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两广部分地区仔猪腹泻死亡的流行病学调查 预览 被引量:1
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作者 罗亚坤 练斯南 +5 位作者 蔺文成 梁琳 史利军 白挨泉 崔尚金 《养猪》 2016年第1期101-104,共4页
研究旨在分析广东、广西地区2015年1—10月份腹泻仔猪群中猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)发病情况和流行特征,以便为今后的防控提供理论数据。分别采用RT-PCR检测PEDV、用Nano PCR方法检测PRV,对2015年1—10月份广东... 研究旨在分析广东、广西地区2015年1—10月份腹泻仔猪群中猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)发病情况和流行特征,以便为今后的防控提供理论数据。分别采用RT-PCR检测PEDV、用Nano PCR方法检测PRV,对2015年1—10月份广东、广西地区7个地市临床送检的56份组织样品(包括心、肝、脾、肺、肾、淋巴等,其中有35份含有小肠样品)进行病原核酸检测。病原核酸检测结果显示:PEDV的阳性率为14.28%,PRV的阳性率为53.6%;PEDV与PRV混合感染率为8.57%。对PEDV阳性样品的S1基因进行遗传进化分析,结果显示,研究获得PEDV阳性样品的S1基因与2015年广东分离的CH-HGC-01-2015的亲缘关系较近。由此可见,广东、广西地区PRV发病率较高,PEDV的发展呈新的流行态势,并且存在PEDV和PRV的混合感染。 展开更多
关键词 猪病流行性腹泻病毒 猪伪狂犬病病毒 流行病学调查 克隆 序列分析
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生物模板法合成铁钴纳米材料的研究 预览 被引量:1
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作者 谢银德 侯保森 +2 位作者 张冰 《郑州大学学报:工学版》 CAS 北大核心 2015年第6期34-37,共4页
采用脱铁铁蛋白为生物模板,以硝酸钴和硫酸亚铁铵为原材料,利用硼氢化钠为还原剂合成了蛋白质包覆的铁钴纳米材料,并通过透射电子显微镜、EDS能谱分析、电子衍射和紫外光谱分析对制得的样品进行了表征.实验结果表明,采用脱铁铁蛋白生物... 采用脱铁铁蛋白为生物模板,以硝酸钴和硫酸亚铁铵为原材料,利用硼氢化钠为还原剂合成了蛋白质包覆的铁钴纳米材料,并通过透射电子显微镜、EDS能谱分析、电子衍射和紫外光谱分析对制得的样品进行了表征.实验结果表明,采用脱铁铁蛋白生物模板制备的铁钴复合纳米颗粒为无定型的非晶体,具有高度的单分散性,其直径大约为5~7 nm,粒径分布较为均匀,且研究结果进一步表明了脱铁铁蛋白是一种良好的制备纳米材料的模板. 展开更多
关键词 脱铁铁蛋白 生物模板 铁钴 纳米颗粒
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晶界扩散镝(Dy)烧结钕铁硼磁性能的研究 预览 被引量:1
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作者 向春涛 张鹏杰 +3 位作者 黄秀莲 衣晓飞 陈静武 《安徽科技》 2015年第11期48-49,共2页
采用晶界扩散镝的方式对烧结后的磁体进行研究.探讨晶界扩散镝对磁体成分、磁性能、失重等的影响。
关键词 晶界扩散 烧结钕铁硼 磁性能 失重
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小反刍兽疫病毒H基因在杆状病毒中的表达及其免疫原性研究 预览 被引量:4
4
作者 隋修锟 金红岩 +4 位作者 李文超 史利军 梁琳 李刚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期974-980,共7页
为表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H蛋白,并探讨其免疫原性,通过RT-PCR克隆PPRV Nigeria75/1毒株H基因,将其克隆至供体质粒pFB-LIC-Bse中,测序验证后将重组质粒pFB-LIC-Bse-PPRV-H转化至DH10Bac感受态细胞中,经同源重组获得重组杆状病毒穿梭... 为表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H蛋白,并探讨其免疫原性,通过RT-PCR克隆PPRV Nigeria75/1毒株H基因,将其克隆至供体质粒pFB-LIC-Bse中,测序验证后将重组质粒pFB-LIC-Bse-PPRV-H转化至DH10Bac感受态细胞中,经同源重组获得重组杆状病毒穿梭质粒bacmid-PPRV-H,将其转染昆虫细胞sf21获得含有PPRV H基因的重组杆状病毒。采用SDS-PAGE、Western blot、IFA及小鼠免疫试验鉴定表达产物的反应原性及免疫原性。结果表明,在杆状病毒表达系统中表达的PPRV H蛋白能与His-tag单克隆抗体及PPRV阳性血清发生特异性反应,其相对分子质量为68ku;表达产物接种小鼠可诱导其产生特异性抗体和抗小反刍兽疫病毒中和抗体,淋巴细胞增殖试验检测结果表明重组杆状病毒rBacmid-H能与相应抗体和致敏的效应淋巴细胞发生较强的特异性反应。本试验获得的重组杆状病毒表达的PPRV H蛋白具有良好的免疫原性及反应原性,可诱导小鼠产生保护性中和抗体,该试验为进一步开发小反刍兽疫亚单位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 H蛋白 杆状病毒表达系统 免疫性检测
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抗狂犬病病毒核蛋白单链抗体的表达及活性鉴定 被引量:3
5
作者 程朝飞 宫苗苗 +4 位作者 李刚 朱鸿飞 袁维峰 史利军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期963-968,共6页
为了获得抗狂犬病病毒(RV)核蛋白(N)的单链抗体,从分泌抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1D9中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到抗体的轻链可变区基因和重链可变区基因,利用重叠引物延伸法将轻链可变区基因和重链可变区基因连... 为了获得抗狂犬病病毒(RV)核蛋白(N)的单链抗体,从分泌抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1D9中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到抗体的轻链可变区基因和重链可变区基因,利用重叠引物延伸法将轻链可变区基因和重链可变区基因连接,同时引入连接肽编码序列,成功扩增得到单链抗体(ScFv)基因,将ScFv基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后得到融合蛋白。SDS-PAGE和Western-blot分析结果表明,融合蛋白大小约为32ku,主要以包涵体的形式存在,能被抗His标签的单克隆抗体特异性识别。间接竞争ELISA检测结果表明,该单链抗体能够与RV-His-N重组蛋白和RV结合。抗RV核蛋白单链抗体的成功表达,为单链抗体在狂犬病的诊断和治疗中的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒核蛋白 单链抗体 原核表达 活性鉴定
犬瘟热病毒截短P蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 预览
6
作者 袁维峰 贾红 +5 位作者 于萍萍 侯绍华 郭晓宇 史利军 朱鸿飞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期22-25,共4页
为制备针对犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)P1蛋白的单克隆抗体(McAb),本研究利用重组犬瘟热病毒P1蛋白免疫BALB/c小鼠,并将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,用CDV包被ELISA板,通过间接ELISA法筛选出两株稳定分泌抗CDV-P1的杂... 为制备针对犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)P1蛋白的单克隆抗体(McAb),本研究利用重组犬瘟热病毒P1蛋白免疫BALB/c小鼠,并将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,用CDV包被ELISA板,通过间接ELISA法筛选出两株稳定分泌抗CDV-P1的杂交瘤细胞株(E9E4C10、E9F8D9)。间接ELISA检测腹水效价均为1∶106,亚类鉴定结果均为IgG2b。Western blotting和间接免疫荧光(IFA)分析结果表明,两株单克隆抗体均能与重组P1蛋白和CDV发生反应;ELISA叠加试验增殖结果表明,两株单克隆抗体识别的抗原表位不同。本研究制备的特异性抗CDV-P1的单克隆抗体为建立CDV免疫学检测方法和P蛋白的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 重组P蛋白 单克隆抗体 鉴定
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小反刍兽疫病毒M蛋白主要抗原表位区的原核表达及鉴定 被引量:8
7
作者 黄华欣 李刚 +6 位作者 史利军 王勇 金红岩 李文超 陶春爱 隋修锟 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期266-270,共5页
为了制备小反刍兽疫病毒(PPRV)特异性单抗及临床抗体水平监测,通过在线软件分析PPRV Nigeria75/1株M蛋白可能包含的B细胞线性表位位点,结合可溶性预测,设计1对引物,扩增303bp目的基因。将目的基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,... 为了制备小反刍兽疫病毒(PPRV)特异性单抗及临床抗体水平监测,通过在线软件分析PPRV Nigeria75/1株M蛋白可能包含的B细胞线性表位位点,结合可溶性预测,设计1对引物,扩增303bp目的基因。将目的基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,用IPTG诱导表达,纯化,SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定结果显示,所构建的重组蛋白以可溶性形式高效表达并具有良好的反应原性,为制备特异性单抗及包被抗原用于PPRV抗体水平监测奠定了一定基础。 展开更多
关键词 小反刍兽疫 M蛋白 抗原表位 原核表达
基于狂犬病病毒重组蛋白的ELISA检测方法比较研究 预览
8
作者 程朝飞 宫苗苗 +4 位作者 田康乐 王勇 史利军 李刚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1925-1930,共6页
原核表达狂犬病病毒的基质蛋白(M),并以此作为包被抗原建立间接ELISA检测方法,与以狂犬病病毒磷蛋白(P)作为包被抗原建立的间接ELISA方法进行比较。根据GenBank中公布的狂犬病病毒LEP—Flury株M基因序列设计特异性引物并引入SmaI... 原核表达狂犬病病毒的基质蛋白(M),并以此作为包被抗原建立间接ELISA检测方法,与以狂犬病病毒磷蛋白(P)作为包被抗原建立的间接ELISA方法进行比较。根据GenBank中公布的狂犬病病毒LEP—Flury株M基因序列设计特异性引物并引入SmaI和NotI酶切位点,经RT—PCR扩增得到目的基因,连接pCR2.1载体,构建重组质粒pCR_Rv_M,重组质粒用SmaI和NotI进行双酶切,酶切产物定向克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组表达载体pGEX-RV-M。将重组表达载体转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,使用IPTG诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析表明蛋白表达量较大,且主要以可溶性的形式表达。亲和层析纯化目的蛋白,Westernblot表明融合蛋白具有良好的反应原性,使用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA方法并检测了95份血清,同时使用带有His标签的重组狂犬病病毒磷蛋白P(RV-His—P)建立的ELISA方法和商品化的ELISA试剂盒检测该血清。结果表明:与商品化的以全病毒作为包被抗原的ELISA检测试剂盒相比,使用重组P蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA检测方法具有更高的符合率,能够代替全病毒作为诊断抗原建立检测方法。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 基质蛋白M 原核表达 间接ELISA 磷蛋白P
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掺杂改性TiO2可见光光催化剂研究的最新进展 预览 被引量:28
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作者 谢银德 +3 位作者 张冰 王宪 栗栋 暴安杰 《硅酸盐通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 92-95,105,共5页
纳米TiO2在紫外光照射下具有良好的光催化活性,在环境污染物治理方面具有重要的应用前景。为提高TiO2对可见光的吸收,常常需要对TiO2进行掺杂改性以缩小其禁带宽度。本文综述了近些年来国内外在金属掺杂、非金属掺杂、金属-金属共掺杂... 纳米TiO2在紫外光照射下具有良好的光催化活性,在环境污染物治理方面具有重要的应用前景。为提高TiO2对可见光的吸收,常常需要对TiO2进行掺杂改性以缩小其禁带宽度。本文综述了近些年来国内外在金属掺杂、非金属掺杂、金属-金属共掺杂、金属-非金属共掺杂、非金属-非金属共掺杂以及杂多酸盐掺杂改性TiO2光催化剂方面的最新进展,并对TiO2可见光光催化剂的研究进行了展望。 展开更多
关键词 TiO2掺杂 光催化剂 可见光
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DNA疫苗的免疫佐剂 预览 被引量:4
10
作者 薛飞群 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第2期 79-86,共8页
本文综述了目前应用于DNA疫苗的几种免疫佐剂,诸如细胞因子、蛋白质分子、CpG寡核苷酸、化学分子、脂质体等,总结了DNA疫苗免疫佐剂的研究现状,探讨了该领域未来可能的发展方向。
关键词 DNA疫苗 免疫佐剂
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山羊组织中硝唑尼特代谢产物的液相色谱-串联质谱检测
11
作者 辛瑞祥 +3 位作者 张丽芳 王霄旸 江善祥 薛飞群 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期302-306,共5页
以替唑尼特为检测对象,建立了一种检测山羊组织中替唑尼特残留的液相色谱-串联质谱分析方法。样品经正己烷脱脂、乙腈提取,收集提取液于60℃水浴氮气吹干,乙腈溶解,经0.22μm微孔滤膜过滤后,采用多反应监测模式进行分析。结果显示,对于... 以替唑尼特为检测对象,建立了一种检测山羊组织中替唑尼特残留的液相色谱-串联质谱分析方法。样品经正己烷脱脂、乙腈提取,收集提取液于60℃水浴氮气吹干,乙腈溶解,经0.22μm微孔滤膜过滤后,采用多反应监测模式进行分析。结果显示,对于肝样品,替唑尼特在0.25~25μg/kg范围内线性关系良好(r^2〉0.99),检测限和定量限分别为0.1μg/kg和0.25μg/kg;对于肾、肌肉、脂肪样品,替唑尼特在0.1~25μg/kg范围内线性关系良好(r^2〉0.99),检测限和定量限依次为0.05μg/kg,0.1μg/kg;0.025μg/kg,0.05μg/kg;0.025μg/kg,0.05μg/kg。结果表明,该方法操作简单,灵敏度高,适用于山羊组织中替唑尼特残留量的检测。 展开更多
关键词 液相色谱-串联质谱法 替唑尼特 山羊组织 测定
DNA疫苗的优化策略 预览 被引量:1
12
作者 薛飞群 +1 位作者 杨素珍 陈贵锐 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期 206-208,共3页
此文从DNA疫苗载体的构建、保护性抗原编码序列的筛选、免疫佐剂的应用、接种途径的选择、分离纯化工艺的改进等方面介绍了DNA疫苗的优化策略。
关键词 DNA疫苗 载体 抗原 佐剂
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细胞因子在犬新孢子虫感染中的作用 预览
13
作者 刘群 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第8期 43-44,共2页
犬新孢子虫是一种专一性细胞内寄生虫,它的感染导致了宿主Th细胞的分化。一方面,刺激宿主产生Th1型细胞因子反应,这些细胞因子包括IL-12、IFN-7和INF-α。Th1型细胞因子反应同时还激活了产生氧自由基(FOR)、一氧化氮(NO)及其代... 犬新孢子虫是一种专一性细胞内寄生虫,它的感染导致了宿主Th细胞的分化。一方面,刺激宿主产生Th1型细胞因子反应,这些细胞因子包括IL-12、IFN-7和INF-α。Th1型细胞因子反应同时还激活了产生氧自由基(FOR)、一氧化氮(NO)及其代谢物,这些细胞因子对犬新孢子虫均具有致命的杀伤力。另一方面,引发宿主产生IL-4、IL-5和IL-10等Th2型细胞因子,Th2型细胞因子主要在宿主妊娠过程中发挥作用。 展开更多
关键词 犬新孢子虫 细胞因子 感染 IL-12 IL-10 内寄生虫 氧自由基 一氧化氮
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新孢子虫疫苗的研制概况 预览
14
作者 刘群 +1 位作者 赖志 龚建培 《上海畜牧兽医通讯》 2006年第3期 58-59,共2页
新孢子虫病呈世界性分布,是造成奶牛流产的一个主要原因,因奶牛流产和产奶量下降给奶牛业造成的经济损失十分巨大.目前,世界各国对新孢子虫病的防治研究日益重视,研究方向也从基础免疫入手,开拓化学方法以外的防治途径.随着研究的不断... 新孢子虫病呈世界性分布,是造成奶牛流产的一个主要原因,因奶牛流产和产奶量下降给奶牛业造成的经济损失十分巨大.目前,世界各国对新孢子虫病的防治研究日益重视,研究方向也从基础免疫入手,开拓化学方法以外的防治途径.随着研究的不断深入和研究手段的不断提高,人们利用免疫学、分子生物学和生物技术等先进技术对宿主抗犬新孢子虫的免疫反应及预防犬新孢子虫的疫苗进行了研究,并且取得了喜人的进展,本文即重点就疫苗的研制概况及展望进行了综述. 展开更多
关键词 新孢子虫病 疫苗 生物技术 分子生物学 奶牛业 经济损失 基础免疫 化学方法 免疫反应 世界性
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新孢子虫病诊断方法 预览 被引量:3
15
作者 刘群 +1 位作者 赖志 龚建培 《上海畜牧兽医通讯》 2006年第4期 43-45,共3页
新孢子虫病(Neosporosis)是由犬新孢子虫(Neospora caninum)引起的一种全球性的原虫病。该病给多种家畜带来严重的危害,主要引起孕畜流产或死胎,以及新生儿的运动障碍和神经系统疾病,给畜牧业造成很大的经济损失。关于该寄生虫... 新孢子虫病(Neosporosis)是由犬新孢子虫(Neospora caninum)引起的一种全球性的原虫病。该病给多种家畜带来严重的危害,主要引起孕畜流产或死胎,以及新生儿的运动障碍和神经系统疾病,给畜牧业造成很大的经济损失。关于该寄生虫是否感染人类,目前尚无定论,Graham等(1999)研究没有发现犬新孢子虫感染的证据,但Tranas等(1999)在一项研究中发现在1209个血液捐献者中有6.7%的人犬新孢子虫血清学阳性,因此犬新孢子虫感染人的潜在性不容忽视。鉴于新孢子虫病在公共卫生和畜牧业等方面的重要意义,已引起各国兽医界的关注。 展开更多
关键词 新孢子虫病 诊断方法 神经系统疾病 运动障碍 经济损失 公共卫生 畜牧业 原虫病 全球性 新生儿
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犬新孢子虫NcSRS2基因真核表达质粒的构建 预览 被引量:3
16
作者 刘群 汪明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期 819-822,共4页
根据犬新孢子虫NcSRS2基因序列,设计了1对含有Kozak序列、PstⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物,以含有NcSRS2基因的质粒P43为模板,经PCR扩增获得NcSRS2 ORF基因片段,用PstⅠ和XbaⅠ双酶切该片段,回收得到含有以上2个酶切位点黏端的NcSR2 ORF基因... 根据犬新孢子虫NcSRS2基因序列,设计了1对含有Kozak序列、PstⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物,以含有NcSRS2基因的质粒P43为模板,经PCR扩增获得NcSRS2 ORF基因片段,用PstⅠ和XbaⅠ双酶切该片段,回收得到含有以上2个酶切位点黏端的NcSR2 ORF基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pcDNA3.1(+)真核表达载体中,获得重组质粒pcNCSRS2.经PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性. 展开更多
关键词 犬新孢子虫 聚合酶链反应 NCSRS2基因 真核表达载体pcDNA3.1(+)
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蹄叶炎:毒素、组织胺与代谢紊乱 预览 被引量:4
17
作者 刘群 《中国草食动物》 2004年第4期 29-30,共2页
蹄叶炎是蹄真皮急性、亚急性和慢性弥散性、无败血性炎症,通常可侵害几个指(趾),呈现局部和全身性症候.既可能是原发性的,也可能继发于其他疾病.
关键词 蹄叶炎 病因 毒素 组织胺 代谢紊乱
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蹄叶炎:毒素、组织胺与代谢紊乱 预览 被引量:1
18
作者 刘群 《浙江畜牧兽医》 2004年第2期 10-11,共2页
家畜蹄叶炎是蹄真皮急性、亚急性和慢性弥散性炎症,可侵害几个指(趾),呈现局部和全身性症候.既可以是原发性的,也可能继发于其他疾病.到目前为止,发病原因说法不一,国内外学者多认为主要致病因素是毒素、组织胺和代谢紊乱.家畜患蹄叶炎... 家畜蹄叶炎是蹄真皮急性、亚急性和慢性弥散性炎症,可侵害几个指(趾),呈现局部和全身性症候.既可以是原发性的,也可能继发于其他疾病.到目前为止,发病原因说法不一,国内外学者多认为主要致病因素是毒素、组织胺和代谢紊乱.家畜患蹄叶炎时真皮血管系统受到侵害,导致指(趾)部毛细血管血液灌流量减少,造成局部缺血,这种血管变化在早期非常清楚,并且最早的病理变化是停滞性氧不足. 展开更多
关键词 蹄叶炎 毒素 组织胺 代谢紊乱 病理变化 病因 家畜
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蜱诱导宿主免疫的研究进展 预览
19
作者 刘涛 《信阳农业高等专科学校学报》 2004年第2期 38-41,共4页
蜱对人畜的危害很大,传统灭蜱措施主要是化药控制,而耐药性的出现,使得人们转而使用新的方法控制蜱.本文介绍了利用免疫方法控制蜱的一些成就,并对该研究方向做了进一步展望.
关键词 蜱诱导 宿主免疫 危害 耐药性
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