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Fmoc-苯丙氨酸水凝胶及其复配EGCG抑菌作用研究 预览
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作者 付成 +3 位作者 胡芸瑕 高连君 魏栋玉 陈春兰 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第10期37-42,共6页
以pH 7.4的磷酸盐缓冲液体系制备9-芴甲氧羰基-苯丙氨酸(N-[(9H-fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl]-3-phenylalanine, Fmoc-Phe)水凝胶,对比研究D型Fmoc-苯丙氨酸(Fmoc-DPhe)和L型Fmoc-苯丙氨酸(Fmoc-LPhe)形成的水凝胶特性及抑菌性能,并分... 以pH 7.4的磷酸盐缓冲液体系制备9-芴甲氧羰基-苯丙氨酸(N-[(9H-fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl]-3-phenylalanine, Fmoc-Phe)水凝胶,对比研究D型Fmoc-苯丙氨酸(Fmoc-DPhe)和L型Fmoc-苯丙氨酸(Fmoc-LPhe)形成的水凝胶特性及抑菌性能,并分析Fmoc-DPhe与表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)复配的协同抑菌性。结果表明,D型和L型的Fmoc-Phe在质量浓度高于0.2 %、0.2 mol/L磷酸盐缓冲液时可以形成透明的水凝胶,且二者均对金黄色葡萄球菌有明显的抑制效果;随着Fmoc-Phe的浓度增加,抑菌效果随之增强。将12 mg/mL的Fmoc-DPhe与5mg/mL的EGCG复配,发现二者复配形成的水凝胶能够起到协同抑制金黄色葡萄球菌生长的结果。12 mg/mL Fmoc-Phe形成的水凝胶,其性状在10个月的研究期限内可维持稳定。初步探讨水凝胶的抑菌机理,发现与Fmoc-Phe具有类似结构的Fmoc-酪氨酸(Fmoc-LTyr)也具有抑制金黄色葡萄球菌生长的效果,表明Fmoc修饰的氨基酸的抑菌能力是由苯环母体经Fmoc基团修饰后产生的。 展开更多
关键词 超分子水凝胶 对映异构体 抑菌性 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) 复配
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基于基因芯片的TNF-α诱导骨关节炎细胞模型生物信息学分析 预览
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作者 胡松 +3 位作者 黄丽霞 黄念芳 宋文剑 孙宾莲 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期53-60,共8页
目的骨关节炎(osteoarthritis,OA)是最常见的退行性慢性关节疾病,然而其具体的基因机制至今尚不完全清楚,通过基因芯片检测OA细胞模型的基因表达谱变化,为深入研究OA发病机制提供更多生物学依据。方法胰酶结合胶原酶分离获得小鼠原代软... 目的骨关节炎(osteoarthritis,OA)是最常见的退行性慢性关节疾病,然而其具体的基因机制至今尚不完全清楚,通过基因芯片检测OA细胞模型的基因表达谱变化,为深入研究OA发病机制提供更多生物学依据。方法胰酶结合胶原酶分离获得小鼠原代软骨细胞,以50 ng/mL的肿瘤坏死因子α(TNF-α)孵育原代软骨细胞24 h制备OA细胞模型。收获细胞提取总RNA用于基因芯片检测,以表达差异倍数(fold change,FC)>2且P<0.01为条件筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),利用生物信息学软件对差异表达结果进行基因功能分类体系(gene ontology,GO)、KEGG通路注释分析。结果原代软骨细胞经TNF-α处理后,共筛选获得8096个表达上调DEG和6413个表达下调DEG,其中有诸如基质金属蛋白酶、炎性因子、基因凋亡及成骨相关基因等已知的OA相关的差异表达基因。此外,还有Olfml1等olfactomedin超家族成员、Nf1等未见报道的与OA相关的基因,尤其发现大量细胞色素超家族成员基因的异常表达,提示线粒体相关功能基因及信号途径可能与OA进程有重要关联。结论项目从转录组水平整体分析了TNF-α诱导的OA软骨细胞模型基因表达谱变化,为进一步深入探究OA发病机制提供了新思路。 展开更多
关键词 骨关节炎 转录组 软骨细胞 基因芯片 肿瘤坏死因子α 小鼠
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白藜芦醇诱导人胶质瘤细胞U251增殖抑制与凋亡的作用研究 被引量:2
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作者 郭培中 杨小梅 +2 位作者 龚业莉 黄丽霞 《中华中医药学刊》 北大核心 2017年第5期1094-1096,共3页
目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤细胞株U251的增殖抑制与凋亡的作用。方法:用不同浓度的白藜芦醇0、25、50、100、200μm/L处理对数生长期的U251细胞72 h,利用MTT比色法检测U251细胞增殖;流式细胞术检测U251细胞凋亡,采用逆转录聚合酶链... 目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤细胞株U251的增殖抑制与凋亡的作用。方法:用不同浓度的白藜芦醇0、25、50、100、200μm/L处理对数生长期的U251细胞72 h,利用MTT比色法检测U251细胞增殖;流式细胞术检测U251细胞凋亡,采用逆转录聚合酶链反应法检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax mRNA水平。采用Western blotting检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:白藜芦醇抑制U251细胞的增殖和Wnt、β-catenin、p53、p21和Bcl-2的表达,且呈浓度依赖性;促进U251细胞凋亡和Bax的表达。结论:白藜芦醇诱导U251细胞增殖抑制和凋亡与抑制Wnt/β-actin/p53信号通路激活相关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 U251 增殖 凋亡 Wnt/β-catenin/p53
ER Stress-Mediated Cell Damage Contributes to the Release of EDA~+ Fibronectin from Hepatocytes in Nonalcoholic Fatty Liver Disease 预览
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作者 何磊 +3 位作者 陈婷 黄强 王玉 刘志国 《华中科技大学学报:医学英德文版》 SCIE CAS 2017年第2期217-225,共9页
Fibronectin containing extra domain A(EDA~+ FN),a functional glycoprotein participating in several cellular processes,correlates with chronic liver disease.Herein,we aim to investigate the expression and secretion of ... Fibronectin containing extra domain A(EDA~+ FN),a functional glycoprotein participating in several cellular processes,correlates with chronic liver disease.Herein,we aim to investigate the expression and secretion of EDA~+ FN from hepatocytes in nonalcoholic fatty liver disease(NAFLD) and the underlying mechanisms.Circulating levels of EDA~+ FN were determined by ELISA in clinical samples.Western blotting and flow cytometry were performed on L02 and Hep G2 cell lines to analyze whether the levels of EDA~+ FN were associated with endoplasmic reticulum(ER) stress-related cell death.Circulating levels of EDA~+ FN in NAFLD patients were significantly higher than those in control subjects,and positively related with severity of ultrasonographic steatosis score.In cultured hepatocytes,palmitate up-regulated the expression of EDA~+ FN in a dose-dependent manner.Conversely,when the cells were pretreated with 4-phenylbutyrate,a specific inhibitor of ER stress,up-regulation of EDA~+ FN could be abrogated.Moreover,silencing CHOP by sh RNA enhanced the release of EDA~+ FN from hepatocytes following palmitate treatment,which was involved in ER stress-related cell damage.These findings suggest that the up-regulated level of EDA~+ FN is associated with liver damage in NAFLD,and ER stress-mediated cell damage contributes to the release of EDA~+ FN from hepatocytes. 展开更多
关键词 纤维连接蛋白 内质网应激 细胞损伤 肝细胞 脂肪肝 酒精性 肝病 介导
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桃胶-明胶复合凝聚法制备紫苏籽油微胶囊研究 预览 被引量:2
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作者 陈婷 +3 位作者 黄强 冯涵 左正宇 刘志国 《长江大学学报:医学卷》 2016年第5期69-73,共5页
为了提高紫苏(Perillafrutescens(L)Britt)籽油的稳定性,以桃胶一明胶为壁材、紫苏籽油为芯材、转谷氨酰胺酶为固化剂,采用复合凝聚法制备紫苏籽油微胶囊,研究了壁材组成、芯壁比、壁材浓度、pH、搅拌速度、乳化速度等因素对微... 为了提高紫苏(Perillafrutescens(L)Britt)籽油的稳定性,以桃胶一明胶为壁材、紫苏籽油为芯材、转谷氨酰胺酶为固化剂,采用复合凝聚法制备紫苏籽油微胶囊,研究了壁材组成、芯壁比、壁材浓度、pH、搅拌速度、乳化速度等因素对微胶囊形成的影响,确定其最佳工艺为:桃胶:明胶重量比为1:1,芯壁比为1:1,壁材浓度为1.25%,pH为4.3,搅拌速度为300r/min,乳化速度12000r/min。通过对所得产品的包埋率、溶解度、贮藏稳定性等指标进行测定评估,结果发现复合凝聚法制备的紫苏籽油微胶囊包埋率达到90%,溶解度达到75%,15d后的过氧化值降低2.6倍,可为紫苏油在食品中的广泛应用提供参考依据。 展开更多
关键词 紫苏(Perillafrutescens(L.)Britt)籽油 复合凝聚 微胶囊 工艺
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EGCG对日本血吸虫感染小鼠TIMP-1及α-SMA表达和肝纤维化的影响 被引量:5
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作者 冯金梅 +5 位作者 刘锴 胡松 邱文洪 张泽华 Stephen Hsu 宋文剑 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第5期428-433,共6页
目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对日本血吸虫感染小鼠干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-13(IL-13)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨EGCG抑制小鼠日本血吸虫病肝纤维化的作... 目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对日本血吸虫感染小鼠干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-13(IL-13)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨EGCG抑制小鼠日本血吸虫病肝纤维化的作用及机制。方法随机将小鼠分为感染组及对照组(A组)。感染组小鼠用腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴(30±5)条/只后,随机分为感染模型组(B组)、EGCG治疗高剂量[400mg/(kg·d)]组(C组)、治疗低剂量[40mg/(kg·d)]组(D组)、高剂量佐吡喹酮治疗组(E组)、低剂量佐吡喹酮治疗组(F组),溶剂+吡喹酮对照组(G组),灌胃溶剂对照组(H组),每组10只。在血吸虫尾蚴攻击感染后第28d,用EGCG对应灌胃治疗,1次/d,连续治疗8周。其中E、F、G组在感染后第42、43d加用吡喹酮[500mg/(kg·d)]灌胃。实验结束后处死小鼠,测算肝体指数。留取肝脏组织和血清,采用ELISA法测定血清中IFN-γ、IL-13及TIMP-1含量,采用苏木素-伊红(HE)和Masson胶原纤维染色观察小鼠肝组织变性、虫卵肉芽肿与胶原沉积等病理改变,采用免疫组化法观察肝组织中α-SMA的表达。结果与对照组相比,各实验组小鼠肝体指数均升高,肝脏有虫卵肉芽肿形成、胶原沉积及肝纤维化,血清中IL-13、TIMP-1含量升高(P〈0.05),肝细胞内α-SMA表达升高(P〈0.05)。与感染模型组相比,EGCG高、低剂量治疗组及其佐吡喹酮组IL-13和TIMP-1含量及肝体指数均显著降低(P〈0.05),虫卵肉芽肿面积减小,胶原沉积减轻。结论 EGCG可抑制α-SMA表达及TIMP-1分泌,其抗纤维化机制与抑制肝星状细胞(HSC)活化相关,EGCG与吡喹酮伍用可增强其抗血吸虫病肝纤维化作用。 展开更多
关键词 EGCG 血吸虫 日本 肝纤维化 TIMP-1 Α-SMA
《人体寄生虫学》课程说课设计探析 被引量:2
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作者 冯金梅 宋文剑 《热带医学杂志》 CAS 2016年第10期1350-1352,共3页
“说课”是教师在认真备课的基础上,以科学的教育理论为指导,向同行和专家叙述教学设计及其依据的一种新型的教学研究活动,同时也是高校教学水平评估中评价教学水平的指标之一。本文以大学本科人体寄生虫学课程为实例,从课程简介、课程... “说课”是教师在认真备课的基础上,以科学的教育理论为指导,向同行和专家叙述教学设计及其依据的一种新型的教学研究活动,同时也是高校教学水平评估中评价教学水平的指标之一。本文以大学本科人体寄生虫学课程为实例,从课程简介、课程教材、课程对象、课程内容、课程教法和课程评价等6个方面系统分析了大学课程说课设计的思路和方法。 展开更多
关键词 课程说课 人体寄生虫学 教学方法
临床医学专业病原生物学与免疫学综合实验(MIMP)教学体系的构建和实践 预览 被引量:3
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作者 冯金梅 宋文剑 +5 位作者 胡松 张泽华 黄丽霞 邱文洪 刘锴 《江汉大学学报:自然科学版》 2016年第5期438-443,共6页
加强实验教学是提高医学生实践能力、增强创新精神和创新能力的重要途径,也是高等医学院校实验教学改革的重要目标。以提高实验教学效率与质量,培养具有创新实践能力的应用型、复合型人才为宗旨,将医学微生物学、医学寄生虫学及医学... 加强实验教学是提高医学生实践能力、增强创新精神和创新能力的重要途径,也是高等医学院校实验教学改革的重要目标。以提高实验教学效率与质量,培养具有创新实践能力的应用型、复合型人才为宗旨,将医学微生物学、医学寄生虫学及医学免疫学3门学科的实验课程实质性地融合为全新的、独立开设的、应用于本科临床医学专业的“病原生物学与免疫学综合实验(MIMP)”课程。在此基础上研究创新实验项目和编写出版与课程改革相适应的全新教材;整合实验室资源与师资队伍;改革实验教学方法与教学手段;创新实验考核方法及课程评估体系。优化构建了相应的实验教学体系,并在实践中取得了较好的成效。 展开更多
关键词 病原生物学与免疫学综合实验 实验教学体系 教学改革 临床医学专业
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表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)体外抗日本血吸虫尾蚴作用的研究
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作者 冯金梅 +5 位作者 刘锴 张泽华 胡松 邱文洪 Stephen Hsu 宋文剑 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第7期629-633,共5页
目的观察表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对日本血吸虫尾蚴的体外杀伤作用及其超微组织结构的变化,探讨EGCG预防日本血吸虫尾蚴感染的效果,为进一步开展血吸虫尾蚴感染预防措施的研究提供实验数据。方... 目的观察表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对日本血吸虫尾蚴的体外杀伤作用及其超微组织结构的变化,探讨EGCG预防日本血吸虫尾蚴感染的效果,为进一步开展血吸虫尾蚴感染预防措施的研究提供实验数据。方法将日本血吸虫尾蚴分别置于空白对照组蒸馏水、药物处理组0.2%EGCG和1%EGCG溶液中,各处理0、30和60min,解剖镜下观察并摄像;分别选取以上3组处理30min的尾蚴进行扫描电镜观察。设置蒸馏水对照组、0.1%和1%EGCG溶液处理30min组尾蚴感染小白鼠,饲养43d后解剖小鼠,冲虫,观察感染情况。结果解剖镜下观察,蒸馏水对照组在0min和30min时尾蚴体态柔和,自由运动;60min时尾蚴虫体完整,蜷缩成团,活动停止。0.2%和1%EGCG处理组在30min时尾蚴剧烈运动,尾部急剧摆动、挛缩,体部发生变形,且1%EGCG处理组比0.2%EGCG处理组尾蚴运动更为剧烈,形态变形更明显;60min时,两组尾蚴尾部都已脱落且死亡。扫描电镜观察对照组尾蚴形态修长且虫体完整,口吸盘、头器和腹吸盘的结构正常,体部与尾部连接紧密,尾蚴体被表面光滑,体棘遍布全身,且头部和躯干部体棘的排列和棘的尖端都朝向身体后方。0.2%和1%EGCG处理30min组尾蚴体部高度收缩且皱褶不平,尾蚴口吸盘变形、肿大,腹吸盘肿胀、变窄,其中1%EGCG处理组比0.2%EGCG处理组尾蚴体部的收缩皱褶和腹吸盘变形更明显;两组EGCG处理组尾蚴体部与尾部连接松弛,尾端呈皱褶状变化,其中1%EGCG处理30min组尾蚴的尾部都已脱落,体表体棘散在分布,体棘紊乱、朝向不一,部分体棘脱落。动物感染试验显示对照组和0.1%EGCG处理组尾蚴感染小鼠的感染率均为100%,但0.1%EGCG处理组的减虫率为33.52%;1%EGCG处理组尾蚴感染小鼠的感染率为16.7%,减虫率81.87%。结论 EGCG对日本血吸虫尾蚴具有体外杀伤作用,发生的形态结构可能影响其侵袭宿主� 展开更多
关键词 血吸虫 日本 尾蚴 EGCG 扫描电镜
n-3多不饱和脂肪酸、内质网应激与非酒精性脂肪肝病的研究进展 被引量:1
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作者 赵秀举 刘志国 《食品安全质量检测学报》 2013年第4期共5页
非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)已逐渐成为一个全球性健康问题,但其发病的具体机制不甚明朗。内质网是细胞内蛋白质加工、脂质合成和钙储存的主要场所,内质网结构和功能的失常所致的内质网应激(endoplasm... 非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)已逐渐成为一个全球性健康问题,但其发病的具体机制不甚明朗。内质网是细胞内蛋白质加工、脂质合成和钙储存的主要场所,内质网结构和功能的失常所致的内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)对脂代谢和细胞功能具有重要调控作用,可能是NAFLD 的发生和发展的重要机制。近来大量研究显示,脂类中特定的脂质负荷(饱和脂肪酸、胆固醇)可能是诱导ERS导致NAFLD重要原因,而另一方面, n-3多不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acids, n-3 PUFA)的摄入量却与NAFLD患病率呈负相关。本文就脂肪酸与内质网应激及其与NAFLD的联系作一综述,进一步探讨n-3多不饱和脂肪酸防治NAFLD的机制。 展开更多
关键词 N-3多不饱和脂肪酸 脂代谢 内质网应激 非酒精性脂肪肝病
肠炎沙门氏菌的LAMP检测方法的建立 预览 被引量:11
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作者 尹欢 +3 位作者 李琦 陈江源 刘烈炬 刘志国 《中国酿造》 CAS 2013年第4期146-149,共4页
建立肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,实现对肠炎沙门氏菌的快速检测。通过针对肠炎沙门氏菌血清型特异性基因lygD设计LAMP内外引物对,优化LAMP扩增反应条... 建立肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,实现对肠炎沙门氏菌的快速检测。通过针对肠炎沙门氏菌血清型特异性基因lygD设计LAMP内外引物对,优化LAMP扩增反应条件,采用包括肠炎沙门氏菌在内的10种不同菌株进行LAMP引物特异性检测;通过系列梯度稀释肠炎沙门氏菌菌液进行LAMP扩增,计算检出限;并对鲜鸡蛋模拟样本进行LAMP检测。结果表明LAMP法可快速特异地检测出肠炎沙门氏菌;细菌培养液检出限为2.33×10^1cfu/mL,鲜鸡蛋模拟样品为2.67×10^1cfu/mL。该方法反应灵敏度高,可用于食品中肠炎沙门氏菌的快速检测。 展开更多
关键词 肠炎沙门氏菌 环介导等温扩增 检测 检出限
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