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我国股权众筹准入制度研究 预览
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作者 宁静 陈梦琪 +4 位作者 王再超 许钊洛 钟倩 李国民 《金融经济:下半月》 2018年第4期132-133,共2页
我国应立足于普通投资者的净资产水平和投资能力,设置合理的年投资总金额以及对单个投资项目的最高投资金额。同时,面对现行融资准入制度瓶颈,除了调整法律法规,还需要规范融资方的信息披露要求。想要解决我国众筹平台目前普遍存在的量... 我国应立足于普通投资者的净资产水平和投资能力,设置合理的年投资总金额以及对单个投资项目的最高投资金额。同时,面对现行融资准入制度瓶颈,除了调整法律法规,还需要规范融资方的信息披露要求。想要解决我国众筹平台目前普遍存在的量多质低的问题,必须在发放经营许可之前,在审核上对平台质量严格把关。 展开更多
关键词 股权众筹 投资准入 融资门槛 平台审核
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租售同权背景下二手学区房交易价格变化趋势分析 预览
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作者 《产业创新研究》 2018年第9期53-54,共2页
自2017年7月广州市率先提出"租售同权"政策以来,有12个城市参与政策试点,引发社会关注。但是受教育资源长期分配不均的影响,学区房的存在始终是我国房价居高不下的一大原因。单纯依靠租售同权政策来调控学区房价格,在市场供求机制作用... 自2017年7月广州市率先提出"租售同权"政策以来,有12个城市参与政策试点,引发社会关注。但是受教育资源长期分配不均的影响,学区房的存在始终是我国房价居高不下的一大原因。单纯依靠租售同权政策来调控学区房价格,在市场供求机制作用下,容易导致租金、房价双双暴涨的不利局面。如何合理利用租售同权政策优势,使其发挥抑制房地产泡沫、完善住房租赁市场的作用,有待商榷。 展开更多
关键词 租售同权 学区房 房屋租赁市场 房价调控 教育资源配置
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抗犬细小病毒单链抗体库构建及其亲和力检测 预览
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作者 李德山 车瑞香 +4 位作者 王宇阳 黄涛 任桂萍 《东北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期26-34,共9页
为获得高亲和力抗犬细小病毒单链抗体,构建抗犬细小病毒(CPV)细菌展示单链抗体文库。研究提取犬脾脏总RNA,反转录cDNA,以此为模板,分别扩增犬抗体VH和VL编码序列,插入克隆载体pTlinker。利用SfiⅠ酶切位点将scFv基因构建至细菌... 为获得高亲和力抗犬细小病毒单链抗体,构建抗犬细小病毒(CPV)细菌展示单链抗体文库。研究提取犬脾脏总RNA,反转录cDNA,以此为模板,分别扩增犬抗体VH和VL编码序列,插入克隆载体pTlinker。利用SfiⅠ酶切位点将scFv基因构建至细菌展示载体pBSD中,将重组质粒电转化入E.coliDH5α构建pBFD-scFv细菌展示库。通过标记FITC的VP2蛋白,利用流式细胞术筛选12株阳性scFv。将12株scFv基因分别插入pET-28a,构建重组表达质粒pET28a-scFv。转化到E.coliRosetta中诱导表达,获得约28ku目的蛋白。经ELISA检测,纯化scFv对VP2蛋白P/N值均大于2.1,其中scFv-23、scFv-33、scFv-34对VP2蛋白亲和力较强。研究通过免疫本动物源动物,在获得高价抗体同时,避免传统单克隆抗体的免疫排斥现象;结合流式细胞术和细菌展示技术可对单链抗体文库高效、快速筛选。抗犬细小病毒同源单链抗体研究在填补市场同源基因工程抗体空白的同时,可为研制具有中和活性全长抗体奠定基础。 展开更多
关键词 CPV 单链抗体 流式细胞术 亲和力
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表达抗鸡传染性法氏囊病病毒重组鸡源抗体CHO细胞的悬浮驯化 预览
4
作者 曹宏雪 +5 位作者 李婷婷 张胜奇 张瑛杰 刘鑫 任桂萍 尹杰超 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期68-72,共5页
为将贴壁生长的表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组鸡源抗体的CHO细胞株驯化为在无血清培养基中悬浮生长、高产的工程细胞株,本研究利用流式细胞仪筛选得到高产贴壁细胞株;以快速降低血清法进行驯化,使其适应悬浮培养,经过摇... 为将贴壁生长的表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组鸡源抗体的CHO细胞株驯化为在无血清培养基中悬浮生长、高产的工程细胞株,本研究利用流式细胞仪筛选得到高产贴壁细胞株;以快速降低血清法进行驯化,使其适应悬浮培养,经过摇瓶无血清培养扩增,持续监测葡萄糖消耗情况,最终检测抗IBDV抗体的表达量。结果显示,悬浮驯化培养的CHO细胞能够在无血清培养基中稳定生长,生产周期短,接种密度为4.8×10^5 cells/mL,无血清单细胞悬浮培养120h后最大活细胞密度可达6.0×10^6 cells/mL,相同体积下抗体表达量较贴壁生长的高3倍,平均每个细胞每24h表达量达到15pg-20Pg。以上结果表明,贴壁生长的CHO细胞经过悬浮适应,不仅可以在无血清培养条件下快速生长,而且细胞对葡萄糖的利用率高,抗体表达量高。本研究筛选获得的细胞株节省了工艺生产中原料成本,操作方便,减少污染,易于放大,为工业化大批量生产奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 悬浮驯化 CHO 鸡源抗体
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利用细菌展示技术系统地筛选猪圆环病毒2型衣壳蛋白的线性抗原区域 预览 被引量:2
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作者 徐文娟 张瑛杰 +6 位作者 李青青 吴强 于向纺 尹杰超 任桂萍 李德山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期398-402,共5页
为了系统的筛选位于猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白上的抗原优势区域,本研究将缺少N端核定位信号的Cap蛋白基因分成7个连续重叠的DNA片段cap(1~7),然后分别克隆于细菌展示载体APEx中,IPTG诱导重组蛋白片段表达于细菌内膜外侧,采用流式... 为了系统的筛选位于猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白上的抗原优势区域,本研究将缺少N端核定位信号的Cap蛋白基因分成7个连续重叠的DNA片段cap(1~7),然后分别克隆于细菌展示载体APEx中,IPTG诱导重组蛋白片段表达于细菌内膜外侧,采用流式细胞仪检测各片段和抗PCV2 Cap蛋白的多克隆抗体的结合能力。结果表明,cap(1~7)均可以和抗该Cap蛋白的多抗结合,并且cap6的结合能力最强。将cap6片段进一步分为连续不重叠的3段(cap6-1、cap6-2、cap6-3),以同样的方法鉴定抗原表位。结果显示,cap6-2与抗PCV2 Cap蛋白的多抗结合能力最强。此外,应用western blot的方法对细菌展示结果进行了验证。本研究利用细菌展示技术以及流式细胞仪快速的筛选了PCV2b Cap蛋白上的抗原优势区域,cap(1~7)片段均包含抗原表位,并且cap6是Cap蛋白上的抗原优势区域,cap6-2可能是抗原优势表位。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 CAP蛋白 多克隆抗体 结合能力 抗原表位
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Anti-hEGFR轻、重链共表达及高表达细胞株快速筛选 预览 被引量:1
6
作者 李德山 刘春香 +7 位作者 姜媛媛 刘铭瑶 张瑛杰 袁清艳 任桂萍 吴强 李婷婷 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期56-62,共7页
为实现h EGFR全长抗体(anti-h EGFR)轻、重链共表达以及建立快速、高效筛选方法并获得共表达细胞株。采用分子克隆技术获得重链和轻链基因,将之连入peedual真核表达载体;经GS-Neo加压及流式细胞术筛选获得稳定表达细胞株;通过protein ... 为实现h EGFR全长抗体(anti-h EGFR)轻、重链共表达以及建立快速、高效筛选方法并获得共表达细胞株。采用分子克隆技术获得重链和轻链基因,将之连入peedual真核表达载体;经GS-Neo加压及流式细胞术筛选获得稳定表达细胞株;通过protein A亲和层析技术纯化出目标抗体;应用cck-8法、Annexin V/PI法以及q PCR技术检测anti-h EGFR对A431细胞增殖、凋亡影响。SDS-PAGE分析结果显示,纯化后抗体纯度为95.0%、分子质量约为150 ku。cck-8试验中不同浓度anti-h EGFR对A431细胞增殖均有极显著抑制作用,且与商品化Cetuximab效果相近;anti-h EGFR与Cetuximab均可诱导A431细胞产生凋亡,作用效果相近,均达极显著。全长抗体轻、重链的共表达,省去分别表达的重组过程,保证抗体天然结构;GS-Neo双加压结合流式筛选,实现阳性细胞株快速、高效分离;建立省时、高效抗体共表达平台,为抗体类药物真核构建及筛选提供新思路。 展开更多
关键词 anti-hEGFR 共表达载体 GS-Neo筛选 流式细胞术 抗肿瘤
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样板,决定招商的生死 预览
7
作者 《销售与市场》 北大核心 2005年第02S期i003-i005,共3页
普尔斯马特倒了,蒙牛奶酒遭到置疑了,轰轰烈烈的奶片不见踪影了……
关键词 招商 蒙牛 普尔斯马特 奶片 决定 牛奶 置疑
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浅论第三方支付对银行的影响 预览
8
作者 《中国经贸》 2017年第21期137-,共1页
伴随着全球经济日新月异的发展,商务经济时代已然成为未来经济发展的主流趋势,而与其相伴的电子商务崛起是势在必行的.第三方支付作为新经济形势下的创新性支付平台,已然成为现代金融服务业的翘楚,不仅是互联网经济快速发展的源动力,而... 伴随着全球经济日新月异的发展,商务经济时代已然成为未来经济发展的主流趋势,而与其相伴的电子商务崛起是势在必行的.第三方支付作为新经济形势下的创新性支付平台,已然成为现代金融服务业的翘楚,不仅是互联网经济快速发展的源动力,而且是经济迅猛发展的支撑力量,同时也弥补了银行服务功能的短板,具有健全金融体系、完善金融功能的作用.本文将对第三方支付进行概述,并就其对传统银行的影响进行论述. 展开更多
关键词 第三方支付 概述 问题 影响
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工程预算定额在造价管理中的应用研究 预览
9
作者 梅李 《科学与财富》 2012年第11期353-353,共1页
配额管理是随着生产技术的提高,出现在经济和社会发展的过程,伴随着各种科学和技术的综合利用,工程造价已经发展成为一门系统的学科,集经济学,管理学为一体的集体技术管理措施和全面的应用管理模式,为当前工程预算在建筑行业中得... 配额管理是随着生产技术的提高,出现在经济和社会发展的过程,伴随着各种科学和技术的综合利用,工程造价已经发展成为一门系统的学科,集经济学,管理学为一体的集体技术管理措施和全面的应用管理模式,为当前工程预算在建筑行业中得到有效利用,提供支持。随着社会发展中的各种技术手段和管理措施不断完善,固定预算管理系统的管理和管理系统中的应用,在造价管理中已经形成了一套系统的管理模式。本文简要介绍中国的工程预算定额的发展过程和其对应的分类和功能,并根据项目成本的功能和结构,对工程造价管理和控制进行论述。 展开更多
关键词 预算定额 造价 应用
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