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以腹痛为首发症状的布鲁菌病一例
1
作者 永贞 冯国和 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 2019年第2期116-117,共2页
布鲁菌病临床表现极其复杂多样,血清学检测会出现一定比例的假阴性和假阳性,外周血液细菌培养阳性率低于骨髓细菌培养,临床上常常容易被漏诊和误诊。本例患者有消瘦、腹痛、间歇性发热、肝脾肿大、门静脉增宽、肝损伤、心包积液、双肺... 布鲁菌病临床表现极其复杂多样,血清学检测会出现一定比例的假阴性和假阳性,外周血液细菌培养阳性率低于骨髓细菌培养,临床上常常容易被漏诊和误诊。本例患者有消瘦、腹痛、间歇性发热、肝脾肿大、门静脉增宽、肝损伤、心包积液、双肺膨胀不良伴炎性反应、胸腔积液、胸椎椎体骨质改变,几乎包含了所有布鲁菌病的常见和罕见的并发症,为该病诊治能力的进一步提高提供帮助。 展开更多
关键词 布鲁菌病 首发症状 腹痛 血液细菌培养 临床表现 血清学检测 间歇性发热 肝脾肿大
188例布鲁杆菌病患者的临床特征
2
作者 永贞 张琪 冯国和 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2018年第1期9-12,共4页
目的 探究布鲁杆菌病(布病)临床表现及多系统损害特点,为布病的预防以及诊治提供依据.方法 收集2012-2015年沈阳市第六人民医院及中国医科大学附属盛京医院收治的188例布病患者的临床资料进行描述性分析.结果 188例布病患者中,男女比例4... 目的 探究布鲁杆菌病(布病)临床表现及多系统损害特点,为布病的预防以及诊治提供依据.方法 收集2012-2015年沈阳市第六人民医院及中国医科大学附属盛京医院收治的188例布病患者的临床资料进行描述性分析.结果 188例布病患者中,男女比例4.88∶1;年龄7月龄~72岁,其中41~60岁患者占60.11%(113例);每年的4-7月份高发(132例,70.21%);174例(92.55%)患者有明确接触史.急性期及亚急性期主要表现为发热(91.49%,172例,其中不规则热164例)、关节痛(57.98%)、多汗(54.26%)、脾大(45.74%)、乏力(40.96%)及腰痛(30.32%),实验室检查表现为WBC减少、贫血、ALT升高,尤以红细胞沉降率(ESR)和C反应蛋白(CRP)升高最为突出.慢性期患者乏力及关节痛仍较为明显.部分患者在布病病程中出现椎间盘突出(14例)、心内膜炎(2例)、脑梗塞(1例)等罕见并发症.结论 各年龄人群对布病普遍易感,春季多发,多有明确的接触史,发热伴关节疼痛,且实验室检查发现ESR及CRP升高时应考虑布病可能. 展开更多
关键词 布鲁杆菌病 临床特征 并发症
DNA疫苗免疫增强效应研究进展
3
作者 赵芳芳 永贞 冯国和 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2018年第2期124-128,共5页
DNA疫苗技术近年来迅速发展,但当被实际应用于人体试验时免疫原性不足仍是其最大的弱点。国内外科研工作者尝试了多种策略来解决这一问题,包括重组质粒载体的构建及编码抗原的基因优化,电穿孔疫苗免疫、接种方案优化、与能增强转染... DNA疫苗技术近年来迅速发展,但当被实际应用于人体试验时免疫原性不足仍是其最大的弱点。国内外科研工作者尝试了多种策略来解决这一问题,包括重组质粒载体的构建及编码抗原的基因优化,电穿孔疫苗免疫、接种方案优化、与能增强转染基因表达和疫苗诱导免疫的分子佐剂共免疫等。熟悉DNA疫苗的作用机制能更好地利用宿主天然免疫应答以增强疫苗的免疫原性。该综述总结了DNA疫苗免疫效应增强技术的新进展,以及这些进展对DNA疫苗未来发展方向可能产生的影响。 展开更多
关键词 疫苗 DNA 免疫原性 质粒 分子佐剂
ATP处理对宰后浙东白鹅肌原纤维蛋白结构与蒸煮损失率的影响 预览 被引量:1
4
作者 永贞 周昌瑜 +4 位作者 詹光 王颖 潘道东 孙杨赢 曹锦轩 《核农学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1368-1376,共9页
为研究 ATP 处理对鹅肉骨骼肌组织肌原纤维蛋白二级结构和保水性的影响,以浙东白鹅为试验对象,探究 ATP 浸泡后鹅肉在成熟过程中,骨骼肌组织内能量代谢物质(ATP、ADP 和 AMP)的含量、肌肉组织的超微结构、肌原纤维蛋白二级结构以及鹅... 为研究 ATP 处理对鹅肉骨骼肌组织肌原纤维蛋白二级结构和保水性的影响,以浙东白鹅为试验对象,探究 ATP 浸泡后鹅肉在成熟过程中,骨骼肌组织内能量代谢物质(ATP、ADP 和 AMP)的含量、肌肉组织的超微结构、肌原纤维蛋白二级结构以及鹅肉的蒸煮损失率变化. 结果表明,与对照组(CK)相比,20 mmol·L^-1ATP 处理显著促进了鹅肉组织内 ATP、ADP 和 AMP 的含量,同时促进了肌肉组织中 Z线和I 带的断裂. 拉曼光谱分析肌原纤维蛋白二级结构含量显示,20 mmol·L^-1ATP 处理显著促进了肌原纤维蛋白 α - 螺旋逐渐向无规则卷曲和 β - 折叠转变(P 〈 0.001);保水性结果分析显示,与 CK 相比,20 mmol·L^-1ATP 处理在成熟48-168h有更低蒸煮损失率(P〈0.001). 蛋白质二级结构和蒸煮损失率相关性分析显示,α - 螺旋与蒸煮损失率呈显著正相关(r=0.92,P〈0.001);β - 折叠(r=-0.87,P〈0.001)、β -转角(r=-0. 72,P〈0.001)、无规则卷曲(r=-0.85,P〈0.001)与蒸煮损失率均呈显著负相关. 本研究为探究 ATP 处理对肌肉保水性的影响提供了理论支撑和新思路. 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 浸泡 超微结构 二级结构 蒸煮损失
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血清前白蛋白联合终末期肝病模型评分评估失代偿期肝硬化患者预后的临床价值 被引量:6
5
作者 永贞 岳阳阳 +2 位作者 丁德平 张琪 冯国和 《中华肝脏病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期533-535,共3页
失代偿期肝硬化病死率高,是全球公认的健康问题,严重影响患者生存质量,Child-Pugh分级和终末期肝病模型(MELD)分值同终末期肝病严重程度及其预后密切相关,MELD评分和Child—Pugh分级均能够较准确地预测失代偿期肝硬化患者的短期... 失代偿期肝硬化病死率高,是全球公认的健康问题,严重影响患者生存质量,Child-Pugh分级和终末期肝病模型(MELD)分值同终末期肝病严重程度及其预后密切相关,MELD评分和Child—Pugh分级均能够较准确地预测失代偿期肝硬化患者的短期临床预后,但各有其局限性,失代偿性肝硬化患者短期预后评分仍在不断探寻。 展开更多
关键词 肝硬化 CHILD-PUGH分级 MELD评分
IgG Fc基因增强乙型脑炎DNA疫苗细胞免疫效应的分析 被引量:1
6
作者 永贞 冯国和 《中国热带医学》 CAS 2015年第10期1161-1164,共4页
目的评价IgG Fc段编码基因不同构建方式对乙型脑炎(JE)DNA疫苗细胞免疫应答的影响。方法以套式RT-PCR法获取BALB/c鼠IgG Fc编码基因,构建含乙型脑炎病毒(JEV)pr ME蛋白与IgG Fc编码基因以及单纯IgG Fc编码基因重组质粒,分别命名pJME... 目的评价IgG Fc段编码基因不同构建方式对乙型脑炎(JE)DNA疫苗细胞免疫应答的影响。方法以套式RT-PCR法获取BALB/c鼠IgG Fc编码基因,构建含乙型脑炎病毒(JEV)pr ME蛋白与IgG Fc编码基因以及单纯IgG Fc编码基因重组质粒,分别命名pJME/IgG Fc和pIgG Fc,以不同免疫原肌注免疫BALB/c小鼠,经流式细胞仪检测不同免疫原免疫鼠后脾T淋巴细胞亚群及Th细胞内细胞因子(IFN-γ、IL-4)变化,乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)法测定细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes,CTL)活性。数据进行单因素方差分析。结果 pJME/IgG Fc组CD4+T淋巴细胞比例为(66.64±5.84)%,明显高于pJME+pIgG Fc、pJME、JE灭活疫苗和pc DNA3.1(+)组(P〈0.05),pJME+pIgG Fc组CD4+T淋巴细胞比例(60.55±2.09)%,高于pJME组(52.86±1.92)%,也高于JE灭活疫苗组(55.77±1.62)%(P〈0.05),pc DNA3.1(+)组CD4+T淋巴细胞比例为(37.82±4.93)%,明显低于其他组(P〈0.05);pJME/IgG Fc与pJME+pIgG Fc免疫组CD8+T细胞比例较空载体pc DNA3.1(+)及灭活疫苗组升高(P〈0.05)。pJME/IgG Fc免疫组CTL活性为(46.92±1.97)%,明显高于其它组(P〈0.05)。pJME/IgG Fc、pJME+pIgG Fc免疫组IFN-γ+CD4+T淋巴细胞比例分别为(37.90±4.79)%、(21.53±4.61)%,明显高于其它组(P〈0.05)。结论相对于pJME+pIgG Fc联合免疫组,pJME/IgG Fc融合质粒免疫组能够诱导更强的细胞免疫反应。 展开更多
关键词 日本脑炎病毒 DNA疫苗 IGG FC段 树突状细胞
壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米DNA疫苗肌注BALB/c鼠诱导细胞免疫效应的研究 被引量:2
7
作者 永贞 周言 +1 位作者 马力 冯国和 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期423-428,共6页
探讨载有日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)prME蛋白与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)编码基因重组子(命名为pJME/GM-CSF)的壳聚糖纳米颗粒的免疫佐剂效应... 探讨载有日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)prME蛋白与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)编码基因重组子(命名为pJME/GM-CSF)的壳聚糖纳米颗粒的免疫佐剂效应及其机制。本研究采用复凝聚法制备壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米颗粒;免疫组化法检测肌肉注射部位浸润细胞的类型,流式细胞仪检测不同免疫原免疫鼠后脾脏DC表型和功能的变化;乳酸脱氢酶释放法检测CTL活性。结果显示制备的壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米颗粒鉴定正确;pJME/GM-CSF募集包括非成熟树突状细胞、巨噬细胞、粒细胞到注射部位,增加脾脏树突状细胞表面MHCII的表达,抗原摄取和递呈功能,增强疫苗诱导的细胞免疫反应,壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米颗粒可进一步扩大pJME/GM-CSF的上述作用。这些结果表明壳聚糖可作为DNA疫苗肌注免疫时的传送载体,能够增强pJME/GM-CSF疫苗的细胞免疫应答。 展开更多
关键词 脑炎病毒 日本 壳聚糖 GM-CSF 树突状细胞 纳米颗粒 T淋巴细胞 细胞毒性T淋巴细胞
血清前白蛋白结合Child-Pugh分级及MELD评分对肝硬化肝脏功能的评价 预览 被引量:13
8
作者 韦丽娅 永贞 冯国和 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第13期1871-1875,共5页
目的:明确血清前白蛋白(prealbumin,PA)评价肝硬化肝脏功能临床意义.方法:回顾性分析我科肝硬化患者351例并随访1年.计算Child-Pugh分级与MELD评分.将血清PA与Child-Pugh分级、MELD评分结合,并分别与单弛Child-Pugh分级、MELD... 目的:明确血清前白蛋白(prealbumin,PA)评价肝硬化肝脏功能临床意义.方法:回顾性分析我科肝硬化患者351例并随访1年.计算Child-Pugh分级与MELD评分.将血清PA与Child-Pugh分级、MELD评分结合,并分别与单弛Child-Pugh分级、MELD评分对肝脏功能评价作用相比较.采用LogisticS/归统计分析进行肝硬化患者1年生存率评价.结果:351肝硬化病例中Child.PughA组1l1例,B组62例.C组178例.健康对照组与Child-PughA、B、C各组血清PA值分别为261.5mg/L±68.7mg/L.152.6mg/L±62.7mg/L.70.7mg/L±36.9mg/L,36.2mg/L±13.1mg/L,健康对照组与Child-Pugh各组血清PA值比较具有显著性差异(P〈0.05),血清PA值在Child.PughA、B、C各组间比较也有显著性差异(μ=0.05).血清PA结合Child-Pugh分级与单纯Child.Pugh分级相比较,Child-PughA组中31N手术病例,24例术前血清PA在194.0mg/L±56.1mg/L水平者术后未出现腹水,7例术前血清PA为123.1mg/L±35.4mg/L水平者术后出现腹水(P〈0.05).将Child-PughB、C组240例肝硬化患者计算MELD评分,血清PA结合MELD评分与单纯MELD评分相比较,在判断ChildB级、ChildC级肝硬化患者一年生存率方面有显著性差异(χ22-χ12=8.229〉3.84,P〈0.05).结论:血清PA结合Child.Pugh分级的使用有利于预测肝病患者术后腹水发生的可能性。但不能提高对肝硬化患者1年生存率的判断:血清PA结合MELD评分能提高对ChildB级、ChildC级肝硬化患者1年生存率的判断. 展开更多
关键词 血清PA CHILD-PUGH分级 MELD评分 1年生存率
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丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定研究 预览 被引量:4
9
作者 张丹 永贞 冯国和 《临床和实验医学杂志》 2014年第16期1329-1331,共3页
目的构建含丙型肝炎病毒( hepatitis C virus,HCV)核心( core,C)蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体,为C蛋白与宿主蛋白相互作用机制研究奠定基础。方法聚合酶链反应( PCR)法扩增HCV 1b基因型C蛋白基因,经EcoR I和Pst I双酶切后插... 目的构建含丙型肝炎病毒( hepatitis C virus,HCV)核心( core,C)蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体,为C蛋白与宿主蛋白相互作用机制研究奠定基础。方法聚合酶链反应( PCR)法扩增HCV 1b基因型C蛋白基因,经EcoR I和Pst I双酶切后插入到诱饵载体pGBKT7中,构建含HCV C蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Core,经酶切分析及核酸测序分析加以鉴定。醋酸锂法将pGBKT7-Core转化入酵母菌株Y2HGold,蛋白印迹法检测C蛋白的表达,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母细胞的毒性作用及对报告基因的激活作用。结果重组质粒pGBKT7-Core中的C蛋白基因为576 bp,经核酸测序分析与NCBI中注册的HCV 1b基因型C蛋白基因序列一致;转化酵母菌后检测到C蛋白的表达;HCV C蛋白对酵母菌Y2HGold无毒性,且对报告基因无激活作用。结论含HCV C蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体构建成功,表达稳定。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 病毒核心蛋白质类 酵母双杂交技术
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布鲁杆菌病发病机制及临床诊治研究进展 被引量:2
10
作者 陈恩静 永贞 冯国和 《国际流行病学传染病学杂志》 2014年第4期273-276,共4页
布鲁杆菌病是一种人畜共患性传染病,人感染布鲁杆菌由于缺乏特异性的临床症状和体征,极易被误诊为其他疾病。布鲁杆菌感染是目前的研究热点,研究者试图从分子水平阐述其致病机制。另外,布鲁杆菌病临床表现发生一些新变化,呈单一或... 布鲁杆菌病是一种人畜共患性传染病,人感染布鲁杆菌由于缺乏特异性的临床症状和体征,极易被误诊为其他疾病。布鲁杆菌感染是目前的研究热点,研究者试图从分子水平阐述其致病机制。另外,布鲁杆菌病临床表现发生一些新变化,呈单一或多个器官或系统受累,临床诊断治疗和预防也有新进展。基于此,文章将对布鲁杆菌致病机制以及布鲁杆菌病的临床变化新特点和诊治等方面作一综述。 展开更多
关键词 布鲁杆菌病 发病机制 临床特点
乙型脑炎病毒非结构4A蛋白编码基因重组子的构建及表达 被引量:1
11
作者 永贞 常彩芳 冯国和 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第7期599-602,612共5页
目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)非结构4A(NS4A)蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEV SA14-14-2株Total RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增JEV NS4A蛋白编码基因,克隆至pMD19-T Simple载体并测序。为便于分析JEV NS4A蛋白编码基因重... 目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)非结构4A(NS4A)蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEV SA14-14-2株Total RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增JEV NS4A蛋白编码基因,克隆至pMD19-T Simple载体并测序。为便于分析JEV NS4A蛋白编码基因重组子在哺乳动物细胞中的表达,在JEV NS4A蛋白编码基因5’端附加FLAG序列,亚克隆至pcDNA3.1(+)载体中,构建重组子pJNS4A并作酶切及DNA测序分析;采用脂质体法将pJNS4A转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞,采用免疫荧光法检测转染的CHO细胞中JEV NS4A蛋白分布与表达。结果重组质粒pJNS4A经BamHⅠ/EcoRⅠ酶切释出的插入子在830bp左右,与JEV NS4A蛋白编码基因和FLAG基因序列之和(834bp)相一致。JEV NS4A蛋白编码基因重组质粒转染的CHO细胞可见绿色荧光标记,主要分布在胞膜。结论 pJNS4A构建成功,转染的CHO细胞可稳定表达JEV NS4A蛋白。 展开更多
关键词 脑炎病毒 日本 病毒蛋白质类 NS4A蛋白 CHO细胞
输入性恶性疟疾1例报告并文献复习
12
作者 王岩 张琳 +2 位作者 韩冰 永贞 冯国和 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期904-906,共3页
疟疾(malaria)是一个严重的公共卫生问题,在我国以间日疟为主,随着与疟疾特别是恶性疟疾流行国家和地区的交流活动增加,罹患输入性恶性疟疾的几率也增大,其临床表现复杂多样,极易造成误诊或漏诊而延误治疗。近几年来辽宁省也有... 疟疾(malaria)是一个严重的公共卫生问题,在我国以间日疟为主,随着与疟疾特别是恶性疟疾流行国家和地区的交流活动增加,罹患输入性恶性疟疾的几率也增大,其临床表现复杂多样,极易造成误诊或漏诊而延误治疗。近几年来辽宁省也有输人性疟疾的散发发病,但凶险型疟疾的诊治尚未有报道,本文报道我科收治的1例我省重症输人性恶性疟疾患者,并复习相关文献及分析诊治体会。 展开更多
关键词 疟疾 恶性 溶血尿毒综合征 床旁血液滤过
ICAM-1编码基因对乙型脑炎DNA疫苗树突状细胞功能的影响 预览
13
作者 永贞 马力 冯国和 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期148-153,167共7页
目的:研究细胞间粘附分子1(ICAM-1)编码基因对日本脑炎(JE)DNA疫苗脾脏树突状细胞功能的影响。方法:套式RT-PCR法获取BALB/c鼠ICAM-1编码基因,构建重组子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂质体法转染上述质粒于CHO细胞,Western blot法检测... 目的:研究细胞间粘附分子1(ICAM-1)编码基因对日本脑炎(JE)DNA疫苗脾脏树突状细胞功能的影响。方法:套式RT-PCR法获取BALB/c鼠ICAM-1编码基因,构建重组子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂质体法转染上述质粒于CHO细胞,Western blot法检测转染的CHO细胞中目的蛋白表达。实验分5组,包括:pJME/ICAM-1、pJME+PICAM-1、pJME、JE灭活疫苗和pcDNA3.1(+)免疫组,以不同免疫原肌注免疫BALB/c小鼠,流式细胞仪检测经不同免疫原免疫鼠后脾脏DC表型、抗原吞噬功能以及混合淋巴细胞反应。结果:融合表达重组质粒pJME/ICAM-1和单质粒pICAM-1经鉴定构建正确。pJME/ICAM-1组CD11c+CD86+DC和CD11c+ICAM-1+DC比例分别为(6.92±1.40)%、(7.18±0.57)%,高于其它免疫组(均P〈0.05);pJME/ICAM-1和pJME+pICAM-1组DC表面CD80和MHCⅡ表达水平比较差异无统计学意义(P〉0.05);pJME/ICAM-1与pJME+pICAM-1组内吞能力明显增强,平均荧光强度分别为437.11±47.60、416.67±29.12,显著高于其它组(P〈0.05)。比较不同免疫原对细胞分裂的作用,以pJME/ICAM-1组最强,(73.69±7.32)%CD4+T细胞发生分裂,(45.40±2.57)%CD8+T细胞发生分裂,显著高于对照组(P〈0.05)。结论:ICAM-1编码基因能够促进JE DNA疫苗脾脏树突状细胞的成熟,能够提供独立或放大B7分子的协同刺激信号。 展开更多
关键词 脑炎 日本 DNA疫苗 细胞间粘附分子1 树突状细胞 共刺激分子
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乙型脑炎病毒C蛋白编码基因重组质粒构建与表达 预览 被引量:1
14
作者 永贞 王志峰 冯国和 《山西医药杂志:上半月》 CAS 2013年第1期7-9,共3页
目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEvSAl4—14—2株总RNA为模板,应用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增JEVC蛋白编码基因,克隆至pMDl9一TSimple载体测序。为便于分析JEVC蛋白编码基因重组... 目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEvSAl4—14—2株总RNA为模板,应用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增JEVC蛋白编码基因,克隆至pMDl9一TSimple载体测序。为便于分析JEVC蛋白编码基因重组子在哺乳动物细胞中的表达,在JEVC蛋白编码基因5’端附加FLAG序列,并亚克隆至peDNA3.1(4-)载体中,构建重组子pJe并经酶切及DNA测序分析。脂质体法将pJc转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞。免疫荧光检测转染的CHO细胞中JEVC蛋白分布与表达。结果pJC经BamHI/EeoRI酶切释出的插入子片段(414bp)分别与预期结果相符合。所编码的融合蛋白主要分布于胞质,少量分布于胞膜。结论pJC成功构建,转染的CHO细胞可表达JEVC蛋白。 展开更多
关键词 脑炎病毒 日本 病毒蛋白质类 蛋白质C CHO细胞
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血清前白蛋白对肝功能评估的研究进展 预览 被引量:15
15
作者 韦丽娅 永贞 冯国和 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2013年第15期1387-1393,共7页
血清前白蛋白(prealbumin,PA)主要由肝脏合成,可反映肝脏合成及储备能力及营养状况。具有检测方便、准确、干扰因素少等优点.长期以来由于一直把血清PA以独立因素作为肝脏功能状态的评价指标,缺乏以一种系统、关联、前瞻的临床思... 血清前白蛋白(prealbumin,PA)主要由肝脏合成,可反映肝脏合成及储备能力及营养状况。具有检测方便、准确、干扰因素少等优点.长期以来由于一直把血清PA以独立因素作为肝脏功能状态的评价指标,缺乏以一种系统、关联、前瞻的临床思维方法去分析血清PA,虽然临床应用由来已久,但是广大临床医生在肝病的诊治过程中仍不足以重视血清PA的变化特点,作者结合近年来对血清PA生化特性、结构、功能新变化以及与血清白蛋白、胆固醇、胆碱酯酶、总胆汁酸、凝血酶原时间、肝功能评分及终末期肝病模型评分系统等指标相关性研究作一综述. 展开更多
关键词 血清前白蛋白 肝功能评估 肝功能Child—Turcotte—Pugh 终末期肝病模型
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肝衰竭的营养代谢异常与营养支持治疗的研究进展 预览 被引量:13
16
作者 王岩 永贞 冯国和 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第23期2167-2172,共6页
营养和代谢损害是严重肝病的重要表现,并已成为影响患者预后的明确危险因素.本文对肝衰竭患者的营养代谢异常与营养支持治疗作一综述,总结了肝脏疾病营养代谢状况评价的指标,以及肝衰竭患者营养物质及能量代谢特点,指出利用CCM-D营养代... 营养和代谢损害是严重肝病的重要表现,并已成为影响患者预后的明确危险因素.本文对肝衰竭患者的营养代谢异常与营养支持治疗作一综述,总结了肝脏疾病营养代谢状况评价的指标,以及肝衰竭患者营养物质及能量代谢特点,指出利用CCM-D营养代谢测试系统可以测定肝衰竭患者的静息能量消耗,慢性肝衰竭患者能量供给以脂肪氧化为主、呼吸商明显低于预测值,并进一步讨论了不同阶段肝衰竭营养支持干预的方式及摄入量等.目的在于提高临床医师对肝衰竭患者营养代谢异常的认知程度,制定个体化的营养支持治疗,从而为提高肝衰竭的抢救成功率、改善患者的中远期预后提供条件. 展开更多
关键词 营养治疗 能量代谢 静息能量消耗 呼吸商 肝衰竭
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GM-CSF基因增强HCV核心蛋白基因DNA疫苗的免疫应答 预览
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作者 永贞 王岩 冯国和 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第35期3424-3430,共7页
目的:研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)编码基因对丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核心(core,C)蛋白编码基因重组质粒诱导的免疫应答有无增强作用.方法:人工合... 目的:研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)编码基因对丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核心(core,C)蛋白编码基因重组质粒诱导的免疫应答有无增强作用.方法:人工合成HCV核心蛋白基因至克隆载体pUC 119上,酶切后与真核表达质粒pCMH6K连接,测序正确后将重组质粒pCMH6K/HCV-C转染中华仓鼠卵巢(China hamster ovary,CHO)细胞.免疫荧光检测转染的CHO细胞中HCVC蛋白分布与表达.将已构建成功的GM-CSF编码基因重组子(pGM-CSF)联合pCMH6K/HCV-C肌注免疫Balb/c鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清抗HCV C特异性抗体水平,经流式细胞仪检测不同免疫原免疫鼠后脾T淋巴细胞亚群及Th细胞内细胞因子[干扰素-(interferon-,IFN-)、白介素-4(interleukin-4,IL-4)]变化,LDH法测定CTL活性.结果:pCMH6K/HCV-C经鉴定构建正确.所编码的蛋白主要分布于胞膜,少量分布于胞浆.pGM-CSF+pCMH6K/HCV-C联合免疫组和pCMH6K/HCV-C单独免疫组均产生抗HCVC特异性抗体,两组间比较差异无统计学意义;联合免疫组CD4+T淋巴细胞比例为44.90%±5.99%,明显高于其他组(P〈0.05).不同免疫组CD8+T细胞比例变化不大,与空载体pcDNA3.1(+)组比较,差异无统计学意义(P〉0.05).联合免疫组CTL活性为56.48%±4.68%,明显高于其他组(P〈0.05).联合免疫组IFN-/IL-4比值为18.20±2.36,明显高于其他组(P〈0.05).结论:GM-CSF编码基因可增强HCV C基因DNA疫苗的细胞免疫应答,并能够诱导Th1型免疫应答. 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 核心蛋白 DNA疫苗 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
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乙脑病毒prME蛋白与鼠GM—CSF编码基因的融合构建与表达 预览
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作者 永贞 周言 +1 位作者 马力 冯国和 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期706-709,共4页
目的构建乙脑病毒prME蛋白与鼠GM-CSF融合基因重组子并建立稳定细胞表达株。方法套式-RT—PCR法从BALB/c鼠脾组织获取GM+CSF编码基因,用限制性内切酶从含乙脑病毒wME蛋白基因重组子获取prME蛋白基因,定向克隆至同-真核表达载体pcDNA... 目的构建乙脑病毒prME蛋白与鼠GM-CSF融合基因重组子并建立稳定细胞表达株。方法套式-RT—PCR法从BALB/c鼠脾组织获取GM+CSF编码基因,用限制性内切酶从含乙脑病毒wME蛋白基因重组子获取prME蛋白基因,定向克隆至同-真核表达载体pcDNA3.1(+)不同酶切位点,构建重纽子pJME/GM—CSF并经酶切及DNA测序分析。脂质体法将pJME/GM—CSF转染中华仓鼠卵巢(CHO)N胞。Western blot法检测转染的CHO细胞中融合蛋白表达。结果pJME/GM—CSF经BamHI/EcoRI和BamHI/NotI酶切释出的插入子片段(2001bp、2472bp)分别与预期结果相符合。所编码的融合蛋白相对分子量(Mr)为85×103。结论pJME/GM-CSF成功构建,转染的CHO细胞可稳定表达融合蛋白。 展开更多
关键词 脑炎病毒 日本 病毒蛋白质类 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 CHO细胞
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粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子编码基因对乙型脑炎DNA疫苗细胞免疫增强效应的影响
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作者 永贞 李喜梅 +3 位作者 周言 张丹 邓宝成 冯国和 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期257-261,共5页
目的研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)编码基因对乙型脑炎(JE)DNA疫苗细胞免疫应答的影响。方法套式RT—PCR法获取BALB/c小鼠GM—CSF编码基因,构建含乙型脑炎病毒(JEV)前膜(prM)-包膜(E)蛋白与GM-CSF编码基因以及... 目的研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)编码基因对乙型脑炎(JE)DNA疫苗细胞免疫应答的影响。方法套式RT—PCR法获取BALB/c小鼠GM—CSF编码基因,构建含乙型脑炎病毒(JEV)前膜(prM)-包膜(E)蛋白与GM-CSF编码基因以及单纯GM—CSF编码基因的重组质粒,分别命名为pJME/GM—CSF和pGM—CSF。脂质体法转染上述质粒人中华仓鼠卵巢细胞(CHO),免疫荧光法检测编码蛋白的表达与分布。流式细胞仪检测经不同组合的免疫原免疫后小鼠脾T淋巴细胞亚群及Th细胞内细胞因子(IFN-γ、IL-4)变化,LDH法测定CTL活性。数据行单因素方差分析及最小显著差数法比较。结果重组质粒pJME/GM—CSF与pGM—CSF经鉴定构建正确,所编码的蛋白主要分布于胞质,少量分布于胞膜。pJME/GM—CSF组CD4^+T淋巴细胞比例为(33.90±0.79)%,明显高于其他组(t值分别为9.818、6.804、6.594、10.061、9.380和17.675,均P%0.05)。pJME+pGM—CSF同时注射组及pGM—CSF注射3d后接种pJME组CD4^+T淋巴细胞比例分别为(29.83±0.61)%、(29.70±0.51)%,高于pJME注射3d后接种pGM—CSF组的(27.69±0.50)%(t=3.466、t=3.255,P〈0.05)。pJME/GM—CSF组与pJME+pGM—CSF同时注射组CD8^+T淋巴细胞比例较空载体(pcDNA3.1+)组及JE灭活疫苗组升高(t值分别为3.811、2.627、10.537和3.811,均P〈0.05)。pJME/GM—CSF组CTL活性为(51.48±0.10)%,明显高于其他组(t值分别为22.868、13.823、5.377、32.287、34.632和53.795,均P〈0.05)。pJME/GM—CSF组、pJME+pGM—CSF同时注射组及pGM—CSF注射3d后接种pJME组IFN-γ/IL-4比值分别为19.13±1.36、12.32±0.82、7.05±0.43,明显高于其他组(P〈0.05)。结论GM—CSF编码基因可增强JEDNA疫苗的细胞免疫应答效应。 展开更多
关键词 脑炎病毒 日本 疫苗 DNA 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 免疫 细胞
乙脑病毒prME蛋白与BALB/c鼠IgG Fc段编码基因联合构建DNA免疫研究 被引量:2
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作者 李喜梅 周言 +2 位作者 永贞 马力 冯国和 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期634-638,共5页
目的研究IgG Fc编码基因对流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)DNA疫苗免疫增强效应的影响。方法巢式RT-PCR法从BALB/c鼠脾组织获取IgG Fc段编码基因,用限制性内切酶从含流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,... 目的研究IgG Fc编码基因对流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)DNA疫苗免疫增强效应的影响。方法巢式RT-PCR法从BALB/c鼠脾组织获取IgG Fc段编码基因,用限制性内切酶从含流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)prME蛋白基因重组子获取prME蛋白基因,分别插入同一真核表达载体pcDNA3.1(+)不同酶切位点,构建重组子pJME/IgG Fc并经酶切及DNA测序分析。脂质体法将pJME/IgG Fc转染CHO细胞。免疫荧光、Western blot法检测转染的CHO细胞中融合蛋白分布与表达。将pJME/IgG Fc肌注免疫BALB/c鼠,检测小鼠脾特异性细胞毒T细胞(CTL)杀伤活性和中和抗体滴度。结果pJME/IgGFc经BamHI/EcoRI和BamHI/NotI酶切释出的插入子大小(2001 bp、2730 bp)分别与预期结果相符合。所编码的融合蛋白相对分子质量(Mr)为101×10^3,主要分布于胞浆,少量分布于胞膜,pJME/IgG Fc转染CHO细胞经32次传代仍可表达融合蛋白。pJME/IgG Fc免疫组中和抗体滴度与CTL活性较pJME及灭活疫苗组均升高(P〈0.05)。结论pJME/IgG Fc成功构建,转染的CHO细胞可稳定表达融合蛋白,IgG Fc段编码基因能够增强JEV DNA疫苗的细胞和体液免疫应答。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 DNA疫苗 免疫球蛋白G FC段 CHO细胞 中和试验
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