应用重组酶介导核酸扩增技术快速鉴定新菠萝灰粉蚧

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作者 唐慧骥 党志浩 +4 位作者 郭长宁 王晓晶 苗小星 郭保生 徐超 《植物检疫》 北大核心 2019年第2期37-42,共6页

本文建立了基于重组酶介导核酸扩增(RAA)技术快速鉴定新菠萝灰粉蚧(Dysmicoccus neobrevipes)反应体系,并利用该技术开展了口岸截获粉蚧的检测与鉴定。通过分析河南口岸常截获的17种粉蚧线粒体COI基因序列,设计筛选了基于RAA技术的新菠... 本文建立了基于重组酶介导核酸扩增(RAA)技术快速鉴定新菠萝灰粉蚧(Dysmicoccus neobrevipes)反应体系,并利用该技术开展了口岸截获粉蚧的检测与鉴定。通过分析河南口岸常截获的17种粉蚧线粒体COI基因序列,设计筛选了基于RAA技术的新菠萝灰粉蚧的特异性引物,并对其进行条件优化。结果表明线粒体COI基因能准确区分新菠萝灰粉蚧与其他16种粉蚧;新菠萝灰粉蚧RAA特异性引物能稳定扩增出片段大小为323 bp单一条带,最适宜扩增温度为恒温39℃,扩增时间为20~30 min,检测DNA浓度限值为1.6×10-3μg/mL。本文利用RAA技术建立的新菠萝灰粉蚧快速鉴定方法,耗时短,灵敏度高,重复性好,适用于一线口岸初筛鉴定。 展开更多

关键词 新菠萝灰粉蚧 重组酶介导核酸扩增 COI基因 鉴定

2015～2016年河南口岸进境水果截获粉蚧概况及其形态鉴定

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作者 唐慧骥 苗小星 +2 位作者 党志浩 郭长宁 王晓晶 《植物检疫》 北大核心 2017年第5期53-56,共4页

粉蚧是一类严重危害农林果树作物的重要害虫,极易随水果等植物产品进行传播。因其个体微小,形态近似,所以鉴定较难。本文对河南口岸近两年截获的粉蚧及其形态特征进行描述,并编制种类检索表,以供检疫人员鉴定参考。

关键词 粉蚧 截获 形态特征 检索表 鉴定

金纹细蛾Hsp90基因片段的克隆及其表达模式分析 预览 被引量：1

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作者 王冠华 李鑫 +3 位作者 郭长宁 于建光 侯茜 辛文 《西北农林科技大学学报：自然科学版》 CSCD 北大核心 2016年第10期114-120,共7页

【目的】对金纹细蛾Hsp90基因进行生物信息学和表达模式分析,为深入研究金纹细蛾PrHsp90与生长发育和抗逆行为的关系奠定基础。【方法】利用分子克隆技术获得金纹细蛾Hsp90基因片段,并对其进行生物信息学分析。同时利用RT-qPCR技术检测H... 【目的】对金纹细蛾Hsp90基因进行生物信息学和表达模式分析,为深入研究金纹细蛾PrHsp90与生长发育和抗逆行为的关系奠定基础。【方法】利用分子克隆技术获得金纹细蛾Hsp90基因片段,并对其进行生物信息学分析。同时利用RT-qPCR技术检测Hsp90在金纹细蛾不同组织、不同生长发育阶段和高温胁迫后的表达情况。【结果】获得了金纹细蛾Hsp90基因的一条长度为942bp的片段序列,命名为PrHsp90,登录号为KP671600。序列分析显示,其对应的氨基酸序列与其他昆虫的相似性很高,与棉铃虫（ADP37710.1）、斜纹夜蛾（ADK55516.1）、烟夜蛾（ADM26742.1）等鳞翅目昆虫的同源性在98%以上,表明Hsp90基因家族具有高度保守性。实时荧光定量结果表明,PrHsp90在金纹细蛾翅中的相对表达量显著高于头、胸、腹和足;金纹细蛾各个生长发育阶段都有PrHsp90表达,但其在成虫体内的相对表达量显著高于蛹期和幼虫期。高温胁迫下PrHsp90的表达水平随着温度的升高而升高,且经过35,38,41和44℃处理后的金纹细蛾,其体内PrHsp90相对表达量均显著提高,约为对照处理表达量的3-15倍。【结论】金纹细蛾PrHsp90的表达具有组织特异性,且在其生长发育的各个阶段和温度胁迫中均可能起重要作用。 展开更多

关键词 金纹细蛾 热激蛋白 生长发育 高温胁迫

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金纹细蛾细胞色素CYP6家族基因的克隆及表达 预览

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作者 田甜 李鑫 +3 位作者 郭长宁 侯茜 王冠华 于建光 《西北农林科技大学学报：自然科学版》 CSCD 北大核心 2016年第1期111-117,共7页

【目的】克隆并鉴定金纹细蛾（Phyllonorycter ringoniella）细胞色素CYP6家族基因，并观察氯氟氰菊酯药剂处理后mRNA相对表达量的变化，为金纹细蛾细胞色素CYP6家族基因全长cDNA的获得，以及防止或延缓金纹细蛾抗药性的产生提供理论依... 【目的】克隆并鉴定金纹细蛾（Phyllonorycter ringoniella）细胞色素CYP6家族基因，并观察氯氟氰菊酯药剂处理后mRNA相对表达量的变化，为金纹细蛾细胞色素CYP6家族基因全长cDNA的获得，以及防止或延缓金纹细蛾抗药性的产生提供理论依据。【方法】以GenBank上公布的CYP6家族基因编码区序列为基础设计并合成简并引物；利用RTPCR扩增获得序列后在NCBI上进行Blastx对比，根据P450基因命名法进行命名并向GenBank提交序列获得登录号；利用点滴法和qRTPCR技术，将金纹细蛾3龄幼虫在氯氟氰菊酯（LC50=12.88 mg/L）条件下处理24 h后，观察其体内细胞色素P450基因的相对表达量。【结果】成功扩增出3个长度分别为415，412和421 bp的cDNA片段。同源性分析表明，3条基因序列与CYP6AN5、CYP6B5和CYP6ab氨基酸相似性分别达61%，59%和71%，可将其初步均归类为CYP6家族，并分别命名为phCYP6AN5、phCYP6B5和phCYP6ab，将序列信息提交至GenBank，获得GenBank登录号分别为KJ559411、KJ559412和KJ559413。药剂处理对3种基因发生了不同的诱导或抑制作用，phCYP6AN5基因在受到药剂处理后相对表达量显著上升，而phCYP6B5和phCYP6ab在受到药剂处理后相对表达量显著下降。【结论】成功获得3条金纹细蛾细胞色素CYP6家族基因片段；诱导剂的诱导作用存在一定程度的特异性，对某种或几种P450酶有效应的化合物并不一定诱导其他类型的P450。 展开更多

关键词 金纹细蛾 细胞色素P450 序列分析 基因表达

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Design-Oriented Thermodynamic Analysis of Novel Heat-Integrated C5 Isomeride Distillation Scheme on Pilot Scale 预览

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作者 孙津生 戴雷雷 +3 位作者 马婷婷 郭长宁 卫宏远 李正虎 《天津大学学报：英文版》 EI CAS 2016年第1期77-82,共6页

为生产 C5 的飞行员规模上的一个新奇热综合的蒸馏计划起泡沫的代理人，在某个比例的 isopentane 和戊烷的混合物，在过程模拟的帮助下被建议。与常规蒸馏计划相比， C5 起泡沫代理人直接在新奇计划在原来的 isopentane 或戊烷列的顶被... 为生产 C5 的飞行员规模上的一个新奇热综合的蒸馏计划起泡沫的代理人，在某个比例的 isopentane 和戊烷的混合物，在过程模拟的帮助下被建议。与常规蒸馏计划相比， C5 起泡沫代理人直接在新奇计划在原来的 isopentane 或戊烷列的顶被分开，而不是首先精制到高纯净的二 isomerides 然后混合他们进最后的产品。这改进减少了分离的困难并且避免了重新录制引起的无意义的 exergy 损失，它最后由大边缘贡献了一个精力有效的图案。而且，列宏大合成曲线(CGCC ) 被用来修改所有蒸馏列，显示有潜力进一步改进精力效率。因此，双效果，或热综合的蒸馏也被采用。精力和 exergy 分析然后被进行为精力节省的目的评估建议计划的有效性。常规蒸馏计划的模拟结果与它的所在地的对应物一致。分析证明新奇热综合的计划在 27.12% 减少了热用途，，在 24.49% 的冷用途，，并且在 23.95% 的全部的 exergy 损失，。 展开更多

关键词 精馏塔 热集成 异构体 热力学分析 C5 面向设计 比例混合 过程模拟

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进口羊皮携带外来杂草种子情况分析及应对措施 预览 被引量：2

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作者 唐慧骥 史建华 +3 位作者 赵芳 苗小星 郭长宁 党志浩 《检验检疫学刊》 2016年第2期31-34,共4页

对进口羊皮携带的外来杂草种子进行筛查鉴定,论述了羊皮中携带种子的特点、种类、分布、危害等情况。并提出了产地考察、风险分析、过程监管、加强宣传等预防和控制措施。

关键词 进口羊皮 外来杂草种子 危害 植物检疫 应对措施

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差压双效精馏在尼龙66聚合反应器尾气回收中的应用研究 预览

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作者 赵铎 孙津生 +3 位作者 郭长宁 陈喜成 曹希佳 刘广歆 《天然气化工：C1化学与化工》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期65-69,98共6页

针对神马实业股份有限公司帘子布公司现有9条尼龙66工业丝生产线，每年累计排放尾气36000多吨、己二胺120多吨的现状，采用差压双效精馏模式，对这9条尼龙66工业丝生产线聚合反应器尾气进行回收利用，并减少进入厂区生产有机废水生化处... 针对神马实业股份有限公司帘子布公司现有9条尼龙66工业丝生产线，每年累计排放尾气36000多吨、己二胺120多吨的现状，采用差压双效精馏模式，对这9条尼龙66工业丝生产线聚合反应器尾气进行回收利用，并减少进入厂区生产有机废水生化处理系统有机废水的处理量。利用Pro/Ⅱ进行了流程模拟，证实了差压双效精馏模式的可行性以及节能效果。 展开更多

关键词 尼龙66 尾气回收 差压双效精馏 流程模拟:工程设计

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差压双效精馏在尼龙66聚合反应器尾气回收中的应用研究 预览

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作者 赵铎 孙津生 +3 位作者 郭长宁 陈喜成 曹希佳 刘广歆 《化学工程师》 CAS 2015年第9期65-69,38共6页

本文针对神马实业股份有限公司帘子布公司现有的9条尼龙66工业丝生产线每年累计排放36000余t尾气和120余t己二胺的现状,采用差压双效精馏模式,对这9条尼龙66工业丝生产线聚合反应器尾气进行回收利用,并减少进入厂区生产有机废水生化处... 本文针对神马实业股份有限公司帘子布公司现有的9条尼龙66工业丝生产线每年累计排放36000余t尾气和120余t己二胺的现状,采用差压双效精馏模式,对这9条尼龙66工业丝生产线聚合反应器尾气进行回收利用,并减少进入厂区生产有机废水生化处理系统有机废水的处理量。利用Pro/Ⅱ进行了流程模拟,证实了差压双效精馏模式的可行性以及节能效果。 展开更多

关键词 尼龙66 尾气回收 差压双效精馏 流程模拟 工程设计

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金纹细蛾β-actin基因克隆及表达分析 预览 被引量：2

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作者 郭长宁 李鑫 +1 位作者 于建光 侯茜 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期157-162,共6页

为了明确β-actin基因在金纹细蛾定量实验中作为内参基因的可靠性。根据近缘物种同源基因设计简并引物,通过RT-PCR技术克隆得到金纹细蛾β-actin基因片段,并进行序列分析;利用QRT-PCR方法检测该基因在金纹细蛾不同发育时期及成虫5种组... 为了明确β-actin基因在金纹细蛾定量实验中作为内参基因的可靠性。根据近缘物种同源基因设计简并引物,通过RT-PCR技术克隆得到金纹细蛾β-actin基因片段,并进行序列分析;利用QRT-PCR方法检测该基因在金纹细蛾不同发育时期及成虫5种组织间的表达情况。结果表明：金纹细蛾β-actin基因片段为594bp（GenBank登录号：KF880733）,编码174个氨基酸残基,具有actin蛋白家族典型特征,富含4种类型特定功能位点,其氨基酸序列与其他鳞翅目昆虫的相似性均大于96%。金纹细蛾β-actin基因在其生长发育阶段稳定表达,无显著差异,可以作为研究金纹细蛾不同发育时期的内参;在成虫头、胸、足和翅4种组织间表达量无显著差异。 展开更多

关键词 金纹细蛾 Β-ACTIN基因 序列分析 基因表达

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苹果园金纹细蛾种群动态及空间分布 预览 被引量：9

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作者 曹春玲 李鑫 +2 位作者 吴素蓉 田甜 郭长宁 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期169-175,共7页

金纹细蛾（LithocolletisringoniellaMatsumura）是中国苹果产区的重要潜叶害虫，研究金纹细蛾种群消长动态和空间格局，可为该虫的为害调查与防治提供理论依据。应用4个聚集度指标、Taylor的幂法则、1wao回归法和Bray—CurtisMeasure... 金纹细蛾（LithocolletisringoniellaMatsumura）是中国苹果产区的重要潜叶害虫，研究金纹细蛾种群消长动态和空间格局，可为该虫的为害调查与防治提供理论依据。应用4个聚集度指标、Taylor的幂法则、1wao回归法和Bray—CurtisMeasure系数，对金纹细蛾5代种群的空间分布型和树冠不同方位分布近度进行研究。结果表明：金纹细蛾第1代和越冬代发生量大且整齐，是防治的较佳时期。金纹细蛾的5代种群在苹果树冠上的大部分方位呈聚集分布，个体间相互吸引，其聚集性随密度的增大而增大。运用Bray-CurtisMeasure系数计算出近度值，显示5代金纹细蛾种群在树冠上的分布形成不同层次上的种群亚层结构。 展开更多

关键词 金纹细蛾 种群动态 空间分布 5代

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河南口岸首次截获进境植物检疫性有害生物——鹰嘴豆象

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作者 唐慧骥 赵芳 +1 位作者 苗小星 郭长宁 《华中昆虫研究》 2014年第1期239-241,共3页

河南口岸首次从进境旅客携带物中截获检疫性外来有害生物鹰嘴豆象(Callosobruchus analis Fabricius),对其分类地位、寄主、分布、形态特征及为害特性进行了介绍,并提出了检疫措施。

关键词 鹰嘴豆象 检疫性 形态特征 为害特性 检疫措施

低温对金纹细蛾越冬蛹及蛹后发育的影响 被引量：3

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作者 曹春玲 李鑫 +3 位作者 吴素蓉 张金钰 郭长宁 田甜 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期392-398,共7页

为探索金纹细蛾Phyllonorycterringoniella（Matsumura）最佳保种方法，在室外变温和恒温冷藏两种条件下研究低温对其越冬蛹及蛹后发育的影响。结果显示，室外变温贮藏60d，稞蛹和虫疤叶内蛹的发育历期分剐为15．3d和20．5d，与非冷藏... 为探索金纹细蛾Phyllonorycterringoniella（Matsumura）最佳保种方法，在室外变温和恒温冷藏两种条件下研究低温对其越冬蛹及蛹后发育的影响。结果显示，室外变温贮藏60d，稞蛹和虫疤叶内蛹的发育历期分剐为15．3d和20．5d，与非冷藏正常发育的对照比较差异显著；恒温冷藏120d，稞蛹和虫疤叶内蛹发育历期分别为23．5d和29．6d，与对照差异显著。室外变温贮藏60d时，裸蛹及虫疤叶内蛹的羽化率接近60％；恒温冷藏105d时，裸蛹和虫疤叶内蛹的羽化率大于60％。75～120d内，羽化畸形率依次为室外虫疤叶内蛹〉室外裸蛹〉冷藏稞蛹〉冷藏虫疤叶内蛹。恒温冷藏对雌、雄蛾寿命无明显影响，但雌雄性比随冷藏时间的增加而明显增大，室外变温贮藏75d以上，羽化的雄蛾平均寿命显著缩短。恒温冷藏对产卵行为无显著影响，随冷藏时间的延长，雌蛾平均产卵量下降，但孵化率增加。研究表明，恒温冷藏虫疤叶是较好的保种方式，以4℃冷藏105d最佳。 展开更多

关键词 越冬蛹 低温 发育历期 羽化率 成虫寿命

太行菊DNA提取和ISSR标记的筛选与优化 预览 被引量：10

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作者 何敏杰 程月琴 +3 位作者 王红卫 郭长宁 叶永忠 孟丽 《中国农学通报》 CSCD 2012年第16期202-207,共6页

为了探索太行菊DNA的适宜提取方法,获得适用于太行菊的ISSR标记,以太行菊为试验材料,采用常规CTAB法、改良CTAB法和SDS法提取太行菊总DNA,利用提取的太行菊DNA对ISSR引物进行了筛选和优化。结果表明,改良CTAB法提取的DNA产率高且稳定,... 为了探索太行菊DNA的适宜提取方法,获得适用于太行菊的ISSR标记,以太行菊为试验材料,采用常规CTAB法、改良CTAB法和SDS法提取太行菊总DNA,利用提取的太行菊DNA对ISSR引物进行了筛选和优化。结果表明,改良CTAB法提取的DNA产率高且稳定,无明显降解,杂质少。以改良CTAB法提取的DNA为模板,应用ISSR引物对总DNA进行扩增,进而从测试的50条ISSR引物中选出了扩增效率高,条带丰富的15条引物。通过设置温度梯度对每条引物的反应条件进行了优化。最后,使用引物UBC848对部分群体样品进行检测,得到了效果稳定、重复性好的扩增结果。上述结果表明,通过温度梯度筛选出的ISSR引物适用于太行菊的群体遗传学研究。 展开更多

关键词 太行菊 DNA提取 ISSR 条件优化

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构建横向切削进给时的刀具使用寿命方程 预览

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作者 李其钒 潘燕 +1 位作者 郭在云 郭长宁 《机电工程》 CAS 2011年第4期 425-428,共4页

针对目前在横向切削进给时,刀具耐用度没有明确计算公式的问题,通过对横向车削进给磨损过程的研究,分析了切削用量（切削速度υc、进给量f、背吃量ap）对磨损的影响,根据泰勒（F.W.taylor）公式,建立起了切削用量与刀具使用寿命方程式。... 针对目前在横向切削进给时,刀具耐用度没有明确计算公式的问题,通过对横向车削进给磨损过程的研究,分析了切削用量（切削速度υc、进给量f、背吃量ap）对磨损的影响,根据泰勒（F.W.taylor）公式,建立起了切削用量与刀具使用寿命方程式。在CY6140车床上,用YT5硬质合金车刀,按υcmax=175 m/min,f=0.2 mm/r,ap=5 mm参数对碳素钢进行了横向切削进给切槽实验30次。研究结果表明,在横向切削进给时,建立的刀具使用寿命方程是可行的。 展开更多

关键词 构建 刀具 寿命 方程

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影响冲裁零件质量的原因分析 被引量：2

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作者 李其钒 潘燕 +1 位作者 王锐 郭长宁 《热加工工艺》 CSCD 北大核心 2011年第7期88-90,96共4页

主要从尺寸精度和断面质量两方面，对影响普通冲裁方法加工零件质量的因素进行了分析研究，并提出了提高冲裁零件质量的具体措施和对策。

关键词 冲裁 质量 因素 分析

外圆车削过程中稳定状态的探讨 预览

16

作者 李其钒 潘燕 郭长宁 《机械工程与自动化》 2011年第1期 202-204,共3页

通过对外圆车削过程中工件的受力分析，建立起外圆切削过程中刀具的稳定状态方程．并对稳定状态方程进行分析。从而得出外圆切削过程中保持刀具稳定状态的实际措施，为切削加工过程的稳定设计、技术改造和使用提供一定理论依据。

关键词 外圆车削 稳定状态 稳态方程

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直齿圆柱齿轮加工稳定状态的探讨 预览

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作者 李其钒 潘燕 +1 位作者 郭长宁 李明相 《机械工程师》 2010年第10期 25-26,共2页

通过对用齿轮滚刀加工直齿圆柱齿轮过程的受力分析,建立起直齿圆柱齿轮滚齿加工过程中滚刀的稳定状态方程.从而得出滚齿加工过程中滚刀保持稳定进给状态的条件,为机床自动进给的研究提供参考.

关键词 齿轮 加工 稳定 方程

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聚乙烯醇缩丁醛缩合反应过程设计与改造 预览

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作者 付昕志 郭长宁 《天津化工》 CAS 2008年第6期 54-58,共5页

介绍聚乙烯醇缩丁醛（PVB）树脂制备过程中缩合釜夹套、釜底阀、搅拌器、传动装置和测温元件等设备的设计与改造，以及缩合反应中导热油升、降温流程的设计以及设备、温度控制改造。

关键词 缩合反应 升降温 搅拌器 反应釜 导热油

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活塞环装配机的致命性分析 预览

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作者 万里斌 郭长宁 刘金桥 《机械工程师》 2007年第10期 14-15,共2页

故障模式影响与致命性分析（FMECA）是提高产品可靠性的一种有效的定性分析技术。根据6台某系列活塞环装配机故障数据，应用FMECA法对其进行分析，掌握了该活塞环装配机的故障发生情况及其子系统的致命度。为该活塞环装配机进行改进设... 故障模式影响与致命性分析（FMECA）是提高产品可靠性的一种有效的定性分析技术。根据6台某系列活塞环装配机故障数据，应用FMECA法对其进行分析，掌握了该活塞环装配机的故障发生情况及其子系统的致命度。为该活塞环装配机进行改进设计及可靠性再分配提供了依据。 展开更多

关键词 FMECA 致命性 可靠性 活塞环装配机

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郑州机场口岸从肯尼亚大星芹中截获鳞球茎茎线虫、菊花滑刃线虫、草莓滑刃线虫

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作者 党志浩 唐慧骥 +2 位作者 苗小星 郭长宁 王晓晶 《植物检疫》 北大核心 2018年第2期79-79,共1页

郑州新郑国际机场是我国的八大枢纽机场之一,是国家的一类航空口岸,也是鲜切花进口指定口岸。2016年10月开始,从郑州机场口岸入境肯尼亚鲜切花共29批次,价值12 380美元。来自肯尼亚的鲜切花种类丰富,主要包括玫瑰、六出花、火龙珠、松... 郑州新郑国际机场是我国的八大枢纽机场之一,是国家的一类航空口岸,也是鲜切花进口指定口岸。2016年10月开始,从郑州机场口岸入境肯尼亚鲜切花共29批次,价值12 380美元。来自肯尼亚的鲜切花种类丰富,主要包括玫瑰、六出花、火龙珠、松从草、风车果、飞燕草、绣球、大星芹等。2017年7月24日和12月7日,河南出入境检验检疫局检疫人员两次在对来自肯尼亚的大星芹进行检疫时, 展开更多

关键词 枢纽机场 肯尼亚 鳞球茎茎线虫 滑刃线虫 口岸 郑州 出入境检验检疫局 截获