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生鲜乳中微生物检测技术研究进展 预览
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作者 赵艳坤 陈贺 +3 位作者 王帅 王富兰 蔡建星 王成 《中国奶牛》 2019年第4期52-56,共5页
我国现阶段乳品科技发展迅速,随之衍生一些乳品安全问题。目前,微生物引发的乳品污染问题仍然是乳品质量安全的重点和难点,生鲜乳质量安全影响着终端奶业发展,相关机构和部门都在探寻简单、便捷、廉价、高效的乳品微生物检测方法。本文... 我国现阶段乳品科技发展迅速,随之衍生一些乳品安全问题。目前,微生物引发的乳品污染问题仍然是乳品质量安全的重点和难点,生鲜乳质量安全影响着终端奶业发展,相关机构和部门都在探寻简单、便捷、廉价、高效的乳品微生物检测方法。本文就生鲜乳中微生物检测技术现状和进展进行简要综述,以供相关行业借鉴参考。 展开更多
关键词 生鲜乳 乳制品 质量安全 微生物 检测技术
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牛乳中硝基呋喃代谢物检测技术研究进展 预览
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作者 朱宁 赵艳坤 +2 位作者 蔡建星 安静 陈贺 《中国奶牛》 2019年第3期43-47,共5页
本文对牛乳中硝基呋喃类抗生素及其代谢物的残留危害和检测方法进行综述。介绍了样品前处理和仪器测定方法,包括高效液相色谱、液相色谱质谱联用、液相色谱串联质谱和酶联免疫吸附分析。同时综述了我国现有的关于硝基呋喃代谢物的检测方... 本文对牛乳中硝基呋喃类抗生素及其代谢物的残留危害和检测方法进行综述。介绍了样品前处理和仪器测定方法,包括高效液相色谱、液相色谱质谱联用、液相色谱串联质谱和酶联免疫吸附分析。同时综述了我国现有的关于硝基呋喃代谢物的检测方法,比较了各种方法的工作原理、适用范围以及各自的特点。 展开更多
关键词 牛乳 硝基呋喃代谢物 检测
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不同生物素水平对3T3-L1脂肪细胞脂肪分解及相关基因表达的影响 预览
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作者 雒诚龙 邵伟 +3 位作者 任万平 赵艳坤 武开乐 余雄 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第7期1783-1790,共8页
为研究不同生物素水平对3T3-L1脂肪细胞脂肪分解及相关基因表达的影响,本试验利用三联诱导法将3T3-L1细胞经诱导分化为3T3-L1脂肪细胞。当3T3-L1脂肪细胞密集后分别采用0(对照组)、0.2、0.5、1.0μmol/L生物素处理,分别在12、24与48h... 为研究不同生物素水平对3T3-L1脂肪细胞脂肪分解及相关基因表达的影响,本试验利用三联诱导法将3T3-L1细胞经诱导分化为3T3-L1脂肪细胞。当3T3-L1脂肪细胞密集后分别采用0(对照组)、0.2、0.5、1.0μmol/L生物素处理,分别在12、24与48h时检测细胞上清液中甘油释放量、脂肪甘油三酯水解酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)、脂滴包被蛋白A(perilipin A)及脂肪分化相关蛋白(ADRP)相对表达量。结果显示,在12h时,1.0μmol/L组甘油释放量、ATGL基因mRNA相对表达量均极显著低于对照组(P〈0.01),0.5、1.0μmol/L组HSL基因mRNA相对表达量显著低于对照组(P〈0.05),1.0μmol/L组perilipin A、ADRP基因mRNA相对表达量均极显著高于对照组与0.2μmol/L组(P〈0.01);在24h时,各试验组甘油释放量、1.0μmol/L组ATGL基因mRNA相对表达量均极显著低于对照组(P〈0.01),0.5、1.0μmol/L组perilipin A基因mRNA相对表达量极显著高于对照组与0.2μmol/L组(P〈0.01);1.0μmol/L组ADRP基因mRNA相对表达量极显著高于其他组(P〈0.01);在48h时,1.0μmol/L组甘油释放量、ATGL基因mRNA相对表达量均极显著或显著低于对照组(P〈0.01;P〈0.05),1.0μmol/L组perilipin A基因mRNA相对表达量显著高于对照组与0.2μmol/L组(P〈0.05),0.5、1.0μmol/L组ADRP基因mRNA相对表达量极显著高于对照组(P〈0.01)。综上所述,生物素可通过促进perilipin A与ADRP表达,同时抑制ATGL与HSL表达,达到抑制脂肪分解的效果,且浓度为1.0μmol/L时效果最佳。 展开更多
关键词 生物素 3T3-L1脂肪细胞 脂肪分解
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不同生物素水平对3T3-L1脂肪细胞脂肪合成相关基因转录表达的影响 预览
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作者 雒诚龙 邵伟 +3 位作者 任万平 赵艳坤 王东海 余雄 《新疆农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第2期371-378,共8页
【目的】诱导3T3-L1细胞分化为3T3-L1脂肪细胞,研究不同生物素水平对3T3-L1脂肪细胞脂肪合成相关基因转录表达的影响。【方法】利用三联诱导法将3T3-L1细胞经诱导分化为3T3-L1脂肪细胞。当3T3-L1脂肪细胞密集后分别采用0(对照组)、0.... 【目的】诱导3T3-L1细胞分化为3T3-L1脂肪细胞,研究不同生物素水平对3T3-L1脂肪细胞脂肪合成相关基因转录表达的影响。【方法】利用三联诱导法将3T3-L1细胞经诱导分化为3T3-L1脂肪细胞。当3T3-L1脂肪细胞密集后分别采用0(对照组)、0.2、0.5、1μmol/L生物素处理,分别在12 h、24 h与48 h时检测细胞上清液中PK mRNA、GLUT-4 mRNA、FAS mRNA及ACC1 mRNA相对表达量。【结果】在试验12 h时:各试验组GLUT-4、PK、ACC1 mRNA相对表达量均极显著(P<0.01)高于对照组,1μmol/L组与0.5μmol/L组FAS mRNA相对表达量极显著(P<0.01)高于对照组与0.2μmol/L组;在试验24 h时:1μmol/L组GLUT-4 mRNA与PK mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于对照组,1μmol/L组ACC1 mRNA相对表达量极显著(P<0.01)高于对照组,0.2μmol/L组与0.5μmol/L组ACC1 mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于对照组;在试验48 h时:1μmol/L组GLUT-4 mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于对照组,1μmol/L组PK mRNA相对表达量极显著(P<0.01)高于对照组,0.5μmol/L组FAS mRNA相对表达量极显著(P<0.05)高于1μmol/L组,1μmol/L组FAS mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于对照组,1μmol/L组ACC1 mRNA相对表达量极显著(P<0.01)高于其它组。【结论】生物素的添加可以提升脂肪细胞GLUT-4、PK、FAS与ACC1 mRNA相对表达量,且当以1μmol/L浓度作用时对GLUT-4、PK与ACC1提升效果最佳,以0.5μmol/L浓度作用时对FAS提升效果最佳。 展开更多
关键词 生物素 3T3-L1脂肪细胞 脂合成
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基于正则表达式的空间数据纠偏算法实现 预览
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作者 宋碧波 冯玉铃 +1 位作者 李旭 赵艳坤 《资源导刊》 2018年第22期30-32,共3页
在电子地图生产过程中,空间参考数据的来源多种多样,准确、高效地利用来源各异的空间数据,能够有效提高电子地图的生产效率 [1].采用一种基于GDAL和坐标信息正则替换的空间数据处理方法,实现了数据的快速批量纠偏、加偏,显著提高了多源... 在电子地图生产过程中,空间参考数据的来源多种多样,准确、高效地利用来源各异的空间数据,能够有效提高电子地图的生产效率 [1].采用一种基于GDAL和坐标信息正则替换的空间数据处理方法,实现了数据的快速批量纠偏、加偏,显著提高了多源空间数据的处理效率和整体利用率. 展开更多
关键词 电子地图 GDAL 空间数据 正则替换
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我国部分地区奶牛乳房炎无乳链球菌的分离及耐药性研究 预览
6
作者 王帅 陈贺 +5 位作者 赵艳坤 王富兰 蔡建星 曹双瑜 蔡扩军 徐敏 《中国奶牛》 2018年第11期36-39,共4页
本研究对黑龙江、上海、河北、山东、内蒙古的部分牧场共计497份乳房炎患牛的乳样进行无乳链球菌分离鉴定及药物敏感性分析,结果显示,共分离出无乳链球菌18株,内蒙古分离菌株对11种抗菌药物耐药,黑龙江省分离菌株对7种抗菌药物耐药。本... 本研究对黑龙江、上海、河北、山东、内蒙古的部分牧场共计497份乳房炎患牛的乳样进行无乳链球菌分离鉴定及药物敏感性分析,结果显示,共分离出无乳链球菌18株,内蒙古分离菌株对11种抗菌药物耐药,黑龙江省分离菌株对7种抗菌药物耐药。本结果可为上述地区的牧场在抗生素临床合理使用方面提供参考。 展开更多
关键词 乳房炎 无乳链球菌 耐药性
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新乡市国土资源土地利用批后监管系统研建 预览
7
作者 毛航 李旭 +1 位作者 窦小楠 赵艳坤 《资源导刊》 2018年第6期37-38,41共3页
国土资源批后监管是国土部门日常重点工作之一。以新乡数字城市建设项目为例,研究设计了如何在地理空间框架的基础上构建国土资源土地利用批后监管系统,实现项目跟踪管理、预警管理、警示管理、闲置管理、督办管理、历史项目以及统计... 国土资源批后监管是国土部门日常重点工作之一。以新乡数字城市建设项目为例,研究设计了如何在地理空间框架的基础上构建国土资源土地利用批后监管系统,实现项目跟踪管理、预警管理、警示管理、闲置管理、督办管理、历史项目以及统计查询等功能。 展开更多
关键词 数字城市 土地利用 国土一张图 批后监管
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奶牛脐带间充质干细胞介导PI3K/Akt/mTOR信号通路对乳腺上皮细胞凋亡调控研究 预览
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作者 王立文 余雄 +2 位作者 赵艳坤 李杨 邵伟 《中国畜牧杂志》 北大核心 2018年第3期50-53,共4页
本实验旨在探究脐带间充质干细胞(UC-MSCs)介导磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路对乳腺上皮细胞(BMECs)凋亡的调控作用。将处于对数生长期的UC-MSCs与BMECs按照1:2的比例混合共培养72... 本实验旨在探究脐带间充质干细胞(UC-MSCs)介导磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路对乳腺上皮细胞(BMECs)凋亡的调控作用。将处于对数生长期的UC-MSCs与BMECs按照1:2的比例混合共培养72 h,对照单独培养的UC-MSCs和BMECs,再分别用PI3K抑制剂LY294002(50μmol/mL)和mTOR抑制剂RAPA(50 nmol/mL)孵育细胞48 h,采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果表明:将UC-MSCs与BMECs共培养,能够显著抑制BMECs细胞凋亡,加入PI3K抑制剂LY294002和mTOR抑制剂RAPA孵育BMECs后,极显著地促进了BMECs细胞凋亡(P〈0.01),但是与UC-MSCs共培养后,这种抑制作用明显得到抵消。UC-MSCs通过介导PI3K/Akt/mTOR信号通路参与调控BMECs的凋亡;抑制剂LY294002和RAPA通过阻断PI3K/Akt/mTOR通路促进BMECs凋亡。综上可知,UC-MSCs能够激活被阻断的PI3K/Akt/mTOR信号通路,使其重新参与调控BMECs。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 乳腺上皮细胞 共培养 PI3K/AKT/MTOR 凋亡
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奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌耐药性研究进展 预览 被引量:2
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作者 赵艳坤 刘慧敏 +3 位作者 王帅 蔡建星 王成 陈贺 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2018年第10期18-25,共8页
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是奶牛乳房炎(Bovine mastitis)最主要致病菌之一。抗菌药物在奶牛乳房炎治疗中的作用无可替代,但随着严重依赖甚至过度使用抗菌药物,S.aureus耐药性等问题日益凸显,我国现阶段尤为严重... 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是奶牛乳房炎(Bovine mastitis)最主要致病菌之一。抗菌药物在奶牛乳房炎治疗中的作用无可替代,但随着严重依赖甚至过度使用抗菌药物,S.aureus耐药性等问题日益凸显,我国现阶段尤为严重。近年来,耐药菌株、耐药谱逐渐变宽,耐药水平不断提高,使其耐药性越来越强,耐药机制变得复杂,耐药基因种类繁多,导致乳房炎源S.aureus广谱耐药性和多重耐药性现象已经十分严重,甚至出现超级耐药细菌-耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA),为奶牛乳房炎治疗带来极大困难。S.aureus耐药性不仅对奶牛养殖业和乳房炎防治造成影响,同时直接或间接威胁人类健康。因此,监测S.aureus耐药性及变迁情况,探明其具体耐药机制是解决问题的关键。目前,S.aureus可通过产生修饰酶、改变抗菌药物的作用靶点、降低细胞壁的通透性等不同作用机制,对β-内酰胺类、氨基糖胺类、四环素类、大环内酯类、林可胺类和喹诺酮类等抗菌药物产生不同程度的耐药,但基因编码的分子耐药机制尚未明确。综述了奶牛乳房炎中S.aureus耐药性及其分子耐药机制,讨论了明确S.aureu耐药机制的意义及存在的问题,以期为奶牛乳房炎临床合理用药及有效防治提供思路和依据。 展开更多
关键词 乳房炎 金黄色葡萄球菌 抗菌药物 耐药 分子机制
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与脐带间充质干细胞共培养对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成及关键基因表达的影响
10
作者 赵艳坤 邵伟 余雄 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期784-790,共7页
探究与脐带间充质干细胞共培养对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂合成及关键基因表达的影响。将脐带间充质干细胞和乳腺上皮细胞利用Transwell小室双层共培养,BMECs单纯培养为对照组,IGF—IR抑制剂AG1024处理细胞,检测上清IGF—I、甘... 探究与脐带间充质干细胞共培养对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂合成及关键基因表达的影响。将脐带间充质干细胞和乳腺上皮细胞利用Transwell小室双层共培养,BMECs单纯培养为对照组,IGF—IR抑制剂AG1024处理细胞,检测上清IGF—I、甘油三酯(TAG)含量变化,再用磷脂酰肌醇3一羟激酶(P13K)信号阻断剂LY294002孵育细胞,RT—qPCR检测乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)、脂肪酸合成酶(FASN)和固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element,bindingproteins,SREBP1)基因的相对表达丰度。结果显示,共培养后BMECs的IGF—I含量极显著升高(P〈0.01),TAG含量显著升高(P〈0.05);加入AG1024后,IGFI明显受到抑制(P〈0.01),显著降低了各组TAG含量及各基因的表达丰度(P〈0.05);LY294002抑制了P13K(P〈0.01)、AKT、mTOR(P〈0.05)mRNA的表达,显著降低了TAG含量及ACACA、FASN、SREBPlmRNA的表达(P〈0.05);共同处理后极显著降低了TAG合成量及各基因相对表达丰度(P〈0.01)。结果表明,脐带间充质干细胞能够通过IGF—I介导P13K/Akt/mTOR信号通路上调BMECs乳脂合成关键基因的表达丰度,促进TAG的合成。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 奶牛乳腺上皮细胞 共培养 乳脂 基因表达
无乳链球菌耐药性及分子分型方法的研究进展 预览
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作者 蔡建星 赵艳坤 +2 位作者 王帅 陈贺 孙涛 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期114-124,共11页
无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)是链球菌属最主要的致病菌之一,又被称为B群链球菌(group B Streptococcus,GBS)。S.agalactiae致病性主要由毒力因子和表面蛋白引起,毒力因子包括荚膜多糖、溶血素、菌毛岛屿、透明质酸酶、磷酸甘... 无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)是链球菌属最主要的致病菌之一,又被称为B群链球菌(group B Streptococcus,GBS)。S.agalactiae致病性主要由毒力因子和表面蛋白引起,毒力因子包括荚膜多糖、溶血素、菌毛岛屿、透明质酸酶、磷酸甘油激酶和CAMP因子,表面蛋白是αC蛋白、表面免疫相关蛋白、黏附蛋白、纤维蛋白原结合蛋白、层黏连蛋白结合蛋白和纤溶酶受体蛋白。近8年的S.agalactiae耐药情况统计数据发现,S.agalactiae已对19种抗菌抗药物产生耐药,检出20个耐药基因和12种毒力因子。国内外S.agalactiae分子分型方法主要致力于血清型、多位点序列、脉冲场凝胶电泳、菌毛岛屿和细菌前噬菌体基因分型。本文阐述了S.agalactiae生物学特性、流行性致病信息、耐药性研究现状和分子分型方法研究进展,以期为进一步探明S.agalactiae耐药机制、开发治疗S.agalactiae的新型药物提供参考。 展开更多
关键词 无乳链球菌 耐药基因 毒力基因 分子分型
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与脐带间充质干细胞共培养促进奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成及其机制
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作者 赵艳坤 邵伟 +2 位作者 雒诚龙 武开乐 余雄 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期185-189,共5页
目的研究脐带间充质干细胞(UCMSC)调节奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)乳蛋白合成的可能作用机制。方法利用TranswellTM小室将UCMSC和BMEC进行双层共培养,BMEC单纯培养为对照组,胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂AG1024处理细胞,ELISA... 目的研究脐带间充质干细胞(UCMSC)调节奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)乳蛋白合成的可能作用机制。方法利用TranswellTM小室将UCMSC和BMEC进行双层共培养,BMEC单纯培养为对照组,胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂AG1024处理细胞,ELISA检测上清IGF-1和β酪蛋白(CSN2)、κ酪蛋白(CSN3)含量变化,实时定量PCR检测Janus激酶2/信号转导子与转录激活子5(JAK2/STAT5)信号通路相关基因的相对表达丰度;再用JAK2信号通路阻断剂AG490孵育细胞,实时定量PCR检测CSN2、CSN3 mRNA的相对表达丰度。结果与UCMSC共培养后,BMEC的CSN2、CSN3合成量和CSN2、CSN3、JAK2、STAT5、E74样ETS转录因子5(ELF5)mRNA相对表达丰度均显著高于单纯培养的BMEC;AG1024处理后,显著降低BMEC的CSN2、CSN3合成量,显著降低CSN2、CSN3、JAK2、STAT5、ELF5 mRNA的相对表达丰度;给予AG490阻断后,显著降低CSN2、CSN3 mRNA相对表达丰度;在AG1024基础上,加入AG490后显著降低CSN2、CSN3 mRNA相对表达丰度。结论UCMSC能够通过IGF-1介导JAK2/STAT5信号通路,上调BMEC乳蛋白合成关键基因mRNA的表达丰度,促进其乳蛋白的合成。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞(UCMSC) 牛乳腺上皮细胞(BMEC) 共培养 乳蛋白 β酪蛋白(CSN2) κ酪蛋白(CSN3)
无血清共培养条件下脐带间充质干细胞对奶牛乳腺上皮细胞的增殖作用 预览 被引量:2
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作者 赵艳坤 邵伟 +1 位作者 雒诚龙 余雄 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期391-398,共8页
目的旨在探究无血清共培养条件下脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary gland epithelial cells,BMECs)的增殖作用。方法选取生长状态最佳的UC-MSCs和BMECs,将两种细... 目的旨在探究无血清共培养条件下脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary gland epithelial cells,BMECs)的增殖作用。方法选取生长状态最佳的UC-MSCs和BMECs,将两种细胞以直接接触和间接接触两种共培养方式作为试验组,直接接触是按照UCMSCs:BMECs分别为2∶1、1-阴性空白对照,于0、4、8、12、24、36、48、60、72 h时观察各组细胞的生长变化,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况。结果在48 h,条件培养基BMECs组A值显著高于对照组(P〈0.05),而1∶2浓度组A值达到峰值,极显著高于对照组(P〈0.01),显著高于其他各浓度组和条件培养基BMECs组(P〈0.05)。结论无血清条件下,UC-MSCs和BMECs共培养可以促进BMECs增殖,直接接触促增殖效果优于间接接触,且最适比例为1∶2,最佳时间是48 h。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 乳腺上皮细胞 无血清 共培养 增殖
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添加通路阻断剂对IGF-1影响奶牛乳腺上皮细胞增殖与凋亡的研究 预览 被引量:1
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作者 雒诚龙 赵艳坤 +1 位作者 武开乐 邵伟 《中国畜牧兽医》 北大核心 2017年第8期2277-2282,共6页
试验旨在研究胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)增殖的影响,为后期利用IGF-1调控乳腺发育奠定理论基础。以奶牛乳腺上皮细胞为材料,首先分4组分... 试验旨在研究胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)增殖的影响,为后期利用IGF-1调控乳腺发育奠定理论基础。以奶牛乳腺上皮细胞为材料,首先分4组分别外源添加0(对照组)、10、50、100μg/mL IGF-1且分别培养12、24、48、72h,测定抑制BMECs凋亡率的最佳浓度;然后分6组:单纯BMECs组、BMECs+IGF-1组、BMECs+LY294002组、BMECs+IGF-1+LY294002组、BMECs+RAPA组和BMECs+IGF-1+RAPA组,采用流式细胞术测定各组细胞凋亡率。结果表明,外源性添加IGF-1对BMECs凋亡率具有抑制作用,最佳浓度为50μg/mL;BMECs+IGF-1+LY294002与BMECs+IGF-1+RAPA组细胞凋亡率均极显著高于BMECs+IGF-1组(P〈0.01)。推断IGF-1能够活化PI3K/Akt/mTOR信号通路,参与BMECs凋亡的调控作用,进而抑制BMECs细胞凋亡;IGF-1可能会对被抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路产生"修复"机制,使其能够重新参与BMECs的生命进程。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1(IGF-1) 奶牛乳腺上皮细胞(BMECs) 增殖 凋亡
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脐带间充质干细胞通过类胰岛素样生长因子-Ⅰ介导的Janus激酶/信号转导及转录活化因子信号通路抑制奶牛乳腺上皮细胞凋亡的体外研究 预览
15
作者 赵艳坤 邵伟 +2 位作者 雒诚龙 武开乐 余雄 《动物营养学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期1335-1342,共8页
本试验旨在探究Janus激酶/信号转导及转录活化因子(JAK/STAT)信号通路是否参与脐带间充质干细胞(UC-MSCs)通过类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)抑制奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)凋亡的调节。将UC-MSCs和BMECs利用TranswellTM小室双层... 本试验旨在探究Janus激酶/信号转导及转录活化因子(JAK/STAT)信号通路是否参与脐带间充质干细胞(UC-MSCs)通过类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)抑制奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)凋亡的调节。将UC-MSCs和BMECs利用TranswellTM小室双层共培养,以BMECs单纯培养为对照,给予类胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)抑制剂AG1024进行干预,并用信号阻断剂AG490处理细胞,24 h后采用实时荧光定量PCR检测各组细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)基因的相对表达丰度,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果表明:UC-MSCs和BMECs共培养组BMECs的凋亡率极显著低于其他各组(P〈0.01);UC-MSCs和BMECs共培养组Bcl-2基因的相对表达丰度较BMECs组极显著上调(P〈0.01),Caspase-3、Bax基因的相对表达丰度则显著或极显著下调(P〈0.05或P〈0.01);AG1024和AG490单独处理或二者共同处理升高了单独培养的BMECs和与UC-MSCs共培养的BMECs的凋亡率,并上调了Bax、Caspase-3基因的相对表达丰度,下调了Bcl-2基因的相对表达丰度,均具有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。由此得出,UC-MSCs能够通过IGF-Ⅰ介导JAK/STAT信号通路调节BMECs凋亡相关基因的表达,降低BMECs的凋亡率。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 乳腺上皮细胞 共培养 IGF-Ⅰ JAK/STAT 凋亡
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与脐带间充质干细胞共培养对乳腺上皮细胞乳脂合成及关键基因表达的影响 预览 被引量:1
16
作者 赵艳坤 邵伟 +1 位作者 王立文 余雄 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期846-853,共8页
旨在探究奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)与脐带间充质干细胞(UC-MSCs)共培养对(BMECs)乳脂合成及关键基因表达的影响。试验共分为8组:共培养组为UC-MSCs和BMECs共培养条件下的不处理组、IGF-1R抑制剂AG1024处理组、Janus激酶和转录活... 旨在探究奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)与脐带间充质干细胞(UC-MSCs)共培养对(BMECs)乳脂合成及关键基因表达的影响。试验共分为8组:共培养组为UC-MSCs和BMECs共培养条件下的不处理组、IGF-1R抑制剂AG1024处理组、Janus激酶和转录活化因子(JAK/STAT)信号通路信号阻断剂AG490处理组及AG1024+AG490处理组,对照组为BMECs单培养条件下的不处理组、IGF-1R抑制剂AG1024组、Janus激酶和转录活化因子(JAK/STAT)信号通路信号阻断剂AG490组及AG1024+AG490处理组。检测各组上清IGF-1、甘油三酯(TG)含量变化;RT-qPCR检测乙酰辅酶A羧化酶(ACACA),脂肪酸合成酶(FASN)和固醇调节元件结合蛋白(Sterol regulatory element binding proteins,SREBP1)基因的相对表达丰度。结果表明,共培养组IGF-1、TG含量均显著高于对照组(P〈0.05);AG1024处理对IGF-1具有极显著抑制效果(P〈0.01),显著降低TG含量及ACACA、FASN、SREBP1mRNA相对表达丰度(P〈0.05);AG490处理对ACACA、FASN、SREBP1mRNA的表达无显著影响(P〉0.05);AG1024和AG490共同处理较AG1024单独处理各项指标表现差异不显著(P〉0.05)。综上表明,脐带间充质干细胞能够通过IGF-1促进乳腺上皮细胞乳脂合成及关键基因的表达,JAK2/STAT5信号通路不参与脐带间充质干细胞对乳腺上皮细胞乳脂调控。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 乳腺上皮细胞 共培养 乳脂 基因表达
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移植BMSCs对3-9月龄奶山羊乳腺发育显微结构的影响
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作者 李杨 邵伟 +2 位作者 王立文 赵艳坤 余雄 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期47-50,293共5页
为了分析探究移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对萨能奶山羊乳腺组织发育的影响,试验选取2月龄且体重接近的健康萨能奶山羊16只,随机分为对照组和试验组,将扩增至P6代的BMSCs按体重5×10^5个/kg经颈静脉注射至奶山羊体内,对照组... 为了分析探究移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对萨能奶山羊乳腺组织发育的影响,试验选取2月龄且体重接近的健康萨能奶山羊16只,随机分为对照组和试验组,将扩增至P6代的BMSCs按体重5×10^5个/kg经颈静脉注射至奶山羊体内,对照组注射等量生理盐水,在相同饲养管理条件下饲养,分别在3,5,7月龄进行乳腺组织样品采集,制备乳腺组织冰冻切片,在显微镜下观察3,5,7月龄奶山羊乳腺组织形态及各组乳腺组织导管数和腺泡数。在7,8,9月龄测定乳房线性性状包括乳房宽度、乳房深度、乳房围、乳房高度、乳房纵沟深、乳头长度、乳头直径、乳头左右间距、乳房曲深、乳房附着高度、乳房附着宽度共计11个指标。结果表明:奶山羊移植BMSCs后,3月龄时试验组与对照组差异不显著(P〉0.05);5月龄时试验组乳腺导管变粗,腺泡增多,试验组导管数、腺泡数均显著高于对照组(P〈0.05);7月龄时试验组乳腺发育明显快于对照组,导管生长更明显,且试验组导管数、腺泡数均显著高于对照组(P〈0.05)。试验组各项乳房线性性状均高于对照组。其中乳房宽度、乳房深度试验组8月龄和9月龄显著高于对照组(P〈0.05)。说明注射BMSCs能促进奶山羊乳腺导管延伸、变粗,增加腺泡数,促进乳腺组织发育。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞(BMSCs) 显微结构 导管 腺泡 乳腺发育
脂滴发育中代谢相关的结构蛋白研究进展 预览
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作者 雒诚龙 邵伟 +1 位作者 赵艳坤 余雄 《中国畜牧兽医》 北大核心 2017年第5期1321-1328,共8页
一般认为脂滴是脂肪细胞中甘油三酯的贮存器,但近来研究发现细胞中脂肪的运输贮存与动员分解都是以脂滴为核心完成的,种种现象揭示了脂滴在细胞内并不仅仅是一个简单的能量贮存器,而更多地扮演着一个多功能细胞器的角色。通过对脂滴结... 一般认为脂滴是脂肪细胞中甘油三酯的贮存器,但近来研究发现细胞中脂肪的运输贮存与动员分解都是以脂滴为核心完成的,种种现象揭示了脂滴在细胞内并不仅仅是一个简单的能量贮存器,而更多地扮演着一个多功能细胞器的角色。通过对脂滴结构进行分析发现,脂滴以中性脂肪为核心,表面覆盖单层磷脂结构并镶嵌多种功能蛋白,即脂滴相关蛋白。脂滴相关蛋白以不同形式协同脂滴参与调控脂代谢、膜转运及信号转导等多个生理过程。根据蛋白承载功能的不同,可大致将其分为三大类:脂滴结构蛋白、脂滴代谢相关蛋白与脂滴转运蛋白。其中,结构蛋白如PAT家族蛋白、CIDE家族蛋白等在脂滴发育代谢的调控与信息传递介导中发挥着重要作用,此外,还有激素敏感脂肪酶、脂肪甘油三酯水解酶与Rab蛋白等代谢与转运蛋白通过不同形式参与脂滴发育。目前,脂滴相关蛋白新种类与具体作用机制仍在不断探索中。作者就细胞中脂滴与脂代谢及脂滴相关蛋白的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 脂滴 代谢 脂滴相关蛋白
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丙二酰辅酶A对小鼠脂肪细胞甘油三酯及其代谢产物的影响 预览
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作者 任万平 邵伟 +2 位作者 雒诚龙 赵艳坤 余雄 《新疆农业大学学报》 北大核心 2017年第3期171-178,共8页
旨在研究丙二酰CoA对小鼠脂肪细胞甘油三酯及其代谢产物的影响,将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞做为研究对象,在诱导培养第14天,加入含0(对照组)、20μmol/L(试验Ⅰ组)、50μmol/L(试验Ⅱ组)、200μmol/L(试验Ⅲ组)... 旨在研究丙二酰CoA对小鼠脂肪细胞甘油三酯及其代谢产物的影响,将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞做为研究对象,在诱导培养第14天,加入含0(对照组)、20μmol/L(试验Ⅰ组)、50μmol/L(试验Ⅱ组)、200μmol/L(试验Ⅲ组)的丙二酰CoA完全培养基培养细胞0、36、72h,收集细胞进行ELISA及后续检测。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组合成的甘油三酯量高于对照组水平(P〈0.01);试验各组乙酰CoA羧化酶、脂肪酸合成酶、柠檬酸等含量均高出对照组水平(P〈0.01);试验各组激素敏感脂肪酶、肉碱脂酰转移酶Ⅰ、游离脂肪酸及乙酰CoA等含量均极显著低于对照组水平(P〈0.01)。丙二酰CoA能够促进小鼠脂肪细胞甘油三酯的合成和沉积,且丙二酰CoA的浓度在一定范围内随着时间和甘油三酯合成量成正相关;50μmol/L丙二酰CoA为最佳浓度,在此浓度下脂肪细胞能够最大化的合成甘油三酯;丙二酰CoA还能提高甘油三酯合成代谢中乙酰CoA羧化酶、脂肪酸合成酶、柠檬酸等产物的含量(P〈0.01);能够降低甘油三酯分解代谢中激素敏感脂肪酶、肉碱脂酰转移酶Ⅰ、游离脂肪酸及乙酰CoA等产物的含量(P〈0.01)。 展开更多
关键词 丙二酰CoA 小鼠脂肪细胞 甘油三酯 脂代谢
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IGF-Ⅰ及其受体对奶牛乳腺上皮细胞泌乳性能的影响 被引量:1
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作者 赵艳坤 邵伟 +2 位作者 王立文 李杨 余雄 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第3期58-62,共5页
乳腺发育及泌乳是由机体内分泌系统严格控制的复杂过程,受多种激素和细胞因子等因素的调控,许多外源激素和生长因子对乳腺生长发育、泌乳的启动和维持具有十分重要的调节作用。而具有促进细胞分化和增殖作用的类胰岛素样生长因子-Ⅰ(in... 乳腺发育及泌乳是由机体内分泌系统严格控制的复杂过程,受多种激素和细胞因子等因素的调控,许多外源激素和生长因子对乳腺生长发育、泌乳的启动和维持具有十分重要的调节作用。而具有促进细胞分化和增殖作用的类胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin like growth factors-Ⅰ,IGF-Ⅰ)在奶牛乳腺生长发育中起重要作用,IGF-Ⅰ可促进细胞生长分化和存活,从而维持泌乳细胞的数量和泌乳性能,可以说IGF-Ⅰ是促进泌乳和维持泌乳更直接的生长因子。近年来,IGF-Ⅰ对动物乳腺发育和泌乳性能的影响也成为研究热点之一,因此文章扼要叙述了IGF-Ⅰ及其受体对乳腺上皮细胞及泌乳等的影响和可能的作用机制。 展开更多
关键词 类胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ) IGF-I受体(IGF-ⅠR) 乳腺上皮细胞 信号通路 泌乳
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