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人胚胎干细胞向嗜酸性粒细胞高效定向诱导分化模型的建立 被引量:1
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作者 杨文钰 +11 位作者 孙文翠 毛斌 郁金凤 黄淑 赖默温 周涯 邹庆 李晴 曾宪波 周家喜 马峰 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期479-482,共4页
目的建立从人胚胎干细胞向成熟嗜酸性粒细胞定向诱导分化的高效体外培养模型。方法采用人胚胎干细胞与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM)基质细胞共培养的方法,进行早期造血干细胞诱导分化,将诱导分化的造血干细胞进行悬浮培养,在含有血清... 目的建立从人胚胎干细胞向成熟嗜酸性粒细胞定向诱导分化的高效体外培养模型。方法采用人胚胎干细胞与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM)基质细胞共培养的方法,进行早期造血干细胞诱导分化,将诱导分化的造血干细胞进行悬浮培养,在含有血清的培养基中,分阶段添加不同细胞因子组合进行成熟嗜酸性粒细胞的定向分化和增殖。结果获得从CD34^+CD45^+细胞扩增了约651倍,且纯度高达95%以上,CD88^+Siglec-8^+EPO^+的成熟嗜酸性粒细胞。结论本研究建立了1种人胚胎干细胞高效定向分化为成熟嗜酸性粒细胞的模型,为进一步深入研究嗜酸性粒细胞的早期发育调控和相关疾病的发生机制奠定了基础。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 嗜酸性粒细胞 定向诱导分化
人胚胎干细胞高效诱导产生巨噬细胞方法的建立 被引量:5
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作者 郁金凤 孙文翠 +13 位作者 边国慧 毛斌 黄淑 赖默温 周涯 邹庆 李晴 曾宪波 李玉佳 陈利民 周家喜 马峰 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期482-487,共6页
目的利用人胚胎干细胞(h ESCs)建立高效巨噬细胞体外诱导分化体系,并与人脐带血CD34+细胞来源的巨噬细胞进行比较。方法通过将h ESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM)来源的基质细胞共培养产生CD34^+CD45^+造血干祖细胞,在多种细... 目的利用人胚胎干细胞(h ESCs)建立高效巨噬细胞体外诱导分化体系,并与人脐带血CD34+细胞来源的巨噬细胞进行比较。方法通过将h ESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM)来源的基质细胞共培养产生CD34^+CD45^+造血干祖细胞,在多种细胞因子的诱导下悬浮培养14 d,利用May-Grünwald Giemsa染色、流式表面抗原及功能检测等方法对我们培养的巨噬细胞和人脐带血CD34^+细胞来源的巨噬细胞进行比较鉴定。结果该方法可产生大量高纯度的巨噬细胞,成功的建立了体外高效诱导的巨噬细胞分化体系,并且该体系获得的巨噬细胞与人脐带血CD34^+细胞来源的巨噬细胞具有相似的表型和功能。结论建立高效巨噬细胞体外诱导分化体系,为进一步研究人类巨噬细胞的早期发育和建立相关疾病模型提供了可靠的方法。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞(hESCs) 巨噬细胞 诱导分化
拟胚体培养体系中造血表面标志的变化及其向红细胞分化潜能的研究 被引量:1
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作者 郁金凤 +11 位作者 孙文翠 毛斌 邹庆 赖默温 周涯 李晴 曾宪波 黄淑 周琼秀 周家喜 马峰 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期488-492,共5页
目的探讨拟胚体(EB)造血相关表面标志物的变化及其向红细胞定向诱导分化的潜能。方法利用悬浮培养体系使人胚胎干细胞(h ESCs)形成三维囊状结构(EB),通过添加细胞因子BMP-4、SCF和FL使EB向造血前体细胞分化,通过流式细胞术(FACs... 目的探讨拟胚体(EB)造血相关表面标志物的变化及其向红细胞定向诱导分化的潜能。方法利用悬浮培养体系使人胚胎干细胞(h ESCs)形成三维囊状结构(EB),通过添加细胞因子BMP-4、SCF和FL使EB向造血前体细胞分化,通过流式细胞术(FACs)检测细胞发育各个阶段内皮及血细胞表面分子的变化情况以判断细胞的不同发育阶段。采用胰酶消化处理的方式将EB消化为单个细胞并向红细胞诱导分化,在诱导的d7、d14、d21取样,流式检测分析红细胞的成熟程度。结果在EB培养体系中,d6即可检测到造血前体细胞表面标志物CD34和CD31,且在EB培养的d6-d21,CD34^+CD31^+细胞的比例逐渐升高,到d15达到顶峰(8.86%)。在红细胞定向分化过程中,红细胞的纯度达73.22%,免疫荧光染色显示:ε亚基的阳性率为88%(424/482),γ亚基的阳性率为94%(326/347),而β亚基的阳性率为0%(0/167)。结论建立了1种EB悬浮培养体系和体外诱导红细胞的方法;EB的造血相关表面标志物的表达呈现时序性变化,且由EB分化而来的红细胞具有早期胚胎红细胞的发育特点。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞(hESCs) 拟胚体(EB) 造血表面标志 红细胞 悬浮培养 体外诱导
颗粒性急性淋巴细胞白血病的实验室检查及诊断分析二例 预览
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作者 肖继刚 田欣 +4 位作者 蔡文宇 孟洁 王慧君 汝昆 《中华临床实验室管理电子杂志》 2015年第4期253-256,共4页
颗粒性急性淋巴细胞白血病(granular acute lymphoblastic leukemia,G-ALL)是一种少见的ALL亚型,细胞质中可见较多的粗大颗粒。形态上极易与部分急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)及大颗粒淋巴细胞白血病(large gra... 颗粒性急性淋巴细胞白血病(granular acute lymphoblastic leukemia,G-ALL)是一种少见的ALL亚型,细胞质中可见较多的粗大颗粒。形态上极易与部分急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)及大颗粒淋巴细胞白血病(large granular lymphocytic leukemia,LGLL)相混淆。我院在近期诊断2例G-ALL,现报告和结合文献讨论, 展开更多
关键词 急性髓系白血病 GRANULAR LYMPHOCYTIC LYMPHOBLASTIC 诊断分析 免疫表型 特异性分子标志 骨髓涂片 淋巴细胞白血病 髓系抗原
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