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水稻OsDUF393基因编辑突变体的创建 预览
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作者 王荃 石雨鹭 +5 位作者 邳瑞雪 孔晓聪 靳亚军 梁闪闪 张泗举 《中国稻米》 2019年第2期40-45,共6页
DUFs家族是一类未知功能结构域蛋白家族,转录谱和蛋白谱分析发现,DUFs蛋白在生物的生长和发育中发挥着至关重要的作用,因此对DUFs基因功能的研究将有助于了解生物体复杂的生长发育机制。目前该家族基因功能仍鲜见报道。为了探究水稻(Ory... DUFs家族是一类未知功能结构域蛋白家族,转录谱和蛋白谱分析发现,DUFs蛋白在生物的生长和发育中发挥着至关重要的作用,因此对DUFs基因功能的研究将有助于了解生物体复杂的生长发育机制。目前该家族基因功能仍鲜见报道。为了探究水稻(Oryza sativa)OsDUF393(Domains of Unknown Function 393)基因的生物学功能,利用CRISPR/Cas9技术构建了水稻DUFs家族基因OsDUF393的载体,同时利用农杆菌介导的遗传转化将构建的CRISPR/Cas9载体转化水稻品种中花11中,经潮霉素抗性基因鉴定,获得了100株T0代转基因植株。对转基因植株的靶位点进行测序分析后发现有单碱基插入和大片段DNA序列缺失2种类型。通过RT-PCR分析突变体中OsDUF393基因的表达水平,结果表明,目的基因在不同纯合编辑突变体中转录水平均有下降。上述结果表明,CRISPR/Cas9重组载体成功实现了对OsDUF393基因的定向编辑。这些编辑突变体材料为后续该基因功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 OsDUF393 基因编辑 CRISPR/Cas9
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基因编辑技术原理及其在动植物研究中的应用 预览
2
作者 张泗举 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期1-9,共9页
自人类基因组计划开展以来,越来越多生物的基因组序列得到了测定,基因的功能逐步得到鉴定.人们期望通过对基因表达的改变,来治疗人类疾病或提高生物的产量和品质.早期突变技术对基因的改变是不定向的,近年来,锌指核酸酶(ZFN)、转录激活... 自人类基因组计划开展以来,越来越多生物的基因组序列得到了测定,基因的功能逐步得到鉴定.人们期望通过对基因表达的改变,来治疗人类疾病或提高生物的产量和品质.早期突变技术对基因的改变是不定向的,近年来,锌指核酸酶(ZFN)、转录激活子样效应因子核酸酶(TALEN)和CRISPR/Cas9等技术可对某个已知基因进行编辑.特别是CRISPR/Cas9技术,由于具有操作方便、效率高等优点,因此成为对基因进行定向操作的强有力工具.本文对几种基因编辑技术的原理和应用进行简要介绍和展望. 展开更多
关键词 基因编辑 CRISPR/Cas9 转录激活子样效应因子核酸酶 锌指核酸酶
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基于CRISPR/Cas9技术的水稻OsDUF1475突变体的创建与分析
3
作者 孔晓聪 邳瑞雪 +5 位作者 石雨鹭 王荃 靳亚军 梁闪闪 张泗举 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期393-401,共9页
未知功能结构域蛋白家族(domains of unknown function protein families, DUFs)是一大群功能未表征的蛋白家族,在生命活动中具有重要作用。为了探究水稻(Oryza sativa) DUF基因OsDUF1475的生物学功能,利用CRISPR/Cas9技术对OsDUF1475... 未知功能结构域蛋白家族(domains of unknown function protein families, DUFs)是一大群功能未表征的蛋白家族,在生命活动中具有重要作用。为了探究水稻(Oryza sativa) DUF基因OsDUF1475的生物学功能,利用CRISPR/Cas9技术对OsDUF1475基因进行靶向编辑。针对OsDUF1475基因第1个外显子设计2个single guide RNA (sgRNA)靶位点,分别构建获得2个CRISPR/Cas9重组载体;然后通过农杆菌(Agrobacterium)介导的遗传转化法导入水稻品种日本晴(Nipponbare)中,经潮霉素抗性筛选之后获得65株T0代转基因植株。对转基因植株的靶位点进行测序分析,发现有单碱基插入、10 bp以内碱基缺失和大片段DNA序列缺失3种类型。进一步分析氨基酸序列,发现这些突变造成氨基酸移码现象,进而导致蛋白质翻译的提前终止。上述结果表明,CRISPR/Cas9重组载体成功实现了对OsDUF1475基因的定向编辑,并且通过自交获得了T1代纯合突变植株。这些突变植株为进一步开展OsDUF1475功能研究提供了基础资料。 展开更多
关键词 水稻 OsDUF1475 CRISPR/Cas9技术 基因编辑
过量表达OsDTH11基因对水稻穗发育和花粉育性的影响 预览
4
作者 靳亚军 石雨鹭 +5 位作者 邳瑞雪 王荃 孔晓聪 梁闪闪 张泗举 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期39-44,共6页
为了探究水稻成花转变基因家族成员OsDTH11的功能,采用反向遗传学方法,构建OsDTH11的过表达载体并通过农杆菌介导转化水稻,获得了水稻OsDTH11过量表达转基因植株.分子检测结果表明:OsDTH11在转基因植株中的表达明显上升,说明过量表达载... 为了探究水稻成花转变基因家族成员OsDTH11的功能,采用反向遗传学方法,构建OsDTH11的过表达载体并通过农杆菌介导转化水稻,获得了水稻OsDTH11过量表达转基因植株.分子检测结果表明:OsDTH11在转基因植株中的表达明显上升,说明过量表达载体正常工作,起到了过量表达作用.表型分析发现,过量表达OsDTH11不影响水稻成花转变的时间,但转基因植株表现出穗发育不良、结实率降低(只有野生型的46%).通过碘染法进行花粉育性鉴定,与对照植株相比,过量表达OsDTH11的转基因植株花粉育性明显降低,从而降低了水稻结实率,表明OsDTH11可能在水稻穗及花的发育方面发挥作用.组织特异性表达分析结果表明:OsDTH11在水稻各个组织中均有表达,在穗中表达量很高,在分生组织、叶片和根中表达较弱.这一结果也说明OsDTH11有可能在水稻穗的生长发育过程中发挥重要作用. 展开更多
关键词 水稻 成花转变 OsDTH11 过表达 穗发育 花粉育性
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水稻HD-Zip Ⅲ家族成员OsHox10的功能分析 预览
5
作者 杨波 罗倩 +6 位作者 靳亚军 熊炜 孔晓聪 王荃 邳瑞雪 石雨鹭 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2018年第5期36-41,共6页
为了探究HD-ZipⅢ家族成员之一OsHox10在水稻发育中的功能,构建了OsHox10的过量表达载体并获得了转基因株系,明确了OsHox10基因的表达模式和亚细胞定位,并初步了解它与植物激素及抗旱性的关系.表型观察发现,过量表达OsHox10能使水稻叶... 为了探究HD-ZipⅢ家族成员之一OsHox10在水稻发育中的功能,构建了OsHox10的过量表达载体并获得了转基因株系,明确了OsHox10基因的表达模式和亚细胞定位,并初步了解它与植物激素及抗旱性的关系.表型观察发现,过量表达OsHox10能使水稻叶片出现不同程度的皱缩、卷曲,尤其是靠近叶鞘部分卷曲明显. OsHox10基因的组织特异性表达结果表明,OsHox10在水稻不同器官中都有表达,但主要在分裂旺盛的部位,如茎顶端分生组织及不同时期的幼穗中表达量较高.亚细胞定位结果表明,OsHox10定位于细胞质中或者细胞膜上.分析OsHox10在植物激素及干旱条件处理下的表达,结果发现,激素及干旱处理均能够诱导OsHox10基因的表达,表明OsHox10可能与水稻响应激素信号和干旱胁迫有关. 展开更多
关键词 水稻 HD-ZIP Ⅲ家族 OsHox10 过表达 亚细胞定位
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水稻OsDTH10基因CRISPR/Cas9编辑突变体的创建及功能分析 预览
6
作者 刘薇茵 杨波 +5 位作者 王荃 孔晓聪 靳亚军 李莹莹 熊炜 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 2017年第6期26-30,36共6页
为了探究OsDTH10基因在水稻生长发育及开花中的作用,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsDTH10基因进行定向编辑.在OsDTH10基因的第4个外显子处设计sgRNA的靶位点,通过PCR扩增与Os U6SK空载体连接形成OsU6SK-sg RNA融合载体,再将获得的sg ... 为了探究OsDTH10基因在水稻生长发育及开花中的作用,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsDTH10基因进行定向编辑.在OsDTH10基因的第4个外显子处设计sgRNA的靶位点,通过PCR扩增与Os U6SK空载体连接形成OsU6SK-sg RNA融合载体,再将获得的sg RNA和Cas9连接到植物双元载体pCAMBI1300中,得到重组载体pCAMBI1300-CRISPR/Cas9-OsDTH10.利用农杆菌介导的植物转化法得到转基因植株,对其进行鉴定并测序.本研究共获得3个株系8株转基因植株,测序结果显示,2号株系的4株转基因植株由于发生了单碱基的插入,基因测序出现了套峰.田间表型观察发现,2号株系的4株T0代转基因植株抽穗期早于空载体对照,获得的T1代转基因植株抽穗期比对照的提早8 d.这些结果表明,重组载体pCAMBI1300-CRISPR/Cas9-OsDTH10成功实现了对水稻OsDTH10基因的定向编辑. 展开更多
关键词 水稻 OsDTH10 CRISPR/Cas9系统 表达分析
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水稻顺式还原酮加双氧酶基因的表达及功能分析 预览
7
作者 熊炜 杨波 +6 位作者 刘薇茵 王荃 孔晓聪 靳亚军 梁闪闪 张泗举 《中国农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第12期2199-2208,共10页
【目的】农作物对逆境胁迫的耐受能力与产量息息相关,是作物育种要考虑的重要因素。文中对水稻顺式还原酮加双氧酶基因Os ARD1进行研究,分析其表达模式,明确其在水稻应对非生物胁迫中的功能,为水稻耐旱品种的分子设计及育种提供参考依... 【目的】农作物对逆境胁迫的耐受能力与产量息息相关,是作物育种要考虑的重要因素。文中对水稻顺式还原酮加双氧酶基因Os ARD1进行研究,分析其表达模式,明确其在水稻应对非生物胁迫中的功能,为水稻耐旱品种的分子设计及育种提供参考依据。【方法】提取不同组织器官的总RNA,利用RT-PCR方法分析Os ARD1表达的组织特异性。利用不同的非生物胁迫处理14 d大小的野生型(中花11)植株,在不同时间点提取总RNA,利用RT-PCR方法分析Os ARD1表达的受诱导情况。通过农杆菌遗传转化法转化水稻愈伤组织,经过一系列分子检测后获得稳定遗传的T1代Os ARD1的过量表达转基因植株,以转入空载体的野生型植株作为对照。将在营养液中正常培养的12 d大小的野生型和过表达幼苗移出营养液进行缺水处理并进行恢复试验。将催芽后的野生型和过表达转基因植株种子种在含有5%PEG6000的agar培养基中进行渗透胁迫处理,以不含PEG6000的agar培养基作为对照,观察二者的表型。【结果】组织特异性表达分析表明Os ARD1主要在根及成熟的组织中表达,尤其在衰老的组织中有较高表达。非生物胁迫处理表明Os ARD1的表达明显受机械损伤、高盐和渗透胁迫的诱导。获得6个独立株系的可稳定遗传的Os ARD1过量表达转基因植株。对过量表达转基因植株及空载体野生型对照进行干旱胁迫处理,缺水处理5 h后,野生型植株叶片卷曲皱缩成针状表现出严重的缺水症状,但此时过表达转基因植株叶片仍处于舒展状态;缺水处理8 h后开始复水培养3 d,野生型植株的存活率仅为10%,而过表达植株存活率为80%,远远高于野生型,说明过量表达Os ARD1提高了水稻对缺水的耐受能力。用PEG渗透胁迫模拟干旱胁迫处理6 d后发现,不含PEG6000对照组中野生型和过表达植株的幼苗生长情况没有明显的差别;在PEG处理组中,野生型� 展开更多
关键词 水稻 OS ARD1 过量表达 干旱胁迫 乙烯
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水稻开花时间基因OsDTH10的过表达分析 预览 被引量:2
8
作者 李莹莹 熊炜 +2 位作者 宋婷 曹振华 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期121-126,共6页
开花时间(抽穗期)是农作物一个重要的农艺性状,与农作物的产量息息相关。调节农作物的开花抽穗时间是提高农作物产量的一条重要途径。为了揭示水稻开花时间基因OsDTHl0在水稻抽穗期调控中的功能,利用反向遗传学方法构建了水稻OsDTHl... 开花时间(抽穗期)是农作物一个重要的农艺性状,与农作物的产量息息相关。调节农作物的开花抽穗时间是提高农作物产量的一条重要途径。为了揭示水稻开花时间基因OsDTHl0在水稻抽穗期调控中的功能,利用反向遗传学方法构建了水稻OsDTHl0基因过量表达载体,获得转基因植株,分析目的基因在过量表达条件下的功能。结果表明,过量表达OsDTHl0导致水稻的抽穗期推迟;RT-PCR检测结果表明OsDTHl0的表达量在晚抽穗的转基因株系中明显提高,但在没有表型的转基因株系及野生型中表达量较低,说明晚抽穗的表型是由于OsDTHl0过量表达所致。组织特异性表达结果表明OsDTHl0在植物的不同器官中都有表达,但在水稻的茎、叶鞘中表达量较高。分析OsDTHl0在不同叶龄叶片中的表达,结果表明OsDTHl0在未完全展开的剑叶叶片及倒2叶中的表达量较高,但在下部较老的倒3叶及倒4叶中的表达量下降。另外,分析OsDTHl0在不同光周期条件下的昼夜节律性表达,结果表明无论在短日照还是长日照条件下,OsDTHl0都在白天(光期)有表达高峰,在夜晚(暗期)表达降低,表明OsDTHl0可能涉及光周期调控通路调节水稻的抽穗期。 展开更多
关键词 水稻 OsDTH10 过量表达 表达分析
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一个水稻类受体蛋白激酶OsRPK2的过量表达分析 预览
9
作者 曹振华 宋婷 +3 位作者 李莹莹 熊炜 刘晨曦 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 2016年第3期50-53,共4页
为了解类受体蛋白激酶OsRPK2在水稻发育中的作用,采用反向遗传学方法构建了该蛋白激酶基因的过表达载体,将其导入野生型水稻中获得转基因植株后,观察植株的表型变化以及该基因在水稻植株不同部位的表达情况.结果发现,OsRPK2的转基... 为了解类受体蛋白激酶OsRPK2在水稻发育中的作用,采用反向遗传学方法构建了该蛋白激酶基因的过表达载体,将其导入野生型水稻中获得转基因植株后,观察植株的表型变化以及该基因在水稻植株不同部位的表达情况.结果发现,OsRPK2的转基因植株产生白化现象,qRT-PCR分析表明白化植株中OsRPK2的表达量明显增加,说明水稻转基因植株的白化表型是由OsRPK2基因的过表达造成的.OsRPK2的组织特异性表达结果表明,OsRPK2在水稻的不同组织器官中均有表达,但在水稻幼嫩的分生组织和幼龄叶片中表达量较高,反映了OsRPK2在水稻植株发育及建成中具有重要作用. 展开更多
关键词 水稻 类受体蛋白激酶OsRPK2 过表达 白化
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一个水稻富亮氨酸重复类受体蛋白激酶的RNAi及表达分析 预览 被引量:1
10
作者 宋婷 熊炜 +4 位作者 李莹莹 曹振华 刘晨曦 刘薇茵 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 2016年第1期48-51,共4页
为了揭示富亮氨酸重复类受体蛋白激酶(LRR-RLKs)家族成员OsLPR1在水稻生长发育与抗逆性中的功能,利用反向遗传学方法构建了OsLPR1的RNAi载体,将其导入野生型水稻中获得转基因植株,观察表型并且分析OsLPR1基因在野生型和转基因植株... 为了揭示富亮氨酸重复类受体蛋白激酶(LRR-RLKs)家族成员OsLPR1在水稻生长发育与抗逆性中的功能,利用反向遗传学方法构建了OsLPR1的RNAi载体,将其导入野生型水稻中获得转基因植株,观察表型并且分析OsLPR1基因在野生型和转基因植株中的表达情况.在表型观察中发现RNAi转基因植株出现白化苗.进一步的RT-PCR分析发现,白化苗中目的基因OsLPR1的表达量明显偏低,野生型中的表达量则较高,这表明OsLPR1基因表达异常会导致水稻出现白化现象另外,还分析了oSlpr1的组织特异性表达,结果表明,OsLPR1在不同的组织器官中均有表达,但在叶片及叶鞘中高表达,这说明该基因可能与水稻叶片的生长发育有关. 展开更多
关键词 蛋白激酶 表达分析 RNAi分析 白化苗 OsLPR1
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一个水稻bHLH转录因子的反向遗传学分析 预览
11
作者 孙琼琳 罗倩 +2 位作者 宋婷 李莹莹 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 2015年第2期67-70,共4页
bHLH类型转录因子对于植物开花具有重要的调控作用.为了揭示bHLH转录因子在短日照植物水稻中的功能,利用反向遗传学方法构建了水稻OsbHLH1基因过表达载体,获得过表达转基因植株,分析目的基因在过量表达条件下的功能.结果表明:过表... bHLH类型转录因子对于植物开花具有重要的调控作用.为了揭示bHLH转录因子在短日照植物水稻中的功能,利用反向遗传学方法构建了水稻OsbHLH1基因过表达载体,获得过表达转基因植株,分析目的基因在过量表达条件下的功能.结果表明:过表达OsbHLH1能够导致水稻的抽穗期推迟;OsbHLH1在水稻中的表达还具有光周期昼夜节律性,无论是在长日照还是在短日照条件下,OsbHLH1都在夜间具有表达高峰.组织特异性表达结果表明:OsbHLH1在水稻的不同器官中都有表达,但在叶片中表达较高,与光周期相关基因的表达吻合. 展开更多
关键词 水稻 转录因子bHLH OsbHLH1基因 光周期 过表达分析
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水稻同源异型域转录因子 OsHox9的反向遗传学分析 预览 被引量:1
12
作者 艾丽萍 申奥 +3 位作者 高志超 李政龙 孙琼琳 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期223-228,共6页
同源异型域(Homeobox,HB)转录因子对于植物的生长发育具有重要的调控作用,主要涉及细胞分化、形态建成、内外环境信号应答等多个方面。为了研究该转录因子家族成员在水稻中的功能,构建了该家族成员 Os Hox9基因的 RNAi 表达载体,利用... 同源异型域(Homeobox,HB)转录因子对于植物的生长发育具有重要的调控作用,主要涉及细胞分化、形态建成、内外环境信号应答等多个方面。为了研究该转录因子家族成员在水稻中的功能,构建了该家族成员 Os Hox9基因的 RNAi 表达载体,利用反向遗传方法分析该基因的功能。与野生型对照植株相比,RNAi 转基因植株株高变矮,分蘖数减少。实时PCR 表达分析表明 Os Hox9基因在有表型转基因植株中的表达下调,但在没有表型转基因植株中 Os Hox9表达量与野生型植株差异不显著,说明 RNAi 载体起到了干涉作用,转基因植株的表型是由 RNAi 造成的。组织特异性表达分析表明 Os-Hox9在水稻的根、茎、叶、茎顶端分生组织及不同时期的幼穗中均有表达,但在茎顶端分生组织及幼穗中表达量较高。为了查明 OsHox9的亚细胞定位,构建了 OsHox9与绿色荧光蛋白 GFP 的融合载体并导入烟草叶片中进行瞬时表达,结果表明OsHox9定位于细胞膜上,在细胞膜上起作用。 展开更多
关键词 水稻 OS Hox9 RNA 干涉 表达分析
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水稻中两个同源异型结构域转录因子的亚细胞定位 预览
13
作者 李政龙 申奥 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 2014年第3期62-65,共4页
为了对水稻同源异型结构域转录因子HD-ZipⅢ家族中的HDZ1和HDZ2进行亚细胞定位,利用RT-PCR技术从水稻cDNA中扩增HDZ1和HDZ2的编码区(去除终止密码子序列),与绿色荧光蛋白GFP编码框融合,构建2个转录因子的瞬时表达载体,采用农杆菌介导... 为了对水稻同源异型结构域转录因子HD-ZipⅢ家族中的HDZ1和HDZ2进行亚细胞定位,利用RT-PCR技术从水稻cDNA中扩增HDZ1和HDZ2的编码区(去除终止密码子序列),与绿色荧光蛋白GFP编码框融合,构建2个转录因子的瞬时表达载体,采用农杆菌介导的转化方法转化至烟草中进行瞬时表达分析.结果表明:PCR扩增所得为目的基因片段HDZ1和HDZ2;二者与载体质粒pCAMBIA35S-GFP连接获得的融合表达载体成功移至烟草中并表达;确定HDZ1主要定位于烟草叶片的气孔中,而HDZ2定位于烟草表皮细胞的细胞膜上.二者在亚细胞中的定位不同,可能在水稻生长发育中所起的作用也不相同. 展开更多
关键词 水稻 同源异型结构域HD-ZipⅢ 转录因子 绿色荧光蛋白 亚细胞定位
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干扰HD-ZipⅢ家族成员OsHox33的表达加速水稻叶片的衰老
14
作者 申奥 +3 位作者 金治平 宋素胜 李政龙 沙爱华 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2014年第1期54-65,共12页
HD—ZipⅢ基因家族成员在植物生长发育中起重要作用,主要涉及调控植物胚的发育模式、茎顶端分生组织的形成、叶片极性的形成、维管系统的发育等多个方面.尤其在植物叶片的发育中起重要作用.尽管HD-ZipⅢ家族成员在陆生植物中高度保... HD—ZipⅢ基因家族成员在植物生长发育中起重要作用,主要涉及调控植物胚的发育模式、茎顶端分生组织的形成、叶片极性的形成、维管系统的发育等多个方面.尤其在植物叶片的发育中起重要作用.尽管HD-ZipⅢ家族成员在陆生植物中高度保守,但基于拟南芥多重突变体的遗传分析揭示了HD-ZipⅢ家族的功能在进化过程中已有所分化.本文报道了一个HD-ZipⅢ家族成员OsHox33,并分析了其功能,研究结果表明,其在水稻叶片衰老中起重要作用.为了揭示OsHox33的功能,本研究构建两个特异的RNkd载体(一个干涉片段来自OsHox33的5’端,另一个来自OsHox33的3’非翻译区)干扰OsHox33的表达,结果表明,两个载体的转基因植株都展示了叶片早衰的相似表型,表明干扰OsHox33的表达加速了水稻叶片的衰老.pOsHox33::GUS及RT.PCR分析表明,OsHox33在水稻幼嫩的器官中有较高的表达,尤其在茎顶端分生组织、居间分生组织及愈伤等幼嫩组织有较高的表达.不同时期叶片实时定量PCR分析表明,OsHox33在水稻幼叶中有较高的表达,但在衰老叶片中表达降低.另外,不同时期叶片叶绿体电子显微镜超微结构显示,OsHox33RNAi转基因植株加速了叶绿体结构的降解,与OsHox33RNAi转基因植株的表型相一致.基因表达调控结果显示,OsHox33可以调控水稻叶片衰老特性基因GSI和GS2的表达,干扰OsHox33的表达降低了GSl的表达,但增加了GS2的表达.本文对于HD—zipⅢ家族在植物生长发育中的功能提供了新的理解. 展开更多
关键词 水稻 HD—ZipIII 叶片衰老
两个水稻叶片反向卷曲突变体的表型及遗传分析 预览 被引量:1
15
作者 申奥 苏余燕 +1 位作者 宋远丽 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 2014年第1期67-71,共5页
为了揭示水稻叶片卷曲的形态建成,分析了水稻Ac/Ds转座子插入突变体库中的2个叶片反向卷曲突变体的表型及组织形态.研究发现,与野生型平展叶片相比,内卷突变体和外卷突变体叶片中泡状细胞数目明显减少,这可能是造成水稻叶片卷曲... 为了揭示水稻叶片卷曲的形态建成,分析了水稻Ac/Ds转座子插入突变体库中的2个叶片反向卷曲突变体的表型及组织形态.研究发现,与野生型平展叶片相比,内卷突变体和外卷突变体叶片中泡状细胞数目明显减少,这可能是造成水稻叶片卷曲的重要原因.另外,内卷突变体叶片主脉薄壁细胞少,薄壁细胞崩裂形成的气腔面积较大.对2个卷叶突变体的纤维素含量进行测定发现,内卷突变体叶片及茎杆中纤维素含量明显减少,而外卷突变体叶片及茎杆的纤维素含量与野生型没有显著差异,说明2个卷叶突变体叶片的卷曲可能由不同基因突变造成.分析了2个水稻卷叶突变体的遗传规律,结果表明,二者均由隐性单基因控制. 展开更多
关键词 水稻 叶片卷曲 表型分析 遗传分析
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一个水稻蛋白激酶的过表达分析及表达调控 预览
16
作者 张宝来 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 2013年第3期63-66,共4页
对一个预测的具有光反应活性的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶STK进行过表达研究,构建了STK过表达载体,并用农杆菌介导的方法进行遗传转化,获得T0代转基因植株.对转基因阳性植株进行表达分析的结果表明,转基因植株STK基因的表达量显著高于对照,... 对一个预测的具有光反应活性的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶STK进行过表达研究,构建了STK过表达载体,并用农杆菌介导的方法进行遗传转化,获得T0代转基因植株.对转基因阳性植株进行表达分析的结果表明,转基因植株STK基因的表达量显著高于对照,说明目的基因得到了过表达.另外,利用获得的过表达转基因植株对STK调控水稻中光周期相关的开花基因Hd1和Hd3a的表达进行分析,结果表明,Hd1及Hd3a的表达在转基因植株中明显上调,表明该蛋白激酶的基因可能位于Hd1和Hd3a上游,对于Hd1和Hd3a的表达具有重要的调控作用. 展开更多
关键词 水稻 蛋白激酶 转基因 过表达 表达调控
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温度和光周期对水稻抽穗期调控的交互作用
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作者 宋远丽 高志超 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2012年第4期 316-325,共10页
光周期和温度是植物开花的2个关键的调控因素,植物成花转变决定于植物对光周期和温度变化的精确测量.作为短日照植物,水稻在长日低温条件下抽穗期推迟,为了阐明温度和光周期对水稻开花时间的调控效应,本文利用1个光周期不敏感的突... 光周期和温度是植物开花的2个关键的调控因素,植物成花转变决定于植物对光周期和温度变化的精确测量.作为短日照植物,水稻在长日低温条件下抽穗期推迟,为了阐明温度和光周期对水稻开花时间的调控效应,本文利用1个光周期不敏感的突变体及其野生型,系统地分析了不同温度和光周期处理条件下,调控水稻开花时间几个关键基因(Hd3a,RFTL,Ehdl,Ghd7,RID1/Ehd2/Osldl,SeS)的表达调控模式,结果表明Ehdl—Hd3a/RFTl通路在光周期和温度调控水稻开花途径中保守.Ehdl,Hd3a和RFT1的表达在低温(23℃)条件下急剧下降,表明Ehdl,Hd3a和RFTl表达阻抑是低温条件下水稻开花推迟的主要原因.另外,在长日照条件下,低温(23℃)处理促进了水稻开花抑制子Ghd7的表达,表明低温条件和长日照条件对Ghd7的表达具有协同作用.此外,本文还分析了Hdl与光周期开花调控途径中几个关键基因的调控关系,发现Hdl在长日照条件下负向调控Ehdl的表达而正向调控Ghd7的表达,表明在长日照条件下,Hdl-Ghd7-Ehdl—RFTl通路也是水稻抽穗期调控的一条重要途径. 展开更多
关键词 水稻 光周期 温度 开花调控 交互作用
水稻开花的光温调控分子机理 预览 被引量:5
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作者 宋远丽 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期383-392,共10页
水稻一生要经历营养生长和生殖生长两个阶段,只有顺利从营养生长向生殖生长转变,水稻才能开花结实。水稻的开花是环境因素与控制水稻开花基因网络相互作用的结果,光照和温度是调控水稻开花的两个重要的环境因子。关于水稻如何感知光照... 水稻一生要经历营养生长和生殖生长两个阶段,只有顺利从营养生长向生殖生长转变,水稻才能开花结实。水稻的开花是环境因素与控制水稻开花基因网络相互作用的结果,光照和温度是调控水稻开花的两个重要的环境因子。关于水稻如何感知光照和温度变化,然后启动内部基因的表达来调控水稻开花,科学家提出了一些假说试图解释这个问题。近几年对水稻的开花调控途径的研究有了长足进展,人们对该问题有了新认识。结合前人的研究结果,分析了水稻在不同光温调控下的分子机理。 展开更多
关键词 水稻 开花 基因调控 光周期 温度
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一个Ds插入标签基因OsPI—PLC2的分子鉴定及表达分析 预览 被引量:1
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作者 高志超 《天津师范大学学报:自然科学版》 CAS 2012年第3期85-90,共6页
在前期构建的水稻转座子标签插入突变体库中,鉴定了一个没有明显表型变化的Ds转座子标签系,发现Ds标签插入到一个编码磷脂酰肌醇磷脂酶C(PI-PLC)基因的第6个内含子中,分析该基因编码的氨基酸序列发现其含有已知的PI—PLC所具有的... 在前期构建的水稻转座子标签插入突变体库中,鉴定了一个没有明显表型变化的Ds转座子标签系,发现Ds标签插入到一个编码磷脂酰肌醇磷脂酶C(PI-PLC)基因的第6个内含子中,分析该基因编码的氨基酸序列发现其含有已知的PI—PLC所具有的典型的X、Y和C2-like保守结构域,与已知的其它植物的PI-PLC蛋白有较高的同源性.另外,利用RT—PCR对该基因进行了表达分析,结果表明该基因在正常条件下表达量很低,但在胁迫条件下(机械损伤、盐、干旱、低温)或一些信号分子(SA、ABA)的诱导下大量表达,表明该基因参与植物对不良环境条件的信号转导途径,对于植物抵御不良环境条件具有重要作用. 展开更多
关键词 水稻 Ds转座子标签 OsPI-PLC2 表达分析
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硼等4种元素对甘草酸生物合成关键酶基因表达的RT-PCR分析 预览 被引量:4
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作者 梁新华 +1 位作者 梁军 张风侠 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期 2351-2353,共3页
目的研究B、Mn、Zn和Mo等4种微量元素对甘草酸生物合成关键酶鲨烯合成酶(SQS)和β-香树脂醇合成酶(β-AS)基因表达的影响。方法设置上述4种微量元素0,0.05%,0.1%,0.15%和0.3%5个不同浓度水培乌拉尔甘草幼苗,9天后,取其根部半定量PC... 目的研究B、Mn、Zn和Mo等4种微量元素对甘草酸生物合成关键酶鲨烯合成酶(SQS)和β-香树脂醇合成酶(β-AS)基因表达的影响。方法设置上述4种微量元素0,0.05%,0.1%,0.15%和0.3%5个不同浓度水培乌拉尔甘草幼苗,9天后,取其根部半定量PCR检测。结果能够促进SQS基因表达的是高和极高浓度的Zn元素(0.15%和0.3%)和中、高和极高浓度的Mo元素(0.1%,0.15%和0.3%);Zn元素所有处理浓度均可明显提高β-AS基因的表达,随着Mo元素处理浓度的提高,β-AS基因的表达量增加。结论 Zn和Mo两种元素对乌拉尔甘草甘草酸生物合成关键酶基因表达有明显的促进作用。 展开更多
关键词 甘草 甘草酸 关键酶 基因表达 微量元素 半定量PCR
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