅助回交选育高油酸花生新种质 预览 被引量:1
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作者 徐平丽 唐桂英 +4 位作者 付春 鲁成凯 姜言生 单雷 《山东农业科学》 2018年第6期46-51,64共7页
以山东大花生鲁花14号(LH14)为母本、高油酸花生开农176(KN176)为父本配置杂交组合,再以LH14为轮回亲本历经4次回交获得BC4F1,期间用Taq Man探针标记技术辅助杂种AhFAD2B基因型选择;BC4F1经连续自交、田间筛选并辅助KASP分子标记鉴... 以山东大花生鲁花14号(LH14)为母本、高油酸花生开农176(KN176)为父本配置杂交组合,再以LH14为轮回亲本历经4次回交获得BC4F1,期间用Taq Man探针标记技术辅助杂种AhFAD2B基因型选择;BC4F1经连续自交、田间筛选并辅助KASP分子标记鉴别后代籽粒AhFAD2B基因的基因型,获得基因型aabb的BC4F5株系10个,它们分别来源于BC4F1代7个单株。分析这10个株系产量及品质性状,结果显示各株系结果集中,单株平均荚果数、果型与母本LH14相似,油酸含量为68.67%~77.93%;其中7个株系的百果重、饱果率和6个株系的百仁重分别比对照LH14提高0.02%~16.05%、4.55%~12.31%和0.05%~9.41%。综合各株系田间表现及籽粒品质指标,最终选择油酸含量高于70%的7个BC4F5代株系进行DUS测试、品种区试和生产试验。Taq Man探针标记与KASP标记结合应用于高油酸品种选育过程中,大大减少了田间选择的工作量,提高了回交选育高油酸花生的效率。 展开更多
关键词 花生 高油酸 回交 分子标记辅助选育
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棉花转录因子GhSNAC3启动子的克隆与表达分析 预览 被引量:1
7
作者 马骏骏 +4 位作者 李菲 王立国 傅明川 朱新霞 刘任重 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第5期35-43,共9页
为研究棉花NAC转录因子基因GhSNAC3启动子的结构和功能,以鲁棉研32号基因组为模板,用PCR扩增的方法得到棉花基因GhSNAC3的启动子序列,利用分析网站PlantCARE、PLACER和BDGP对启动子上存在的顺式作用元件进行了预测与分析,在此基础上利... 为研究棉花NAC转录因子基因GhSNAC3启动子的结构和功能,以鲁棉研32号基因组为模板,用PCR扩增的方法得到棉花基因GhSNAC3的启动子序列,利用分析网站PlantCARE、PLACER和BDGP对启动子上存在的顺式作用元件进行了预测与分析,在此基础上利用该启动子及GhSNAC3基因构建植物表达载体,并通过烟草遗传转化进一步研究启动子的转录活性。结果表明GhSNAC3启动子除含有CAAT-box等基本顺式作用元件外,还含有茉莉酸、赤霉素和脱落酸响应元件以及大量光顺式作用元件和逆境胁迫诱导相关的顺式调控元件。采用不同胁迫处理转基因烟草并进行表达分析,结果显示GhSNAC3在盐胁迫下植株根部有高水平的表达,而在茎和叶中表达量极低,表明GhSNAC3在逆境胁迫应答过程中可能具有重要功能,其启动子是一个盐诱导型启动子,具有组织特异性。研究结果为棉花NAC信号通路研究和耐盐基因工程改良提供了理论依据。 展开更多
关键词 棉花 NAC 启动子 盐诱导
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亚洲棉全基因组中NAC类转录因子基因的鉴定与分析 预览 被引量:1
8
作者 赵灿 刘任重 +4 位作者 李菲 王立国 马骏骏 朱新霞 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2015年第4期397-404,共8页
为了开发棉花NAC基因资源,本文利用生物信息学方法在亚洲棉基因组中预测了138个NAC基因,根据其在染色体上的位置关系命名为GaNAC001-GaNACl38,所有GaNAC基因分布于亚洲棉13条染色体上。根据GaNAC蛋白的序列相似性及系统进化分析,将... 为了开发棉花NAC基因资源,本文利用生物信息学方法在亚洲棉基因组中预测了138个NAC基因,根据其在染色体上的位置关系命名为GaNAC001-GaNACl38,所有GaNAC基因分布于亚洲棉13条染色体上。根据GaNAC蛋白的序列相似性及系统进化分析,将亚洲棉GaNAC蛋白分为11个亚家族,每个亚家族的GaNAC蛋白数目为4—25个。基因结构分析发现,大部分(63.7%)GaNAC基因含有2个内含子。比较亚洲棉与陆地棉、雷蒙德氏棉NAC蛋白的同源性,发现亚洲棉与雷蒙德氏棉NAC蛋白的匹配程度高于陆地棉,平均序列一致性分别为93.9%和81.2%,一些NAC基因(58/138)在棉属的进化过程中高度保守,一些(37/138)则变异程度较大,可能是生物体为了适应环境的变化产生了新的功能。本研究结果为亚洲棉及陆地棉NAC转录因子基因的后续深入研究提供了重要参考。 展开更多
关键词 NAC转录因子 棉花 亚洲棉 生物信息学
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玉米全基因组中NAC基因家族的鉴定与分析 预览 被引量:4
9
作者 葛姗姗 唐桂英 +1 位作者 毕玉平 《山东农业科学》 2015年第2期1-6,共6页
本试验利用生物信息学方法预测了玉米NAC基因家族成员、基因结构、染色体定位和系统进化关系。结果表明,玉米NAC基因家族包含128个成员,依据其在染色体上的位置系统命名为Zm NAC001~Zm NAC128;Zm NAC分布在10条染色体上,且分布不均;Zm ... 本试验利用生物信息学方法预测了玉米NAC基因家族成员、基因结构、染色体定位和系统进化关系。结果表明,玉米NAC基因家族包含128个成员,依据其在染色体上的位置系统命名为Zm NAC001~Zm NAC128;Zm NAC分布在10条染色体上,且分布不均;Zm NAC基因与拟南芥NAC基因具有一定相似性,可分为13个亚家族;基因结构分析发现绝大多数Zm NAC基因含有1~3个内含子;miRNA靶基因预测发现7个Zm NAC基因为miRNA164的靶基因。 展开更多
关键词 玉米 NAC基因家族 生物信息学
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棉花转录因子基因(GhMYB11)的克隆与表达分析 预览 被引量:3
10
作者 李菲 +2 位作者 王立国 刘勤红 刘任重 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期161-169,共9页
MYB基因家族在植物应对外界生物和非生物胁迫的过程中有重要的调控作用.本研究利用二倍体雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii)基因组数据库,从陆地棉(G.hirsutum)品种鲁棉研32号中克隆到一个新的MYB转录因子GhMYB111(GenBank登录号:H... MYB基因家族在植物应对外界生物和非生物胁迫的过程中有重要的调控作用.本研究利用二倍体雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii)基因组数据库,从陆地棉(G.hirsutum)品种鲁棉研32号中克隆到一个新的MYB转录因子GhMYB111(GenBank登录号:HQ234875.1),Cdna全长1 001 bp,开放阅读框828bp.通过与模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和主要作物小麦(Triticum aestivum L.)、玉米(Zea mays L.)、水稻(Oryza sativa L.) MYB蛋白的氨基酸序列比对发现,GhMYB 11蛋白与拟南芥中脱落酸(abscisic acid,ABA)合成和信号传导的重要基因AtMYB13/14编码的蛋白高度相似(E值分别为7e-83和1e-90),含两个高度保守的MYB结构域R2R3及一个转录激活结构域.实时定量PCR分析发现,GhMYB 11基因在黄萎病菌(Verticillium dahliae)侵染、干旱、盐和氧化胁迫处理后的棉花幼苗叶片中表达显著上调.GhMYB11基因可能在棉花生物和非生物胁迫反应中起重要调控作用,是陆地棉品种抗逆性遗传改良的重要候选基因.本研究为利用基因工程手段提高棉花抗逆性提供了基础材料。 展开更多
关键词 棉花 抗逆 MYB转录因子 基因克隆
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棉花GhSRO04/GhSRO08基因的克隆及表达分析 被引量:1
11
作者 马骏骏 李菲 +4 位作者 刘任重 王立国 赵灿 朱新霞 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2196-2205,共10页
SRO转录因子在植物响应盐、旱和病菌等生物和非生物胁迫中具有重要的调节作用。本研究从抗枯萎病耐黄萎病的棉花品种鲁研棉32号中克隆获得2个基因:命名为GhSRO04和GhSRO08(Gen Bank登录号为KR534896和KR534895)。结果显示:GhSRO04包含... SRO转录因子在植物响应盐、旱和病菌等生物和非生物胁迫中具有重要的调节作用。本研究从抗枯萎病耐黄萎病的棉花品种鲁研棉32号中克隆获得2个基因:命名为GhSRO04和GhSRO08(Gen Bank登录号为KR534896和KR534895)。结果显示:GhSRO04包含一个最大开放阅读框1830 bp(ORF),推测编码609个氨基酸;GhSRO08包含一个最大开放阅读框1 842 bp(ORF),推测编码编码613个氨基酸。比对分析表明GhSRO04和GhSRO08基因均含有RCD1-SRO-TAF4结构域(RST)。系统进化树分析表明,GhSRO04和GhSRO08编码产物与拟南芥RCD1和SRO1亲缘关系最近,属于同一进化分支。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析基因表达显示,GhSRO04和GhSRO08基因均受黄萎病菌侵染、干旱和高盐诱导表达,表明GhSRO04和GhSRO08在棉花应对盐、旱和病菌胁迫中可能起着重要的调节作用,对棉花种质的抗逆性遗传改良具有潜在利用价值。本研究首次从棉花中分离鉴定出SRO类转录因子,并进行了初步功能分析,为棉花遗传改良储备了基因资源。 展开更多
关键词 棉花 GhSRO04/GhSRO08 SRO 基因表达 抗逆
不同SSR标记检测技术及其在花生栽培种遗传多样性分析中的应用 被引量:7
12
作者 王燕龙 单雷 +5 位作者 付春 徐平丽 姜言生 曲志才 唐桂英 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期96-105,共10页
以85份花生栽培种为材料,分别应用银染法和荧光检测法检测9对SSR引物的扩增产物。比较结果显示.荧光检测法具有灵敏度高、检测结果准确、效率高等优点。聚类分析表明,银染法与荧光检测法分别能够区分74个、82个花生品种,并分别聚成... 以85份花生栽培种为材料,分别应用银染法和荧光检测法检测9对SSR引物的扩增产物。比较结果显示.荧光检测法具有灵敏度高、检测结果准确、效率高等优点。聚类分析表明,银染法与荧光检测法分别能够区分74个、82个花生品种,并分别聚成8个、9个类群;荧光检测法的聚类结果虽然反映的品种间遗传多样性较低,但与品种类型、产地及其亲缘关系相关程度更高,表明荧光检测数据更精确、可靠。遗传多样性分析发现,地方品种的遗传多样性指数最高,其次为多粒型育成品种,表明我国地方品种和多粒型育成品种蕴藏了丰富的优异性状,有利于对其挖掘和利用。 展开更多
关键词 花生 SSR 银染法 荧光检测法 遗传多样性
花生质体型酰基载体蛋白基因5'侧翼调控序列的克隆与分析 预览 被引量:4
13
作者 单雷 唐桂英 +2 位作者 徐平丽 赵学彬 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期381-389,共9页
采用染色体步移技术分别克隆3个花生质体型酰基载体蛋白(ACP)基因的5¢侧翼调控区序列, AhACP1、AhACP4和AhACP5基因5¢上游序列分别为535、1400和1180 bp; 利用5¢RACE方法确定了这3个基因的转录起始位点, 分别位于起始密码ATG上游–... 采用染色体步移技术分别克隆3个花生质体型酰基载体蛋白(ACP)基因的5¢侧翼调控区序列, AhACP1、AhACP4和AhACP5基因5¢上游序列分别为535、1400和1180 bp; 利用5¢RACE方法确定了这3个基因的转录起始位点, 分别位于起始密码ATG上游–71 bp、–92 bp和–71 bp处。利用生物信息学软件分析了花生ACPs启动子区包含的主要调控元件, 发现尽管花生AhACP4和AhACP5基因在根、茎、叶、花和不同发育期种子中的基本表达模式相似, 但它们的启动子中包含各自特有的顺式元件, AhACP4启动子区包含根或芽顶端分生组织表达调控元件WUS, 而AhACP5启动子区则含有侧芽萌动和伸展所需的多个关键调控元件E2FB、TELO BOX和UP1, 推测它们的表达具有组织和发育阶段特异性。在进化上, 花生AhACP4与拟南芥AtACP4可能为直系同源基因, 但它们的表达模式产生了分歧, AhACP4为组成型表达, AtACP4主要在叶中表达; 与AtACP4启动子相比, 花生AhACP4启动子区中参与光调控相关元件明显减少。 展开更多
关键词 质体型酰基载体蛋白 启动子 调控元件 花生
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一个新的陆地棉抗逆锌指蛋白基因GhCHP的克隆与分析
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作者 李菲 +2 位作者 王立国 刘勤红 刘任重 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1163-1168,共6页
锌指蛋白是一类重要的转录因子,在植物应对外界生物和非生物胁迫的过程中起着极为重要的调节作用。基于二倍体雷蒙德氏棉基因组数据库,本研究从抗枯萎病、耐黄萎病的转基因抗虫棉品种鲁棉研32号中克隆到棉花锌指蛋白类基因Gh CHP。序列... 锌指蛋白是一类重要的转录因子,在植物应对外界生物和非生物胁迫的过程中起着极为重要的调节作用。基于二倍体雷蒙德氏棉基因组数据库,本研究从抗枯萎病、耐黄萎病的转基因抗虫棉品种鲁棉研32号中克隆到棉花锌指蛋白类基因Gh CHP。序列分析表明,Gh CHP基因的开放阅读框长度为720 bp,编码239个氨基酸,预测的蛋白质等电点为9.12。通过与其它植物锌指蛋白的序列进行聚类和比对分析,发现Gh CHP与拟南芥的AT2g16050和小麦的Ta CHP极为相近,其中两个保守的C1结构域呈典型的锌指结构。实时荧光定量PCR检测表明,Gh CHP在经过不同胁迫处理的棉花根和叶中的表达模式存在差异。PEG、Na Cl、H2O2、低温和黄萎病菌侵染处理均对Gh CHP的表达产生较大影响,表明Gh CHP可能在棉花生物和非生物胁迫响应中起重要的调控作用,是棉花品种抗逆性分子改良的重要候选基因。 展开更多
关键词 棉花 抗逆性 锌指蛋白 基因克隆
转Bt基因抗虫棉的生物安全性研究进展 预览 被引量:2
15
作者 王立国 李菲 +2 位作者 刘勤红 刘任重 《山东农业科学》 2014年第7期150-156,共7页
作为一种生物技术产品,转Bt基因抗虫棉的生物安全性一直是人们关注和争论的焦点。世界上许多棉花主产国通过严格的试验从基因漂移、靶标害虫对Bt蛋白的抗性产生及治理对策、抗虫棉种植对非靶标昆虫及土壤生态系统的影响以及转Bt基因抗... 作为一种生物技术产品,转Bt基因抗虫棉的生物安全性一直是人们关注和争论的焦点。世界上许多棉花主产国通过严格的试验从基因漂移、靶标害虫对Bt蛋白的抗性产生及治理对策、抗虫棉种植对非靶标昆虫及土壤生态系统的影响以及转Bt基因抗虫棉产品的食品安全性等方面进行了大量研究。迄今为止,尚未发现有关生物安全方面的问题。由于对棉铃虫等鳞翅目害虫的有效控制及其所产生的经济和生态效益,转Bt基因抗虫棉已经为越来越多的人们所接受,对维持世界棉花的可持续发展产生了不可替代的作用。 展开更多
关键词 转BT基因抗虫棉 生物安全 基因漂移 靶标昆虫 土壤生态系统
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花生AhFT基因的克隆与序列分析 预览
16
作者 葛姗姗 唐桂英 +3 位作者 陈霞霞 付旭 毕玉平 《花生学报》 2014年第3期1-6,共6页
FT(Flowering Locus T)作为"成花素"在成花转变及促进开花上起重要作用。本研究利用分子克隆和RT-PCR方法,从花生中克隆了一个与FT同源的cDNA序列,命名为AhFT,该序列长度为893bp,开放阅读框长度为534bp,推测编码蛋白含有177个氨基酸... FT(Flowering Locus T)作为"成花素"在成花转变及促进开花上起重要作用。本研究利用分子克隆和RT-PCR方法,从花生中克隆了一个与FT同源的cDNA序列,命名为AhFT,该序列长度为893bp,开放阅读框长度为534bp,推测编码蛋白含有177个氨基酸,分子量为19.95kD,等电点为6.9。通过与其他植物PEBP蛋白序列的比对,发现花生FT基因属于FT-Like家族,可能在控制植物开花中起重要作用。 展开更多
关键词 花生 FT 功能预测
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花生二酰基甘油酰基转移酶基因克隆与功能研究 预览 被引量:4
17
作者 唐桂英 +2 位作者 徐平丽 赵学彬 单雷 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期857-863,共7页
利用RT-PCR方法,从花生品种‘鲁花14’未成熟种子中克隆了二酰基甘油酰基转移酶(Diacylglycerol acyltransferase,DGAT)基因AhDGAT3A和AhDGAT3B的cDNA,序列分析显示,两者在编码区核苷酸序列有96%相似性,氨基酸序列有94%相似,并对其中... 利用RT-PCR方法,从花生品种‘鲁花14’未成熟种子中克隆了二酰基甘油酰基转移酶(Diacylglycerol acyltransferase,DGAT)基因AhDGAT3A和AhDGAT3B的cDNA,序列分析显示,两者在编码区核苷酸序列有96%相似性,氨基酸序列有94%相似,并对其中的AhDGAT3A进一步研究。(1)半定量RT-PCR分析显示,AhDGAT3A在花生根、茎、叶、花和种子中均有表达,且花中表达量最高,茎中表达量非常低;在花生果针入土60d时种子中的表达量较其它发育时期有所提高。(2)利用染色体步移技术克隆了AhDGAT3A5′上游1 588bp调控区,在线软件分析发现该调控区除包括启动子核心元件外,还包含多个调控花粉中表达的顺式元件、光信号调控元件和胁迫相关元件等。(3)在烟草中过量表达AhDGAT3A基因,转基因烟草种子粗脂肪和主要脂肪酸含量较对照均有所下降,推测这一结果可能由转基因共抑制作用导致。 展开更多
关键词 花生 二酰基甘油酰基转移酶基因 功能研究
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花生子叶不定芽的诱导和组织细胞学观察 预览 被引量:4
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作者 唐桂英 单雷 《山东农业科学》 2011年第2期 7-10,共4页
以MS+6.79μmol/L2,4-D+22.19μmol/L6-BA为诱导培养基,以花生成熟种子子叶为外植体,诱导出大量丛生芽和少量体细胞胚;组织细胞学观察发现,子叶外植体不经过愈伤组织,直接诱导分化出丛生芽和体细胞胚,属于直接发生途径;并且子叶丛生... 以MS+6.79μmol/L2,4-D+22.19μmol/L6-BA为诱导培养基,以花生成熟种子子叶为外植体,诱导出大量丛生芽和少量体细胞胚;组织细胞学观察发现,子叶外植体不经过愈伤组织,直接诱导分化出丛生芽和体细胞胚,属于直接发生途径;并且子叶丛生芽和体细胞胚起源于外植体表皮或皮层细胞,为外起源方式。 展开更多
关键词 花生 不定芽 体细胞胚 组织学观察
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花生叶片蛋白质双向电泳的方法与优化 预览 被引量:5
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作者 邵媛嫒 +1 位作者 王龙龙 毕玉平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期 136-139,共4页
以花生品种鲁花14为试验材料,提取叶片可溶性蛋白进行双向电泳分析。在三氯乙酸/丙酮沉淀法的基础上,对样品抽提、样品溶解、胶条pH范围选择、蛋白上样量、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等关键步骤进行改进,获得了蛋白点较多、重复性好的... 以花生品种鲁花14为试验材料,提取叶片可溶性蛋白进行双向电泳分析。在三氯乙酸/丙酮沉淀法的基础上,对样品抽提、样品溶解、胶条pH范围选择、蛋白上样量、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等关键步骤进行改进,获得了蛋白点较多、重复性好的双向电泳图谱,为开展花生叶片蛋白质组研究奠定了基础。 展开更多
关键词 花生 可溶性蛋白 双向电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)研究进展 预览 被引量:17
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作者 唐桂英 单雷 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期 320-328,共9页
二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)是生物体内TAG合成过程中的关键酶,它的作用是催化二酰甘油加上脂肪酸酰基形成三酰甘油。本文介绍了DGAT的分类、亚细胞定位、功能、底物特异性和调控,并展望了DGAT研究在油料作物品种改良方面的应用前景。
关键词 二酰基甘油酰基转移酶(DGAT) 三酰甘油(TAG) 分类 功能 调控
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