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FAM3C通过激活Akt促进口腔鳞癌细胞活力 预览
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作者 迟毓婧 李玫 +3 位作者 禹祎萌 刘爱禹 卫东 莫珩 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期424-429,共6页
目的:探讨FAM3C (family with sequence similarity 3, member C)蛋白在口腔鳞癌细胞中的表达和作用。方法:通过RT-qPCR及Western blot法检测人口腔鳞癌癌前病变细胞DOK和口腔鳞癌细胞WSU-HN6中FAM3C的mRNA及蛋白表达水平。在WSU-HN6细... 目的:探讨FAM3C (family with sequence similarity 3, member C)蛋白在口腔鳞癌细胞中的表达和作用。方法:通过RT-qPCR及Western blot法检测人口腔鳞癌癌前病变细胞DOK和口腔鳞癌细胞WSU-HN6中FAM3C的mRNA及蛋白表达水平。在WSU-HN6细胞中分别使用siFAM3C和抗FAM3C抗体处理,在DOK细胞中使用腺病毒过表达FAM3C,分别在处理后24、48和72 h使用CCK-8和Western blot法检测FAM3C对细胞活力及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)激活的影响。结果:(1)与DOK细胞相比,WSU-HN6细胞中FAM3C的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);(2)siFAM3C在转染后48 h和72 h均可抑制WSU-HN6细胞的活力(P<0.05),同时抑制Akt的激活(P<0.05);(3)抗体封闭FAM3C蛋白48 h和72 h也能抑制WSU-HN6细胞的活力,并抑制Akt的激活(P<0.05);(4)过表达FAM3C 48 h和72 h可促进DOK细胞的活力,并激活Akt(P<0.05)。结论:FAM3C可能通过激活Akt促进口腔鳞癌细胞的活力。 展开更多
关键词 FAM3C蛋白 口腔鳞状细胞癌 细胞活力 蛋白激酶B
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FPSO大型电站模块转运及吊装 预览
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作者 石兵 卫东 《造船技术》 2019年第1期47-50,69共5页
船厂根据实际生产需要,将浮式生产储油船(FPSO)上大型电站模块通过轴线车进行陆地转运,通过海上起重机进行海上吊装,使用SACS软件及PATRAN有限元软件分析计算,保证方案设计的合理性及使用工具的安全性,总结大型电站模块转运、吊装和封... 船厂根据实际生产需要,将浮式生产储油船(FPSO)上大型电站模块通过轴线车进行陆地转运,通过海上起重机进行海上吊装,使用SACS软件及PATRAN有限元软件分析计算,保证方案设计的合理性及使用工具的安全性,总结大型电站模块转运、吊装和封固整套方案。 展开更多
关键词 浮式生产储油船(FPSO) 电站模块 转运 吊装 有限元 SACS
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以需求为导向的医院科研共享平台服务模式的建立与实践
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作者 梁公文 李媛 +5 位作者 刘慧鑫 杨琳 卫东 牛屹东 张育军 张华 《中华医学科研管理杂志》 2018年第4期241-244,253共5页
目的提升科研共享平台的管理与服务,充分发挥科研共享平台在医院科研发展中的支撑作用。 方法北京大学人民医院基于问卷调研了解服务对象的需求以及对平台的评价,建立并实施了以需求为导向的科研共享平台的服务模式。 结果通过该模... 目的提升科研共享平台的管理与服务,充分发挥科研共享平台在医院科研发展中的支撑作用。 方法北京大学人民医院基于问卷调研了解服务对象的需求以及对平台的评价,建立并实施了以需求为导向的科研共享平台的服务模式。 结果通过该模式的实施,医院优化科研共享平台服务策略,在一定程度上提升了科研共享平台的知晓率和服务满意度。 结论以需求为导向的平台服务模式能够一定程度上提升科研共享平台的服务,将为医院科研的可持续发展提供有力的支持与服务。 展开更多
关键词 科研共享平台 需求调研 服务评价 医院
γδT细胞对膀胱癌细胞的细胞毒活性及MICA/B蛋白在膀胱癌中的表达 预览
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作者 周建华 王地 +4 位作者 王焕瑞 侯晓利 卫东 许克新 胡浩 《北京大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第4期595-601,共7页
目的:初步探索γδT细胞在抗膀胱癌过程中的作用及其识别的应激蛋白MICA/B在膀胱癌中的表达情况。方法:经帕米磷酸二钠体外扩增培养膀胱癌患者外周血来源的γδT细胞,利用流式细胞术检测γδT细胞的纯度、扩增效率和经佛波酯/离子霉素... 目的:初步探索γδT细胞在抗膀胱癌过程中的作用及其识别的应激蛋白MICA/B在膀胱癌中的表达情况。方法:经帕米磷酸二钠体外扩增培养膀胱癌患者外周血来源的γδT细胞,利用流式细胞术检测γδT细胞的纯度、扩增效率和经佛波酯/离子霉素(PMA/ionomycin)刺激后CD107a的表达,通过细胞毒实验检测其对膀胱癌细胞株的细胞毒作用;采用流式细胞术和免疫组织化学染色法分别检测膀胱癌细胞株表面和膀胱癌组织中MICA/B蛋白的表达情况。结果:成功扩增6例膀胱癌患者外周血γδT细胞,纯度达75%-94%,γδT细胞绝对数达到初始的109-371倍。经PMA/ionomycin刺激后,表达CD107a的γδT细胞比例明显增加,可达40%-82%,膀胱癌患者的γδT细胞对3株膀胱癌细胞株都有显著的细胞毒作用,且随效靶比增高而增强。3株膀胱癌细胞株表面和26例膀胱癌组织中均不同程度地表达MICA/B,浸润性膀胱癌中MICA/B的染色评分略高于非浸润性膀胱癌,高级别膀胱癌中MICA/B的染色评分要高于低级别膀胱癌,但统计学分析显示组织中MICA/B的染色评分与肿瘤分期、分级没有显著相关性。结论:膀胱癌患者外周血γδT细胞可在体外成功扩增,并显示出显著的抗膀胱癌作用,膀胱癌细胞和组织中都不同程度表达MICA/B,但统计学分析显示MICA/B在膀胱癌组织中的染色评分与肿瘤分期、分级没有相关性。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 受体 抗原 T细胞 γ-δ MICA/B T淋巴细胞 细胞毒性
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TUDCA缓解小鼠肠炎对内质网应激与双氧化酶2表达的研究 预览
5
作者 梁君 高强 +4 位作者 崔梅花 卫东 侯晓琳 杨成 李想 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2017年第1期40-44,共5页
目的探讨特异性内质网应激抑制剂牛磺熊去氧胆酸(Tauroursodeoxycholate,TUDCA)缓解DSS诱导的小鼠肠炎对内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)蛋白与肠黏膜过氧化氢产生酶双氧化酶2(dual oxidase2,Duox2)表达的研究。方... 目的探讨特异性内质网应激抑制剂牛磺熊去氧胆酸(Tauroursodeoxycholate,TUDCA)缓解DSS诱导的小鼠肠炎对内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)蛋白与肠黏膜过氧化氢产生酶双氧化酶2(dual oxidase2,Duox2)表达的研究。方法 7周C57BL/6J雄性小鼠适应喂养1周后随机分为对照组、炎症组、干预组。炎症组和干预组饮用2.5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)溶液诱导小鼠肠炎,干预组再以500 mg/kg的TUDCA灌胃。8 d后处死小鼠,收集结肠作HE和免疫组化染色,Western blotting检测Duox2及ERS相关蛋白Grp78、Atf6、P-Ire1α/Ire1α、Ire1β、P-Perk/Perk的表达。结果 TUDCA明显减轻DSS诱导的小鼠肠炎。Western blotting结果显示炎症组Grp78、P-Perk/Perk蛋白及Duox2表达均升高,干预组这三种蛋白表达恢复到对照组水平,其余ERS相关蛋白表达无变化。免疫组化结果显示Grp78和Duox2三组表达水平与Western blotting结果相一致。结论 TUDCA缓解小鼠肠炎可能与抑制内质网Grp78-Perk通路有关,该通路与Duox2表达相互影响。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 内质网应激 牛磺熊去氧胆酸 双氧化酶2
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口腔鳞癌中CD24的表达、作用和治疗靶点价值 预览 被引量:1
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作者 莫珩 高承志 +3 位作者 王少杰 李玫 董建强 卫东 《北京大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期16-22,共7页
目的:明确口腔鳞癌组织和细胞中黏液素样细胞表面黏附分子CD24的表达模式、作用及其作为治疗靶点的潜在价值。方法:利用免疫组化、real-time RT-PCR和Western blot方法,明确CD24在78例人口腔组织标本和59例动物模型金地鼠(Hamster bu... 目的:明确口腔鳞癌组织和细胞中黏液素样细胞表面黏附分子CD24的表达模式、作用及其作为治疗靶点的潜在价值。方法:利用免疫组化、real-time RT-PCR和Western blot方法,明确CD24在78例人口腔组织标本和59例动物模型金地鼠(Hamster buccal)颊囊组织标本,以及口腔癌前病变上皮细胞DOK4、口腔鳞癌细胞CAL-27和WSU-HN6中的表达模式;以CAL-27和WSU-HN6细胞为模型,明确在常规和无血清成球培养条件下,全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)和CD24抗体对CAL-27和WSU-HN6细胞及肿瘤球生长的影响,并观察它们是否影响这两种细胞中CD24的表达。结果:人和金地鼠组织的免疫组织染色结果显示,在正常/单纯增生组织、轻度/中度异常增生组织、重度异常增生和鳞癌组织中均依次呈现CD24表达递增的现象(P〈0.05);与DOK细胞相比较,CAL-27和WSU-HN6口腔鳞癌细胞中CD24表达上调(P〈0.05)。相对于癌前病变细胞DOK,口腔鳞癌细胞CAL-27和WSU-HN6具有更强的增殖和肿瘤球成球的潜能(P〈0.05)。ATRA能够有效地抑制这两种口腔鳞癌细胞的CD24表达、体外增殖和肿瘤球形成的能力(P〈0.05),而CD24抗体虽然也一样能够抑制口腔鳞癌细胞的增殖和肿瘤球形成(P〈0.05),但却不影响其CD24的表达。结论:CD24在口腔鳞癌中表达上调,具有促进口腔鳞癌细胞增殖和肿瘤球形成的作用,维甲酸和CD24抗体皆能以CD24为靶点有效地抑制口腔鳞癌细胞的增殖和肿瘤球形成。 展开更多
关键词 口腔肿瘤 鳞状细胞 抗原 CD24 维甲酸 细胞增殖
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小鼠脂肪间充质干细胞的分离培养及肠道归巢 预览 被引量:9
7
作者 侯晓琳 卫东 +2 位作者 崔梅花 何湘君 梁君 《中国组织工程研究》 北大核心 2015年第6期854-860,共7页
背景:脂肪来源间充质干细胞因其取材安全、创伤小、易纯化、增殖快等优点而备受关注。目的:建立一种有效、快速分离培养较高纯度小鼠脂肪间充质干细胞的方法,荧光标记后探索其是否可在体内向肠道归巢。方法:取小鼠腹股沟及附睾脂肪,用0... 背景:脂肪来源间充质干细胞因其取材安全、创伤小、易纯化、增殖快等优点而备受关注。目的:建立一种有效、快速分离培养较高纯度小鼠脂肪间充质干细胞的方法,荧光标记后探索其是否可在体内向肠道归巢。方法:取小鼠腹股沟及附睾脂肪,用0.1%Ⅰ型胶原酶消化得到单细胞,并与剩余未消化脂肪组织块一起接种,贴壁培养获得脂肪间充质干细胞,通过细胞形态、细胞表型、生长动力学、成骨成脂分化潜能4个方面进行鉴定,并将脂肪间充质干细胞用PKH67标记后经尾静脉注射移植到溃疡性结肠炎模型小鼠体内,观察其向肠道的归巢情况。结果与结论:脂肪间充质干细胞镜下呈梭形,快速增殖呈漩涡状排列,细胞高表达CD29、CD44、CD90,不表达CD45。成骨诱导碱性磷酸酶染色显示有黑色颗粒生成,茜素红S染色呈红色结节,成脂诱导油红O染色显示有大量脂滴。细胞生长曲线显示第3-5天为对数增长期,细胞生长活力良好。结肠冰冻切片在荧光显微镜下可见绿色荧光光点,并随时间推移有增加趋势。以上结果表明采用胶原酶消化加组织块贴壁法体外分离培养的脂肪间充质干细胞增殖快、纯度高,可向成骨成脂细胞分化,在体内可向结肠归巢并增殖。 展开更多
关键词 脂肪组织 间质干细胞 结肠炎 溃疡性 干细胞 脂肪干细胞 细胞归巢 脂肪间充质干细胞 小鼠 生物学特性 诱导分化 分离培养 溃疡性结肠炎
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ABI1表达上调与结直肠腺癌临床病理及预后的相关性分析 被引量:1
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作者 李锟 李玫 +2 位作者 刘玉兰 马淑云 卫东 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2015年第8期643-646,共4页
目的分析Abl相互作用蛋白1(Ab1 interactor 1,ABI1)表达与结直肠腺癌临床病理特征和预后的相关性。方法应用免疫组织化学技术,检测ABI1蛋白在218例结直肠腺癌组织中的表达,利用矿检验及Spearman相关检验,分析ABI1表达与结直肠腺... 目的分析Abl相互作用蛋白1(Ab1 interactor 1,ABI1)表达与结直肠腺癌临床病理特征和预后的相关性。方法应用免疫组织化学技术,检测ABI1蛋白在218例结直肠腺癌组织中的表达,利用矿检验及Spearman相关检验,分析ABI1表达与结直肠腺癌临床病理特点的相关性[χ^2和(或)Fisher检验及Spearman相关检验],应用Kaplan-Meier方法计算其中109例结直肠腺癌患者术后5年生存率及生存时间。结果相对于癌旁组织,ABI1在结直肠腺癌中的表达明显上调(P=0.000);ABI1表达与结直肠腺癌浸润深度(P=0.040)和组织分化程度(P=0.043)显著相关,而与肿瘤部位、临床分期、淋巴结和远处转移等无相关性;高表达和低表达ABI1的患者术后5年累积生存率分别为45.6%和76.9%,中位生存时间为71.6(95%CI:57.4—85.7)个月和99.0(95%CI:85.6—112.4)个月,Kaplan—Meier分析显示,差异有统计学意义(r=11.090,P=0.001)。多因素分析显示,ABI1不是一个独立的结直肠癌预后评估因素(P=0.119)。结论结直肠腺癌组织中表达的显著上调提示ABI1具有潜在的促癌作用;ABI1表达上调与结直肠腺癌的浸润程度、组织分化程度和患者生存时间相关。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 病理学 临床 预后 免疫组织化学
磷脂酰肌醇-3激酶催化亚基β在胃癌组织中的表达及其临床意义
9
作者 翟薇 李玫 +1 位作者 董建强 卫东 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第12期934-936,共3页
目的 明确磷脂酰肌醇-3激酶催化亚基β(phosphoinositide-3 kinase,catalytic subunit beta,PIK3CB)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌发生发展中的临床意义.方法 应用组织芯片和免疫组织化学技术,检测PIK3CB蛋白在138例胃腺癌组织中... 目的 明确磷脂酰肌醇-3激酶催化亚基β(phosphoinositide-3 kinase,catalytic subunit beta,PIK3CB)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌发生发展中的临床意义.方法 应用组织芯片和免疫组织化学技术,检测PIK3CB蛋白在138例胃腺癌组织中的表达,并对PIK3 CB表达与胃癌患者的临床病理特点和预后进行分析.结果 PIK3CB在胃癌组织中阳性表达率为63.8%,癌旁组织中阳性表达率为45.7%,两者相比差异有统计学意义(χ^2=9.139,P=0.003);PIK3CB高表达与胃癌大小(χ^2 =8.677,P =0.003)、胃癌浸润深度(χ^2=9.306,P=0.025)和临床分期(χ^2=8.242,P=0.041)相关;高表达和低表达PIK3 CB的胃癌患者术后5年累积生存率分别为15.9%和70.3%,中位生存时间分别为30.2个月和60.3个月,差异有统计学意义(χ^2=25.644,P=0.000).多因素分析显示,PIK3 CB可作为一个独立的预后评估因素(HR=15.785,95%CI:1.943~7.805,P=0.000).结论 PIK3CB表达上调与胃癌的浸润程度和患者的生存时间相关,可看成是评估胃癌预后的一个独立影响因素. 展开更多
关键词 胃肿瘤 磷酸肌醇3-激酶类 预后
RIPl40过表达对神经母细胞瘤细胞迁移及增殖的影响
10
作者 冯霄 卫东 +3 位作者 梁荣 石程 赵竹然 郭静竹 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第32期2540-2543,共4页
目的探讨受体相互作用蛋白140(RIPl40)过表达对小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)迁移和增殖的影响。方法采用脂质体转染法将RIPl40过表达质粒导入N2a细胞,经G418筛选出稳定过表达RIPl40的细胞系,利用实时定量PCR及Westem印迹法对构... 目的探讨受体相互作用蛋白140(RIPl40)过表达对小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)迁移和增殖的影响。方法采用脂质体转染法将RIPl40过表达质粒导入N2a细胞,经G418筛选出稳定过表达RIPl40的细胞系,利用实时定量PCR及Westem印迹法对构建的细胞模型进行鉴定;分别采用Transwell小室和活细胞计数试剂盒(CCK)8检测RIPl40过表达对N2a细胞迁移和增殖的影响。结果将RIPl40过表达质粒导入N2a细胞,成功构建RIPl40过表达的N2a细胞模型N2a-ripl40,与N2a细胞相比,N2a-ripl40细胞中RIPl40mRNA及蛋白表达量均增高。迁移检测显示N2a细胞迁移数明显高于N2a-ripl40细胞[(70±20)个比(5±4)个,P〈0.05]。细胞增殖检测显示N2a细胞在24、48、72h的增殖率分别为1.567±0.107、3.018±0.212、4.112±0.221,而N2a-ripl40细胞为1.561±0.281、2.232±0.235、4.025±0.217,两种细胞在3个时间点的增殖率差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论RIPl40过表达抑制N2a细胞的迁移行为,但不影响其增殖行为。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 细胞迁移分析 细胞增殖 受体相互作用蛋白140
胃癌组织中靶向Abl相互作用蛋白-1的microRNA筛选 预览 被引量:2
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作者 崔梅花 卫东 +3 位作者 李晓宇 张秀茹 傅怡 岳林 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第36期39-42,共4页
目的检测3种Abl相互作用蛋-1(ABI-1)相关的microRNA(miRNA)在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达模式,筛选出与胃癌组织相关的靶向ABI-1的miRNA。方法收集59例胃癌术后蜡块标本,包含胃癌组织和癌旁正常组织,抽提石蜡组织中的总RNA。在... 目的检测3种Abl相互作用蛋-1(ABI-1)相关的microRNA(miRNA)在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达模式,筛选出与胃癌组织相关的靶向ABI-1的miRNA。方法收集59例胃癌术后蜡块标本,包含胃癌组织和癌旁正常组织,抽提石蜡组织中的总RNA。在基因网选择ABI-1相关的miRNA(即miR-181c、miR-148b、miR-9),采用逆转录实时荧光定量PCR法对胃癌组织及癌旁正常组织中的3种miRNA进行检测,计算胃癌组织相对癌旁正常组织中miRNA的相对表达量(2-ΔΔCt)。结果 miR-181c、miR-148b、miR-9在胃癌组织中的相对表达量分别为(2.32±1.04)(P=0.000)、(0.82±0.67)(P=0.321)、(1.07±0.95)(P=0.774),其中miR-181c在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达差异有显著性(P=0.000)。结论 miR-181c在胃癌组织中相对高表达,提示其可能作为靶向ABI-1的miRNA调节ABI-1蛋白的表达,为进步研究靶向ABI-1miRNA在胃癌发生发展中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 microRNA(miRNA) miR-181c Abl相互作用蛋白-1(ABI-1) 胃癌
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Abl相互作用蛋白1过表达对胃癌细胞系AGS体外凋亡及迁移的影响 预览 被引量:1
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作者 崔梅花 傅怡 +2 位作者 卫东 侯晓琳 雷晓燕 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2013年第9期847-850,共4页
目的研究Abl相互作用蛋白1(ABIl)过表达对人胃癌细胞系AGS体外凋亡及迁移的影响,初步探讨ABII在胃癌发生发展中可能的作用机制。方法首先应用脂质体转染方法分别将基因重组表达载体鼠干细胞病毒(MSCV)-绿色荧光蛋白(GFP)-ABI1质... 目的研究Abl相互作用蛋白1(ABIl)过表达对人胃癌细胞系AGS体外凋亡及迁移的影响,初步探讨ABII在胃癌发生发展中可能的作用机制。方法首先应用脂质体转染方法分别将基因重组表达载体鼠干细胞病毒(MSCV)-绿色荧光蛋白(GFP)-ABI1质粒和对照载体MSCV—GFP质粒导人胃癌细胞系AGS,用嘌呤霉素筛选获得稳定表达MSCV—GFP—ABIl和MSCV—GFP的细胞系;其后应用流式细胞仪及Transwell小室检测ABIl过表达对AGS细胞体外凋亡及迁移能力的影响。结果流式细胞仪检测显示,AGS细胞凋亡率与ABIl过表达后AGS细胞凋亡率无明显变化,差异无统计学意义(P〉0.05);Transwell小室检测显示,AGS细胞迁移能力与ABIl过表达后AGS细胞迁移能力比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论ABIl过表达抑制胃癌细胞系AGS的体外迁移能力,提示影响胃癌细胞的迁移可能是ABIl在胃癌发生发展中发挥作用的重要途径之一。 展开更多
关键词 Abl相互作用蛋白1 过表达 胃癌 凋亡 迁移
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抗Sclerostin单链抗体基因的构建、表达及活性分析 预览 被引量:1
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作者 姚琦 张立才 +4 位作者 倪杰 侯宇 刘长振 卫东 张里程 《武警医学》 CAS 2013年第12期1047-1052,共6页
目的 构建抗Sclerostin(SOST)单链抗体原核表达载体并对表达蛋白进行活性分析.方法 提取抗SOST单克隆抗体5H3D1杂交瘤细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增抗体轻链可变区基因(VL)和重链可变区基因(VH)并通过重叠延伸拼接(SOE)PCR方法,... 目的 构建抗Sclerostin(SOST)单链抗体原核表达载体并对表达蛋白进行活性分析.方法 提取抗SOST单克隆抗体5H3D1杂交瘤细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增抗体轻链可变区基因(VL)和重链可变区基因(VH)并通过重叠延伸拼接(SOE)PCR方法,在VL和VH基因之间引入Linker(Gly4Ser)3,连接成单链抗体SOST-scFv(VL-Linker VH).将scFv基因克隆至表达载体PET-22b(+)后转入HEK293细胞进行分泌表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE鉴定表达产物,ELISA和West-blot检测表达蛋白的反应活性,茜素红结节染色法评估单链抗体对体外培养骨髓间充质干细胞成骨矿化的影响.结果 VL基因序列全长为339个碱基对,VH基因序列全长330个碱基对,均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,而SOST-scFv基因全长包括4个框架区(FR)、3个抗原互补决定区(CDR)以及具有抗体特征性的2个半胱氨酸残基;本研究构建的scFv全长687个碱基对,VL-Linker-VH为连接结构,SDS-PAGE分析表明大肠杆菌表达的scFv为可溶性蛋白,ELISA和West-blot检测证实表达scFv具有与SOST特异性结合的活性,细胞实验结果证实scFv能够促进骨髓间充质细胞成骨分化及矿化结节的形成.结论 成功构建抗SOST单链抗体表达载体,而且表达的scFv产物具有确切的免疫结合活性以及体外诱导成骨分化、矿化作用,为该抗体应用于骨质疏松疾病治疗奠定了实验基础. 展开更多
关键词 骨硬化素 单链抗体 骨质疏松 表达 活性
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GPR34在原发性肝细胞癌中表达的临床意义 被引量:4
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作者 金仲田 李锟 +3 位作者 卫东 王福顺 朱继业 冷希圣 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第11期868-870,共3页
目的探讨G蛋白偶联受体34(G—proteincoupledreceptor34,GPR34)的表达与肝细胞癌发生发展的相关性。方法应用肝细胞癌组织芯片和免疫组织化学技术,检测GPR34蛋白在44例肝细胞癌组织中的表达,X2检验和Fisher检验及Spearman相关检验... 目的探讨G蛋白偶联受体34(G—proteincoupledreceptor34,GPR34)的表达与肝细胞癌发生发展的相关性。方法应用肝细胞癌组织芯片和免疫组织化学技术,检测GPR34蛋白在44例肝细胞癌组织中的表达,X2检验和Fisher检验及Spearman相关检验,分析GPR34表达与肝细胞癌临床病理特点的相关性,应用Kaplan—Meier方法计算肝细胞癌患者术后5年生存率及生存时间。结果GPR34在肝细胞癌组织中的表达比癌旁组织明显上调(P=0.003);GPR34表达与肝细胞癌大小(P=0.024)、小肝癌(P=0.030)和浸润深度(P=0.012)显著相关,与性别、年龄、肝硬化、组织分化程度及临床分期无明显相关性(P〉0.05);高表达和低表达GPR34的患者术后5年累积生存率分别为56.6%和66.0%,中位生存时间为59.0(95%凹:49.9~68.1)个月和65.0(95%CI:56.4~73.6)个月,Kaplan-Meier分析显示其差异有统计学意义(X2=5.617,P=0.018)。多因素分析显示,GPR34可以作为一个独立的预后评估因素(P=0.037)。结论GPR34在肝细胞癌组织中的表达上调,提示GPR34在其中具有促癌作用。GPR34表达上调与肝细胞癌大小、小肝癌、浸润深度和患者的生存时间相关。GPR34表达上调可以作为肝细胞癌预后不良评估的一个潜在影响因素。 展开更多
关键词 肝细胞 基因表达 G蛋白偶联受体34
亚甲基四氢叶酸还原酶基因677位多态性、高同型半胱氨酸血症与复发性流产 被引量:38
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作者 韩红敬 沈浣 +1 位作者 王艳槟 卫东 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2012年第7期486-489,477共5页
目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)多态性(C677T)与高同型半胱氨酸(Hcy)血症以及复发性流产之间的关系。方法:采用前瞻性病例对照研究方法,收集71例复发性自然流产患者为病例组,另征集同期58例有正常妊娠史者为对照... 目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)多态性(C677T)与高同型半胱氨酸(Hcy)血症以及复发性流产之间的关系。方法:采用前瞻性病例对照研究方法,收集71例复发性自然流产患者为病例组,另征集同期58例有正常妊娠史者为对照组,利用PCR.RFLP方法研究MTHFR基因多态性(C677T);同时应用酶法测定血清同型半胱氨酸水平;并随访病例组的妊娠结局。结果:①MTHFR基因677位点的3种基因型在病例组和对照组分布分别为CC:14.1%VS43.1%、cT:49.3%VS25.9%、TT:36.6%VS31.0%,组间比较有极显著统计学差异(X。=14.7,df=2,P=0.001);其中CC基因型在病例组显著降低(P=0.000,OR=0.216,95%CI:0.093.0.505);T等位基因分布在病例组显著升高(61.3%vs38.7%,P=0.006)。②129例研究对象中TT基因型血同型半胱氨酸水平显著升高(P=0.000):TT为19.0±9.5nmol/L、CC为13.1±6.2nmol/L、CT为11.7±4.0nmol/L,病例组和对照组高Hcy水平组间无统计学差异(P〉0.05)。③病例组中有38.0%(27/71)为高Hcy血症,叶酸治疗有效。结论:MTHFR基因多态性(C677T)与复发性流产有关;MTHFR基因TT型与高Hcy血症有关;叶酸可用于治疗高Hcy血症且有助于改善下次妊娠结局。 展开更多
关键词 复发性流产(RPL) 亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR) 高同型半胱氨酸血症 叶酸治疗
趋化素样因子超家族成员5对前列腺癌侵袭行为的影响 被引量:1
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作者 萧云备 李晶 +6 位作者 张晓威 刘振华 卫东 乔正国 牛屹东 徐涛 王晓峰 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期943-946,共4页
目的探讨趋化素样因子超家族成员5(CMTM5)对前列腺癌细胞的作用及机制。方法利用划痕实验观察CMTM5对前列腺癌、DU145细胞迁移的影响;蛋白质印迹法检测P13K—AKT信号通路相关蛋白的表达;建立18只裸鼠皮下前列腺癌移植瘤模型,实验... 目的探讨趋化素样因子超家族成员5(CMTM5)对前列腺癌细胞的作用及机制。方法利用划痕实验观察CMTM5对前列腺癌、DU145细胞迁移的影响;蛋白质印迹法检测P13K—AKT信号通路相关蛋白的表达;建立18只裸鼠皮下前列腺癌移植瘤模型,实验组肿瘤局部注射CMTM5腺病毒,检测CMTM5过表达对裸鼠前列腺肿瘤生长的影响,应用免疫组织化学方法检测裸鼠肿瘤组织中Ki-67的表达。结果过表达CMTM5抑制前列腺癌DU145细胞迁移,减少了P13K—AKT信号通路中的关键分子pAKT、NF.KB等蛋白的表达。裸鼠体内实验结果显示,CMTM5组肿瘤体积及质量分别为(573.39±175.24)mm’及(0.55±0.11)g,对照组分另Ij为(1482.50±327.86)mm。及(1.31±0.29)g,2组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。CMTM5组肿瘤组织Ki-67表达明显低于对照组。结论过表达CMTM5抑制前列腺肿瘤的增殖及迁移能力,其机制与P13K—AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 趋化素样因子超家族成员5 PI3K-AKT信号通路 动物实验
医院科研试剂和耗材的分类管理模式 被引量:3
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作者 粱公文 卫东 +1 位作者 何湘君 刘玉兰 《中华医学科研管理杂志》 2012年第2期 102-103,109,共3页
为了提高医院对科研试剂和耗材的管理水平,医院可以将科研试剂和耗材分为通用类和特殊类两类实施分类管理,通过实施基于信息化系统的科研试剂和耗材的分类管理模式,一方面,为科研人员提供了良好的服务,提高了科研经费的使用效率;... 为了提高医院对科研试剂和耗材的管理水平,医院可以将科研试剂和耗材分为通用类和特殊类两类实施分类管理,通过实施基于信息化系统的科研试剂和耗材的分类管理模式,一方面,为科研人员提供了良好的服务,提高了科研经费的使用效率;另一方面,医院可以掌握科研试剂和耗材的使用情况,便于加强对科研经费的有效控制与管理。 展开更多
关键词 科研试剂和耗材 信息系统 医院科研管理
Abl相互作用蛋白-1在肿瘤基础与临床研究中的进展 预览 被引量:1
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作者 崔梅花(综述) 卫东(审校) 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期2021-2024,2028共5页
Abl相互作用蛋白-1(Abl interactor protein 1,Abil)作为接合蛋白参与肌动蛋白重建,在细胞的多种生物学行为中发挥重要的作用;通过形成不同的大分子复合物,调控着多种与肿瘤细胞增殖、凋亡、黏附、迁移等相关的信号传导通路;并... Abl相互作用蛋白-1(Abl interactor protein 1,Abil)作为接合蛋白参与肌动蛋白重建,在细胞的多种生物学行为中发挥重要的作用;通过形成不同的大分子复合物,调控着多种与肿瘤细胞增殖、凋亡、黏附、迁移等相关的信号传导通路;并与某些类型的白血病及部分恶性实体肿瘤的发生发展密切相关。Abil作为潜在的分子靶点在肿瘤的基础和临床研究中显示出广阔的研究前景。 展开更多
关键词 Abl相互作用蛋白-1 分子标志物 肿瘤
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受体相互作用蛋白140对神经胶质细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 谢丽娜 卫东 +6 位作者 梁蓉 张晓蕊 晁爽 赵贺华 章利琴 马淑云 郭静竹 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第37期 2648-2652,共5页
目的明确受体相互作用蛋白140(RIP140)基因过表达对小鼠小胶质瘤细胞(BV-2)增殖、凋亡、侵袭及迁移行为的影响。方法采用脂质体转染和G418筛选法构建RIP140过表达的BV-2细胞模型,用实时定量PCR及Western印迹法鉴定过表达模型构建... 目的明确受体相互作用蛋白140(RIP140)基因过表达对小鼠小胶质瘤细胞(BV-2)增殖、凋亡、侵袭及迁移行为的影响。方法采用脂质体转染和G418筛选法构建RIP140过表达的BV-2细胞模型,用实时定量PCR及Western印迹法鉴定过表达模型构建是否成功,用四甲基偶氮唑蓝(Mrrr)法、流式细胞仪和Transwell小室检测RIPl40过表达对BV-2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移行为的影响。结果成功构建RIP140过表达模型BV-2—1,BV-2—1细胞RIP140mRNA与蛋白表达量均高于BV-2细胞(t=49.794,P〈0.01)。细胞增殖检测显示:BV-2细胞24、48、72h吸光度(A)值分别为1.157±0.013、1.679±0.005、2.609±0.008,BV-2—1细胞3个时间点的A值分别为0.929±0.013、1.188±0.008、1.528±0.012,BV-2,1细胞48及72h增殖率明显低于BV-2细胞(t=6.058、9.245,均P〈0.01)。凋亡检测显示:BV-2—1细胞凋亡率明显高于BV-2细胞[(5.35±0.23)%比(3.46±0.45)%,t=6.619、P=0.003]。侵袭检测显示:BV-2—1细胞侵袭平均数多于BV-2细胞[(166±43)个比(93±32)个,t=3.403,P=0.007]。迁移检测显示BV-2—1细胞迁移平均数高于BV-2细胞[(202±50)个比(101±25)个,t=4.104,P=0.002]。结论RIP140过表达抑制BV-2细胞增殖,促进其凋亡;RIP140过表达促进BV-2细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 细胞增殖 细胞运动 受体相互作用蛋白140
新跨膜蛋白非转移性黑色素瘤糖蛋白B在前列腺癌组织中的表达及意义 预览
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作者 萧云备 乔正国 +6 位作者 张晓威 刘振华 谢京 郝一昌 卫东 徐涛 王晓峰 《北京大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期 496-499,共4页
目的:探讨非转移性黑色素瘤糖蛋白B(glycoprotein non-metastatic melanoma protein B,GPNMB)在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用组织芯片结合免疫组织化学方法,检测GPNMB在63例前列腺癌组织、3例异型生前列腺组织、8... 目的:探讨非转移性黑色素瘤糖蛋白B(glycoprotein non-metastatic melanoma protein B,GPNMB)在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用组织芯片结合免疫组织化学方法,检测GPNMB在63例前列腺癌组织、3例异型生前列腺组织、8例良性前列腺增生组织中的表达情况,用积分光密度值(integral optical density,IOD)代表阳性细胞的表达水平。结果:GPNMB在前列腺良性增生组表达水平(IOD=70 017.49)明显低于异型增生组(IOD=10 1547.33),两组差异具有统计学意义(P=0.000 1);前列腺癌组中GPNMB的表达(IOD=162 027.54)明显高于非肿瘤组(包括良性增生和异型增生,IOD=79 290.97),两组差异具有统计学意义(P=0.000 1),但未见GPNMB的表达随着病理分级的升高而升高,病理分级低组(病理分级Ⅱ及Ⅱ以下)GPNMB表达(IOD=177 944.30)反而高于病理分级高组(病理分级Ⅱ以上,IOD=150 885.81),两组差异具有统计学意义(P=0.013)。结论:GPNMB在前列腺癌组织中的异常高表达,可能在前列腺癌的早期诊断上具有重要参考价值。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 膜糖蛋白类 免疫组织化学
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