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27nt-miRNA对血管平滑肌细胞SM22α表达的调节及其对细胞活力、迁移和表型改变的影响 预览
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作者 沈凤 杨鹏 +6 位作者 陶晓静 李丹 颜渊鸳 罗雪 秦祖杰 覃裕旺 欧和生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期200-205,共6页
目的:探讨27nt-微小RNA(27nt-miRNA)对血管平滑肌细胞(VSMCs)中平滑肌22α蛋白(SM22α)表达的调节及其对细胞活力、迁移和表型改变的影响。方法:构建27nt-miRNA高表达、反义序列(anti-27nt-miRNA)以及阴性对照的表达质粒,经慢病毒包装... 目的:探讨27nt-微小RNA(27nt-miRNA)对血管平滑肌细胞(VSMCs)中平滑肌22α蛋白(SM22α)表达的调节及其对细胞活力、迁移和表型改变的影响。方法:构建27nt-miRNA高表达、反义序列(anti-27nt-miRNA)以及阴性对照的表达质粒,经慢病毒包装后分别转染大鼠原代VSMCs,加入血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导VSMCs表型转换。MTT实验检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学染色法检测细胞中SM22α的mRNA和蛋白表达情况。结果:与正常组相比,PDGF-BB组的细胞活力上升(P<0.05)、迁移能力上升(P<0.05),SM22α的mRNA及蛋白表达量下降(P<0.05);与阴性对照慢病毒组相比,27nt-miRNA高表达组的细胞活力下降(P<0.05),迁移能力下降(P<0.05),SM22α的mRNA及蛋白表达量明显升高(P<0.05);而anti-27nt-miRNA组细胞的细胞活力上升(P<0.05),迁移能力上升(P<0.05),SM22α的mRNA及蛋白表达量下降(P<0.05)。结论:27nt-miRNA促进SM22α表达,同时抑制VSMCs的活力及迁移,并有可能抑制VSMCs从收缩型转变为合成型。 展开更多
关键词 27nt-miRNA 血管平滑肌细胞 表型 平滑肌22α蛋白 血小板源性生长因子
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microRNA-24对自噬的调节及血管内皮细胞管腔形成的影响 预览
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作者 杨鹏 欧和生 +4 位作者 莫国君 罗雪 沈凤 陶晓静 吕冬宁 《广东医学》 2018年第15期2268-2273,共6页
目的探讨microRNA-24(miR-24)对自噬相关基因LC3Ⅱ和Beclin-1的调节及其对血管内皮细胞管腔形成能力的影响。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)随机分为空白对照组、雷帕霉素+miR-24高表达组以及雷帕霉素组。其中空白对照组的细胞不... 目的探讨microRNA-24(miR-24)对自噬相关基因LC3Ⅱ和Beclin-1的调节及其对血管内皮细胞管腔形成能力的影响。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)随机分为空白对照组、雷帕霉素+miR-24高表达组以及雷帕霉素组。其中空白对照组的细胞不作任何处理;雷帕霉素+miR-24高表达组的细胞先转染miR-24高表达质粒,再用1 000 nmol/L的雷帕霉素干预6 h建立自噬模型;雷帕霉素组的细胞同样用1 000 nmol/L的雷帕霉素干预6 h建立自噬模型;然后分别用MTT法检测HUVECs的增殖能力、细胞划痕实验检测HUVECs迁移能力及Matrigel实验检测HUVECs管腔形成能力,进一步用蛋白免疫印迹法(Western blot)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测LC3II和Beclin-1的蛋白和mRNA表达水平。结果 (1)与空白对照组相比,雷帕霉素组、雷帕霉素+miR-24高表达组细胞增殖能力和迁移比例降低(P〈0.05),雷帕霉素组的管腔形成数量、长度与空白对照组相近,而雷帕霉素+miR-24高表达组则基本没有形成明显管腔样结构。(2)与空白对照组相比,雷帕霉素+miR-24高表达组和雷帕霉素组的LC3II和Beclin-1 mRNA和蛋白表达量均不同程度增加(P〈0.05)。(3)在雷帕霉素+miR-24高表达组中,上述指标较雷帕霉素组均降低(P〈0.05),特别是管腔形成数目明显减少。结论 miR-24可在转录后水平调控自噬相关基因LC3II和Beclin-1的表达,进而下调细胞自噬水平。这很有可能是miR-24抑制HUVECs增殖、迁移和管腔形成的机制之一。 展开更多
关键词 miR-24 管腔 自噬 LC3Ⅱ BECLIN-1
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智造“美丽红利”——记平桂飞碟钛白粉厂环保车间
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作者 罗雪 《中国有色金属》 2018年第15期56-57,共2页
面对"绿水青山就是金山银山"的"美丽"要求,平桂飞碟钛白粉厂环保车间以创建"美丽"车间为目标,把这作为可持续发展的"摇钱树"、"聚宝盆",变身生态红利,打造出"美丽车间"的闪亮"金名片"。一个50多人的车间,技术革新不断,"... 面对"绿水青山就是金山银山"的"美丽"要求,平桂飞碟钛白粉厂环保车间以创建"美丽"车间为目标,把这作为可持续发展的"摇钱树"、"聚宝盆",变身生态红利,打造出"美丽车间"的闪亮"金名片"。一个50多人的车间,技术革新不断,"美丽红利"不断;一个处理尾水的车间,点废成金,实现废水资源化,产出氧化钪、回收有价值的钛;今年,他们又一举破解降低石膏水份行业难题. 展开更多
关键词 钛白粉厂 车间 红利 环保 飞碟 可持续发展 废水资源化 技术革新
绿色矿山就是金山银山的生动实践
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作者 罗雪 《中国有色金属》 2018年第5期56-57,共2页
来到中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司桂华成公司(以下简称“桂华成”),满目的绿水青山,满院的绿草鲜花,满怀的绿意情感,尤其是有着“布达拉宫”美誉的长营岭选厂的雄伟气势、职工们脸上透出的由衷喜悦,行走在这美丽怡... 来到中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司桂华成公司(以下简称“桂华成”),满目的绿水青山,满院的绿草鲜花,满怀的绿意情感,尤其是有着“布达拉宫”美誉的长营岭选厂的雄伟气势、职工们脸上透出的由衷喜悦,行走在这美丽怡人的矿区环境,记者情小自禁地从脑海里蹦出一个新词-“矿山绿”。 展开更多
关键词 绿色矿山 银山 金山 布达拉宫 矿区环境
“聚能”组长——记平桂飞碟钛白粉厂酸解车间维修组副组长、高级技师谢授明
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作者 罗雪 《中国有色金属》 2018年第20期48-51,共4页
在20多年的维修生涯中,谢授明熟练地掌握了电焊、机修、设备防腐作业处理等维修工作,一专多能,被大伙称为"三栖"修理工、"难得的多面手"。他是位钳工高级技师,懂技术、能修理、会带徒,同事佩服他有能耐,领导觉得他是个人才。
关键词 维修工作 高级技师 钛白粉厂 车间 酸解 飞碟 聚能 设备防腐
平桂飞碟元月份生产经营实现开门红
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作者 罗雪 《中国有色金属》 2018年第5期22-23,共2页
从平桂飞碟股份有限公司1月30日生产工作会获悉,元月份,平桂飞碟实现营业收入完成年计划的10%,同比增长104%;实现利润完成年计划的17%,同比增长135%,元月份生产经营实现开门红,为实现全年“两个目标增长”奠定了坚实基础。
关键词 生产经营 飞碟 开门 同比增长 生产工作 营业收入 成年
平桂飞碟提质增效决胜之役战绩斐然
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作者 罗雪 《中国有色金属》 2018年第1期21-22,共2页
中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司即将迎来提质增效决战圆满收官,截至11月底,该公司提质增效赢利成果进一步巩固扩大,实现营业收入同比增长13.51%,实现利润总额同比增长11倍,上缴税金同比增长7.35%,出口创汇同比增... 中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司即将迎来提质增效决战圆满收官,截至11月底,该公司提质增效赢利成果进一步巩固扩大,实现营业收入同比增长13.51%,实现利润总额同比增长11倍,上缴税金同比增长7.35%,出口创汇同比增长56.97%。运营效率持续提升, 展开更多
关键词 增效 飞碟 同比增长 营业收入 出口创汇 运营效率
27nt-miRNA对人脐带间充质干细胞定向内皮细胞分化和管腔形成的影响及其分子机制 预览
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作者 陶晓静 杨鹏 +6 位作者 沈凤 颜渊鸳 李丹 罗雪 甘娜 覃裕旺 欧和生 《山东医药》 2018年第35期23-27,共5页
目的探讨27nt-miRNA对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)定向内皮细胞分化和分化后细胞管腔形成能力的影响,并探讨其分子机制。方法 构建27nt-miRNA、anti-27nt-miRNA及对照慢病毒载体。将hUCMSCs分为27nt-miRNA组、anti-27nt-miRNA组、对照... 目的探讨27nt-miRNA对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)定向内皮细胞分化和分化后细胞管腔形成能力的影响,并探讨其分子机制。方法 构建27nt-miRNA、anti-27nt-miRNA及对照慢病毒载体。将hUCMSCs分为27nt-miRNA组、anti-27nt-miRNA组、对照组,分别转染27nt-miRNA、anti-27nt-miRNA及对照慢病毒载体后观察转染效率,诱导分化并观察细胞形态变化,MTT检测分化后细胞增殖能力,硝酸还原酶法检测分化过程中细胞的一氧化氮(NO)产量,人工基底膜检测分化后细胞的成管能力,RT-PCR、免疫细胞化学和Western blotting分别检测分化后细胞的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和蛋白。结果 与对照组相比,27nt-miRNA组hUCMSCs分化程度低,未见管腔样网络结构;分化第9天,27nt-miRNA组细胞NO产量较对照组降低33.49%(P<0.05)、eNOS mRNA表达量较对照组降低23.81%(P<0.01)、eNOS蛋白表达较对照组降低24.56%(P<0.05);anti-27nt-miRNA组的上述指标较对照组及27nt-miRNA组升高(P<0.05或P<0.01)。结论 27nt-miRNA明显抑制hUCMSCs定向内皮细胞分化及管腔形成能力,其作用机制与27nt-miRNA抑制eNOS蛋白表达及NO合成有关。 展开更多
关键词 27nt-微小RNA 非编码RNA 干细胞分化 间充质干细胞 人脐带间充质干细胞 内皮细胞 一氧化氮合酶
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人骨髓间充质干细胞定向血管内皮细胞诱导分化前后eNOS表达/活性及其代谢产物的差异 预览 被引量:3
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作者 罗雪 陈伟 +2 位作者 莫国君 杨鹏 欧和生 《西安交通大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2017年第3期386-391,共6页
目的探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)定向血管内皮细胞诱导分化前后内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达、活性及其代谢产物的差异。方法建立hBMSCs定向血管内皮细胞诱导分化系统。应用倒置显微镜观察细胞形态的改变,Transwell实验检... 目的探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)定向血管内皮细胞诱导分化前后内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达、活性及其代谢产物的差异。方法建立hBMSCs定向血管内皮细胞诱导分化系统。应用倒置显微镜观察细胞形态的改变,Transwell实验检测细胞的迁移能力,细胞免疫荧光及Western blot检测eNOS的蛋白表达,ELISA法检测eNOS的活性,硝酸还原法检测细胞培养上清液NO含量。结果与未分化组相比,分化后的细胞形态发生明显改变;细胞的迁移能力增强238.10%(73.000±7.002 vs.21.000±4.359,P〈0.05);eNOS蛋白的表达增加114.72%(0.423±0.011 vs.0.197±0.079,P〈0.05);eNOS的活性增强157.49%(4.967±0.073 vs.1.929±0.103,P〈0.05);NO合成与释放增加155.67%(184.909±1.853 vs.72.323±0.426,P〈0.05)。结论 hBMSCs定向内皮细胞诱导分化后eNOS基因表达增加、活性增强,其代谢产物NO的合成与释放增加。本结果可能为干细胞在心血管疾病等防治提供依据。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 血管内皮细胞 诱导分化 内皮型一氧化氮合酶(eNOS) 代谢产物
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miRNA-24对血管内皮细胞eNOS表达/活性及其代谢产物NO生成的影响 预览 被引量:4
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作者 罗雪 陈伟 +2 位作者 莫国君 杨鹏 欧和生 《国际药学研究杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期245-250,共6页
目的探讨微小RNA(miRNA)-24对血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(e NOS)基因表达、活性调节的分子机制及其代谢产物的影响。方法构建miRNA-24高表达质粒,并转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。MTT法检测细胞的增殖情况,划痕实验检测细胞... 目的探讨微小RNA(miRNA)-24对血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(e NOS)基因表达、活性调节的分子机制及其代谢产物的影响。方法构建miRNA-24高表达质粒,并转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。MTT法检测细胞的增殖情况,划痕实验检测细胞的迁移能力,RT-PCR和Western印迹法检测细胞eNOS mRNA和蛋白的表达情况,ELISA法检测eNOS的表达活性,硝酸还原法测定细胞培养上清液中NO的含量。结果与对照组相比,转染miRNA-24后细胞增殖能力下降54.32%、迁移能力下降48.62%;转染miRNA-24后eNOS mRNA降低43.92%,蛋白表达量减少42.71%;转染miRNA-24后eNOS的酶活性降低73.20%,同时NO的合成与释放减少55.29%。结论 miRNA-24高表达抑制eNOS的表达及酶活性;miRNA-24抑制代谢产物NO的合成与释放,这可能成为心血管疾病防治的分子靶点。 展开更多
关键词 微小RNA-24 内皮细胞 内皮型一氧化氮合酶 代谢产物
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百年平桂不忘初心 提质增效砥砺前行——中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司改革发展纪实 预览
11
作者 罗雪 《中国金属通报》 2017年第2期20-25,共6页
中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司(下文简称"平桂飞碟")地处三省通衢之贺州,经历了风雨磨砺后,依然壮志在胸、步伐坚定。今天的平桂飞碟,矢志复兴百年平桂辉煌,正在迈向跨越式发展征程。今天的平桂飞碟,正载着飞碟人多少... 中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司(下文简称"平桂飞碟")地处三省通衢之贺州,经历了风雨磨砺后,依然壮志在胸、步伐坚定。今天的平桂飞碟,矢志复兴百年平桂辉煌,正在迈向跨越式发展征程。今天的平桂飞碟,正载着飞碟人多少年来的"飞碟梦"扬帆起航! 展开更多
关键词 中国有色集团 扬帆起航 跨越式发展 平桂矿务局 电力公司 企业管理现代化 工业科学技术 主要经济指标 绿色矿山 找矿成果
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不畏浮云遮望眼——看广西桂华成有限责任公司如何破解“降本增效之困”
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作者 罗雪 《中国有色金属》 2017年第13期48-49,共2页
广西桂华成有限责任公司通过强化全面预算管理、提质增效、节支降本、综合回收、优化管理等有力举措,多管齐下,谋困境之变,谱发展新篇,全面提升自身竞争实力,推动企业实现有质量的发展。
关键词 中国有色集团 价格持续低迷 出资企业 预算管理 综合回收 钨矿 出矿品位 成本控制目标 钨锡 金属产品
平桂飞碟员工有力量创新创效2500万元 预览
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作者 罗雪 《中国金属通报》 2017年第6期34-35,共2页
随着初夏的到来,位于钟山县珊瑚镇的国家绿色矿山、中国有色(广西)平桂飞碟股份有限公司珊瑚矿更是绿惫盎然。刚刚到精选车间烘干设备微波烘干炉岗位巡检完工作的生产技术部主任黎晓光,充满收获的喜悦:“引进微波烘干设备代替高温... 随着初夏的到来,位于钟山县珊瑚镇的国家绿色矿山、中国有色(广西)平桂飞碟股份有限公司珊瑚矿更是绿惫盎然。刚刚到精选车间烘干设备微波烘干炉岗位巡检完工作的生产技术部主任黎晓光,充满收获的喜悦:“引进微波烘干设备代替高温烟气炉,经一年多的生产,微波干燥设备的应用,运行环境干净,处理能力大,自动化程度高,新设备工艺投入生产后年可节支33万多元。”作为“精选车间烘干设备采用微波烘干炉代替高温烟气炉”合理化建议提交人,黎晓光对此次装备引进的效果感到满意。 展开更多
关键词 飞碟 微波干燥设备 创新 员工 烘干设备 自动化程度 合理化建议 生产后
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关于企业提质增效中合理化建议活动的问题思考 预览
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作者 罗雪 《中国金属通报》 2017年第8期98-99,97共3页
提质增效是企业近年来应对经济低迷的重要抓手。而员工长期扎跟一线,熟悉基层情况,开展员工合理化建议活动无疑是全心全意依靠员工抓好提质增效的有效形式,更是先进技术、科研成果转化为企业提质增效效果的重要途径。近三年来,中国有色... 提质增效是企业近年来应对经济低迷的重要抓手。而员工长期扎跟一线,熟悉基层情况,开展员工合理化建议活动无疑是全心全意依靠员工抓好提质增效的有效形式,更是先进技术、科研成果转化为企业提质增效效果的重要途径。近三年来,中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司员工合理化建议活动蓬勃发展,收到良好成效。如何充分调动广大员工的积极性、创造性,组织开展好这一项活动,使民智转化成真金白银,是企业当前的一项重要工作,笔者调研分析了目前企业合理化活建设活动存在的问题,就如何加强员工合理化建议提出了几点思考。 展开更多
关键词 企业 提质增效 合理化建议 长效机制
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不畏浮云遮望眼——看桂华成公司如何破解“降本增效之困” 预览
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作者 罗雪 《中国金属通报》 2017年第6期36-37,共2页
今年以来,面对市场形势复杂多变,钨矿市场价格持续低迷,企业降本提质增效的压力不断加大的困难掣肘,中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司出资企业广西桂华成有限责任公司(简称桂华成公司)积极应对,通过强化全面预算管理、提质... 今年以来,面对市场形势复杂多变,钨矿市场价格持续低迷,企业降本提质增效的压力不断加大的困难掣肘,中国有色集团(广西)平桂飞碟股份有限公司出资企业广西桂华成有限责任公司(简称桂华成公司)积极应对,通过强化全面预算管理、提质增效、节支降本、综合回收、优化管理等有力举措,多管齐下,谋困境之变,谱发展新篇,全面提升自身竞争实力,推动企业实现有质量的发展。 展开更多
关键词 中国有色集团 价格持续低迷 出资企业 综合回收 预算管理 钨矿 钨锡 出矿品位 达标达产 成本控制目标
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miR-24对人脐静脉内皮细胞增殖、转移及自噬的影响 预览 被引量:2
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作者 杨鹏 罗雪 +3 位作者 莫国君 陶晓静 沈凤 欧和生 《山东医药》 北大核心 2017年第13期24-27,共4页
目的 探讨miR-24对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、转移、自噬的影响.方法 将HUVECs随机分为空白对照组、雷帕霉素+miR-24高表达组、雷帕霉素组.空白对照组不给予任何处理;雷帕霉素组的HUVECs用1 000 nmol/L雷帕霉素处理6 h建立自噬... 目的 探讨miR-24对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、转移、自噬的影响.方法 将HUVECs随机分为空白对照组、雷帕霉素+miR-24高表达组、雷帕霉素组.空白对照组不给予任何处理;雷帕霉素组的HUVECs用1 000 nmol/L雷帕霉素处理6 h建立自噬模型.雷帕霉素+miR-24高表达组的HUVECs先转染miR-24高表达质粒,待转染成功后以同样方法建立自噬模型;用CCK-8法检测HUVECs增殖能力,细胞划痕试验检验细胞的转移能力,进一步用免疫组织化学和 Western blotting 法检测HUVECs自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1的蛋白表达水平,采用透射电镜观察细胞内部自噬小体.结果 与空白对照组相比,雷帕霉素组、雷帕霉素+miR-24高表达组OD值、细胞迁移比例降低、Beclin-1蛋白及LC3Ⅱ蛋白表达量上升(P<0.01或<0.05).与雷帕霉素组相比,雷帕霉素+miR-24高表达组OD值、细胞迁移比例下降,Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达量下降(P<0.01或<0.05).透射电镜观察结果显示,空白对照组和雷帕霉素+miR-24高表达组的细胞质内各细胞器分布基本正常,细胞核形态也正常,细胞质中未见明显自噬小体;雷帕霉素组细胞质中可见明显的空泡状结构、包含部分双层膜结构的自噬小体.结论 miR-24可显著抑制HUVECs的增殖、转移及自噬. 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 miRNA-24 细胞自噬 细胞增殖
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27-ntmiRNA对血管内皮细胞eNOS表达/活性的调节及其代谢产物的影响 被引量:1
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作者 罗雪 陈伟 +2 位作者 莫国君 杨鹏 欧和生 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第8期1442-1447,共6页
目的:前期工作表明,27-nt miRNA对eNOS的转录和表达有负反馈调节作用。本实验进一步探讨27-nt miRNA对血管内皮细胞eNOS的基因表达、活性调节及其代谢产物的影响。方法:构建27-nt miRNA高表达质粒,并将其转染至HUVECs。MTT法检测细胞... 目的:前期工作表明,27-nt miRNA对eNOS的转录和表达有负反馈调节作用。本实验进一步探讨27-nt miRNA对血管内皮细胞eNOS的基因表达、活性调节及其代谢产物的影响。方法:构建27-nt miRNA高表达质粒,并将其转染至HUVECs。MTT法检测细胞的增殖情况,划痕实验检测细胞的迁移能力,Western Blot检测27-nt miRNA及细胞eNOS蛋白的表达情况,ELISA法检测eNOS活性,硝酸还原法测定细胞培养上清液中NO的含量。结果:27-nt miRNA对HUVECs的增殖有强烈的抑制作用(0.674±0.093 vs 0.315±0.013,0.743±0.076 vs 0.315±0.013,P〈0.05);27-nt miRNA对HUVECs的迁移有显著的抑制作用(0.483±0.009vs 0.806±0.017,0.465±0.047 vs 0.806±0.017,P〈0.05);27-nt miRNA显著降低eNOS蛋白的表达(0.410±0.004 vs 0.645±0.007,0.483±0.009 vs 0.645±0.007,P〈0.05)及明显抑制eNOS的活性(1.093±0.357 vs 5.034±0.509,1.707±0.652 vs 5.034±0.509,P〈0.05);27-nt miRNA明显抑制NO的合成与释放(70.687±4.432 vs 136.803±6.913,75.264±4.481 vs 136.803±6.913,P〈0.05)。结论:27-nt miRNA高表达明显抑制eNOS基因的表达及活性;27-nt miRNA明显抑制NO的合成和释放,可能成为血管性疾病治疗的分子靶点。 展开更多
关键词 27-nt MIRNA 内皮细胞 ENOS 代谢产物
miR-21抑制剂对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞增殖及eNOS表达的影响 预览
18
作者 莫国君 陈伟 +2 位作者 罗雪 杨鹏 欧和生 《广西医科大学学报》 CAS 2017年第5期681-684,共4页
目的:探讨miR-21抑制剂对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法:将miR-21抑制剂转染至经AngⅡ诱导的HUVECs,采用MTT法检测细胞的增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁... 目的:探讨miR-21抑制剂对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法:将miR-21抑制剂转染至经AngⅡ诱导的HUVECs,采用MTT法检测细胞的增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,分别采用RT-PCR和western blotting法检测转录因子AP1和eNOS的mRNA和蛋白表达水平。结果:AngⅡ能促进HUVECs增殖和迁移,并使细胞中AP1、eNOS mRNA和蛋白表达明显上调(P〈0.05);miR-21抑制剂转染细胞后,AngⅡ促进HUVECs增殖和迁移的作用发生显著逆转(P〈0.05),且AP1、eNOS mRNA和蛋白表达明显下调(P〈0.05)。结论:miR-21抑制剂能够抑制AngⅡ刺激下HUVECs的增殖及eNOS的表达;AP1在AngⅡ诱导细胞eNOS表达中可能起到关键的调控作用。 展开更多
关键词 miR-21抑制剂 血管紧张素Ⅱ 一氧化氮合酶 AP1转录因子
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AS-miR-21对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及对PTEN/P13K/Akt信号通路的作用 被引量:2
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作者 王辉 黄江南 +5 位作者 李玉媚 张文宇 陈伟 莫国君 罗雪 欧和生 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第22期3349-3353,共5页
目的探讨miR-21的反义寡核苷酸(AS-miR-21)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和迁移能力的影响及对PTEN/P13K/Akt信号通路的调控作用机制。方法将NSCLCA549细胞分为3组,分别为AS-miR-21组、miR-NC组和Blank组,前两组分别应用... 目的探讨miR-21的反义寡核苷酸(AS-miR-21)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和迁移能力的影响及对PTEN/P13K/Akt信号通路的调控作用机制。方法将NSCLCA549细胞分为3组,分别为AS-miR-21组、miR-NC组和Blank组,前两组分别应用阳离子脂质体LipofectamineTM 2000瞬时转染AS-miR-21及阴性对照miRNA(miR-NC),后者未进行任何干预。应用qRT-PCR检测AS-miR-21对NSCLCA549细胞中miR-21表达的影响;应用MTT检测NSCLCA549细胞增殖抑制率;Giemsa染色检测NSCLCA549细胞克隆形成;细胞划痕实验检测NSCLCA549细胞迁移潜能;qRT-PCR检测AS-miR-21对NSCLCA549细胞中PrENmRNA表达水平的影响;蛋白质免疫印迹法检测AS-miR-21对NSCLCA549细胞中PTEN、PI3K、Akt蛋白表达水平的影响。结果与miR-NC组和Blank组比较,AS-miR-21组miR-21表达水平下调(P〈0.05);AS-miR-21显著抑制NSCLCA549细胞增殖能力(P〈0.05),显著减少NSCLCA549细胞克隆形成(P〈0.01)和迁移率(P〈0.01);AS-miR-21显著上调NSCLCA549细胞中PTEN蛋白表达水平(P〈0.01),而显著下调PI3K和Akt蛋白表达水平(P〈0.01)。结论AS-miR-21能抑制NSCLCA549细胞增殖及迁移,此外,AS-miR-21通过负调控胛EN/PI3K/Akt信号通路有可能成为NSCLC治疗新靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 AS-miR-21 增殖 迁移 PTEN/PI3K/Akt
全文增补中
微小核糖核酸-24对内皮型一氧化氮合酶基因表达的调节及其对血管内皮细胞管腔形成的影响 预览 被引量:1
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作者 陈伟 莫国君 +3 位作者 罗雪 王辉 杨鹏 欧和生 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2016年第8期797-801,共5页
目的:探讨微小核糖核酸(microRNA)-24(miR-24)对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达调节的分子机制及其对血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成能力的影响。方法:构建miR-24及其反义序列的高表达质粒,分别转染人脐静脉内皮细胞(HUV... 目的:探讨微小核糖核酸(microRNA)-24(miR-24)对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达调节的分子机制及其对血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成能力的影响。方法:构建miR-24及其反义序列的高表达质粒,分别转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs),根据转染质粒将实验细胞分为:miR-24高表达组、miR-24干扰组和空白质粒对照组。用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测HUVECs增殖能力,划痕和Transwell试验检测细胞的迁移能力,人工基底膜检测细胞的管腔形成能力;分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测eNOS和Sp1转录因子m RNA和蛋白表达水平。结果:(1)与空白质粒对照组比较,miR-24高表达组细胞增殖能力降低45.45%(0.36±0.04 vs 0.66±0.08,P〈0.05);miR-24高表达组细胞迁移速度明显减缓,且迁移数目降低74.75%(30.25±3.78 vs 119.80±10.94,P〈0.01),未能形成明显管腔样结构。(2)与空白质粒对照组比,miR-24高表达组eNOS m RNA降低46.2%(0.49±0.02vs 0.91±0.01,P〈0.05),蛋白表达减少49.07%(0.55±0.05 vs 1.08±0.05,P〈0.05);同时Sp1 m RNA降低44.9%(0.49±0.01 vs 0.89±0.02,P〈0.05),其蛋白质表达量也相应减少54.90%(0.46±0.02 vs 1.02±0.04,P〈0.05)。在miR-24抑制组中,上述指标较空白质粒对照组降低,但比miR-24高表达组显著升高,特别是小管形成数量、及管腔长度与空白质粒对照组相近。结论:miR-24显著抑制HUVECs的增殖、迁移和管腔形成的能力,并且与miR-24对eNOS的表达调控有关;miR-24明显抑制eNOS表达,Sp1的参与可能是这一调节过程的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 核糖核酸 管腔 一氧化氮合酶 内皮型
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