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肝再生磷酸酶-3上调缺氧诱导因子-1,α亚基促进结肠癌细胞血管生成的研究
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作者 张韬 罗自通 +4 位作者 蓝球生 许鹤洋 自强 苏鹏伟 忠华 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期852-854,共3页
目的观察结肠癌细胞中肝再生磷酸酶-3(PRL-3)上调缺氧诱导因子-1(HIF1)-α的表达。方法构建稳定转染的上调PRL-3(LoVo-P/LoVo-NC)及下调PRL-3的结肠癌细胞株(HT29-P/HT29-NC),通过蛋白质印迹法(Western blot)及定量聚合酶链反应(qPCR)... 目的观察结肠癌细胞中肝再生磷酸酶-3(PRL-3)上调缺氧诱导因子-1(HIF1)-α的表达。方法构建稳定转染的上调PRL-3(LoVo-P/LoVo-NC)及下调PRL-3的结肠癌细胞株(HT29-P/HT29-NC),通过蛋白质印迹法(Western blot)及定量聚合酶链反应(qPCR)检测结肠癌细胞中HIF1-α及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。取各株细胞上清液,与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)行血管生成试验。将细胞注入小鼠皮下行小鼠成瘤实验后,瘤体切片行免疫组织化学(IHC)观察VEGF及HIF1-α表达差异。应用SPSS 15.0统计软件进行分析。结果Western blot及qPCR结果显示PRL-3上调后结肠癌细胞中的HIF1-α[LoVo-P/LoVo-NC:4]及VEGF[LoVo-P/LoVo-NC:5.8]表达升高(P<0.05),而敲低PRL-3后HIF1-α[HT29-P/HT29-NC:0.3]及VEGF[HT29-P/HT29-NC:0.2]亦随之表达降低(P<0.05)。血管生成试验提示,PRL-3水平高的细胞培养上清有更好的促血管生成作用[血管生成数为LoVo-P/LoVo-NC:(8±2)条比(2±1)条,HT29-P/HT29-NC:(3±1)条比(11±3)条,(P<0.05]。免疫组化显示结肠癌细胞LoVo-P及HT29-NC分别相对于LoVo-NC及HT29-P在HIF1-α、VEGF的表达上都有明显升高[LoVo-P/LoVo-NC,HIF1-α:89%比33%,VEGF:83%比25%。HT29-P/HT29-NC,HIF1-α:8%比67%,VEGF:12%比82%,t=9.934、17.890、19.190、106.000、P<0.05]。结论结肠癌细胞中PRL-3上调HIF1-α的表达从而促进血管生成。 展开更多
关键词 结肠癌 血管生成 肝再生磷酸酶-3 缺氧诱导因子-1Α
肝再生磷酸酶-3通过肿瘤相关巨噬细胞作用促进结肠癌侵袭转移的研究
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作者 张韬 罗自通 +4 位作者 蓝球生 许鹤洋 自强 苏鹏伟 忠华 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期656-659,共4页
目的探讨肝再生磷酸酶-3(PRL-3)与肿瘤相关巨噬细胞(TAM)相互作用从而促进结肠癌细胞侵袭转移的机制。方法构建稳定转染下调PRL-3(HT29-P/HT29-NC)以及上调PRL-3的结肠癌细胞株(LoVo-P/LoVo-NC),分别与肿瘤相关巨噬细胞(TAM)共培养后,通... 目的探讨肝再生磷酸酶-3(PRL-3)与肿瘤相关巨噬细胞(TAM)相互作用从而促进结肠癌细胞侵袭转移的机制。方法构建稳定转染下调PRL-3(HT29-P/HT29-NC)以及上调PRL-3的结肠癌细胞株(LoVo-P/LoVo-NC),分别与肿瘤相关巨噬细胞(TAM)共培养后,通过Western blot检测TAM中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达。采用Transwell侵袭实验比较与TAM共培养后结肠癌细胞的侵袭能力。抑制TAM中MAPK信号通路后,通过侵袭实验检测结肠癌细胞的侵袭能力。将细胞注入小鼠皮下行小鼠成瘤实验,将瘤体切片行免疫组织化学观察MAPK蛋白的表达情况。结果Westernblot显示,与高表达PRL-3的结肠癌细胞(HT29-NC、LoVo-P)共培养后的TAM中MAPK蛋白相较于低表达组(p-JNK,p-ERK)明显升高(P<0.05),其中LoVo-P比LoVo-NC升高3倍(p-JNK)及2倍(p-ERK),HT29-NC中表达为HT29-P的3倍(p-JNK)及1.3倍(p-ERK)。而Transwell侵袭实验表明,高表达PRL-3的结肠癌细胞与TAM作用后可增强自身的侵袭能力。其中LoVo细胞[(268±22)个比(129±12)个],HT29细胞[(298±19)个比(152±14)个],P<0.05。同时,抑制TAM中的MAPK信号通路后,共培养后结肠癌细胞的EMT减弱,侵袭能力也相应下降。LoVo最终通过细胞数降至1/2,HT29降至1/3,P<0.05。另外,小鼠成瘤实验中的组织切片免疫组化结果显示,在PRL-3表达高的组织中,TAM中MAPK磷酸化蛋白增加,其中LoVo[p-JNK:82%/20%,p-ERK:83%/16%],HT29[p-JNK:81%:21%,p-ERK:76%/16%]。结论PRL-3激活肿瘤相关巨噬细胞中的MAPK信号通路增强结肠癌细胞的EMT从而促进其侵袭。 展开更多
关键词 结肠癌 蛋白酪氨酸磷酸酶-3 肿瘤相关巨噬细胞 磷酸化
丁酸钠诱导不成熟树突状细胞分化过程中基因表达谱与微小RNA表达谱的研究
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作者 自强 李琳 +3 位作者 许鹤洋 来伟 曾育杰 刘璐 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1045-1047,共3页
目的利用基因芯片技术检测丁酸钠诱导人外周血来源的不成熟树突状细胞(DC)分化过程中基因表达谱和微小RNA(miRNA,miR)表达谱的变化,为进一步研究诱导DC分化的分子机制奠定基础。方法体外诱导人外周血单个核细胞来源的DC,经1mmol/L丁酸... 目的利用基因芯片技术检测丁酸钠诱导人外周血来源的不成熟树突状细胞(DC)分化过程中基因表达谱和微小RNA(miRNA,miR)表达谱的变化,为进一步研究诱导DC分化的分子机制奠定基础。方法体外诱导人外周血单个核细胞来源的DC,经1mmol/L丁酸钠诱导分化24h,使用树突状和抗原递呈细胞基因芯片检测DC分化相关基因,并利用miRNA芯片技术检测、筛选显著表达差异的miRNA并进行靶基因预测,应用SPSS20.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,两组间比较采用t检验方法。结果丁酸钠诱导下DC共筛选出表达差异的基因有34个。上调的基因有14个,下调的基因有20个。改变的基因功能主要涉及细胞因子及其受体表达、抗原摄取、抗原递呈、细胞表面受体、及信号传导。丁酸钠诱导下DC表面标志CD83(8.90±6.63)显著低于对照组(18.11±3.34,t=3.037,P<0.05),表达差异的miRNA共34个,下调的miRNA基因有23个,上调的miRNA有11个。其中17个与组蛋白去乙酰化酶有关。结论丁酸钠诱导不成熟DC涉及多个基因的表达调控,伴随组蛋白去乙酰化酶及相关miRNA参与其中,共同控制并影响DC分化及功能改变。 展开更多
关键词 树突状细胞 丁酸钠 基因表达谱 微小RNA表达谱
结直肠癌相关环状RNA的研究进展 预览 被引量:1
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作者 自强 刘璐 《岭南现代临床外科》 2018年第4期468-472,共5页
结直肠癌(CRC)是全球第三大常见的恶性肿瘤,也是导致癌症相关死亡的第四大原因。环状RNA属新型长链非编码RNA,广泛存在于真核生物中,由多种机制剪接而成。早期被当成基因表达的副产物且无生物学功能而被忽略。近年研究证实环状RNA在许... 结直肠癌(CRC)是全球第三大常见的恶性肿瘤,也是导致癌症相关死亡的第四大原因。环状RNA属新型长链非编码RNA,广泛存在于真核生物中,由多种机制剪接而成。早期被当成基因表达的副产物且无生物学功能而被忽略。近年研究证实环状RNA在许多生命活动中发挥着不可或缺的作用,并且在CRC组织中存在差异表达,对肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移和凋亡发挥着重要作用。探索环状RNA在结直肠癌中的作用机制,将有助于CRC的早期诊疗和预后。本文将针对结直肠癌相关环状RNA的最新研究进展做一阐述,以期为CRC的诊治提供新的思路。 展开更多
关键词 结直肠癌 环状RNA
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小学语文作业设计创新探讨 预览
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作者 自强 《都市家教:下半月》 2017年第10期143-143,共1页
我们必须冲破“标准答案”的樊篱,变“标准答案”为合理回答。鼓励学生独立思考,尊重个人见解,允许学生与同学争论答案,最后自己得出正确答案,而不是一味由教师下定语。
关键词 小学语文 作业设计 优化设计
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