弓形虫微线体蛋白4的表达及其应用

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作者 王宁 薛俊欣 +1 位作者 李健 赵俊龙 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1782-1787,共6页

根据已发表的弓形虫微线体蛋白4(MIC4)序列进行生物信息学分析并设计引物扩增RH株中的目的基因,将扩增产物链接到pET-28a(+)载体并转化大肠杆菌感受态细胞进行诱导表达,用纯化后去除内毒素的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过监测抗体水平、W... 根据已发表的弓形虫微线体蛋白4(MIC4)序列进行生物信息学分析并设计引物扩增RH株中的目的基因,将扩增产物链接到pET-28a(+)载体并转化大肠杆菌感受态细胞进行诱导表达,用纯化后去除内毒素的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过监测抗体水平、Western blot和激光共聚焦方法鉴定其免疫原性并初步分析其生物学功能。结果显示,mic4基因ORF编码580个氨基酸残基,去除信号肽(25个氨基酸残基)后的PCR产物长度为1 686 bp,重组蛋白的理论相对分子质量为63 830,与其他物种的同源性较低,在pH7.5和IPTG浓度为0.5 mmol/L时18℃培养可溶性表达,血液中的抗体水平随着免疫次数的增加而升高,3免之后抗体滴度达到1∶8 000以上,抗体可以识别排泄分泌抗原(ESA)中的MIC4,MIC4主要位于速殖子前部的细胞质和膜表面。结果表明,重组MIC4是ESA的成分并且分泌之前分布于虫体前部,具有良好的特异性和免疫原性。 展开更多

关键词 弓形虫 微线体蛋白4 排泄分泌抗原 原核表达 免疫原性

弓形虫蛋白质二硫键异构酶的免疫保护作用

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作者 王宁 薛俊欣 +2 位作者 丁佳乐 李健 赵俊龙 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1157-1162,共6页

为了探讨皮下免疫弓形虫蛋白质二硫键异构酶(TgPDI)对弓形虫急性感染的保护作用,本试验通过原核表达获取了重组TgPDI,将纯化并去除内毒素的重组蛋白皮下免疫昆明小鼠,利用ELISA方法监控抗体水平变化,通过实时荧光定量PCR检测感染小鼠的... 为了探讨皮下免疫弓形虫蛋白质二硫键异构酶(TgPDI)对弓形虫急性感染的保护作用,本试验通过原核表达获取了重组TgPDI,将纯化并去除内毒素的重组蛋白皮下免疫昆明小鼠,利用ELISA方法监控抗体水平变化,通过实时荧光定量PCR检测感染小鼠的组织载虫量并记录小鼠存活时间,评价TgPDI的免疫保护作用。结果显示,免疫重组TgPDI可以有效刺激小鼠产生抗体(1∶16 000);免疫该蛋白可以极显著抑制弓形虫感染小鼠血液、肝脏、脾脏和脑组织中的弓形虫增殖(P<0.01),并能延长小鼠感染后的存活时间。结果表明,皮下免疫重组TgPDI可以刺激小鼠产生保护性免疫应答,TgPDI是预防弓形虫感染的免疫候选分子。 展开更多

关键词 弓形虫 蛋白质二硫键异构酶 蛋白表达 免疫保护

弓形虫GRA1基因的原核表达与鉴定 预览

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作者 韩阳瑞 蒋蔚 +5 位作者 陈芸 薛俊欣 熊挺 龙梦瑶 凌娇 王权 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第1期70-77,共8页

为深入研究弓形虫致密颗粒蛋白GRA1及其单克隆抗体对弓形虫感染诊断的意义,本研究采用逆转录PCR方法扩增弓形虫RH株截短型GRA1基因,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SD... 为深入研究弓形虫致密颗粒蛋白GRA1及其单克隆抗体对弓形虫感染诊断的意义,本研究采用逆转录PCR方法扩增弓形虫RH株截短型GRA1基因,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS-PAGE分析表达情况,并分别通过Western blot和间接免疫荧光检测(indirect immunofluorescence assay,IFA)鉴定蛋白和单抗的免疫原性。结果表明重组蛋白GRA1高效可溶性表达,分子量约为24 kDa,且在28℃条件下诱导表达效果更好。Western blot显示,重组蛋白GRA1可以被感染弓形虫的犬阳性血清识别,具有良好的反应原性。IFA显示单克隆抗体能够特异性地识别弓形虫的天然蛋白,GRA1主要分布于虫体的细胞质中。本研究结果可为利用GRA1蛋白和其单抗诊断弓形虫感染提供借鉴和依据。 展开更多

关键词 弓形虫 GRA1 原核表达 单克隆抗体 诊断

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南非进口羊毛携带蜱的监测与伊文斯扇头蜱鉴定

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作者 李树清 王强 +8 位作者 林颖峥 邓耀华 夏谦 陈志飞 王艳 张强 薛俊欣 王巧全 何宇平 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2019年第4期414-417,共4页

目的为防止有害寄生虫通过国际贸易传入我国,对进口羊毛进行蜱监测与鉴定。方法采集进口羊毛进行蜱检疫。将检出的蜱进行形态学鉴定,并提取其基因组DNA,扩增线粒体16S rRNA基因和细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因,并进行测序鉴定。结果 ... 目的为防止有害寄生虫通过国际贸易传入我国,对进口羊毛进行蜱监测与鉴定。方法采集进口羊毛进行蜱检疫。将检出的蜱进行形态学鉴定,并提取其基因组DNA,扩增线粒体16S rRNA基因和细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因,并进行测序鉴定。结果 2016年1月至2018年8月上海口岸从南非进口的31批次羊毛中,有8批次羊毛检出蜱,阳性检出率为25.8%。经形态学和分子生物学鉴定,隶属3属8种,其中伊文斯扇头蜱15只,占截获蜱总数的53.6%,为本批次南非羊毛携带蜱的优势种类,该蜱在我国暂无分布记录。结论从南非进口羊毛中检出的蜱主要为一种能传播巴贝斯虫病等多种动物疫病的伊文斯扇头蜱。 展开更多

关键词 南非 羊毛 伊文斯扇头蜱 鉴定

4种有机溶剂对Vero细胞活力和弓形虫增殖的影响 预览

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作者 薛俊欣 熊炜 +6 位作者 张强 黄忠荣 李树清 李春阳 赵新宇 李健 王权 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第8期2265-2272,共8页

本研究旨在筛选低细胞毒性和低弓形虫毒性的有机溶剂。Vero细胞在96孔板培养12 h后,将培养基更换为200μL分别含0、0.1%、0.3%、0.5%、1%、3%、5%、10%(V/V)的二甲基亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺、乙醇和甲醇的完全培养基,同时设立空白对照... 本研究旨在筛选低细胞毒性和低弓形虫毒性的有机溶剂。Vero细胞在96孔板培养12 h后,将培养基更换为200μL分别含0、0.1%、0.3%、0.5%、1%、3%、5%、10%(V/V)的二甲基亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺、乙醇和甲醇的完全培养基,同时设立空白对照孔,继续培养12和24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法评价4种有机溶剂对Vero细胞增殖活力的影响,筛选出对宿主细胞毒性最小的有机溶剂并确定其安全浓度;弓形虫接种Vero细胞12 h后,弃上清后分别加入含有0、0.1%、0.3%、0.5%、1%、3%(V/V)的DMSO、二甲基甲酰胺、乙醇和甲醇的完全培养基120μL,接种36 h后判定各组溶剂对弓形虫增殖的影响,计数感染细胞数并计算相对感染率,筛选出对弓形虫增殖影响最小的有机溶剂及其安全浓度。结果显示,对于Vero细胞,DMSO、二甲基甲酰胺、甲醇和乙醇分别在其体积分数低于1%、0.1%、3%和1%时无明显毒性;对于弓形虫,DMSO、二甲基甲酰胺、甲醇和乙醇对弓形虫增殖的安全添加浓度分别为1%、0.1%、1%和0.1%。本研究表明,DMSO、甲醇对Vero细胞、弓形虫的毒性较小,可作为水溶性较差药物进行抗弓形虫筛选时优先选择的有机溶剂。 展开更多

关键词 有机溶剂 VERO细胞 弓形虫 活力 增殖

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双抗体夹心ABC-ELISA检测弓形虫循环抗原方法的建立 被引量：3

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作者 宫枫举 蒋蔚 +4 位作者 陈永军 薛俊欣 王民燕 孙卫东 王权 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第1期65-70,共6页

为检测弓形虫循环抗原,以实现弓形虫急性感染的早期诊断,本研究建立了基于ABC（avidin biotin-peroxidase complex）放大系统的双抗体夹心ELISA方法。通过制备弓形虫排泄分泌抗原（ESA）并免疫动物,经3种抗原的筛选以获得抗循环抗原（CA... 为检测弓形虫循环抗原,以实现弓形虫急性感染的早期诊断,本研究建立了基于ABC（avidin biotin-peroxidase complex）放大系统的双抗体夹心ELISA方法。通过制备弓形虫排泄分泌抗原（ESA）并免疫动物,经3种抗原的筛选以获得抗循环抗原（CAg）的单抗,以方阵滴定法确定最佳多抗包被浓度和单抗工作浓度,利用夹心法和ABC放大系统建立检测弓形虫循环抗原的夹心ABC-ELISA方法,用该方法对人工感染犬血清和其他阳性血清样本进行检测以确定该方法的检出时间和准确性,并应用于临床样品的检测。结果：获得了3株针对不同抗原表位的单克隆抗体,并对CAg有较高特异性。双抗体夹心ABC-ELISA反应条件：兔多抗包被浓度为3.7μg/mL,生物素标记3A5、3E5和10F5-3单抗在混合工作液中的浓度分别为0.1、0.13和0.12μg/mL。该ELISA方法对ESA最低检测限为11.9 ng/mL,并与隐孢子虫早期感染牛血清、血吸虫尾蚴早期感染牛血清、艾美耳球虫早期感染鸡血清、犬瘟热急性感染早期血清、犬细小病毒急性感染血清无交叉反应。用该ELISA方法检测人工感染的犬,于感染后2 d血清即显示阳性,该方法能明显区分标准阳性血清和阴性血清。用该方法检测68份猪临床血样（其中包括2份标准阳性血清）,检测结果与Nest-PCR结果一致。表明该双抗体夹心ABC-ELISA方法特异性强、敏感性高,可用于弓形虫急性感染的早期或活动期的诊断。 展开更多

关键词 弓形虫 急性感染 循环抗原 双抗体夹心ABC-ELISA

磺胺氯吡嗪钠复方对小鼠体内抗弓形虫疗效的观察 预览 被引量：1

7

作者 程军霞 蒋蔚 +3 位作者 陈永军 薛俊欣 韩阳瑞 王权 《中国动物传染病学报》 北大核心 2017年第3期54-60,共7页

为进一步挖掘磺胺氯吡嗪钠的抗弓形虫疗效,本研究以磺胺嘧啶钠作为对照,观察磺胺氯吡嗪钠（sulfachloropyrazine sodium,SPZ）、黄芩苷、乳酸TMP、乙胺嘧啶和甘草单独使用时的体内外抗弓形虫效果,然后以SPZ-甘草-黄芩苷3种药物的复方制... 为进一步挖掘磺胺氯吡嗪钠的抗弓形虫疗效,本研究以磺胺嘧啶钠作为对照,观察磺胺氯吡嗪钠（sulfachloropyrazine sodium,SPZ）、黄芩苷、乳酸TMP、乙胺嘧啶和甘草单独使用时的体内外抗弓形虫效果,然后以SPZ-甘草-黄芩苷3种药物的复方制剂作为复方对照组,用叶酸合成双抑制的SPZ-乳酸TMP/乙胺嘧啶复方制剂对人工感染弓形虫RH株的KM小鼠进行体内治疗试验。体外试验表明,这6种药物均可较好地抑制弓形虫增殖;小鼠体内试验表明,单独使用SPZ（250 mg/kg、200 mg/kg）可保护部分小鼠存活（存活率分别为50%和25%）,其他5种药物可不同程度地延长小鼠存活时间,但均不能避免小鼠死亡。在复方给药组（SPZ浓度为200 mg/kg）,使用SPZ-乳酸TMP/乙胺嘧啶无明显的协同作用,使用SPZ-甘草-黄芩苷时疗效得到明显提高（小鼠存活率达到40%）。结果启示SPZ特别的治疗效果除了与其具有的通过干扰虫体叶酸代谢来抑制虫体繁殖的作用有关外,可能还与其他机制（如药物作用影响弓形虫调节宿主的免疫功能）有关。 展开更多

关键词 弓形虫病 磺胺氯吡嗪钠 体内试验 体外试验 协同作用

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呋喃它酮代谢物直接竞争化学发光检测方法的建立 被引量：2

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作者 王民燕 蒋蔚 +6 位作者 陈永军 刘迎春 曾鹏 薛俊欣 张梦 宫枫举 王权 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期656-663,共8页

将呋喃它酮代谢物（AMOZ）与对醛基苯甲酸反应生成CPAMOZ,采用碳二亚胺法将CPAMOZ和HRP偶联得到酶标物CPAMOZ-HRP,在该酶标物和CPAMOZ单克隆抗体的基础上,建立AMOZ的直接竞争化学发光（CLIA）检测方法。结果显示,CPAMOZ-HRP经紫外扫描... 将呋喃它酮代谢物（AMOZ）与对醛基苯甲酸反应生成CPAMOZ,采用碳二亚胺法将CPAMOZ和HRP偶联得到酶标物CPAMOZ-HRP,在该酶标物和CPAMOZ单克隆抗体的基础上,建立AMOZ的直接竞争化学发光（CLIA）检测方法。结果显示,CPAMOZ-HRP经紫外扫描鉴定偶联成功;以单克隆抗体稀释度1∶8 000为最佳包被浓度,CPAMOZ-HRP稀释浓度1∶64 000为最佳工作浓度建立CLIA方法,其标准曲线呈线性,线性范围0.062 5-8 ng/m L,回归方程为y=-0.397x＋0.286（R-2=0.992）,IC_（50）为0.289 ng/m L;AMOZ单克隆抗体能特异性识别NPAMOZ（AMOZ的对硝基苯甲醛的衍生物）,除AMOZ外与其他参试的化学品或药物无交叉反应;样品最低检出限为0.059 6 g/kg;样品添加回收率在85%-91.93%之间,检测值的变异系数≤10%;实际样品检测结果与进口试剂盒检测结果呈线性相关（y=0.935x＋0.556,R-2=0.997）,表明本试验建立的方法可靠性等同于进口试剂盒,可满足AMOZ实际检测的需要。 展开更多

关键词 呋喃它酮代谢物 酶标物 直接竞争化学发光法

采用免疫磁珠富集呋喃唑酮残留标示物的研究

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作者 曾鹏 刘迎春 +6 位作者 蒋蔚 李洑辰 陈永军 王民燕 薛俊欣 孙卫东 王权 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第12期1-7,共7页

将呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮（AOZ）单克隆抗体偶联至经3-乙基碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化的磁珠上制备成免疫磁珠,建立快速、特异性富集鸡肉中残留标示物NPAOZ（3-[[（4-硝基苯基）-亚甲基]-氨基]-2-恶唑烷... 将呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮（AOZ）单克隆抗体偶联至经3-乙基碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化的磁珠上制备成免疫磁珠,建立快速、特异性富集鸡肉中残留标示物NPAOZ（3-[[（4-硝基苯基）-亚甲基]-氨基]-2-恶唑烷酮）的方法。纳米磁珠经EDC和NHS活化后与AOZ单克隆抗体偶联,得到抗体偶联量为50μg/mg的免疫磁珠。该免疫磁珠只对NPAOZ具有较高的特异性吸附,而对呋喃妥因代谢物AHD、呋喃西林代谢物SEM、呋喃它酮代谢物AMOZ的衍生物均无吸附作用。在样品前处理过程中利用免疫磁珠富集呋喃唑酮代谢物,当加标量为0.25~2 ng/g时回收率均在78%以上,变异系数为5.3%~10.9%,最低检测限为0.049μg/kg,远低于样品常规样品前处理法的最低检测限0.139μg/kg。结果显示基于免疫磁珠的样品前处理方法能有效富集鸡肉中NPAOZ,进一步有效提高ELISA检测方法的灵敏度。 展开更多

关键词 免疫磁珠 富集 3-氨基-2-恶唑烷酮 鸡肉

肠出血性大肠杆菌O157：H7抗原基因及毒力基因多重荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：3

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作者 夏灿 蒋蔚 +5 位作者 刘迎春 陈永军 龙梦瑶 薛俊欣 王权 孙卫东 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第10期13-21,共9页

根据Gen Bank公布的大肠杆菌O157：H7的菌体抗原基因rfb E、鞭毛抗原基因fli C、溶血素基因hly A、紧密黏附素基因eae A和志贺样毒素基因stx1和stx2的序列,同源性比较后选择保守序列分别设计6对特异性的引物及相应的Taqman探针,rfb E/ea... 根据Gen Bank公布的大肠杆菌O157：H7的菌体抗原基因rfb E、鞭毛抗原基因fli C、溶血素基因hly A、紧密黏附素基因eae A和志贺样毒素基因stx1和stx2的序列,同源性比较后选择保守序列分别设计6对特异性的引物及相应的Taqman探针,rfb E/eae A、Stx1/hly A、fli C/Stx2探针5＇端分别标记为FAM、HEX、CY5荧光报告基团,3＇端均标记为BHQ1荧光淬灭基团。通过优化反应体系和程序,建立2个能够快速、特异性地检测大肠杆菌O157：H7及其4个主要毒力基因的三重荧光定量PCR方法。结果显示,该方法灵敏度高,stx1、rfb E、fli C、eae A、hly A、stx2的最低检测限分别为20、30、20、20、30和40拷贝数/μL;特异性试验证明,该菌与其他菌种无交叉反应;重复性好,变异系数均小于2%;检测过程耗时约1 h。将建立的荧光定量PCR体系应用到人工染菌模拟猪肉样品试验中,未富集或富集8 h后测得大肠杆菌O157：H7的最低检出限分别为200 cfu/m L与1 cfu/m L。以上结果表明,本试验所建立的三重荧光定量PCR方法的敏感性、重复性及特异性均较好,可作为同时快速检测肠出血性大肠杆菌O157：H7及其毒力基因的方法。 展开更多

关键词 肠出血性大肠杆菌 O157:H7 三重荧光定量PCR 毒力基因 TAQMAN探针

磺胺氯吡嗪钠单克隆抗体的制备及鉴定 预览

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作者 张梦 刘迎春 +7 位作者 蒋蔚 陈永军 张花景 薛俊欣 宫枫举 曾鹏 王民燕 王权 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2015年第3期36-41,共6页

应用重氮化方法制备了磺胺氯吡嗪钠（sulfachloropyrazine sodium,SPZ）完全抗原SPZ-OVA,将成功偶联的人工全抗原（SPZ-OVA）免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,经间接ELISA检测,1号小鼠血清抗体效价达到1：6.4×104。取该小鼠脾细胞与SP2/... 应用重氮化方法制备了磺胺氯吡嗪钠（sulfachloropyrazine sodium,SPZ）完全抗原SPZ-OVA,将成功偶联的人工全抗原（SPZ-OVA）免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,经间接ELISA检测,1号小鼠血清抗体效价达到1：6.4×104。取该小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合。利用ELISA方法对融合后的杂交瘤细胞上清进行检测,筛选出能够稳定分泌抗体的细胞株：D9。将细胞株D9扩大培养后,经腹腔注射小鼠使其产生腹水。腹水单抗经纯化后,通过间接竞争ELISA对该单克隆抗体的效价、半数抑制浓度以及特异性进行检测。结果表明,所制备的单克隆抗体效价为1：4×10^5,半数抑制浓度为326 ng/m L,特异性良好。 展开更多

关键词 磺胺氯吡嗪钠 单克隆抗体 间接竞争ELISA

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弓形虫烯醇化酶2基因的原核表达与鉴定 被引量：2

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作者 张花景 蒋蔚 +7 位作者 刘迎春 陈永军 李欣彤 石金磊 乔元彪 薛俊欣 张梦 王权 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期503-508,共6页

为深入研究弓形虫烯醇化酶的生物学功能,根据已发表的eno2基因序列设计引物,通过RTPCR方法扩增弓形虫RH株的eno2基因。将eno2克隆到载体pET-28a(+)中后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS-PAGE... 为深入研究弓形虫烯醇化酶的生物学功能,根据已发表的eno2基因序列设计引物,通过RTPCR方法扩增弓形虫RH株的eno2基因。将eno2克隆到载体pET-28a(+)中后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS-PAGE分析表达情况,并通过Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定其免疫活性。结果显示,eno2基因全长1 353bp,编码444个氨基酸,与GenBank中登录的弓形虫烯醇化酶基因的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列的同源性均高达99.8%,与其他物种的烯醇化酶的同源性较低。在pH7.5、28℃和IPTG终浓度0.1mmol/L条件下,重组蛋白ENO2得到高效可溶性表达,分子质量约为55ku。Western-blot结果显示,重组蛋白能被感染弓形虫的犬阳性血清识别,说明ENO2具有较好的反应原性,可以作为血清学诊断抗原。IFA表明,NO2在弓形虫的细胞质和细胞核中均有分布。结果表明,本研究成功获得了可溶性、具有良好免疫活性的弓形虫重组蛋白ENO2,为深入研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 弓形虫 烯醇化酶2 原核表达 反应原性

猪链球菌2型主要毒力因子三重荧光定量PCR检测方法的建立 预览 被引量：9

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作者 王蓉蓉 孙卫东 +5 位作者 蒋蔚 刘迎春 陈永军 薛俊欣 张梦 王权 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第6期25-31,共7页

根据GenBank中猪链球菌2型三种毒力因子CP2SJ、MRP、EF基因序列,利用Primer Express 3.0软件分别设计3对特异性的引物及相应的Taqman探针。CP2SJ、MRP、EF探针5′端分别标记FAM、HEX、CY5荧光发射基团,3′端标记BHQ1淬灭荧光基团。通过... 根据GenBank中猪链球菌2型三种毒力因子CP2SJ、MRP、EF基因序列,利用Primer Express 3.0软件分别设计3对特异性的引物及相应的Taqman探针。CP2SJ、MRP、EF探针5′端分别标记FAM、HEX、CY5荧光发射基团,3′端标记BHQ1淬灭荧光基团。通过优化反应体系和程序,建立了一种基于Taqman探针法的三重荧光定量PCR,可同时检测上述三种毒力基因。该方法灵敏度高,CP2SJ、MRP、EF的最低检测限分别为90、40、60拷贝数/μL的质粒;特异性强,与其他病原菌无交叉反应;重复性好,变异系数均小于3%。整个检测扩增在60 min内完成。以上结果表明本试验所建立的三重荧光定量PCR方法的敏感性、重复性及特异性均较好,可用于同时快速检测猪链球菌2型三种毒力因子。 展开更多

关键词 猪链球菌2型 三重荧光定量PCR 毒力因子

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磺胺氯吡嗪钠中药复方对小鼠体内抗弓形虫疗效的观察 预览 被引量：6

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作者 蒋蔚 陈永军 +4 位作者 张花景 刘迎春 荆振宇 薛俊欣 王权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2022-2028,共7页

为探索治疗动物弓形虫病的有效药物组方，本研究以磺胺嘧啶钠作为对照首先通过药物体外试验观察磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩抑制弓形虫增殖的效果，然后分别用磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩以及3种药物的复方制剂，对人工感染弓形虫RH株的KM... 为探索治疗动物弓形虫病的有效药物组方，本研究以磺胺嘧啶钠作为对照首先通过药物体外试验观察磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩抑制弓形虫增殖的效果，然后分别用磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩以及3种药物的复方制剂，对人工感染弓形虫RH株的KM小鼠进行体内治疗试验。体外试验表明磺胺氯吡嗪钠、磺胺嘧啶钠、黄芩和甘草对弓形虫速殖子均有一定的抑制效果，磺胺氯吡嗪钠抑制效果最好。小鼠体内试验表明单独使用磺胺嘧啶钠、甘草和黄芩均可不同程度地延长小鼠存活时间，但均不能避免小鼠死亡，而单独使用磺胺氯吡嗪钠可使小鼠的存活率达到40％，在同等剂量下，磺胺氯吡嗪钠与黄芩和甘草配伍后，疗效得到明显提高，可显著延长小鼠存活时间，并使小鼠存活率高达50％。本研究的结果提示磺胺氯吡嗪钠具有显著体内抗弓形虫的作用，与甘草和黄芩配伍后的中西药复方制剂，能在保持疗效的基础上显著减少磺胺氯吡嗪钠的用量，因此磺胺氯吡嗪钠、甘草和黄芩复方制剂是未来治疗动物弓形虫病的优良方案之一。 展开更多

关键词 弓形虫病 磺胺氯吡嗪钠 甘草 黄芩 治疗效果 小鼠

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奶牛亚临床酮病对乳房炎发病情况和抗氧化功能的影响 被引量：1

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作者 薛俊欣 张铮臻 +1 位作者 黄克和 张克春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1876-1881,共6页

为研究奶牛亚临床酮病与乳房炎的关系以及血液中的酮体成分对奶牛抗氧化功能的影响，以156头健康荷斯坦奶牛为试验动物（SCC〈200000／mL），共筛选亚临床酮病奶牛69头（1．0mmol／L≤BHBA〈2．6mmol／L）作为试验组，根据年龄、胎次、... 为研究奶牛亚临床酮病与乳房炎的关系以及血液中的酮体成分对奶牛抗氧化功能的影响，以156头健康荷斯坦奶牛为试验动物（SCC〈200000／mL），共筛选亚临床酮病奶牛69头（1．0mmol／L≤BHBA〈2．6mmol／L）作为试验组，根据年龄、胎次、产奶量、泌乳天数配对的69头奶牛作为时照组（血液BHBA〈1．0mmol／L），监测乳房炎发病情况并在各组中选取12头奶牛检测血液酮体水平和抗氧化指标。结果表明亚临床酮病奶牛试验期间乳房炎的发病率为43．48％，对照组试验期间乳房炎的发病率为31．88％，但差异不显著（P〉0．05）；试验组奶牛乳房炎高发期为分娩后3～6周，对照组奶牛乳房炎发病时间为分娩后5～8周，亚临床酮病发病后1～3周内为乳房炎的高发期，占试验组奶牛乳房炎总发病比例的73．33％，试验组和对照组病原菌的组成无显著差异（P〉0．05）；试验组奶牛血液中T—AOC显著低于对照组（P〈0．05），GSH—PX活力、MDA和N0显著高于对照组（P〈0．05），血液ACAC浓度与GSH—PX活力呈显著正相关（P〈0．05，r=0．595），ACAC浓度与NO呈显著正相关（P〈0．05，r=0．655），T—AOC与MDA呈显著负相关（P〈0．05，r=0．533）。结果表明奶牛亚临床酮病可以导致乳房炎的发病率升高，但不是主要影响因素，亚临床酮病对乳房炎病原体构成无影响；外周血酮体水平升高导致机体总抗氧化能力的降低并引起机体脂质过氧化反应；谷胱甘肽过氧化物酶在发挥抗氧化功能时具有一定的抵抗力和自我调节能力。 展开更多

关键词 奶牛 亚临床酮病 乳房炎 抗氧化功能

散放牧场泌乳初期低酸度酒精阳性乳患牛乳及血液学指标分析 预览

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作者 薛俊欣 徐莹莹 +2 位作者 张瑞华 张铮臻 张克春 《中国奶牛》 2012年第23期32-36,共5页

上海牛奶集团种奶牛场，上海202177；

关键词 低酸度酒精阳性乳 血液学指标 泌乳初期 牛乳 放牧场 成分检测 生产能力 行业标准

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亚临床酮病对围产期奶牛免疫功能的影响 预览 被引量：1

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作者 薛俊欣 缪德年 +1 位作者 黄克和 张克春 《上海交通大学学报：农业科学版》 2011年第1期 48-53,共6页

从43头荷斯坦奶牛（体细胞数〈200 000个.mL-1）中筛选出处于分娩第14天的自然发生亚临床酮病的9头奶牛作为试验组（1.0 mmol.L-1≤血清β-羟丁酸〈2.6 mmol.L-1）,根据泌乳天数、年龄、胎次、产奶量配对的9头健康奶牛作为对照组（血液... 从43头荷斯坦奶牛（体细胞数〈200 000个.mL-1）中筛选出处于分娩第14天的自然发生亚临床酮病的9头奶牛作为试验组（1.0 mmol.L-1≤血清β-羟丁酸〈2.6 mmol.L-1）,根据泌乳天数、年龄、胎次、产奶量配对的9头健康奶牛作为对照组（血液β-羟丁酸〈1.0 mmol.L-1）,检测不同种类白细胞数量、中性粒细胞吞噬功能、趋化功能、淋巴细胞转化率以及血液免疫球蛋白G（IgG）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-8（IL-8）和γ-干扰素水平（IFN-γ）。结果显示试验组奶牛外周血白细胞总数、中性粒细胞数、淋巴细胞数、中性粒细胞吞噬率和趋化指数显著低于对照组（P〈0.05）,淋巴细胞转化率极显著低于对照组（P〈0.01）,血清-γIFN水平显著低于对照组（P〈0.05）。亚临床酮病可以使奶牛免疫功能降低。 展开更多

关键词 奶牛 亚临床酮病 免疫功能 白细胞 细胞因子

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奶牛氧化应激研究进展 预览 被引量：4

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作者 薛俊欣 张克春 《中国奶牛》 2011年第14期 29-32,共4页

高产奶牛更容易发生氧化应激，氧化应激可以导致生物学大分子和生物膜系统的破坏，并可以增加炎症反应时的组织损伤：奶牛氧化应激的产生除了与机体的生理状态、健康状况和饲料成分有关外，环境因素也会引起氧化应激。目前主要通过饲喂... 高产奶牛更容易发生氧化应激，氧化应激可以导致生物学大分子和生物膜系统的破坏，并可以增加炎症反应时的组织损伤：奶牛氧化应激的产生除了与机体的生理状态、健康状况和饲料成分有关外，环境因素也会引起氧化应激。目前主要通过饲喂抗氧化添加剂来预防奶牛氧化应激。 展开更多

关键词 奶牛 氧自由基 氧化应激 损伤

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我国南方都市型奶牛临床疾病特点与对策 预览 被引量：1

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作者 张瑞华 薛俊欣 +1 位作者 张峥臻 张克春 《上海畜牧兽医通讯》 2011年第3期 32-34,共3页

我国南方土地资源有限,以都市型奶牛养殖为主,规模化、集约化程度较高。但由于土地、气候、资源等条件的影响,各种临床疾病发病率居高不下,奶牛养殖业一直得不到很好的发展。本文以上海为例,重点介绍了南方都市型奶牛临床发病的特点,详... 我国南方土地资源有限,以都市型奶牛养殖为主,规模化、集约化程度较高。但由于土地、气候、资源等条件的影响,各种临床疾病发病率居高不下,奶牛养殖业一直得不到很好的发展。本文以上海为例,重点介绍了南方都市型奶牛临床发病的特点,详细地分析了其原因,并提出了相应的对策,为南方地区的奶牛养殖工作者及科研人员提供一定的参考。 展开更多

关键词 南方 奶牛业 临床疾病 特点 对策

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奶牛免疫功能的影响因素 预览 被引量：2

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作者 薛俊欣 张克春 《乳业科学与技术》 2011年第3期 142-144,共3页

影响奶牛免疫功能的因素复杂,围产期、能量负平衡以及饲料蛋白质、维生素、某些微量元素的缺乏会引起的奶牛出现免疫功能的降低,饲料中添加某些维生素、微量元素、壳聚糖、酵母细胞壁等添加剂可以增强奶牛的免疫功能,此外,某些中药也可... 影响奶牛免疫功能的因素复杂,围产期、能量负平衡以及饲料蛋白质、维生素、某些微量元素的缺乏会引起的奶牛出现免疫功能的降低,饲料中添加某些维生素、微量元素、壳聚糖、酵母细胞壁等添加剂可以增强奶牛的免疫功能,此外,某些中药也可增强奶牛的免疫功能。 展开更多

关键词 奶牛 免疫功能 影响因素

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