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基于ISO 16140验证食品中沙门氏菌实时荧光PCR方法 认领
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作者 王立平 王丹 +3 位作者 韩月贝 李赫婧 姜洁 《食品科技》 CAS 北大核心 2020年第4期327-332,共6页
以食品中沙门氏菌为研究对象,以GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》为参比方法,依据ISO 16140-1:2016《Microbiology of food and animal feeding stuffs-Protocol for the validation of alternative met... 以食品中沙门氏菌为研究对象,以GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》为参比方法,依据ISO 16140-1:2016《Microbiology of food and animal feeding stuffs-Protocol for the validation of alternative methods》中评价指标、评价方法及评价步骤,对SN/T 1870-2016《出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法》中沙门氏菌检验方法进行评估。结果表明:该方法在针对食品中沙门氏菌检测时,其准确性、特异性和灵敏度均呈现满意结果,与参比方法具有相似的检出限,具有很好的包含性和排他性,可用于食品中沙门氏菌的快速筛选检测。 展开更多
关键词 沙门氏菌 Real-Time PCR 方法验证
肉制品中鸵鸟源性成分的实时荧光PCR检测 认领 被引量:3
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作者 齐春萌 杨昕霆 +2 位作者 赵琳娜 侯彩云 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第7期246-251,共6页
通过实时荧光PCR技术检测肉制品中鸵鸟源性成分。根据鸵鸟线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(COX1)序列,用Primer Express和DNAMAN软件设计特异性的引物和Taq Man探针,并用阳性样本进行验证。结果表明,引物和探针对鸵鸟源性成分的特异... 通过实时荧光PCR技术检测肉制品中鸵鸟源性成分。根据鸵鸟线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(COX1)序列,用Primer Express和DNAMAN软件设计特异性的引物和Taq Man探针,并用阳性样本进行验证。结果表明,引物和探针对鸵鸟源性成分的特异性良好,与常见物种DNA无非目标扩增,该方法的检测灵敏度达0.27 pg/反应,适用于鸵鸟源性成分的鉴定,从而建立了肉制品中鸵鸟源性成分的实时荧光PCR鉴定方法 。 展开更多
关键词 实时荧光聚合酶链式反应 鸵鸟源性成分 线粒体COX1基因
实时荧光PCR法检测食品中梅花鹿成分 认领 被引量:2
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作者 齐春萌 杨昕霆 +2 位作者 赵琳娜 侯彩云 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1088-1092,共5页
采用实时荧光聚合酶链式反应技术检测食品中梅花鹿成分。通过对梅花鹿基因序列对比分析,选取种间差异大、种内差异小的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因序列作为靶序列,利用Primer Express、Oligo和DNAMAN等软件设计了梅花鹿特异性的... 采用实时荧光聚合酶链式反应技术检测食品中梅花鹿成分。通过对梅花鹿基因序列对比分析,选取种间差异大、种内差异小的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因序列作为靶序列,利用Primer Express、Oligo和DNAMAN等软件设计了梅花鹿特异性的引物和TaqMan探针,并用已知样本对引物和TaqMan探针的物种特异性、检测灵敏度进行验证和检测。实验结果表明,引物和探针对梅花鹿成分检测的特异性良好,与其他物种DNA无非目标扩增,对梅花鹿DNA的扩增效率为91.68%,该方法的检测灵敏度达0.42 pg/反应。 展开更多
关键词 物种鉴定 梅花鹿 实时荧光聚合酶链式反应 线粒体COX1基因
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实时荧光聚合酶链式反应法检测食品中狗源性成分 认领 被引量:4
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作者 高晓丽 杨昕霆 +3 位作者 王丹 赵琳娜 侯彩云 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期61-64,共4页
根据狗线粒体NADH氧化还原酶亚基2基因(ND2)中的序列设计了狗特异性引物和Taqman探针,建立了食品中狗源性成分的实时荧光聚合酶链式(Real-time PCR)检测方法。实验表明,该方法可以很好地区分狗与其他常见的14个物种,引物、Taqman探... 根据狗线粒体NADH氧化还原酶亚基2基因(ND2)中的序列设计了狗特异性引物和Taqman探针,建立了食品中狗源性成分的实时荧光聚合酶链式(Real-time PCR)检测方法。实验表明,该方法可以很好地区分狗与其他常见的14个物种,引物、Taqman探针特异性良好,检测灵敏度可达100fg,适用于食品中狗源性成分的快速鉴定。 展开更多
关键词 REAL-TIME PCR 线粒体ND2基因 狗源性成分
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实时定量PCR法对牛肉中鸡源性成份的量化检测 认领 被引量:5
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作者 胡智恺 宋丽萍 +4 位作者 姜洁 郭淼 王丹 赵琳娜 《食品安全质量检测学报》 2015年第2期550-554,共5页
目的实现样品中牛源性成份和鸡源性成份的量化分析。方法通过在基因组单拷贝基因上设计引物,绘制模板DNA扩增标准曲线以及确定牛肉、鸡肉质量与DNA浓度的比值常数,利用实时荧光定量PCR技术对四种不同掺混比例的牛鸡瘦肉混合样本中牛源... 目的实现样品中牛源性成份和鸡源性成份的量化分析。方法通过在基因组单拷贝基因上设计引物,绘制模板DNA扩增标准曲线以及确定牛肉、鸡肉质量与DNA浓度的比值常数,利用实时荧光定量PCR技术对四种不同掺混比例的牛鸡瘦肉混合样本中牛源性成份和鸡源性成份所占的质量百分比含量进行分析。结果通过荧光实时定量PCR反应的Ct值、模板DNA扩增标准曲线和质量与DNA的比值常数可以计算出样品中所含牛源性成份和鸡源性成份的质量百分比含量,检测值与理论值之间的绝对误差可控制在5%以内,量化研究结果基本准确。结论对于组织成份单一的样品,可以通过在基因组单拷贝基因上设计特异性的引物,利用PCR技术实现在质量水平上对食品中动物源性成份的量化分析,该技术方法的建立可以为肉类掺假监管工作提供有力的技术支撑。 展开更多
关键词 肉类掺假监管 量化研究 实时荧光定量PCR 鸡肉 牛肉
应用实时荧光PCR技术定量检测羊肉中的猪肉成分 认领 被引量:10
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作者 宋丽萍 +5 位作者 路勇 赵琳娜 王丹 杨红莲 郭淼 杨昕霆 《食品科技》 CAS 北大核心 2014年第10期319-322,326共5页
为了经济利益,一些商贩会在羊肉食品中掺混猪肉。为了定量检测假冒商品中猪肉掺混的比例,研究提供了一种基于实时荧光PCR技术的羊肉中猪源性成分定量检测的方法。研究结果表明,使用该方法可以对羊肉中猪源性成分的含量进行质量百分比分... 为了经济利益,一些商贩会在羊肉食品中掺混猪肉。为了定量检测假冒商品中猪肉掺混的比例,研究提供了一种基于实时荧光PCR技术的羊肉中猪源性成分定量检测的方法。研究结果表明,使用该方法可以对羊肉中猪源性成分的含量进行质量百分比分析,分析结果的绝对误差可以控制在10%以内。该研究结果为我国对肉类食品安全的监管提供了有力的保障。 展开更多
关键词 荧光实时PCR 定量检测 猪肉 食品安全
实时定量PCR法对羊肉中鸡源性成分的量化检测 认领 被引量:5
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作者 宋丽萍 +6 位作者 路勇 赵琳娜 王丹 杨红莲 郭淼 杨昕霆 胡智恺 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期294-297,共4页
为实现羊肉中鸡源性成分的量化检测,本文利用实时荧光PCR技术,通过在单拷贝基因上设计引物,DNA标准曲线绘制以及确定羊肉,鸡肉质量与DNA数学换算参数等方法,对四种不同掺混比例的鸡肉、猪肉混合样本掺混的质量百分比进行分析。结... 为实现羊肉中鸡源性成分的量化检测,本文利用实时荧光PCR技术,通过在单拷贝基因上设计引物,DNA标准曲线绘制以及确定羊肉,鸡肉质量与DNA数学换算参数等方法,对四种不同掺混比例的鸡肉、猪肉混合样本掺混的质量百分比进行分析。结果显示,检测百分比与理论混合百分比间的绝对误差控制在5%以内,量化研究结果准确,该法为食品安全检测工作提供了技术支撑。 展开更多
关键词 肉类掺假 量化研究 实时荧光PCR
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