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rL-RVG通过α7烟碱型乙酰胆碱受体诱导胃癌细胞系SGC凋亡的机制 预览
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作者 雪峰 章安伟 +4 位作者 尹超云 张烜烽 陈正威 张日婷 严玉兰 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第5期623-629,共7页
目的探讨表达狂犬病毒疫苗糖蛋白的重组新城疫病毒(rL-RVG)通过乙酰胆碱受体诱导胃癌细胞凋亡的可能机制。方法将对数增殖期的胃癌细胞系SGC随机分成rL-RVG、新城疫病毒(NDV)组、PBS组,并同时分别设α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)抑... 目的探讨表达狂犬病毒疫苗糖蛋白的重组新城疫病毒(rL-RVG)通过乙酰胆碱受体诱导胃癌细胞凋亡的可能机制。方法将对数增殖期的胃癌细胞系SGC随机分成rL-RVG、新城疫病毒(NDV)组、PBS组,并同时分别设α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)抑制剂(MLA)及激动剂(ACB)预处理组。病毒感染24 h后,CCK8法测定病毒对SGC增殖影响;蛋白印迹检测α7-nAChR、RVG、NDV;凋亡蛋白cleved-caspase-3、BAX/BCL-2;P-ERK、ERK的表达。免疫荧光法测定P-ERK表达。结果随着rL-RVG、NDV病毒液浓度增加,胃癌细胞活力下降,rL-RVG在10 -2 稀释倍数时抗增殖作用显著( P <0.05);病毒组凋亡相关蛋白cleved-caspase-3、BAX/BCL-2相对表达量较PBS组明显升高,且rL-RVG组较NDV组及PBS组升高明显,乙酰胆碱受体抑制剂预处理后rL-RVG组、NDV组及PBS组凋亡蛋白水平明显增高,胆碱受体激动剂预处理组凋亡蛋白表达水平明显下降( P < 0.05);P-ERK在病毒组表达下降,且rL-RVG组较NDV组更低,乙酰胆碱受体抑制剂、激动剂预处理后分别下降、上升( P <0.05)。结论 rL-RVG通过α7-nAChR诱导胃癌细胞系SGC凋亡的机制之一是抑制ERK通路。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 狂犬疫苗糖蛋白 胃癌 烟碱型乙酰胆碱受体 ERK
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微阵列芯片分析miR-125b-5p在胃癌中的表达及临床意义 预览
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作者 张烜烽 陈正威 +1 位作者 章安伟 雪峰 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2019年第3期253-257,263共6页
目的:运用生物信息学技术分析胃癌中microRNA表达特征。方法:使用R语言软件包分析GEO芯片数据集的两个子集中的miRNA表达量的差异;采用qRT-PCR技术检测本院60例胃癌患者癌组织及20例胃癌手术患者癌旁组织中miR-125b-5p的表达量,统计分... 目的:运用生物信息学技术分析胃癌中microRNA表达特征。方法:使用R语言软件包分析GEO芯片数据集的两个子集中的miRNA表达量的差异;采用qRT-PCR技术检测本院60例胃癌患者癌组织及20例胃癌手术患者癌旁组织中miR-125b-5p的表达量,统计分析其表达特征与分化程度、TNM分期、性别、年龄、家族史及肿瘤直径之间的关系。结果:miR-125b-5p在GSE93415和GSE99415中的表达均上调,且其在胃癌组织与癌旁胃组织表达量差异具有统计学意义(P<0.05)。使用qRT-PCR验证了miR-125b-5p在胃癌组织中的表达高于癌旁组织的趋势,miR-125b-5p表达量与TNM分期和浸润程度有关(P<0.05),与年龄、性别、家族史、肿瘤直径和分化程度均无关(P>0.05);高表达miR-125b-5p的胃癌患者生存期明显缩短。结论:胃癌组织miR-125b-5p高表达,且与胃癌TNM分期、浸润程度及总生存率有关。 展开更多
关键词 miR-125b-5p 胃癌 生物信息学 GEO芯片数据集
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rL-RVG通过拮抗α7烟碱型乙酰胆碱受体影响胃癌细胞凋亡及增殖 预览 被引量:1
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作者 尹超云 严玉兰 +2 位作者 章安伟 张烜烽 雪峰 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2018年第1期28-33,共6页
目的:探讨表达狂犬病毒糖蛋白(RVG)的重组LaSota株新城疫病毒(recombinant LaSota strain NDV expressing the rabies virus glycoprotein,rL-RVG)是否通过α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR)影响... 目的:探讨表达狂犬病毒糖蛋白(RVG)的重组LaSota株新城疫病毒(recombinant LaSota strain NDV expressing the rabies virus glycoprotein,rL-RVG)是否通过α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR)影响胃癌细胞HGC的增殖与凋亡。方法:将rL-RVG、新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)和PBS分别感染胃癌HGC细胞24h后,采用蛋白质印迹法检测RVG、NDV、pro-caspase3蛋白和α7-nAChR在HGC细胞中的表达,免疫荧光检测α7-nAChR在HGC细胞中的表达,MTT检测HGC细胞的增殖情况。将HGC细胞随机分为rL-RVG组、rL-RVG+α7-nAChR抑制剂组、rL-RVG+α7-nAChR激动剂组,NDV组、NDV+α7-nAChR抑制剂组、NDV+α7-nAChR激动剂组,PBS组、PBS+α7-nAChR抑制剂组、PBS+α7-nAChR激动剂组;倒置显微镜下观察各组细胞形态,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白pro-caspase3、bax、bcl-2表达水平。结果:蛋白质印迹结果显示,病毒感染HGC细胞24h后,NDV、pro-caspase3蛋白和α7-nAChR在rL-RVG组、NDV组的表达均显著高于PBS组(P均<0.01),RVG蛋白在rL-RVG组表达显著高于NDV组和PBS组(P均<0.01);免疫荧光显示α7-nAChR在rL-RVG组中明显高于NDV组和PBS组。MTT结果显示两种病毒浓度大于10-5mmol/L对细胞的增殖有明显抑制作用(P<0.05)。倒置显微镜下可见NDV+α7-nAChR抑制剂组、PBS+α7-nAChR抑制剂组HGC细胞分别较NDV组、PBS组皱缩、凋亡更明显,但rL-RVG组与其α7-nAChR抑制剂组相比细胞皱缩、凋亡差异不明显;rL-RVG+α7-nAChR激动剂组、NDV+α7-nAChR激动剂组、PBS+α7-nAChR激动剂组HGC细胞皱缩、凋亡分别较rL-RVG组、NDV组、PBS组明显减弱。蛋白质印迹显示bcl-2、bax和pro-caspase3蛋白在rL-RVG+α7-nAChR抑制剂组的相对表达量与rL-RVG组无显著性差异(P均>0.05),但在NDV+α7-nAChR抑制剂组、PBS+α7-nAChR抑制剂组的相对表达量分别较NDV组、PBS组显著上调(P均<0.01);rL-RVG+α7-nAChR激动剂组、NDV+α7-nAChR激动剂组、PBS+α7-nAChR激动� 展开更多
关键词 重组LaSota株新城疫病毒 α7烟碱型乙酰胆碱 凋亡 增殖
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重组新城疫病毒rL-IL29促进人小细胞肺癌细胞系H446内质网应激、自噬及凋亡相关蛋白的表达 预览
4
作者 严玉兰 邵小美 +4 位作者 刘沙 杭敏 尹超云 张日婷 雪峰 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第10期1397-1402,共6页
目的 探讨重组新城疫病毒rL-IL29对小细胞肺癌细胞系H446细胞内质网应激、自噬及凋亡相关蛋白表达的影响。方法 将H446细胞随机分为对照组、新城疫病毒(NDV)组及rL-IL29组,后2组分别转染NDV和rL-IL29。CCK-8法检测细胞活性;ELISA检测... 目的 探讨重组新城疫病毒rL-IL29对小细胞肺癌细胞系H446细胞内质网应激、自噬及凋亡相关蛋白表达的影响。方法 将H446细胞随机分为对照组、新城疫病毒(NDV)组及rL-IL29组,后2组分别转染NDV和rL-IL29。CCK-8法检测细胞活性;ELISA检测细胞上清中IL-29含量;Western blot和免疫荧光检测内质网应激相关蛋白GRP78和CHOP的表达。并分别加入内质网应激抑制剂4-PBA预处理4 h,Western blot检测处理组及对照组GRP78、CHOP、自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ和凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3的表达。结果 感染H446细胞后,随着病毒浓度的升高,细胞活力明显降低,其中rL-IL29在10-5升高明显(P〈0.05)。rL-IL29处理组细胞上清中IL-29含量明显升高(P〈0.05),rL-IL29组IL-29蛋白水平较对照组明显升高(P〈0.05)。NDV组、rL-IL29组中GRP78及CHOP表达明显升高(P〈0.05),LC3Ⅰ/Ⅱ、cleaved-caspase-3表达明显高于对照组(P〈0.01),且rL-IL29组明显高于NDV组(P〈0.05)。4-PBA预处理后,4-PBA组GRP78、CHOP、cleaved-caspase-3以及LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白表达明显降低(P〈0.05)。结论 rL-IL29能促进人小细胞肺癌细胞内质网应激、自噬及凋亡相关蛋白的表达。 展开更多
关键词 rL-IL29 小细胞肺癌 内质网应激 自噬 凋亡
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rL-IL29对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响及相关机制 预览
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作者 杭敏 严玉兰 +2 位作者 邵小美 张日婷 雪峰 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2018年第2期99-103,共5页
目的:探讨表达rL-IL29的重组新城疫病毒LoSota株(recombinant Newcastle disease virus LoSota line express-ing rL-IL29,rL-IL29)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法:体外培养肺腺癌A549细胞,以rL-IL29感染的A549... 目的:探讨表达rL-IL29的重组新城疫病毒LoSota株(recombinant Newcastle disease virus LoSota line express-ing rL-IL29,rL-IL29)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法:体外培养肺腺癌A549细胞,以rL-IL29感染的A549细胞为rL-IL29组,LoSota株新城疫病毒(NDVL)感染的A549细胞为NDVL组及PBS处理的A549细胞为对照组。蛋白质印迹法检测各组A549细胞中NDV HN、rL-IL29蛋白的表达;CCK8法、划痕试验及Transwell侵袭实验检测rL-IL29对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测细胞E-钙黏蛋白、MMP2、波形蛋白及AKT/NF-kB通路相关蛋白的表达水平。结果:A549细胞感染rL-IL29后,NDVHN及rL-IL29蛋白均稳定表达,且明显高于NDVL组及对照组;rL-IL29及NDVL感染A549细胞后能够抑制细胞的增殖、迁移及侵袭,且rL-IL29作用更强;与对照组及NDVL组比较,rL-IL29感染后A549细胞中E钙黏蛋白表达量明显增加,波形蛋白、MMP2(66kDa/72kDa)、pAKT及P65蛋白表达明显减弱(均P<0.05)。结论:rL-IL29可能通过阻碍AKT/NFκB信号通路上调E钙黏蛋白表达和下调波形蛋白、MMP2蛋白表达,从而抑制肺腺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 白细胞介素-29 肺腺癌 迁移 侵袭
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rNDV IL-29对肺腺癌A549细胞恶性生物学行为的影响 被引量:2
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作者 严玉兰 刘沙 +4 位作者 李米 赵英海 金惠 尹超云 雪峰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期510-515,共6页
目的:探讨表达IL-29的重组新城疫病毒(recombinant Newcastle disease virus IL-29,rNDV IL-29)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和细胞凋亡的影响。方法:实验分为rNDV IL-29组(rNDV IL-29感染A549细胞)、NDV组(NDV感染A549细胞)和... 目的:探讨表达IL-29的重组新城疫病毒(recombinant Newcastle disease virus IL-29,rNDV IL-29)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和细胞凋亡的影响。方法:实验分为rNDV IL-29组(rNDV IL-29感染A549细胞)、NDV组(NDV感染A549细胞)和对照组(PBS)。用Western blotting、RT-PCR、免疫荧光法检测IL-29蛋白及其mRNA的表达;MTT、克隆形成实验及划痕实验检测rNDV IL-29对A549细胞增殖、迁移能力的影响;流式细胞术及Western blotting检测rNDV IL-29对A549细胞凋亡的影响。结果:与NDV组和对照组相比,rNDV IL-29组细胞:(1) IL-29蛋白及其mRNA表达水平显著升高;(2)细胞增殖抑制率明显升高[(56.48±1189)% vs (42.18±6.18)%, P〈0.05],细胞迁移率明显下降[(5.00±4.00)% vs (32.43±3.71)%、(84.57±396)%, 均P〈0.05];(3)Caspase3 表达水平明显上调[(29.67±1.53)% vs (18.33±3.06)%、(7.00±6.08)%, 均P〈0.05],Bcl-2/bax表达水平明显下调[(12.00±2.65)% vs (42.33±5.86)%、(67.00±6.25)%, 均P〈0.05],细胞凋亡增多。结论:rNDV IL-29抑制肺腺癌A549细胞增殖、迁移,并且促进其凋亡,提示rNDV IL-29可能成为一种很有潜力的抗癌药物。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 白细胞介素-29 肺腺癌 凋亡
胃切除术后胆囊结石腹腔镜治疗28例临床分析 预览
7
作者 向庆龙 徐厚梅 雪峰 《中外医学研究》 2016年第4期107-108,共2页
目的:探讨腹腔镜治疗胃切除术后胆囊结石的疗效、手术方式的变化。方法:对江苏大学附属人民医院2013年5月-2014年11月的28例进行腹腔镜治疗的胃切除术后胆囊结石患者的临床资料进行回顾性分析。结果:建立气腹28例,中转开腹4例;术后... 目的:探讨腹腔镜治疗胃切除术后胆囊结石的疗效、手术方式的变化。方法:对江苏大学附属人民医院2013年5月-2014年11月的28例进行腹腔镜治疗的胃切除术后胆囊结石患者的临床资料进行回顾性分析。结果:建立气腹28例,中转开腹4例;术后并发胆漏1例,腹腔出血2例,切口感染1例,胆管炎及胆管狭窄0例,失访4例。结论:术前充分评估腹腔粘连,严格掌握适应证,腹腔镜治疗胃切除术后胆囊结石无明显严重并发症,且具有腹腔镜手术创伤小的优势,显著提高患者生活质量。 展开更多
关键词 胃切除术 胆囊结石 腹腔镜
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重组新城疫病毒rL-RVG诱导人胃腺癌细胞内质网应激和凋亡 预览 被引量:1
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作者 赵英海 严玉兰 +2 位作者 李米 王穆彬 雪峰 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2016年第3期199-203,共5页
目的:观察新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)及稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(recombinant avirulent NDV La Sota strain expressing the rabies virus glycoprotein,rL-RVG)对胃腺癌HGC细胞内质网应激及凋亡的... 目的:观察新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)及稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(recombinant avirulent NDV La Sota strain expressing the rabies virus glycoprotein,rL-RVG)对胃腺癌HGC细胞内质网应激及凋亡的影响。方法:将HGC细胞随机分为对照组、NDV组和rL-RVG组,分别转染PBS、NDV和rL-RVG 24 h,免疫印迹法和免疫荧光检测糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)表达。再将HGC细胞随机分为对照组、4-苯基丁酸钠盐(sodium phenylbutyrate,4-PBA)组、rL-RVG组和4-PBA+rL-RVG组,4-PBA组和4-PBA+rL-RVG组分别加入4-PBA预处理4 h,然后rL-RVG组和4-PBA+rL-RVG组分别转染rL-RVG,对照组和4-PBA组转染PBS,免疫印迹法检测各组细胞GRP78、CHOP和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:感染HGC细胞24 h后,NDV组及rL-RVG组GRP78和CHOP表达明显高于对照组(P均〈0.05),且rL-RVG组明显高于NDV组(P〈0.01)。4-PBA预处理后,4-PBA+rL-RVG组GRP78、CHOP、caspase-3蛋白表达和细胞凋亡率较rLRVG组明显降低(P〈0.05)。结论:rL-RVG较NDV更易引起胃腺癌HGC细胞内质网应激,且与凋亡相关。 展开更多
关键词 新城疫病毒 狂犬病毒糖蛋白 内质网应激 细胞凋亡
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狂犬病毒糖蛋白重组的新城疫病毒诱导人胃癌SGC细胞自噬 预览 被引量:1
9
作者 王穆彬 严玉兰 +3 位作者 张志坚 赵英海 李米 雪峰 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2015年第5期373-377,共5页
目的:观察狂犬病毒糖蛋白重组的新城疫病毒(rabies virus glycoprotein recombinated Newcastle disease virus,r L-RVG)及野生型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)对胃癌SGC细胞自噬的影响。方法:将SGC细胞随机分为3组,rl-RVG组... 目的:观察狂犬病毒糖蛋白重组的新城疫病毒(rabies virus glycoprotein recombinated Newcastle disease virus,r L-RVG)及野生型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)对胃癌SGC细胞自噬的影响。方法:将SGC细胞随机分为3组,rl-RVG组(转染rl-RVG)、NDV组(转染NDV)、对照组(转染PBS),24 h后观察细胞的形态变化,评价病毒对细胞的影响。用免疫双标记和免疫印迹法鉴定病毒感染是否成功;蛋白质印迹检测各组细胞自噬相关蛋白LC3及Beclin1的表达;透射电镜观察细胞内超微结构的变化和自噬体的形成。结果:病毒感染细胞24 h后,rl-RVG组及NDV组细胞皱缩明显,且rl-RVG组较NDV组变化明显,对照组无明显变化;rl-RVG组和NDV组细胞LC3及Beclin1蛋白表达较对照组明显升高(P<0.05),且rl-RVG组明显高于NDV组(P<0.05);rl-RVG组及NDV组出现的自噬体明显多于对照组,且rl-RVG组较NDV组明显增多(P<0.05)。结论:r L-RVG较NDV更易引起胃癌SGC细胞的自噬。 展开更多
关键词 自噬 胃癌细胞 新城疫病毒 狂犬病毒糖蛋白
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重组新城疫病毒rl—RVG抑制人肺腺癌A549系细胞迁移及相关机制 预览 被引量:2
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作者 金惠 雪峰 +2 位作者 王穆彬 苏春香 严玉兰 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第4期508-513,共6页
目的观察表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(d-RVG)对人肺癌细胞系A549的迁移影响,初步探讨其可能的机制。方法重组新城疫病毒r1-RVG直接感染A549细胞为rl-RVG实验组,新城疫病毒LaSota株处理的A549细胞组及未感染病毒的A549细胞... 目的观察表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(d-RVG)对人肺癌细胞系A549的迁移影响,初步探讨其可能的机制。方法重组新城疫病毒r1-RVG直接感染A549细胞为rl-RVG实验组,新城疫病毒LaSota株处理的A549细胞组及未感染病毒的A549细胞组作为对照组。Western blot法检测NDV—HN蛋白及狂犬病毒糖蛋白(RVG),细胞增殖实验测定新城疫病毒使用的最佳作用浓度;划痕实验及Transwell法测A549迁移;Westernblot法及免疫荧光法检测E-cadherin,MMP2蛋白表达。结果空白对照组无NDV、rl-RVG表达,rl-RVG仅在感染rl-RVG细胞组有表达,NDV在感染rl—RVG细胞组及感染NDV细胞组皆有表达;与空白对照组相比,rl-RVG及NDV稀释浓度大于5×10^-5对细胞的增殖有抑制作用(P〈0.05);rl-RVG组迁移的距离及细胞数明显减少(P〈0.05)。与空白对照组及NDV感染组相比,r1.RVG组E-cadherin蛋白表达水平上调(P〈0.05),MMP2蛋白表达水平减弱(P〈0.05)。结论重组新城疫病毒rl-RVG能抑制人肺癌细胞系A549的迁移,并可能通过影响肺腺癌A549上皮细胞一间质转化(EMT)过程中的调控因子E-cadherin,MMP2蛋白而对细胞迁移而作用。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒RVG 肺癌 迁移 上皮细胞-间质转化
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重组人IFN-λ1腺病毒对胃癌原位移植瘤的影响及其机制 被引量:1
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作者 雪峰 张杰 +5 位作者 刘洋 贾丽娟 张金 梁冰 张津 严玉兰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期662-667,共6页
目的:通过人IFN-λ1重组腺病毒(r-Ad-hIFN-λ1)对人类胃癌裸鼠原位移植瘤模型的干预,探讨人r-Ad-hIFN-λ1重组腺病毒对胃癌生长的抑制作用及其部分机制。方法应用原位移植方法建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型,后随机分为3组:PBS对... 目的:通过人IFN-λ1重组腺病毒(r-Ad-hIFN-λ1)对人类胃癌裸鼠原位移植瘤模型的干预,探讨人r-Ad-hIFN-λ1重组腺病毒对胃癌生长的抑制作用及其部分机制。方法应用原位移植方法建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型,后随机分为3组:PBS对照组、Ad-LacZ空载体组、r-Ad-hIFN-λ1实验组。每周干预1次,共3次,不同时间点二维B超探查裸鼠原位肿瘤的瘤体大小并绘制生长曲线。末次干预后1周处死,收集相应组织,RT-PCR检测骨骼肌中IFN-λ1mRNA的表达;Westernblot检测胃癌组织中IFN-λ1蛋白的表达;免疫组化染色检测肿瘤组织切片中IFN-λ1的表达;TUNEL法检测瘤体石蜡切片组织凋亡;流式细胞仪分析脾中NK细胞比例。结果实验组裸鼠胃癌移植瘤体积(248.39±7.60)mm3明显小于对照组(322.92±5.92)mm3和空载体组(331.25±6.00)mm3(P<0.05);hIFN-λ1成功转染骨骼肌并在胃癌组织中表达;免疫组化切片中实验组肿瘤组织胞质内hIFN-λ1强阳性表达;TUNEL测凋亡指数示实验组有大片凋亡(0.700±0.059)明显区别于对照组(0.271±0.026)和空载体组(0.333±0.028)(P<0.05);实验组裸鼠脾脏中NK细胞比例(26.49±1.89)%明显大于对照组(13.94±1.31)%及空载体组(19.12±1.69)%(P<0.05)。结论r-Ad-hIFN-λ1通过骨骼肌转染能够显著抑制胃癌生长,并可能通过诱导其凋亡、刺激NK细胞而起作用。 展开更多
关键词 IFN-λ1 重组 胃癌 凋亡 免疫
应用福爱乐医用胶粘贴法构建人胃癌组织块原位移植模型 预览 被引量:2
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作者 张杰 贾丽娟 +1 位作者 梁冰 雪峰 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2014年第4期287-289,293共4页
目的:利用福爱乐医用胶构建人胃癌组织块裸鼠原位移植模型,为研究胃癌的病理生理过程及实验研究提供理想的动物模型。方法:以人胃癌SGC-7901细胞株反复接种传代于BALB/C裸鼠皮下形成的皮下移植瘤组织块为材料,利用福爱乐医用胶将其粘贴... 目的:利用福爱乐医用胶构建人胃癌组织块裸鼠原位移植模型,为研究胃癌的病理生理过程及实验研究提供理想的动物模型。方法:以人胃癌SGC-7901细胞株反复接种传代于BALB/C裸鼠皮下形成的皮下移植瘤组织块为材料,利用福爱乐医用胶将其粘贴在30只裸鼠胃大弯侧浆膜下,分别在术后4、6、8周随机取10只裸鼠观察原位移植瘤的生长状况、移植成功率及转移情况。结果:原位移植瘤成瘤率为100%。随着饲养时间的延长,胃癌腹腔淋巴结转移、肝脏黏连等出现率逐渐增高。结论:利用福爱乐医用胶粘贴法能够安全、便捷地建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型,并可模拟胃癌的临床发生发展过程。 展开更多
关键词 胃癌 原位移植模型 医用胶
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不同年龄人群肌肉组织中7种线粒体酶的表达差异 预览 被引量:2
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作者 Rukhsar Ahmad 蒋鹏程 +6 位作者 顾韵 刘嫣方 陈芹 雪峰 谢黎 林志强 钱炜 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2014年第1期22-25,30共5页
目的:探讨年轻人与中老年人肌肉中线粒体电子传递链和胞质中一些关键酶的表达差异。方法:收集7例年轻人及33例中老年人颈部肌肉标本,透射电镜观察两组肌肉中线粒体形态学变化,免疫组织化学染色和蛋白质印迹检测NADH氧化还原酶辅酶1[... 目的:探讨年轻人与中老年人肌肉中线粒体电子传递链和胞质中一些关键酶的表达差异。方法:收集7例年轻人及33例中老年人颈部肌肉标本,透射电镜观察两组肌肉中线粒体形态学变化,免疫组织化学染色和蛋白质印迹检测NADH氧化还原酶辅酶1[NADH dehydrogenase(ubiquinone)1 alpha subcomplex 1,NDUFA 1],琥珀酸脱氧酶复合体铁硫亚基(succinate dehydrogenase complex,subunit B,SDHB),细胞色素b(cytochrome b,Cytb),细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase,COX),V型H^+ATP酶(vacuolar—type H^+-ATPase,V—ATPase H),苹果酸脱氢酶(cytosolic malate dehydrogenase,MDH)、短链羟烷基-辅酶A脱氢酶(hydroxyacyl—coenzyme A dehydrogenase,HADHSC)的表达情况。结果:与年轻人相比,中老年人肌肉中线粒体体积增大,空泡增多,嵴排列紊乱,出现类结晶状包涵体;NDUFA1、SDHB、Cytb、COX、V—ATPaseH表达量明显降低(P均〈0.05),但MDH及HADHSC的表达差异无统计学意义;蛋白质印迹结果与免疫组织化学结果相一致。结论:肌肉组织中线粒体的形态和关键酶的表达随年龄的增加出现明显改变,可能在衰老过程中起到重要作用。 展开更多
关键词 衰老 肌肉 线粒体
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腹腔镜术后穿刺孔疝的临床治疗及分析 预览 被引量:1
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作者 禹峰 张拥军 +2 位作者 雪峰 夏磊洲 李华 《中国现代普通外科进展》 CAS 2014年第7期567-569,共3页
探讨腹腔镜术后穿刺孔疝的临床特点、诊断、预后及治疗,以提高对此并发症的认识.通过分析本院三例腹腔镜术后穿刺孔疝的临床资料,并进行相关文献复习来总结其治疗效果.腹腔镜术后穿刺孔疝患者均有腹痛或腹胀、恶心及呕吐表现.腹部CT或B... 探讨腹腔镜术后穿刺孔疝的临床特点、诊断、预后及治疗,以提高对此并发症的认识.通过分析本院三例腹腔镜术后穿刺孔疝的临床资料,并进行相关文献复习来总结其治疗效果.腹腔镜术后穿刺孔疝患者均有腹痛或腹胀、恶心及呕吐表现.腹部CT或B超均显示肠梗阻或穿刺孔疝表现.3例患者均治愈.腹腔镜穿刺孔疝虽然发生率较低,但后果严重,对该并发症的危险因素进行预防,早期诊断及治疗可望减少此类并发症及其造成的后果. 展开更多
关键词 切口疝 穿刺孔 腹腔镜
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重组新城疫病毒rl-RVG抑制A549荷瘤鼠的瘤体生长 预览 被引量:1
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作者 严玉兰 贾丽娟 +4 位作者 刘洋 张金 张杰 梁冰 雪峰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第11期1537-1542,共6页
目的 探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒疫苗对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能促凋亡机制.方法 将rl-RVG感染到成功建立的A549荷瘤鼠瘤体内,检测对瘤体生长抑制率;RT-PCR检测NDV HN基因及RVG基因的表达;TUNEL检测... 目的 探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒疫苗对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能促凋亡机制.方法 将rl-RVG感染到成功建立的A549荷瘤鼠瘤体内,检测对瘤体生长抑制率;RT-PCR检测NDV HN基因及RVG基因的表达;TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡;蛋白印迹法测caspase系列、Bax、Bcl-2表达;NDV及PBS作为对照.结果 与对照组相比,rl-RVG组荷瘤鼠瘤体增长明显缓慢;RVG及NDV基因表达;rl-RVG组肿瘤细胞凋亡明显增加(P<0.05);rl-RVG组caspase-3,8和9高表达(P<0.01),Bax/Bcl-2比值明显高于对照组(P<0.01).结论 rl-RVG成功感染至A549荷瘤鼠,其对A549荷瘤鼠瘤体生长有着明显的抑制作用,且可能与rl-RVG激活机体的Bcl-2和caspase家族诱导凋亡相关. 展开更多
关键词 rl-RVG 肺癌 凋亡
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急性肠系膜上静脉血栓形成的临床诊治分析 预览 被引量:4
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作者 禹峰 夏磊洲 +2 位作者 张拥军 雪峰 李华 《中国现代普通外科进展》 CAS 2014年第10期829-831,共3页
探讨急性肠系膜上静脉血栓形成(ASMVT)的临床特点与诊治经验.回顾性分析经手术及CT/CTA确诊的11例ASMVT患者的临床资料.11例患者均有不同程度的腹痛表现.2例经手术证实,术后旰素抗凝、尿激酶溶栓治疗;9例经CT/CTA证实,其中5例经CT/CT... 探讨急性肠系膜上静脉血栓形成(ASMVT)的临床特点与诊治经验.回顾性分析经手术及CT/CTA确诊的11例ASMVT患者的临床资料.11例患者均有不同程度的腹痛表现.2例经手术证实,术后旰素抗凝、尿激酶溶栓治疗;9例经CT/CTA证实,其中5例经CT/CTA明确后手术治疗成功,4例保守治疗(经外周静脉给予肝素、尿激酶抗凝、溶栓处理).所有11例患者均成功治愈.随访6个月~3年,11例患者均无复发.CT/CTA可早期确诊ASMVT,根据患者的具体情况选择合适的治疗方案,如抗凝、溶栓或合适的手术治疗(术前、术后辅以抗凝溶栓),可显著降低患者的死亡率. 展开更多
关键词 急性肠系膜上静脉血栓形成 诊断 治疗
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人IFN-λ1重组腺病毒对胃癌细胞增殖的影响及其机制研究 被引量:1
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作者 刘峻 严玉兰 +4 位作者 张金 刘洋 张杰 梁冰 雪峰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期507-512,共6页
目的探讨Ad-hIFN-λ1重组腺病毒对胃腺癌细胞SGC-7901增殖的影响及其机制。方法分别用Ad-hIFN-λ1重组腺病毒、Ad-LacZ空质粒及PBS对照组作用于人胃腺癌细胞SGC-7901,MTT法测定细胞增殖情况,RT-PCR检测胃癌SGC-7901中IFN-λ1mRNA的表... 目的探讨Ad-hIFN-λ1重组腺病毒对胃腺癌细胞SGC-7901增殖的影响及其机制。方法分别用Ad-hIFN-λ1重组腺病毒、Ad-LacZ空质粒及PBS对照组作用于人胃腺癌细胞SGC-7901,MTT法测定细胞增殖情况,RT-PCR检测胃癌SGC-7901中IFN-λ1mRNA的表达,免疫荧光法检测hIFN-λ1蛋白的表达,Tunel、流式细胞术检测细胞凋亡。结果Ad-hIFN-λ1转染胃腺癌细胞SGC-7901后,肿瘤细胞生长明显抑制,细胞中hIFN-λ1 mRNA、蛋白高效表达,细胞凋亡率明显高于Ad-LacZ组、PBS空白对照组。结论Ad-hIFN-λ1重组腺病毒转染至胃腺癌细胞SGC-7901后表达IFN-λ1,Ad-hIFN-λ1能够显著抑制人胃腺癌SGC-7901细胞生长,并可能通过诱导其凋亡而起作用。 展开更多
关键词 胃癌 IFN-λ 重组病毒 凋亡
鼠IFN-λ2腺病毒载体的构建及鉴定 预览 被引量:1
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作者 刘洋 袁利学 +1 位作者 雪峰 严玉兰 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2012年第2期120-124,共5页
目的:构建鼠IFN-λ2重组腺病毒载体。方法:用人水疱口炎病毒诱导小鼠原代脾细胞表达IFN-λ2,通过RT-PCR获取IFN-λ2 cDNA,将其亚克隆至pShuttle-CMV载体,经PmeⅠ线性化后,与腺病毒的骨架载体pAdEasy在BJ5183菌中同源重组,转染293A细... 目的:构建鼠IFN-λ2重组腺病毒载体。方法:用人水疱口炎病毒诱导小鼠原代脾细胞表达IFN-λ2,通过RT-PCR获取IFN-λ2 cDNA,将其亚克隆至pShuttle-CMV载体,经PmeⅠ线性化后,与腺病毒的骨架载体pAdEasy在BJ5183菌中同源重组,转染293A细胞包装扩增,RT-PCR检测重组腺病毒的目的基因,TCID50法对构建的腺病毒进行滴度测定。用鼠IFN-λ2重组腺病毒感染小鼠肺腺癌细胞,蛋白质印迹法检测细胞中IFN-λ2蛋白的表达,倒置显微镜观察鼠IFN-λ2重组腺病毒对鼠肺腺癌细胞生长的抑制作用。结果:成功克隆鼠IFN-λ2的cDNA,序列与基因库公布序列完全一致;经酶切鉴定表明成功构建鼠IFN-λ2重组腺病毒载体;重组腺病毒载体在293A细胞中成功包装及扩增;包装成功的重组腺病毒中含有目的基因,病毒滴度为2×1010pfu/ml;蛋白质印迹显示感染细胞的上清中有鼠IFN-λ2蛋白的表达,倒置显微镜显示感染的鼠肺腺癌细胞生长受到抑制。结论:成功构建了鼠IFN-λ2重组腺病毒载体,并能介导鼠IFN-λ2蛋白的表达进而抑制鼠肺腺癌细胞的生长,为进一步开展抗肿瘤研究及基因治疗奠定基础。 展开更多
关键词 IFN-λ2 腺病毒载体 构建 鉴定
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持续腹腔冲洗加生长抑素治疗胰十二指肠切除术后胰瘘 预览 被引量:1
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作者 周晓东 张拥军 +1 位作者 雪峰 李华 《齐齐哈尔医学院学报》 2012年第17期2335-2336,共2页
目的探讨持续腹腔冲洗及生长抑素在治疗胰十二指肠切除术后胰瘘中的效果。方法 2007年1月~2012年1月期间,对16例胰十二指肠切除术后发生胰瘘患者行双套管持续腹腔冲洗,并予生长抑素静脉使用。结果全组病人的胰瘘均治愈,未出现腹腔脓肿... 目的探讨持续腹腔冲洗及生长抑素在治疗胰十二指肠切除术后胰瘘中的效果。方法 2007年1月~2012年1月期间,对16例胰十二指肠切除术后发生胰瘘患者行双套管持续腹腔冲洗,并予生长抑素静脉使用。结果全组病人的胰瘘均治愈,未出现腹腔脓肿、腹壁外瘘、脓毒血症及出血等明显并发症。结论持续腹腔冲洗及生长抑素静脉使用,是治疗胰瘘的有效方法。 展开更多
关键词 胰十二指肠切除术 胰瘘 腹腔持续冲洗 生长抑素
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整合素β1基因沉默对胰腺癌细胞PANC1体外侵袭能力的影响及机制研究
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作者 禹峰 雪峰 +3 位作者 李华 张拥军 王春友 崔静 《中华胰腺病杂志》 CAS 2011年第5期 322-325,共4页
目的应用短发夹RNA(shRNA)沉默人胰腺癌细胞株PANC1的整合素β1(integrinβ1)基因表达,观察其对PNAC1细胞体外侵袭能力的影响,探讨其机制。方法构建靶向integrinβ1基因的shRNA真核表达质粒integrinβ1-shRNA及对照真核表达质粒c... 目的应用短发夹RNA(shRNA)沉默人胰腺癌细胞株PANC1的整合素β1(integrinβ1)基因表达,观察其对PNAC1细胞体外侵袭能力的影响,探讨其机制。方法构建靶向integrinβ1基因的shRNA真核表达质粒integrinβ1-shRNA及对照真核表达质粒c—shRNA,转染人胰腺癌PANC1细胞,以未转染质粒的细胞作为对照组。应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测integrinβ1、MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白的表达水平,应用Transwell侵袭小室检测细胞体外侵袭能力。结果integrinβ1-shRNA组、c—shRNA组和对照组细胞integrin[MmRNA表达量分别为0.0029±0.0004、0.0131±0.0009、0.0138±0.0005;integrinβ1蛋白表达量为0.0159±0.0062、0.3215±0.0126、0.3107±0.0094。integrinβ1-shRNA组integrin[MmRNA和蛋白表达抑制率分别为(78.6±7.2)%和(92.9±3.2)%(P〈0.01)。而c-shRNA组与对照组差异无统计学意义(P=0.2999)。integrinβ1-shRNA组穿膜细胞数由(52±5)个降低至(21±4)个(P〈0.01);MMP-2和MMP-9mRNA表达分别从0.592±0.073和0.847±0.069降低到0.102±0.034和0.273±0.071;MMP-2和MMP-9蛋白表达分别从0.225±0.046和0.416±0.081降低No.059±0.013和0.106±0.022(P值均〈0.05)。结论重组质粒integrinβ1-shRNA能有效地抑制PANC1细胞integrinβ1基因的表达,并可能通过下调MMP-2和MMP-9基因表达而抑制其体外侵袭能力。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 整合素Β1 SHRNA 肿瘤侵润
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