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牛羊泰勒虫病的流行、危害、防控技术及致病机制研究进展 预览
1
作者 刘军龙 关贵全 +6 位作者 刘群 李祥瑞 赵俊龙 周金林 张西臣 朱兴全 罗建勋 《中国动物保健》 2019年第6期55-57,共3页
牛羊泰勒虫病是由寄生于牛或羊的淋巴样细胞和红细胞内的泰勒虫所引起的一类血液原虫病,通过硬蜱传播,在我国农牧区广泛分布,患病动物表现为发热、贫血、黄疸、浅表淋巴结肿胀等典型临床症状,重症病例常会导致死亡,给养殖业带来巨大经... 牛羊泰勒虫病是由寄生于牛或羊的淋巴样细胞和红细胞内的泰勒虫所引起的一类血液原虫病,通过硬蜱传播,在我国农牧区广泛分布,患病动物表现为发热、贫血、黄疸、浅表淋巴结肿胀等典型临床症状,重症病例常会导致死亡,给养殖业带来巨大经济损失。本文将从泰勒虫病主要病原、流行特点、临床症状、诊断治疗、防控方法及致病机制等方面对该病进行介绍。 展开更多
关键词 泰勒虫病 临床症状 诊断治疗 防控 致病机制
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环形泰勒虫喀什株感染牛淋巴细胞系的建立及其生物学特征的鉴定
2
作者 马全英 李有全 +8 位作者 刘军龙 刘爱红 王锦明 赵帅阳 陈银银 徐建林 殷宏 关贵全 罗建勋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期144-151,共8页
建立1株环形泰勒虫(Theileria annulata)感染的牛淋巴细胞系,分析其生物学特征,为环形泰勒虫病疫苗研发提供新的细胞系。用环形泰勒虫喀什株感染的小亚璃眼蜱成蜱叮咬健康黄牛,当动物体温升高,体表淋巴结肿大时,用显微镜检查肩前和股前... 建立1株环形泰勒虫(Theileria annulata)感染的牛淋巴细胞系,分析其生物学特征,为环形泰勒虫病疫苗研发提供新的细胞系。用环形泰勒虫喀什株感染的小亚璃眼蜱成蜱叮咬健康黄牛,当动物体温升高,体表淋巴结肿大时,用显微镜检查肩前和股前淋巴结穿刺物涂片,出现裂殖体感染的淋巴细胞时,手术摘取淋巴结,无菌条件下进行淋巴细胞的分离培养;选择合适的培养条件对该细胞进行适应性传代培养,可稳定传代培养后,绘制细胞生长曲线,测定细胞倍增时间和细胞周期,测定细胞系环形泰勒虫18S rRNA基因序列,通过序列比对分析其亲缘关系。结果显示,建立了1株可传代培养的环形泰勒虫喀什株裂殖体感染的淋巴细胞系(TaKashi),接种5.0×10^5 mL^-1的细胞,经72 h培养周期,细胞浓度可达到(2.8~3.0)×10^6mL^-1,细胞存活率维持在90%以上;细胞群体倍增时间为33.4 h。细胞周期分析显示,G1期占46.2%,G2期占10.4%,S1期占43.4%,TaKashi传50代后仍然保持着淋巴细胞的形态学特征。18S rRNA基因序列比对及抗原基因Tams1同源性分析显示,该虫株与我国不同省份流行的环形泰勒虫虫株的相似性在91.9%以上,并处于同一个分支。 展开更多
关键词 环形泰勒虫 细胞培养 牛淋巴细胞 细胞系
牛巴贝斯虫巢式PCR检测方法的建立
3
作者 孙明 王锦明 +7 位作者 刘爱红 刘志杰 聂英 魏华 李玉峰 殷宏 关贵全 罗建勋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期183-189,共7页
为建立一种适用于基层兽医实验室特异、敏感、快速检测牛巴贝斯虫感染的方法,以牛巴贝斯虫球状体蛋白4(SBP4)基因为靶基因设计引物,建立检测牛巴贝斯虫的巢式PCR方法。结果表明,该方法可特异性地检测牛巴贝斯虫感染,与14种动物梨形虫无... 为建立一种适用于基层兽医实验室特异、敏感、快速检测牛巴贝斯虫感染的方法,以牛巴贝斯虫球状体蛋白4(SBP4)基因为靶基因设计引物,建立检测牛巴贝斯虫的巢式PCR方法。结果表明,该方法可特异性地检测牛巴贝斯虫感染,与14种动物梨形虫无交叉反应。该方法能够检测到1 copy的SBP4基因,其敏感性分别是对应的内、外引物普通PCR的10倍和1 000倍。应用该巢式PCR方法,对田间随机采集的136份野外样品进行检测,检出阳性样品9份,显著高于AbouLaila等报道的方法(5份)。这些数据表明,建立的巢式PCR方法可用于基层兽医实验室敏感、准确地检测牛巴贝斯虫感染。 展开更多
关键词 牛巴贝斯虫 巢式PCR SBP4基因
南方四季杨雌雄幼苗对镉胁迫光合生理响应的差异 预览
4
作者 赵子豪 宋琦 +3 位作者 李利 楼锦锋 罗建勋 俞飞 《森林与环境学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期201-207,共7页
为探讨南方四季杨雌雄幼苗对土壤镉污染的生理适应机制,采用盆栽模拟试验,测定了植株气体交换特征和叶绿素荧光参数,以及最终的生物量积累、丙二醛和可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶活性。结果表明:镉处理45 d后,雌株的净光合速率(Pn)... 为探讨南方四季杨雌雄幼苗对土壤镉污染的生理适应机制,采用盆栽模拟试验,测定了植株气体交换特征和叶绿素荧光参数,以及最终的生物量积累、丙二醛和可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶活性。结果表明:镉处理45 d后,雌株的净光合速率(Pn)、水分利用效率(WUE)、PSII最大光化学量子产量(Fv/Fm)显著下降,初始荧光(F0)、非光化学猝灭系数(qN)显著上升,但是在第60天这些指标均恢复正常,一直到第90天,Pn、气孔导度(Gs)、电子传递速率(ETR)显著下降,但是WUE仍维持正常;而雄株的光合和荧光参数在第45天没有显著变化,从第60天开始,Pn、Gs、Fv/Fm、ETR显著下降,F0、qN显著上升,并且维持到第90天,一直没有恢复。第90天的雌株根、茎、叶生物量和丙二醛(MDA)含量分别比对照降低了71.04%、58.33%、71.61%和54.22%,雄株降低了83.11%、72.72%、80.31%和69.38%;雌株的超氧化物歧化酶活性、可溶性蛋白含量与对照变化均不显著,雄株的比对照分别降低了30.54%和20.50%。可见镉对两者都造成了胁迫,且雄株的受胁迫程度高于雌株,可能是因为雌株的光合系统对镉胁迫更敏感,因此比雄株更早地做出相应的防御响应。 展开更多
关键词 南方四季杨 雌雄异株 镉 光合特征 抗氧化酶 叶绿素荧光
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我国羊巴贝斯虫棒状体颈部蛋白RON2基因的克隆与结构和遗传进化分析
5
作者 徐建林 王锦明 +5 位作者 刘军龙 刘爱红 李有全 殷宏 罗建勋 关贵全 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期551-559,共9页
用牛巴贝斯虫棒状体颈部蛋白RON2基因序列BLAST我国羊感染的2种巴贝斯虫全基因组数据库,以获得的RON2基因保守序列片段为模板设计PCR引物;从6株羊巴贝斯虫基因组DNA和c DNA中扩增RON2基因全长序列,分析其基因结构特征;并通过序列比对和... 用牛巴贝斯虫棒状体颈部蛋白RON2基因序列BLAST我国羊感染的2种巴贝斯虫全基因组数据库,以获得的RON2基因保守序列片段为模板设计PCR引物;从6株羊巴贝斯虫基因组DNA和c DNA中扩增RON2基因全长序列,分析其基因结构特征;并通过序列比对和进化树构建,分析我国羊巴贝斯虫的遗传进化关系。结果显示,该基因无内含子,羊巴贝斯虫未定种新疆株/敦煌株(BspX J/DH)、莫氏巴贝斯虫天祝株/临潭株(BmTZ/LT)和莫氏巴贝斯虫宁县株/河北株(BmNX/HB)RON2蛋白基因ORF的大小分别为4 029、4 047和4 044 bp,编码1 345、1 349和1 348个氨基酸。RON2蛋白的分子质量约为151 ku,等电点为8.91,具有3个跨膜区,N端第1~29位氨基酸为其信号肽区域。RON2核苷酸和氨基酸序列比对分析结果显示,BspXJ/DH与BmTZ/LT和BmNX/HB的核苷酸和氨基酸序列相似性分别为67.0%~67.4%和69.2%~69.3%,BmTZ/LT和BmNX/HB间的相似性分别为92.8%~92.9%和91.1%~91.2%。系统发生树上羊巴贝斯虫未定种和莫氏巴贝斯虫分别位于2大支,莫氏巴贝斯虫又被分为2小支。该结果为开展我国羊巴贝斯虫的分类关系和RON2基因功能的研究提供了基础数据。 展开更多
关键词 羊巴贝斯虫 棒状体颈部蛋白2 基因结构 序列比对 遗传进化
双芽巴贝斯虫Hsp20一新基因型的发现及生物学特性分析
6
作者 曲志强 张亮 +10 位作者 罗金 陈泽 任巧云 刘文阁 倪军 许肖枫 吴泽功 罗建勋 殷宏 孙晓林 刘光远 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期567-573,共7页
为了鉴定分离自甘肃永靖的1株双芽巴贝斯虫Hsp20基因型为一新基因型,参考双芽巴贝斯虫Hsp20核苷酸序列,设计特异性引物。对其进行扩增,利用生物信息学方法对其进行比对分析。结果显示,扩增获得了700 bp的核苷酸片段。与GenBank中公布的1... 为了鉴定分离自甘肃永靖的1株双芽巴贝斯虫Hsp20基因型为一新基因型,参考双芽巴贝斯虫Hsp20核苷酸序列,设计特异性引物。对其进行扩增,利用生物信息学方法对其进行比对分析。结果显示,扩增获得了700 bp的核苷酸片段。与GenBank中公布的18种不同物种的氨基酸序列构建遗传发育树,结果表明本实验获得的双芽巴贝斯虫与美国株和中国新疆株的亲缘关系最近。对其氨基酸序列进行比对分析,发现在第31~85位点存在冗余,与公布的Hsp20氨基酸序列存在明显的差异。通过同源建模分析,发现该冗余致使Hsp20蛋白在第7号位形成1个环形结构,从而引起了第3号位的拉伸。通过生物信息学分析得出,获得的双芽巴贝斯虫甘肃株的Hsp20基因是一新基因型。该基因型的存在为更加准确诊断双芽巴贝斯虫病提供了依据。 展开更多
关键词 双芽巴贝斯虫 Hsp20 基因型 生物学特征
非洲猪瘟病毒K205R蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
7
作者 赵亚茹 韩蓉 +7 位作者 杨吉飞 牛庆丽 关贵全 罗建勋 刘光远 殷宏 GRZEGORZ Wozniakowski 刘志杰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期805-811,共7页
将合成的非洲猪瘟病毒K205R基因序列插入pET-28a(+)表达载体,经IPTG诱导表达pET-28a-K205R重组蛋白。用制备的重组抗原免疫BALB/c小鼠,采用化学融合方法融合、筛选,获得了6A4、7F5和7G3三株抗K205R蛋白的杂交瘤细胞株。经鉴定,这3株单... 将合成的非洲猪瘟病毒K205R基因序列插入pET-28a(+)表达载体,经IPTG诱导表达pET-28a-K205R重组蛋白。用制备的重组抗原免疫BALB/c小鼠,采用化学融合方法融合、筛选,获得了6A4、7F5和7G3三株抗K205R蛋白的杂交瘤细胞株。经鉴定,这3株单克隆抗体(单抗)的亚类均为IgG1型;单抗的腹水效价分别为1∶51200、1∶409600和1∶102400。将这3株杂交瘤细胞连续培养20代,在第20代仍有很高的分泌抗体的能力,表明其稳定性较好。Western-blot检测结果表明,这3株单抗与K205R重组蛋白有良好的反应性和特异性。上述结果表明,本研究制备的这3株杂交瘤细胞株能够稳定分泌抗体,分泌的抗体特异性高,为非洲猪瘟诊断技术的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 非洲猪瘟病毒 K205R蛋白 单克隆抗体
IFN-λ1作为乙型脑炎病毒DNA疫苗佐剂的免疫效应研究
8
作者 周亚红 田占成 +5 位作者 于瑞明 高闪电 独军政 刘光远 罗建勋 殷宏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期841-846,共6页
为了评估IFN-λ1作为免疫佐剂能否提高乙型脑炎病毒DNA疫苗的免疫效应,利用RT-PCR方法扩增猪源IFN-λ1基因,构建重组真核表达载体pVAX1-IFN-λ1,通过Western-blot和间接免疫荧光试验鉴定免疫效果。结果表明,转染pVAX1-IFN-λ1重组质粒的... 为了评估IFN-λ1作为免疫佐剂能否提高乙型脑炎病毒DNA疫苗的免疫效应,利用RT-PCR方法扩增猪源IFN-λ1基因,构建重组真核表达载体pVAX1-IFN-λ1,通过Western-blot和间接免疫荧光试验鉴定免疫效果。结果表明,转染pVAX1-IFN-λ1重组质粒的BHK21细胞能够正确表达IFN-λ1;将重组IFN-λ1与pVAX1-prMEDNA疫苗免疫小鼠后,与对照组pVAX1-prME相比,IFN-λ1可以诱导小鼠产生乙型脑炎病毒EⅢ蛋白特异性抗体水平、乙脑病毒特异性中和抗体效价和淋巴细胞增殖水平显著提高。结论,重组猪源IFN-λ1作为乙型脑炎病毒DNA疫苗的分子免疫佐剂能够在小鼠动物模型上提高乙型脑炎病毒DNA疫苗的免疫效应。 展开更多
关键词 IFN-λ1 乙型脑炎病毒 DNA疫苗 鉴定 免疫
新分离植物乳杆菌的药敏性和抑菌性试验
9
作者 李禤 贾丹 +10 位作者 刘军龙 王锦明 王佳慧 刘爱红 王杰 刘志杰 关贵全 刘光远 罗建勋 殷宏 李有全 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期879-886,共8页
从市售泡菜、酸奶、肉牛牦牛粪便以及天然植物等基质中新分离出8株植物乳杆菌,采用K-B法和双层琼脂扩散法评价这8株植物乳杆菌对13种常用抗生素的耐药性以及对14株致病菌株的抗菌活性。结果表明,不同来源所分离植物乳杆菌的敏感性基本相... 从市售泡菜、酸奶、肉牛牦牛粪便以及天然植物等基质中新分离出8株植物乳杆菌,采用K-B法和双层琼脂扩散法评价这8株植物乳杆菌对13种常用抗生素的耐药性以及对14株致病菌株的抗菌活性。结果表明,不同来源所分离植物乳杆菌的敏感性基本相似,对β-内酰胺类抗生素敏感,但对万古霉素、氨基糖苷类和喹诺酮类等临床上常见抗生素均有抗性。这8株植物乳杆菌对12株指示菌有不同程度的抑制作用,对强致病性大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌等的抑菌功能较强。这些具有良好抗菌性的植物乳杆菌具有防治动物胃肠道疾病的潜能,但仍需对其益生潜能进行深入研究。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 抑菌性 抗生素抗性
山桐子优良无性系选择初步评价 预览
10
作者 贾晨 王戈 +2 位作者 罗建勋 武华卫 王海峰 《四川林业科技》 2019年第3期57-62,共6页
以20个山桐子无性系为研究对象,通过分析其生长量、结实量、含油率等性状差异进而评价筛选优良无性系。结果表明:不同无性系间的果穗性状、果实表型、果实含油率存在显著差异;果穗长宽与果穗重相关性极显著,果实大小显著影响单果重量的... 以20个山桐子无性系为研究对象,通过分析其生长量、结实量、含油率等性状差异进而评价筛选优良无性系。结果表明:不同无性系间的果穗性状、果实表型、果实含油率存在显著差异;果穗长宽与果穗重相关性极显著,果实大小显著影响单果重量的大小;利用主成分分析法,综合评选出6个优良无性系,入选率30%,入选无性系具有含油率高、结实量大、树体健壮等特点。本研究筛选的山桐子优良无性系为四川地区选育良种或品种提供良好物质基础。 展开更多
关键词 山桐子 无性系 选择评价
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氮沉降对镉胁迫下南方四季杨生物量积累和光合生理的影响 预览
11
作者 古洪双 赵子豪 +4 位作者 楼锦锋 李利 俞飞 卢婷 罗建勋 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期6-9,19共5页
为了探讨氮(N)沉降对植物镉(Cd)耐受性的影响,采用盆栽模拟试验,研究了低N(30kg·hm^-2·a^-1)、中N(60kg·hm^-2·a^-1)、高N(90kg·hm^-2·a^-1)3种施氮量处理下,受Cd胁迫(100mg·kg^-1)的南方四季杨(Pop... 为了探讨氮(N)沉降对植物镉(Cd)耐受性的影响,采用盆栽模拟试验,研究了低N(30kg·hm^-2·a^-1)、中N(60kg·hm^-2·a^-1)、高N(90kg·hm^-2·a^-1)3种施氮量处理下,受Cd胁迫(100mg·kg^-1)的南方四季杨(Populus deltoides×P.nigra)幼苗生物量积累、气体交换特征、叶绿素荧光参数、叶片绿度(SP,A,D)和丙二醛(MDA)质量摩尔浓度、可溶性蛋白质量浓度的差异。结果表明:单独Cd处理显著降低了根、茎、叶生物量的积累。交互作用下,低N和中N处理对各器官生物量积累影响不显著,高N处理显著提高了根、茎、叶生物量的积累。单独Cd显著降低了除胞间二氧化碳摩尔分数之外的所有气体交换参数。交互作用下,低N处理显著升高了幼苗的净光合速率(PN);中N处理显著提高了幼苗的PN、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr);高N处理对各参数无影响。单独Cd处理显著降低了光系统Ⅱ的实际光量子产量(ΦP,S,Ⅱ)和SP,A,D值,升高了非光化学淬灭系数(qN)。交互条件下,中N和低N处理提高了SP,A,D值,低N处理降低了qN,而高N处理对这些参数没有显著影响。单独Cd处理显著升高了叶片的MDA质量摩尔浓度。交互作用下,MDA质量摩尔浓度随着N沉降量的增加先降低后升高,可溶性蛋白质量浓度在Cd和中N处理的交互作用下显著升高。由此可见,N对Cd胁迫的缓解作用与N沉降量和植物自身氮素亏缺状态密切相关。 展开更多
关键词 氮沉降 南方四季杨 生物量积累 光合生理
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有线电视宽带接入网技术应用分析 预览
12
作者 罗建勋 杨全保 《科学与信息化》 2019年第28期17-17,23共2页
网络几乎是二十一世纪人们生活必备的物品,人们的衣食住行都能通过网络连接实现,网络对当代人的影响力是毋庸置疑的。在有线电视领域,有线电视宽带接入网技术的应用范围不断扩大,这利于行业进行自我改革不断发展,本文对有线电视宽带接... 网络几乎是二十一世纪人们生活必备的物品,人们的衣食住行都能通过网络连接实现,网络对当代人的影响力是毋庸置疑的。在有线电视领域,有线电视宽带接入网技术的应用范围不断扩大,这利于行业进行自我改革不断发展,本文对有线电视宽带接入网技术进行分析和探讨,阐述有线电视宽带接入网的相关技术应用现状并进行合理的分析。 展开更多
关键词 有线电视 宽带接入网 技术应用
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图书馆发展文化休闲功能与服务研究 预览
13
作者 罗建勋 《图书情报》 2019年第6期00018-00021,共4页
图书馆是人类文化信息服务中心。随着时代的发展,社会大众对休闲文化的需求日益增大,图书馆应与时俱进,大力发展文化休闲功能与服务。文章介绍了图书馆发展文化休闲功能的重要意义;分析了图书馆发展文化休闲功能的类型,并对目前广东省... 图书馆是人类文化信息服务中心。随着时代的发展,社会大众对休闲文化的需求日益增大,图书馆应与时俱进,大力发展文化休闲功能与服务。文章介绍了图书馆发展文化休闲功能的重要意义;分析了图书馆发展文化休闲功能的类型,并对目前广东省市级以上公共图书馆文化休闲功能进行了调查研究;重点阐述了发展文化休闲功能与服务的策略。 展开更多
关键词 图书馆 文化休闲 功能与服务 类型 策略
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"研讨式、项目化"方法在"皮革整饰化学及工艺学"课程教学中的实践
14
作者 罗建勋 马贺伟 李书卿 《中国皮革》 CAS 2019年第4期19-23,共5页
基于目前皮革企业对人才及其创新能力需求的调研和对轻化工程专业(皮革模块)核心课程之一--《皮革整饰化学及工艺学》的教学内容、传统教学方法和教学效果的分析,在该课程的教学方法、考核方法方面进行了改革和实践。通过采用研讨式和... 基于目前皮革企业对人才及其创新能力需求的调研和对轻化工程专业(皮革模块)核心课程之一--《皮革整饰化学及工艺学》的教学内容、传统教学方法和教学效果的分析,在该课程的教学方法、考核方法方面进行了改革和实践。通过采用研讨式和项目化的教学方法,将"碎片化"的知识讲解与研讨、有机串联并运用于项目方案的设计与实践之中。实践结果表明:该项课程改革有效地激发与培养了学生对专业的兴趣,提升了对专业的再认识,将其所学的专业课程知识用之于实践,增强了其创新能力。 展开更多
关键词 轻化工程 教学改革 研讨式教学 项目化教学 教学效果
党支部标准化规范化建设研究 预览
15
作者 罗建勋 《各界》 2019年第22期15-16,共2页
党的基层组织是党在社会基层组织中的战斗堡垒,是党的全部工作和战斗力的基础。本文从基本情况、主要问题、建议对策等方面,就党支部标准化规范化建设作了一些探索。
关键词 支部 党员 标准化 规范化
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废弃牛油的亚硫酸化改性及应用 预览
16
作者 骆如慧 吴伟潇 +3 位作者 陈德燕 琚逸松 韩美玉 罗建勋 《皮革与化工》 CAS 2019年第2期14-20,共7页
以制革废弃牛油为原材料,对其先后进行理化性能检测、脱色脱臭、酰胺化、酯化和亚硫酸化反应并制得亚硫酸化加脂剂。结果表明,制革废弃牛油酸值为45 mg KOH/g,皂化值为207 mg KOH/g;采用10%双氧水、6%活性白土对其脱色脱臭,效果最佳。采... 以制革废弃牛油为原材料,对其先后进行理化性能检测、脱色脱臭、酰胺化、酯化和亚硫酸化反应并制得亚硫酸化加脂剂。结果表明,制革废弃牛油酸值为45 mg KOH/g,皂化值为207 mg KOH/g;采用10%双氧水、6%活性白土对其脱色脱臭,效果最佳。采用n(乙醇胺)/n(牛油)为4∶1且1.5%的甲酸钠催化下,在130~140℃反应2 h后,油脂的酸值和羟值分别为15~30 mg KOH/g和约280 mg KOH/g。在亚硫酸化改性反应中,当偏重亚硫酸钠的最佳用量为20%时,该加脂剂为浅黄色且具有良好的乳液稳定性,加脂后的绵羊皮服装革柔软。 展开更多
关键词 废弃牛油 酸值 羟值 亚硫酸化 应用
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蓝舌病毒VP5蛋白抗体的制备及鉴定
17
作者 康棣 独军政 +6 位作者 高闪电 田占成 Darien Kheder ALI MOHAMED 郭艳妮 刘光远 罗建勋 殷宏 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期671-677,共7页
本研究参考GenBank中蓝舌病毒16型（BTV-16）标准株RSAvvvv的序列,首先人工合成编码BTV-16 VP5蛋白的S6全长基因,并克隆于pUC-57载体。设计表达引物,利用PCR方法扩增N末端缺少编码第1~41位氨基酸的截短基因VP5Δ41aa,将其亚克隆到表达载... 本研究参考GenBank中蓝舌病毒16型（BTV-16）标准株RSAvvvv的序列,首先人工合成编码BTV-16 VP5蛋白的S6全长基因,并克隆于pUC-57载体。设计表达引物,利用PCR方法扩增N末端缺少编码第1~41位氨基酸的截短基因VP5Δ41aa,将其亚克隆到表达载体pET-32a（＋）中,构建重组表达质粒pET-VP5Δ41aa。将表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）后,利用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白VP5Δ41aa在大肠杆菌中大量表达。利用组氨酸标签纯化树脂获得了高纯度的VP5Δ41aa蛋白,用其3次免疫新西兰大白兔制备相应的抗血清,Western-blot检测显示,抗血清不仅可与重组表达的VP5Δ41aa蛋白反应,而且可与BTV感染细胞中的VP5蛋白反应。免疫荧光试验表明,该抗体也可与BTV感染C6/36细胞中具有天然构象的VP5蛋白反应。上述结果表明,本试验制备的VP5抗体将为深入研究VP5蛋白的生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 蓝舌病毒 VP5基因 原核表达 多克隆抗体 鉴定
吕氏泰勒虫TlSP重组亚单位疫苗免疫保护效果的评估
18
作者 韩元 郭鹏飞 +9 位作者 李禤 刘军龙 刘爱红 王锦明 关贵全 刘志杰 刘光远 李有全 罗建勋 殷宏 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第8期939-945,共7页
为了评价吕氏泰勒虫表面蛋白Tl SP（Theileria luwenshuni surface protein）的免疫保护效果,分别用150 g/只和300 g/只乳化后的Tl SP蛋白免疫试验Ⅰ组和Ⅱ组绵羊,对照组为等量PBS,每组5只。二免后第14天,每只绵羊用50只青海血蜱饥饿成... 为了评价吕氏泰勒虫表面蛋白Tl SP（Theileria luwenshuni surface protein）的免疫保护效果,分别用150 g/只和300 g/只乳化后的Tl SP蛋白免疫试验Ⅰ组和Ⅱ组绵羊,对照组为等量PBS,每组5只。二免后第14天,每只绵羊用50只青海血蜱饥饿成蜱进行攻蜱试验。结果显示,对照组绵羊攻蜱后出现跛行、体温2次升高和淋巴结肿大等症状,发病率为100%,死亡率为40%,染虫率在2.23%~3.50%之间;试验Ⅰ组和Ⅱ组绵羊免疫后产生的最高抗体效价分别为1∶102 400和1∶25 600,发病率均为60%,表现轻度临床症状而未发生死亡,染虫率在1.23%~1.89%之间。上述结果证实,制备的Tl SP重组亚单位疫苗在抗泰勒虫感染上具有良好的免疫保护效果,为进一步开展羊泰勒虫病亚单位疫苗的研制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 吕氏泰勒虫 TL SP蛋白 染虫率 抗体水平 免疫保护效果
青钱柳不同种源幼树生长特性及叶片性状差异分析 预览
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作者 王海峰 严贤春 +2 位作者 罗建勋 刘芙蓉 王凘璐 《四川林业科技》 2018年第3期1-6,共6页
为进行青钱柳优良种源的早期选择,对四川沐川、贵州黎平、湖南东安、湖北五峰和江西修水5个种源的青钱柳幼树生长特性和叶片性状进行分析。结果表明：青钱柳不同种源间幼树生长特性各指标均达到显著水平;幼树的小叶长度、小叶宽度、小... 为进行青钱柳优良种源的早期选择,对四川沐川、贵州黎平、湖南东安、湖北五峰和江西修水5个种源的青钱柳幼树生长特性和叶片性状进行分析。结果表明：青钱柳不同种源间幼树生长特性各指标均达到显著水平;幼树的小叶长度、小叶宽度、小叶面积的差异等均达到了显著水平,但叶片厚度和复叶叶柄粗度和复叶叶柄长度差异不显著。对不同种源青钱柳幼树的生长和叶片指标进行了相关性分析和主成分分析,结果表明：树高、地径、最长侧枝长度、最长侧枝粗度、侧枝数量间存在显著正相关关系;侧枝数量、小叶长度、小叶宽度、小叶面积间存在显著正相关关系;小叶长度、小叶宽度、小叶面积分别与复叶叶柄长度、复叶叶柄宽度显著正相关。通过主成分分析,前两个主成分的累积方差贡献率为97.18%。经综合评价,不同种源青钱柳幼树综合得分最高的为四川沐川、贵州黎平种源。 展开更多
关键词 青钱柳 不同种源 生长特性 叶片性状 主成分分析
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犊牛粪便中益生菌的分离与鉴定 预览
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作者 韩元 李禤 +6 位作者 郭鹏飞 关贵全 刘军龙 刘爱红 罗建勋 殷宏 李有全 《中国奶牛》 2018年第7期21-24,共4页
为了筛选出能够抑制犊牛腹泻的益生菌株,本研究采集了20份健康犊牛新鲜粪便,采用厌氧培养、形态学观察以及分子鉴定技术,初步分离得到3株革兰氏阳性杆菌（A1、A2和A3）和4株革兰氏阳性球菌（B1、B2、B3和B4）,并对这些菌株进行分子鉴定... 为了筛选出能够抑制犊牛腹泻的益生菌株,本研究采集了20份健康犊牛新鲜粪便,采用厌氧培养、形态学观察以及分子鉴定技术,初步分离得到3株革兰氏阳性杆菌（A1、A2和A3）和4株革兰氏阳性球菌（B1、B2、B3和B4）,并对这些菌株进行分子鉴定。鉴定结果表明：A1和A2均为罗伊乳杆菌,A3为黏膜乳杆菌;B1为坚强肠球菌,B2为海氏肠球菌,B3和B4均为屎肠球菌。本研究为防治犊牛腹泻提供了更多的候选菌种。 展开更多
关键词 厌氧培养 犊牛粪便 益生菌
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