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肿瘤来源的IgG抑制脐带血中T细胞的增殖 预览 被引量:1
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作者 刘恩阳 刘静芳 +4 位作者 邵文威 肖琳 李国辉 《北京大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2017年第5期824-828,共5页
目的:探究肿瘤来源的IgG是否对T细胞活化具有抑制作用。方:首先从卵巢癌肿瘤组织纯化了肿瘤来源的IgG(tumorderivedIgG,tlgG),并从胳带血中分离出单个核细胞(cordbloodmononuclearcells,CBMC)及淋巴细胞(cordbloodlymphocyte,CBL... 目的:探究肿瘤来源的IgG是否对T细胞活化具有抑制作用。方:首先从卵巢癌肿瘤组织纯化了肿瘤来源的IgG(tumorderivedIgG,tlgG),并从胳带血中分离出单个核细胞(cordbloodmononuclearcells,CBMC)及淋巴细胞(cordbloodlymphocyte,CBL),用植物血球凝集素(phytohaemagglutinin,PHA)刺激单个核细胞和淋巴细胞,使单个核细胞与淋巴细胞处于增殖状态,用黃光染料轻基黃光素二醋酸盐琥拍酰亚胺醋〇31'13(^7£111()1^。6111&11(^1111^-dylammoeSter,CFSE)染色,CFSE对细胞无毒性,可以穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白结合,其黃光强度会随着细胞的分裂增殖而逐级递减,从而可以检测细胞增殖的情况。把从卵巢癌肿瘤组织中纯化得到的tlgG分为1L、10mg/L和100mg/L组,分别加人到单个核细胞和淋巴细胞中,静脉注射用免疫球蛋白(intravenousimmunoglobulin,IVIG)作为阳性对照,也分为1mg/L、10mg/L和100mg/L组,磷酸缓冲盐溶液(phosphatebuffersaline,PBS)作为阴性对照,用细胞流式术检测CD4+及CD8+T细胞的增殖能力,并分别在64h和86h两个时间点检测细胞的增殖情况。结票:在CBMC体系中加人的tlgG可以明显地抑制CBMC中T细胞的增殖,发挥免疫抑制作用;同样,在CBL体系中加人的tlgG对T细胞也有抑制作用,且加人tlgG刺激的T细胞比加人IVIG刺激的T细胞的抑制增殖作用更强;在CBL体系中,tlgG的1m#L组和10mg/L组对T细胞发挥的抑制增殖作用比100mg/L组弱。结讼:tlgG可以抑制T细胞的增殖,促使肿瘤发挥肿瘤免疫逃逸效应。 展开更多
关键词 免疫球蛋白G 免疫逃逸 肿瘤 T淋巴细胞
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免疫球蛋白A在人肾小球系膜细胞中的合成与分泌 预览 被引量:1
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作者 邓会 马骏凡 +5 位作者 景子洋 梁耀先 阿拉塔 刘洋 王悦 《北京大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2017年第6期948-953,共6页
目的:探讨人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)中是否表达免疫球蛋白A(immunoglobulin A,Ig A)。方法:培养人HMCs细胞系,以免疫荧光染色检测Igα、Igκ、Igλ在系膜细胞中的表达;以反转录聚合酶链式反应(reverse trans... 目的:探讨人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)中是否表达免疫球蛋白A(immunoglobulin A,Ig A)。方法:培养人HMCs细胞系,以免疫荧光染色检测Igα、Igκ、Igλ在系膜细胞中的表达;以反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和DNA测序检测HMCs中Igα、Igκ、Igλ恒定区转录本表达;以Western blot方法检测细胞裂解液及培养上清液中Igα、Igκ、Igλ蛋白水平表达;以jacalin为配体的亲和层析纯化上清液蛋白质,以蛋白质谱检测纯化的蛋白氨基酸序列。结果:免疫荧光染色检测到HMCs细胞浆Igα、Igκ、Igλ的阳性表达;RT-PCR检测到细胞内Igα1、Igα2重链、Igκ轻链、Igλ轻链恒定区转录本表达,且其核苷酸序列与美国国立生物技术信息中心(National Center of Biotechnology Information,NCBI)数据库相应的mRNA序列比对,同源性分别达到99%、97%、98%和97%;Western blot检测到细胞内Igα1、Igα2和Igλ蛋白水平的表达,Igκ目前检测为阴性;细胞上清液中可见完整Ig A分子表达;以jacallin为配体亲和层析纯化的培养上清液中的Ig A,蛋白质谱测序所得的氨基酸片段序列与NCBI数据库比对,显示HMCs分泌的蛋白质与B细胞表达的Igα1恒定区52-104之间53个氨基酸、154-221之间68个氨基酸、以及276-327之间52个氨基酸的序列完全相同,与Igα2重链恒定区52-113之间62个氨基酸、151-204之间54个氨基酸、以及251-314之间64个氨基酸的序列完全相同,提示系膜细胞可以将合成的Ig A分泌到胞外。结论:HMCs可能合成并分泌Ig A。 展开更多
关键词 人肾小球系膜细胞 免疫球蛋白A 蛋白质谱 DNA测序
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非B细胞来源的免疫球蛋白促进肿瘤的发生和发展 被引量:2
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作者 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期183-190,共8页
免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)是一类最重要的免疫分子,是B淋巴细胞的特有产物,分泌型Ig通过不同的机制发挥着重要的免疫防御作用,即抗体活性;膜结合型Ig是B细胞识别抗原受体(B cell antigen receptor,BCR),这是目前仍然写在国内外免... 免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)是一类最重要的免疫分子,是B淋巴细胞的特有产物,分泌型Ig通过不同的机制发挥着重要的免疫防御作用,即抗体活性;膜结合型Ig是B细胞识别抗原受体(B cell antigen receptor,BCR),这是目前仍然写在国内外免疫学教材的经典概念。然而,近年来越来越多的研究证据表明,机体内还存在一类迄今未被关注的、非B细胞来源的Ig分子(non B-Ig),它们在可变区重排模式、表达调控及功能等方面有别于经典的Ig分子。non B-Ig的突出特点是在恶性转化的细胞中高水平表达,其表达水平与肿瘤的不良分化及不良预后密切相关;功能研究显示,non B-Ig促进肿瘤细胞的生长及生存,并参与肿瘤的发生及发展。研究提示,non B-Ig具有原癌基因的潜质,有可能成为多种肿瘤新的治疗靶点。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 非B细胞 肿瘤发生 肿瘤发展
解整合素金属蛋白酶10在重度子痫前期胎盘中的表达及其意义 预览 被引量:1
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作者 刘静芳 赵丽君 +3 位作者 王宠 刘国莉 王建六 《中国妇产科临床杂志》 2013年第6期516-519,共4页
目的通过对孕妇胎盘组织中解整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10)的检测,探讨ADAM10与子痫前期发病的关系。方法选择2009年9月至2012年3月在北京大学人民医院产科住院分娩的30例重度子痫前期(子痫... 目的通过对孕妇胎盘组织中解整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10)的检测,探讨ADAM10与子痫前期发病的关系。方法选择2009年9月至2012年3月在北京大学人民医院产科住院分娩的30例重度子痫前期(子痫前期组)和30例正常孕妇(正常妊娠组),采用反转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测两组孕妇胎盘组织中ADAM10 mRNA的表达,并采用免疫组化二步法和蛋白质印迹法(Western Blot)检测胎盘组织中ADAM10蛋白的表达。结果ADAM10表达于胎盘组织的细胞滋养细胞和合体滋养细胞的细胞浆和细胞核中。子痫前期组中ADAM10 mRNA及蛋白的表达均明显高于正常妊娠组(P〈0.05)。结论重度子痫前期胎盘组织中ADAM10的过度表达可能与子痫前期的发生和发展有关。 展开更多
关键词 解整合素金属蛋白酶10 胎盘 子痫前期
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Ig启动子有效启动肿瘤抑制基因的表达研究 被引量:1
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作者 何峙峤 毋丽娜 +2 位作者 马腾 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期136-141,共6页
免疫球蛋白(Ig)启动子在多种上皮性肿瘤细胞具有高启动活性。采用PCR方法获得了Ig重链VH6—1启动子,用该启动子DNA序列替换真核表达载体(PDC316)中巨细胞白血病病毒启动子(CMV)序列,构建了Ig启动子/人增殖抑制基因(hHSG)/PDC... 免疫球蛋白(Ig)启动子在多种上皮性肿瘤细胞具有高启动活性。采用PCR方法获得了Ig重链VH6—1启动子,用该启动子DNA序列替换真核表达载体(PDC316)中巨细胞白血病病毒启动子(CMV)序列,构建了Ig启动子/人增殖抑制基因(hHSG)/PDC316表达载体。结果显示,与CMV启动子相比,Ig启动子能够更有效地启动hHSC基因的表达,并显示其生长抑制作用和诱导凋亡作用。提示Ig启动子可作为肿瘤靶向治疗载体中的启动子,在肿瘤基因治疗研究中具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 肿瘤基因治疗 免疫球蛋白启动子 表达载体
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增殖抑制基因抑制乳腺癌细胞生长和侵袭及其相关机制研究 被引量:2
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作者 张扬 杜强 +2 位作者 田新霞 方伟岗 《中华病理学杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期259-263,共5页
目的研究增殖抑制基因(HSG)对乳腺癌MDA-MB-231细胞(简称231细胞)生物学行为的影响并对其作用机制进行探讨。方法构建HSG全长真核表达载体,通过脂质体瞬时转染法使其在231细胞中高表达,通过MTT比色实验检查肿瘤细胞的体外增殖能力... 目的研究增殖抑制基因(HSG)对乳腺癌MDA-MB-231细胞(简称231细胞)生物学行为的影响并对其作用机制进行探讨。方法构建HSG全长真核表达载体,通过脂质体瞬时转染法使其在231细胞中高表达,通过MTT比色实验检查肿瘤细胞的体外增殖能力、Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力和应用流式细胞术检测肿瘤细胞的细胞周期及凋亡情况;并应用GsT—pulldown法检测HSG高表达对乳腺癌细胞Ras蛋白活性的影响。结果将构建好的重组人HSG真核表达质粒pcDNA3-MYC-HSG转染至231细胞中,MTT比色实验结果显示HSG的过表达可以抑制肿瘤细胞的增殖;Matrigel侵袭实验显示转染HSG的肿瘤细胞的穿膜细胞数(HSG/231组,78.5个±5.8个)与转染空载体组(vector/231组,131.1个±14.5个)相比明显减少。流式细胞分析结果显示转染HSG/231组细胞出现了G0/G1期阻滞(56.3%±2.3%),且凋亡细胞的百分比与对照组(vector/231组为50.4%±1.9%)相比有所增加。Ras蛋白活性检测发现转染HSG/231组的乳腺癌细胞Ras蛋白活性明显下降。结论HSG表达上调可抑制高侵袭性231细胞的体外增殖和侵袭能力,使其出现G0/G1期细胞周期阻滞,并可促进细胞凋亡。HSG对乳腺癌细胞的抑制作用可能与其抑制细胞Ras活性有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因 肿瘤抑制 肿瘤侵润 细胞周期
高储蓄率下养老金与个税缴纳激励联动的应用探索 预览 被引量:4
7
作者 陈收 李双飞 《财经理论与实践》 CSSCI 北大核心 2009年第1期 30-35,共6页
中国基本养老保险存在的主要问题是基金缺口过大,个人账户“空账”问题突出。将养老金与个税缴纳激励联动可以让积极缴纳税收者、税收贡献大者获得更多的社会保障福利支持,中国养老金制度不健全是高储蓄率现状的主要原因之一,而养老... 中国基本养老保险存在的主要问题是基金缺口过大,个人账户“空账”问题突出。将养老金与个税缴纳激励联动可以让积极缴纳税收者、税收贡献大者获得更多的社会保障福利支持,中国养老金制度不健全是高储蓄率现状的主要原因之一,而养老金部分积累制在中国应用的主要障碍是来源不足;国际上在解决该问题上所提出的通过个税减免或优惠来激励个人缴纳养老金的方案,在中国有一定的借鉴意义,但要结合中国国情,从而提出养老金制度建设和税收激励联动体系设计的新思路。 展开更多
关键词 高储蓄率 养老金 个人所得税 个人账户
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个人账户与个人所得税激励联动对养老金替代率的影响 被引量:4
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作者 陈收 李双飞 《中国管理科学》 CSSCI 北大核心 2009年第2期29-35,共7页
本文针对养老保险资金来源不足问题,提出了将一部分个人所得税转入到养老保险个人账户的思路,既弥补养老保险缴费不足,又可提高人们缴纳个人所得税积极性,且有助于机关事业单位养老保险改革试点方案的顺利实施。并在此思路上针对现行的... 本文针对养老保险资金来源不足问题,提出了将一部分个人所得税转入到养老保险个人账户的思路,既弥补养老保险缴费不足,又可提高人们缴纳个人所得税积极性,且有助于机关事业单位养老保险改革试点方案的顺利实施。并在此思路上针对现行的企业养老保险计发办法上建立了精算模型,比较分析了个人所得税转入与不转入养老金个人账户情形下不同工资水平及其增长率、不同的基金累积利率、不同的退休年龄对个人账户养老保险水平的影响。 展开更多
关键词 养老金个人账户 个人所得税 精算模型 替代率
白细胞介素2促进宫颈癌细胞系HeLaS3免疫球蛋白G的表达 预览 被引量:1
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作者 卢恬 +2 位作者 柳世庆 郑杰 《北京大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2009年第2期 158-161,共4页
目的:探讨白细胞介素2(interleukin2,IL-2)对宫颈癌细胞系HeLaS3表达免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)的影响。方法:用免疫荧光-流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测IL-2刺激后HeLaS3胞膜和胞内IgG表达变化;用Western blot检... 目的:探讨白细胞介素2(interleukin2,IL-2)对宫颈癌细胞系HeLaS3表达免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)的影响。方法:用免疫荧光-流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测IL-2刺激后HeLaS3胞膜和胞内IgG表达变化;用Western blot检测IL-2刺激HeLaS3后IgG的表达变化;用同时能扩增IgG四个亚类的引物,以RT-PCR法,从mRNA水平检测IL-2刺激后,HeLaS3γ链转录水平的变化。结果:免疫荧光-FCM结果显示,IL-2刺激48h后HeLaS3胞膜和胞内IgG表达明显上调;Western blot结果显示IL-2刺激48h后HeLaS3胞内IgG表达水平明显上调;RT-PCR显示IL-2刺激48h后HeLaS3γ链转录水平有所上升。结论:IL-2能促进HeLaS3IgG的表达。 展开更多
关键词 白细胞介素2 宫颈肿瘤 免疫球蛋白G 细胞系 肿瘤
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人增殖抑制基因(hHSG)联合热处理对结肠癌细胞系HT-29的体外诱导凋亡效应 预览 被引量:1
10
作者 毋丽娜 李志新 +2 位作者 卢恬 马腾 《北京大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2008年第5期 524-527,共4页
目的:观察人增殖抑制基因(human hyperplasia suppressor gene,hHSG)超表达联合热处理对结肠癌细胞株HT-29的细胞存活及其诱导凋亡的效应。方法:首先制备复制缺陷5型腺病毒-hHSG表达载体(Ad5-hHSG),然后将其在HT-29中超表达,观察A... 目的:观察人增殖抑制基因(human hyperplasia suppressor gene,hHSG)超表达联合热处理对结肠癌细胞株HT-29的细胞存活及其诱导凋亡的效应。方法:首先制备复制缺陷5型腺病毒-hHSG表达载体(Ad5-hHSG),然后将其在HT-29中超表达,观察Ad5-hHSG对肿瘤细胞的热增敏效应。采用细胞计数法检测其对细胞存活的影响,流式细胞术检测细胞凋亡和周期改变。结果:100感染复数(multiplicity of infection,MOI)剂量Ad5-hHSG与42℃加热1h联合应用后,活细胞数显著低于单用加热组和单用Ad5-hHSG组(P〈0.01)。流式细胞术检测细胞凋亡,Ad5-hHSG单独作用组、单独加热组以及联合作用组细胞凋亡率均较对照组显著升高,而且联合作用组与单独作用组之间差异具有统计学意义(P〈0.01)。细胞周期结果显示,Ad5-hHSG与42℃加热1h联合作用可明显导致HT-29细胞阻滞在G2/M期。结论:Ad5-hHSG对肿瘤细胞具有热增敏效应。 展开更多
关键词 基因 抑制 高温 诱发 细胞凋亡 细胞增殖
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^125Ⅰ标记的羊抗人IgG多克隆抗体在荷人结肠癌裸鼠体内的生物分布及γ显像 预览 被引量:1
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作者 贺巍巍 刘昭飞 +2 位作者 贾兵 王凡 《同位素》 CAS 北大核心 2008年第2期 77-81,共5页
采用Iodogen法对羊抗人IgG多克隆抗体(GAHG)进行^125I标记,并观察了^125I-GAHG在荷HT-29人结肠癌裸鼠体内的生物分布和γ显像,以探讨肿瘤细胞分泌的IgG作为靶点进行肿瘤放射免疫显像和治疗的可能性。结果显示,^125I-GAHG具有良好... 采用Iodogen法对羊抗人IgG多克隆抗体(GAHG)进行^125I标记,并观察了^125I-GAHG在荷HT-29人结肠癌裸鼠体内的生物分布和γ显像,以探讨肿瘤细胞分泌的IgG作为靶点进行肿瘤放射免疫显像和治疗的可能性。结果显示,^125I-GAHG具有良好的体外稳定性,其血液清除符合二室模型,T1/2α和T1/2β分别为1.19h和43.99h。尾静脉给药后,与^125I标记的正常羊IgG(^125I-IgG)对照相比,^125I-GAHG具有更加明显的肿瘤摄取。瘤体内给药的实验结果显示,^125I-GAHG在肿瘤部位具有良好的滞留。在静脉注射后72h,肿瘤摄取达到最大,为6.71±2.19%ID/g。靶与非靶组织的放射性摄取比(T/NT)随着时间延长逐渐增大。上述结果提示,^125I-GAHG具有肿瘤特异性摄取,这为以肿瘤分泌的IgG为靶点的肿瘤放射免疫显像和靶向治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 IgG ^125I 肿瘤显像 生物分布
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免疫球蛋白IgG在卵巢上皮性癌中的表达 预览 被引量:5
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作者 叶雪 郭慧方 +5 位作者 程洪艳 付天云 崔恒 冯捷 《中国妇产科临床杂志》 2007年第3期 192-194,I0001,共4页
目的探讨正常卵巢、卵巢良性肿瘤、卵巢上皮性癌中免疫球蛋白IgG的表达。方法采用免疫组化染色,应用兔抗人IgG多克隆抗体对42例卵巢上皮性癌、10例卵巢良性肿瘤、10例正常卵巢进行检测,并用计算机图像分析系统检测IgG的表达情况。结... 目的探讨正常卵巢、卵巢良性肿瘤、卵巢上皮性癌中免疫球蛋白IgG的表达。方法采用免疫组化染色,应用兔抗人IgG多克隆抗体对42例卵巢上皮性癌、10例卵巢良性肿瘤、10例正常卵巢进行检测,并用计算机图像分析系统检测IgG的表达情况。结果上述三类组织中均存在不同程度的IgG表达,阳性表达基本定位于细胞浆。卵巢上皮性癌组织中IgG阳性表达的相对面积和平均光密度均显著高于正常卵巢(P〈0.01),正常卵巢与卵巢良性肿瘤之间在阳性表达相对面积上有明显差异,在平均光密度比较中没有明显差异。结论卵巢上皮性癌中存在免疫球蛋白IgG的高表达。 展开更多
关键词 免疫球蛋白IGG 卵巢上皮性癌 免疫组化 图像分析
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SARS—CoV—X4蛋白在SARS患者肺组织中的表达及其意义 预览 被引量:1
13
作者 谭亚夏 陈涛 +12 位作者 钟淑卿 黎毅敏 陈英玉 莫小宁 宋泉声 甘启倪 顾莹莹 莫红缨 罗炜 何新明 刘慕嫦 钟南山 《中华内科杂志》 CAS 北大核心 2006年第3期 196-198,共3页
目的探讨SARS-CoV-X4蛋白在SAILS患者肺病变组织中的表达及其意义。方法取4例SAILS患者的肺组织,HE染色观察肺组织病理学变化,免疫组化检测肺病变组织中SARS-CoV-X4蛋白表达。结果(1)HE染色可见肺组织充血、水肿,肺泡腔内大量红细... 目的探讨SARS-CoV-X4蛋白在SAILS患者肺病变组织中的表达及其意义。方法取4例SAILS患者的肺组织,HE染色观察肺组织病理学变化,免疫组化检测肺病变组织中SARS-CoV-X4蛋白表达。结果(1)HE染色可见肺组织充血、水肿,肺泡腔内大量红细胞及纤维渗出,透明膜形成。肺泡上皮变性坏死脱落,部分肺组织纤维细胞明显增生。(2)4例SARS患者肺组织损伤病变中可见黄棕色SARS-CoV-X4蛋白高表达,弥漫分布在肺泡上皮、红细胞、白细胞及渗出液中。结论SAILS-CoV-X4蛋白可能参与了SARS的发生与发展。SARS-CoV的传播途径除呼吸道外。尚可能通过血液、呼吸道分泌物等传播。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 SARS-CoV-X4蛋白
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免疫球蛋白在结肠癌HT-29细胞中的表达及其生物学活性探讨 预览 被引量:11
14
作者 邓郁青 郑杰 +6 位作者 李国辉 朱小辉 张培 黄晶 张颖妹 李志新 《中华肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2006年第2期 88-91,共4页
目的明确免疫球蛋白(Ig)在人大肠癌传代细胞系HT-29细胞中的表达情况,并探讨其对肿瘤细胞生物学活性的影响。方法用RT-PCR方法检测Ig重链可变区转录本在HT-29细胞中的表达,并构建含有HT-29特异的CDR3片段的反义重组载体,电穿孔法... 目的明确免疫球蛋白(Ig)在人大肠癌传代细胞系HT-29细胞中的表达情况,并探讨其对肿瘤细胞生物学活性的影响。方法用RT-PCR方法检测Ig重链可变区转录本在HT-29细胞中的表达,并构建含有HT-29特异的CDR3片段的反义重组载体,电穿孔法将其转染入HT-29细胞,观察其对HT-29细胞生长增殖及凋亡等基本生命活动的影响。结果在HT-29细胞内检测到人Ig重链转录本,且测序显示为单一性克隆;含有HT-29特异的CDR3片段的反义重组载体能够有效地抑制HT-29细胞Ig分子的表达,且能够有效的诱导细胞的凋亡(P〈0.01)和生长抑制(P〈0.05)。结论肿瘤细胞来源的Ig可促进肿瘤细胞的生存和生长。 展开更多
关键词 免疫球蛋白(Ig) 人大肠癌传代细胞系HT-29 生物学活性
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人增殖抑制基因(HSG)对肿瘤细胞系化疗敏感性的作用 预览 被引量:14
15
作者 王萍 毋丽娜 +4 位作者 蒋春笋 李志新 张颖妹 陈光慧 《北京大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2005年第2期 117-120,共4页
目的:将人增殖抑制基因(hHSG)用电子穿孔的转基因方式转染到体外培养的人肿瘤细胞系中,观察hHSG 基因对内源性hHSG表达水平不同的肿瘤细胞系的化疗敏感性的影响.方法:首先用免疫组化方法检测不同组织来源的肿瘤细胞系中hHSG的表达水平,... 目的:将人增殖抑制基因(hHSG)用电子穿孔的转基因方式转染到体外培养的人肿瘤细胞系中,观察hHSG 基因对内源性hHSG表达水平不同的肿瘤细胞系的化疗敏感性的影响.方法:首先用免疫组化方法检测不同组织来源的肿瘤细胞系中hHSG的表达水平,然后选择内源性hHSG表达水平较低的肺腺癌(A549)和内源性hHSG表达水平较高的宫颈癌(HeLa S3)细胞系,用电穿孔方法转染含有hHSG的真核表达载体(pEGFP-hHSG)24 h后,加入放线菌酮(CHX),采用细胞计数、MTT法观察hHSG对肿瘤细胞增殖抑制作用及对CHX的化疗敏感性的影响.结果:hHSG在不同组织来源的肿瘤细胞系都有不同程度的表达, pEGFP-hHSG转染到两种内源性hHSG表达水平不同的肿瘤细胞系后,这两种肿瘤细胞的生长增殖都明显受到抑制,同时外源性的hHSG也增强了这些肿瘤细胞系对CHX的敏感性.结论:外源性hHSG可不依赖其内源性表达水平而抑制肿瘤细胞的增殖,与CHX并用可增强肿瘤细胞对CHX的敏感性,具有协同作用. 展开更多
关键词 化疗敏感性 抑制基因 人肿瘤细胞系 免疫组化方法 真核表达载体 增殖抑制作用 抑制肿瘤细胞 组织来源 内源性 CHX 体外培养 基因方式 放线菌酮 细胞计数 MTT法 不同程度 生长增殖 协同作用 外源性 水平 转染 G基因 HHS
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抗人趋化素样因子1羧基端多肽抗体的制备、鉴定及组织芯片分析 被引量:2
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作者 石爽 张颖妹 +7 位作者 刘雅楠 甘启霓 杨田 宋泉声 马大龙 韩文玲 《中国医学科学院学报》 CAS 北大核心 2004年第5期 496-499,i001,共5页
目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础.方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体.经ELISA法测定抗体效... 目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础.方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体.经ELISA法测定抗体效价,Western-blot鉴定抗体与原核细胞体外翻译和果蝇S2细胞稳定转染表达的CKLF1反应,组织芯片检测该抗体与内源性表达的CKLFs结合.结果抗CKLF1 C端多肽抗体的效价为10-4,能识别在原核细胞体外翻译系统和真核细胞中表达的CKLF1蛋白,也可与多种组织中天然表达的CKLFs发生特异性反应,在正常支气管软骨、胃粘膜和平滑肌中呈阳性表达,在正常直肠和高分化直肠癌的腺上皮中呈强阳性表达,而在低分化的直肠癌中为阴性.结论抗CKLF1多克隆抗体效价高,亲和力强,可用于CKLF1的检测和研究. 展开更多
关键词 趋化素样因子1 抗多肽抗体 组织芯片
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免疫球蛋白样物质在上皮来源的恶性肿瘤中的表达 被引量:13
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作者 汪泱 《中国肿瘤临床》 CAS 北大核心 2001年第3期 169-171,共3页
目的:研究在上皮来源恶性肿瘤细胞中免疫球蛋白样物质的表达。方法:采用免疫组化SP法,分别用鼠抗人IgG、IgA和I gM单克隆体对乳腺癌、肝癌、肺癌、膀胱癌等多种上皮来源恶性肿瘤瘤组织及其部分传代细胞进行了检测。结果:在上述 癌... 目的:研究在上皮来源恶性肿瘤细胞中免疫球蛋白样物质的表达。方法:采用免疫组化SP法,分别用鼠抗人IgG、IgA和I gM单克隆体对乳腺癌、肝癌、肺癌、膀胱癌等多种上皮来源恶性肿瘤瘤组织及其部分传代细胞进行了检测。结果:在上述 癌组织及癌细胞中有不同程度的阳性反应,与抗人IgG、IgD、IgA和IgM抗体反应阳性率分别为50.0%、85.7%、61.9%和45.2%。其中乳腺癌阳性率为100.0% 。结论 :在上皮来源恶性肿瘤中存在免疫球蛋白样物质 的表达,其性质和机制有待于进一步研究。 展开更多
关键词 Ig样物质 上皮性恶性肿瘤 免疫组织化学 免疫球蛋白样物质
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人宫颈癌传代细胞Ig样蛋白的纯化分析 预览 被引量:2
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作者 王东升 《北京医科大学学报》 2000年第4期 310-312,共3页
目的:探讨非造血系统来源的恶性肿瘤细胞内Ig样蛋白与Ig分子在抗原性及分子结构上的关系。方法:应用亲和层析的方法将HeLa MR(人宫颈癌传代细胞)细胞内Ig样蛋白进行了纯化;并以SDS-PAGE及Western B... 目的:探讨非造血系统来源的恶性肿瘤细胞内Ig样蛋白与Ig分子在抗原性及分子结构上的关系。方法:应用亲和层析的方法将HeLa MR(人宫颈癌传代细胞)细胞内Ig样蛋白进行了纯化;并以SDS-PAGE及Western Blot方法将Ig样蛋白与IgG进行比较分析。结果:SDS-PAGE结果显示Ig样蛋白既有与IgG相近的轻、重链泳事,同时又分别在相对分子质量6600、7000左右出现两条泳带,此两条泳 展开更多
关键词 HELA细胞 Ig样蛋白 宫颈肿瘤 分子结构
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Ig样蛋白的表达与恶性肿瘤分化及增殖细胞核抗原的相关性分析 被引量:3
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作者 孙薇 《军事医学科学院院刊》 北大核心 1999年第1期16-18,共3页
目的:探讨Ig样蛋白的表达与恶性肿瘤分化及增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的关系。方法:应用免疫组织化学方法对32例乳腺癌,大肠癌,胃癌等上皮性恶性肿瘤及相位... 目的:探讨Ig样蛋白的表达与恶性肿瘤分化及增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的关系。方法:应用免疫组织化学方法对32例乳腺癌,大肠癌,胃癌等上皮性恶性肿瘤及相位正常组织细胞内Ig样蛋白的表达与肿瘤分化,增殖细胞核抗原表达的相关性进行了分析。结果Ig样蛋白与PCNA在这些肿瘤细胞内部呈阳性反应,而在相应的正常组织细胞内这两种蛋白表达很少或不表达 展开更多
关键词 肿瘤 Ig样蛋白 增殖细胞核抗原 上皮组织肿瘤
HL—60细胞Ig样蛋白的表达及IgH V—D—J序列分析 预览 被引量:6
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作者 侯春梅 《中华血液学杂志》 CAS 北大核心 1999年第6期 319-320,共2页
HL60为髓系白血病传代细胞,在诱导分化的条件下,可向粒细胞及单核细胞分化。到目前为止,未见到该细胞可向B细胞分化及产生免疫球蛋白(Ig)的研究报道。然而,我们在探讨癌细胞内的Ig样蛋白表达情况时,偶然发现HL6... HL60为髓系白血病传代细胞,在诱导分化的条件下,可向粒细胞及单核细胞分化。到目前为止,未见到该细胞可向B细胞分化及产生免疫球蛋白(Ig)的研究报道。然而,我们在探讨癌细胞内的Ig样蛋白表达情况时,偶然发现HL60细胞内也同多种上皮来源的肿瘤细胞... 展开更多
关键词 HL-60细胞 白血病 Ig样蛋白 序列分析
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