期刊文献+
共找到49篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
芽孢杆菌在农业生产中的应用 预览
1
作者 崔晓 徐艳霞 +2 位作者 刘俊杰 王光华 《土壤与作物》 2019年第1期32-42,共11页
芽孢杆菌是一类好氧或兼性厌氧,能产生抗逆性芽孢的革兰氏阳性细菌。具有种类多,遗传稳定性强,耐高温和抗逆性强等特性。芽孢杆菌是一类重要的资源微生物,包含许多具有特殊功能的菌株,可用于防治植物病虫害,溶解土壤中难溶的含磷化合物... 芽孢杆菌是一类好氧或兼性厌氧,能产生抗逆性芽孢的革兰氏阳性细菌。具有种类多,遗传稳定性强,耐高温和抗逆性强等特性。芽孢杆菌是一类重要的资源微生物,包含许多具有特殊功能的菌株,可用于防治植物病虫害,溶解土壤中难溶的含磷化合物等,在工业、农业及医学等科学领域有着十分广泛的应用价值。本文介绍了芽孢杆菌的主要种类、作用机制和不同芽孢杆菌的功能,分析了目前芽孢杆菌应用在农业生产中所存在的问题及今后研究发展的趋势。 展开更多
关键词 促生 溶菌 生态位竞争 解磷 芽孢杆菌菌剂
在线阅读 下载PDF
3个黑龙江烟区烟草花叶病毒分离物的全基因组序列测定与分析
2
作者 姜瀚林 +4 位作者 刘永中 万秀清 刘文涛 李现道 李向东 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期77-85,共9页
为明确黑龙江烟区烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)分子株系和进化特征,从哈尔滨和牡丹江感病烟草采集到HEB1、HEB2和MDJ三个样品,通过RT-PCR扩增了其全基因组序列,并进行了一致率、重组、系统发育和选择压力等分析。结果表明,3... 为明确黑龙江烟区烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)分子株系和进化特征,从哈尔滨和牡丹江感病烟草采集到HEB1、HEB2和MDJ三个样品,通过RT-PCR扩增了其全基因组序列,并进行了一致率、重组、系统发育和选择压力等分析。结果表明,3个分离物全长均为6395核苷酸(GenBank登录号分别为MH595919、MH595920和MH595921)。HEB1和MDJ与辽宁分离物Beipiao(HE818412)一致率最高,分别为98.9%和99.6%;HEB2与云南分离物Chuxiong1(HE818417)一致率最高,为97.1%。HEB1是MDJ和HEB2的重组体。在根据全基因组序列构建的系统进化树中,TMV分为3个组,其中HEB1和MDJ均属Ⅰ(U1)组,HEB2属Ⅱ(Rakkyo)组。TMV的4个基因均处于负选择,其中衣壳蛋白基因的选择压力最大。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 基因组全序列 系统发育分析 重组分析
在线阅读 免费下载
青枯雷尔氏菌噬菌体研究进展 预览
3
作者 苏靖芳 于浩 +4 位作者 刘俊杰 孙宏伟 顾刚 王光华 《土壤与作物》 2017年第1期61-66,共6页
烟草等茄科植物青枯病的防治是世界性难题,传统的化学方法、轮作及种植抗病品种等都不能有效控制该病害。探索一种新型、有效的生物防治方法——"噬菌体疗法"成为近年来研究的热点。噬菌体应用于细菌性疾病或病害的防治可以追溯到上... 烟草等茄科植物青枯病的防治是世界性难题,传统的化学方法、轮作及种植抗病品种等都不能有效控制该病害。探索一种新型、有效的生物防治方法——"噬菌体疗法"成为近年来研究的热点。噬菌体应用于细菌性疾病或病害的防治可以追溯到上世纪初,然而伴随着抗生素的发现和广泛应用,噬菌体疗法在相当长的时间里被忽略。近年来,随着耐药性细菌和超级细菌的出现,利用噬菌体防控细菌性疾病和病害的研究越来越受到人们的重视。本文简单阐述了噬菌体的早期研究与复苏的历史,青枯雷尔氏菌噬菌体的获得方法、分类及潜在应用,指出了噬菌体应用研究中存在的问题,并对其以后的发展进行了展望。 展开更多
关键词 青枯雷尔氏菌 噬菌体 噬菌体疗法 生物防治
在线阅读 下载PDF
一株烟草青枯雷尔氏菌烈性噬菌体RS-PII-1的分离及全基因组分析 被引量:2
4
作者 苏靖芳 刘俊杰 +5 位作者 于浩 孙宏伟 范国权 顾刚 王光华 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期441-449,共9页
分离鉴定一株侵染烟草青枯雷尔氏菌的烈性噬菌体,观察其形态特征,并进行全基因组测序与分析,为采用噬菌体疗法防治烟草青枯病提供技术储备。以烟草青枯菌TB15-15为宿主菌,从土壤中筛选分离得到噬菌体;分离得到的噬菌体经纯化浓缩,采用... 分离鉴定一株侵染烟草青枯雷尔氏菌的烈性噬菌体,观察其形态特征,并进行全基因组测序与分析,为采用噬菌体疗法防治烟草青枯病提供技术储备。以烟草青枯菌TB15-15为宿主菌,从土壤中筛选分离得到噬菌体;分离得到的噬菌体经纯化浓缩,采用透射电子显微镜观察其形态特征;提取噬菌体DNA,进行全基因组高通量测序,分析其全基因组的结构特征,比较基因组分析明确其进化关系。以TB15-15为宿主菌,从长期种植烟田土壤中分离得到一株青枯雷尔氏菌烈性噬菌体。电镜观察显示,该噬菌体属于有尾噬菌体目、短尾噬菌体科。基因组全长42 042bp,GC含量为63.2%,含有46个开放阅读框,比较基因组分析确定该噬菌体为一株新的青枯雷尔氏菌烈性噬菌体,命名为RS-PⅡ-1。以烟草青枯菌为宿主菌,分离到一株新的青枯雷尔氏菌烈性噬菌体RS-PⅡ-1,明确了其形态和基因组特征,为防治青枯病的噬菌体疗法奠定基础。 展开更多
关键词 烟草 青枯雷尔氏菌 烈性噬菌体 全基因组测序 全基因组分析
烈性青枯雷尔氏菌噬菌体的分离与生物学特性分析 被引量:2
5
作者 苏靖芳 孙剑萍 +4 位作者 顾刚 刘俊杰 孙宏伟 王光华 《烟草科技》 CSCD 北大核心 2017年第10期16-21,共6页
为采用噬菌体疗法防治烟草青枯病,以烟草青枯菌TB15-15为宿主菌,从土壤中筛选分离得到噬菌体,并采用双层平板法检测了噬菌体的效价、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线以及噬菌体对温度和酸碱度的敏感性。结果表明:从长期植烟田块土... 为采用噬菌体疗法防治烟草青枯病,以烟草青枯菌TB15-15为宿主菌,从土壤中筛选分离得到噬菌体,并采用双层平板法检测了噬菌体的效价、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线以及噬菌体对温度和酸碱度的敏感性。结果表明:从长期植烟田块土壤中分离得到1株青枯雷尔氏菌烈性噬菌体,命名为RS-PⅡ-1。经检测该噬菌体最佳感染复数为1;一步生长曲线显示噬菌体潜伏期为10 min,爆发期持续100 min,裂解量为1 411;该噬菌体40℃活性最高,裂解量也最大,当温度超过40℃时活性逐渐下降,直至在60℃时活性丧失;噬菌体对酸碱均具有一定的耐受能力,pH在4~8范围内噬菌体均有很好裂解活性,当p H小于4或大于8,裂解活性均减小,特别是在p H大于11时,噬菌体裂解活性完全丧失,因此噬菌体RS-PⅡ-1不适合与碱性溶液混合应用。 展开更多
关键词 烟草 青枯病 青枯雷尔氏菌 噬菌体 生物学特性
在线阅读 免费下载
应用TALENs技术定向敲除烟草eIF4E-6基因 预览 被引量:1
6
作者 宋琳娜 杨鹏九 +6 位作者 万秀清 乔婵 潘洪杏 振楠 刘侠 李若 《安徽农业科学》 CAS 2017年第4期142-146,共5页
[目的]利用TALENs技术定向敲除烟草eIF4E-6基因,为提高优质烤烟品种K326的马铃薯Y病毒(PVY)抗性提供材料。[方法]构建特异靶向烟草eIF4E-基因的TALENs载体,并由农杆菌介导转化K326烟草,用PCR和克隆测序方法筛选目的基因被成功编辑的T... [目的]利用TALENs技术定向敲除烟草eIF4E-6基因,为提高优质烤烟品种K326的马铃薯Y病毒(PVY)抗性提供材料。[方法]构建特异靶向烟草eIF4E-基因的TALENs载体,并由农杆菌介导转化K326烟草,用PCR和克隆测序方法筛选目的基因被成功编辑的T0代转基因烟株。[结果]构建了2个特异靶向eIF4E-6基因的TALENs载体T3和T4。2个载体各获得了约40和50株阳性转化的K326 T0代烟株。T3载体获得1株目的基因靶位点发生大片段碱基缺失的杂合突变型T0代单株、3株靶位点发生碱基替换的杂合突变型T0代单株。T4载体获得5株靶位点发生碱基替换的杂合突变型T0代单株。[结论]利用TALENs技术获得的eIF4E-6基因杂合突变型K326 T0代单株为后续获得纯合基因敲除的K326烟草,并最终获得PVY病毒抗性改良的K326烟草材料奠定了基础。 展开更多
关键词 烟草 PVY K326 eIF4E-6基因 TALENs
在线阅读 下载PDF
利用CRISPR-Cas9基因组编辑技术定向敲除烟草eIF4E-6基因 被引量:2
7
作者 潘洪杏 刘侠 +4 位作者 万秀清 乔婵 宋琳娜 李若 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期538-544,共7页
马铃薯Y病毒(PVY)是危害烟叶生产的主要病害之一。已有研究表明,烟草对PVY的抗性由隐性抗性基因e IF4E-6控制。本研究利用CRISPR-Cas9技术定向敲除烟草e IF4E-6基因以改良优质烤烟品种K326的PVY抗性。我们构建了2个特异靶向e IF4E-6... 马铃薯Y病毒(PVY)是危害烟叶生产的主要病害之一。已有研究表明,烟草对PVY的抗性由隐性抗性基因e IF4E-6控制。本研究利用CRISPR-Cas9技术定向敲除烟草e IF4E-6基因以改良优质烤烟品种K326的PVY抗性。我们构建了2个特异靶向e IF4E-6基因的CRISPR-Cas9载体g1和g2。构建的载体转化烟草品种K326,PCR检测潮霉素B抗性标签鉴定阳性T0代转基因烟草。PCR扩增阳性转基因烟株靶位点周围DNA序列,对PCR产物进行直接测序或克隆测序,筛选自靶位点处发生突变的烟株,得到2个载体各约50株阳性转化T0代烟株。序列分析结果表明,有2株g1载体转化的烟株在靶位点处出现杂合型单碱基缺失,分别有3和4株g1和g2载体转化的烟株在靶位点处出现杂合型1~2个碱基的替换。这些目的基因杂合型突变的T0代烟株为后续自交获得目的基因纯合敲除后代材料并最终获得PVY抗性改良的烟草提供了研究基础。 展开更多
关键词 烟草 PVY eIF4E-6 CRISPR-Cas9
应用PCR技术分离纯化烟草野火病菌
8
作者 张萌 万秀清 +4 位作者 乔婵 李若 李秀兰 孙剑萍 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第S1期329-332,共4页
针对烟草野火病原菌的鉴定和分离纯化,设计合成其特异PCR鉴定引物,应用PCR技术对分离的烟草野火病病原细菌进行了纯化分离,并通过接种鉴定方法对纯化分离的病原菌进行了致病性评价,结果表明,经PCR鉴定的阳性和阴性细菌与接种鉴定试验结... 针对烟草野火病原菌的鉴定和分离纯化,设计合成其特异PCR鉴定引物,应用PCR技术对分离的烟草野火病病原细菌进行了纯化分离,并通过接种鉴定方法对纯化分离的病原菌进行了致病性评价,结果表明,经PCR鉴定的阳性和阴性细菌与接种鉴定试验结果一致。从而证实了烟草野火病菌特异PCR鉴定引物及应用PCR技术进行野火病病原细菌分离纯化方法的实用性和可靠性。 展开更多
关键词 PCR方法 烟草野火病 分离 纯化
在线阅读 免费下载
黑龙江省烟草角斑病菌菌系分化研究 被引量:3
9
作者 孙剑萍 文景芝 +3 位作者 孙宏伟 王春军 张萌 《中国烟草科学》 CSCD 2014年第3期46-49,共4页
为明确黑龙江省烟草角斑病菌生理小种的遗传分化,本试验将在黑龙江省主要烟区采集到的19个烟草角斑病菌菌株通过针刺接种法接种到36个供试烟草品种上,通过对供试烟草品种病情指数的差异性分析和聚类分析,筛选了一套鉴定烟草野火病菌... 为明确黑龙江省烟草角斑病菌生理小种的遗传分化,本试验将在黑龙江省主要烟区采集到的19个烟草角斑病菌菌株通过针刺接种法接种到36个供试烟草品种上,通过对供试烟草品种病情指数的差异性分析和聚类分析,筛选了一套鉴定烟草野火病菌生理小种的鉴别寄主体系,利用这套鉴别寄主将19个供试菌株划分为5个生理小种。 展开更多
关键词 烟草 角斑病 生理小种 遗传分化
在线阅读 免费下载
不同土壤熏蒸剂对烤烟苗床杂草的药效试验 预览
10
作者 黄磊 赵宏伟 +3 位作者 万秀清 李丽杰 乔婵 《中国林副特产》 2011年第5期 74-76,共3页
以烟草品种龙江911为供试材料,对适每地、维博亩和斯美地这3种不同土壤熏蒸剂防除烟草苗床杂草效果进行了试验。结果表明,适每地和斯美地这两种土壤熏蒸剂对苗床杂草均有较好的防除效果。综合防除效果及安全性等因素.以斯美地效果最... 以烟草品种龙江911为供试材料,对适每地、维博亩和斯美地这3种不同土壤熏蒸剂防除烟草苗床杂草效果进行了试验。结果表明,适每地和斯美地这两种土壤熏蒸剂对苗床杂草均有较好的防除效果。综合防除效果及安全性等因素.以斯美地效果最理想,其次是适每地,均可在黑龙江省烟区推广使用。 展开更多
关键词 土壤熏蒸剂 烤烟 杂草 防治
在线阅读 下载PDF
烟草cDNA-AFLP体系中选择性引物筛选 被引量:1
11
作者 刘磊 +3 位作者 万秀清 颜培强 乔婵 刘丹 《黑龙江八一农垦大学学报》 2010年第5期 9-12,共4页
为确定cDNA-AFLP技术在烟草中的最适合的选择性碱基数目,本实验对低钾胁迫下的烟草根系进行了cDNA-AFLP分析,通过240对引物组合的筛选,共得到2100个转录衍生片段,并根据不同选择性碱基的组合对2100个片段进行了分析。结果表明,在扩增产... 为确定cDNA-AFLP技术在烟草中的最适合的选择性碱基数目,本实验对低钾胁迫下的烟草根系进行了cDNA-AFLP分析,通过240对引物组合的筛选,共得到2100个转录衍生片段,并根据不同选择性碱基的组合对2100个片段进行了分析。结果表明,在扩增产物过多时,应将引物中选择性碱基的数量调整到3个较为合适。 展开更多
关键词 烟草 CDNA-AFLP 低钾胁迫
在线阅读 免费下载
N基因标记基因PCR检测方法的建立及其在遗传育种中的应用 预览 被引量:7
12
作者 刘磊 +3 位作者 万秀清 颜培强 乔婵 刘丹 《分子植物育种》 CAS CSCD 2010年第1期 167-171,共5页
烟草的N基因是一个较为有效的抗烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)基因,在抗病育种中发挥着重要的作用。为建立其标记基因PCR检测体系,评估已知目的基因cDNA序列作为分子标记的目的基因辅助育种的可行性,本文依据N基因cDNA... 烟草的N基因是一个较为有效的抗烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)基因,在抗病育种中发挥着重要的作用。为建立其标记基因PCR检测体系,评估已知目的基因cDNA序列作为分子标记的目的基因辅助育种的可行性,本文依据N基因cDNA序列设计4对扩增范围在150~950bp的不同片段长度引物,并对含有N基因的coker176基因组DNA进行PCR扩增。扩增结果表明,有3对可扩增出特异产物。测序结果表明,有2对引物的扩增产物含有内含子。根据所获得的DNA序列设计出2对用于分子标记辅助育种的引物,并分别对C151、NC89、coker176等11个品种的基因组DNA进行扩增,结果表明在coker176、龙江912、吉烟9号和龙江911品种中有扩增产物,除龙江911外,这一结果与已知的N基因在11个品种的分布相一致,成功建立了N基因PCR检测体系,并证明以cDNA序列设计引物扩增DNA序列的目的基因辅助育种技术完全可行。并对实验中出现的问题进行了研究。 展开更多
关键词 N基因 分子标记辅助育种 PCR检测
在线阅读 下载PDF
PF7-5对烟草角斑病的室内及大田防治效果 预览 被引量:5
13
作者 乔婵 陈星 +5 位作者 张艳菊 万秀清 黄磊 李丽杰 颜培强 《中国林副特产》 2010年第5期 18-20,共3页
为验证荧光假单胞杆菌PF7-5对烟草角斑病的生物防治效果,设计了荧光假单胞杆菌PF7-5对烟草角斑病菌的室内和大田抑菌试验。结果表明,室内试验中荧光假单胞杆菌PF7-5代谢产物对烟草角斑病的抑菌效果达到71%,大田试验中PF7-5活菌的50倍稀... 为验证荧光假单胞杆菌PF7-5对烟草角斑病的生物防治效果,设计了荧光假单胞杆菌PF7-5对烟草角斑病菌的室内和大田抑菌试验。结果表明,室内试验中荧光假单胞杆菌PF7-5代谢产物对烟草角斑病的抑菌效果达到71%,大田试验中PF7-5活菌的50倍稀释液田间防治效果达87.34%,说明荧光假单胞杆菌PF7-5对烟草角斑病有一定的防治效果。 展开更多
关键词 荧光假单胞杆菌PF7-5 烟草角斑病 抑菌 防治
在线阅读 下载PDF
低钾胁迫下烟草根系差异表达基因的cDNA-AFLP分析 预览 被引量:3
14
作者 刘磊 +3 位作者 万秀清 颜培强 乔婵 刘丹 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第3期 583-585,共3页
烟叶含钾量是评价优质烟叶重要品质指标,大量研究认为钾元素的吸收和积累是由植物基因型所控制,而在烟草转录水平上的低钾胁迫的应答机制方面,尚未见报道。本实验为鉴定烟草低钾胁迫响应基因,应用.cDNA-AFLP技术,对低钾胁迫下烟草N... 烟叶含钾量是评价优质烟叶重要品质指标,大量研究认为钾元素的吸收和积累是由植物基因型所控制,而在烟草转录水平上的低钾胁迫的应答机制方面,尚未见报道。本实验为鉴定烟草低钾胁迫响应基因,应用.cDNA-AFLP技术,对低钾胁迫下烟草NC89根系基因表达进行了mRNA指纹分析,通过240对引物组合的筛选,共得到324个差异表达转录衍生片段。对其中9个TDF进行了克隆、测序和序列分析。结果表明:其中7个TDF涉及逆境响应,氨基酸的转运与代谢,转录调控及钾吸收,2个TDF为功能未知。 展开更多
关键词 烟草 低钾胁迫 cDNA—AFLP
在线阅读 下载PDF
转录因子CBF基因转化烟草抗寒性指标的检测 预览 被引量:3
15
作者 沙丽娜 +1 位作者 万秀清 程红梅 《中国林副特产》 2009年第1期 4-7,共4页
为了解棉花转录因子CBF基因转化烟草的抗寒性,将苗龄21d的转基因及其野生型T2代烟苗进行0、-1、-2、-3、-4℃低温处理4h,分别进行各处理材料的电解质渗透率、丙二醛含量和可溶性糖含量的检测。结果表明转基因烟草的电导率和丙二醛含... 为了解棉花转录因子CBF基因转化烟草的抗寒性,将苗龄21d的转基因及其野生型T2代烟苗进行0、-1、-2、-3、-4℃低温处理4h,分别进行各处理材料的电解质渗透率、丙二醛含量和可溶性糖含量的检测。结果表明转基因烟草的电导率和丙二醛含量均低于非转基因烟草,而转基因烟草的可溶性糖含量高于非转基因烟草。证实转CBF基因可以提高烟株的抗寒性。 展开更多
关键词 转基因烟草 CBF基因 抗寒性
在线阅读 下载PDF
TMV和PVY外壳蛋白双基因融合干涉及烟草转化 预览 被引量:2
16
作者 刘丹 +3 位作者 万秀清 颜培强 乔婵 刘磊1 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期 450-454,共5页
为了降低烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯Y病毒(potato irus Y,PVY)复合侵染对烟草带来的危害,本实验找到TMV—CP和PVY—CP基因部分保守序列,将保守序列进行双基因融合,此双基因即为RNAi的靶序列,用限制性内... 为了降低烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯Y病毒(potato irus Y,PVY)复合侵染对烟草带来的危害,本实验找到TMV—CP和PVY—CP基因部分保守序列,将保守序列进行双基因融合,此双基因即为RNAi的靶序列,用限制性内切酶将双基因从pMD18-T载体上切下,正反向连接到pUCCRNAi载体后,经酶切鉴定后定向连接到含超强启动子的pC2300—35S—OCS表达载体上,利用冻融法将此表达载体导入只含辅助质粒的根癌农杆菌中,构建含靶序列反向重复结构的RNAi双元载体系统,提取转化质粒,经酶切验证鉴定表明TMV和PVY外壳蛋白基因植物表达双元载体构建成功。并转化烟草,获得了3株对TMV和PVY抗性显著提高的转基因烟草。 展开更多
关键词 TMV和PVY双基因融合 RNA干涉 转化烟草
在线阅读 下载PDF
CBF4基因植物表达双元载体的构建 预览 被引量:1
17
作者 沙丽娜 +3 位作者 万秀清 颜培强 刘丹 刘磊 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期 6-9,共4页
目的:对拟南芥CBF4基因序列进行克隆。方法:用限制性内切酶将CBF4基因从pMD18-T CBF4载体上切下,定向连接到含超强启动子的pC2301-35S-OCS表达载体上,成功构建了CBF4基因植物表达载体pC2301-35S-OCS-CBF4。利用冻融法将此表达载体导... 目的:对拟南芥CBF4基因序列进行克隆。方法:用限制性内切酶将CBF4基因从pMD18-T CBF4载体上切下,定向连接到含超强启动子的pC2301-35S-OCS表达载体上,成功构建了CBF4基因植物表达载体pC2301-35S-OCS-CBF4。利用冻融法将此表达载体导入只含辅助质粒的根癌农杆菌中,提取转化质粒,经PCR扩增和酶切验证鉴定表明。结果:CBF4基因植物表达双元载体构建成功。结论:转CBF4基因烟草的抗寒性比野生型烟草要高。 展开更多
关键词 CBF4基因 植物表达载体 抗寒性
在线阅读 下载PDF
外源RNA干涉基因在烟草中的转化及表达 预览 被引量:4
18
作者 律凤霞 潘永明 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期 1962-1966,共5页
依据RNA干涉机制,以TMV复制酶基因为靶标基因,针对TMV5个株系复制酶基因间高度同源序列设计引物,经RT-PCR反应获得靶序列,构建靶序列反向重复结构的RNA干涉双元载体。用根癌农杆菌介导将外源基因转化至烟草品种K326基因组中,培育RNA干... 依据RNA干涉机制,以TMV复制酶基因为靶标基因,针对TMV5个株系复制酶基因间高度同源序列设计引物,经RT-PCR反应获得靶序列,构建靶序列反向重复结构的RNA干涉双元载体。用根癌农杆菌介导将外源基因转化至烟草品种K326基因组中,培育RNA干涉转基因烟草。人工接种病毒验证转基因烟草中外源基因在植物抗病毒能力方面的表达效果,实时荧光定量PCR分析转基因烟草抗病毒能力。结果表明,实验培育的RNA干涉转基因烟草67%对TMV呈现高度抗性;荧光定量PCR分析显示,对TMV具高度抗性的转基因烟草中病毒复制酶基因转录产物mRNA存在很大程度的降解,证实了RNA干涉技术在培育抗病毒烟草品种中的效果。 展开更多
关键词 RNA干涉 烟草花叶病毒 载体构建 基因表达
在线阅读 下载PDF
PF7-5对烟草野火病的抑制及田间防治效果 被引量:6
19
作者 万秀清 +4 位作者 乔婵 李丽杰 任文宏 杨林 牟伟峰 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2009年第10期 58-60,共3页
为验证荧光假单胞杆菌PF7-5(CGMCC No.2069)对烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.taba.ci)的生防效果,设置了PF7-5对烟草野火病菌的室内抑菌及田间防治试验。结果表明,稀释5倍的PF7-5代谢产物室内对烟草野火病菌的抑制效果... 为验证荧光假单胞杆菌PF7-5(CGMCC No.2069)对烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.taba.ci)的生防效果,设置了PF7-5对烟草野火病菌的室内抑菌及田间防治试验。结果表明,稀释5倍的PF7-5代谢产物室内对烟草野火病菌的抑制效果达96%,PF7.5活菌田间抑菌效果达91%。证实PF7-5对烟草野火病具有显著的拮抗作用和防治效果。 展开更多
关键词 荧光假单胞杆菌PF7-5 烟草野火病 生物防治
在线阅读 免费下载
酿酒酵母TRK1和TRK2钾吸收缺陷型菌株的构建 预览 被引量:1
20
作者 杨谦 +2 位作者 颜培强 万秀清 姚泉洪 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期 183-187,共5页
为更好的进行钾素营养有关基因表达调控和功能性研究,我们采用同源重组法通过重叠引物扩增分别将URA3扣HIS3基因替代酿酒酵母的TRK1和TRK2基因,并以酿酒酵母的尿嘧啶合成酶URA3基因和组氨酸合成酶HIS3力标记基因,在不合尿嘧啶和组氨... 为更好的进行钾素营养有关基因表达调控和功能性研究,我们采用同源重组法通过重叠引物扩增分别将URA3扣HIS3基因替代酿酒酵母的TRK1和TRK2基因,并以酿酒酵母的尿嘧啶合成酶URA3基因和组氨酸合成酶HIS3力标记基因,在不合尿嘧啶和组氨酸的基本培养基筛选转化子获得了钾离子转运蛋白TRK1和TRK2基因缺失的酿酒酵母钾素营养缺陷型菌株,该菌株在低K^+培养基中导入拟南芥K^+转运体基因AtKuP1可恢复正常生长。 展开更多
关键词 酵母 TRK1 TRK2吸钾基因缺陷型 同源重组
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈