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p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达及其与胞质氧化还原稳态的关系 预览
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作者 张通 瑞兰 +4 位作者 范晓梅 刘春洁 海日汗 霍敏 张家新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2183-2192,共10页
[目的]研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。[方法]试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于... [目的]研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。[方法]试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于屠宰场的绵羊卵巢。分别收集成熟前优质和劣质、常规成熟24 h及成熟30 h老化的卵母细胞,采用实时荧光定量PCR对成熟前后不同质量绵羊卵母细胞中p66Shc mRNA的表达量进行分析,利用细胞免疫荧光结合MitoTracker Red探针对p66Shc蛋白和线粒体进行共定位,同时利用荧光探针DCFH-DA和卵母细胞自发荧光分别对成熟前后不同质量卵母细胞内ROS水平和氧化还原稳态进行检测。此外,采用外源H2O2诱导的氧化应激处理成熟前优质卵母细胞,并对p66Shc蛋白的表达及定位进行了检测分析。[结果]实时荧光定量PCR结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc mRNA表达量分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。然而优质卵母细胞成熟前后p66Shc mRNA表达量没有显著差异(P>0.05)。共定位结果表明,p66蛋白主要分布在线粒体分布活跃的区域。细胞免疫荧光结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc蛋白表达量也分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。与成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞相比,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞表现出线粒体分布紊乱和活性下降、ROS水平升高以及氧化还原稳态的失衡。此外,与未添加外源H2O2的对照组相比,外源H2O2处理成熟前优质卵母细胞诱导的氧化应激显著(P<0.05)上调p66Shc蛋白的表达并促使p66Shc由胞质向细胞核定位。[结论]p66Shc基因在劣质和老化的绵羊卵母细胞中呈现高水平的表达,H2O2诱导的氧化应激显著上调p66Shc蛋白的表达并影响其亚细胞定位。总之,绵羊卵母细胞中p 展开更多
关键词 绵羊卵母细胞 P66SHC 线粒体 ROS 氧化还原稳态
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雄激素和氢化可的松对山羊附睾头上皮细胞增殖的影响
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作者 栾兆进 范晓梅 +3 位作者 宋慧子 瑞兰 张通 张家新 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期91-98,共8页
为研究雄激素和氢化可的松对山羊附睾上皮细胞生长的作用模式,本研究利用酶标仪检测附睾头部上皮细胞增殖情况,实时荧光定量PCR及ELISA检测雄激素受体(AR)的表达,检测睾酮与氢化可的松对山羊附睾上皮细胞体外增殖的作用以及对AR表达的... 为研究雄激素和氢化可的松对山羊附睾上皮细胞生长的作用模式,本研究利用酶标仪检测附睾头部上皮细胞增殖情况,实时荧光定量PCR及ELISA检测雄激素受体(AR)的表达,检测睾酮与氢化可的松对山羊附睾上皮细胞体外增殖的作用以及对AR表达的影响。结果表明:100nmol/L睾酮对附睾头上皮细胞增殖的促进效应最高且与对照组差异极显著(P<0.01),200nmol/L氢化可的松促进附睾头上皮细胞增殖效应最佳并与对照组差异显著(P<0.05),前者的效应明显且可以被AR阻断剂阻断;睾酮和氢化可的松对附睾头上皮细胞增殖表现为协同作用;100nmol/L睾酮与200nmol/L氢化可的松均使附睾头上皮细胞的AR mRNA和蛋白表达量上调,与对照组差异显著(P<0.05),且二者共存时附睾头上皮细胞的AR mRNA和蛋白表达量极显著高于对照组(P<0.01)。本研究表明睾酮和氢化可的松对附睾头上皮细胞体外增殖均有促进作用,呈明显的浓度依赖性,且二者之间存在协同作用,这为进一步研究附睾上皮细胞增殖及功能的调节机理提供了基础。 展开更多
关键词 睾酮 氢化可的松 附睾头上皮细胞 细胞增殖 雄激素受体
褪黑素对绒山羊精液冷冻保存效果的影响
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作者 霍敏 瑞兰 +5 位作者 海日汗 林奕全 王瑞军 刘志红 李金泉 张家新 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期58-62,179共6页
为了研究褪黑素对绒山羊精液冷冻保存效果的影响,在冷冻稀释液中外源补充不同浓度(0.125,0.250,0.500,1.000mg/mL)的褪黑素进行冷冻试验,冷冻解冻采用计算机辅助精液分析系统(CASAS)和流式细胞仪分别检测精子活率、质膜完整率、顶体完... 为了研究褪黑素对绒山羊精液冷冻保存效果的影响,在冷冻稀释液中外源补充不同浓度(0.125,0.250,0.500,1.000mg/mL)的褪黑素进行冷冻试验,冷冻解冻采用计算机辅助精液分析系统(CASAS)和流式细胞仪分别检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率以及精子细胞中活性氧(ROS)的含量。结果表明:在冷冻稀释液中添加褪黑素能够显著降低精子细胞中ROS的含量,而且在冷冻稀释液中添加浓度为0.500mg/mL的试验组绒山羊精子活率(53.3%)、质膜完整率(44.6%)、顶体完整率(77.9%)均显著高于空白对照组(47.8%、36.3%和53.2%)(P<0.05)。说明在绒山羊精液冷冻稀释液中添加0.500mg/mL褪黑素能够显著提高绒山羊精子抗氧化能力和冷冻保存效果。 展开更多
关键词 褪黑素 抗氧化能力 绒山羊 精液 精子质量 冷冻保存
绵羊附睾褪黑素受体1的表达与定位 预览
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作者 宋慧子 边小娜 +2 位作者 瑞兰 刘春洁 张家新 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第9期2544-2549,共6页
为研究褪黑素受体1(MT1)在不同年龄绵羊附睾中的表达模式,选用幼龄绵羊(2~3月龄)、青年绵羊(6~8月龄)和成年绵羊(2~3岁)的附睾,采用实时荧光定量PCR和免疫组化技术检测不同年龄绵羊附睾各部位MT1基因mRNA的表达量和MT1的分布情况。结果... 为研究褪黑素受体1(MT1)在不同年龄绵羊附睾中的表达模式,选用幼龄绵羊(2~3月龄)、青年绵羊(6~8月龄)和成年绵羊(2~3岁)的附睾,采用实时荧光定量PCR和免疫组化技术检测不同年龄绵羊附睾各部位MT1基因mRNA的表达量和MT1的分布情况。结果表明:幼龄绵羊附睾尾MT1基因的转录水平极显著高于附睾头和附睾体(P<0.01);青年绵羊附睾体和附睾尾MT1基因的转录水平显著高于附睾头(P<0.05);成年绵羊附睾尾MT1基因的转录水平显著高于附睾头和附睾体(P<0.05),附睾各部位MT1基因的转录水平随年龄增长呈明显降低趋势;定位结果显示,MT1在各年龄组绵羊附睾的各个部位均有分布,且主要分布在附睾上皮细胞中。综合上述结果,不同年龄绵羊附睾的不同部位均有MT1表达和分布,并随年龄增长各部位的表达量降低,相同年龄绵羊附睾尾MT1的表达水平较高。 展开更多
关键词 绵羊 附睾 褪黑素受体1(MT1) 基因表达 蛋白定位
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辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响 预览
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作者 霍敏 瑞兰 +4 位作者 林奕全 王瑞军 刘志红 李金泉 张家新 《畜牧与饲料科学》 2018年第7期39-45,共7页
旨在探讨辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响。利用添加不同浓度辅酶Q10(4、40、400?滋g/mL)的精液冷冻稀释液对绒山羊精液样本进行冷冻保存,待冷冻精液解冻后,采用流式细胞仪和计算机辅助精液分析系统(CASAS)分别检测不同精液样本... 旨在探讨辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响。利用添加不同浓度辅酶Q10(4、40、400?滋g/mL)的精液冷冻稀释液对绒山羊精液样本进行冷冻保存,待冷冻精液解冻后,采用流式细胞仪和计算机辅助精液分析系统(CASAS)分别检测不同精液样本的精子活率、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位和细胞内ROS水平。结果表明,当冷冻稀释液中添加浓度为40μg/mL辅酶Q10时,经历冷冻—解冻过程的绒山羊精液样本的精子活率、质膜完整率、顶体完整率均显著高于对照组(P<0.05);在冷冻稀释液中添加浓度为40μg/mL或400μg/mL的辅酶Q10均能显著提高线粒体膜电位并降低细胞内ROS水平(P<0.05)。综上所述,在冷冻稀释液中添加40μg/mL的辅酶Q10能够显著提高绒山羊精子抗氧化能力和冷冻保存效果。 展开更多
关键词 辅酶Q10 绒山羊 精液 冷冻保存
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葡萄糖对绒山羊精子冷冻保存及代谢的影响 预览
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作者 瑞兰 张通 +3 位作者 刘志红 王瑞军 李金泉 张家新 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期2054-2062,共9页
旨在研究葡萄糖对绒山羊精子冷冻保存及代谢的影响。本研究将混合后的精液样品,在含有不同浓度葡萄糖(0、28、56、84和112mmol·L-1)的冷冻稀释液进行冷冻-解冻,利用计算机辅助精液分析系统(CASAS)、流式细胞仪和酶标仪检测精子... 旨在研究葡萄糖对绒山羊精子冷冻保存及代谢的影响。本研究将混合后的精液样品,在含有不同浓度葡萄糖(0、28、56、84和112mmol·L-1)的冷冻稀释液进行冷冻-解冻,利用计算机辅助精液分析系统(CASAS)、流式细胞仪和酶标仪检测精子的运动性能、精子DNA完整性、顶体完整性、质膜完整性和精子中ROS和Ca2+水平,以及精子中ATP浓度、精子悬浮液中乳酸和丙酮酸浓度。结果表明,在冷冻稀释液中添加56mmol·L-1葡萄糖可以显著提高绒山羊精子冷冻-解冻后的精子活力、完整顶体和完整质膜的精子比率(P<0.05),但各组间完整DNA的精子比率差异不显著(P>0.05)。56mmol·L-1葡萄糖组精子细胞中ROS水平极显著高于其它各组(P<0.01);28和56mmol·L-1葡萄糖组精子细胞中Ca2+水平极显著低于其它各组(P<0.01);与其它各组相比,56和84mmol·L-1葡萄糖组精子细胞中ATP浓度极显著升高(P<0.01)。精液解冻后,在低葡萄糖浓度组(28~56mmol·L-1)的精子悬浮液中未检测到乳酸,而112mmol·L-1组检测到大量乳酸(P<0.01);当冷冻稀释液中添加低浓度的葡萄糖(28~84mmol·L-1),葡萄糖对精子悬浮液中丙酮酸的产生存在剂量依赖性作用,而高浓度(112mmol·L-1)组中丙酮酸产生减少(P<0.05)。综上表明,在冷冻稀释液中添加56mmol·L-1葡萄糖可以促进绒山羊精子冷冻-解冻过程中的代谢,提高其冷冻保存效果。 展开更多
关键词 绒山羊 精子 冷冻保存 葡萄糖 乳酸
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绒山羊附睾上皮细胞培养方法的建立及其生长特性 预览 被引量:5
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作者 范晓梅 张通 +2 位作者 瑞兰 边小娜 张家新 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第7期1212-1220,共9页
本研究旨在建立一种简单易行、获取细胞纯度高的绒山羊附睾上皮细胞体外培养体系。10~12月龄绒山羊附睾头部分别采用酶消化法和改良组织块消化法进行原代培养,利用免疫细胞化学染色法和免疫荧光化学法对细胞进行鉴定,同时利用流式细胞仪... 本研究旨在建立一种简单易行、获取细胞纯度高的绒山羊附睾上皮细胞体外培养体系。10~12月龄绒山羊附睾头部分别采用酶消化法和改良组织块消化法进行原代培养,利用免疫细胞化学染色法和免疫荧光化学法对细胞进行鉴定,同时利用流式细胞仪和CCK法分别检测细胞纯度和增殖情况,在电镜下观察细胞超微结构。结果表明,两种培养方法所获的细胞均呈岛屿状克隆生长和较好的增殖能力,具有活跃的分泌和代谢功能;上皮细胞特异性的角蛋白18和附睾特异性的谷胱甘肽过氧化物酶5(GPx5)的表达以及流式细胞仪结果显示,两种方法所获细胞均为纯度较高的附睾上皮细胞,但改良组织块消化法获得原代细胞需要的时间长,酶消化法获得原代细胞时间短,获得的细胞量大。本研究结果为进一步研究绒山羊附睾上皮功能提供了良好的基础。 展开更多
关键词 细胞培养 附睾上皮细胞 酶消化法 改良组织块消化法
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GPx5在内蒙古绒山羊附睾中的表达 被引量:1
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作者 范晓梅 瑞兰 +2 位作者 张通 边小娜 张家新 《中国农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第10期84-90,共7页
为研究GPx5在内蒙古绒山羊附睾中的表达模式,对初情期、体成熟期、老龄期3个生殖生理阶段绒山羊附睾及睾丸中的GPx5从mRNA和蛋白水平进行了检测。结果显示各生殖生理阶段绒山羊睾丸中均未见GPx5表达,附睾中均有GPx5表达。各生殖生理阶... 为研究GPx5在内蒙古绒山羊附睾中的表达模式,对初情期、体成熟期、老龄期3个生殖生理阶段绒山羊附睾及睾丸中的GPx5从mRNA和蛋白水平进行了检测。结果显示各生殖生理阶段绒山羊睾丸中均未见GPx5表达,附睾中均有GPx5表达。各生殖生理阶段附睾表达区域及表达量存在差异:初情期,GPx5mRNA和蛋白主要表达于附睾头部;体成熟期,附睾各区域GPx5mRNA和蛋白的表达量极显著高于其他阶段,附睾起始部和附睾头部为主要表达区;老龄期,GPx5mRNA和蛋白主要表达于附睾头部,但较体成熟期明显减少。免疫组化定位显示GPx5蛋白主要分布于附睾上皮细胞,而且各年龄阶段绒山羊附睾腔内精子上都有明显的GPx5阳性信号。研究表明绒山羊附睾GPx5的表达区域及表达量变化与动物生殖生理阶段直接相关。 展开更多
关键词 绒山羊 附睾 精子 GPx5
GDF-9基因真核表达载体的构建及其对牛卵丘细胞扩展相关基因表达的影响 预览
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作者 瑞兰 欧阳效晴 +3 位作者 张春强 张通 范晓梅 张家新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1325-1332,共8页
为构建牛生长分化因子9(GDF-9)基因真核表达载体,观察GDF-9基因真核表达载体转染牛卵丘细胞后对卵丘扩展相关基因表达的影响,试验在质粒pcDNA4myc-his的多克隆位点插入GDF-9基因构建真核表达载体pcDNA4myc-his-GDF-9,用脂质体转染牛... 为构建牛生长分化因子9(GDF-9)基因真核表达载体,观察GDF-9基因真核表达载体转染牛卵丘细胞后对卵丘扩展相关基因表达的影响,试验在质粒pcDNA4myc-his的多克隆位点插入GDF-9基因构建真核表达载体pcDNA4myc-his-GDF-9,用脂质体转染牛卵丘细胞,利用Western blotting检测了GDF-9蛋白的表达量,同时利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测牛卵丘细胞中卵丘扩展相关基因的表达量。结果发现,转染了pcDNA4myc-his-GDF-9的牛卵丘细胞中检测到GDF-9蛋白的表达,且牛卵丘细胞扩展相关基因PTGS2、PTX3和HAS2的表达量显著提高(P〈0.05),表明牛pcDNA4myc-his-GDF-9可有效地转染到牛卵丘细胞中,该试验结果为进一步研究GDF-9基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 GDF-9 真核表达载体 扩展相关基因
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GPX5在成年绵羊附睾中的表达与蛋白定位 预览 被引量:6
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作者 瑞兰 张通 +4 位作者 范晓梅 欧阳效晴 张春强 曹俊伟 张家新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期4989-4995,共7页
【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶-5(glutathione peroxidase type-5,GPX5)在成年绵羊附睾的表达特征以及GPX5蛋白在附睾中的定位,为绵羊精子在附睾中抗氧化机制的研究提供理论依据。【方法】采取年龄相近的成年蒙古绵羊的附睾、睾丸... 【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶-5(glutathione peroxidase type-5,GPX5)在成年绵羊附睾的表达特征以及GPX5蛋白在附睾中的定位,为绵羊精子在附睾中抗氧化机制的研究提供理论依据。【方法】采取年龄相近的成年蒙古绵羊的附睾、睾丸和输精管。每一只公羊的附睾分别按照附睾头、附睾体和附睾尾进行分割。样品保存于-80℃冰箱,采用实时荧光定量PCR和Western blotting的方法,对成年绵羊的附睾、睾丸和输精管的GPX5表达量进行分析。将新鲜的组织样品各部分切取适合大小浸泡于4%多聚甲醛溶液中24h,按照石蜡切片的方法制作组织切片。用GPX5特异性抗体孵育组织切片,利用DAB显色试剂盒对阳性信号进行标记。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,成年绵羊附睾头GPX5基因的表达量极显著高于附睾体和附睾尾(P〈0.01),而在输精管和睾丸几乎不表达。Western blotting的结果显示,GPX5蛋白在成年绵羊附睾头高表达,在附睾体和附睾尾有微量蛋白存在,睾丸和输精管中未发现GPX5蛋白。这表明GPX5主要在成年绵羊附睾头表达;经过免疫组化染色分析,GPX5蛋白主要位于附睾头上皮细胞质以及静纤毛,附睾体和附睾尾中的GPX5蛋白主要集中在静纤毛。在附睾头、附睾体和附睾尾中的精子上以及附睾腔都可以观察到GPX5蛋白,表明GPX5蛋白从附睾上皮分泌到附睾腔中,随着精子在附睾中的运输与精子结合。【结论】在成年绵羊附睾中,GPX5主要由附睾头上皮细胞合成和分泌,在附睾管腔中与精子结合,为精子功能的正常发挥提供保护。 展开更多
关键词 绵羊 附睾 GPX5 基因表达 蛋白定位
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C型钠肽预处理对牛卵母细胞体外成熟的影响 预览 被引量:2
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作者 张春强 欧阳效晴 +3 位作者 张通 瑞兰 范晓梅 张家新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1424-1431,共8页
旨在研究C型钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)预处理对牛卵母细胞体外成熟(In vitro maturation,IVM)的影响。以常规的牛卵母细胞体外24h成熟培养为对照,研究了CNP预处理牛卵母细胞6h,再进行成熟培养28h后(CNP预处理组)的牛卵母细... 旨在研究C型钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)预处理对牛卵母细胞体外成熟(In vitro maturation,IVM)的影响。以常规的牛卵母细胞体外24h成熟培养为对照,研究了CNP预处理牛卵母细胞6h,再进行成熟培养28h后(CNP预处理组)的牛卵母细胞成熟情况。结果表明,CNP预处理组的牛卵母细胞成熟效果明显提高,其受精后的囊胚率和囊胚细胞数都明显高于对照组((51.55%±2.50%),(156.2±11.0)和(28.13%±3.80%),(116.3±19.0),P<0.05);卵母细胞中线粒体分布由未成熟时的周边分布变为成熟时的均匀分布;而CNP预处理6h的卵母细胞中线粒体多呈半周边分布,在随后的28h成熟培养中也变为均匀分布;CNP预处理组的成熟卵母细胞线粒体DNA的拷贝数为(510 078.4±28 906.0),明显高于对照组的((416 558.5±51 743.0),P<0.05)。综上表明:C型钠钛预处理可以有效改善牛卵母细胞的体外成熟质量。 展开更多
关键词 C型钠肽 牛卵母细胞 体外成熟 线粒体
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生长分化因子-9对牛卵丘细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 欧阳效晴 张春强 +5 位作者 瑞兰 张通 范晓梅 高丽霞 赵濛 张家新 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期920-926,共7页
研究生长分化因子-9(growth differentiation factor-9,GDF-9)对牛卵丘细胞增殖的影响。采用MTT法检测不同浓度GDF-9对卵丘细胞增殖的影响,结果表明,GDF-9能促进卵丘细胞的增殖,且GDF-9与卵丘细胞增殖效应存在浓度梯度关系;在卵丘细... 研究生长分化因子-9(growth differentiation factor-9,GDF-9)对牛卵丘细胞增殖的影响。采用MTT法检测不同浓度GDF-9对卵丘细胞增殖的影响,结果表明,GDF-9能促进卵丘细胞的增殖,且GDF-9与卵丘细胞增殖效应存在浓度梯度关系;在卵丘细胞增殖过程中,FSH在一定程度上与GDF-9发挥协同作用。在GDF-9和FSH的作用下,去除卵母细胞的卵丘细胞复合体(oocytectomized cumulus cell complexes,OOX)也可以保持较好的发育形态。实时定量PCR结果表明,随着GDF-9浓度的增加,卵丘细胞扩展相关基因PTX3、HAS2及PTGS2的表达量也增加。总之,以上的研究结果表明,GDF-9可以促进卵丘细胞的增殖,对卵丘细胞功能的发挥起着重要的作用。 展开更多
关键词 牛卵丘细胞 扩展相关基因 增殖 生长分化因子-9
以学案为载体 落实“先学后教,以学定教” 预览
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作者 瑞兰 《中学课程资源》 2014年第5期8-9,共2页
课堂教学是教学的基本形式,优质、高效的课堂教学是促进学生有效学习的前提条件,所以实现课堂教学的有效性已成为当前课程改革的重要方向。本文在理解"什么是有效教学""如何评价教学的有效性"的基础上,结合高中化... 课堂教学是教学的基本形式,优质、高效的课堂教学是促进学生有效学习的前提条件,所以实现课堂教学的有效性已成为当前课程改革的重要方向。本文在理解"什么是有效教学""如何评价教学的有效性"的基础上,结合高中化学新课程的课堂教学,论述了在课改中实践以学案为载体,落实"先学后教,以学定教"的策略,并介绍了作者提高课堂教学有效性的一些做法和体会。 展开更多
关键词 有效课堂教学 学案导学 先学后教 以学定教 做法 体会
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生长分化因子9在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中的表达 预览 被引量:2
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作者 欧阳效晴 杨淑青 +3 位作者 张春强 瑞兰 张通 张家新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1569-1575,共7页
旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus—oocytecomplex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growthdifferentiationfactor9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系。运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体... 旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus—oocytecomplex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growthdifferentiationfactor9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系。运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中(0、6、12、18、24和28h)的相对表达变化,同时观察了卵丘细胞扩展情况。结果表明,GDF-9mRNA的表达量在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中呈现一定的规律性变化,随着成熟培养的进行,其表达量逐渐增加,在成熟培养12h时表达量最高,但随后又逐渐降低,在成熟培养24h表达量最低;卵丘细胞在IVM12h开始出现明显的扩散,而且随着成熟时间的延长,卵丘细胞的扩散程度在不断增加。研究结果表明:高水平的GDF-9mRNA表达与卵丘细胞开始扩散的时间一致,揭示GDF-9基因可能在牛卵丘细胞扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 卵丘卵母细胞复合体 GDF-9 体外成熟
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